液相色谱串联质谱联用专业技术实验指导(许煊炜)

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高效液相色谱串联质谱法测定猪肉中磺胺多辛的不确定度评定

高效液相色谱串联质谱法测定猪肉中磺胺多辛的不确定度评定张厚森;武晓静;王玮;方文娟【摘要】Uncertainties from the test results of sulfadoxine in pork by liquid chromatography tandem mass spectrometry were analyzed and assessed. The relative expended uncertainty calculated from the experimental date was 8.58% ,when the designed incredible probability was 95%(k=2). The expended uncertainty was 3.03 g / kg,while the content of sulfadoxine in the sample was 35.37 g / kg. The contribution of the uncertainty introduced by the sample pretreatment was the largest part to the combined uncertainty.%对高效液相色谱一串联质谱法测定猪肉中磺胺多辛含量过程中引入的不确定度进行了分析和评定，通过试验计算出猪肉中磺胺多辛含量测量结果的不确定度。

在置信水平为95％，包含因子k=2时，其相对扩展不确定度8．58％；当磺胺多辛含量为35．37μg／kg，其扩展不确定度为3．03μg／kg。

样品的前处理所引入的不确定度对合成不确定度的贡献最大。

【期刊名称】《食品工程》【年(卷),期】2012(000)003【总页数】4页(P55-58)【关键词】不确定度;液相色谱串联质谱;磺胺多辛;猪肉【作者】张厚森;武晓静;王玮;方文娟【作者单位】江苏省理化测试中心,江苏省营养成分与有毒有害物质检测中心,南京210042;江苏省理化测试中心,江苏省营养成分与有毒有害物质检测中心,南京210042;江苏省理化测试中心,江苏省营养成分与有毒有害物质检测中心,南京210042;江苏省理化测试中心,江苏省营养成分与有毒有害物质检测中心,南京210042【正文语种】中文【中图分类】TS207.51磺胺多辛（Sulfadoxine）又名周效磺胺，磺胺邻二甲氧嘧啶，是一种应用较广的磺胺类药物（Sulfonamides，SAs）。

液相色谱串联质谱联用法检验TNT

ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅａｎａｌｙｓｉｓ．Ｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｗａｓｐｅｒｆｏｒｍｅｄｂｙｔｒｉｐｌｅｑｕａｄｒｕｐｏｌｅｍａｓｓｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙｏｐｅｒａｔｅｄｗｉｔｈａｎｅｇａｔｉｖｅ
２．ＣｉｓｅｎＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＣＯ．，Ｌｔｄ，ｊｉｎｉｎｇ１１００３２，Ｃｈｉｎ
ＡＢＳＴＲＡＣＴ：ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｅｓｔａｂｌｉｓｈａＨＰＬＣ．ＭＳ／ＭＳｍｅｔｈｏｄｗａｓｔｏｆｏｒｄｅｔｅｃｔｉｎｇＴＮＴｉｎｓｕｒｆａｃｅＳＯｉｌ．ＭｅｔｈｏｄＴｈｅｌｉｑｕｉｄ．
ＦｏｒｅｎｓｉｃＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ
别事拔术
２０１６年第４１卷第６期
・论著・
ＤＯＩ：１０．１６４６７／ｊ．ｉ００８・３６５０．２０１６．０６．００８
ＺＨＡＯＨａｉｙｕ，ＳＯＮＧＭｉｎｇ，ＫＡＮＸｕｓｈｅｎｇ，ＧＵＡＮＺｈｕａｎｚｈｕａｎ
ｆ１．ＦｏｒｅｎｓｉｃＳｃｉｅｎｃｅＤｉｖｉｓｉｏｎｏｆＬｉａｏｎｉｎｇＰｒｏｖｉｎｃｉａｌＰｕｂｌｉｃＳｅｃｕｒｉ￣ＤｅｐａｒｔｍｅｎＬＳｈｅｎｙａｎｇ、１００８５．Ｃｈｉｎａ．

