高效液相色谱-串联质谱法
超高效液相色谱法-串联质谱法测定百色辣椒酱中合成辣椒素的含量
超高效液相色谱法-串联质谱法测定百色辣椒酱中合成辣椒素的含量班 振，邓 瑜*（百色市食品药品检验所，广西百色 533000）摘 要：目的：建立超高效液相色谱-串联质谱法快速检测百色辣椒酱中合成辣椒素的方法。
方法：样品经J2 PrepLinc全自动样品前处理平台净化浓缩后，采用超高效液相色谱法串联质谱法进行分析，以电喷雾化离子源多反应监测模式进行外标定量分析。
结果：合成辣椒素在1.0～500.0 ng·mL-1呈良好线性关系，相关系数为0.999 4，检出限为0.08 mg·kg-1，定量限为0.40 mg·kg-1，加标回收率在73.8%～97.5%，相对标准偏差为2.1%～3.5%（n=6）。
结论：该方法操作可靠、测定结果准确，适用于实验室大批量检验辣椒酱中合成辣椒素。
关键词：超高效液相色谱-串联质谱法；辣椒酱；合成辣椒素Determination of Synthetic Capsaicin in Baise Chili Sauce by Ultra-High Performance Liquid Chromatography TandemMass SpectrometryBAN Zhen, DENG Yu*(Baise Institutes for Food and Drug Control, Baise 533000, China)Abstract: Objective: A new method for the determination of synthetic capsaicin in Baise chili sauce by using UPLC-ESI-MS/MS was developed. Method: The samples were cleaned up by J2 PrepLinc platform and then determined by UPLC-ESI-MS/MS with multiple reaction monitoring. Result: The synthetic capsaicin showed a good linear relationship between 1.0 and 500.0 ng·mL-1, with a correlation coefficient of 0.999 4. The quantitation limit was 0.08 mg·kg-1, and the quantification limit is 0.40 mg · kg-1. The recoveries were in the range of 73.8%～97.5%, and the relative standard deviations of which were 2.1%～3.5%(n=6). Conclusion: This method is reliable in operation and accurate in determination results, which can meet the requirement of analysis in a large number of samples.Keywords: ultra-high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry; chili sauce; synthetic capsaicin辣椒中呈辣味的物质统称为辣椒素或辣素，又名辣椒碱[1]。
17 种全氟化合物的测定 高效液相色谱串联质谱法
17 种全氟化合物的测定高效液相色谱串联质谱法随着全氟化合物在环境和生物体中的广泛存在，其检测和分析成为了重要的科研课题。
本文就高效液相色谱串联质谱法在17种全氟化合物的测定中的应用进行了系统性的总结和分析。
1. 研究背景全氟化合物在人类活动中的广泛应用导致其不断释放到环境中，在生态系统中广泛存在，对于人类和环境的危害性引起了人们的重视。
然而，17种全氟化合物的检测和分析在传统的方法中往往受到了许多限制，给科学家们带来了挑战。
2. 高效液相色谱串联质谱法概述高效液相色谱串联质谱法（HPLC-MS/MS）是一种高灵敏度、高选择性、高效率的分析技术，已经在各种全氟化合物的检测中得到了广泛的应用。
该方法具有较低的检出限、良好的线性范围和稳定性，能够准确、快速地测定出样品中的全氟化合物含量。
