反相高效液相色谱与质谱联用分析合成七肽的消旋产物
超高效液相色谱-质谱法(UPLC-MS)检测7种合成甜味剂的方法的建立
分析与检测甜味剂是能够赋予食品甜味的物质的总称，适量添加可使食品具有适口的感觉、良好的风味，又可保留新鲜的味道。
甜味剂按其来源分为人工甜味剂和合成甜味剂。
人工甜味剂主要是指一些具有甜味但不是糖类的化学物质，甜度一般比蔗糖高十倍至数百倍；其化学性质稳定，耐热、耐酸碱，不易出现分解失效现象，不具有任何营养价值[1]。
常见的人工甜味剂有糖精钠、甜蜜素、安赛蜜、阿斯巴甜、纽甜、阿力甜、三氯蔗糖与糖精等。
如果超量使用，则会危害人体健康，为此，国家对甜味剂的使用范围及用量进行了严格规定。
为确保合成甜味剂的合理使用，必须对添加种类及含量进行准确测定[2]。
本文通过实验建立了测定食品中7种甜味剂的超高效液相色谱-质谱法。
1 试验部分1.1 仪器与试剂Waters Xevo TQ-S液相色谱质谱联用仪；湖南赫西仪器装备离心机，甲醇（HPLC纯）；实验室自制超纯水；甲酸（色谱级），甲酸铵（分析纯），乙腈（HPLC纯）；安赛蜜、糖精钠、甜蜜素、阿斯巴甜、阿力甜、纽甜与三氯蔗糖（均≥98%）。
1.2 色谱条件色谱柱：C18柱（2.1 mm×100 mm，1.7 μm）；流动相：A为0.1%（体积分数）甲酸-5 mmol/L甲酸铵水溶液，B为乙腈；柱温：35 ℃；进样量：10 μL，流动相的洗脱程序见表1。
表1 流动相的洗脱程序时间/min流速（mL/min）A B00.25802080.2520808.10.258020120.2580201.3 质谱条件离子源：ESI；扫描方式：负离子扫描；检测方式：多反应监测扫描模式（MRM）,干燥气温度：500 ℃；气体流速：1 000 L/Hr。
表2 七种甜味剂质谱参数和保留时间化合物母离子定量离子锥孔压/V碰撞能/V保留时间/min安赛蜜161.93783023 1.16纽甜377.2200.31520 5.2阿斯 巴甜293.1199.82516 2.06糖精钠181.9541.73021 1.22阿力甜330.2312.61814 2.86甜蜜素17879.93024 1.32三氯 蔗糖3943593611 1.871.4 样品前处理取3 g左右样品于50 mL离心管中，加入20 mL甲醇-水（1∶1）超声提取30 min，加入2 mL 10.6%的亚铁氰化钾和22%的乙酸锌涡旋1 min混匀后，于10 000 r/min速率下离心20 min，上清液转移至100 mL容量瓶中，重复提取一次，合并上清液，用甲醇-水（1∶1）定容至刻度线，过0.22 μm有机滤膜，供液相色谱-质谱仪器上机检测。
液相色谱／质谱联用技术
液相色谱／质谱联用技术李立军色谱是快速灵敏分离有机物的有效手段，各种检测器中，除了应用最广泛的 FID（GC）和UV（LC）外，质谱（MS）尽管价格较昂贵，但是其选择性、灵敏度、分子量及结构信息等优势，已被公认为高级的通用型检测器，把它与各种分离手段联用，将定性、定量结果有机地结合在一起，一直是人们所研究的目标。
GC／MS在我国已有 20多年的应用历史，随着台式小型仪器迅速增长，在色谱研究中已经成为重要的手段，气相色谱质谱技术成熟运用至今，人们越来越不满足仅仅分析那些具有挥发性和低分子量的化合物，面对日益增加的大分子量（特别是蛋白，多肽等）和不挥发化合物的分析任务，迫切需要用液相色谱／质谱联用解决实际间题。
与气相色谱相比，液相色谱的分离能力有着不可比拟的优势，液相色谱／质谱联用技术为人们认识和改造自然提供了强有力的工具。
HPLC可以直接分离难挥发、大分子、强极性及热稳定性差的化合物，LC ／MS联机曾长期为分析界所期待，由于LC流动相与MS传统电离源的高真空难以相容，还要在温和的条件下使样品带上电荷而样品本身不分解，大量的样品不得不采取脱机方式 MS 鉴定，或制成衍生物用 GC／MS分析。
经过努力相继出现了多种液相色谱／质谱联用接口，实现了液相色谱／质谱的联用。
特别是大气压电离质谱（APIMS）的实现为 LC／MS的兼容创造了机会，商品化的小型 LC／MS作为成熟的常规分析仪器在九十年代已经在生物医药实验室发挥着重要的作用。
一．液相色谱／质谱联用适用范围液相色谱／质谱联用的基本流程为：混合的样品经高效液相色谱柱分离后成为多个单一组分，依次通过液相色谱／质谱接口进入质谱仪的离子源，离子化后的样品经过质量分析器分析后由检测系统记录，后经数据系统采集处理，得到带有结构信息的质谱图。
