电喷雾质谱仪操作规程

电喷雾质谱仪操作规程

（非实验操作人员严禁操作机器，严禁改动实验参数）

1．进入操作间时请换上拖鞋，并穿上实验服。

2．打开喷雾腔，去掉橡皮帽，安装喷雾遮盖，关上喷雾腔，小心不要夹到输送氮气的塑料管。3．进入esquire Control窗口，调到standby模式。进入菜单栏Option 下vacuum system 查看真空状态，Fore: 3.0 mbar, High: 1.5 × 10 -5 mbar, 必须达到此数值以下才能操作。没有达到时，将仪器调到shutdown 模式，继续抽真空。关闭对话框。

4．Standby 模式下，调到Tune面板，参数设置如下：

Nebulizer: 1.0 psi; Dry Gas: 3.0 l/min; Dry Temp: 300 °C

等到机器温度稳定地达到300 °C 时才能开始操作，操作时参数设置如下：

Nebulizer: 7.0 psi; Dry Gas: 4.0 l/min; Dry Temp: 300 °C

除多肽和蛋白样品可稍做改动外，其他有机小分子勿改动参数。前面的参数为设置值，后面为实际值，如果实际值跟不上设置值的改动变化时，需要更换液氮。做样间隔时，重新将参数设置为：

Nebulizer: 1.0 psi; Dry Gas: 3.0 l/min; Dry Temp: 300 °C

中午下午休息时，将机器调为shutdown 模式。

5． 缓慢用甲醇清洗注射器4到5次后，清洗仪器管线，先推两次空针再用甲醇清洗4到5次。

6．用甲醇或乙腈稀释样品，样品浓度应尽可能稀，在10 μmol/L – 100 μmol/L 数量级即可，样品必须是清澈透明的，决不允许有沉淀和漂浮物。

7．打开进样器开关。进样器的流量已设为240 μl/h，勿改动。把注射器与仪器管线连好后，安装在进样器上。

8．点击工具栏设置保存路径，Tune面板中更改Target Mass、 Scan范围、Nebulizer: 7.0 psi、Dry Gas: 4.0 l/min，Mode面板中选择离子模式，其他参数勿动。点击Operate模式，同时按下进样器右起两个按键，看到显示屏上有信号时松手，再按下run/stop键开始进样，点击工具栏保存。重新调至Standby模式，按下进样器run/stop键停止进样。如果离子强度达到107甚至更高，立即停止进样，重新稀释样品。

9. 特别注意：在做同一个样品时，如果要在Mode面板中转换离子模式，即正负离子的转换，

一定要先将机器调为Standby，再转换离子模式，切记切记！！以前我们是在Operate模式

下直接调换离子模式，这是严重错误的操作！！

即：Standby模式下，Mode positive—operate—save—standby—Mode negative—save—standby－Mode positive——operate……

10. 如需做多级质谱，Operate模式下进入MS/MS 面板，以二级为例：在stage1中，Isolation

下的Mass写下需做二级的分子量，将on前面的方框点击，待屏幕上显示出分子量所示的唯一一根峰时，表示已经选上该物质，再点击Fragmentation下的on方框，缓慢调节Ampl的树值做出合适的多级谱。二级三级谱等依次类推。想看上一级谱图时，将该级状态下所有的对钩消除即可。想关掉所有的多级时，直接点击off。做下一个样品时一定要关掉所有的多级。

11．进入Data Analysis窗口调出数据打印结果。打印机使用时一定要缓慢，一张一张打印，禁止连击，否则会造成打印机死机，严重时甚至质谱仪死机。无打印纸时与负责人员联系。

12. 清洗注射器和仪器管线，进入下一个样品操作。

13. 出现紧急情况，比如电脑一直显示沙漏状态，无法控制机器等，首先试着从esquire Control

窗口菜单栏File 下Exit退出，接着关闭电脑。如果不能退出程序，只能直接强行关机。

重新启动后，点击桌面的esquire Control图标，进入操作软件。

13．除了清洗仪器管线外，所有的操作都要在通风厨中进行。严禁将所有瓶子搬出通风厨在机器旁边操作，严禁在质谱仪上面放任何物品。

13. 当天值班同学严格负责，钥匙不要外借给非值班同学，外出时无论时间长短一定将实验

室锁门。当天的样品完全由值班同学做，不允许组内外其他同学操作仪器，更不允许其他同学更改参数。阻止未换鞋的同学进入操作间。人多时预约登记按序做样，其他人操作间外排队等候。

14. 保持操作间卫生，当天实验结束时，收拾好一切实验物品，将登记本整理好，将做过的

样品丢掉，盖好溶剂瓶盖。清洗注射器，仪器管线。打开喷雾腔，去掉喷雾遮盖，堵上橡皮帽，关上喷雾腔，小心不要夹到输送氮气的塑料管。

15. 离开实验室前再次重新检查仪器，是否处于Shutdown模式，进样器是否关闭，切记切记！

如遇任何问题，必须及时与负责人员联系