3. 实验方法实验采用了HPLC-MS/MS技术，首先对17种全氟化合物进行了标准品的制备，然后利用该方法对样品进行了萃取和制备，并在质谱仪上进行了分析。
在实验过程中，采用了一系列的控制措施，例如内标法、质量控制等，保证了实验的准确和可靠性。
4. 结果分析通过HPLC-MS/MS技术的分析，成功地检测到了样品中的17种全氟化合物，获得了准确的含量数据。
实验结果表明，该方法具有较低的检出限、良好的线性范围和稳定性，可以满足全氟化合物的检测需求。
5. 结论及意义HPLC-MS/MS技术在17种全氟化合物的测定中具有较高的准确性和精密度，为全氟化合物的检测和分析提供了一种有效的方法。
这对于环境监测、食品安全、医学诊断等领域具有重要的意义，为相关研究和应用提供了支持。
6. 展望未来，我们将继续探索更加高效、更加灵敏的分析方法，完善HPLC-MS/MS技术在全氟化合物测定中的应用，进一步提高检测的准确性和稳定性，并将其推广至更多领域的应用中，为全氟化合物的检测和分析提供更好的技术支持。
本研究系统总结了HPLC-MS/MS技术在17种全氟化合物测定中的应用，强调了该方法的重要意义及其在环境和生物监测中的潜在应用价值，为相关领域的研究和应用提供了重要参考。
高效液相色谱串联质谱法学习交流
2、Agilent 6420 液相色谱串联质谱仪
液相
C18色谱柱连接
质谱
脱气 真空泵
自动进样器
色谱柱
学习过程中主要操作和使用的仪器设备有 高效液相色谱串联质谱仪；液相色谱法；凝 胶色谱渗透净化仪；氮吹仪；旋转蒸发仪； 固相萃取装置，详细介绍如下：
1、Waters ACQUITY UPLC 沃特世超高效液相色谱串联质谱仪
液相
C18色谱柱连接
质谱
紫外 TUV Detector
自动进样器 Sample Manager
18932.22-2003 8、牛奶和奶粉中玉米赤霉醇、玉米赤霉酮、己烯雌酚、己烷雌酚、双烯雌酚残留量的测定 液相色谱-串
联质谱法 （质控-3个混标）------ GB/T 22992-2008 9、婴幼儿配方粉及婴幼儿补充谷粉通用技术条件（含第1号、第2号和第3号修改单，已作废） GB 10767-1997 （维生素D测定 D2、D3） 10、动物源性食品中11种激素残留检测 液相色谱-串联质谱法----------农业部1031号公告-1-2008 11、粮谷中486种农药及相关化学品残留量的测定 液相色谱-串联质谱法（凝胶色谱渗透仪净化）--GB/T 20770-2008 12、动物源性食品中14种喹诺酮药物残留检测方法 液相色谱-质谱/质谱法---------GB/T 21312-2007 13、食品安全地方标准 火锅食品中罂粟碱、吗啡、那可丁、可待因和蒂巴因的测定 液相色谱-串联质谱 法（地方标准） DB31/ 2010-2012
学习提纲
第一部分：仪器实验室（3.18-5.15）★ ★ ★ 第二部分：微生物实验室（5.18-5.29） 第三部分：理化实验室（6.1-6.12） 第四部分：仪器操作★ ★ ★ 第五部分：资料收集★ ★ 第六部分：学习总结、心得体会
高效液相色谱-串联质谱法分离鉴定绿原酸及其相关杂质
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高效液相色谱串联质谱法
高效液相色谱串联质谱法（High-Performance Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry，HPLC-MS/MS）是一种分离和分析分子化合物的分析技术，结合了高效液相色谱和质谱分析技术的优点。
在HPLC-MS/MS技术中，样品经过高效液相色谱柱分离后进入质谱仪，通过电离和碎片化反应将分离出来的化合物分离和鉴定。HPLC-MS/MS技术具有灵敏度高、分离效率好、分析速度快、可同时检测多个成分等优点，因此在药物分析、生物分析、环境监测等领域得到广泛应用。
超高效液相色谱串联质谱法快速测定
超高效液相色谱串联质谱法快速测定贝类中3种腹泻性贝类毒素许均图，陈德斌，陈 燕，唐春玲（广州华鑫检测技术有限公司，广东广州 510663）摘 要：建立了应用EMR-Lipid小柱净化结合超高效液相色谱串联质谱法快速测定贝类样品中3种腹泻性贝类毒素的分析方法。
样品用80%乙腈溶液提取，以安捷伦Captival EMR-Lipid小柱净化，经超高效液相色谱串联质谱分析测定，采用大气压电喷雾负离子电离，选择反应监测模式，基质匹配外标法定量。
