苯酚生物降解菌的筛选
苯酚高效降解菌的筛选及其降解特性研究
ｔａ ｉ ｎ ｙ Ｗ ｕ ｔＣ ｒ ｔｏ ｓ ｂ ｓ－
２ ４ 固 定 化 Ｗ ｕｔ ． ｓ Ｃ对 苯 酚 的 降解 效 果 －
通 过 比 较 采 用 ２ ５ １ 、 、 ０ ｍＬ 注 射 器 制 作 的 Ｗ ｕｔＣ固定 化 小球 （ 别 记 为 １ ２ ３ ｓ— 分 、 、 小 球 ）
８６ ４ 、 ９ ３ 、 ７． 、 １ 。 ． ５ 。 ４ ６ ４ ．７
茅醇假 单胞 菌 ） 降解 苯酚 的效 率 明显 高 于 其 他 菌
株 ， 选其 作为研 究 菌株 ， 故 其革 兰 氏染 色结 果为 阴
性。
通过 一系列 的降 解 条件 优 化 试 验 发现 ， 酚 含
经 反 复驯化 、 涂板 分离 ， 共得 到 ８株 以苯酚 为
惟 一碳 源 和能源 而高 效生 长 的菌株 。通过 比较 发 现其 中 ３号 菌 株 （ 名 为 Ｗ ｕｔ 初 步鉴 定 为香 命 ｓ Ｃ， —
降解 不 同浓度 的苯 酚 。初 始 苯 酚浓 度 越 低 ， 解 降
所需 时 间越短 。在 初始 苯酚 浓度 为 ３ ０ｍｇ Ｉ 和 ０ ／ ５ ０ｍｇ Ｌ的 试 样 中 ， 酚 完 全 降解 所 需 的 时 间 ０ ／ 苯 分别 为 ８ｈ和 １ ； 初始 苯酚浓 度 为 ｌ ０ ／ ２ｈ 在 ０ｍｇ ０ Ｌ的试样 中， 酚完 全降解 所需 的时 问为 ３ ； 苯 ２ｈ 在 初 始苯 酚浓度 为 １６ ０ｍｇ Ｌ的试样 中 ， ０ ／ 菌体 的生 长 速度和 苯 酚的 降解 速度 均 极 其缓 慢 。培 养 ４ ｈ 时 ， ｓ Ｃ 对 初 始 含 酚 浓 度 分 别 为 ３ ０ ５ ０ Ｗｕ ｔ — ０、 ０、 ８ ０ １０ ０ｍｇ Ｉ 试 样 中的 苯酚 降解 率 分 别 达 到 ０ 、 ０ ／
焦化厂含酚废水中高效苯酚降解菌的筛选
和 生物 降解两 种 。 。 环境 治理 中 ， 在 利用培 养优 势
菌群的微生物法降解酚类化合物 因其投资少 ， 处理
效 率高 ， 运行 成本 低 ， 次污 染少等 优 点而得 到越 来 二 越 广泛 的应用 。 实验采 用 自然选 育 的方法 ， 本 以包 钢
ｘ 一
， １ １ＵＵＵ
庄 晓娟 ， 杨宏 伟 ， 明． 庄 六种 茶叶 中微 量元 素含 量 的调 查及 分析 ＥＪ 内蒙古大 学 学报 （ Ｊ． 自然科
学版 ） ２ ０ ，７ ２ ：３ ￣２ ０ ，０ ６ ３ （ ） ２ ７ ４ ．
式中： ｘ—— 样 品 中铅含 量 ， ｇ・ ｇ （或 ｇ・ ） ｋ Ｌ
２ ２ 结 论
李 星彩． 子 吸收分 光光度 法测 定 南瓜 籽 中的 原
微 量 元 素Ｅ Ｊ 微 量 元 素 与健 康研 究 ， ０ ６ ２ Ｊ． ２ ０ ，３
（ ）６． ５ ： ８
本 实验通 过 原子 吸收分 光光度 法对 呼和 浩特 市 售 的 十几 种牛 奶 中含铅 量 进行 了测 定 ， 测定 结 果表
保护起 着一 定 的作 用。
关 键词 ： 苯酚 ； 菌种驯化 ； 生物 降解 ； 理化 测定
