高效液相色谱-串联质谱法分析
第39卷2011年4月分析化学(FENXIHUAXUE)研究报告ChineseJournalofAnalyticalChemistry第4期534~539
DOI:10.3724/SP.J.1096.2011.00534
高效液相色谱串联质谱法分析
大肠杆菌代谢组中样品提取方法的比较
梅辉1,2戴军*1刘文卫3凌霞3朱鹏飞3赵志军1
1(江南大学食品科学与技术国家重点实验室,无锡214122)2(江南大学食品学院,无锡214122)3(无锡市疾病预防控制中心,无锡214002)
摘要比较了基于液相色谱和串联质谱联用技术(LCMS/MS)的E.coli代谢组分析的5种不同样品提取方法。在对样品进行淬灭和洗涤后,分别使用冷甲醇法、热乙醇法、甲醇/氯仿法、热甲醇法和高氯酸法对样品平行提取3次,每个样品重复进样3次。结果显示,冷甲醇法所得到的相对提取率最高,且重复性好(RSD<5%)。从相对提取率、重复性等方面综合考察5种提取方法,从优到劣依次为:冷甲醇法>甲醇/氯仿法>高氯酸法>热乙醇法>热甲醇法。此外,以冷甲醇法的提取溶剂配制系列不同浓度的代谢物标样测定的结果表明,本方法的代谢物检测线性较好,线性范围较宽,提取溶剂的基体效应对代谢物的定量分析影响较小。本方法的检出限为0.05~0.36mmol/L。
关键词代谢组分析;液质联用;提取方法;大肠杆菌
20100720收稿;20101029接受本文系江南大学食品科学与技术国家重点实验室自由探索课题基金(No.SKLFTS200803)资助项目*Email:dj998lc@yahoo.com.cn1引言
饲料工业的发展及在医药工业上应用的不断扩大使色氨酸的需求量越来越大,目前我国色氨酸主
要依赖进口。采用微生物直接发酵法生产色氨酸,其合成代谢途径较长,代谢流弱,调控机制复杂,很难
实现工业化。代谢组学技术已应用于微生物表型分类、突变体筛选、代谢途径及微生物代谢工程等方面,但有关色氨酸生产的代谢组学及其分析策略的研究尚未见报道。
微生物代谢组学定义为对胞内所有低分子量代谢物的定性和定量分析[1]。微生物样品前处理是对
代谢物进行准确定性和定量的关键步骤,一般包括微生物培养、淬灭、洗涤和代谢产物的提取等步骤[2]。
本实验所研究的Escherichiacoli(E.coli)全部代谢物仅占细胞干重的3%~5%,但其化学成分的复杂性和生物活性的多样性远超过一般化学合成和组合化学体系[3]。应用现代分析技术对大部分中心代谢
途径的磷酸化代谢产物以及三羧酸循环中间代谢物的提取方法已有报道[4~6],多采用气质联用(GC
MS)[7]检测目标代谢物。但气质联用法往往需要衍生化,且高温条件下易导致热敏性化合物的变性分
解。本研究对生产色氨酸的E.coli发酵液进行淬灭、洗涤处理后,分别运用冷甲醇法、热乙醇法、甲醇/氯仿法、热甲醇法和高氯酸法提取胞内代谢物,在LCMS/MS的多反应检测模式(MRM)对目标代谢
物进行检测,由于胞内代谢物数量巨大,而在代谢流研究磷酸化糖和磷酸化有机酸、有机酸和氨基酸起
到关键作用。因此分别选择以上3类物质中有代表性的8种代谢物(共计24种)作为考察对象,比较5
种提取方法的提取率及重复性。结果表明,冷甲醇法的相对提取率及其重复性均优于其它方法。
2实验部分
2.1仪器与试剂1200型高效液相色谱仪(Agilent公司);3200QTRAP质谱仪(AppliedBiosystems公司),配有
电喷雾离子源;3L发酵罐(NBS);高速冷冻离心机(Termo公司),超低温冰箱(NBS公司);真空冷冻
干燥机(Labconco公司);JY2006电子分析天平(MettlerTpledo公司);YDS6液氮罐(乐山东亚公
司)。苹果酸、富马酸、琥珀酸、柠檬酸、草酰乙酸、2酮戊二酸、邻氨基苯甲酸的标准品均购自BBI公司,其它标准品购自Sigma公司;甲醇和乙腈(色谱纯,Tedia公司);超纯水由Millipore公司超纯水器制备。
2.2菌株与培养基E.coliBW25113(DE(trpR,tnaA,pheA)),实验室改造后的菌株。
培养基组成:3.0g/LMgSO47H2O,5.0g/L(NH4)2SO4,15g/LGlucose,2g/LYeast,4g/L