实验结果表明，3种腹泻性贝类毒素的检出限为0.5～1.0 μg·kg-1，回收率为82.6%～107.1%，相对标准偏差为3.5%～9.9%。
该方法操作简单、灵敏度高、回收率和精密度较好，适合应用于日常贝类样品中腹泻性贝类毒素的监测。
关键词：腹泻性贝类毒素；贝类；超高效液相色谱串联质谱Rapid Determination of Three Diarrhoeal Shellfish Poisons in Shellfish by Ultra-Performance Liquid ChromatographyTandem Mass SpectrometryXU Juntu, CHEN Debin, CHEN Yan, TANG Chunling(Guangzhou Huaxin Testing Technology Co., Ltd., Guangzhou 510663, China) Abstract: A method for rapid determination of three diarrhoeal shellfish poisons in shellfish samples by EMR-Lipid column purification combined with ultra high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry was established. The sample was extracted with 80% acetonitrile solution, purified with Agilent Captiva EMR-Lipid column, analyzed by ultra high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry, ionized by atmospheric pressure electrospray negative ions, selected reaction monitoring mode, and quantified by matrix matching external standard method. The results showed that the detection limits of three diarrhoeal shellfish toxins were 0.5～1.0 μg·kg-1, the recovery was 82.6%～107.1%, and the relative standard deviation was 3.5%～9.9%. The method is suitable for monitoring diarrhoeal shellfish poisons in shellfish samples because of the advantages of simple operation, goodsensitivity and recoveries.Keywords: diarrhoeal shellfish poisons; shellfish; ultra high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry腹泻性贝类毒素（Diarrhetic Shellfish Poisoning，DSP）是由原甲藻属和有毒赤潮藻类鳍藻属的藻类产生的脂溶性多环醚类生物活性毒素[1]。
液相色谱-串联质谱法测定污水处理厂水样中双酚A、四溴双酚A及烷基酚类化合物
液相色谱-串联质谱法测定污水处理厂水样中双酚A、四溴双酚A及烷基酚类化合物液相色谱-串联质谱法测定污水处理厂水样中双酚A、四溴双酚A及烷基酚类化合物一、引言污水处理厂是将废水进行处理，去除其中的有害物质，最终达到排放标准。
然而，近年来，一些有机物污染物，如双酚A、四溴双酚A和烷基酚类化合物等，经常被检测出在污水处理厂的水样中。
这些化合物具有潜在的环境和健康风险，因此对其进行准确测定是十分重要的。
二、双酚A双酚A (BPA) 是一种常见的内分泌干扰物，广泛用于塑料制品和树脂的生产中。
由于其广泛应用，它已经被检测出在各种环境样品中，包括水和废水中。
传统的双酚A测定方法主要依赖于气相色谱-质谱法，但该方法需要样品预处理过程复杂，且仪器昂贵。
液相色谱-串联质谱法 (LC-MS/MS) 是一个更快捷、更灵敏的测定方法。
