乙酰辅酶A(Acetyl-CoA)含量测定试剂盒说明书 微量法
乳酸(LA)含量检测试剂盒说明书 微量法
乳酸（LA）含量检测试剂盒说明书微量法注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
货号：BC2235规格：100T/48S产品内容：提取液一：液体50mL×1瓶，4℃保存。
提取液二：液体8mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体6mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体34μL×1支，4℃保存。
临用前按试剂二（V）：蒸馏水（V）=10μL：450μL的比例配制试剂二溶液，现用现配。
试剂三：粉剂×1瓶，-20℃避光保存。
临用前加入4mL蒸馏水充分溶解，可分装后-20℃保存，避免反复冻融，-20℃保存一周。
试剂四：粉剂×1瓶，4℃避光保存。
临用前加4mL蒸馏水充分溶解，4℃保存一周。
试剂五：粉剂×1瓶，-20℃避光保存。
临用前每瓶加入3mL蒸馏水混匀，可分装后-20℃保存，避免反复冻融，-20℃保存一周。
试剂六：液体2mL×1瓶，4℃保存。
标准品：粉剂×1支，4℃保存。
临用前加入1.04mL蒸馏水配成100μmol/mL的标准溶液。
显色液的配制：临用前根据用量按照试剂三（V）：试剂四（V）=1：1的比例充分混匀，现配现用。
产品说明：乳酸是生物体代谢过程中重要的中间产物，与糖代谢、脂类代谢、蛋白质代谢及细胞内能量代谢密切相关，乳酸含量是评估糖元代谢的和有氧代谢的重要指标。
乳酸在乳酸脱氢酶的作用下生成丙酮酸，同时使NAD+还原生成NADH和H+，H+传递给PMS生成的PMSH还原MTT生成紫色物质，在570nm处有特征吸收峰。
2自备实验用品及仪器：天平、研钵/匀浆器、离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、恒温水浴锅、乙醇和蒸馏水。
操作步骤：一、样本处理：1.组织：按照质量（g）：提取液一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g，加入1mL提取液一）加入提取液一，冰浴匀浆后于4℃，12000g离心10min，取0.8mL上清液，再加入0.15mL提取液二，4℃12000g 离心10min后取上清待测。
游离脂肪酸(NEFA)测定试剂盒(ACS-ACOD酶法)产品技术要求百奥泰康
游离脂肪酸(NEFA)测定试剂盒（ACS-ACOD酶法）适用范围：该产品用于体外定量测定人血清中游离脂肪酸的浓度。
1.1产品规格1.2 组成成分1.2.1 试剂组成试剂1：磷酸盐缓冲液（pH=7.0） 50mmol/L；辅酶A 0.5mmol/L；ATP 3 mmol/L；乙酰辅酶A合成酶（ACS ） 0.4KU/L；）2mmol/L；氯化镁（MgCl2偶联终点比色法结合成份（Trinder结合成份）0.5g/L；表面活性剂和稳定剂＜1%；试剂2：磷酸盐缓冲液（pH=7.0） 50mmol/L；乙酰辅酶 A 氧化酶（ACOD ）30KU/L；过氧化物酶（POD ） 45KU/L；4-氨基安替比林（4AAP） 1.5g/L；表面活性剂和稳定剂＜1%1.2.2 校准品的组成单水平的液体校准品，在50mM pH7.0的磷酸盐缓冲液中添加十六烷酸纯品，稳定剂<0.5%；定值范围：0.8-1.2mmol/L。
1.2.3质控品的组成两个水平的液体质控品，在牛血清(20g/L)中加入十六烷酸纯品，添加的牛血清的比例为5%-10%，稳定剂<0.5%；目标浓度范围：低水平（0.30-0.60）mmol/L，高水平（0.80-1.20）mmol/L。
2.1 外观液体双试剂：试剂1：无色或淡黄色澄清液体；试剂2：黄色澄清液体。
校准品：无色或淡黄色澄清液体。
质控品：无色或淡黄色澄清液体。
2.2 净含量液体试剂的净含量不得低于标示体积。