Peptone,1g/LNaCl,3g/LKH2PO4,0.1g/LC6H5Na3O7,0.0129g/LCaCl2,0.075g/LFeSO4
7H2O,12.54g/LCaCO3,3mg/LAl2(SO4)318H2O,1.125mg/LCoSO4,3.75mg/LCuSO45
H2O,0.75mg/LH3BO3,36mg/LMnSO4,4.5mg/LNa2MoO42H2O,3.75mg/LNiSO46H2O,
22.5mg/LZnSO47H2O,0.075g/LThiamine。
2.3液相色谱与质谱条件
色谱条件:WatersAtlantisHILICSilica色谱柱(150mm2.1mm,3mm,Ireland);柱温:35;进样体积:5mL;流动相A为10mmol/L乙酸铵溶液,流动相B为乙腈。梯度洗脱:0~3min,10%A;3
~15min,10%~50%A;15~25min,50%A;25~27min50%~10%A;27~35min,10%A。
质谱条件:电喷雾离子(ESI)源;负离子扫描;喷雾电压-4.2kV;离子源温度500;气帘气压
172.37kPa;喷雾气压310.28kPa;加热辅助气压275.80kPa。多反应监测扫描模式(MRM):入口电
压-5V,出口电压-3V。24种代谢物的质谱检测具体参数见表1。表124种代谢物的质谱检测参数Table1MSparametersof24metabolites
代谢物Metabolite保留时间Retentiontime(min)母离子Precursorion(m/z)去簇电压Declusteringpotential(V)子离子(碰撞能)Daughterion(m/z)(Collisionenergy/eV)磷酸化糖和磷酸化有机酸Phosphoratedsugarandorganicacid葡萄糖6磷酸Glucose6phosphate,G6P14.00259.0-2397.0(-27)*,78.9(-57)果糖6磷酸DFructose6phosphate,F6P14.28259.0-2097.0(-22)*,78.9(-27)果糖1,6二磷FBPDfructose1,6bisphosphate15.86339.0-2497.0(-32)*赤藓糖4磷酸DErythrose4phosphate,E4P11.80199.0-1597.0(-16)*,78.9(-12)甘油醛3磷酸DGlyceraldehyde3Phosphate,GAP14.48168.8-1478.9(-42)*,96.9(-14)2/3磷酸甘油2/3PhosphoDglycerate,2/3PG12.71185.0-2279.0(-47)*,96.9(-21)磷酸二羟丙酮DHAP(Dihydroxyacetonephosphate,DHAP1.99169.0-1897.0(-15)*
磷酸烯醇式丙酮酸Phosphoenolpyruvate,PEP13.86167.0-1579.0(-20)*有机酸Organicacid草酰乙酸Oxaloaceticacid,OXA13.15131.0-1687.0(-13)*2酮戊二酸2Oxoglutarate,AKG13.60145.0-24101.0(-13)*琥珀酸Succinate,SUC3.88117.0-2373.0(-18)*,98.9(-16)富马酸Fumarate,FUM12.60115.0-2071.0(-13)*苹果酸Malate,MAL2.11133.0-22115.0(-15)*,88.0(-17)柠檬酸Citrate,CIT15.65191.0-2087.0(-25)*,111.0(-22)邻氨基苯甲酸Anthranilate,ANTH1.94136.0-3192.0(-19)*莽草酸Shikimate,SHIK3.57173.0-37137.0(-19)*,111.0(-15)氨基酸Aminoacid丝氨酸Serine,SER15.03104.1-2074.0(-16)*谷氨酰胺Glutamine,GLN15.44145.1-32127.0(-15)*,108.9(-18)天门冬氨酸Asparticacid,ASP14.83132.0-22115.0(-16)*,88.0(-18)酪氨酸Tyrosine,TYR12.48179.8-42119.0(-21)*,163.0(-21)天门冬酰胺Asparagine,ASN15.51131.0-26113.0(-15)*,95.0(-16)苯丙氨酸Phenylalanine,PHEN10.51164.0-32146.9(-19)*,102.9(-23)色氨酸Tryptophan,TRP11.62203.0-38116.0(-25)*,158.7(-19)谷氨酸Glutamicacid,GLU25.81146.0-24128.0(-17)*,101.9(-20)*:定量离子(Quantitativeion)。