图1 液相色谱／质谱联用的基本流程首先看看气相色谱／质谱联用的特点：·要求样品气化后进入质谱仪·用电子轰击方式（EI）得到的谱图，可与标准谱库对比·用毛细管色谱柱分离化合物，分高效率高·操作条件稳定、使用方法成熟·适宜分析小分子、易挥发、热稳定的化合物液相色谱／质谱联用主要可解决如下几方面的问题：①不挥发性化合物分析测定；②极性化合物的分析测定；③热不稳定化合物的分析测定；④大分子量化合物（包括蛋白、多肽、多糖、多聚物等）的分析测定；附图清楚地表明了各种接口技术的适用范围。
液相色谱质谱联用分离鉴定小肽混合物
收稿日期：!""!#$!#$"作者简介：曹书霞，女，$%&’年生，硕士，讲师，从事有机分析及化学生物学研究，()*：（"+,$）,,&,"-"，.#/01*：234!5567)867297液相色谱／质谱联用分离鉴定小肽混合物曹书霞$，廖新成$，陈晓岚$，赵玉芬$，!（$7郑州大学化学系化学生物重点实验室，河南郑州:-""-!；!7清华大学化学系生命有机磷化学与化学生物学教育部重点实验室，北京$"""’:）关键词：液相色谱／质谱法；丝组二肽；组组二肽中图分类号：;&-’文献标识码：<文章编号：$"""#’,$+（!""+）"&#"&!&#"$!实验部分仪器与试剂：德国=>6?)>.3@61>)+"""高效液相色谱#电喷雾#离子阱多级质谱仪（A B C D #.E F #G E ／G E ）；甲醇、乙腈为色谱纯，三氟乙酸（(H <）、十二烷基磺酸钠（E I E ）为分析纯。
色谱条件：色谱柱为G 12>J 3J >K;I E 柱（:L &//1L 8L M !-"//，-"/）；检测波长，!$"9/；流动相为乙腈#水（含"L "-N (H <，$//J *／CE I E ）溶液（体积比为+-O &-）；流速"L :/C ／/19。
质谱条件：.E F 离子源，正离子检测模式，喷雾电压为:"""P ，毛细管温度为+&-Q ，喷雾气（R !）压力为$,!L !-?B 0（!-S 31）；干燥气（R !）流速为,C ／/19。
反相高效液相色谱法检验饮料中人工合成色素
分析 检测反相高效液相色谱法检验饮料中人工合成色素 张琦惠 梁伟 刘庚 玉溪市食品药品检验所目的:对饮料中7种人工合成色素（柠檬黄、新红、日落黄、苋菜红、胭脂红、亮蓝、赤藓红）进行高效液相色谱法（HPLC）分析。
方法 用聚酰胺吸附法或液-液分配法提取，将样品制成水溶液，经Mono Tower C18（3μm×100mm）色谱柱分离后，以甲醇：乙醇铵溶液（0.02mol/L）进行梯度洗脱，流速为1.00ml/min,在检测波长为254nm条件下进行检测，根据保留时间定性和与峰面积比较进行定量。
结果：7种人工合成色素在1.00-20.00mg/L质量浓度范围内的线性关系较为良好（r>0.999），回收率为95%-101%，相对标准差（RSD）0.1%-0.4%。
结论：高效液相色谱法操作简便，结果准确可靠，重复性好，可广泛应用于饮料人工合成色素的检测。
食品着色剂分为两类：人工合成色素和天然色素，两者相比，因人工合成色素的着色效果更佳，且成本较低，而被广泛应用于食品生产中。
人工合成色素的主要原料包括有苯、甲苯、萘和苯胺等，经有机反应（磺化、硝化、卤化和偶氮化等）后制成色素，长期食用后会对人体健康造成严重的损害。
GB 2760-2011《食品添加剂使用卫生标准》中对食品添加剂的使用原则、允许使用的品种、使用范围和最大使用量或残留量进行了规定。
目前，我国允许使用的人工合成色素包括有柠檬黄、新红、日落黄、苋菜红、胭脂红、亮蓝、赤藓红和酸性红等。
目前，人工合成色素的检测方式主要有薄层色谱法、高效液相色谱法、超高效液相色谱法和毛细管电泳法等。
此次研究根据GB5009.35-2016《食品中合成色剂的测定》中的实验原理，利用高效液相色谱法对饮料中的人工合成色素（柠檬黄、新红、日落黄、苋菜红、胭脂红、亮蓝、赤藓红）进行检测，为相关检测单位提供一定的参考依据。
材料和方法仪器。
Agilent 1260 高效液相色谱仪，二极管阵列检测器。
反相离子对高效液相色谱法
反相离子对高效液相色谱法高效液相色谱法（HighPerformanceLiquidChromatography,HPLC）是一种常用的分析技术，可用来定量和定性分析物质中的药物和其他有机物质。
反相离子对高效液相色谱法是其常用技术，可有效检测和去除肽类抗原，尤其是细胞色素b。
