国内的溶菌酶的应用与发展
溶菌酶在治疗细菌、真菌等感染性疾病的应用
溶菌酶在治疗细菌、真菌等感染性疾病的应
用
溶菌酶具有广泛的抑菌谱，对革兰阳性菌、革兰阴性菌、真菌等致病微生物均有不同程度的抑制作用，已应用于口腔、五官、上呼吸道、皮肤、泌尿生殖系统感染性疾病的治疗。
据文献报道，溶菌酶可有效地治疗龋齿、口腔溃疡、牙周炎、复发性口疮、白念珠菌感染口炎等疾病。
陈楷正和韩剑星等分别研究了生物溶菌酶辅助治疗婴幼儿和小儿鹅口疮的疗效，两项研究结果显示，制霉菌素、特比萘芬分别与生物溶菌酶合用比单独使用治疗效果好，且起效快，病程缩短。
张昱观察了含服溶菌酶含片对小儿急性扁桃体炎治疗的临床效果，研究结果显示常规青霉素治疗加含服溶菌酶含片比常规青霉素治疗疗效显著提高，溶菌酶的辅助治疗可以降低因长期服用青霉素而产生的耐药性。
张琇等报道，溶菌酶对革兰阳性菌（金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、变形链球菌等）、革兰阴性菌（大肠埃希菌、铜绿假单胞菌）及真菌（白念珠菌）均有抑制作用，其广谱的抗菌作用解决了现有抗菌药物抗菌谱窄的问题。
同传统抗菌药物比较，溶菌酶具有更广的抗菌谱和更高的敏感性，尤其是对多重耐药菌株和真菌具有优势。
此
外，溶菌酶还能降低头孢菌素对某些致病菌致炎活性物质的释放，减轻内毒素血症。
鸡蛋溶菌酶蛋白片加工技术及发展前景
鸡蛋溶菌酶蛋白片加工技术及发展前景鸡蛋是人类不可缺少的重要营养食品之一，也是一种值得深加工的产品。
随着科学技术的发展，人们对鸡蛋的认识也由简单食用发展到对鸡蛋的深加工和生物提取。
从鸡蛋中得到全蛋粉、蛋黄粉、蛋白粉、蛋白片、蛋清低聚肽、卵磷脂、蛋黄免疫球蛋白、溶菌酶、醋酸钙、鞣酸蛋白、柠檬酸钙、卵膜素、蛋黄油等提取物。
其在现代食品业、生物工程、医药业、保健品及美容化妆业、工业和军事业都有广泛的用途，发挥着有益而独特的作用。
这里仅谈谈溶菌酶和蛋白片加工技术及发展前景。
1.市场分析和发展前景我国鸡蛋生产量虽大，但其加工技术水平低，尤其鸡蛋产品中高附加值天然产物高效提取技术与产品开发技术水平很低，致使鸡蛋产品成为低附加值的商品，制约了养禽业的发展。
因此，通过研究提高我国鸡蛋产品中高附加值天然产物高效提取技术与产品开发技术水平，提高鸡蛋产品的商品价值，真正使鸡蛋加工业成为畜牧产业的龙头，推动养禽业快速发展，增加我国鸡蛋产品在国际市场的竞争力。
1.1 溶菌酶溶菌酶又称胞壁质酶或N-乙酰胞壁质聚糖水解酶，为白色结晶粉状固体，无味、无毒、易溶于水，可作为生物催化剂。
广泛存在于动物组织和分泌物中，以鸡蛋清中最丰富，其含量的占蛋清总量的3.4%-3.5%。
溶菌酶具有广泛用途，极高附加值，经济效益可观，前景看好，其主要应用有：在食品工业上的应用：可用做食品防腐剂;溶菌酶是婴儿生长发育必不可少的抗菌蛋白;溶菌酶为双歧杆菌的增殖因子，直接或间接促进婴儿肠道双歧乳杆菌的增殖，促进婴儿胃肠道内乳酪蛋白形成微细凝乳，有利用婴儿消化吸收。
在医药临床上的应用：溶菌酶能参与人体的多糖代谢，加速粘膜组织的修复，并具有抗感染、抗细菌、抗病毒的作用;它能分解粘厚蛋白，降低脓液或痰液的粘度使之变稀而排出;它能与血液中的抗凝因子结合，具有止血作用，还能提高抗菌素和其它药物的医疗效果。
在生物工程上的应用：溶菌酶具有破坏细胞壁结构的作用，用它溶解菌体或细胞壁可获得细胞内容物(如原生质体等)，可用于细胞融合或原生质体转化以达到育种或生产蛋白质的目的。
