烟草品种防御酶活性对黑胫病菌响应差异
烟草黑胫病生物防治研究进展
１ 利用诱抗剂 防治烟草黑胫病的研究
植物诱导抗性 （ｎｕｅ ｅ ｓ ｎｅ 是指利用物理、 Ｉ ｃｄＲ ｓｔ ｃ） 诱导植物启动 自身防 御体系 ， 以增强对病原物的抵抗力。利用诱导抗病性 防
治烟草 黑胫 病具有 安全 、 抗 的优点 ， 最理 想途径 高 是
也对烟草黑胫病菌具有明显的抑制效果。烟草内生拮抗
子的消解 ， 采用植物诱抗剂来提高植物抗性 ， 使易感病 的
优质品种转变为抗病品种； 最后 ， 选用少量低毒、 高效、 无 残留的生物农药杀死或抑制病原菌。综上所述 ， 防因 生 子的多样性决定了防治方法 的多样性 ， 为烟草黑胫病的 生物防治提供 了多种有效 的途径。
８ ｄＩｓｃ Ｐ ｓ ， ｈ ｇｈ １ １８ Ｃ ｉ ） ｅ ａ ｅｔ ｅｔ Ｃ ａ ｓａ ０ ２ ， ｈｎ ｓｎ ｎ ｓ ｎ ４ ａ
Ａｂ ｔ ａ ｔ Ｔ ｉ ｒ ｃｅ ｒｖ ｅ ｅ ｒｓ ａ ｃ ｄ ａ ｃ ｎｔ ｅ ｂｏｏ ｉａ ｏ ｔ ｌ ｆ ｏ ａ ｃ ｌ ｃ ｈ ｎ ｏ ｔ ｅｆｌ ｗ ｎ ｓ ｅ ｔ ：ｒ ． ｓ ｒ ｃ ： ｈ ｓａ ｔ ｌ ｅ ｉｗｓｔ ｅ ｅ ｒ ｈ ａ ｖ ｎ ｅ ｉ ｉｌｇ ｃ ｃ ｎｒ ｂ ｃ ｏｂ ａ ｋ ｓ ａ ｋ ｆ ｍ ｌ ｉ ｇａ ｐ ｃ ｓ ｅ ｉ ｈ ｈ ｌ ｏｏｔ ｒ ｈ ｏｏ ｓｔ ｅ ｉ ａ ｅ—ｉ ｄ ｃ ｎ ｈ ｍｉａｓ ｎ ｔｇ ｎ ｓｉ ｆ ｎ ｕ ｎ ｈ ｔ ｇ ｎ ｃ ｆｎ ｉ ｉｅ ｏ ｏ ａ ｃ ｌｃ ｈ ｎ ，ａ ｄ ｌｏ ｓ ｆｒ ａ ｄ ｔ ｅ ｃ ｎ ｒｌ ｓｎ ｎ ｕ ｉ ｇ ｃ ｅ ｃ ，ａ ａ ｏ ｉｔ ｕ ｇ ｓ ａ ｄ ｐ ｙｏ ｅ ｉ ｕ ｇｃｄ ｆｔｂ ｃ ｏ ｂａ ｋ ｓ ａ ｋ ｎ ｏ ｋ ｏ ｗ ｒ ｈ ｏ ｔ ｌ ｃ ｏ ｍｅ ｏ ｓ ｏ ｏ ａ ｃ ｌｃ ｈ ｋ ａ ｄ ｔ ｅｒｄ ｖ ｌ ｐ ｎ ａ ｒ ｓ ｅ ｔ ｅｆ ｔ ｒ ． ｈ ｔ ｄ ｔｂ ｃ ｏ ｂ ａ ｋ ｓ ａ ｉ ｅ ｅｏ ｍｅ ｔｌｐ ｏ ｐ ｃｓ ｉ ｔ ｕｕ ｅ ｆ ｎ ｎ ｈ ｎ ｈ
烟草黑胫病发病机理及防治方法研究进展
烟草黑胫病发病机理及防治方法研究进展1. 引言1.1 烟草黑胫病概述烟草黑胫病是一种常见的烟草病害，主要由真菌感染引起，对烟草种植造成严重的危害。
烟草黑胫病的发病特点是在烟草叶片上形成黑色斑点，逐渐蔓延并导致叶片坏死。
这不仅影响了烟草的品质和产量，还给农民带来了经济损失。
烟草黑胫病的传播途径主要有空气传播和土传两种方式。
在潮湿的环境下，真菌会迅速繁殖并侵染烟草植株，加剧病害的发展。
病原真菌还会在烟草植株残体和种子上长时间存活，为病害的再次发作提供了条件。
为了有效防治烟草黑胫病，农民需要加强田间管理，保持烟田通风和排水良好，及时清除病变叶片和烟草残体，避免病原真菌的传播。
选择抗病品种、合理施肥、科学使用化学农药也是防治烟草黑胫病的重要措施。
通过对烟草黑胫病的认识和防治方法的研究，可以有效减少病害的发生，保障烟草产量和质量，为农民增加收益提供技术支持。
2. 正文2.1 烟草黑胫病的发病机理烟草黑胫病是由真菌类病原体引起的一种重要病害，主要发生在烟草的根部和地下茎部。
发病机理主要包括以下几个方面：1. 病原侵入：烟草黑胫病的发病过程首先是病原菌通过伤口或根部吸收器官侵入植株，损害其正常功能。
病原菌在植株内部迅速繁殖，导致病变的扩散和加重。
2. 植物抗性：烟草黑胫病的发病机理还与植物本身的抗病性相关。
一些研究表明，植株的遗传背景和生长环境都会影响其对病原菌的抵抗能力，进而影响疾病的发生和发展。
3. 气候环境：烟草黑胫病的发病还受气候环境的影响。
高温多湿的气候条件有利于病原菌的生长和繁殖，从而增加疾病的发生风险。
