轮状病毒发现与检测
SOP034A群轮状病毒

A群轮状病毒检测SOP文件一、检验目的本试纸剂应用免疫层析法原理定性检测大便之中A群轮状病毒,适用于临床婴幼儿腹泻A群轮状病毒感染的辅助诊断。
二、检测原理:本试剂盒采用免疫层析双抗体夹心法,在硝酸纤维薄膜上的检测区被A群轮状病毒抗体,同时用胶体金标记A群轮状病毒单克隆抗体。
检测时,如果样品中有A群轮状病毒时,样品中的病毒与检测卡前端的“胶体金-抗体”结合,形成免疫复合物,复合物沿膜带层析移动,并在包被了抗体的检测区出现一条红色线,判读为阳性;如样品中不含A群轮状病毒时,检测区不会出现红色线,判读为阴性。
三、样品采集:当日新鲜大便上清液。
四、试剂:北京万泰生物药业股份有限公司A群轮状病毒检测试剂盒五、检测方法:1.旋开滴管,取出采便勺,从便中收取一勺,取后抹平勺面,放入装有样品稀释液的滴管中,旋紧滴管。
2.震动混匀,折断滴管盖帽。
3.将测试卡平方在干燥的平面上。
4.垂直缓慢的滴加2-3滴混悬液后的样品至测试卡加样端中心。
5.5-10分钟内判读结果,结果判读不可以超过10分钟。
六、结果判读:复合物沿膜带层析移动,并在包被了抗体的检测区形成一条红线,判读为阳性;如果样品中不含A群轮状病毒时,检测区不会出现红色线,判读为阴性。
七、质量控制:1.试剂应该平衡在室温下20分钟后,再打开铝箔袋使用。
在室温条件下,测试卡取出后应该在20分钟内使用完,以免影响测试结果。
2.不要使用放置时间过长,长菌,有异味的样品。
样品过于粘稠可以用样品稀释液稀释后离心再取上清液滴入加样端中心测试。
3.实验时,检测卡应该放平。
以免造倾斜造成层析速度过快或过慢,影响检测结果。
4.滴加样品稀释液不可过多或过少,均可影响检验结果的准确性。
5.在规定时间内观察结果,时间过长或过短,均影响检测结果。
八、结算方法:九、生物参考区间:阴性十、操作性能:十一、超出可报告范围的处理:十二、危急值:十三、干扰因素:十四、临床意义:适用于临床婴幼儿腹泻A群轮状病毒感染的辅助诊断。
轮状病毒检测试剂说明书

轮状病毒是一种常见的肠胃病毒,可引起腹泻、呕吐、腹痛等症状。
轮状病毒检测试剂是一种用于检测轮状病毒的试剂盒,以下是其说明书的概述。
产品名称
轮状病毒检测试剂盒
产品原理
本试剂盒利用免疫层析法检测人体样品中的轮状病毒抗原,并通过结果的颜色变化判定是否存在轮状病毒。
其中,试剂盒的主要成分包括试剂盒条、样本处理盒、稀释盒等。
检测流程
将待测样品收集到样本处理盒中;
添加几滴稀释液进行稀释,充分混合后,将混合物放置于试剂盒条的样本孔上;
等待10-15分钟,待结果出现后,使用结果对照表判断检测结果。
注意事项
试剂盒仅供专业技术人员使用,避免直接与样本接触。
样本处理过程中需佩戴手套、护目镜等个人防护用具。
试剂盒开封后需在有效期内使用,过期试剂盒使用可能导致结果不准确。
试剂盒储存温度应在2-8℃之间,避免阳光直射和冷冻。
结果解释
根据试剂盒提供的结果对照表,判断检测结果的阳性、阴性或无效。
总结
轮状病毒检测试剂盒是一种快速检测轮状病毒的诊断试剂盒,操作简单,结果明确。
但其检测结果仅供参考,需与其他临床资料一起综合分析,最终由专业人士进行诊断和治疗。
婴幼儿腹泻轮状病毒检测及结果分析

婴幼儿腹泻轮状病毒检测及结果分析一、概述腹泻是指排便次数增多、粪便疏松、水样或黏液血便的症状。
在婴幼儿中,轮状病毒是导致腹泻的主要病原体之一。
