谷氨酸发酵及工艺流程

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谷氨酸发酵工艺流程1

谷氨酸发酵工艺流程1

二、谷氨酸发酵的工艺流程菌种的选育,培养基配制,斜面培养,一级种子培养,二级种子培养,发酵(发酵过程参数控制通风量、pH、温度、泡沫),发酵液分离提取。

2.1谷氨酸生产菌种棒状杆菌属谷氨酸棒状杆菌:生物素缺陷型、温度敏感型;北京棒杆菌、钝齿棒杆菌;短杆菌属:黄色短杆菌、天津短杆菌。

2.2生产原料玉米、小麦、甘薯、大米等。

其中甘薯和淀粉最为常用,大米进行浸泡磨浆,再调成15Bx,调pH6.0,加细菌α-淀粉酶进行液化,85℃30min,加糖化酶60℃糖化24h,过滤后可供配置培养基。

甘蔗糖蜜、甜菜糖蜜。

糖蜜原料因含丰富的生物素,不宜直接用来作为谷氨酸发酵的碳源。

2.3.培养基制备谷氨酸发酵培养基组成包括碳源、氮源、水、无机盐和生长因子等。

2.3.1碳源目前使用的谷氨酸生产菌均不能利用淀粉,只能利用葡萄糖、果糖等,有些菌种还能利用醋酸、正烷烃等做碳源。

2.3.2氮源常见无机氮源:尿素,液氨,碳酸氢铵。

常见有机碳源:玉米浆,豆浓,糖蜜。

碳氮比一般控制在100:15—30。

2.3.3生物素含硫水溶性维生素,是B族维生素的一种,又叫做维生素H或辅酶R。

生物素的作用主要影响谷氨酸生产菌细胞膜的通透性,同时也影响菌体的代谢途径。

生物素对发酵的影响是全面的,在发酵过程中要严格控制其浓度。

2.4培养基保藏斜面培养基:牛肉膏l%,蛋白胨l%,氯化钠0.5%,琼脂2%,pH7.0。

活化斜面培养基:葡萄糖0.1%,牛肉膏l%,蛋白胨l%,氯化钠0.5%,琼脂2%,pH7.0。

一级种子培养基:葡萄糖2.5%,玉米浆3.1%;,尿素0.55%,磷酸氢二钾0.12%,硫酸镁0.06%,pH7.0。

2.4.3.1谷氨酸菌种的分离挑一环生产斜面到装有生理盐水,、小玻璃珠三角瓶中,振荡摇匀,稀释,10。

5~10。

6涂平板_挑选30个单菌落移接到生产斜面上(每个菌落接2支斜面)培养48h_其中30支斜面存入超低温冰箱保存,另外相同顺序编号的30支斜面则进行摇瓶产酸试验。

谷氨酸生产工艺流程

谷氨酸生产工艺流程

谷氨酸生产工艺流程一、前期准备工作1. 确定生产规模和产品质量要求;2. 筛选原料供应商,确保原料的质量和稳定性;3. 筛选合适的微生物菌种,进行培养和筛选。

二、谷氨酸发酵过程1. 发酵罐的选择:根据生产规模确定发酵罐的大小,通常采用不锈钢或玻璃钢材质;2. 发酵基质制备:将筛选好的原料按照一定比例混合,加入适量水进行搅拌均匀;3. 调节基质pH值:将基质加热至70℃,并加入碱性物质(如氢氧化钠)或酸性物质(如硫酸)进行调节,使pH值控制在6-7之间;4. 加入微生物菌种:将培养好的微生物菌种加入到发酵罐中,并进行搅拌均匀;5. 发酵过程控制:控制温度、搅拌速度、通气量等参数,以保证微生物菌种正常生长和代谢活动;6. 监测谷氨酸产量:通过取样分析,监测谷氨酸的产量和质量;7. 终止发酵过程:当谷氨酸产量达到预定值或微生物菌种生长停止时,终止发酵过程。