2.4样品处理
2.4.1样品的淬灭与洗涤为了使胞内反应停止,代谢物轮廓冻结,菌体与培养基相分离,在取样后必须迅速
对样品进行淬灭和洗涤处理。取指数生长后期发酵液5mL,迅速与-40下预冷的20mL甘油0.9%NaCl(60535第4期梅辉等:高效液相色谱串联质谱法分析大肠杆菌代谢组中样品提取方法的比较40,V/V)溶液混合。在-19,以12000r/min离心3min,弃去上清液,用4预冷的5mL0.9%NaCl溶液洗
涤菌体,再于4以12000r/min离心3min,弃去上清液,收集新鲜干净的菌体于离心管中,供提取使用[8]。
2.4.2提取方法(1)冷甲醇提取法在含有菌体的离心管中加入5mL50%甲醇溶液,漩涡混匀后,放入液氮
罐3min,取出,冰上解冻5min,漩涡混合,再重复上述液氮冻融过程二次,在4以15000r/min离心5min,取上
清液进行分析。(2)热乙醇提取法参照文献[9],在含有菌体的离心管中加入5mL完全沸腾的乙醇,在90下
保持10min,在4以15000r/min离心5min,取上清液进行分析。(3)甲醇/氯仿提取法在含有菌体的离心管
中加入5mL新配制的甲醇氯仿溶液(21,V/V),经过液氮冻融3次后,加入0.5mL0.5mmol/L三羟甲基氨基
液相色谱-串联质谱法测定禽蛋和禽肉中酰胺醇类药物残留
农产品质量与安全
2019年第
3期液相色谱
-串联质谱法测定禽蛋和禽肉中酰胺醇类药物残留
曾勇董文婷周青吴晓翠
渊湖北省兽药监察所
袁武汉430070
冤
摘要
院禽蛋
尧禽肉中的抗生素药物残留超标会直接影响消费者健康
遥本文建立了禽蛋和禽肉中酰胺醇类药物包括氯霉
素
尧甲砜霉素
尧氟苯尼考及氟苯尼考胺的高效液相色谱－串联质谱分析方法
遥禽蛋和禽肉用乙腈提取后
袁正己烷除脂
袁PCX
固相萃取小柱净化
袁液相色谱－串联质谱法测定
袁电喷雾离子源
渊ESI
冤袁多反应监测
渊MRM
冤模式检测
袁基质匹配氯霉素
－
D5内标法定量
遥结果表明
袁在0.25～50
滋g/L的系列浓度范围内均呈良好线性关系
袁相关系数均
>0.999
遥样品中氯霉素
尧甲
砜霉素
尧氟苯尼考及氟苯尼考胺的检测限为0.1
滋g/kg
袁定量限为0.2
滋g/kg
袁在0.2～1
滋g/kg的添加浓度范围内平均回收率
为70％～100％
袁精密度
<15％
遥该方法方便快捷
尧定性准确
袁适用于禽蛋和禽肉中的酰胺醇类药物残留检测
遥
关键词
院酰胺醇类
曰兽药残留
曰禽蛋
曰禽肉
曰液相色谱－串联质谱
基金项目
院湖北省地方标准项目
野液相色谱－串联质谱法测定禽蛋中酰胺醇类药物残留
冶遥
作者简介
院曾勇
渊1973－
冤袁农业推广研究员
袁从事兽药残留分析方法研究
遥E
院zengyong633@
遥酰胺醇类药物又称氯霉素类抗生素
袁属于广谱
抗生素
袁对革兰氏阳性菌和阴性菌均有抑制作用
袁
常见的该类药物主要包括氯霉素
尧甲砜霉素
尧氟苯
尼考等
遥氯霉素曾被广泛用于动物性疾病的治疗
袁
但是由于氯霉素严重干扰动物造血功能
袁引起粒细
胞及血小板生成减少
袁导致不可逆性再生障碍性贫
血等
袁我国已禁用于食品动物
遥甲砜霉素为氯霉素
类衍生物
袁抗菌谱和抗菌作用与氯霉素相仿
袁会抑
制红细胞
尧白细胞和血小板生成
袁还具有较强的免
疫抑制作用
遥氟苯尼考是新一代氯霉素类动物专用
抗生素
袁但繁殖毒性试验表明
袁氟苯尼考具有胚胎
毒性
袁用药后动物还会出现厌食
尧腹泻等不良反应
遥
禽蛋
尧禽肉作为人们日常生活中的重要食物
高效液相色谱-串联质谱法测定婴幼儿奶粉中核苷酸
第
42卷 第
1期
2021年
1月Vol42 No1
Jan'2021质谱学报
JournalofChinese MassSpectrometrySociety