烟草黑胫病的发病机理是一个复杂的过程，受到多种因素的影响。
深入研究这些因素之间的相互作用，可以帮助我们更好地理解烟草黑胫病的发生规律，找到有效的防治方法。
2.2 烟草黑胫病的防治方法烟草黑胫病的防治方法可以采取多种措施，包括遗传改良、农艺管理、化学防治和生物防治等方面。
在遗传改良方面，选育抗病品种是预防烟草黑胫病的首要措施。
烟草“两黑病”的防治措施
zhi w u bao hu11烟草“两黑病”的防治措施张顺(普洱市职业教育中心，云南普洱665000)摘要:烟草“两黑病”指的是烟草黑胫病和烟草根黑腐病。
烤烟产业是普洱市的重要支柱产业，而烟草病虫害又是制约普洱烟草产业发展的重要因素之一，其中的烟草黑胫病和烟草推■黑腐病是两种重要的病害,且在普洱烟区烟草黑胫病和烟草推■黑腐病经常混合发生。
本文从烟草黑胫病和烟草根黑腐病的症状特征、发病规律以及烟草黑胫病和烟草根黑腐病的防治方法几个方面进行了阐述。
关键词:普洱市;烟草两黑病；防治方法中图分类号：S435.72 文献标识码：A DOI编号：10.14025/ki.j lny.2017.04.025烟草“两黑病”指的是烟草黑胫病和烟草根黑腐病。
普再市位于云南省西南部，幅员面积45385平方公里，总人口259万。
烤烟产业是普'再市的重要支柱产业，近年来全市的烤烟产量已 经突破了 100万担，烤烟产业成为了农民脱贫致富，政府增加 税收的重要产业。
普洱市处于热带、亚热带地区，年均温度 15.3尤~ 20.2'C,年降水量1102.8~ 2779.0毫米,在烤烟生长的 季节温度较高，湿度较大，因此病虫害发生较多。
烟草病虫害是制约普再烟草产业发展的重要因素之一，而其中的烟草黑E病和烟草根黑腐病又是其中重要的两种病害，且在普再烟区烟草 黑腔病和烟草根黑腐病经常混合发生。
本文就烟草黑腔病和烟草根黑腐病在普洱的发生规律和防治方法进行阐述。
1烟草黑胫病的症状特征及发病规律1.1烟草黑胫病症状特征烟草黑胫病在普洱烟区主要在大田期发病，先从茎基部发 病，再向上发展，然后在烟株的茎干上形成一条黑色的长形条斑,最后坏死的条斑横向发展，导致茎基部变黑干枯。
由于病原菌破坏了烟株的输导组织,影响了水分的运输会导致烟株的叶片白天向下萎垂,晚上恢复正常的现象，俗称“穿大褂”。
如果把发病的茎干拿来肖岍，则可看见发病部位的髓部呈现碟片状。
4种生防菌对烟草黑胫病的防治作用
【科普惠农植物保护与栽培ZHI WU BAO HU YU ZAI PEI烟草黑胫病是一种由烟草疫霉菌（Phytophthora parasitica var.Nicotianae）[1]引起的典型高温高湿土传性病害，在全国地区一般与烟草青枯病混合发生，常给烟草种植业带来重大经济损失[2]。
目前对烟草黑胫病的防治主要是以化学防治为主，由于长期大量使用化学农药，使病原菌产生抗药性，导致防治效果差和农药残留等问题。
采用以生防菌为基础的生物防治技术可以避免这些弊端，并且具有防效快、无毒害、无残留、对环境友好等特点，符合绿色生态防控、绿色优质烟叶生产的要求。
据报道，迄今为止用于烟草黑胫病的生物防治菌主要有假单胞杆菌（Pseudomonas spp.）、芽孢杆菌（Bacillus spp.）、木霉菌（Trichoderma spp.）、放线菌（actinomyces spp.）等[3-4]。
笔者综述这4种微生物菌对烟草黑胫病防治的研究进展，为防治该病害提供参考依据。
1假单胞杆菌非致病性假单胞杆菌（Pseudomonas spp.）广泛活跃于烟草根际，主要通过嗜铁素对铁的营养竞争、抗生作用、次生代谢产物[5-8]等方式对病原菌起着生防效应，蒋海霞[9]对铜绿假单胞菌（Pseudomo ns aeruginosa）生防菌株抑菌代谢产物的研究中认为，铜绿假单胞菌分泌嗜铁素、吩嗪类等多种代谢产物对疫霉菌等具有良好的拮抗作用。
