人血管性血友病因子 瑞斯托霉素辅因子 (VWF)
儿童血友病罕见病诊疗规范
儿童血友病一、诊疗规范（一）概述血友病（hemophilia）是一种X染色体连锁的隐性遗传性出血性疾病。
可分为血友病A（h emophili A，HA）和血友病B（hemophilia B，HB）两种。
前者为凝血因子Ⅷ（FⅧ）缺乏，后者为凝血因子Ⅸ（FⅨ）缺乏，均由相应的凝血因子基因突变引起。
（二）病因和流行病学编码FⅧ和FⅨ的基因均位于X染色体，女性常是携带者（46；XX），而男性是患者（46；XY），女性患者极为罕见（通常是由2个FⅧ或者FⅨ基因同时发生缺陷，或者是X染色体非随机失活所致）。
在FⅧ和FⅨ基因中点突变、缺失、插入和重排/倒位均可见，点突变是最常见的基因缺陷，约在90％的患者中存在。
HA中45％的重型患者为重现性的基因倒位突变；而HB患者中无重现性突变。
血友病的发病率没有种族或地区差异。
在男性人群中，血友病A的发病率约为1/5000，血友病B的发病率约为1/25000。
所有血友病患者中，血友病A占80％～85％，血友病B占15％～20％。
女性血友病患者极其罕见。
由于经济等各方面的原因，血友病的患病率在不同国家甚至同一国家的不同时期都存在很大的差异。
我国1986—1989年期间在全国24个省的37个地区进行的调查结果显示，我国血友病的患病率为2.73/100000人口。
（三）临床表现HA和HB的临床表现相似。
主要表现为关节、肌肉和深部组织出血，也可表现为胃肠道、中枢神经系统等内部脏器出血等。
若反复出血，不及时治疗可导致关节畸形和（或）假肿瘤形成，严重者可危及生命。
外伤或手术后延迟性出血是本病的特点。
根据患者凝血因子活性水平，可将血友病分成轻型、中间型和重型。
血友病A和血友病B的临床分型临床分型活性水平（IU/dl）出血症状轻型＞5～40大手术或外伤可致严重出血，罕见自发性出血中间型1～5小手术/外伤后可有严重出血，偶有自发性出血重型＜1肌肉或关节自发性出血（四）辅助检查1721.筛选试验包括进行血小板计数排除血小板异常导致的出血；凝血检查中仅活化部分凝血活酶时间（A PTT）延长，凝血酶原时间（PT）、凝血酶时间（TT）、纤维蛋白原（Fbg）均正常。
【国家自然科学基金】_血友病_基金支持热词逐年推荐_【万方软件创新助手】_20140803
科研热词 推荐指数 血管性血友病因子 3 间质细胞 2 钙化 2 血管内皮细胞 2 血友病a 2 真核表达 2 基因治疗 2 高血压 1 骨钙素 1 颗粒物 1 间充质干细胞 1 重组蛋白 1 酶活性 1 逆转录病毒 1 超微结构 1 表型 1 血管性血友病因子裂解酶 1 血管性血友病因子裂解蛋白酶 1 血管内皮损伤 1 血瘀证 1 血液凝固 1 血浆 1 蛋白酶类adamts13 1 自杀基因 1 腺相关病毒 1 腺病毒 1 脐静脉内皮细胞 1 脂肪组织 1 脂肪干细胞 1 联合培养 1 羊水 1 细胞分化 1 细胞免疫毒性 1 纤维蛋白原 1 糖尿病 1 空气污染 1 抗血管生成 1 抑癌基因 1 慢性肾脏病 1 心血管系统 1 干细胞 1 大鼠 1 基因药物 1 基因剔除 1 四倍体囊胚补偿技术 1 单核细胞趋化蛋白-1 1 动脉粥样硬化 1 分化 1 凝血酶 1 凝血因子ⅷ 1 凋亡 1 内皮细胞 1
科研热词 血管性血友病因子 血小板膜糖蛋白 血友病a 睡眠诱导低氧 基因治疗 内皮细胞 产前诊断 gpibα 2型糖尿病 黏附概率 骨髓细胞 骨髓 饮酒 阻塞性肺气肿 逆转录病毒 诱导 解离力 血管性血友病因子裂解酶 血管性血友病因子(vwf) 血管内皮细胞损伤 血管内皮细胞(vec) 血管假性血友病因子 血瘀证 血栓形成 血小板聚集 血友病b 蛇毒金属蛋白酶 肾上腺素(adr) 肺气肿 罗格列酮 细胞模型 纤维蛋白原 甲型血友病 瑞斯托霉素 炎性因子 溶酶体相关细胞器 残余胶原结合实验 拉伸分子动力学模拟 抗凝血酶ⅲ 慢病毒属 慢性阻塞性肺疾病 慢性肾脏病 微吸管系统 干细胞 小鼠 基因诊断 基因倒位 因子ⅷ 分子间相互作用 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39 40 41 42 43 44 45 46 47 48 49 50 51 52