高效液相色谱-串联质谱法
测定婴幼儿奶粉中核苷酸
陈晶燕，陈万勤，王峰，陈碧莲，周 霞，刘柱，梁晶晶
（浙江省食品药品检验研究院，浙江杭州310052）
摘要：建立了高效液相色谱-串联质谱法
（HPLC-MS/MS）测定婴幼儿奶粉中胞嘧啶核苷酸
（CMP）、腺嘌
吟核苷酸
（AMP）、鸟嘌吟核苷酸
（GMP）、尿嘧啶核苷核
（UMP）、次黄嘌吟核苷酸
（IMP）等
5种核苷酸含
量。使用碱性磷酸酶去磷酸化作用，把样品中的核苷酸水解成相应核苷，经选择性硼酸固相萃取净化，
ACQUITY UPLC HSS T3（2. 1 mmX100 mmXi. 8
"m）色谱柱分离，以
5 mmol/L 甲酸铵溶液和乙腈
为流动相进行梯度洗脱。采用电喷雾正离子源，内标法定量，以多反应监测
（MRM）模式进行质谱分析°
结果表明，奶粉中
5种核苷在各自线性范围内的线性关系良好，相关系数均大于
0.998,回收率为
74. 2%
〜110. 7%，相对标准偏差在
0. 8%
〜5. 3%之间（
n=6）,CMP、
AMP、
GMP、
UMP、
IMP的定量限
分别为
0. 7、
0. 1、
0. 7、
3. 3、
0. 6 mg/100 g°该方法灵敏度高、重现性好、定量准确，可用于测定婴幼儿奶
粉中核苷酸含量°
关键词：高效液相色谱-串联质谱法
（HPLC-MS/MS）；奶粉;核苷酸；核苷；多反应监测
（MRM）
中图分类号
:O657. 63 文献标志码:
A 文章编号：
10042997（2021）01009308
doi：10. 7538/zpxb. 2019. 0156 开放科学（资源服务）标识码（OSID）:
Determination of Nucleotides in Infant Milk Powder by High
液相色谱-串联质谱法测定海产品中5-羟色胺含量
124·
FOOD INDUSTRY分析 检测５－羟色胺（５－ｈｙｄｒｏｘｙｔｒｙｐｔａｍｉｎｅ）又名血清素，分子式Ｃ１０Ｈ１２Ｎ２Ｏ，是一种吲哚衍生物，分子量１７６．２２，在海产品组织中广泛存在，是一种神经递质。５－羟色胺被认为可能参与人体许多生理功能的调节，也被认为是疼痛感、冷热感、亢奋感等的信号传输物质。５－羟色胺的缺乏可引起抑郁、精神萎靡、酒精依赖等精神疾病，许多抗抑郁的药物是通过刺激产生５－羟色胺达到治疗目的。另外，５－羟色胺还能增强记忆力，防止脑损害发生。人们对５－羟色胺的研究也越来越重视，特别是５－羟色胺的检测方法报道很多。目前报道５－羟色胺的检测方法主要有荧光分析法、酶联法、气相色谱法、高效液相色谱法。荧光分析法检测５－羟色胺是基于其分子结构的共轭体系在紫外光照射下很多能发射荧光，对高含量５－羟色胺的鉴别十分有用，但是灵敏度偏低；酶联法检测５－羟色胺也有商品化的ＥＬＩＳＡ测试盒，操作叶相对简单，但是定量并不准确；５－羟色胺的沸点高，极性大，在气相色谱法检测时需要进行衍生化，操作繁琐；液相色谱－质谱联用法测定５－羟色胺含量的报道很少。液相色谱－质谱联用法测定５－羟色胺有更高的灵敏度，前处理工作相对简单，本文研究液相色谱－串联质谱联用技术测定海产品中５－羟色胺的含量，为海产品中５－羟色胺的含量测定提供技术参数。材料与方法仪器及材料。液质联用仪（ＬＣＭＳ８０３０ ｐｌｕｓｈ，日本岛津公司）；电子分析天平（ＡＵＷ ２２０Ｄ，日本岛津公司）；色谱柱：Ｃ１８柱（１５０ｍｍ×２．１μｍ，ｗａｔｅｒｓ公司）；超纯水系统（德国Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ公司）。高速冷冻离心机（Ｍｉｃｒｏ１７Ｒ，Ｔｈｅｒｍｏ公司）；超声波提取器（ＨＡＤ－７２０北京恒奥德仪器仪表有限公司）；涡旋混合器（德国ＩＫＡ公司）。５－羟色胺标准品纯度大于９８％（德国Ｄｒ．Ｅｒｅｎｓｔｏｒｆｅｒ公司）；甲醇、乙腈（色谱纯，美国默克公司）；三氯乙酸、乙酸铵、甲酸（分析纯，广州化学试剂有限公司）。仪器条件。流动相：流速：２５０μＬ／ｍｉｎ；Ａ：５ ｍｍｏｌ／Ｌ乙酸铵水溶液（含０．１％甲酸）；Ｂ：甲醇，梯度程序见表１。柱温为３５℃；进样量：１０．０μＬ；电喷雾正离子（ＥＳＩ＋）多反应监测（ＭＲＭ）扫描方式；喷雾电压：４５００ Ｖ；雾化气流量：２．５Ｌ／ｍｉｎ，干燥气：１３Ｌ／ｍｉｎ，质谱参数见表２。结果与讨论流动相的选择。５－羟色胺分子量小，极性强，在色谱柱上的保留行为需要优化液相色谱的流动相，比较以下三种流动相：水－甲醇；５ ｍｍｏｌ／Ｌ乙酸铵水溶液－甲醇；５ ｍｍｏｌ／Ｌ乙酸铵水溶液（含０．１％甲酸）－甲醇，结果见图１－３。 吴移山 湛江市质量计量监督检测所 廖佳佳 黄国方 廖建萌 湛江市食品药品检验所液相色谱-串联质谱法测定海产品中5-羟色胺含量
