干热灭菌法
实验室的灭菌方法
实验室的灭菌方法在实验室中，灭菌是非常重要的一个步骤，可以有效地消除实验过程中可能存在的各类微生物，确保实验结果的准确性和可靠性。
常用的灭菌方法包括物理灭菌和化学灭菌两种。
一、物理灭菌方法：1. 高温灭菌（烘箱法）：将待灭菌的器具（如培养皿、试管等）放入预热至适当温度的烘箱中，通过高温作用杀灭其中的微生物。
常用的温度为160-180摄氏度，时间约为1-2小时。
此方法适用于不耐热的固体物品。
2. 压力蒸汽灭菌（高压灭菌法）：将待灭菌的物品放入装有适量清水的高压灭菌锅中，加热至适当的温度（121-134摄氏度），经过一定时间的高压和高温作用，实现微生物的灭活。
常规操作时间为15-30分钟。
这种方法适用于实验器械、培养基、培养瓶等耐热器具。
3. 过滤法：通过微生物滤膜过滤器将待检测的液体或气体经过过滤，将其中的微生物截留下来，达到灭菌的效果。
该方法适用于不耐高温或无法承受高压的液体、气体样品。
4. 紫外线灭菌法：将待灭菌的物品放置在紫外线照射区域，经过一定时间的紫外线照射，使微生物的核酸发生损伤，从而达到杀灭微生物的目的。
该方法适用于表面较为平坦的培养皿、试管等小型器具。
5. 干热灭菌法：将待灭菌的物品置于常温下的烘箱中，在较高的温度（170-180摄氏度）下进行一定时间的干热处理。
该方法适用于不耐水或无法耐受湿热的物品。
二、化学灭菌方法：1. 乙醛灭菌法：将待灭菌的物品放入密闭的容器中，加入一定浓度的乙醛液并封闭容器，在一定时间内使乙醛蒸气作用于物品表面，达到杀菌的目的。
该方法易于操作，适用于对物品表面较干净的物品。
2. 酒精灭菌法：将待灭菌的物品浸泡在一定浓度的乙醇或异丙醇溶液中一段时间，使其达到杀菌的效果。
该方法适用于小型的器具或实验室台面的表面。
值得注意的是，不同的灭菌方法适用于不同类型的物品，我们在选择灭菌方法时要根据物品的性质、尺寸和特点来进行判断。
同时，灭菌操作过程要遵循一定的操作规范，确保操作的安全性和有效性。
热力消毒灭菌法的原理
热力消毒灭菌法的原理
热力消毒灭菌法是一种常见的消毒方法，它的原理是利用高温来杀死细菌和病毒。
在医疗领域中，这种方法被广泛使用，因为它可以有效地消除各种细菌和病毒，从而预防感染的发生。
热力消毒灭菌法主要有两种方式：干热灭菌和湿热灭菌。
干热灭菌是通过将物品置于高温下进行加热，达到灭菌的效果。
一般情况下，此方法需要将物品加热至160℃以上，并且持续加热至少2小时才能达到完全杀灭微生物的效果。
但由于干热灭菌需要较高的温度和时间，所以它只适用于那些较为耐高温的物品，如玻璃器皿、金属器具等。
相比之下，湿热灭菌则更为广泛地使用于多种物品的灭菌过程中。
此方法通常使用蒸汽或者水气进行加热，将物品加热至121℃左右，且持续加热30分钟以上就能够有效地杀灭各种微生物。
此外，在医疗设备中，湿热灭菌还有其他的加工方法，例如使用过氧化氢来进行高温高压的灭菌处理等。
需要注意的是，热力消毒灭菌不仅对细菌和病毒有杀灭作用，而且可以有效地去除一些细菌和病毒产生的毒素。
因此，在医疗领域中，这种方法被广泛使用，并成为了预防和控制感染的主要手段之一。
总结起来，热力消毒灭菌法的原理是利用高温来杀死各种细菌和病毒，从而达到灭菌的效果。
与其他消毒方法相比，热力消毒灭菌具有快速、彻底、安全的优点，因此在医疗领域得到了广泛应用。
中药材的消毒方法
中药材的消毒方法中药材的消毒方法有多种，以下介绍几种常见的方法：1. 热力灭菌法：这是一种应用广泛、效果可靠的消毒方法。