轮状病毒(Rotavirus,RV)是一种双链RNA病毒,属于轮状病毒科,包括7种血清型(G1~G4、G9~G11),其中G1、G2和G3分别为临床上较为常见的三个亚型。
RV感染多发生在6个月到2岁的婴幼儿中,是导致婴幼儿腹泻的主要原因之一。
因此,早期发现并诊治婴幼儿轮状病毒感染非常重要。
本文将介绍婴幼儿轮状病毒检测及结果分析的相关知识。
二、检测方法1. 肠道病毒培养法肠道病毒培养法是传统的病毒检测方法之一,包括传统培养法和快速培养法。
传统培养法需要3~7天才能获得结果,一般只适用于研究目的。
快速培养法和传统培养法相比具有更高的灵敏度和特异性,且可以在1~2天获得结果,但仍需要技术人员有丰富的操作经验才能获得准确的结果。
2. 免疫学检测法(1)酶联免疫吸附试验(ELISA)轮状病毒ELISA检测法是一种简单、快速、经济的方法。
该方法以特异性的抗轮状病毒抗体为探针,检测样本中的轮状病毒抗原。
该方法操作简便,成本低廉,适用范围广,但灵敏度和特异性不如PCR法。
(2)荧光抗体检测法(FA)荧光抗体检测法是一种快速的免疫学检测方法,它同样以抗体或探针为基础进行检测。
相比ELISA,FA法具有更高的灵敏度和特异性,且可以检测多种病毒。
3. 分子生物学检测法(1)聚合酶链式反应(PCR)PCR是一种灵敏、特异且可重复的检测方法,能够对低剂量病毒进行检测。
PCR法的灵敏度高,能够检测到病毒抗原在样本中的微量存在,同时可对病毒血清学分型,有助于了解不同血清型的轮状病毒在流行病学意义上的分布情况。
(2)实时荧光定量PCR(qPCR)qPCR技术结合PCR技术和荧光测定技术,其结果可以快速、准确地分析并定量RNA分子的数目。
相比传统PCR技术,qPCR具有较高的灵敏度和特异性,且能够快速、准确、定量检测病原体。
猪轮状病毒如何诊断和治疗?

猪轮状病毒如何诊断和治疗?畜牧堂徐老师为你,讲解该疾病的治疗预防:猪轮状病毒怎么治疗?对症治疗:饮水中补充营养。
用葡萄糖甘氨酸溶液(葡萄糖22. 5克、氯化钠4. 75克、甘氨酸3. 44克、柠檬酸0.27 克、枸橼酸钾0.04克、无水磷酸钾2. 27克配于1000毫升水) 或葡萄糖生理盐水自由饮用;停乳、止泻、抗菌。
止泻可用收敛剂如鞣酸等,抗菌可用抗生素和磺胺类药物以防止继发感染;补液,以防脱水和酸中毒,可静脉注射5% ~ 10%的葡萄糖生理盐水或3% ~ 10%的碳酸氢钠溶液。
猪轮状病毒病如何诊断?主要发生于哺乳期的仔猪。
病猪开始出现厌食,精神沉郁,继而出现下痢,粪色暗黑或黄白色,较腥臭,持续2-4天个别猪出现呕吐。
病猪消瘦、脱水,若无继发感染,病死率不会超过l0%。
症状的轻重取决于发病猪的日龄、免疫状态和环境条件,缺乏母原抗体保护、出生后几天的仔猪症状**重。
环境温度下降或继发大肠杆菌病时,常使症状加重,病死率增高,可高达100%。
通常10-21日龄仔猪的症状较轻,腹泻数日即可康复,3-8周龄仔猪症状更轻,成年猪为隐性感染,一般不发病。
实验室诊断(l)镜检:在普通显微镜下,可以见到小肠绒毛的萎缩。
除猪轮状病毒感染外,猪传染性胃炎、猪流行性腹泻也有绒毛的萎缩现象。
(2)免疫荧光技术:采集发病早期的小肠,刮取小肠绒毛做压抹片,丙酮固定后用猪轮状病毒荧光抗体染色,可以在绒毛上皮细胞的胞浆内见到特异的荧光。
本法是目前国内外**常用,也是**快的常规检查技术。
(3)elisa技术:除了可以检查抗原外,常用于抗体效价的检测。