溶菌酶作为抗生素替代品在饲料中的应用
溶菌酶作为抗生素替代品在饲料中的应用
溶菌酶是一种具有溶菌作用的酶类物质，能够破坏细菌细胞壁，使细菌失去生存能力。
溶菌酶作为抗生素的替代品，在饲料中的应用越来越受到重视。
本文将重点介绍溶菌酶作
为抗生素替代品在饲料中的应用。
1. 抗菌作用：溶菌酶可以破坏细菌的细胞壁，使细菌失去生存能力。
将溶菌酶添加
到饲料中，可以起到一定的抗菌作用。
研究表明，溶菌酶对多种细菌都具有较强的抗菌活性，可以有效地抑制细菌的生长和繁殖，减少对动物的感染风险。
2. 提高饲料利用率：饲料中添加溶菌酶可以增加动物对饲料的消化吸收率，提高饲
料利用效率。
溶菌酶可以破坏饲料中的细菌细胞壁，释放细菌细胞内的营养物质，使其更
易于被动物吸收。
溶菌酶还可以促进动物的消化功能，增强消化道蠕动，进一步提高饲料
的利用率。
4. 降低抗生素使用量：溶菌酶作为抗生素的替代品，可以降低饲料中抗生素的使用量。
抗生素的滥用和过度使用不仅容易导致细菌耐药性的产生，还对人类和动物健康造成
潜在的风险。
而溶菌酶具有抗菌作用，可以替代抗生素的使用，减少抗生素对动物及人类
健康的危害。
溶菌酶作为抗生素的替代品，在饲料中的应用具有明显的优势。
通过抗菌作用，提高
饲料利用率，改善动物健康状况，以及降低抗生素的使用量，溶菌酶可以为饲料生产提供
一种可行的替代方案。
未来，随着对溶菌酶作用机制的深入研究，溶菌酶的应用前景将更
加广阔。
溶菌酶
眼泪中的溶菌酶能杀死细胞壁
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溶菌酶的分离与提纯
溶菌酶的纯化
离子交换层析法：离子交换层析（IEC）是基于 待分离物质的酸碱性、极性等差异，它们与离子 交换剂的亲和力不同，通过离子之间的吸附和脱 吸附而将各组分依次从层析柱中洗脱下来，从而 达到分离目的。 聚丙烯层析柱、 CM Sepharose FF（快速羧甲 基琼脂糖凝胶）、 0.5 M NaCl洗脱溶菌酶、用考 马斯亮蓝G-250检测杂蛋白的洗脱情况。
bacteria)]的细胞壁多糖是N-乙酰氨基葡糖（Nacetylglucosamine, NAG）-N-乙酰氨基葡糖乳酸 （N-acetylmuramic acid, NAM）的共聚物，其中 的NAG及NAM通过β-1，4糖苷键而交替排列。溶 菌酶对于破坏G+细菌的细胞壁较G-细菌强。 ）
溶菌酶是一种葡糖苷酶，作用底物是几丁质。 溶菌酶的内部几乎全部是非极性的 (nonpolar) 。疏水的相互作用在溶菌酶的 折叠构象中起重要作用。在溶菌酶分子的表 面，有一个比较深的裂缝，其大小恰好能容 纳多糖底物的6个单糖，这是溶菌酶的活性 部位。活性部位所在的裂缝(cleft)正好被6 个糖残基所装满，水解部位只能发生在D-E 之间。
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来源
最早对溶菌酶的研究起于 1907 年发表的枯草芽孢杆菌中的溶解 子,1922年，在人的唾液、眼泪 中存在有能够溶解细胞壁杀死细 菌的酶,因而被命名为溶菌酶。 1937年从卵蛋白中分离出溶菌 酶晶体,揭开了研究溶菌酶的历 史篇章。1965年,英国的菲利普 等用X衍射法对溶菌酶进行研究 分析,第一个完全弄清了溶菌酶 的立体结构。