三、分离提纯过程1. 发酵液初步处理:将发酵液进行初步处理,去除杂质和微生物菌体;2. 降解蛋白质:采用酶解剂(如蛋白酶)对发酵液进行降解蛋白质,使谷氨酸与其他成分分离;3. pH值调节:通过控制pH值,使谷氨酸在溶液中处于稳定状态;4. 谷氨酸萃取:采用离子交换树脂或有机溶剂等方法对谷氨酸进行萃取和分离;5. 谷氨酸精制:通过再结晶、洗涤等工艺对萃取得到的谷氨酸进行精制。

四、包装储存1. 调整产品质量指标:根据市场需求和用户反馈意见,调整产品的颜色、味道、纯度等指标;2. 包装:选择合适的包装材料和方式,对谷氨酸进行包装;3. 储存:将包装好的谷氨酸存放在干燥、阴凉、通风的仓库中,避免阳光直射和潮湿环境。

五、质量控制1. 原料质量控制:对原料进行严格筛选和检验,确保原料的质量和稳定性;2. 发酵过程控制:通过监测发酵过程中的温度、pH值、搅拌速度等参数,保证微生物菌种正常生长和代谢活动;3. 谷氨酸产量监测:通过取样分析,监测谷氨酸的产量和质量;4. 分离提纯过程控制:通过控制pH值、温度等参数,保证谷氨酸在分离和提纯过程中处于稳定状态;5. 产品质量检验:对成品进行严格检验,确保产品符合国家相关标准及用户要求。

(完整版)谷氨酸发酵

(完整版)谷氨酸发酵

1)生物素营养缺陷型⏹作用机制:生物素是脂肪酸生物合成最初反应的关键酶乙酰CoA羧化酶的辅酶,参与了脂肪酸的合成,进而影响脂肪酸的合成.当磷脂合成量少到正常的1/2左右时,细胞变形,Glu向膜外泄漏.⏹控制关键:使用该类突变株必须限制发酵培养基中生物素亚适量(5-10 g/L).在发酵初期(0-8小时),细胞正常生长,当生物素耗尽后,在菌的再次倍增时,开始出现异常形态细胞,即完成了细胞从生长型到积累型转换.2)油酸营养缺陷型⏹作用机制:油酸营养缺陷型丧失了合成油酸的能力,通过控制油酸使磷脂合成量减少到正常量的1/2左右.⏹控制关键:保证在培养基中油酸亚适量,完成细胞从生长型到生产型的转换.(3)添加表面活性剂⏹添加表面活性剂(如吐温60)或不饱和脂肪酸(C16-18),也能造成细胞渗漏,积累谷氨酸.⏹机理:两者在脂肪酸合成时对生物素有拮抗作用,导致磷脂合成不足,形成不完整的细胞膜.⏹关键:控制好脂肪酸或表面活性剂的时间和浓度,必须在药剂加入后,在这些药剂存在下进行分裂,形成产酸型细胞.(4)添加青霉素⏹机理:青霉素抑制谷氨酸生产菌细胞壁后期的合成,细胞膜在失去保护,在渗透压的作用下受损,向外泄露谷氨酸.⏹控制关键:一般在进入对数生长期的早期(3-6小时)添加.添加青霉素后倍增的菌体不能合成完整的细胞壁,完成细胞功能的转换.谷氨酸发酵强制控制工艺⏹为了稳产,克服培养基原料中某些成分不易控制带来的影响,在谷氨酸发酵时可采取“强制控制”的方法,如:“高生物素高吐温”或“高生物素高青霉素”的方法.⏹控制方法:在发酵培养基中预先配加一定量(过量)的纯生物素,大大地削弱每批原料中生物素含量变化的影响,高生物素、大接种量能促进菌体迅速增殖.再在菌体倍增的早期加入相对高的吐温或青霉素,形成产酸型细胞.固定其它条件,确保高产稳产。