反相离子对高效液相色谱法属于一种非常活性的技术，它主要用于分析物质中的有机成分，例如药物，环状化合物，肽类抗原等，通常使用氨基苯磺酸（AAS）和电离水作为非常有效的反相离子。
反相技术主要是利用溶剂的分散性和反相离子的溶解性来溶解物质，由于这种机制，物质可以被彻底清洗和去除，而反相技术有效地去除了有机抗原。
反相技术有很多优点，如用来分析肽类抗原等有机物质，具有很高的灵敏度，速度快，响应时间短，信号增益高等。
在肽类抗原的分析中，具有较多的样品，可以让抗原得以迅速准确地与固定的反相离子结合。
此外，反相技术的使用对延迟效应仍然有效，因此可以有效消除反应物和产物的残余。
在实际使用中，反相离子对高效液相色谱法还可以用于测定细胞色素b，目前用于这方面的研究正在取得重要进展。
研究表明，反相技术具有高灵敏度，可以用来精准检测细胞色素b，其灵敏度可达100ppt，可以有效消除反应物和产物的残余，有助于准确检测低浓度的细胞色素b。
此外，反相离子对高效液相色谱法还可以应用于精确分析复杂的有机溶液，因为溶解性可以较快地溶解复杂的有机物质，从而得到更精确的检测结果。
因此，反相离子对高效液相色谱法对于定量和定性分析物质中的药物和其他有机物质有着重要的作用，其主要特点是高灵敏度，快速，可以有效消除反应物和产物的残余，可以有效检测和去除肽类抗原，尤其是细胞色素b，也可用来分析复杂的有机溶液，可获得更精确的检测结果。
因此，反相离子对高效液相色谱法的应用将推动分析技术的发展和改进，从而为物质分析提供更有效的方法。
综上所述，反相离子对高效液相色谱法是一项先进而又高效的技术，它有助于准确定性和定量分析物质中的药物和其他有机物质，并有效立竿见影地去除有机抗原，例如细胞色素b，也可以用于分析复杂的有机溶液，可以获得更精确的检测结果，为进一步发展和改进分析技术提供了可能性，以实现更高的精确度。
高效液相色谱-_质谱联用技术在食品中的应用
高效液相色谱-质谱联用技术在食品中的应用杨 林，何海洋（临沂市疾病预防控制中心理化检验科，山东临沂 276000）摘 要：本文综述了高效液相色谱-质谱联用技术（High Performance Liquid Chromatography，HPLC-MS）在食品分析中的重要性以及其广泛应用的领域，详细介绍了HPLC-MS技术的原理及其在分析中的优势，并通过具体实例深入探讨了HPLC-MS在食品领域的多方面应用，包括对食品营养成分的鉴别、农兽药残留的检测、对潜在威胁如过敏原和生物胺的分析，以期HPLC-MS在食品分析领域有更广泛、深入的应用。
关键词：高效液相色谱-质谱联用；高效性；食品检测；定性；定量Application of High Performance Liquid ChromatographyMass Spectrometry in FoodYANG Lin, HE Haiyang(Linyi Center for Disease Control and Prevention, Linyi 276000, China) Abstract: In this paper, the importance of high performance liquid chromatography-mass spectrometry in food analysis and its wide application fields were reviewed. The principle of HPLC-MS technology and its advantages in analysis were introduced in detail. The application of HPLC-MS in food field was discussed in depth through specific examples, including the identification of food nutrients, the detection of pesticide and veterinary drug residues, and the analysis of potential threats such as allergens and biogenic amines. It is expected that HPLC-MS will have a wider and deeper application in the field of food analysis.Keywords: high performance liquid chromatography-mass spectrometry; high efficiency; food detection; qualitative; quantitative随着科技的不断进步和人们生活水平的提高，食物在日常饮食中的作用已逐渐超越了基本的生存需求。