国内已研制出了猪轮状病毒的免疫荧光和elisa诊断试剂。
(4)rt-pcr技术:灵敏度高,是常用的新技术,但单个猪场使用的成本较大。
猪轮状病毒病的综合防控1、灭活苗于产前30天,交巢穴注射2毫升;仔猪于7日龄和21日龄各注射1次,每次每头注射0.5毫升。
弱毒苗于临产前5周和2周分别肌肉注射1次,每次每头1毫升。
人类轮状病毒

• 疫苗尚在研制中
二、生物学性状
• 病毒颗粒呈球形,为双链RNA病毒,径约 为60-80nm。外被双层衣壳包裹蛋白核心, 外壳辐射呈车轮状。
• 较强抵抗力,在粪便中可存活数日到数周, 耐乙醚、耐酸碱。55℃加热30min可灭活。
Vp1~Vp7及五个非结构蛋白。根据衣壳蛋白组特异性抗原 Vp6不同,可分为七个血清型(A~G)。儿童感染多为A型。
如何应对轮状病毒感染
1.改善卫生状况 2.提高儿童营养 3.母乳喂养
4.临床治疗 5.口服補液治疗 6.疫苗接种
有助于疾病恢复,不能减少轮状病毒感染。 有效减少各种腹泻疾病,不能减少>8月 婴幼儿轮状病毒腹 泻。 临床治疗尚无特异有效的治疗药物,主要采用对症治疗。 不能有效救治重症患者,难以推广使用。
产品具有以下优势: 1、结果快速:独特膜处理工艺,样本爬升速度明显优于其它 品牌,5分钟即可判读结果。 2、组件独有:人性化设计,充分考虑取样实际情况,独家标 配勺型大便采集器和吸管,可轻松处理水样便、稀便等样本。 采便管密封严密,杜绝外泄。 3、储运方便:室温储存(4-30℃),有效期长达24个月。 4、性能优异:与进口乳胶凝集法相比,符合率达到99%以上。 5、操作简便:样本稀释后仅需1步操作,无需任何仪器,适 合家庭和各级医疗单位使用。 注:我公司腺病毒抗原检测试剂盒特点及试剂盒组成与“轮 状病毒抗原检测试剂盒”相同
传染源
• 腹泻患儿和无症状的带病毒者是主要的传 染源。
• 42%的RV感染是无症状的。
易感人群
5岁以下 的儿童几 乎人人都 遭受过轮 状病毒的 侵染。
传播途径
水源污染可造成 成人腹泻轮状病 毒的爆发流行
猪轮状病毒检测卡说明书(完整版)

猪轮状病毒金标检测卡使用说明书【简介】猪轮状病毒病是由猪轮状病毒(Porcine Rotavirus Infection ,RV)所致的一种幼龄猪急性消化道传染病。
仔猪感染后引起厌食、下痢、呕吐,中猪和大猪为亚临床症状或隐性感染。
轮状病毒主要存在于病猪及带毒猪的消化道,随粪便排到外界环境。
有些临床健康猪粪便也可检出病毒。
【检测原理】采用渗滤式免疫胶体金技术,利用金颗粒作为示踪剂,选择性捕捉标本中轮状病毒抗原。
斑点反应板上的固相单克隆抗体特异地与标本中的轮状病毒抗原结合形成复合物,胶体金标记的抗体再与复合物结合,形成肉眼可见的红色斑点。
【试剂及用品】●猪轮状病毒金法检测卡(50份)●一次性塑料滴管(50支)●塑料一次性手套(5只)●使用说明书(1份)【样品收集及准备】1、用生理盐水沾湿的棉签从直肠取样,或从新鲜粪便中直接取样;2、采集样品时注意多部位同时收集新鲜及有效样品,充分在试管中搅拌稀释;静置10分钟(建议离心3分钟)后,用一次性滴管取上清液;3、样品一般须当即进行检测,否则应冷藏保存,超过24小时的,应该冷冻保存。
【检测步骤】1、试纸条恢复室温;2、取出试纸,开封后平放在桌面,从滴管中缓慢而准确地逐滴加入2-3滴混合液。
3、加样品液后,红色的液体从靠样品孔的观察窗边缘涌出,朝另一方向流动。