谷氨酸发酵⏹ 1.适应期:尿素分解出氨使pH上升.糖不利用.2-4h.措施:接种量和发酵条件控制使适应期缩短.⏹ 2.对数生长期:糖耗快,尿素大量分解使pH上升,氨被利用pH又迅速下降.溶氧急剧下降后维持在一定水平.菌体浓度迅速增大,菌体形态为排列整齐的八字形.不产酸.12h.措施:及时供给菌体生长必须的氮源及调节pH,在pH7.5-8.0时流加尿素;维持温度30- 32℃⏹ 3.菌体生长停止期:谷氨酸合成.措施:提供必须的氨及pH维持在7.2-7.4.大量通**,控制温度34-37 ℃.⏹ 4.发酵后期:菌体衰老,糖耗慢,残糖低.措施:营养物耗尽酸浓度不增加时,及时放罐.发酵周期一般为30h.二、谷氨酸发酵的生化过程⏹(1)是代谢控制发酵的典型代表⏹(2)是目前代谢控制发酵中,在理论与实践上最成熟的……⏹整个过程可简单的分为2 个阶段:➢第1阶段是菌体生长阶段;➢第2阶段是产酸阶段,谷氨酸得以大量积累。

谷氨酸的发酵制备流程

谷氨酸的发酵制备流程

谷氨酸的发酵制备流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成,希望大家下载以后,能够帮助大家解决实际的问题。

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从自然界中筛选高产谷氨酸的菌株,如谷氨酸棒杆菌、黄色短杆菌等。

谷氨酸发酵生产工艺

谷氨酸发酵生产工艺

目录1.谷氨酸发酵生产工艺简介1.1工艺流程1.2工艺参数1.3工艺要求2串级控制系统特点与分析2.1串级系统特点2.2串级控制结构框图及分析3控制方案3.1总体方案3.2系统放图3.3待检测点的控制系统流程图4仪表的选型4.1热交换器4.2仪表清单5控制算法选择5.1控制规律5.2调节器正反作用的选择6总结7参考文献附图串级控制系统-----两只调节器串联起来工作,其中一个调节器的输出作为另一个调节器的给定值的系统。

例:加热炉出口温度与炉膛温度串级控制系统1. 基本概念即组成结构串级控制系统采用两套检测变送器和两个调节器,前一个调节器的输出作为后一个调节器的设定,后一个调节器的输出送往调节阀。

前一个调节器称为主调节器,它所检测和控制的变量称主变量(主被控参数),即工艺控制指标;后一个调节器称为副调节器,它所检测和控制的变量称副变量(副被控参数),是为了稳定主变量而引入的辅助变量。

整个系统包括两个控制回路,主回路和副回路。

副回路由副变量检测变送、副调节器、调节阀和副过程构成;主回路由主变量检测变送、主调节器、副调节器、调节阀、副过程和主过程构成。

在该反应中,主要控制的指标是釜温。

但由于测量元件的测量滞后,以及由于测量套管插入其内,在套管的外表面有反应发生,很容易造成釜温的假象。

因此在升温-恒温控制的过程中需要热水和冷水的交换切换,以便使谷氨酸发酵充分反应,提高产品质量。

主、副变量,主、副控制器(调节器),主、副对象,主、副检测变送器,主、副回路。

作用在主、副对象上的干扰分别为一、二次干扰系统特点及分析* 改善了过程的动态特性,提高了系统控制质量。

* 能迅速克服进入副回路的二次扰动。

* 提高了系统的工作频率。

* 对负荷变化的适应性较强串级控制系统的特点:1、 能迅速地克服进入副回路的扰动2、 改善主控制器的被控对象特征3、 有利于克服副回路内执行机构等的非线性执行阀流量对象流量检测变送器)(S E 1)(S R 2)(S R 1)(S E 2温度调节器流量调节器温度对象--温度检测变送器流量原料出口温度)(S D 2)(S D 1输出对于输入的传递函数:)(1s W c )(2s W c )(s W V )(02s W )(01s W )(2s W m )(1s W m )(1s F )(2s F )(2s Y )(2s E )(1s E )(2s X )(2s Z +++++--[])()()()()()()()()()(1)()()()()(2022101022101022111s W s W s W s W s W s W s W s W s W s W s W s W s W s W s W S X S Y m V c m V c c V c c ---=)()(。