β-酪啡肽-7功效学研究进展全解
（6）潘翠玲发现饲喂β-酪啡肽-7能够促进 仔猪免疫器官和组织的发育
一、材料与方法 1.饲养动物 将来源于日龄、体质量相近的12头三元杂交仔公 猪随机分为对照组和试验组，每天喂料4次，自由饮水， 以红外灯保温，室内温度25±2℃湿度81% -85%，试验 前及试验过程中疫病防治均按该场的常规方案进行试 验组的仔猪于21日龄断乳，与母猪隔离，饲养在保育 室，在饲喂早期断乳仔猪料的基础上，每头每天添喂 10umol/ Lβ -酪啡肽-7的溶液20 mL(分2次喂给)，连 续添喂10d，对照组的仔猪随母猪饲养在产仔室继续吃 母乳到28日龄时断乳，移入保育室饲养，饲喂与试验 组相同的仔猪料，2组均于32日龄捕杀。
β-酪啡肽-7功效学研究进展
营养与食品卫生 M150879 吴鹏
目的定义 （2） β -酪啡肽的发现 （3） β -酪啡肽的结构特征
二、 β -酪啡肽-7的制备（分离、纯化、鉴定） 三、 β -酪啡肽-7的主要生理功能及研究进展
四、展望
酪啡肽的定义
酪啡肽又称酪蛋白吗啡、酪蛋白阿片肽、外啡肽，是 酪蛋白在消化酶作用下释放的，能被机体直接吸收，具有 多种生物学功能的乳源生物活性肽之一。是重要的乳源阿 片肽。它具有行为调节及免疫调节作用，能抑制肠道运动， 促进胰岛素分泌，对产乳及内源性器官发育生长因子有协 同作用。 酪蛋白是乳中最重要的成分。乳源生物活性肽是酪蛋 白在消化酶作用下释放的，能被机体直接吸收，具有多种 生物学功能。其中酪啡肽是最重要的乳源生物活性肽之一。 β -酪啡肽-7(beta-asomor-phin-7p）是从牛乳β -酪蛋白 的酶解产物中分离出来的具有阿片活性的七肽物质，为 β -酪蛋白第60 -66氨基酸残基片段。
6.对神经系统的作用（促进神经母细胞瘤神经细胞的生长）
高效液相色谱 质谱联用技术的应用
高效液相色谱质谱联用技术的应用高效液相色谱(HPLC或LC)是以液体溶剂作为流动相的色谱技术，一般在室温下操作，可以直接分析不挥发性化合物、极性化合物和大分子化合物（包括蛋白、多肽、多糖、多聚物等)，分析范围广，而且不需衍生化步骤。
质谱是强有力的结构解析工具，能为结构定性提供较多的信息，是理想的色谱检测器，不仅特异，而且具有极高的检测灵敏度。
串联质谱（MS/MS）是将一个质量选择的操作接到另一个质量选择的后面，在单极质谱给出化合物相对分子量的信息后，对准分子离子进行多极裂解，进而获得丰富的化合物碎片信息，确认目标化合物，对目标化合物定量等。
［1］高效液相色谱一质谱(HPLC—MS)联用技术是近几年来发展起来的一项新的分离分析技术，将HPLC 对复杂样品的高分离能力，与MS具有高选择性、高灵敏度及能够提供相对分子质量与结构信息的优点结合起来，在药物分析、环境分析等许多领域得到了广泛的应用。
［2］本文着重讲述液相色谱质谱联用仪在药物分析、环境分析上的应用。
1液相色谱质谱联用在药学分析上的应用1.1LC/MS在药物代谢中的应用Lee等［3］总结了利用LC／MS鉴定药物代谢产物的方法，主要包括以下几个步骤：测定原形药物的质谱；选择准分子离子、加合离子和主要的碎片离子进行多级质谱分析；选择原形药物的主要中性丢失，测定生物样品的中性丢失谱，图谱中的离子即为原形药物和可能的代谢物的分子离子；选择主要的子离子测定生物样品的母离子谱，所得母离子即为各个代谢物；测定生物样品中所有可能代谢物的子离子谱，解谱得到代谢物的结构。
王宁生等［4］以LC／MS联用技术及标准品对照法，分离检测健康志愿者口服复方丹参滴丸后，血清中水溶性成分及代谢产物，从一级质谱的分子离子峰推测，丹参素及原儿茶醛在体内分别与硫酸及葡萄糖醛酸结合，产生丹参素硫酸结合物及原儿茶醛的葡糖醛酸结合物。
Hsiu SL等［5］研究芍药苷在小鼠体内药代动力学，用LC／MS方法检测体内药物浓度，未检测到芍药苷原形药物；但在血浆及各种排泄物中，均可检测其代谢物，经液相色谱一质谱分析，结合核磁共振(NMR)，确定其为芍药苷的脱糖基代谢物，提示芍药苷给药后，在肠道经细菌转化为PG后，被吸收进入血液循环中发挥作用。