超高效液相色谱串联质谱联用法快速测定生物样品中莽草毒素

DOI ：10．3724/SP．J．1096．2011．01917超高效液相色谱串联质谱联用法快速测定生物样品中莽草毒素张秀尧*蔡欣欣（温州市疾病预防控制中心，温州325001）摘要建立了超高效液相色谱三重四极杆质谱法检测血浆、尿液、呕吐物和药材中八角属植物有毒倍半萜内酯标志物莽草毒素的检测方法。

血浆样品经多重机制杂质吸附萃取净化柱萃取，尿液样品经硅藻土柱吸附叔丁基甲醚萃取、植物样品经叔丁基甲醚液液萃取，以水和甲醇为流动相进行梯度洗脱，在UPLC BEH C 18柱上实现分离，采用负离子ESI-MS /MS MRM 方式检测。

一次进样分析时间为5min 。

血浆和尿液中的平均加标回收率分别为92．6% 100．3%和101% 118%；相对标准偏差分别为3．8% 11%和6．4% 17%（n =6）；定量限（S /N =10）分别为2．0和1．0!g /L 。

本方法简单、准确、灵敏，适合于莽草毒素中毒样品的测定。

关键词超高效液相色谱串联质谱；莽草毒素；血浆；尿液；生物样品2011-03-31收稿；2011-06-28接受本文系温州市医学重点学科、温州市第三轮“311”工程建设项目基金（No．2008012）资助*E-mail ：xyzwz123@126．com1引言八角茴香为木兰科植物八角茴香（Illicium verum hook．f．）的果实，有温阳，散寒，理气等功效，用于治疗寒疝腹痛、肾虚腰痛、脘腹冷痛等病症，民间常用作烹饪调料。

由于同属植物果实的形态相似，八角茴香有许多伪品，如红茴香、莽草、野八角等，有的具有毒性，误用会引起中毒［1，2］，特别是日本莽草（Illicium anisatum L．）毒性较大。

同属多种植物中曾分离出莽草毒素（Anisatin ）、新莽草毒素（Neoani-satin ）和伪莽草毒素（Pseudoanisatin ）等倍半萜内酯类成分［3，4］，并证实莽草毒素为γ-氨基丁酸受体非竞争性拮抗剂［5，6］，小鼠腹腔注射可引起惊厥、死亡，LD 50为0．76mg /kg 体重［7］。

超高效液相色谱–串联质谱法同时测定蔬菜中阿维菌素和氟吡菌酰胺的残留

超高效液相色谱–串联质谱法同时测定蔬菜中阿维菌素和氟吡菌酰胺的残留作者：陈丽霞许丽建陈歆彭黎旭来源：《热带作物学报》2021年第01期摘要：为建立同时测定蔬菜中阿维菌素和氟吡菌酰胺残留的超高效液相色谱-串联质谱（UPLC-MS/MS）方法，采用乙腈高速匀浆提取蔬菜样品中的阿维菌素和氟吡菌酰胺，利用无水硫酸镁和PSA吸附剂进行净化，在UPLC-MS/MS的正离子电离和多反应离子监测模式下进行测定。

结果表明，阿维菌素和氟吡菌酰胺的检出限分别为1.0、0.2 µg/kg;在0.005～0.200 mg/L浓度范围内，其线性相关系数均大于0.999。

阿维菌素和氟吡菌酰胺在3个试验水平（0.01、0.02和1.0 mg/kg）的添加回收率分别为83%～106%和90%～108%，相对标准偏差分别在0.5%～5.2%和1.2%～8.4%。