谷氨酸的发酵和提取工艺综述

谷氨酸的发酵和提取工艺综述

⾕氨酸的发酵和提取⼯艺综述综述:⾕氨酸的发酵与提取⼯艺第⼀部分⾕氨酸概述⾕氨酸⾮⼈体所必需氨基酸,但它参与许多代谢过程,因⽽具有较⾼的营养价值,在⼈体内,⾕氨酸能与⾎氨结合⽣成⾕氨酰胺,解除组织代谢过程中所产⽣的氨毒害作⽤,可作为治疗肝病的辅助药物,⾕氨酸还参与脑蛋⽩代谢和糖代谢,对改进和维持脑功能有益。

另外,众所周知的⾕氨酸钠盐即味精有很强烈的鲜味,是重要的调味品。

1996、1997、1998年味精年产量分别为55.0万吨、56.64万吨、59.03万吨。

尽管如此,我国⼈均年消耗味精量还只有400g左右,⽽台湾省已达2000g。

因此,中国将是世界上最⼤的潜在味精消费市场,也就是说,味精⽣产会稳步发展。

这也意味着⾕氨酸的⽣产不断在扩⼤[1]。

⾕氨酸⽣产⾛到今天就⽣产技术⽽⾔已有了长⾜进步,⽆论是规模还是产能都今⾮昔⽐,与此同时各⼚家还在追求完美, 这是⾏业进步的动⼒,也是⽣存之所需。

实际上⽣产⼯艺是与时俱进的,没有瑕疵的⼯艺是不存在的。

如:配⽅及提取⽅法现在是多种多样,有单⼀⽤纯⽣物素的,也有⽤⽢蔗糖蜜加纯⽣物素的, 还有加⽟⽶浆⼲粉或麸⽪⽔解液及⾖粕⽔解液等等;提取⽅法有:等电-离交、等电-离交-转晶、连续等点-转晶等等[2]。

本综述简述⾕氨酸⽣产的流程及发酵机制,着重介绍⾕氨酸的提取⼯艺。

第⼆部分⾕氨酸⽣产原料及其处理⾕氨酸发酵的主要原料有淀粉、⽢蔗糖蜜、甜菜糖蜜、醋酸、⼄醇、正烷烃(液体⽯蜡)等。

国内多数⾕氨酸⽣产⼚家是以淀粉为原料⽣产⾕氨酸的,少数⼚家是以糖蜜为原料进⾏⾕氨酸⽣产的,这些原料在使⽤前⼀般需进⾏预处理。

(⼀)糖蜜的预处理⾕氨酸⽣产糖蜜预处理的⽬的是为了降低⽣物素的含量。

因为糖蜜中特别是⽢蔗糖蜜中含有过量的⽣物素,会影响⾕氨酸积累。

故在以糖蜜为原料进⾏⾕氨酸发酵时,常常采⽤⼀定的措施来降低⽣物素的含量,常⽤的⽅法有以下⼏种:(1)活性炭处理法; (2)⽔解活性炭处理法;(3)树脂处理法。

谷氨酸生产工艺流程

谷氨酸生产工艺流程
谷氨酸是一种重要的氨基酸,广泛应用于食品、饲料、医药和化工等领域。

下面将介绍一种常见的谷氨酸生产工艺流程。

首先是原料准备。

谷氨酸的生产主要依靠微生物发酵,常用的菌株有谷氨酸棒状杆菌、曲霉等。

菌种的培养需要合适的培养基,常用的培养基成分包括碳源、氮源、无机盐和微量元素等。

其中,常用的碳源有糖类、淀粉类和脂肪类,常用的氮源有尿素、氨基酸和蛋白质等。

其次是发酵过程。

将培养基加热灭菌后,转入发酵罐中,控制好温度、pH值和搅拌速度等条件,接种适量的菌种,并进行
培养。

在发酵过程中,菌株利用培养基中的碳源和氮源进行生长和代谢,并分泌出谷氨酸。

通常发酵时间为30-48小时。

然后是分离提取。

发酵结束后,需要将发酵液中的谷氨酸进行分离提取。

一般采用酸碱法进行提取,即先用酸调整发酵液的pH值使其酸化,然后用碱调整pH值使其碱化,谷氨酸因为
在酸性条件下溶解度较大,在碱性条件下溶解度变小,从而通过溶液的酸碱调节将谷氨酸分离出来。