4、5-10分钟后判断结果,半小时后结果判读无效。
【结果判定】阳性(+):当位置C显示出红色线条,而位置T同时显示出红色线条时,判为阳性。
阴性(-):当位置C显示出红色线条,而位置T不显色时,判为阴性。
无效:当位置C不显示出红色线条,则无论位置T显示出红色线条与否,均判为无效。
【注意事项】1.仅用作体外诊断。
2.注意样品具有潜在传染性,注意防止交叉感染。
3.该试纸及配套试管、棉签均为一次性产品,不可交叉及重复使用。
4.包装袋破损或产品过期请勿使用。
5.试纸2-8℃冷藏保存,勿要冷冻。
轮状病毒的快速检测与临床应用

前 两 季 。并且 以 0 2岁 的 婴幼 儿感 染 率 为最 高 , ~ 其 次 为 2 4岁 儿 童 . 随着 年 龄 的增大 轮 状病 毒 感染 率
降低
,
勺标 本f 10 )取 样后 抹 平 勺 面 , 人 装 有样 本 约 0 mg, 放
稀 释液 的滴管 中 , 紧滴 管 。 旋
第2 8卷 第 5期 21年 l 00 0月
实 验 与 检 验 医 学
EXP ERI MEN TAL AND A B0 I RAT 0RY MEDI I C NE
Vo .8 No5 1 . 2 0c. 0 0 t2 1
・
经验交 流 ・
轮 状 病 毒 的快 速 检 测 与 临床 应 用
黄 英 英 , 小 华 吴
( 西 抚 州 市 临川 区人 民医 院 , 西 抚 州 3 4 0 ) 江 江 4 0 0 中图 分类 号 R 4 . ,525 4 66 R 1. 2 文 献 标识 码 B 文 章 编 号 17 — 92 )5 0 8 一 1 6 4 12 (0 00 —4 2 O 1
11 一 般 资 料 本 院 2 0 ~ 0 9年 临 床 门诊 和 .1 . 0 8 20
住 院送 检 的 6 7例 腹泻 儿粪便 标本 检测结 果 其 中 1
0 2岁 5 3例 .~ 3 2 4岁 6 4例 , 4 7岁 2 0例 。
1 方法 . 2 .
3 讨论
从 我们 统 计 的数 据来 分 析 . 状 病毒 的感 染 呈 轮
严重 时 可导 致脱 水 和 电解质 平 衡紊 乱 . 生 素 治疗 抗 无效 . 能危 及 生命 本文 就 我 院 2 0 ~ 0 8年就 可 06 2 0
医 的腹 泻患儿 轮状 病毒 检测结 果进 行分 析
荷斯坦犊牛轮状病毒及其检测方法

包含 6 A n抗原 区, 个f~ 免疫 优势 区 A和 C形成 了单个构 象依 赖的位点 ; P V 4和 V 7决定 了病毒的毒 力。 P 存在与病毒衣 P V6 壳 内的结构蛋 白, 南第 6基因片段编码 , 在病毒粒子的装配中 发挥作用 ; 根据 V 6抗原不 同, R P 人 V可分 为 7组f~ ) A G 。用轮
要的功能是接触细胞膜 , 并且 穿透进入细胞 , 在穿透宿主细胞 中,它决定着宿主细胞的趋向性 和运 载蛋自酶敏感的血清特 异型 ;P在促细胞裂解酶的作用 F V ,裂解为增 强病毒感 染性
和 快 速 内 化 形 成 V 8 ̄ 对 分 子 质 量 为 2 00和 V 5相 对 分 P( f N 80) Pf
成肠炎 , 伴随着大量生物 学上高
度 活化物 质在组 织 中浓 度 的增 加加剧 了炎症 的发展 , 种反馈 这
和 内循 环作 用单 独 和共 同活 化
j肠 神 经 组织 。 ,
轮状病毒感染后 , 肠神经 组
织活化的机理 又有新途径 。 已经