冷沉淀在临床生化分析中的重要作用
纤维蛋白原含量测定方法
免疫比浊法
利用特异性抗体与纤维蛋白原结 合形成复合物，通过检测复合物 的浊度来测定纤维蛋白原含量。
凝血酶法
在受检血浆中加入一定量的凝血 酶，使纤维蛋白原转变为纤维蛋 白，通过检测凝固时间来推算纤 维蛋白原含量。
血管性血友病因子活性评估
瑞斯托霉素辅因子活性检测
利用瑞斯托霉素诱导血小板聚集时，需要血管性血友病因子（vWF）作为辅因子的原理，通过检测血小板聚集程 度来评估vWF活性。
凝血因子消耗过多
在大量输血、手术、创伤等情况下，凝血因子可能被大量消耗，此时补充冷沉淀可迅速 提高血液中凝血因子水平，防止出血。
肝功能衰竭导致的凝血障碍
肝脏是合成凝血因子的主要器官，肝功能衰竭时凝血因子合成减少，冷沉淀可提供必要 的凝血因子以改善凝血功能。
纤维蛋白原缺乏症替代治疗
先天性纤维蛋白原缺乏症
尊重献血者和受血者权益，保护其隐 私和个人信息安全。
加强人员培训和管理
提高工作人员的专业素质和安全意识 ，确保工作质量和血液安全。
总结与展望：提高冷沉淀利
06
用效率
当前存在问题和挑战
01 冷沉淀制备技术不成熟
目前冷沉淀制备技术尚不成熟，制备过程中存在 损失大、纯度低等问题，导致冷沉淀利用效率低 下。
注意事项
在制备、储存和使用过程中，应严格遵守无菌操作原则，防止细菌污染。同时，对于不同批次 的冷沉淀应进行交叉配合试验，以避免输血反应的发生。
冷沉淀在临床生化分析中应
02
用概述
凝血因子补充治疗适应症
先天性或获得性凝血因子缺乏症
如血友病、血管性血友病等，冷沉淀可作为凝血因子浓缩物，提供必要的凝血因子以纠 正凝血障碍。
医疗机构临床检验项目目录
包括外观和镜检 包括清洁度、细胞、滴虫、霉菌 检查
包括酸碱度、基础胃酸分泌量、 最大胃酸分泌量测定 包括一般性状和镜检 包括一般性状检查、镜检 不包括细菌涂片 包括嗜酸、肥大细胞、肿瘤细胞 等
包括粒－单系、红细胞系
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医疗机构临床检验项目目录
组织化学染色
中性粒细胞碱性磷酸酶测定 白血病残留病灶检测 6.溶血检查 阵发性睡眠性血红蛋白尿症异常细胞检查 红细胞包涵体检查 血浆游离血红蛋白测定 血清结合珠蛋白测定(HP) 红细胞自身溶血过筛试验 红细胞自身溶血及纠正试验 红细胞渗透脆性试验 红细胞孵育渗透脆性试验 热溶血试验 冷溶血试验 蔗糖溶血试验 血清酸化溶血试验(Ham) 酸化甘油溶血试验 微量补体溶血敏感试验 蛇毒因子溶血试验 高铁血红蛋白还原试验(MHB—RT) 葡萄糖6－磷酸脱氢酶检测 变性珠蛋白小体检测(Heinz小体) 红细胞谷胱甘肽(GSH)含量及其稳定性检测 谷胱甘肽过氧化酶测定 红细胞丙酮酸激酶测定(PK) 还原型血红蛋白溶解度测定 热盐水试验 红细胞滚动试验 红细胞镰变试验 血红蛋白电泳 抗碱血红蛋白测定(HbF) 胎儿血红蛋白(HbF)酸洗脱试验 血红蛋白H包涵体检测
不稳定血红蛋白测定
血红蛋白C试验 血红蛋白S溶解度试验 抗人球蛋白试验 红细胞电泳测定 红细胞膜蛋白电泳测定 肽链裂解试验 红细胞游离原卟啉测定
包括：过氧化物酶染色、苏丹黑 染色、酸性磷酸酶染色、抗酒石 酸酸性磷酸酶染色、糖原染色、 铁染色、脱氧核糖核酸染色、核 糖核酸染色、特异性酯酶染色、 非特异酯酶染色、酯酶双染 色，脂类染色等