最后是纯化和结晶。

将提取的谷氨酸溶液进行纯化和结晶工艺,以提高产品的纯度和晶体形态。

常用的纯化方法有酸沉淀、蒸发结晶和逆流结晶等。

纯化后的谷氨酸产品可以用于进一步加工和应用。

以上就是一种常见的谷氨酸生产工艺流程。

当然,不同厂家和
规模的生产工艺可能略有不同,但总体来说,这是一种经济有效的谷氨酸生产方法。

随着生物工程技术的发展,谷氨酸的生产工艺也在不断改进和创新,以提高生产效率和产品质量。

谷氨酸发酵的工艺流程

谷氨酸发酵的工艺流程
《谷氨酸发酵的工艺流程》
谷氨酸是一种重要的氨基酸,广泛应用于食品、医药和化工等领域。

发酵工艺是生产谷氨酸的主要方法之一,下面将介绍谷氨酸发酵的工艺流程。

1. 选择菌株:选择适合发酵生产的菌株是谷氨酸发酵工艺的第一步。

通常采用属于放线菌属或棒状杆菌属的菌株进行发酵。

这些菌株具有较高的谷氨酸产量和较好的耐受性。

2. 发酵培养基的配制:发酵培养基是支撑谷氨酸发酵的重要基础。

一般包括碳源、氮源、无机盐、生长因子等组成成分。

常用的碳源包括葡萄糖、麦芽糖等,氮源包括氨基酸、尿素等。

3. 发酵条件控制:发酵过程中的温度、pH值、氧气供应等条件都会影响谷氨酸的产量。

通常采用恒温发酵,温度一般控制在28-32摄氏度。

同时控制好培养基的pH值,通常在6.5-7.5之间。

氧气供应也是非常重要的,通过控制搅拌速度和通气量来保证充足的氧气供应。

4. 发酵过程监测:在发酵过程中需要对微生物生长、培养基中各种成分的消耗和产物的生成进行持续监测。

通过检测微生物生长曲线和培养基中各成分的浓度变化来掌握发酵情况,及时调整发酵条件以提高产量。

5. 发酵产物的提取与精制:发酵结束后,需要对发酵产物进行
提取和精制。

通常采用离心、过滤等方法将微生物分离,然后通过酸碱调节、浓缩、结晶等工艺步骤来得到纯净的谷氨酸产物。

通过以上工艺流程,谷氨酸发酵生产可以实现高效、稳定的产量,并且能够得到高纯度的产物,满足市场需求。

谷氨酸生产工艺流程

谷氨酸生产工艺流程谷氨酸是一种重要的氨基酸,具有多种生物学功能,广泛应用于食品、医药、化工等领域。

下面是谷氨酸的生产工艺流程。

1. 淀粉水解首先将淀粉加入水中进行水解,可采用传统的酸水解或者酶水解方法。

酸水解需要在酸性条件下进行,通过加入酸性物质(如盐酸)降低溶液的pH值,使淀粉分子链断裂,形成果糖和葡萄糖。

酶水解则是通过添加淀粉酶,使淀粉分子链断裂。

2. 发酵将水解后的淀粉溶液转移到发酵罐中,加入适量的谷氨酸生产菌株,如谷氨酰转氨酶阳性菌株或谷氨酸合成菌株。

发酵条件需要控制在合适的温度、pH值和营养物质供给下,促进菌株的生长和谷氨酸的合成。

此外,发酵过程中还要进行通气,提供菌株所需的氧气。

3. 提纯发酵结束后,将发酵液进行提纯。

首先将发酵液进行离心或者过滤,除去固体颗粒。

然后,通过酸碱调节和溶剂萃取等方法,将固液分离,得到谷氨酸的提纯液。

提纯液中还可能存在杂质,可以通过活性炭吸附或离子交换树脂吸附等方法去除。

4. 结晶将谷氨酸的提纯液进行结晶处理。

首先,在适当的温度下加入结晶剂,如酒精或乙醇,使谷氨酸分子互相结合形成结晶。

然后,通过过滤或离心等方法,将结晶分离出来。

5. 干燥将分离出的谷氨酸结晶进行干燥处理,除去水分。

可以采用真空干燥、喷雾干燥或者冷冻干燥等方法,在适当的温度下蒸发水分,得到干燥的谷氨酸成品。

6. 包装将干燥的谷氨酸成品进行包装,通常使用塑料袋、铝箔袋或者纸盒等包装材料,保护谷氨酸的质量和稳定性。

包装后,进行质量检验,确保谷氨酸成品符合相关标准。

以上就是谷氨酸的生产工艺流程。