据报道，荧光假单胞杆菌（Pseudomonasfluorescens）、绿针假单胞菌（Pseudomonaschlororaphis）、铜绿假单胞菌（Pseudomo nsaeruginosa）、恶臭假单胞菌（Pseudomonas putida）[10]等在生物防治方面发挥着重要作用。
荧光假单胞杆菌（Pseudomonas fluorescens）能产生抗生素物质，抑制烟草黑胫病菌孢子的萌发与生长，进而达到控制烟草黑胫病的目的[11]。
烟草黑胫病怎么防治
烟草黑胫病又叫烟草黑根、黑杆疯，是由烟草疫霉侵染所引起的、发生在烟草上重要土传真菌病害。
主要侵染烟草的根和茎基部，在其上形成黑色凹陷的病斑，故称“黑胫病”。
苗床期一般发生较少，主要为害大田期的烟株。
症状因烟株生长阶段和气候条件的不同而有较大差异。
烟草黑胫病遍布全世界，特别是温带、亚热带和热带地区发生较严重，有近40个国家和地区受到烟草黑胫病的危害。
[4] 中国华南地区3月下旬至4月中旬，黄淮地区5月出现症状。
降雨及田间土壤湿度是烟草黑胫病流行的关键性因素，在适温条件下，雨后相对湿度80%以上保持3-5天，病害即可流行。
烟草黑胫病的防治方法首先需要选择种植抗病品种。
大力推广高起垄、高培土技术，烟田要求平整，防止积水。
育苗时苗床用20%地菌灵（乙酸铜）可湿性粉剂10克/平方米，拌10-12千克干细土，播种时1/3撒在苗床表面，播种后其余2/3覆盖在种子上。
移栽前苗床用58%甲霜灵锰锌可湿性粉剂500倍液均匀喷雾。
移栽时用55%敌克松可湿性粉剂350-400克/亩穴施。
最后在发病期结合化学药剂进行防治。
烟草黑胫病菌主要侵染烟草的根和茎基部，在其上形成黑色凹陷的病斑，故称“黑胫病”。
苗床期一般发生较少，主要为害大田期的烟株。
症状因烟株生长阶段和气候条件的不同而有较大差异。
对于一般具有水平抗性的品种来说，苗期对烟草黑胫病是非常感病的。
幼苗首先在近土表的茎基部出现暗褐色至黑色的病斑或底叶受到侵染，再沿叶柄扩展到茎上，常引起“猝倒”症状。
但与由腐霉属（Pythium）引起的烟草猝倒病不同的是，在苗床期，烟草黑胫病的病苗的部分或全部根系受侵染腐烂变黑，而烟草猝倒病在发病前、中期根系较少受到侵染。
当气温较低时，幼苗虽可以受到烟草黑胫病菌侵染，但往往不表现症状，这些受侵染而尚未表现症状的烟苗移栽到大田，不仅成活率很低，同时也是大田初侵染菌源之。
旺长期症状：这个时期病菌主要侵染部位是根系及茎的地下部分。
因此，首先看到的症状是烟株的叶片突然萎蔫下垂，几天后叶片变黄枯萎。
烟草黑胫病
烟草黑胫病中文名称:烟草黑胫病拉丁学名:Phytophthora parasitica var nicotianae为害作物:烟草病原菌形态特征:所引起的病害。
菌丝无隔膜，孢子囊顶生或侧生，梨形或椭圆形，顶端有乳状突起。
内生游动孢于，圆形或肾形，有侧生鞭毛两条。
厚膜孢子圆形或卵形，萌发时产生芽管形成菌丝．卵孢子球形，黄色、厚膜发病特点:黑胫病的流行主要由病菌特性，烟草的抗病性和环境条件三因素所制约。
寄主除不同烟草品种的抗性不同外，随株龄的增加其抗性增加，在现蕾期以前，茎基部组织柔嫩，为感病阶段，至现蕾后基部己本质化，即进入抗病阶段。
高温、多湿有利于此病流行，24．5~32℃为侵染适温。
在适温条件下，如雨后相对湿度保持在80％以上，连续3-5天，田间即可出现发病高峰。
防治方法:1) 种植抗病品种中烟14、5008、革新一号G140、G28、NC82、NC89、金星6007、(2)轮作换茬苗床地和烟田至少实行三年轮作。
前作以禾本科为宜不要与切科蔬菜科轮作(3)平整土地,越垅培土(4)药剂防治苗期喷洒1:1:120波尔多液二三次,移栽时用95%敌克松350克,对细土15-25公斤拌匀,于移栽封高窝前及起垅培土前,把药土洒在烟株周围,立即覆土避免药剂光解。