液相色谱-串联质谱法同时检测糕点中31种食品添加剂
70
2021年第4期中国食品添加剂China Food Additives分析测试
液相色谱-串联质谱法同时检测糕点中
31种食品添加剂
郑娟梅，莫紫梅，王警，陈宁周，王海波*
（广西-东盟食品检验检测中心，南宁 530022）
摘 要：建立糕点中31种食品添加剂的液相色谱-串联质谱分析方法。样品经70%甲醇振荡提取15min，WAX固相萃取柱净化，在电喷雾电离模式下采用多反应监测模式进行测定。结果表明，31种添加剂在各自质量浓度范围内线性良好，线性相关系数大于0.992。空白样品在2.0、4.0、8.0mg/kg添加水平下的平均回收率在71.3%～103.1%之间，相对标准偏差为0.49%～7.62%。将该方法应用于市售样品的检测，方法简便、快速、灵敏，可作为糕点食品中添加剂的快速筛查。关键词：食品添加剂；糕点；液相色谱-串联四极杆质谱；同时检测中图分类号：O657.7+2/TS202.3 文献标识码：A 文章编号：1006-2513（2021）04-0070-11doi：10.19804/j.issn1006-2513.2021.04.012
Simultaneous determination of 31 food additives in pastries with
liquid performance chromatography-tandem mass spectrometry
ZHENG Juan-mei，MO Zi-mei，WANG Jing，CHEN Ning-zhou，WANG Hai-bo*
（Guangxi-ASEAN Center for Food Control，Nanning 530022）
Abstract：A liquid chromatography-tandem mass spectrometry（HPLC-MS/MS）method for the analysis of 31 food additives in pastries was developed. Samples were extracted by 70% methanol oscillation for 10 min，then purified with WAX，Mass spectral data were acquired in electro spray ion（ESI）mode using multiple reaction monitoring（MRM）scan function. Results showed that an excellent linear relationship in their respective concentration ranges was observed for all the analytes with a correlation coefficient larger than 0.992. The average recoveries of blank samples at the levels of 2.0，4.0 and 8.0 mg/kg were between71.3% and 103.1%，with relative standard deviation between 0.49% and 7.62%. The method is simple，rapid and sensitive，and can be used for quick screening of additives in pastries.Key words：food additives；pastry；high performance liquid；chromatography-tandem mass spectrometry；simultaneous detection