整个工艺包括淀粉水解、发酵、提纯、结晶、干燥和包装等环节,通过合理控制各个步骤的条件和参数,可以有效提高谷氨酸的产量和质量,满足市场需求。

同时,在生产过程中还要注意环保和安全,做好废水、废气和废弃物的处理与排放。

发酵法生产谷氨酸

湖北理工学院学年论文发酵法生产谷氨酸摘要:谷氨酸是一种酸性氨基酸,广泛用于食品,日用化妆品及医药行业。

本文主要介绍了采用发酵法来制备谷氨酸,全过程可划分为三个工艺阶段:原料的预处理及糖化;种子扩大培养及谷氨酸发酵;谷氨酸的提取。

又着重详细介绍了等电离交法提取谷氨酸。

关键词:谷氨酸;发酵;工艺;提取Abstract : Glutamic acid is an acidic amino acid , widely used in food , daily cosmetics and the pharmaceutical industry . This paper introduces that the preparation of glutamate fermentation , the fermentation processes can be divided into three process stages: pretreatment and saccharification of raw materials ; seeds to expand cultivation and glutamic acid fermentation ; the extraction of glutamic acid . This paper describes the ionization cross-extraction of glutamic acid .Keywords : Glutamic acid ; Fermentation ; Process ; Extract湖北理工学院学年论文目录一、谷氨酸简介 (3)1.1概述 (3)二、发酵法生产谷氨酸 (3)2.1 发酵法概述 (3)2.2 原料的预处理及糖化 (4)2.2.1 原料的种类 (4)2.2.2 原料的处理 (4)2.3 谷氨酸发酵工艺 (5)2.3.1 发酵培养基 (5)2.3.2 培养基灭菌 (6)2.3.3 发酵控制 (6)2.4 谷氨酸提取 (7)2.4.1 原理 (7)2.4.2 工艺流程 (7)2.5 鉴别 (8)2.6发酵终点的判断 (8)三、总结 (8)参考文献 (9)湖北理工学院学年论文一、谷氨酸简介1.1概述谷氨酸一种酸性氨基酸。

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谷氨酸发酵及工艺流程
一、准备阶段
1、菌种:谷氨酸产生菌BL-115
2、试剂:将40%尿素溶液、1%水解糖液、4%水解糖液分别装入流加瓶中,121℃15min备用
3、培养基:
(1)一级种子培养基:按下列培养基配方配1000ml一级种子培养基。

按20%装液量分装后,于121℃灭菌30min冷却备用。

葡萄糖2.5%、尿素0.5%、硫酸镁0.04%、磷酸氢二钾0.1%、玉米浆2.5-3.5%、磷酸亚铁、硫酸锰各20ppm、pH7.0
(2)二级种子培养基:按下列培养基配方配制1000ml二级种子培养基,并按20%装液量分装于三角瓶中后,于121℃灭菌30min冷却备用。

水解糖2.5%、玉米浆2.5-3.5、K
2HPO
4
0.15%、MgSO
4
0.04、尿素0.4%、FeSO
4
2ppm、
MnSO
4
2PPm、pH6.8~7.0
(3)发酵培养基:按下列培养基配方制发酵培养基,并按70%装液量装于小型发酵罐中,离位灭菌,121℃实罐灭菌20min,冷却备用。