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应用
溶菌酶在食品工业中的应用
替代有害人体健康的化学防腐剂（如苯甲酸及其 钠盐等），以达到延长食品货架期的目的 溶菌酶可以作为婴儿食品的添加剂，主要用于牛 乳的“人乳化”（尤其在欧洲）。 溶菌酶是一种无毒、无害的高盐基蛋白质，且具 有一定的保健作用，有抗感染和增强抗生素作用 效力，促进血液凝固及止血作用，有组织再生作 用。可以在保健食品中添加一定量以提高保健效 果。
溶菌酶作为抗生素替代品在饲料中的应用
溶菌酶作为抗生素替代品在饲料中的应用随着饲料行业的发展，越来越多的人开始关注饲料中的抗生素使用问题。
因为长时间的过度使用会导致抗药性菌株的产生，从而危及人类健康和动物健康。
因此，寻找一种能够替代抗生素的安全、有效的饲料添加剂是非常必要的。
而溶菌酶就是一种备受关注的替代品。
溶菌酶是一种能够溶解细菌壁的酶，它可以针对多种细菌进行杀菌，不仅对革兰氏阳性菌有杀菌作用，而且对一些革兰氏阴性菌也有很好的抑制作用，对肠道中的致病菌如沙门氏菌、大肠杆菌和弧菌等有很好的控制效果。
而且，溶菌酶对于肠道有一定的修复作用，可以改善肠道健康状况。
因此，在酿酒业、食品工业、医药工业以及动物饲料等领域中都有着广泛的应用前景。
在动物饲料中，溶菌酶可以用于代替传统的抗生素应用。
溶菌酶最初在禽类饲料中得到了广泛的应用，能够显著地降低育肥期间禽类的死亡率和完整性发病率，同时对肠道菌群的结构和肠道健康有良好的调节作用。
由于禽类相对于哺乳动物具有更短的消化道，因此禽类动物对溶菌酶的快速吸收和利用能力较强。
近年来，随着对斑马鱼和猪这些哺乳动物中溶菌酶作用的研究逐步深入，表明溶菌酶的应用也在这些动物中得到了一定的推广。
饲料添加溶菌酶的优势是多方面的。
首先，溶菌酶是一种天然的抗生素替代品，因此不会引起人畜残留问题和药物抗性。
其次，与抗生素相比，溶菌酶作用于细菌结构的外部，不与细菌体内的物质产生作用，因此不会像抗生素那样引起抗药性菌株的产生。
此外，溶菌酶不会破坏对有益菌群的调节作用，在降低有害菌的同时，可促进有益菌的生长和繁殖。
最后，溶菌酶的作用范围广泛，性价比高，在饲料加工中稳定性和适用性也比较好，添加溶菌酶后，动物的生产效益可得到显著提高。
虽然溶菌酶在饲料中的应用前景十分广阔，但是其中也存在一些问题需要注意。
尽管溶菌酶是一种天然和安全的饲料添加剂，但是高浓度的溶菌酶也会对动物消化道中有益菌产生影响，可能影响肠道微生态平衡。
此外，在摄入相同量的溶菌酶的情况下，不同类型和生长阶段的动物对其的吸收和利用效果可能存在差异，因此需要对不同种类和生长阶段的动物进行较为细致的研究。
溶菌酶的研究及其在医药领域中的应用
溶菌酶的研究及其在医药领域中的应用第一章：概述溶菌酶是一类广泛存在于许多生物体内的酶，主要作用是溶解和破坏细菌细胞壁，使其裂解。
由于溶菌酶具有很强的杀菌作用，因此在医药领域中有广泛的应用价值。
第二章：溶菌酶的分类根据来源不同，溶菌酶可以分为植物溶菌酶、细菌溶菌酶和动物溶菌酶等。
其中植物溶菌酶主要存在于植物种子、芽和根的细胞壁中，细菌溶菌酶则是许多细菌重要的代谢产物，动物溶菌酶则存在于动物体内的多种组织和液体中。
第三章：溶菌酶的作用机制溶菌酶能够作用于细菌的细胞壁，使其发生裂解。
溶菌酶能够与细菌细胞壁中的N-乙酰葡萄糖胺（NAG）和N-乙酰葡萄糖酸（NAM）发生结合，进而断裂NAM-NAG多肽链，使细胞壁的完整性发生破坏，最终导致了细菌的裂解。