2.3 空白吸光度试剂空白吸光度应≤0.3。
2.4 分析灵敏度浓度为0.5mmol/L时，吸光度差值的绝对值在0.01-0.2范围内。
2.5 线性在(0,3.0]mmol/L线性范围内，线性相关系数r 应≥0.995；在(0,1.2] mol/L 时绝对偏差不超过0.18mmol/L；在（1.2,3.0]mmol/L范围内的相对偏差不超过±15%。
2.6 精密度变异系数CV应≤6%2.7 批间差不同批号之间测定结果的相对极差应≤10%。
BCA微量蛋白浓度测定试剂盒使用说明
BCA微量蛋白浓度测定试剂盒货号：PC0050规格：500微孔(500T)/1000微孔(1000T)/2000微孔（2000T）保质期：本试剂盒自订购之日起一年内有效。
产品内容：包装500微孔1000微孔2000微孔保存BCA试剂100ml2×100ml4×100ml室温Cu试剂3ml6ml12ml室温PBS稀释液30ml60ml120ml室温BSA蛋白标准0.3ml0.5ml1ml-20℃(5mg/ml BSA)产品简介：碱性条件下，蛋白将Cu2+还原为Cu+，Cu+与BCA试剂形成紫颜色的络合物，测定其在562nm处的吸收值，并与标准曲线对比，即可计算待测蛋白的浓度。
常用浓度的去垢剂SDS，Triton X-100，Tween不影响检测结果，但受螯合剂(EDTA，EGTA)、还原剂（DTT，巯基乙醇）和脂类的影响。
实验中，若发现样品稀释液或裂解液本身背景值较高，可试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒。
操作说明：一.微孔酶标仪法1.配制工作液:根据标准品和样品数量，按50体积BCA试剂加1体积Cu试剂（50:1）配制成BCA工作液，充分混匀(混合时可能会有浑浊，但混匀后就会消失)。
BCA工作液室温24小时内稳定。
2.稀释标准品：先用PBS将BSA标准品稀释至终浓度为0.8mg/ml备用。
再依次稀释至80、40、20、10、5、2.5ug/ml.。
3.高浓度蛋白可将样品作适当稀释（最好多做几个梯度，如作2倍、4倍、8倍稀释），由于移液器在取小量时的误差，标准线前面的点可能不很准确，所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。
4.各孔加入200微升BCA工作液和40ul稀释后的蛋白或标准品溶液，对照孔加入PBS稀释液。
37℃放置4小时。
用酶标仪测定A562nm，根据标准曲线计算出蛋白浓度。
使用温箱孵育时，应注意防止因水分蒸发影响检测结果。
二.分光光度计法如没有酶标仪，在离心管中混匀样品后加入比色皿，用分光光度计比色。
赛默飞bca试剂盒说明书 23227
赛默飞赛默飞bca试剂盒试剂盒说明书23227赛默飞bca试剂盒是目前广泛使用的蛋白定量方法之一。
本产品是基于赛默飞bca试剂盒（Bicin-choninic Acid）法研制而成，实现了对蛋白质进行快速、稳定、灵敏的浓度测定。
其原理是在碱性环境下蛋白质分子中的肽链结构能与Cu2+络合生成络合物，同时将Cu2+还处原成有高的光吸收Cu+。
赛默飞bca试剂盒试剂值，可敏感特异地与颜色的深浅与蛋白Cu结质浓合，形成度成正比，可根据吸收稳定的有颜色的复值合物。
在的大小来562测定蛋nm白质的含量。
本试剂盒含有牛血清白蛋白（BSA）溶液作为蛋白质标准品溶液，测定范围为20～2000μg/ml。
注意事项：1．本产品可以采用分光光度计（试管检测法）或者酶标仪（微孔检测法）测定蛋白浓度。
2．建议每次测定蛋白样品时，绘制标准曲线，以获得准确数据。
3．BSA标准品的稀释液需与待测样品的稀释液一致（可用1×PBS或0.9%生理盐水进行稀释）。
4．完成37℃孵育30分钟或室温孵育2小时后，须在3-5分钟内完成检测，否则会影响蛋白定量的准确度。
5．如待测样品中含较多的干扰物质（具体见附表1），可采用Bradford法蛋白定量试剂盒（K0013）或其他蛋白定量产品。