(5)在培土后也可用500倍的70％敌克松液喷茎基或浇灌，效果更好。
也可用40％三乙膦酸铝(乙磷铝)可湿性粉剂，亩施1公斤，或25％甲霜灵可湿性粉剂50克对水50公斤，每株浇药液20~3~毫升，或于茎基部喷洒，隔10~15天再施药一次，可控制此病。
(4)药剂防治用25%甲霜灵可湿性粉剂10g/m2，拌10-12kg干细土，播种时1/3撒在苗床表面，播种后其余2/3覆盖在种子上。
移栽前用此药500-800倍液喷一次，做到带药移栽。
移栽时用药50g/667m2与干细土拌匀，撒入穴窝。
也可用95%敌克松可湿性粉剂，每667m2350-400g穴施。
烟株培土后发病前采用局部保护的灌根方法向茎部及其土表施用58%甲霜灵·锰锌可湿性粉剂600-800倍液或40%甲霜铜可湿性粉剂600倍液、64%杀毒矾M可湿性粉剂400-600倍液、90%8三乙膦酸铝可湿性粉剂400倍液、70%甲霜灵·福美双可湿性粉剂600-800倍液、1：1：150-200倍式波尔多液喷淋，隔15天喷一次。
烟草黑胫病
烟草黑胫病Tobacco Black Shank烟草黑胫病是烟草上的重要病害之一，1896年首先在印尼的爪哇发现，现已遍布世界各产烟国。
该病在温带、亚热带和热带发生较重。
据全国16省市主产烟区调查，在我国除较寒冷的黑龙江省未发现外，其他各产烟省均有不同程度的发生，其中以安徽、河南、山东等省发生最重。
一般发病率为10%~15%，重者达30%以上。
症状主要危害大田，在苗床期发生相对较轻。
发病部位以茎基部为主，根部和叶片也可受害。
苗床期发病，一般先从苗床低洼处或边缘开始。
发病幼苗首先在茎基部出现黑斑，苗床温度低时该病发展较慢，不易引起注意，苗床后期温度升高，湿度大时黑斑很快沿茎扩展，造成全株腐烂，其上布满白色霉状物，严重情况下造成成片死苗。
气候干燥时，病苗呈黑褐色枯死。
成株期发病，先在茎基部出现黑斑，病斑沿茎向上扩展，病斑有时可扩展至病株的1/3~1/2，病株叶片自下而上逐渐变黄，若遇大雨后天晴高温，则全株叶片突然凋萎，全株枯死。
纵剖病茎，可见髓部呈褐色，干缩成碟片状，碟片间有稀疏的白色霉状物。
雨季，中下部叶片也可受侵染而表现症状，病斑初水渍状，圆形，并有浓淡相间的轮纹。
病斑一般较大，直径可达4~5cm，气候干燥时，病斑处出现穿孔。
病原病原为寄生疫霉烟草变种Phytophthora parasitica var. nicotianae(Breda de Haan) Tucker，属鞭毛菌亚门疫霉属。
菌丝无色透明，无隔膜，有分枝。
孢囊梗分化不明显，菌丝状，常从气孔伸出。
孢子囊顶生或侧生，梨形或椭圆形，顶部有一乳头状突起，适宜条件下可产生5~30个游动孢子。
游动孢子圆形或肾形，侧生两根不等长的鞭毛。
该菌在病残体上或培养6周后可产生圆形的厚垣孢子，自然条件下未发现卵孢子。
菌丝体生长最适温度为28~32℃，产生孢子囊的最适温度为20~28℃，游动孢子萌发最适温度为20℃。
病菌生长的最适pH5.7~7.0。
自然条件下，病菌只侵染烟草，人工接种可侵染番茄、茄子、马铃薯、辣椒等。
烟草黑胫病菌致病力的影响因子及其互作效应
病力有较 大差 异 ］ 。龚龙 英等研究 指出 ， 不 同接种方 法对烟 草黑胫病 菌致病力测定有一定 的影响 ， 甚至会 产生较大差异 ， 但未作系统研 究 ］ 。本试 验就 影 响烟草 黑胫病 菌致 病力 的 主要 因子及其互作效应进 行研究 ， 以期 为今后致 病力 分化测
定方法的选择 、 寄主植物抗病 性的鉴定 以及烟 草黑胫病 的综
江苏农业科学
２ ０ １ ３年第 ４ １卷第 １ ２期