第四章：溶菌酶在医药领域中的应用由于溶菌酶具有很强的杀菌作用，因此目前已经被广泛应用于医药领域中。
具体应用包括以下几个方面：1. 抗感染治疗由于溶菌酶能够破坏细菌的细胞壁，因此已经被广泛应用于抗感染治疗中。
例如，在治疗肺炎、鼻炎等疾病时，可以通过使用含有溶菌酶成分的药物来加速细菌的消灭，从而达到治疗的效果。
2. 保健品制造近年来，随着人们对保健品的需求日益增加，溶菌酶也被广泛用于保健品的制造过程中。
溶菌酶具有促进免疫力、排毒以及对细菌和病毒的抵抗等作用，可以提高人体的免疫力，使人体更加健康。
3. 食品加工业除了医药领域之外，溶菌酶还被广泛应用于食品加工领域中。
例如，在酿造啤酒的过程中，可以添加溶菌酶来加速麦芽中孢子的裂解，进而提高麦芽的质量和酿造啤酒的效率。
第五章：结论作为一种具有很强杀菌作用的酶，溶菌酶在医药、保健品以及食品加工领域中都有广泛的应用价值。
随着科学技术的不断发展，溶菌酶的应用前景也将越来越广阔。
溶菌酶及其在畜牧生产上的应用
溶菌酶及其在畜牧生产上的应用
溶菌酶是一类能够溶解菌壁的酶类物质，它具有广泛的应用价值。
在畜牧生产中，溶菌酶可以用作饲料添加剂，以提高动物的饲料利用率和增强其消化功能。
溶菌酶的作用机制是通过分解细菌细胞壁中的多糖和蛋白质，从而使细菌壁受到破坏，达到杀菌的效果。
同时，溶菌酶还可以促进动物肠道中有益菌的生长，提高肠道健康状况，增强机体免疫力。
在畜牧生产中，溶菌酶被广泛应用于饲料添加剂中，以提高饲料利用效率和增强动物的消化功能。
这是因为溶菌酶可以加速饲料中的大分子多糖的降解，从而提高饲料的可消化性。
同时，溶菌酶还可以减少因为饲料不良造成的消化不良和腹泻等问题，从而提高动物的生产性能。
另外，在动物饲养过程中，肠道微生态平衡的破坏往往导致消化不良和免疫力下降等问题。
溶菌酶可以通过抑制有害细菌的生长，促进有益菌的繁殖，从而有助于维持肠道微生态平衡，提高动物的健康水平。
总之，溶菌酶在畜牧生产中发挥着重要的作用，可以提高动物的饲料利用率，增强消化功能，维护肠道健康和提高免疫力。
生物制药技术中的溶菌酶和抗生素应用
生物制药技术中的溶菌酶和抗生素应用在生物制药技术中，溶菌酶和抗生素是两个重要的工具，它们在医药领域发挥着重要的作用。
溶菌酶是一种具有分解细菌细胞壁的酶类物质，而抗生素则是一类可以抑制或杀灭细菌的化合物。
它们的应用范围广泛，包括治疗感染性疾病、生产抗生素药物以及在食品安全领域的应用等。
首先，让我们来了解一下溶菌酶在生物制药技术中的应用。
溶菌酶可以通过降解细菌细胞壁，使其发生溶解。
由于细菌细胞壁是细菌生存的重要结构之一，因此溶菌酶可以作为一种抗菌剂来杀灭细菌。
特别是在抗菌药物耐药性问题日益突出的今天，溶菌酶成为了一种新的治疗选择。
溶菌酶可以通过多种途径应用于临床。
例如，溶菌酶可以直接应用于治疗皮肤和黏膜感染，如细菌性阴道炎、厌氧性感染等。
其疗效显著，且无耐药性，是一种良好的选择。
此外，溶菌酶还被广泛应用于食品安全领域。
细菌污染是造成食品中毒的一个主要原因。
而使用溶菌酶可以迅速降解细菌细胞壁，使细菌失活，减少食品中的有害菌。
这种方法不仅能保持食品的天然品质和口感，还能确保食品质量的安全。
目前，一些国家已经将溶菌酶应用于食品加工行业，获得了很好的效果。
另外一个在生物制药技术中应用广泛的工具是抗生素。
抗生素是一类可以杀菌或抑制细菌生长的化合物。