液相色谱-串联质谱法检测污水中可替宁
液相色谱 -串联质谱法检测污水 中可替宁
摘要 建立了液相色谱-串联质谱快速测定污水中的可替宁。用Kinetex
Biphenyl 色谱柱为固定相，20mmol/L乙酸铵水溶液（含0.1%甲酸）和乙腈（含0.1%甲酸）为流动相，采用电喷雾正离子模式和多反应监测（MRM）模式，内标法定量。方法的检出限为20ng/L，定量限为50ng/L，在50ng/L~2500ng/L浓度范围内有良好的线性关系。可应用于污水中可替宁的定性定量检测。方法高效、灵敏、准确度高。
关键词 污水 可替宁 质谱
基于污水分析，可以测得经人体代谢后流入生活污水中的化学物质浓度，结合区域的人口数量可以反向计算该物质的消费量，可应用于污水流行病学、化学、环境监测等领域[1]。可替宁是尼古丁的代谢物，吸烟人群排出体外到污水中，而可替宁只有人体代谢这一种来源[2]，因此可作为一种生物标记物，来计算采样区域的服务人口数量。生物样本中可替宁的检测方法有比色法、免疫法、仪器法等[3]，液相色谱-串联质谱法是检测污水中的化合物最常用的仪器检测方法[4]。
1材料与方法
1.1仪器与试剂
1.1.1仪器
Triple Quad 4500 LC-MS/MS三重四级杆质谱仪（美国 AB SCIEX公司）；Fotector Plus 高通量全自动固相萃取仪（睿科集团）；AutoEVA-60全自动氮吹仪（睿科集团）；3K-15低温高速离心机（美国 Sigma公司）；Elix Essential
3& Milli-Q IQ 7000超纯水机（德国 Merck公司）；
1.1.2试剂 标准溶液：可替宁来源于美国西格玛公司，质量浓度为1mg/mL。内标：可替宁-D3来源于美国西格玛公司，质量浓度为100μg/mL。超纯水由超纯水机（德国Merck公司）制备，甲醇(美国Fisher）、乙腈(美国Fisher）、甲酸（阿拉丁）和乙酸铵(美国Fisher）均为色谱纯。
高效液相色谱-串联质谱法检测血液中甲卡西酮及其代谢物卡西酮
质谱学报
JournalofChinese MassSpectrometrySocietyvol40 No6
Nov'2019第
40卷 第
6期
2019年
11月
高效液相色谱-串联质谱法检测血液中
甲卡西酮及其代谢物卡西酮
刘冬娴
1,张旭东
2,赵明明
*，贺江南
*
(1.湖南警察学院刑事科学技术系，湖南长沙
410138；
2.长沙市公安局禁毒支队，湖南长沙
410000)
摘要：建立了高效液相色谱-串联质谱
(HPLC-MS/MS)法检测血液中甲卡西酮及其代谢物卡西酮&用
双苯戊二氨酯
(SKF
525A)的乙腈溶液提取含甲卡西酮及卡西酮的血液样品，提取液过
0.22 ”m微孔有机
滤膜后，进行
HPLC-MS/MS检测&采用
Column Eclipse Plus C18色谱柱分离，柱温
45 P，以
0. 1%甲
酸水溶液和乙腈为流动相进行梯度洗脱；电喷雾离子源
(ESI)正离子多反应监测模式
(MRM)检测&结
果表明，甲卡西酮在
0.2〜2 000 ”g/L浓度范围内线性关系良好(
r=0. 999),日内精密度低于
7. 9%，日
间精密度低于
&8%;卡西酮在
0.5〜2 000 ”g/L浓度范围内线性关系良好(
r=0. 999)，日内精密度低
于
& 2%，日间精密度低于
9.1% &该方法操作简便、检测灵敏度高、专一性强、线性范围宽，可用于血液
中甲卡西酮及其代谢物卡西酮的检测&
关键词：法医毒物；高效液相色谱-串联质谱
(HPLC-MS/MS
)；血液；甲卡西酮；卡西酮
中图分类号:O657. 6 文献标志码:A 文章编号：1004-2997(2019)
06-0584-07
doi 10.7538/
zpxb.2019.0043
Determination of Methcathinone and Cathinone
in Blood by HPLC-MS/MS
LIU Dong-xian1，ZHANG Xu-dong2，ZHAO Ming-ming1，HE Jiang-nan1
超高效液相色谱-串联质谱法测定鸡蛋中7种喹诺酮类药物的基质效应
2021，30（1）福建分析测试FujianAnalysis&Testing
超高效液相色谱-串联质谱法测定鸡蛋中