本方法前处理过程快速简单，仪器分析灵敏度好，方法准确度高，可用于蔬菜样品中阿维菌素和氟吡菌酰胺农药残留量的检测分析。

关键词：超高效液相色谱-串联质谱;蔬菜;阿维菌素;氟吡菌酰胺;残留中图分类号：S481.8 文献标识码：AAbstract： To determine the residues of abamectin and fluopyram in vegetable samples， a method was established using the ultra-high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry. The vegetable samples were extracted with acetonitrile and purified with MgSO4 and PSA adsorbents. The target compounds were separated by a C18 UPLC column， then detected by electro-spray ionization （ESI+） and multiple reaction monitoring （MRM） mode. Quantification was performed by peak area external standard methods using matrix-matched calibration curves. In the range of 0.005 to 0.200 mg/L with good linear relationships， the correlation coefficients were better than 0.999. The limit of detection （LOD） of abamectin and fluopyram was 1.0 and 0.2µg/kg， respectively. At 0.01 to 1.0 mg/kg spiked levels for vegetable samples， the recovery of abamectin was between 83% and 106%， and the relative standard deviation （RSD） was in range of 0.5% to 5.2%; the recovery of fluopyram was between 90% and 108%， and the relative standard deviation （RSD） was in range of 1.2% to 8.4%. This method is simple， quick， accurate， and could be applied to the determination of the four pesticides residues in vegetable samples.Keywords： ultra-high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry （UPLC-MS/MS）; vegetable; abamectin; fluopyram; residueDOI： 10.3969/j.issn.1000-2561.2021.01.034阿维菌素（abamectin）是一种大环内酯类广谱杀菌剂，主要从链霉菌的发酵产物中分离得到，对昆虫和螨类具有较好的触杀和胃毒作用，在农业生产中使用较广[1-3]。

液相色谱-串联质谱法快速测定肥料中15种植物生长调节剂

液相色谱-串联质谱法快速测定肥料中15种植物生长调节剂作者：朱海荣张娟刘爽孙文丹齐云张开亮来源：《安徽农业科学》2022年第11期摘要 [目的]采用液相色譜-串联质谱技术，建立同时测定肥料中15种植物生长调节剂的方法。

[方法]样品经含0.1%甲酸的乙腈溶液提取，Agilent SB-C18（3.0 mm×150 mm，2.7 μm）色谱柱分离，甲醇和0.01%甲酸溶液作为流动相梯度洗脱，采用多反应监测模式，外标法定量。

[结果]15种植物生长调节剂在各自的线性范围内均呈现良好的线性关系（ r >0.996），加标回收率为78.62%～113.12%，相对标准偏差（RSD）为2.11%～13.65%，检出限为0.03～0.20 μg/g。

[结论]该方法样品前处理快捷高效，定性、定量准确，适用于肥料中15种植物生长调节剂的同时检测。

关键词肥料;植物生长调节剂;液相色谱-串联质谱法中图分类号 S482.8 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2022）11-0173-05doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2022.11.045开放科学（资源服务）标识码（OSID）：Rapid Determination of 15 Plant Growth Regulators in Fertilizers by Liquid Chromatography-Tandem Mass SpectrometryZHU Hai-rong， ZHANG Juan， LIU Shuang et al（Shandong Institute for Product Quality Inspection， Jinan，Shandong 250100）Abstract [Objective] A method was established for the simultaneous determination of 15 plant growth regulators in fertilizers by liquid chromatography-tandem mass spectrometry. [Method]The samples were extracted with acetonitrile solution containing 0.1% formic acid and separated on an Agilent SB-C18 （3.0 mm×150 mm，2.7 μm） column. The mobile phase was gradient eluted with methanol and 0.01% formic acid solution. The multiple reaction monitoring mode was used for quantitative analysis. [Result]The 15 plant growth regulators showed a good linear relationship in their respective linear ranges （ r >0.996）， the recovery rates of standard additions were 78.62%-113.11%， and the relative standard deviations （RSD） were 2.11%-13.65%. The detection limit was 0.03-0.20 μg/g.[Conclusion]The method was fast and efficient in sample pretreatment， accurate in qualitative and quantitative determination， and was suitable for simultaneous determination of 15 plant growth regulators in fertilizers.Key words Fertilizers;Plant growth regulators;Liquid chromatography-tandem mass spectrometry近年来各类植物生长调节剂产品在甘蔗、水稻、瓜果蔬菜等领域大规模推广应用[1-2]，对改善作物品质、提高作物产量起到了重要作用。