备注
包括白细胞分类和白细胞、红细 胞、血小板形态分析等
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血管性血友病怎样治疗？
血管性血友病怎样治疗？*导读：本文向您详细介绍血管性血友病的治疗方法，治疗血管性血友病常用的西医疗法和中医疗法。
血管性血友病应该吃什么药。
*血管性血友病怎么治疗？*一、西医*1、治疗1.禁用阿司匹林、保泰松、消炎痛、潘生丁及低分子右旋醣酐、前列腺素E1等可影响止血凝血机能的药物，以防加重出血。
2.口服避孕药，如复方炔诺酮等，可使月经过多及持续时间延长的症状显著改善。
3.纤溶抑制物如6-氨基己酸(EACA)每日口服4～5g，每6小时一次，可减轻粘膜出血，对月经过多也有效。
本病中局部纤维蛋白溶解是许多组织尤其是粘膜出血的原因之一。
4.输新鲜血补充缺乏的因子Ⅷ，为有效的止血措施。
输血后Ⅷ∶C在12～24小时内逐渐升高，使出血倾向得到控制，但血小板瑞斯托霉素聚集作用及ⅧR∶Ag在输血完毕后即迅速降低，所以输血对三者的效应不相一致。
严重病例应补充冷沉淀制剂，剂量为30～50u/kg，每24～48小时注射一次，有良好的疗效。
因子Ⅷ浓缩制剂中缺少与VW因子活性有关的高分子聚合物，所以不能纠正出血缺陷，故不作为首选药物。
5.DDAVP(1-去氨基-8-D精氨酸加压素)是人工合成的抗利尿激素的同类物，经静脉注射一定剂量后，血浆因子Ⅷ活性可明显增高，用于治疗轻症或中、重度病例，但对严重病例无效。
慢速静脉注射给药剂量为0.3～0.5μg/kg，溶于20～30ml生理盐水，因可激活纤溶系统，需与止血环酸，EACA合用。
可使因子Ⅷ(Ⅷ∶C及ⅧR∶Ag)的水平提高2～3倍，注射后30～60分钟达到高峰，可以制止局部鼻出血及拔牙等小手术出血。
为维持因子Ⅷ浓度最初2～4天内每8～12小时1次，经鼻腔内滴入的剂量为0.25ml(每ml含1300μg)，每日2次。
副作用有暂时性面部潮红及水滞留。
6.手术本病原则上应避免手术，必需手术时应在术前及术后输注新鲜血，血浆或因子Ⅷ浓缩物，以补充缺乏的因子。
*二、中医*1、中医疗法白茅根 60克仙鹤草 20克生地 30克花生衣6克藕节10克红枣3枚煮水后平时就可以当茶饮，这6味药经过现代药学研究对对出血性疾病有很好的作用。
血小板粘附
SZ 1 SZ 2 SZ 21
SZ 22
SZ 51
GPIX
中国科学1986, Blood 1987
GPIb
中国科学1986, Blood 1987
GPIIIa Thromb. Hemostas. 1987
中华内科杂志 1987
正常止血机制
正常生理性止血是由血管、血小板及血浆凝血因子 等共同参与的一个复杂、连续的过程 。 初期止血
血管内皮细胞损伤，内皮下组织成分暴露（主要为 胶原），血小板发生黏附、聚集和释放反应，形成血小 板血栓。 二期止血
是凝血、抗凝和纤溶诸系统相互协调、有序完成的 过程，血浆中一系列凝血因子经级联酶促反应依次被活 化,最终形成纤维蛋白凝块。
现状：参与黏附的相关分子的结构、信号传导以及这些分子 缺陷所引 起的临床疾病和症状；
进展：vWF-A1/GPIb, vWF-A2/ADAMTS13, vWF-A3-胶原
抗血栓药物：抗GPIb/IX/V－vWF－胶原轴； 抗GPⅥ/α2β1－胶原轴制剂；
GPIb-IX-V
platelet
Adhension: platelet-VWF-subendothelial Axis
Immunoinhibitory probes using GPIb MoAb AN 51 suggest that GPIb on the platelet membrance is the vWF receptor.