酚类 化合 物 是一 种 原 生质 毒 物 ， 一 切 生 活个 对 体 都 有毒 杀作 用 ， 中 以苯 酚 的毒 性 和污 染 最 为突 其 出（ 。我国和 许 多国家 已将 其列 入重 点污 染物 的名 １ ３ 单 之 中。 由于在 冶 金 ， 料 ， 药 ， 药等 工 业废 水 塑 制 农 中 ， 含有 高 浓 度 的苯 酚 ， 以 ， 何 采取 有 效 的方 都 所 如
～ ７ ４ ．
１ １ １ 菌株 ： ．． 活性 污 泥 （ 自包 头 焦化 厂）
苯酚降解菌的筛选及降解性能研究
苯酚降解菌的筛选及降解性能研究王启明;彭仁;陈文静;杜芸芸;杨贵娟;简敏菲【期刊名称】《江西师范大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2012(036)003【摘要】从腐烂的树木枯枝和污染的淤泥中分离出苯酚的高效降解菌.通过对它们的形态和16S rDNA分析,筛选到的新菌株分别命名为Acinetobactersp.SD1,Pseudomonas sp.SD2和Rhodococcussp.SD3.在筛选到的3株菌中,Rhodococcus sp.SD3的苯酚降解性能最好,该菌株在72 h内几乎能将浓度为1.0 g/L的苯酚完全降解.%Phenol-degrading microbes were isolated from rotting wood and polluted sludge. These strains were identi-fied as Acinetobacter sp. SD1, Pseudomonas sp. SD2 and Rhodococcus sp. SD3 according to their morphological feature and 16S rDNA sequence, respectively.The phenol-degrading performance of Rhodococcus sp. SD3 strain was best among three strains, which almost completely degraded 1.0 g/L phenol in 72 hours.【总页数】4页(P317-320)【作者】王启明;彭仁;陈文静;杜芸芸;杨贵娟;简敏菲【作者单位】江西师范大学生命科学学院,江西南昌330022;江西师范大学生命科学学院,江西南昌330022;江西师范大学生命科学学院,江西南昌330022;江西师范大学生命科学学院,江西南昌330022;江西师范大学生命科学学院,江西南昌330022;江西师范大学生命科学学院,江西南昌330022【正文语种】中文【中图分类】X172【相关文献】1.高效苯酚降解菌的分离及降解性能的研究 [J], 赵宇虹;王月;兰莹;张跃华;赵坤宇2.苯酚降解菌的筛选及其降解性能研究 [J], 张雯;苏静静;曹丽琴3.沙雷氏苯酚降解菌固定化条件优化及降解性能研究 [J], 王春荣;高振凤;王建兵;程芳琳;常莎4.一株苯酚降解菌的筛选及其降解性能研究 [J], 付玲玲5.一株高效苯酚降解菌的筛选及降解性能考查 [J], 石瑞文;哈妮;郭楠;张晓琴;关海滨因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