葡萄糖10%,蜜糖0.18-0.22%,玉米浆0.1-0.15%,Na
2HPO
4
0.17%,KCL 0.12%,
MgSO
4
0.04%,用NaOH溶液调pH7.20于110℃灭菌20min冷却备用。

4、仪器设备:摇床、显微镜、华勃氏呼吸器、分光光度计、蒸汽发生器、5L发酵罐、空压机等。

二、操作阶段
1、一级种子培养:将斜面菌种接入已灭菌冷却的一级种子培养基中(250ml三角瓶内接入1~2环)于32℃±1℃、250r.p.m条件下培养12h。

一级种子质量要求:种龄12h;pH6.4±0.1;光密度:净增O.D值0.5以上;无菌检查阴性,噬菌体检查无。

2、二级种子培养:在已灭菌的二级种子培养基中,按0.5-1.0%接入上述以培养好的一级种子,于32℃±1℃、250r.p.m条件下培养7-8h,二级种子质量要求:种龄7-8h、pH6.8~7.2、OD值净增0.5左右无菌检查:噬菌体无、残糖消耗1%左右镜检:生长旺盛,排列整齐,G+
3、发酵生产操作:
(1)发酵液冷却至40℃左右时,通过蠕动泵加第一次尿素,添加量为0.8~1。

0%。

(2)接种将前次实验制备的二级种子8-10%的接种量接入发酵罐。

于35℃±1℃、250r.p.m条件下培养35h
(3)发酵过程的控制
温度控制:谷氨酸发夹0~12h为长菌期,最适温度在30~32℃,发酵12小时后进入产酸期,控制34~36℃。

由于发酵期代谢活跃,发酵罐要注意冷却,防止温度过高引起发酵迟缓。

pH控制:发酵过程中产物的积累导致pH下降,而氮源的流加导致pH的升高,发酵中当pH值进行控制既8h前pH7.0-7.6;8h后pH7.2-7.3,,20-24h期间pH7.0-7.1,24-35h期间pH6.5-6.6.尿素流加总量为4%
糖液流加:从第10h开始每隔4h补糖一次,每次补入1%的水解糖液,在发酵26h前补入4%的水解糖液。

发酵过程中,需注意完成下列工作
(1)注意发酵罐运转是否正常,检查各控制参数是否在适合的范围内,遇有故障及时排除。

(2)每两小时取样一次,每次取样50ml,取样时,用量筒准确取流出的培养液50ml,对号倒入三角瓶中,封口,来不及测定的样液要立即放入冰箱保存(3)每2小时记录发酵过程温度、pH、OD、通风、转速的测定数值,并记录操作情况。

(4)样液检测:对每份样液进行镜检,经单染后观察菌体形态;测定还原糖,测定菌体浓度。

发酵结束后,用华勃氏呼吸器或其他方法测定发酵液中谷氨酸含量
(5)OD值测定方法:均匀取样5ml于编号试管中,用空白发酵液稀释至一定浓
,根据菌体浓度与吸光度之间关系的标准曲线度,在721分光光度计上测定A
600
换算出菌体浓度;其余发酵于2000r/min条件下离心分离8min,上清夜入编号三角瓶,用于测糖
(6)还原糖测定:用菲林快速定糖法。

(7)菌体形态观察:革兰氏染色,油镜观察菌形、革兰氏染色结果以及有无杂菌污染
4、放罐
达到放罐标准后,及时放罐。

经过发酵约35h后,后残糖在1%以下且糖耗缓慢或残糖<0.5%,菌量增长(OD)值缓慢时,便可放罐,放罐操作同取样。

排放液需灭菌处理才可进入下水道
5、清洗
放罐后,将发酵罐清洗干净,关闭所有电源
6、粗提
用浓硫酸将发酵液pH调至谷氨酸的等电点(pH3.15),用等电点法进行谷氨酸的粗提。

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