7种喹诺酮类药物的基质效应
黄碧慧
（厦门市食品药品质量检验研究院，福建厦门361004）
收稿日期：2020-9-3
作者简介：黄碧慧（1984—），女，工程师，从事食品检验工作，Email：
****************摘要：研究了超高效液相色谱-串联质谱测定鸡蛋中7种喹诺酮类药物的基质效应。比较了鸡蛋中7种喹诺酮类
药物经固相萃取柱净化法、正己烷除油法和未净化法3种前处理方法在高效液相色谱-串联质谱检测模式下基质效
应的差异，结果表明固相萃取柱净化法方法优于其他两种，在此基础上进一步研究了不同称样量和目标化合物不同
进样浓度的基质效应评价。结果表明随着称样量的增加，化合物的基质效应也越来越高；随着检测质量浓度的增
大，目标化合物受基质效应的影响逐渐减小。因此在设计喹诺酮检测实验步骤时，首先应在保证方法灵敏度的前提
下尽可能的减少称样量，其次可以采用固相萃取柱法作为净化步骤，能有效去除基质中大部分杂质，最后如果有合
适的同位素内标物或者与化合物性质相似的物质，也可以用内标校正法来降低目标化合物的基质效应。
关键词：鸡蛋；基质效应；喹诺酮类药物；超高效液相色谱-串联质谱法
中图分类号：TS207.3+O657.72文献标识码：A文章编号：1009-8143（2021）01-0001-06Doi:10.3969/j.issn.1009-8143.2021.01.01
MatrixEffectsintheanalysisofsevenQuinolonesResiduesinEggsbyUPLC-MS/MS
HuangBi-hui
（XiamenInstituteforFoodandDrugQualityControl，Xiamen，Fujian361004，China）Abstract:Thematrixeffectofsevenquinolonesineggswasstudiedbyultraperformanceliquidchromatographytandemmassspectrometry（UPLC-MS/MS）.Inthispaper，thematrixeffectsdifferencesofsevenquinolonesineggswerecompared
高效液相色谱-串联质谱法测定婴幼儿配方乳粉中A1_β-酪蛋白、A2_β-酪蛋白含量
CHINA FOOD SAFETY 83
分析检测高效液相色谱-串联质谱法测定婴幼儿配方乳粉中
A1 β-酪蛋白、A2 β-酪蛋白含量
羊 银，张瑞华，刘 莹*
（天津市食品安全检测技术研究院，天津 300308）
摘 要：建立婴幼儿配方乳粉中A1、A2 β-酪蛋白的高效液相色谱-串联质谱测定方法。乳粉经尿素溶
液溶解稀释，胰蛋白酶酶解，过膜后利用ACQUITY UPLC Peptide BEH C18（100 mm×2.1 mm，1.7 μm）色谱柱分离，0.1%甲酸水、0.1%甲酸乙腈为流动相梯度洗脱，高效液相色谱-串联质谱仪测定。结果表明，A1、A2 β-酪蛋白在0.02～2.00 mg·mL-1线性范围内，相关系数（R2）均≤0.99，检出限为0.05～0.10 g·kg-1；定量限为0.2～0.5 g·kg-1；平均回收率在92.08%～105.29%；平均相对标准偏差为1.5%～7.9%。随机选取了10个品牌的婴幼儿配方乳粉进行测定，得到A1 β-酪蛋白、A2 β-酪蛋白的含量在0～30.3 g·kg-1。关键词：婴幼儿配方乳粉；A2 β-酪蛋白；A1 β-酪蛋白；高效液相色谱-串联质谱法
Determination of A1 and A2 β-Casein in Infant Formula
Milk Powder by High Performance Liquid Chromatography-
Tandem Mass Spectrometry
YANG Yin, ZHANG Ruihua, LIU Ying*
(Tianjin Institute for Food Safety Inspection Technology, Tianjin 300308, China)Abstract: To establish a method based on high performance liquid chromatography-tandem mass