马国胜 ， 高智谋． 烟 草黑胫病菌致病力 的影响 因子及其互作效应［ Ｊ ］ ．江苏农 业科 学， ２ ０ １ ３ ， ４ １ （ １ ２ ） ： ｌ ｌ １ —１ １ ３
烟草黑胫病 菌致病 力 的影 响 因子及其互作效应
马 国胜 ，高智谋
Ｂ ｒ ｅ ｄ ａ ｄ ｅ Ｈ ａ ａ ｎ ） 引起 的烟草主要病害之一 ， 可 以危害所有栽培 烟草 ， 烟株一旦发病 ， 往往都是整株死亡 ， 严重影响烟草生产 ， 是烟草病害 的攻 克难题 之 一 ， 在 中国各 烟 区广 泛发 生 。 我国过去在进 行抗 黑胫 病品种鉴 定 中， 发现不 同地 区菌株致
１ ． ３ 培 养基 （ 液） 的配制
１ ． ３ ．１ Ｌ Ｂ Ａ 培 养 基 取 ６ ０ ｇ利 马 豆 粉 加 入 去 离 子 水 １ ０ ０ ０ ｍ Ｌ ， ６ ０ ｏ Ｃ恒温水浴加热 １ ｈ ， 用 ４层纱布过滤 ， 取滤液 ， 用去离子水定容至 １ ０ ０ ０ ｍＬ ， 加入琼脂 ２ ０ ｇ ， 在微波炉 内加热
得到有大量孢子的孢子悬 浮液 。取样镜 检测定其浓 度 ， 并将
密度 ２ １万 一 ２ ２ ． ５万￣． ／ ｈ ｍ 。条播时行距 ４ ０ ｃ ｍ 为宜 。
态环境 与植物保护 。Ｅ—ｍａ ｉ ｌ ： ｇ ｏ ｓ ｈ ｉ ｎ ｅ ｍ ａ ＠１ ６ ３ ． ｃ ｏ ｎ。 ｒ
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云南农业大学学报JournalofYunnanAgriculturalUniversity，2012，27（3）：321－326http：//xb.ynau.edu.cnISSN1004－390X；CODENYNDXAXE-mail：xb@ynau.edu.cn
收稿日期：2011－07－09修回日期：2011－11－10网络出版时间：2012－05－1010∶21*基金项目：中国烟草总公司重大科技专项及云南省烟草公司项目（09YN022）。作者简介：王戈（1982－），男，云南沾益人，博士研究生，主要从事烟草生理生化研究。E-mail：wangge302@126.com＊＊通讯作者Correspondingauthor：杨焕文（1963－），男，云南剑川人，教授，博士生导师，主要从事烟草生理生化教学及科研工作。E-mail：mryanghuanwen@126.com网络出版地址：http：//www.cnki.net/kcms/detail/53.1044.S.20120510.1021.201203.321_009.html
DOI：10.3969/j.issn.1004－390X（n）.2012.03.004烟草品种防御酶活性对黑胫病菌响应差异*
王戈1，杨焕文1＊＊，赵正雄1，李佛琳1，易建华2（1．云南农业大学烟草学院，云南昆明650201；2．云南省进出口检验检疫局，云南昆明650228）
摘要：以不同抗、感黑胫病烤烟品种云85（高抗）、K326（中抗）、净叶黄（中感）和红花大金元（高感）为供试材料，采用人工接种方法研究了黑胫病菌诱导的这些品种超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）、多酚氧化酶（PPO）和苯丙氨酸解氨酶（PAL）活性差异及其与品种抗性的关系。结果表明，接种
黑胫病后不同抗性品种SOD，POD，PPO和PAL活性与对照相比均出现明显提高，抗病品种SOD和POD活性较感病品种上升快且维持较高活性水平，且抗病品种POD酶活高峰较感病品种出现得早；抗病品种PPO和PAL较感病品种活性上升幅度更大，维持时间更长。相关性分析表明，SOD，POD，PPO和PAL活性与品种
的黑胫病抗性呈正相关关系。关键词：烤烟；黑胫病；超氧化物歧化酶；过氧化物酶；多酚氧化酶；苯丙氨酸解氨酶中图分类号：S435.72文献标识码：A文章编号：1004－390X（2012）03－0321－06