其中，湿热灭菌法是目前应用最广泛的灭菌方法之一，包括高压蒸汽灭菌、流通蒸汽灭菌、低温间歇灭菌、高温瞬时灭菌和过热水喷淋灭菌等。
不同的湿热灭菌方法灭菌效果不同，但其灭菌原理都是使微生物菌体中的蛋白质、核酸等发生变性凝固而杀灭微生物。
另外，干热灭菌法是利用电热恒温箱或硬气排管内的加热装置，升温至合适的温度和规定时间后，达到杀灭微生物的目的。
2. 烟熏法：使用苍术、艾叶等药材进行烟熏消毒。
这种方法在医院、学校、家庭等的室内空气消毒中很常见。
使用时，将苍术用95%酒精浸泡24小时，取出沥干酒精，与艾绒混合装入耐高温的盘或锅内，关闭门窗，点燃后熄灭火苗使其冒烟，人员撤离，烟熏30~60分钟，1~2小时后再打开门窗通风。
需要注意的是，应将装着药材的器皿放置在需要消毒的室内中央空旷处，周围避免放置易燃易爆物品。
3. 熏蒸法：适用于对烟雾敏感者或室内有人不方便安排撤离时的室内空气消毒。
使用时，将苍术、艾叶等药材放入煎药器皿内用冷水浸泡30分钟，水没过药材表面5厘米，浸泡完毕后将煎药器皿移至需要消毒的室内中央空旷处再进行煎煮，煎煮过程不加盖，加热煮沸后持续加热，空气气化熏蒸1小时或至水干。
4. 酒精或乙醚熏法：将95%酒精或乙醚置于干燥器底部，然后把干燥的药材放在瓷板上，盖严，熏7～10天，可杀死害虫；或者使用70%～75%的酒精，能使组成细菌的蛋白质凝固，而使其彻底消毒杀菌。
5. 除虫菊酯杀虫法：将除虫菊酯干燥后碾成粉与药材混拌，密闭储藏；或用除虫菊喷雾剂直接喷晒于药材表面，可起到杀虫作用。
请注意，中药材的消毒方法需要根据药材的性质和用途选择，以确保药材的质量和安全性。
同时，在消毒过程中也需要注意安全，避免火灾等意外事故的发生。
最可靠的灭菌方法是
最可靠的灭菌方法是灭菌是指将物体或环境中的所有微生物杀死或去除的过程。
灭菌方法的选择和使用对于医疗保健、食品加工等领域的卫生和质量至关重要。
下面将介绍几种常见的可靠灭菌方法。
1. 热灭菌法：热灭菌法是最常见也是最可靠的灭菌方法之一。
常见的热灭菌方法包括高温热灭菌、干热灭菌和高压高温灭菌。
高温热灭菌是将物体暴露在高温环境中一段时间，通常使用蒸汽或热空气。
干热灭菌是通过将物体置于高温干燥的环境中进行灭菌。
高压高温灭菌则是将物体置于压力锅中，以高压高温蒸汽进行灭菌。
热灭菌法的可靠性取决于温度、时间和湿度。
一般来说，高温和长时间的热灭菌会更可靠，但需要对物体的耐热性进行考虑。
2. 化学灭菌法：化学灭菌法是使用化学物质来杀灭微生物。
其中最常见的化学灭菌剂是乙酰过氧化物（氢氧化氢）和氧化乙烯。
乙酰过氧化物在常温下能有效灭活微生物，但对于芽孢和病毒的灭活效果较差。
氧化乙烯是一种广泛应用于医疗器械灭菌的气体，适用于灭活各种细菌、芽孢和病毒。
化学灭菌法的可靠性取决于灭菌剂的种类、浓度、接触时间和使用条件。
3. 离子辐射灭菌法：离子辐射灭菌法使用高能射线（如γ射线、X射线和电子束）来杀灭微生物。
这种方法可以穿透物体并破坏微生物的DNA、RNA和蛋白质，从而达到灭菌的目的。
离子辐射灭菌可以有效灭活各种微生物，包括细菌、病毒和芽孢。
离子辐射灭菌法的可靠性取决于辐射剂量的选择和控制，以及物体的阻挡能力和辐射效应。
4. 过滤灭菌法：过滤灭菌法是通过将物体通入微孔过滤器来去除微生物。
微孔过滤器通常由聚合物或陶瓷材料制成，可以选择过滤孔径以去除特定大小的微生物。
过滤灭菌法适用于病毒、细菌和一些菌落的清除，但对于芽孢和一些大分子物质的去除效果较差。
过滤灭菌法的可靠性取决于过滤器的孔径选择、使用条件（如流速）和过滤器的完整性。
总之，不同的灭菌方法适用于不同的场景和需求。