高效苯酚降解菌的分离及降解性能的研究
高效苯酚降解菌的分离及降解性能的研究引言石油、化工、煤气、焦化及酚类等生产厂排放的废水当中含有大量的苯酚[1]。
未经净化的含酚废水可导致水源被污染，致使鱼类死亡，危害农作物，最终威胁人类的健康。
许多国家将苯酚列为重要的污染物之一。
目前，国内外处理含酚废水的方法主要有物理法、化学法、微生物法及各种结合法[2]。
其中微生物法主要利用微生物的代谢活动去除废水中的有毒物，处理方法无2次污染且安全、经济。
目前，已鉴定具有降解苯酚能力的微生物主要有假单胞菌（Pseudonomonas.sp）[3]、芽孢杆菌（Bacillus.sp）[4]、酵母菌（Yeast trichosporon）[5]、根瘤菌（Rhizobia）[6]、醋酸钙不动杆菌（A. calcoaceticus）[7]等，降酚菌株多存在于酚类污染物企业排放的废水、污泥和被废水污染的土壤中[8]。
本课题拟从被苯酚废水污染的污泥中进行菌株筛选，得到耐酚菌后在以苯酚为唯一碳源的无机盐培养上筛选降酚菌株，进一步测定苯酚降解的影响因素。
对特定菌株降解含酚废水的应用价值进行研究。
1 实验材料和方法1.1 菌株来源采集原黑龙江省佳木斯东郊黑龙农药化工集团废弃排污口处污泥进行菌株筛选。
1.2 培养基基础培养基：NaCl 5.0g/L，蛋白胨10g/L，琼脂15～20g/L，酵母浸膏5.0g/L，调节pH为7.0。
以苯酚为唯一碳源的无机盐培养基：CaCl2 0.1 g/L ，FeSO4.7H2O 0.01 g/L，K2HPO4 0.5g/L，MnSO4.7H2O 0.05 g/L，NaCl 0.2 g/L，KH2PO4 0.5g/L，MgSO4.H2O 0.01 g/L，NH4NO3 1.0 g/L苯酚按实验需要量添加，调节pH为7.0 [8]。
富集培养基：葡萄糖10.0g/L，营养琼脂33.0g/L，酵母浸粉10.0g/L，调节pH为7.5。
1.3 研究内容与方法1.3.1 菌株和的驯化和分离在超净工作台中，将10mL含0.1g/L苯酚的基础培养基倒入培养皿，取10 g污泥加90mL蒸馏水搅拌15min，静置5min后取上层清液为菌原液[8]。
高效苯酚降解菌的分离与降解特性
基金项 目：佳木斯大学学 生创新课题 （课题编号 ：Ｄｚ２０１１—０２１） ＊为通讯作者
· ２５· ２０１１年 ８月
农 业 与 技 术
Ｖｏ１．３１ Ｎｏ．４
荫 种 的甯 集 与驯 化 采用 一 次性 加入 大 剂昂 化 号 】、２、３、４、５、６、７。
合 物 的方法 ［８］。将菌 种在 无菌条 件 下接 种到 ２０ｍＬ
３．１ 结 果
大面积 农 作 物种 植 区 ，利 用 松 花 江 水 进 行 灌 溉 ，
３．１．１ 筛选 出 ７株降解能力强的菌株对苯酚都有 而含酚废水直接排入江中则将对农作物造成毒害 一 定 的点适应 性 ，且对苯 酚有很强的降解能力 ， 作用 ，同时人们适用后有毒物质 在人体 内富集 ，