高效液相色谱——串联质谱法快速测定腐竹中2种工业染料

区的大,总产量比无蜂区平均亩增产32%以上(见表3)。

3结论与讨论冬季保护地栽培草莓采取营养钵育苗和假植育苗可以少伤根,根系发育好,基本无缓苗或缓苗期短,加快花发育,提前采收,提高草莓前期产量。

唐莓1号品种种植适宜密度为9000~10000株/亩。

采用滴灌法进行平衡施肥,铺地膜前,追施氮磷钾比例为(1∶1∶0.5)的复合肥,用量为10kg/667m 2;开花前、第一、二层采收初期、采收高峰期,分别间隔20天追肥5~6次,尿素和硫酸钾或磷酸二氢钾配合施用,总用量为10kg/667m 2,平衡施肥不仅可以提高草莓的总产量,同时可以改善品质。

采用放蜂方法是预防和减少畸形果发生的一项措施,同时促进设施草莓优质高产的措施。

为了避免授粉蜜蜂受到毒害影响授粉效果,应注意杀虫剂的使用,施药前一定要将蜂群从温室内移出,间隔7-10天后再将蜂群移入。

参考文献[1]王桂霞,张运涛,董静,张利喜.中国草莓育种的回顾和展望[J].植物遗传资源学报,2008,9(2):272-276.[2]李莉,杨秋叶.河北省草苟生产中存在问题及解决对策[J].河北农业科学,3003,7(2):66-67.[3]韩雅珊.食品化学实验指导[M].北京:中国农业大学出版社,1990:18-29.[4]薛应龙.植物生理实验手册[M].上海科技出版社,1985:52-67.·46·展示新形象,创新发展!服务新农村,致富百姓!碱性橙Ⅱ、碱性嫩黄O 是一种工业染料,主要用于家具、纸张、纺织品等的染色,这些染料都有致癌、致畸、致突变性,严重危害人体健康。

根据GB 2760-2007《食品添加剂使用卫生标准》规定[1],这二种物质严禁作为食品添加剂使用。

由于在中性及偏碱性条件下,碱性橙Ⅱ和碱性嫩黄O 与蛋白质吸附较牢固,不易褪色,因此有些不法商人就将其用于腐竹的染色,使腐竹的色泽光亮,欺骗消费者,使消费者的身体健康受到严重影响。

本文建立的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS )快速准确地测定腐竹中的碱性橙Ⅱ、碱性嫩黄O 的方法,可满足检测要求,为食品安全监督检验提供技术依据,对于加强食品监管、保障食品安全具有重要意义。

液相色谱–串联质谱法测定化妆品中的β-苔黑酚酸甲酯

Determination of methyl atratate in cosmetics by liquid chromatography– tandem mass spectrometry
HUANG Rilin1, ZHANG Gaoqi2, CHEN Yiguang1, WANG Yaru1, LIAO Huimei1, SHE Wenxun1, GUO Xudong1, YE Lingcong1 [1. Guangzhou Quality Supervision and Testing Institute, National Cosmetic Quality Supervision and Inspection Center（Guangzhou）,
黄日林 1，张高旗 2，陈意光 1，王亚茹 1，廖惠媚 1，佘文勋 1，郭旭东 1，叶凌聪 1
[1. 广州质量监督检测研究院，国家化妆品质量监督检验中心（广州），广州 511447 ； 2. 佛山市质量计量监督检测中心，广东佛山 528225]
摘要建立水剂、乳液、膏霜、香波、油脂 5 种化妆品基质中 β- 苔黑酚酸甲酯的液相色谱 – 串联质谱测定方法。
Guangzhou 511447, China; 2. Foshan Supervision and Testing Center for Quality and Metrology, Foshan 528225, China]
Abstract A method for determining methyl-atratate in water, lotion, cream, shampoo and oil cosmetics by liquid chromatography–tandem mass spectrometry was established. Samples were extracted by methanol. Lotion and shampoo samples was cleaned by WAX cartridges. A C18 column was used for separation with acetonitrile–water as the mobile phase， gradient elution was selected. An electrospray–tandem quadrupole mass spectrometry and select reaction monitoring were used. The concentration of methyl atratate was linear with the chromatographic peak area in the range of 0.5–10 μg／L. The

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（2）利用液相色谱串联质谱联用仪快速测定水果中7种农药的残留量。