在实际应用中，应根据物体的性质、微生物的耐热性以及特定的灭菌需求来选择最可靠的灭菌方法，并确保操作符合相应的灭菌标准和要求。
干热灭菌--去热源 USP、CP、EP关于干热去热原的温度时间要求
USP、CP、EP关于干热去热原的温度/时间要求
关于干热去热原的时间，中、美、欧三国内毒素检查法均接受玻璃器皿250℃*30min的处理方式。
●但中国药典1421《灭菌法》则另有250℃*45min的说法，这也引起不少误会。
●欧洲药典关于干热去热原的标准则保持一致，即250℃*30min。
●中国药典和欧洲药典均要求内毒素下降3个对数。
●美国药典对干热去热原定义了新的解释：认为关注待处理物料（如玻璃瓶）的内毒素负荷，和处理后
物料的内毒素残留水平（当内毒素下降到NMT 0.1 EU时，该工艺被认为可以接受。
），比单纯的关注内毒素下降度更有意义（有点类似于残存概率灭菌法）。
●USP同时还定义了干热灭菌法的F值，即FD值（不是FH值），关于z值的取值，USP则取z=50 ℃
作为标准z 值。
也接受使用其他45℃–55℃的值（过去关于z取值46.4？54？的纷争到此结束）。
基础护理操作规程-消毒、灭菌法
基础护理操作规程-消毒、灭菌法（一）干热灭菌法1.方法（1）焚烧：适用于污染的废弃物、病理标本、带脓血分泌物的敷料和纸张等，可直接投入点燃的焚烧炉内焚烧。
（2）燃烧：器械可放在火焰上烧灼20s；搪瓷容器类可倒入95%乙醇，慢慢转动容器使乙醇分布匀称，燃烧直至熄灭；开启和关闭培养试管时，塞子和试管口须在火焰上烧灼，来回旋转2～3次。
2.注意事项①注意安全，燃烧时须远离易燃易爆物品；②在用酒精燃烧的过程中，不可添加酒精，以免引起烧伤或火灾；③贵重及锐利刀剪，为保护刀锋不宜用燃烧法。
（二）湿热灭菌法1.煮沸灭菌法适用于不怕潮湿耐高温的物品，如搪瓷、金属、玻璃、橡胶等。
（1）方法：①洗净物品，器械打开轴节，管道内充满水，被消毒的物品全部浸入水中，加盖煮沸；②水沸至100℃，开始计时，5～10分钟杀灭繁殖体，1～3小时杀灭芽胞。
（2）注意事项：①玻璃类用纱布包好，应从冷水或温水中放入；②橡胶类应包裹待水沸后放入；③物品不宜重叠，保证物品各面与水接触；④水中加入1%～2%碳酸氢钠溶液，沸点可达105℃，加速芽胞破坏及防止金属物品生锈；⑤消毒时间以水沸起计时，若中途需加入物品，则重新计时。
2.高压蒸汽灭菌法（1）方法：是物理灭菌法中最有效的方法，凡属耐高温不怕潮湿的物品均可适用。
压力灭菌器分为下排气式或预真空式压力蒸汽灭菌器。
下排气式在121～123℃、102.97～137.30kPa压强，15～30分钟达到灭菌目的；预真空式温度可达132℃，压强可提高到205.95kPa，5～10分钟即可灭菌。
（2）注意事项：①器材和物品灭菌前必须清洗干净并擦干或晾干；②灭菌包体积不可超过30cm×30cm×25cm；③灭菌锅内物品放置应保持适当间隔并避免与锅壁上方和左右两侧接触；④易于滞留水分的物品应放在灭菌器内的边缘区；⑤被灭菌物品应待干燥后才能取出备用；⑥做好灭菌效果监测；⑦每件物品消毒前均应贴上化学指示带，注明有效期。
微生物学实验：湿热灭菌法和干热灭菌法
湿热灭菌法和干热灭菌法湿热灭菌法是指用饱和水蒸气、沸水或流通蒸汽进行灭菌的方法，由于蒸汽潜热大，穿透力强，容易使蛋白质变性或凝固，所以该法的灭菌效率比干热灭菌法高，是药物制剂生产过程中最常用的灭菌方法。
湿热灭菌法可分为：煮沸灭菌法、巴氏消毒法、高压蒸汽灭菌法、流通蒸汽灭菌法、和间歇蒸汽灭菌法。
影响湿热灭菌的主要因素有：微生物的种类与数量、蒸汽的性质、药品性质和灭菌时间等。