三、四溴双酚A四溴双酚A (TBBPA) 是一种阻燃剂，普遍应用于电子产品和塑料制品中。
它具有持久性，易在环境中累积并引起一系列生态问题。
TBBPA可以通过液相色谱-串联质谱法定量测定，该方法具有高分辨率、高选择性和高灵敏度。
四、烷基酚类化合物烷基酚类化合物包括烷基酚 (AP) 和烷基酚聚氧乙烯醚(APEOs)。
它们广泛存在于工业和家庭用品中，是水体中常见的有机污染物之一。
由于其疑似致癌性和内分泌干扰作用，十分关注。
LC-MS/MS是测定烷基酚类化合物的最常用方法，它准确快速、操作简便。
五、实验方法液相色谱-串联质谱法测定水样中双酚A、四溴双酚A及烷基酚类化合物主要包括以下步骤：1. 样品预处理：水样中的有机物需经过提取和净化处理，消除干扰物。
2. 色谱条件优化：选择适当的色谱柱、流动相以及梯度洗脱条件。
3. 质谱条件设置：设置质谱的离子源参数、离子传输参数和离子检测参数。
4. 标准曲线制备：制备一系列浓度已知的标准溶液，通过建立标准曲线来定量待测样品中目标化合物的浓度。
5. 样品测定：将经过预处理的样品通过液相色谱-串联质谱系统，测定目标化合物的浓度。
超高效液相色谱-串联质谱法同时测定水、沉积物和生物样品中57种全-多氟化合物
超高效液相色谱-串联质谱法同时测定水、沉积物和生物样品中57种全-多氟化合物超高效液相色谱-串联质谱法同时测定水、沉积物和生物样品中57种全/多氟化合物概要：全/多氟化合物（PFASs）是一类广泛存在于环境及生物体中的污染物，由于其高毒性、高生物蓄积性和长半衰期，对生态环境和人类健康造成潜在风险。
因此，对于这些化合物的快速、准确测定方法的发展至关重要。
本研究旨在开发一种超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）方法，以同时测定水、沉积物和生物样品中57种全/多氟化合物。
引言：全/多氟化合物是一类人工合成的有机污染物，由于其独特的物化特性，被广泛应用于防潮、阻燃、润滑等领域。
然而，由于全/多氟化合物的持久性、生物蓄积性和毒性，它们已成为全球环境污染的重要问题。
目前已经发现的全/多氟化合物超过3,000种，其中包括全氟烷基磺酸盐（PFASs）、全氟烷基胺盐（PFASAs）等。
这些化合物具有高度稳定性和生物传播性，即使在环境中存在很低的浓度，也可能对生态环境和人类健康产生潜在风险。
现有的全/多氟化合物分析方法主要包括气相色谱-质谱法（GC-MS）和液相色谱-质谱法（LC-MS）。
然而，由于PFASs的高亲水性和复杂的基质干扰，传统的液相色谱-质谱方法在样品净化和分离上存在一定的局限性。
因此，开发一种高效准确的测定方法具有重要意义。
方法：本研究选取了57种典型的全/多氟化合物作为目标分析物，包括全氟烷基磺酸盐、全氟烷基胺盐等。
样品净化采用固相萃取（SPE）方法，利用氟化硅固相胶囊柱对样品进行预处理。
色谱分析采用UPLC-MS/MS系统，为了提高色谱分离效果，选择C18色谱柱。
质谱采用电喷雾离子源（ESI）和正离子模式。
结果与讨论：经过方法优化，我们成功开发了一种UPLC-MS/MS方法，可以同时测定水、沉积物和生物样品中的57种全/多氟化合物。
该方法具有高灵敏度、高选择性和较低的方法检出限。
在水样中，该方法的平均回收率在70%-110%之间，相对标准偏差低于15%。
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面膜类化妆品中氟轻松检测方法
（高效液相色谱-串联质谱法）
1范围
本方法规定了面膜类化妆品中氟轻松的高效液相色谱-串联质谱测定方法。
本方法适用于面膜类化妆品中氟轻松的定性定量测定。
2方法提要
面膜类化妆品用饱和氯化钠溶液分散，用乙腈从分散液中提取氟轻松，用亚铁氰化钾和乙酸锌沉淀提取液中大分子基质，经固相萃取小柱净化，用高效液相色谱仪分离，质谱检测器检测，采用保留时间和特征离子对丰度比定性，以待测物质相对应离子峰面积定量，以标准曲线法计算含量。
本方法的检出限为0.03 µg/g，定量限为0.05 µg/g。
3试剂和材料
除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯或以上规格，水为纯化水。
3.1甲醇：色谱纯。
3.2乙腈：色谱纯。
3.3冰醋酸：优级纯。
3.4饱和氯化钠溶液。
3.5 10%亚铁氰化钾溶液：称取115 g亚铁氰化钾K4Fe(CN)6·3H2O固体，
用水溶解定容至1000 mL。