达 ２５％，血酚浓度为 ０．７４ｍｍｏｌ／Ｌ，１０分钟死亡。 将浓度 为 ｌ０～，１０～，１０～，１０一，ｌ０一 的土样
酚类会对人类的身心健康造成危害，毒害其他生 溶液接种到富集培养基上 ，培养 ４８ｈ后观察。
物 ，破坏了生态系统 的稳定性 ，故我国及其他国
（２）选 择 培 养基［ ］：ＫＮｏ３４．０ｇ，ＮａＣ１ ５．０ｇ，
ｓｏｒｂｅｎｔｓ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ａｎｄ ８Ｏｌ￣ Ｖｅ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｔｏｗａｎｔｓ ｐｈｅｎｏｌ ａｎｄｉｔｓ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ ［Ｊ］．ＲＰ￣ｌｃｔｉｖｅ ａｎｄ ＦｕｎｃｔｉｏｎａｌＰｏｌｙｍｅｒｓ，２００１，４６ （３）：
２５９—２７１
高 浓度 含 酚污 水 的研 究 仍 有 深 度 可挖 ，因此 必 须 ［８］任源 ，吴超 飞，等 ．苯胺分离菌 的驯化筛选研究 ［Ｊ］．环 境
及不 同苯酚浓度下的生长和苯酚降解情况的考察 ，
高效苯酚降解菌的分离和鉴定
关键词 ： 酚 ； 苯 生物 降 解 ； 单 胞 菌 属 假
中 图分 类 号 ： ７ ３ Ｘ ０ 文献标识码： Ａ
摘
要 ： 了 寻 找 能 高效 降 解 苯 酚 的 微生 物 ， 包 头 市 污 水 处 理 厂 处 理 车 间 取 活性 污 泥 ， 过 逐 渐 增 加 苯 酚 的 浓 度 为 从 通
驯ｌ 化菌种 ， 然后筛选 出一株高效降解苯酚的细菌 ． 生理生化 特征 测定 及外观 鉴定 ， 经 将其 初步鉴定 为假 单胞菌属 ．
再 经 过对 比 实验 测 各种 因素 （ 源 、 度 、 Ｈ 通 气 ） 该 菌 生 长 及 降 解 苯 酚 能 力 的 影 响 ， 知 该 菌 能 以 苯 酚 作 为 唯 碳 温 ｐ、 对 得
Ｔｈｏ ｇ ｎ ｒａ ｉｇ ｔｅ ｐ ｅ ｏ ｏ ｃ ｎ ａ ｏ ｆｔｅｃ ｌｕｅ ｍｅ ｉｍ ｏｄｏ ｓ ｃ ｔ ｈ ｔａｎｓｅ ｙ ｓｅ ａｓｒ ｉ ｓ ｓｌｔｄｗｈｃ ａｌｂｏ ｅ ｒ ｕ ｈ ｉｃｅ ｓｎ ｈ ｈ ｎ ｌｃ ｎ ｅ ｔ ｔ ｎ ｏ ｕｔｒ ｄｕ ｔ ｍｅ ｔ ａｅ ｔｅｓｒｉ ｔｐ ｂ ｔｐ， ｔａｎ Ｗａ ｉ ａｅ ｉｈ ｃ ｌ ｉｄ — ｒｉ ｈ ｉ ｏ
Ｄｅ ｅ ｅ ，０ ６ ｃ ｍｂ ｒ ２ ０
Ｖｏ ２５． ｌ Ｎｏ４
文 章 编 号 ：０４— ７ ２ ２０ ） ４ ０ ６ —０ １０ ９ ６ （ ０ ６ ０ — ３ ８ ３
高效苯酚降解 菌的分离和鉴定
季 祥 ， 蔡 禄
０４ １） １００ （ 蒙 古 科 技大 学 生 物 与 化 学 工 程 学 院 ， 蒙 古 包 头 内 内
ｄ ｇａ ａｉｎ ｃ ｐ ｂｌｙ ｗ ｔ ｎ ｕ ｈ ａｒ Ｓ ｕｔｅ ｓ ａｃ ｎ ｔ ｅｓ ａｎ ａ ｔ ｙ ｐａ ｌ ｉ ｏ ｔｎｔｒｌ ｎ ｔｅ ｐ ｔｃ ｏ ｆｔｅｅ ｖｒｎ ｎ ． ｅ ｄ ｔ ａ ａ ｉｔ ｈ ｅ ｏ ｇ ｉ，Ｏ ｆ＿ｈ ｒｒ ｅ ｒ ｈ ｏ ｔｉ ｃ ｏｎｍａ ｌｙ ａｌ ｍｐ ｒａ ｅ ｉ ｈ ｒ ｅ ｔ ｎ ｏ ｎ ｉ ｍｅ ｔ ｒ ｏ ｉ ｉ ｒ ｅ ｈ ｒ ｉ ｏ ｏ ｉ ｈ ｏ