（1）煮沸灭菌法：将水煮沸至100摄氏度，保持5-10分钟可杀死细菌繁殖体，保持1-3小时可杀死芽胞。
在水中加入百分之一至百分之二的碳酸氢钠时沸点可达105摄氏度，能增强杀菌作用，还可去污防锈。
此法适用于食具、刀箭、载玻片及注射器等。
（2）xx消毒法：一种低温消毒法，因巴斯德首创而得名。
有两种具体方法，一是低温维持法：62摄氏度维持30分钟；二是高温瞬时法：75摄氏度作用15-30秒。
该法适用于食品的消毒。
（3）流通蒸气灭菌法：利用常压下的流通蒸汽进行灭菌。
（4）间歇蒸汽灭菌法（5）高压蒸汽灭菌法：103.4千帕蒸汽压温度达121.3摄氏度，维持15-20分钟。
湿热灭菌法湿热法可在较低的温度下达到与干热法相同的灭菌效果，因为：①湿热中蛋白吸收水份，更易凝固变性；②水分子的穿透力比空气大，更易均匀传递热能；③蒸汽有潜热存在，每1克水由气态变成液态可释放出529卡热能，可迅速提高物体的温度。
湿热灭菌法一般采用121摄氏度，灭菌20-30min，如果是产孢子的微生物则应采用灭菌后适宜温度下培养几小时，再灭菌一次，以用于杀死刚刚萌发的孢子。
干热灭菌法是指在干燥环境（如火焰或干热空气）进行灭菌的技术。
一般有火焰灭菌法和干热空气灭菌法。
本法适用于干燥粉末、凡士林、油脂的灭菌，也适用于玻璃器皿(如试管、平皿、吸管、注射器)和金属器具(如测定效价的钢管、针头、摄子、剪刀等)的灭菌。
干热空气灭菌法：是指用高温干热空气灭菌的方法。
该法适用于耐高温的玻璃和金属制品以及不允许湿热气体穿透的油脂（如油性软膏机制、注射用油等）和耐高温的粉末化学药品的灭菌，不适合橡胶、塑料及大部分药品的灭菌。
培养基灭菌的方法
培养基灭菌的方法培养基灭菌是为了确保培养基中没有活性的微生物存在。
培养基灭菌的方法有多种，既包括物理方法，如高温灭菌、滤膜灭菌等，也包括化学方法，如化学灭菌剂灭菌等。
下面将详细介绍各种方法以及其操作步骤。
首先是高温灭菌法。
这是最常用的一种灭菌方法，通过高温的热力作用来杀灭微生物。
高温灭菌可以使用干热法或湿热法。
1. 干热法：将需要灭菌的培养基置于干热灭菌器中，通常在160-180C的高温下进行处理。
温度和时间的选择要根据具体情况而定，通常是在热力消毒时间表上选择。
干热灭菌器具有温度调节和定时功能，可以实现自动控制。
2. 湿热法：将培养基装入有效容器中，如玻璃瓶、耐热塑料瓶等，然后通过蒸汽或水浴进行灭菌处理。
蒸汽灭菌是最常用的方法，一般在100C以上进行。
水浴灭菌同样是将培养基容器放入预热的水浴器中进行灭菌，水温通常为100C，持续10-30分钟不等。
其次是滤膜灭菌法。
这是一种通过筛选微生物的方法，可以有效地灭活微生物而保留培养基中的营养物质。
1. 为了滤膜灭菌，首先需要选择一个滤膜尺寸，一般为0.22或0.45微米。
选择合适的滤膜尺寸可以删除绝大多数的微生物。
滤膜的材质非常重要，一般选择具有较好生物相关性的材料，如聚酯膜、聚酰胺膜等。
2. 将培养基通过真空泵抽吸，使其穿过滤膜。
微生物会被滤膜截留在上面，营养物质通过滤膜留下，进入下方的容器中。
3. 然后将滤膜移到含有灭菌溶液的培养皿中，使其与灭菌溶液接触。
最常用的灭菌溶液是70%乙醇或含有漂白剂的水。
化学方法是另一种常用的培养基灭菌方法，主要通过使用化学灭菌剂来达到灭活微生物的目的。
这种灭菌方法对于那些不能耐受高温或压力的培养基非常有用。
1. 最常用的灭菌剂是乙醛。
在常温下，将乙醛溶液添加到培养基中，然后将其密封存放一定时间，一般为3-24小时。