3.6 20%乙酸锌溶液：称取239 g乙酸锌C4H6O4Zn·2H2O固体，用水溶解定容至1000 mL。
3.7Oasis HLB固相萃取小柱或相当者：60 mg，3 mL。
3.8 标准物质：氟轻松，纯度不小于99.0%；标准物质的分子式、相对分子质量、CAS登录号、化学结构图参见附录A。
3.9 标准储备液（ρ=1g/L）：准确称取氟轻松标准物质（3.8）10mg，精确到0.01 mg，置于10 mL量瓶中，用甲醇溶解并定容，于－18℃下冷冻保存。
3.10 标准工作溶液：临用时，取标准储备液（3.9）适量，用乙腈稀释成0.05μg/mL、0.10μg/mL、0.20μg/mL、0.40μg/mL、0.80μg/mL系列浓度的标准工作溶液。
4仪器和设备
4.1 高效液相色谱-三重四极杆质谱联用仪（ESI源）。
4.2 分析天平：感量0.0001g；0.00001g。
4.3 涡旋混合器。
4.4离心机：转速5000r/min，容量10mL；50mL。
4.5 固相萃取装置。
5分析步骤
5.1样品处理
5.1.1提取
称取样品（带有载体的面膜，去除载体后取样）0.2 g，精确至0.0001 g，置15 mL具塞离心管中，加入3 mL饱和氯化钠溶液（3.4），于涡旋混合器上混合使样品分散，准确加入2 mL乙腈，充分涡旋提取2 min，以
5000 r/min离心10 min，吸出上层清液置于另一50 mL具塞离心管中，下层溶液用2 mL乙腈重复提取一次，合并两次乙腈提取液，向提取液中加入40 mL纯化水，混匀，加入10%亚铁氰化钾溶液（3.5）0.2 mL，混匀，加入20%乙酸锌溶液（3.6）0.2 mL，混匀，以5000 r/min离心10 min，取全部上清液待进行净化处理。
5.1.2净化
将Oasis HLB固相萃取小柱（3.7）接上固相萃取装置，小柱预先依次用甲醇5 mL、水10 mL进行活化。
将待净化的样品上清液（5.1.1）倒入漏斗，经滤纸滤过后，滤液流经小柱，待样品溶液自然流尽后，用10%乙腈水溶液10mL清洗小柱，待清洗液自然流尽后，用吸球吹出小柱中的残留液。
在柱出口处接一10mL具塞离心管，用甲醇4 mL淋洗小柱，待甲醇自然流尽后，用吸球吹出小柱中的残留液。
取下离心管，将接收的甲醇用氮气吹干，用50%的甲醇水溶液0.2mL重新溶解后测定（或根据需要的浓度用50%的甲醇水溶液重新溶解定容后测定）。
5.2基质标准曲线溶液制备
称取空白样品5份（带有载体的面膜，去除载体后取样），每份0.2g，精确到0.0001g，置15mL具塞离心管中，分别精密加入各浓度的标准工作溶液（3.10）0.2mL，按样品处理（5.2）步骤操作，将接收的甲醇用氮气吹干，用50%的甲醇水溶液0.2mL重新溶解后测定。
5.3 色谱-质谱参考条件
5.3.1高效液相色谱参考分析条件
色谱柱：SB C18，50 mm×2.1 mm（内径），1.8μm，或相当者；
柱温：室温；
高效液相色谱流动相及参考分离条件见表1；
进样量：5μL。
表1高效液相色谱流动相及参考分离条件
5.3.2质谱检测参考条件
电离方式：电喷雾电离，ESI（+）
离子喷雾电压：4 kV；
雾化气：氮气，38Psi；
干燥气：氮气，流速：12L/min，温度：350 ℃；
碰撞气：氩气；
检测方式：多反应监测（MRM）。
氟轻松的质谱测定参考参数见表2。
表2氟轻松的质谱测定参考参数
6测定结果
6.1 定性判定
在相同实验条件下测定基质标准曲线溶液和样品溶液，如果样品溶液中检出的色谱峰的保留时间与标准溶液中的氟轻松峰的保留时间一致，并且所选择的两对子离子的质荷比一致，样品定性离子相对丰度与浓度相当
标准工作溶液的定性溶液的定性离子的相对丰度进行比较时，相对偏差不超过表3规定的范围，则可判定样品中存在氟轻松。
表3定性判定时相对离子丰度的最大允许偏差
6.2定量测定
相同实验条件下测定基质标准曲线溶液和样品溶液，制作标准曲线，样品中氟轻松的含量用标准曲线法定量，按下式计算含量。
m
D
V ⨯⨯=
ρω
式中：
ω —— 样品中氟轻松含量，μg /g ；
ρ —— 由标准曲线计算得到的样品溶液中氟轻松的浓度，
μg/mL ；
V —— 样品定容体积，mL ； m —— 样品取样量，g ；
D —— 稀释倍数（不稀释则取1）。
附录A
氟轻松的英文名称、分子式、相对分子质量、CAS登录号及化学结构图
附录B
氟轻松标准品溶液MRM（453.3→337.2）质谱图（浓度：0.20 μg/mL）
氟轻松。