ResponseDifferenceoftheDefenceEnzymesofFlue-curedCultivarstoPhytophoraparasiticavar．nicotiana
WANGGe1，YANGHuan-wen1，ZHAOZheng-xiong1，LIFo-lin1，YIJian-hua2（1．CollegeofTobaccoScience，YunnanAgriculturalUniversity，Kunming650201，China；2.Entry-exitInspectionQuarantineBureau，Kunming650228，China）
Abstract：Fourdifferentresistancecultivars，Yun85（highresistance，HR），K326（middleresistance，MR），Jingyehuang（middlesusceptibility，MS）andHongda（highsusceptibility，HS）wereusedtostudySOD，POD，PPOandPALactivedynamicandrelationwithresistanceafterinoculationwithPhyto-phoraparasiticavar．nicotiana．Theresultshowedthatcomparedwithcontrol，SOD，POD，PPOandPALactivityofdifferenceresistancecultivarsallappearedobviousincreaseafterinoculation．Anddis-ease-resistantcultivarraisewasrisingfasterthansusceptiblecultivarsandkeephigheractivity．PODac-tivityofresistancecultivarswasearlierthansusceptiblecultivar．RisingrangeandholdingtimeofPPOandPALactivityofdisease-resistantcultivarsweregreaterandlongerthansusceptibleone．CorrelationanalysisshowedthattherewasapositivecorrelationbetweenSOD，POD，PPOandPALandresistance．AllaboveresultsdemonstratedthattherewasobviousresponsedifferenceofSOD，POD，PPOandPALactivitytoP．parasiticavar．nicotianaandwasdirectcorrelationwithcultivarresistance．Keywords：flue-curedtobacco；Phytophoraparasiticavar．nicotiana；uperoxidedismutase；peroxi-dase；polyphenoloxidase；phenylalanineammonialyase植物的抗病反应涉及植物体内一系列复杂的生理生化变化，如植物细胞内活性氧的积累与清除、次生代谢产物的产生、抗病信号的产生与转导、防卫反应的表达与调控等［1－2］。超氧化物歧化酶（superoxidedismutase，SOD），过氧化物酶（peroxidase，POD）、多酚氧化酶（polyphenoloxi-dase，PPO）和苯丙氨酸解氨酶（phenylalanineammonialyase，PAL）是植物体内较重要的保护酶和防御酶，大量研究表明，在寄主植物和病原物非亲和性互作（抗病反应）和亲和性互作（感病反应）中这些酶与植物抗性密切相关［3－5］。