乙醛具有广谱抗微生物作用，在适当剂量下对大多数病原菌均有很好的抑制效果。
2. 另一种常用的化学灭菌剂是过氧化氢。
干热法用于灭菌和去热原的验证
干热法用于灭菌和去热原的验证Corporation standardization office #QS8QHH-HHGX8Q8-GNHHJ8干热法用于灭菌和去热原的验证美国注射剂协会前言范围对流加热间歇（法）连续（法）传导加热间歇（法）连续（法）辐射加热辐射加热过程的各种因素间歇（法）连续（法）生物学的验证生物学的含义实验室研究工场研究参考文献附录A附录B前言能耐受比较高温的却又不宜被蒸汽渗透或被湿热破坏的灭菌物件，干热法常是可选择的方法。
干热经常用于些诸如粉末，油类，矿脂（凡士林），玻璃器皿，和不锈钢器具等的灭菌。
由于在相同温度时干热对细菌致死率远远低于饱和蒸汽，因此干热灭菌法需要较高温度和/较长时间的暴露，但一般干热比蒸汽灭菌简单。
然而蒸汽灭菌的一些基本概念和方法也可被干热灭菌所采用。
例如，在比较干热法的相对灭菌能力时，可用相似于F0值的致死率单位。
用相似于蒸汽灭菌的方法，时间与温度的条件改变可综合成170℃时的相当时间，（设定一个Z值为20℃），这称之谓F值。
H干热法的验证包括物理的和生物学的试验二个方面。
方法顺序如下：设备安装的认证基本设备特性的认证关键传感，监测和控制设备的校验单元的热力学性能的认证工艺过程的工厂鉴定工艺过程的微生物学验证试验数据的整理检查整套文件的最后认证（注：虽然工作小组选择20℃的Z值，作为平均代表值，但应注意，报告中对干热，该值的范围为13～28℃，其中大部分在18～23℃）。
有些情况下，干热法只用于灭菌；但在某些情况下，则要求既灭菌，又使内毒素失活（去热原）。
一个循环过程的目的是规定验证方法。
干热法的验证有许多方法。
本技术报告提出许多可行方法中的三种。
第一种方法，仅为灭菌设计的干热法，视商品带菌量和其耐热性质而建立灭菌周期参数。
此周期设计得应保证微生物菌落可能生存的几率在一百万单位的商品中不大于一单位（未灭菌的几率为10-6），此方法用于对热极不稳定的材料。
组培实验器皿和器械的灭菌方法
1 玻璃器皿的灭菌湿热灭菌法（蒸汽灭菌），即将玻璃器皿包扎好后，置入蒸汽灭菌器中，进行高温高压灭菌。
灭菌的温度为121℃，维持20-30分钟。
一般玻璃培养容器常常与培养基一起灭菌。
干热灭菌法，即在烘箱内对器皿进行杀菌处理，是一种彻底杀死微生物的方法。
灭菌时间为150℃/40分钟或120℃/120分钟；若发现芽孢杆菌，则应为160℃/90-120分钟。
干热灭菌的缺点是热空气循环不良和穿透很慢，因此，干热灭菌时，玻璃容器在烘箱内不应堆放太满、太挤，以妨碍空气流通，造成温度不均匀，而影响灭菌效果。
灭菌后冷却速度不能太快，以防玻璃容器因温度骤变而破碎，应等到温度下降到50℃左右时，方能打开烘箱门取出玻璃容器；否则外部的冷空气就会被吸入烘箱，使里面的玻璃器皿受到微生物污染，甚至有可能发生炸裂的危险；也可将玻璃器皿直接存放在烘箱内待用。
此外，还可把玻璃器皿放入水中进行煮沸灭菌。
2 金属器械的灭菌对于无菌操作所用的各种器械，如镊子、解剖刀、解剖针和接种铲等金属器械，一般用火焰灭菌法；即把金属器械放在95%的酒精中浸一下，然后放在火焰上燃烧灭菌，待冷却后再使用。
这一步骤应当在无菌操作过程中反复进行，以免交叉污染。
金属器械也可以用干热灭菌法灭菌，即将拭净或烘干的金属器械用纸包好，盛在金属盒内，放于烘箱中在120℃的温度下灭菌2小时，或用布包好后放在高压灭菌器内灭菌。
3 布质制品的灭菌工作服。
口罩。