降解苯酚优势菌的筛选分离和培养条件研究
降解菌大规模培养与实际应用提供理来自依据 。 １ 主 要 材 料和 仪 器
菌种采 自新鲜 的膨润土。
综合 Ｐ Ａ培养基 （ 于降解 优 势菌 扩 大培 养和 菌种 分 Ｄ 用 离 ）马铃薯提取 液 １Ｌ 葡 萄糖 ２ ， Ｉ Ｐ ４ ． ： ， ０ｇＫ－ ０ ３ｇ， Ｉ ０ ２
维普资讯
２０ Ｏ７年第 ３ ３卷第 ６ 期
Ｊｎ Ｏ ７ ｕ ｅ２ ０
工 业安 全 与 环 保 Ｉ ｕｔａＳｆｙａｄＥ ｒＩｌ１】 ｒｅｔｎ ｎ ｓｉ ａ ｔ ｎ ｎ ０ｒ ｒａ Ｐｏ ｃｉ ｄ ｒｌ ｅ ｒｒ ｔ ｅ ｔ ｏ
・ １ ・ ３
７Ｉ ． Ｎ Ｌ ａ ． ｇ 琼脂 ２ ． 。 Ｉ ００ １ ｇ， Ｉ， １ ， － ２ ５ Ｃ０ ００ｇ
・
苯酚的无机盐固体培养基 ：ＮＬ ０ １ｇＩ－Ｐ ４ ． ， －Ｎ ３ ０ ，：２０ １ ｇ ， １ ，Ｉ ０ ５ Ｉ
Ｋ Ｈ Ｏ ０ １ ， Ｓ ４７ ０ ０ １ ２ Ｐ ４ ． ５ ｇ Ｍｇ ０ 。 Ｈ２ ． ２ ｇ，Ｎ Ｃ ０． ２ ｇ Ｃ Ｃ２ １ ， ａ １ １ ， ａ １０． １ ｇ
纯培养。
人类健康和动植物的生长均会造成不利影 响。处理含酚废水
的方法很多， 中生物法最普遍… 还可作为其他净化 工艺 其 １，
的补充 ， 可避免二次污染 。
近年来 ， 苯酚降解 菌的研究受到关 注 ，已发现和分离 了 多种降酚菌株［３。然而这 些研 究的注意力往往集 中于 菌种 ２］ ， 降解苯酚条件研究上 ， 对培养过程中优势菌的生长情况涉及 较少。本文 以菌株 ｝０ 为研究对 象，在不 同的培养条件下 ， Ｕ１
苯酚降解菌NTZH-1的分离筛选及其降解特性研究
酚降解菌的降解特性进行了研究 ， 意在找到一些
对 酚处理效果 好 的优势菌株 ， 为今后 的进一 步研
３０ｍｇＬ的驯化 培养液 中 ， 温通气 富集培 养 ， ０ ／ 室 定 时 取 样 测 定 苯 酚 质量 浓 度 ， 苯 酚完 全 降解 至 后 ， 加 入新 的以苯酚 为唯一碳 源 的驯化培 养液 再
文 章 编 号 ： １０ —４ ３ （０ ７０ —０ ７ —０ ０ ４ ６ ９２ ０ ）３ １９ ４
苯 酚 降解 菌 Ｎ Ｚ ． Ｔ Ｈ １的分 离筛 选及 其 降解 特 性研 究
张月澜 ， 刘桂 萍 ， 刘 长风
（ 阳化工学院 环境 与生物工程学院 ， 宁 沈 阳 １ ０４ ） 沈 辽 １ １２
ＮＨｄ Ｎｏ３ ． ／ ：１ ０ ｇ Ｌ； Ｃａ ２ ． ／ Ｃ１：０ １ｇ Ｌ．
酵母 菌【 ］如麦 芽糖 假 丝酵 母 （ ａ ｄｄ ａ— ， Ｌ ｎ ｉａｒ ｌ ｅ
ｔ ａ 、 形 酵母 属 （ ｉ ｒｓｏ ｕ ｓ 等 ． 用 培 ｏ ）瓶 ｓ Ｐ ｔ ｏｐ ｒ ｍ ｙ ｐ） 利
养优势菌群的微生物效率 高 、 运行 成本 低 、 无二 次污染 等优 点 而得 到越 来越广泛 的应用 ．