（一）检测仪器1、仪器名称高效液相色谱串联质谱联用仪（简称LC-MS-MS）。

型号：4500 QTRAP（美国Applied Biosystems公司）。

在离子源中，各组分以ESI或APCI方式电离，被加速后进入质量分析器。

4500QTRAP 的质量分析器主要由Q1、Q2、Q3三组四级杆串联组成。

Q1可将分子离子按质荷比（m/z）大小分开；Q2是碰撞室，可将母离子进一步破碎为碎片离子；Q3具有四级杆和线性离子阱两种功能，作为四级杆时可将分子离子或碎片离子按质荷比大小分开，作为离子阱还可富集离子从而提高检测灵敏度。

各组分的不同离子在质量分析器中被破碎、分离，并按质荷比大小依次抵达监测器，经记录即得到按不同质荷比排列的离子质谱图。

4500QTRAP通过串联四级杆/线性离子阱两种不同质谱技术的结合，可以在单次分析中对复杂样本中的单个成分同时进行定性和定量，也可以对多个化合物进行定量分析。

整台仪器的控制、数据采集、数据处理、结果输出均由PC计算机Windows操作系统支持下的Analyst软件控制完成。

（二）样品1、样品要求本仪器适合分子量在5 ~ 1700 amu范围内的有机样品的定性及定量分析。

待测样品必须能溶解于水或其它有机溶剂中。

若样品或配制的样品溶液发生沉淀、挥发、变质等异常现象时，应重新取样或重新配制溶液。

2、试剂要求所有的试剂均选用色谱纯级，所用水的电导率应大于18KΩ。

流动相必须用0.2µm 或0.45µm滤膜过滤后方可使用。

3、分离条件要求在液相色谱仪上确定分离条件，使待测组分能完全分离，且该色谱条件中流动相不应含有不挥发性盐，如磷酸盐。

（三）、操作步骤实施检测操作的人员，必须熟悉该仪器的操作规程，仪器的工作状态、包括检测灵敏度和分辨率，必须满足检测项目的要求。

1、开机前准备开机前应检查仪器室内电、气的供应情况及空调机的工作状态是否稳定，检查真空机械泵泵油是否需要更换。

只有当UPS工作正常，Gas1/Gas2、Curtain Gas和Exhaust Gas的压力分别稳定在0.35、0.35和0.7 Mpa，环境温度为10~30℃，相对湿度小于70%时才能开机。

2、开机1) 打开真空机械泵上的电源开关。

2) 真空机械泵继续工作至少15分钟后，打开MS电源主开关。

3) 等真空度达到2×10-5Torr（绿色指示灯不闪）后，打开PC计算机电源3、仪器调谐（四）、方法建立1.在Analyst软件Tools菜单中选择Project→Create Project。

在Project name项下输入新建的Project 名称。

注意，不要点选窗口中的其他按钮！点击OK，确认新建Project。

2.在Analyst软件界面下，双击导航栏内Hardware Configuration。

在弹出窗口中选择MassOnly，点击Activate Profile，激活MassOnly（只联接质谱主机）。

3.在导航栏内单击Tune and Calibrate，进入调谐模式。

点击上方工具条中的T钮。

此时，应注意到主机有“扑”声音，表明进入调谐状态。

此时右下角质谱状态显示绿色。

双击Manual Tuning，进入质谱参数设置及运行窗口。

4.使用1mL玻璃进样针吸取适当标准溶液，置于进样针座上。

点击MS Method下拉菜单，选择Syringe Pump Method，设定针泵流速Flow Rate为10μL/min。

5.点击Start Syringe Pump按钮开针泵进样。

6.返回MS Method，选择扫描模式Scan Type为Q1 MS，设定扫描速度Scan Rate为10Da/s，设定扫描范围Start——Stop设定为50——化合物分子量。

DP预输入60。

7.点击start开始采集数据。

运行稳定后，注意观察是否有预期的母离子出现，并控制其响应值在约E4以下。

点击stop，选择第一个峰（后面是同位素峰）的平稳段，双击，选中母离子。

点击右键，选择Delete Pane。

8.设定Scan type为产物离子扫描Product Ion（Ms2），扫描速度200Da/s，选择扫描正/负离子，输入母离子（product of），设定扫描范围start——stop为50——MW+20，覆盖可能的子离子质量范围，点击compoud标签，设定（DP）60，（CE）5。