它们可以从自然界中提取，也可以通过化学合成获得。
抗生素的应用涉及到多个领域。
首先是临床医疗领域。
抗生素被广泛用于治疗细菌感染，如肺炎、尿路感染、皮肤感染等。
通过抑制细菌生长或杀死细菌，抗生素能够迅速缓解患者的症状，加速疾病康复。
另外，抗生素也广泛应用于抗生素药物的生产和研究领域。
抗生素药物是一类通过生物发酵或化学合成制备的药物，用于治疗细菌感染。
通过研究和改造抗生素分子结构，科学家们不断开发出新的抗生素药物，并改进已有的药物性能，以应对细菌耐药的挑战。
同时，抗生素的生产也是一个庞大的产业，能够提供大量就业机会，促进经济发展。
值得注意的是，随着抗生素的广泛使用，细菌耐药性问题日益突出。
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- -- - . -考试资料- 国的溶菌酶的应用与发展
溶菌酶,又称胞壁质酶。球蛋白G、N - 乙酰胞壁质聚糖水解酶。最早对溶菌酶的研究起于 N icolle 1907 年发表的枯草芽孢杆菌中的溶解子,1922年 Flem ing等发现,在人的唾液、眼泪中存在有能够溶解细胞壁杀死细菌的酶,因而被命名为溶菌酶 [1] 。1965年,英国的菲利普等用 X衍射法对溶菌酶进行研究分析,第一个完全弄清了溶菌酶的立体结构 [ 2 ]。此后人们发现溶菌酶广泛地存在于高等动物组织及分泌物，植物及各种微生物中,其中在新鲜的鸡蛋清中含量最高。溶菌酶可选择性地分解微生物细胞壁的同时不破坏其它组织,且本身无毒无害,因而它是一种天然的安全性能很好的杀菌剂,防腐剂,将可应用于食品防腐、医药制剂 日用化工等行业。在我国,溶菌酶的应用围和应用量还比较有限,但可以预计，溶菌将会是应用于我国食品工业中一种重要的功能性食品添加剂。 溶菌酶的结构特点和抗菌作用机制结构特点与复杂性 大多数鸡蛋清溶菌酶是由129个氨基酸组成的碱性球状蛋白 ,相对分子量在14000 ～18000。其等电点可达 10 7,存在 4 个二硫键。正常条件下溶菌酶作用的最适温度为45℃～50 ℃。蛋清溶菌酶在低温干燥下可长期保存。其纯品为白色粉末状结晶,无臭、味甜 ,易溶于低浓度的食盐水。在碱性条件下易被破坏,但在酸性溶液中其化学性质稳定,热稳定性很强 ,在 pH4 ～7 时,100℃下处理1m in 酶仍保持良好的活性,在pH3时,100℃加热处理 45m in 仍能保持活性 {3}。溶菌酶在水溶液中6215 ℃下,维持30min则完全失活,在20- -- - . -考试资料- 15%的乙醇中,在 6215 ℃下维持 20m in而不失活[4]。王玮等[5]研究表明。在一元醇和二元醇溶液中溶菌酶分子的稳定性均随着醇浓度的增大而提高。人溶菌酶分子量为14600,由130个氨基酸组成 ,也存在4个二硫键,其酶活性比鸡蛋清溶菌酶高2倍左右。在生产或应用溶菌酶时,由于工艺或环境的变化,极易造成酶的变性失活,因此必须采取一定的手段使蛋白复性，减少损失。史晋辉等[7]研究发现 ,当酶浓度较低时,017mol/L 的盐酸胍即可使溶菌酶完全复性。此外 , 溶菌酶和其它酶具有相似的性质 , Karupp iah等[8]研究表明,向复性溶液中加入适量的β- 环糊精,可使变性的碳酸脱水酶的复性率达到80% 。董晓燕等[9]利用β-环糊精和十六烷基三甲基溴化的联合作用,在适宜盐酸胍浓度下,溶菌酶可完全复性。