本试 验通 过对沈 阳某农 药厂土 壤 的处理 ， 对 苯分 降解菌进 行菌 种的分离 和筛选 ， 并对 这株苯
分离培养基 ： 牛肉膏蛋白胨固体培养基 ． 保存 培养基 ： 肉膏蛋 白胨 固体 培养基 加苯 牛 酚溶 液 ， 酚质量 浓度 为 ３ ０ｍｇ Ｌ 苯 ０ ／ ．
１ 试 验原 材料 及 方 法
沈 阳某农 药 厂土壤
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Screening of phenol biodegrading bacteria
实验目的 实验基本原理
实验用品 方法步骤 实验结果及分析
注意事项
实验目的
1·掌握微生物分离纯 化的基本操作 2·掌握用选择性培养 基从土壤中分离苯酚 生物降解菌的原理和 方法
基本原理
苯酚是芳香烃化合物。苯酚是常用的消毒剂，能 意志柠檬酸循环。但在部分细菌中存在芳香烃的降解 质粒，将其降解为三羧酸循环的原料或中间产物。
在苯酚浓度梯度培养基平板高含药区上分离出的 菌落，对苯酚具有较好的耐受性，可能具有分解酚菌 的能力；然后将其在以苯酚为唯一碳源的培养基里进 行摇床培养，淘汰掉不能利用苯酚的菌株，可筛选到 苯酚降解菌；再用不同浓度的苯酚药物培养基分离，
可筛选出耐受能力好，降解程度高的苯酚降解菌。
实验用品
材料 实验土样采自校园肥沃土
4
5
注意事项
各种培养基的配制 应严格按配方的要
A B
涂布梯度平板 的菌悬液只作 适度稀释，菌
C
涂布平板的菌
悬液不要过多
或过少，0.2mL 为宜
求完成，尤其是苯 酚的称量和pH
浓度不必过低 梯度平板上挑
单碳源实验的
E
D
取菌落时，要 挑取单菌落
培养基和培养 条件一定要严 格把握
感谢您的观看
THANK YOU FOR YOUR WATCHING
以苯酚为单碳源的菌株的筛选
1
单碳源培养 基配制：按
2
苯酚的浓度 设定：苯酚 的浓度分别 按0.2g/L， 0.4g/L， 0.6g/L， 0.8g/L， 1.0g/L，
3
平行样：
4
5 接种：将 初选的苯 酚耐受性 菌株，分 别用少许 无菌水稀
6 培养：八 层纱布盖 口，回旋 式摇床， 30℃，100 转/min培
7 检测：用
8
筛选：淘汰 掉不能利用
灭菌：
每菌株、
每药物浓 度各配置
培养基D的
配方，用 250mL三角 瓶，每瓶装 50mL，制成 以苯酚为单 碳源的液体 摇瓶
121℃，
20min
分光光度
计测定OD 值，以空
苯酚为碳源
的菌株。菌 体浓度高的 为生长较好 者，即能以 苯酚为单碳 源的菌株， 可进行下一 步实验
器材
仪器
试管、250ml三角烧瓶、1 mL吸管、吸耳球、无菌 涂棒、量筒、天平、灭菌锅、培养箱、酒精灯、 接种环、棉花、棉线、牛皮纸
试剂
牛肉膏 蛋白胨 苯酚 K2HPO4 KH2PO4 MgSO4 FeSO4 琼脂
培养基的配置
A