PFA-100 REV. 2.00 00370
14/07/97
ID#: Test Type: Collagen/EPI SAMPLE A:
S/N: 14:01 23456.17 110 SEC
海德综合征研究进展
海德综合征研究进展肖园园;何胜虎【摘要】海德综合征是主动脉瓣狭窄、获得性凝血病和肠血管发育不良出血所致贫血的三联征.退行性主动脉瓣狭窄是老年患者中最常见的瓣膜性心脏病, 其发病率随着年龄的增长而增加.随着中国步入老龄化社会, 诊断为主动脉瓣狭窄的患者逐年增加, 因此与其相关的海德综合征患者也会相应增加.血管性血友病因子高分子量多聚体缺乏, 是海德综合征患者血管发育不良相关性胃肠道出血的重要机制.由于临床医生对该病缺少足够认识, 很容易发生漏诊, 延误患者治疗时机.现就海德综合征的发病机制、诊断及治疗进行综述.%Heyde syndrome (HS) describes the sympotoms of aortic stenosis, acquired coagulopathy and anemia due to bleeding from intestinal angiodysplasia.Since aortic stenosis is a common valvular heart disease among the old, there is no doubt that with the aging of the population and the increase number of patients diagonised with AS, the diagnosis of HS will increase accordingly. The deficiency of high molecular weight multimer of von Willebrand factor is a key mechanism of gastrointestinal bleeding associated with angiodysplasia in patients with HS.However, it is easily misdiagnosed due to the absence of relevant clinical consciousness of the disease among physicians, thus resulted in treatment delaying.This article aimed at making a review concerning the pathogenesis, diagnosis and treatment of HS.【期刊名称】《心血管病学进展》【年(卷),期】2019(040)002【总页数】4页(P195-198)【关键词】海德综合征;获得性凝血病;肠血管发育不良;主动脉瓣狭窄;胃肠道出血【作者】肖园园;何胜虎【作者单位】中南大学湘雅医学院,湖南长沙 410000;苏北人民医院心内科,江苏扬州 225000;苏北人民医院心内科,江苏扬州 225000【正文语种】中文退行性主动脉瓣狭窄(AS)是老年人中常见的心脏瓣膜病，并与胃肠道出血存在一定相关性，这种现象称为海德综合征(HS)，由Heyde [1]于1958年首先提出。
内科学_各论_疾病：小儿血管性血友病_课件模板
内科学疾病部分：小儿血管性血友病>>>
相关疾病： 血小板型假性血管性血友病、血友病乙、 获得性血友病、血友病甲、胆道出血。
谢谢！
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治疗：
浓缩剂仅能提高因子Ⅷ的水平，不能纠正 出血时间，一般不作为首选制剂，每天 15～20U/kg。本疗法适用于对DDAVP无反 应者、2B型及3型vWD患者。
4.DDAVP（1-脱氨-8-精氨酸加压素） DDAVP可增加vWF从内皮细胞释放入血的量， 但不能纠正多聚物结构的异常，只能缩
2.获得性vWD 小
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诊断：
儿少见，多继发于淋巴系统增生性疾病、 获得性单株γ球蛋白及其他免疫失调性疾 病，无出血家族史。患者血中产生了中和 vWF活性的抗体并有出血倾向，vWF的 Ristocetin辅因子活性（vWF∶RcoF）、 vWF∶Ag及因子Ⅶ活性降低，出血时间延 长。常有原发病的症状。
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病因：
变、无义突变，引起vWF蛋白水平下降。 2A型是vWF分子上28外显子发生错义突变。 2B型因vWF分子上与GPIb结合的位点发生 错义突变，vWF大多聚体与之结合增强， 在血浆中易被清除。3型为常染色体隐性 遗传，患者异常的vWF基因来自于父母双 方，突变方式为无义突变、基因缺失或 mRNA
简介： vWD，伴有因子Ⅶ促凝血活性（Ⅷ∶C）降 低。临床上有程度不一的皮肤黏膜出血倾 向，血小板黏附性降低，出血时间延长。