高效液相色谱-串联质谱联用法测定人血清中去甲肾上腺素、多巴胺
中国卫生检验杂志２０１５年９月第２５卷第１７期Ｃｈｉｎ Ｊ Ｈｅａｌｔｈ Ｌａｂ Ｔｅｃ，Ｓｅｐ．２０１５，Ｖｏ１．２５，Ｎｏ．１７ ・２８６３・
・化学测定方法・
高效液相色谱一串联质谱联用法测定人血清中
去甲肾上腺素、多巴胺和５一羟色胺含量
王泽民 ，王玉文 ，伊晶 ，龙森 ，余露山
１．杭州市第七人民医院，浙江杭州３１００１３；２．浙江大学药学院药物研究所，浙江杭州３１００５８
摘要：目的建立高效液相色谱一串联质谱联用（ＨＰＬＣ—ＭＳ／ＭＳ）法同时测定人血清中去甲肾上腺素（ＮＥ）、多巴胺 （ＤＡ）及５一羟色胺（５一ＨＴ）含量的检测方法。方法血清样品经液一液萃取后，以乙腈一水一甲酸（７５：２５：０．１， ｖ／ｖ）为流动相，尼莫地平为内标，通过ＺＯＲＢＡＸ Ｅｘｔｅｎｄ Ｃ 柱（２．１ ｍｍ×１００ ｍｍ，３．５ ｍ）进行分离。采用ＨＰＬＣ— ＭＳ／ＭＳ法，以选择离子监测（ＳＩＭ）方式进行检测。结果ＮＥ、ＤＡ、５一ＨＴ的浓度分别为０．５ ｒｉｇ／ｍｌ～４００ ｎｇ／ｍｌ、１ ｎｇ／ｍｌ一 １００ ｎｇ／ｍｌ、１ ｎｇ／ｍｌ～１００ ｎｇ／ｍｌ时，线性关系良好（ｒ＞０．９９），最低定量限分别为０．５ ｒｉｇ／ｍｌ、１ ｎｇ／ｍｌ、１ ｎｇ／ｍｌ，相对标准 偏差（ＲＳＤ）分别为１１．５％、６．１％、９．３％（／Ｚ＝５），平均回收率分别为８５．０７％，８９．２％、９０．６７％。基质效应、日内、日间精 密度和准确度均符合生物样品的测定要求。结论本法操作简便、准确、灵敏度高，适用于血清中神经递质的测定和 研究。 关键词：血清；神经递质；高效液相色谱一串联质谱联用法；含量 中图分类号：０６５２．６３ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００４—８６８５（２０１５）１７—２８６３—０４
Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ０ｆ ｎ０ｒｅｐｉｎｅｐｈｒｉｎｅ，ｄｏｐａｍｉｎｅ ａｎｄ ５一ｈｙｄｒｏｘｙｔｒｙｐｔａｍｉｎｅ
液相色谱-串联质谱法测定水中微囊藻毒素-LR、微囊藻毒素-RR1
液相色谱 -串联质谱法测定水中微囊藻毒素 -LR、微囊藻毒素 -RR1
摘要 为提高实验室水质检测效率，依据《城镇供水水质标准检验方法》CJ/T141-2018，建立高效液相色谱-串联质谱法快速测定水中微囊藻毒素-LR、微囊藻毒素-RR的分析方法。水样经玻璃纤维滤膜过滤，对溶解态藻毒素(水样)和藻细胞内藻毒素(膜样)分别进行不同的处理。水样中的微囊藻毒素-LR、微囊藻毒素-RR的总量是水样处理和膜样处理测定结果之和。经液相色谱仪ACQUITY
UPLC BEH shield RP18分离后，进入串联质谱仪，采用多反应监测(MRM)模式，根据保留时间和特征离子峰进行定性分析，外标法定量分析。本法水样最低检测质量浓度为微囊藻毒素-LR 0.10μg/L、微囊藻毒素-RR 0.02μg/L，标准曲线的质量浓度范围是微囊藻毒素-LR 0μg/L～5.0μg/L、微囊藻毒素-RR 0μg/L～1.0μg/L，线性关系（r≥0.998），精密度满足多次平行测定的相对标准偏差低于10%的要求，准确度试验中加标回收率在80%～130%范围内。按照以上实验过程，能够完成对生活饮用水及其水源水中微囊藻毒素-LR、微囊藻毒素-RR的测定工作。
关键词 液相色谱-串联质谱法 饮用水 微囊藻毒素
中图分类号 X832；R123.1；O657.7
近年来，国内外经常发生蓝藻毒素中毒事件【1】，许多饮用水水源受蓝藻污染时，从其中检测出微囊藻毒素（微囊藻毒素）；微囊藻毒素-LR含量调查显示，水源水和饮用水中微囊藻毒素-LR平均含量均未超过我国地表水环境质量标准、饮用水卫生标准限值1μg/L，水库水中微囊藻毒素-LR平均含量均高于江河水、井水和山泉水【2】。水中藻毒素的去除有多种方法，但常规水处理工艺对其去除率较低，一般在50%以下，有时甚至出现负去除率【3】。微囊藻毒素具有强大的危害性，属肝毒性，具有强致癌性，若皮肤接触或长期饮用含微囊藻毒素的水，可对人体造成伤害，甚至引起肝癌【4】。当细胞破裂或衰老时毒素释放进入水中，同时它还是强烈的肝脏肿瘤促进剂。