牛肉膏蛋白胨培养基：牛肉膏3g，蛋白胨10g， NaCl 5g，琼脂15-20g , 水1000 mL，PH 7.0-7.5 药物培养基：将一定量苯酚加入到牛肉膏蛋白胨 培养基中制成 苯酚浓度梯度平板：在无菌培养皿中，先倒入710 mL 含0.1g/L苯酚的牛肉膏蛋白胨培养基，将培 养皿一侧置于木条上，使培养皿中培养基倾斜成斜 面，且刚好完全盖住培养皿底部；待培养基凝固后， 将培养皿放平，再倒入7~10 mL牛肉膏蛋白胨培养基 以苯酚为单碳源的液体培养基：NH4Cl 1.0g ， K2HPO4 0.6g，KH2PO4 0.4g，MgSO4 0.06g,，FeSO4 3mg，苯酚按设计量添加，水1000 mL ，PH 7.0-7.5
B
C
D
苯酚耐受菌株的初选
平板涂布：用1mL移液管分别从 浓度梯度培养基平板制备： 样品菌悬液制备：将采集的 各菌悬液试管中取菌悬液0.2mL 按培养基C的方法制成苯酚 土样溶解于无菌水中，摇匀， 于苯酚梯度平板上，用涂棒涂 作适度稀释，备用 浓度梯度平板 布均匀
1
2
3
培养：恒温 培养箱30℃ 培养1-2天
4
5
6
挑取菌落：由于在培养基平板中，药物浓度呈由 培养、保藏：将接种 低到高的梯度方式分布，平板上长成的菌落也呈 现由密到稀的梯度分布，而高浓度药物区生长的 后的斜面于恒温培养 少数菌落一般具有较强的抗药性。挑取高含药区 箱中30℃培养1-2天， 编号，4℃冰箱保藏 的单个菌落于牛肉膏蛋白胨培养基斜面上划线
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
0.1
高药区单 菌落数
实验结果
2. 以苯酚为单碳源的菌株的筛选结果（生长情况OD值）
药物浓度（g/ L ） 1
0.2
0.4
0.6
0.8
1.0
1.2
2
菌 种 编 号 3 4 5
实验结果
3. 高耐受性苯酚降解菌的筛选结果（菌落数）
药品浓度 （g/L）
1 2 菌 株 号 3 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2
培养： 恒温 培养 箱 30℃ 培养 1-2 天
筛选：观 察、记录 并挑选高 浓度药物 培养基平 板上生长 旺盛的菌 落，此即 高耐受性 苯酚降解 菌，接种 于牛肉膏 蛋白胨培 养基斜面
保藏： 编号， 4℃冰箱 保藏Fra bibliotek实验结果
1．苯酚耐受菌株的初选结果
平板编号 药物浓度 （g/L） 1 2 3 4 5 6 7 8
灭菌、 倒平板： 121℃， 灭菌 20min， 倒平板， 各菌株、 各浓度 配置两 个
菌悬液制 备：将初 选的培养 液作适度 稀释，或 将保藏的 经单碳源 实验的菌 株用无菌 水制成菌 悬液
涂平板：用 1mL移液管分 别从各菌悬液 试管中取菌悬 液0.2mL涂布 于药物培养基 平板上，每一 试管菌悬液涂 布一组不同浓 度的苯酚药物 培养基平板， 每一浓度设平 板两个，六组 共计12个
平行样两
瓶
白培养基
作对照， 检测各摇
释，接种
于对应摇 瓶中
养 2天
1.2g/L六个
浓度梯度配 制
瓶菌体浓
度
高耐受性苯酚降解菌的筛选
药物培养 基平板的 配制：按 不同浓度 （0.2 g/L ， 0.4 g/L ， 0.6 g/L ， 0.8 g/L ， 1.0 g/L ， 1.2 g/L） 苯酚配置 药物培养 基平板