烟草黑胫病（Phytophoraparasiticavar.nicoti-ana）是一种危害所有栽培烟草的毁灭性土传病害，破坏力极强且蔓延较快，大田侵染后常造成烟株整株死亡，该病在我国各产烟省均有不同程度的发生。云南烟区是黑胫病的多发区，目前黑胫病已成为提高烤烟质量的限制因素之一［6］。目前有关烤烟黑胫病抗性研究主要集中在品种抗性鉴定、病原菌分化和拮抗菌选育上［7－8］，而有关防御酶酶活性和黑胫病抗性方面的研究较少。因此，本研究以目前云南主栽品种云85，K326，净叶黄和红花大金元为材料，研究了各品种接种黑胫病后品种超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）、多酚氧化酶（PPO）和苯丙氨酸解氨酶（PAL）活性差异及其与品种抗性的关系，以期丰富烤烟黑胫病抗性机制研究。1材料与方法1.1供试材料供试烤烟品种：云85（R），为高抗黑胫病烤烟品种；K326（MR），为中抗黑胫病烤烟品种；净叶黄（MS），为中感黑胫病烤烟品种；红花大金元（S，以下简称红大），为高感黑胫病烤烟品种。试验前按照国家行业标准YC/T39－1996和YC/T41－1996对各品种进行抗性评价。试验采用温棚土壤盆栽方法，土壤来源于云南农业大学后山农场未种植过茄科作物地块的耕作层土壤。土壤经自然风干过筛，每盆装土20kg。每株烤烟施纯氮7.0g，采用烤烟专用肥［m（N）∶m（P2O5）∶m（K）=1∶1∶2］，一次性基施。供试病原菌为烤烟黑胫病菌，菌株由云南农业大学烟草学院赵正雄教授提供，菌株经PDA斜面活化后，转入适于黑胫病菌生长的燕麦培养基（OA，1000mL培养基中含燕麦片30.0g，琼脂20.0g）进行纯培养，27℃黑暗培养10d后备用。1.2方法
1.2.1试验设计
采用常规烤烟漂浮育苗，种子表面消毒和催芽后播于育苗盘上，60d苗龄进行移栽。各抗性品种即处理：云85（R）、K326（MR）、净叶黄（MS）和红大（S）；对照组分别为R－CK，MR－CK，MS－CK和S－CK。完全随机摆放，每隔
20d变换1次位置。于团棵期（移栽后30d）采
用浇根法接种黑胫病菌，参照王万能［9］方法，并略加改动：接种前1天先用1kg/盆等量清水浇水以保证土壤湿度，病原菌经致病力检测为强致病菌株，调整孢子囊浓度大约为1×107个/mL，每株接种10mL菌液，对照浇等量清水。于接种前，接种后12，24，48，96，120h分别采集长势一致同部位烟叶测定酶活性。每处理3次重复，共采集6次。1.2.2测定方法
SOD，POD，PPO和PAL活性测定参考李合
生［10］的方法。SOD活性以SOD抑制NBT光化还原反应50%为1个酶活力单位；POD活性以每分钟增加0.01为1个酶活力单位；PAL活性以A290
变化0.01为1个酶活力单位；PPO活性以A420变
化0.01为1个酶活性单位。1.3数据处理和统计方法
实验数据采用Excel2003进行初步处理和作图，相关分析由SPSS13.0统计软件完成，分析了接种后12～120h酶活性平均值与不同抗性烟草品种病情指数的相关关系，显著性检验采用双尾t检验。
2结果与分析
2.1不同抗性品种抗病性评价
根据各品种平均病情指数进行抗性评价，结果如表1所示，云85和K326是抗黑胫病品种，其中云85表现为高抗（R），K326表现为中抗（MR）；净叶黄和红大是感黑胫病品种，其中净
叶黄为中感品种（MS），红大为高感品种（S）。2.2不同抗性品种超氧化物歧化酶（SOD）活性
变化由图1可知，接种后黑胫病菌对各品种SOD活性产生较大影响，相比对照，各品种SOD活性
223云南农业大学学报第27卷