王彦等利用离子交换色谱法研究发现,当复性缓冲液中不含其它盐类时,脲浓度为 210mol/L时复性产率最高,当脲浓度高时,硫酸铵能很好地提高溶菌酶的复性回收率。 溶菌酶的抗菌作用机制 目前已知的几种溶菌酶有:- N -乙酰己糖胺酶、酰胺酶β-1,3、β-1,6葡聚糖酶和甘露聚糖酶、几丁质酶、磷酸甘露糖酶脱、乙酰壳多糖酶[11]。参与细菌细胞壁溶解作用的溶菌酶大致可分为作用于糖苷键和作用于肽和酰胺部分的两类。- N -乙酰己糖胺酶、β- 1, 3、β 1, 6葡聚糖酶等主要作用于糖苷键,使糖苷键断裂,破坏细胞壁的分子结构,而酰胺酶等则主要作用于多肽,使多肽断裂。以 - N - 乙酰己糖胺酶为例,- N-乙酰己糖胺酶能够催化水解细胞壁肽聚糖分子中的 - -- - . -考试资料- N-乙酰胞壁酸(NAM )与 N-乙酰葡萄糖氨(NAG)之间的β- 1, 4糖苷键,使肽聚糖分子发生断裂,使细胞壁外两侧渗透压失衡,造成细胞破裂,导致微生物因细胞壁溶解而被杀死[12]氏阳性菌由于两者细胞壁中肽聚糖含量不同而存在差异,G+细胞壁含80%肽聚糖,而 G-细胞壁只有在壁层含有少量肽聚糖。 结晶法是传统的提取溶菌酶的方法,此方法原料易得,制备过程不是很烦琐。起先 M ayerAbraham 等研究并利用此法,于1937年获得结晶状物质[13],1945年A lderton等提出直接结晶法制备溶菌酶的方法[14]。景芝等[15]对传统结晶法做出了改进,通过调整透析液 pH 值 ,加入磷酸盐,再调整其pH 值,然后离心去除杂质得到纯化液,使产率提高,活性增加。 离子交换层析法 离子交换层析法是根据各种蛋白质所带电荷数的不同而与离子交换剂之间结合力的差异,进而将不同蛋白质分离的技术。该法应用于溶菌酶分离始于 80年代,由于其操作简便、高效、成本低、可自动化连续操作的优点,一直以来都是溶菌酶生产的常用方法[16]。目前国外常用的离子交换剂有 Duolite - 464、724、732弱酸性阳离子交换树脂、D903、201 大孔离子交换树脂、羧甲基纤维素 ( CMC ) 和羧甲基琼脂糖等[17]。宋宏新等[18]采用 724树脂,装柱后抽提液缓慢流入柱中,用缓冲液洗涤，再用硫酸铵洗脱,结果表明724树脂的吸附率达到8315%。由于Duolite - 464非常适合于连续自动化操作,因此利用它来分离纯化溶菌酶,可取得较高的产率。如LiChan等 [19]用- -- - . -考试资料- Duolite-464从性质均一的蛋清溶液中分离溶菌酶,使溶菌酶的回收率达 90 % ～ 95 %。 亲和层析法 亲和层析法是根据酶与作用底物的特异性亲和能力,利用酶分子独有的专一性结合位点或结构性质的分离方法 [ 20 ] 。它的应用始于
上世纪70年,由于底物可以专一性与溶菌酶结合,进而与其它蛋白分离,是一种高效的分离方法。目前利用亲和层析法分离溶菌酶的报导很多,如HeLZ等[21]采用多步亲和层析法分离纯化溶菌酶,结果表明,利用三亲和过滤系统从原料中纯化溶菌酶,与一步法相比产率从 61%提高到96%。 超滤 超滤是一种新兴分离纯化技术,利用控制超滤膜孔径大小来滤过杂质,水及小分子物质可以通过,从而获取产物。在反渗析及浓缩等工艺中广泛应用,同时在蛋白质分离中应用也开始兴起。与传统生化分离技术相比,它的优点是产品的产出量高、杂质少、纯度相对较高。在 2000年,GhoshR等[22]采用小型的中空纤维超滤系统( 30 kDa MWCO , 聚砜膜)从蛋清干粉中分离溶菌酶,溶菌酶选择性透过膜,而其它大分子蛋白质被膜所截留。