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病因：
小儿血管性血友病原因_由什么原因引起 小儿血管性血友病
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人血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(VWF) 酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书
产品编号：E0833h
自备物品
1、酶标仪（建议仪器使用前提前预热）
2、微量加液器及吸头，EP管
3、蒸馏水或去离子水，滤纸
标本的采集及保存
1、血清：全血标本请于室温放置2小时或4g离心20分钟，取上清即可
检测，或将上清置于-20保存，但应避免反复冻融。
2、血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于 1000
或-80
g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20保存，但应避免反复冻融。
4、样本处理：血清或血浆标本推荐稀释10倍，如：稀释10倍，取100uL血清或血浆加入
900uL样品稀释液。
标本使用0.1 M 的PBS稀释（PH=7.0-7.2）。
注：以上标本均应密封保存，4不应超过1个月，-80
溶解；试剂或样品配制时，均需充分混匀，混匀时尽量避免起泡。
实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。
1、加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。
空白孔加样品稀释液 100
，注意不要有气泡，加样时将样品加于酶标板底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37
（临用前配制），酶标板加上覆膜，37
/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。
4、每孔加检测溶液B工作液（临用前配制）100温育1小时。
5、弃去孔内液体，甩干，洗板5次，方法同步骤3。
6、每孔加底物溶液90避光显色（反应时间控制在15-30分钟，当
标准孔的前3-4孔有明显的梯度蓝色，后3-4孔梯度不明显时，即可终止）。
7、每孔加终止溶液50
'(。
注：
1、试剂准备：所有试剂在使用前应平衡至室温，使用后请立即按照说明书要求保存试剂。
实验操作中请使用一次性的吸头，避免交叉污染。
2、加样：加样或加试剂时，第一个孔与最后一个孔加样之间的时间间隔如果太大，将会导致不
同的“预温育”时间，从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。
一次加样时间（包括标准品及所有样品）最好控制在10分钟内。
推荐设置复孔进行实验。
3、温育：为防止样品蒸发，实验时将加上盖或覆膜的酶标板置于湿盒内，以避免液体蒸发；
洗板后应尽快进行下步操作，任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态；同时应严格遵守给定的温育时间和温度。
4、洗涤：洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上拍干，勿将滤纸直接放入反应孔中
吸水，同时要消除板底残留的液体和手指印，避免影响最后的酶标仪读数。
5、试剂配制：Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理，以使管壁
或瓶盖的液体沉积到管底。
标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配制使用，并使用相应的稀释液配制，不能混淆。
请精确配制标准品及工作液，尽量不要微量配制（如吸取检测溶液A时，一次不要小于10
值扣除空白孔
值为横坐标（对数坐标），在对数坐标纸上绘出标准曲线。
推荐使用专业制作曲线软件进行分析，如 curve expert 1.3，根据样品
值计算出标准
曲线的回归方程式，将样品的
由于实验者的操作失误或试剂盒保存不当导致结果不佳，不属产品质量问题。
4、在储存及温育过程中避免将试剂暴露在强光中。
所有试剂瓶盖须盖紧以防止蒸发和微生物的
污染，因为蛋白水解酶的干扰将导致出现错误的结果。
5、试剂盒保存：请收到试剂盒后尽快将标准品、检测溶液A和检测溶液B保存于-20
，长期保存则置于-20
，避免潮湿。
6、浓洗涤液会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。
7、刚开启的酶联板孔中可能会有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。
8、有效期：6个月。
9、本操作说明适用于48T试剂盒，但48T试剂盒所有试剂减半。