9.点击start，开始采集数据，注意观察是否有预期的母离子出现。

手动调节CE，以5eV为步长，逐渐增加。

每次增加后稍作等待，直至目标化合物的子离子清晰看见。

选择平稳的一段，双击，选择子离子。

10.选择Scan Type为MRM。

设定参数表格中的Q1对应的母离子，Q3对应的子离子，time（ms）为50，ID值设为名称1（定量），名称2（定性）。

11.点击Edit Ramp，在Parameter下选择Collision Energy，点击OK。

点击start开始采集数据，记录每个MRM通道的最佳CE电压。

在MRM参数设定表中，右键点击。

选择Collision Energy CE，调出表格中的CE列，输入每个MRM通道的最佳CE电压值，精确到个位数。

重复以上步骤，在Parameter项下选择Declustering Potential，优化并保存DP。

完成后选择菜单File/Save保存采样方法，[文件名].dam。

（五）LCMS方法的建立：1、连接仪器：打开HPLC质谱电源，将HPLC系统接上柱子，将6号出口管线与离子源连好。

调离子源喷雾针位置到2mm处，双击Hardware Configure，在硬件配置菜单下单击LCMS ( 液相与质谱联用)，单击Activate profile激活仪器，会听到笛的一声，说明仪器已经连接上。

2、确认液质同步：选择项目（之前优化方法的时候已经建立的项目）；双击Build acquisition method新建方法，弹出新建方法模板。

在模板左侧点击acquisition method，模板右边显示对应的参数，确认synchronization mode选择LC Sync,表示液质同步。

3、设置MRM参数：点击方法模板左侧的MRM, 在模板右侧Scan Type下选择MRM；在polarity 下选择化合物极性：Positive(正离子)、Negative（负离子）；Duration为15min(与液相分离相同的时间)；表格中Q1：母离子分子量，Q3(Da)：子离子分子量，Time（msec）：50，ID栏：化合物名称（离子对名称后空格加1为定量，空格加2为定性），在表格中右键分别单击DP、CE，点击工具栏的OPEN打开之前优化的方法参数，调出DP,CE值，选中整行，Ctrl+c(复制)参数，关闭窗口，再Ctrl+v(粘贴)参数）；最后点击Edit parameter设置离子源参数：Source/Gas项用以下推荐值：CUR 35，IS:5500(正离子) 或-4500（负离子），TEM 600，GS1 60，GS270，点击OK。

4、设置液相参数：点击模板左边的shimadzu LC system，①在右边的pumps栏下，设置stop time（运行时间）为15min，flow流速为1mL/min，A为水相设为95%，B为有机相设为5%（设置时改B，A自动），泵最大压力为50；点击time program设置液相梯度：例咪唑类梯度设置：②接着在右边的Auto sampler栏下，设置清洗时间，在Rinse mode 下选择Before and after(前后都洗)，并设置清洗时间为5s，清洗液用50%甲醇水。

最后点击保存按钮,在保存窗口输入该方法的名称。

（五）数据处理双击打开Multiquilt，选择项目，点击File下的荧光棒型图标，点击sample，选择需要的标准品和样品数据，点击next，create new method，为方法命名，点击next，选择一个有代表性的样品（一般选择浓度较大的标品数据），设置分组（同一物质定量离子和定性离子设置为一组），并指定内标，next，对每个物质进行积分。

设置积分参数：CausianSmoth（平滑）：一般是0，如有毛刺可改成1或2；Expeceted Time（保留时间）:一般不动Expected time范围：一般30s，表示在保留时间±15s范围最小峰宽最小峰高背景噪音扣除：可调整目标峰基线以下被积分的面积，比例越高积分越往下，必要时调整。

分峰因子：峰有分叉时设置，如有两个分叉，设置为2，峰分叉不能大于2单位：设置单位，勾选Apply units to all可将此单位用于所有化合物点击next，点击finish。

在新跳出窗口内将标准品选定，输入浓度。