溶菌酶的粗提液经过超滤技术后,有时部分杂质如无机离子等未能全部除去若将超滤与结晶法,或是与离子交换法等结合将取得精制溶菌酶。邹艳丽等[23]报道,超滤浓缩溶菌酶经CM - Sepharose FF阳离子交换柱后,纯度提高2119倍。灏等[24]研究表明,将磷酸盐缓冲液稀释10倍,在24M Pa下均质,利用截留- -- - . -考试资料- 相对分子质量为30000的聚醚砜( PES)膜进行超, 溶菌酶制品活力达到 14610u /mg 溶菌酶活性的测定 目前,国外对溶菌酶活性的测定方法,主要有比浊法、紫外分光光度法、比色测定法、琼脂火箭糖电泳法和高效液相色谱法等,但上述各种方法中均存在一定的缺点,如比浊法干扰因素多,重复性差,对单个样品测定速度快,比色法操作简单但误差较大,因此,各种方法都在不停改进中。传统方法测定溶菌酶活性时要将溶微球菌制成冻干粉,此过程不仅步骤烦琐而且易造成细菌大量死亡,影响结果。玉萍等 向溶壁微球菌直接加保护剂(20%的甘油)置于普通采取了类似的方法。采用聚苯乙烯微量反应板,建立了微量快速比浊检测溶菌酶的方法, 使标本用量减少,反应时间缩短,灵敏度较好。近年来,许多报道采用标记乙二醇化几丁冰箱冷冻,使用时解冻,读第1min的吸光度值和第 2min的吸光度值即可。使溶菌酶的测定方法更加节约高效,准确性又好。 溶菌酶在食品、生物医药等工业中的应用 溶菌酶作为一种天然蛋白质 , 能在胃肠被消化和吸收 , 对人体无毒害作用 ,是一种安全系数很高的食品保鲜剂、营养保健品和药品。由于溶菌酶具有良好的理化特性 , 具有一定的保健作用 , 如在化妆品中用可消除粉刺 , 使皮肤滑嫩 ,促进皮肤的新代; 有止血 , 促进组织再生的作用 , 如在牙膏中添加可防止牙龈出血、保护牙龈并具有杀菌作用。因此溶菌酶的应用领域非常广泛 , 在食品、- -- - . -考试资料- 医药、生物工程等方面都具有很大的应用前景。此外,溶菌酶除作为医药原材料外,仅在食品防腐、强化方面市场就比较可观 , 如乳制品、肉制品、酒类发酵、水果防腐等方面。随着对溶菌酶的研究的深入和应用产品的不断开发,溶菌酶一旦被人们认识接受,其对市场的占有率将大幅提高。 溶菌酶在食品中的应用溶菌酶在乳制品中的应用 人乳与牛乳的最大差别之一在于溶菌酶的含量,在欧洲溶菌酶已经广泛用于婴儿食品添加剂,将一定量的溶菌酶添加到牛乳及其制品中 ,使牛乳人乳化,能够强化血清灭菌蛋白,γ-球蛋白等防御因子,抑制肠道中腐败性细菌的增殖,增强婴儿对病菌的抵抗力。因此,在牛乳或奶粉中添加一定量溶菌酶,不但防腐,而且强化营养,有利于婴儿健康成长。此外,在奶酪产业溶菌酶也被广泛使用,如在干酪生产中替代硝酸盐,加入 01001%的溶菌酶,可防止干酪产气,保持香味物质丁酸。德国于1995年11月22日发布了奶酪法规,批准使用溶菌酶来阻止在半硬奶酪的生产中由厌氧孢子增殖所引起的胀气现象。 溶菌酶在肉制品中的应用 低温肉制品由于口感鲜嫩,营养丰富,获得消费者的喜爱。但由于肉类冷藏的温度,并不能彻底杀死微生物或抑制其生长,因而保鲜期短,不能满足消费者需求。溶菌酶本身无毒、无害 ,可替代如苯甲酸及其钠盐等化学防腐剂添加到肉制品中,能有效延长食品保质期。 采用0105%溶菌酶和 0105% N isin 混合液保鲜猪肉,4℃下可保鲜 12d,真空包装保鲜期可达 24d。在此基础上添加了18% NaCl和415%