帽子等布质品均用湿热灭菌法，即将洗净晾干的布质品用牛皮纸包好，放入高压灭菌器中，在压力为1.1Mpa、温度为121℃的情况下，灭菌20-30分钟。
4 塑料器皿和器械有些类型的塑料器皿也可以静心高温灭菌，如聚丙烯、聚甲基戊烯、同质异晶聚合物等可121℃下可反复进行高压蒸汽灭菌。
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干热灭菌法
一、通过使用干热空气杀灭微生物的方法叫干热灭菌。一般是把待灭菌的物品包装就绪后，
放入电烘箱中烘烤，即加热至160～170℃维持1～2h。
二、干热灭菌法常用于空玻璃器皿、金属器具的灭菌。凡带有胶皮的物品，液体及固体培养
基等都不能用此法灭菌。
三、灭菌方法：
1、玻璃器皿等在灭菌前必须经正确包裹和加塞，以保证玻璃器皿于灭菌后不被外界杂
菌所污染。常用玻璃器皿的包扎和加塞方法如下：平皿用纸包扎或装在金属平皿筒内；三角
瓶在棉塞与瓶口外再包以厚纸，用棉绳以活结扎紧，以防灭菌后瓶口被外部杂菌所污染；吸
管以拉直的曲别针一端放在棉花的中心，轻轻捅入管口，松紧必须适中，管口外露的棉花纤
维统一通过火焰烧去，灭菌时将吸管装入金属管筒内进行灭菌，也可用纸条斜着从吸管尖端
包起，逐步向上卷，头端的纸卷捏扁并拧几下，再将包好的吸管集中灭菌。
2、干燥箱灭菌
将包扎好的物品放入干燥烘箱内，注意不要摆放太密，以免妨碍空气流通；不得使器皿
与烘箱的内层底板直接接触。将烘箱的温度升至160～170℃并恒温1～2h，注意勿使温度
过高，超过170℃，器皿外包裹的纸张、棉花会被烤焦燃烧。如果是为了烤干玻璃器皿，温
度为120℃持续30分钟即可。温度降至60～70℃时方可打开箱门，取出物品，否则玻璃器
皿会因骤冷而爆裂。 用此法灭菌时，绝不能用油、蜡纸包扎物品。
3、火焰灭菌
直接用火焰灼烧灭菌，迅速彻底。对于接种环，接种针或其它金属用具，可直接在酒
精灯火焰上烧至红热进行灭菌。此外，在接种过程中，试管或三角瓶口，也采用通过火焰而
达到灭菌的目的。
湿热灭菌
一、 煮沸消毒法
注射器和解剖器械等均可采用此法。先将注射器等用纱布包好，然后放进煮沸消毒器
内加水煮沸。对于细菌的营养体煮沸约15～30min，对于芽孢则需煮沸约1～2h。
二、高压蒸汽灭菌法
高压蒸汽灭菌用途广，效率高，是微生物学实验中最常用的灭菌方法。这种灭菌方法
是基于水的沸点随着蒸汽压力的升高而升高的原理设计的。当蒸汽压力达到1.05kg/cm2时，
水蒸气的温度升高到121℃，经15～30min，可全部杀死锅内物品上的各种微生物和它们的
孢子或芽孢。一般培养基、玻璃器皿以及传染性标本和工作服等都可应用此法灭菌。
操作方法和注意事项如下：
（1）加水 ：打开灭菌锅盖，向锅内加水到水位线。立式消毒锅最好用已煮开过的水，以便
减少水垢在锅内的积存。注意水要加够，防止灭菌过程中干锅。
（2）装料、加盖 ：灭菌材料放好后，关闭灭菌器盖，采用对角式均匀拧紧锅盖上的螺旋，
使蒸汽锅密闭，勿使漏气。
（3） 排气 ：打开排气口(也叫放气阀)。用电炉加热，待水煮沸后，水蒸气和空气一起从排
气孔排出，当有大量蒸汽排出时，维持5min，使锅内冷空气完全排净。
（4）升压、保压和降压
当锅内冷空气排净时，即可关闭排气阀，压力开始上升。当压力上升至所需压力时，
控制电压以维持恒温，并开始计算灭菌时间，待时间达到要求（一般培养基和器皿灭
菌控制在121℃，20min）后，停止加热，待压力降至接近“0”时，打开放气阀。注意
不能过早过急地排气，否则会由于瓶内压力下降的速度比锅内慢而造成瓶内液体冲出
容器之外。