突突出于病毒粒子 的表面 , 它与病毒 的多种功能有关 , 中主 其
加 _细胞 内钙 离子 的浓 度 , 离 r 钙 子浓 度 的增加刺 激位 于 上皮 层 下 的相 交状神 经或 自由神经 末 端 ,因而 活化 了分 泌神 经 的反
3 4 4 1 与潜在融合区序列 和抗原环绕的氨基 酸 3 5有关。 8 — 0, 0
V7 P 是病毒主要 的衣壳蛋 闩, 它携带糖蛋 白血清型的特异型 ,
证 明轮状病 毒能 感染 初 级神 经 元 , 毒的致病体 用是通过病 毒 病
非结构蛋 白颗粒 N P S 4发挥肠毒
素作用 , 引起 氨基酸或多肽从 肠
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选初初 初步择步步鉴鉴鉴鉴定别定定:培:菌依养菌落据基落特:特:征菌S征S落、特MA征C
EMB(37℃ 18-24h)
●可疑细细菌菌菌落特征
沙门菌属
菌落特征
小至中等,透明或半透明,乳糖不发酵,SS培养基形成中心黑 色菌落。
葡萄球菌属
圆形、凸起、表面光滑、湿润、边缘整齐
极有可能是轮状病毒感染
微生物综合技术
细菌性感染? 病毒性感染?
微生物综合技术
患儿的临床症 状
血常规
采样(粪便、呕吐物、血液)
细菌性感染
病毒性感染
增菌
细菌、病 毒快速诊 断
确诊实验
(阳、阴性) (阳、阴性)
分离培养
寻找可疑菌落 (若出现可疑 菌落后的生化 实验)
结果对比 结论
微生物综合技术 ●病人样本:粪便、呕吐物、血液
1免S病 分 选P、、A疫原 离择早协快法学 培期同鉴速:检 养快凝诊别将查 基速集断培诊试粪::法断验养便SS::(标基红本:-与粉S志S红贺色 菌2分 或 (、抗离 中黑病血培 央原色清养 为学中混平 粉检心查合板红),:色在高周、光盐边M学甘无A下露色C 观醇的察平菌 有增板 落 (菌无( )乳液凝菌 、糖:集M落不亚A现呈C硒发(象淡酸粉酵。黄盐红色)肉色)汤或、、G红卵N色磷肉汤)脂 2鉴高 初 E泽 (M、别盐 步 )3B病5及S(平 鉴 。S-原、选3扁板 定7学孔择平℃( :雀培检、3菌绿养1查5粉落-8和基3:-7红2特亚:℃4色征硫Eh1M)有酸8B-/2铋金M4琼h属A)C脂光
4.粪便收集后应在两小时内及时 送检,避免杂菌的污染。
血常规检测
病毒感染初期:
WBC(白细胞)可 轻度升高,但N(中 性粒细胞)多不高。
细菌: 一般二者均高,但 有两种情况: A、WBC升高,N不 高; B、WBC正常/稍低 ,N升高-----多为革兰 阴性菌。
PART1.细菌性感染
发热、 水样腹泻、
呕吐
蛋花样粪便
细菌性食物中毒的可疑对象:沙门菌属、 志贺氏菌、葡萄球菌属、大肠埃希菌属、 产气荚膜梭菌、变形杆菌属
深秋
各类引起 细菌性中 毒引起的 临床症状
● 可疑细菌
可疑细菌
临床症状
潜伏期
沙门菌属
呕吐、腹泻、发热、脱 水
数小时至三天
葡萄球菌属
呕吐、腹泻、发热、头 痛、虚弱无力
2-4小时
大肠埃希菌 变形杆菌属
大肠埃希菌
中等大小的圆形、凸起、表面光滑、湿润、浑浊、灰白色菌落, 边缘整齐。
• 根据观测平板上是否生长了可疑菌落,再 进行全套生化实验来进行确认。
KIA/MIU/吲哚实验 甘露醇/触酶/氧化酶/药敏实验
PART2.病毒性感染
病毒科 呼肠孤病毒科
杯状病毒科
星状病毒科
腺病毒科
病毒属
轮状病毒
基因组特征 双股RNA,呈片段状
RT-PCR
以上升高。
电镜、ELISA、荧光免疫法 电镜、ELISA、聚丙烯酰
、聚合酶链式反应
胺凝胶电泳法
直接检测方法
电子显微镜法: 1.检测范围广(A、B、C组都能测出)。
2.电子显微镜通过典型形态的观察作出特异 性诊断,其阳性率可达90%。本法快速准 确,但设备昂贵,操作要求高检测敏感性
粪便采集 呕吐物搜集 血液采集
1.应在使用抗菌药物之前采集。
1.在服药之前,静脉抽血 2尿不.尽不低量湿于不吸要0水.收5性m集强l,尿用,不红细湿菌头内或管的病进粪毒便, 容行在易抽使被血用吸,抗走,及菌出时药现检物假测之阴血前性。常将规呕, 避吐免物凝盛血于。无菌容器内或置 32于.将.血保新常存鲜规液液状检、粪测增便后菌取进液絮行状中离物及盛心时于, 无取送菌血检容清。器及内或时置进于行保快存速液、诊断 增实菌验液(中胶送检体。金、ELISA)
潜伏期
1~3天
粪-口、空气传播 各年龄段人群
24~48h
粪-口传播
人-人、粪-口、呼吸道
婴幼儿、老年人及免疫功 能低下者
婴幼儿
呈世界性分布,无明显季 呈散发性,无明显季节
节性
性、夏秋季略多
1-3天
约10天
临床表现
婴幼儿急性胃肠炎、 腹泻至脱水、呕吐、 发热、蛋花样粪便
食欲减退、恶心、呕 吐、腹部痛及腹泻
严重腹泻,伴随发热、恶 心、呕吐
腹泻,量少或多,呈水 样便或稀便,少数可排
出粘液,呕吐
①大便常规;②酶联
鉴别诊断
免疫吸附试验;③核 酸电泳图谱分析
(PAGE)④电镜或免 疫学方法直接查病毒 。血标本:双份血测 轮状病毒抗体有否4倍
免疫电镜法(IEM)、 ·酶链免疫法
(ELISA)、杂交技术 和RT-PCR、实时定量
水样便、发热、恶心和 呕吐
10-15小时
恶心、呕吐和发热
5-18小时
多发季节
夏季 夏季 夏秋季 夏秋季
● 细菌性感染
PART 1.镜检 PART 2.快速诊断 PART 3.增菌 PART 4.分离培养 PART 5.观察菌落特征 PART 6.生化试验 PART 7.结论
快增速菌诊液断 增方 菌法 :: ●选观必显择要S察ES微特时菌、L定进镜I落卵S的行检A形黄分生查态琼离化、培全脂养套结平基实构板验 进(行待血胶大培定琼体便养)脂常金平规等板检测、MAC
等等
● 程序
粪便、呕吐物
镜检、染色
增菌培养 分离培养
●选择鉴定培养基,如SS、MAC、伊红美蓝琼脂 ● (37℃培养18-24小时)根据具体细菌情况而定。 ●观察菌落颜色形态结构,是否存在可疑菌落 如:
● 细菌鉴别选择培养基
PART 1.沙门菌属 PART 2.志贺氏菌 PART 3.葡萄球菌属 PART 4.大肠埃希菌属 PART 5.变形杆菌属
● 卫生检验综合技术微生物第六组
● PPT演讲:XXX ● PPT制作:XXX ● PPT资料收集:XXX
微生物综合技术
案例
患儿,半岁,女,突然发病出现 发热、水样性腹泻和呕吐等症状 于2012年11月5日急诊入院,询 问病史患儿为早产1个月,人工 喂养,体检轻微脱水症,蛋花样 粪便,体温38℃。 发病时间为深秋。
诺如病毒 札如病毒 单股正链RNA
星状病毒 单股正链RNA
肠道腺病毒 双链RNA
传染源
患者和无症状带毒者
患者、隐性感染者及 健康携带者
患者和无症状带毒者 患者和无症状带毒者
传播途径
粪-口、水源污染、呼 吸道传播
易感人群
婴幼儿(9-12月)、 青壮年
世界各地,发病高峰
流行 在秋冬寒冷季节(12
月~2月)