操作步骤：1．稀释BSA标准品：用与待测蛋白样品相一致的稀释液按下表稀释BSA标准品。
2．配置赛默飞bca试剂盒工作液：计算赛默飞bca试剂盒工作液总量：赛默飞bca试剂盒工作液总量=（BSA标准品样本个数+未知样本个数）×复孔数×每个样本赛默飞bca试剂盒工作液体积。
举例：BSA标准品样本个数为7个，未知样本个数2个，复孔数3个。
普利莱基因技术微量蛋白质定量试剂盒 (BCA 法) 使用说明说明书
微量蛋白质定量试剂盒(BCA法)使用说明P1513描述：Bicinchoninic acid(BCA)法是近来广为应用的蛋白定量方法。
其原理与Lowery法蛋白定量相似，即在碱性环境下蛋白质与Cu2+络合并将Cu2+还原成Cu1+。
BCA与Cu1+结合形成稳定的紫蓝色复合物，在562 nm处有高的光吸收值并与蛋白质浓度成正比，据此可测定蛋白质浓度。
与Lowery法相比，BCA蛋白测定方法灵敏度高，操作简单，试剂及其形成的颜色复合物稳定性俱佳，并且受干扰物质影响小。
与Bradford 法相比，BCA法的显著优点是不受去垢剂的影响。
组成与储存：(1)BCA Reagent100ml，室温保存；(2)Cu Reagent2.5ml，室温保存；(3)BSA standard4mg/ml1ml，−20ºC冻存。
1.5年有效。
可进行500次微板(microplate)测定或100次1ml比色杯测定。
所需设备：比色计、酶标仪、或微板比色仪，最佳工作波长562nm，可在540-590nm之间。
工作溶液(Working Reagent,WR)配制：将50体积BCA Reagent与1体积Cu Reagent混合即为WR工作试剂，呈嫩绿色，立即使用或者4℃保存不超过一天。
标准蛋白溶液配制：用双蒸水、0.9%生理盐水、PBS、或与待测蛋白样品匹配之缓冲液进行倍比稀释,得到BSA标准溶液80、40、20、10、5、2.5、1.25µg/ml。
蛋白测定微量蛋白质浓度线性检测范围为1-100µg/ml。
标准测定用1cm光程玻璃或塑料比色皿，反应终体积1.2ml，用比色计测定。
微板测定用96孔板，反应终体积240µl，用酶标仪、微板比色仪测定。
1.标准测定：将0.2ml标准品或待测样本与1ml WR工作溶液混合。
微板测定：将40µl标准品或待测样本与200µl WR工作溶液混合。
苏州科铭试剂盒总清单-5.3
咨询 800 420 2300 1200 1000 520 1100 580 1550 800 1200 620
L-半乳糖苷-1,4-内酯脱氢酶(Gal LDH)测试盒
L-半乳糖苷-1,4-内酯脱氢酶(Gal LDH)测试盒
抗坏血酸氧化酶（AAO）测试盒
抗坏血酸氧化酶（AAO）测试盒
抗坏血酸过氧化物酶（APX）测试盒
抗坏血酸过氧化物酶（APX）测试盒
单脱氢抗坏血酸还原酶（MDHAR）测试盒
单脱氢抗坏血酸还原酶（MDHAR）测试盒
微量法
紫外分光光度法
微量法
100管/48样 50管/24样 50管/48样 100管/96样 50管/48样 100管/96样 50管/48样 100管/96样 50管/48样 100管/96样 50管/48样 100管/96样 50管/48样 100管/96样 50管/48样
100管/96样
50管/48样
丙酮酸脱羧酶（PDC）测试盒
丙酮酸脱羧酶（PDC）测试盒
醇脱氢酶（ADH）测试盒
醇脱氢酶（ADH）测试盒
单脱氢抗坏血酸还原酶（MDHAR）测试盒
单脱氢抗坏血酸还原酶（MDHAR）测试盒
乙醛脱氢酶（ALDH）测试盒 乙醛脱氢酶（ALDH）测试盒
烟酸含量测试盒
微量法 可见分光光度法 高效液相色谱法
微量法 可见分光光度法
脱氢抗坏血酸还原酶（DHAR）测试盒
脱氢抗坏血酸还原酶（DHAR）测试盒
酮脂酰-辅酶A硫解酶3KCTelisa试剂盒使用方法
3-酮脂酰-辅酶A硫解酶（3KCT）elisa试剂盒使用方法本试剂盒仅供研究使用。
检测范围：96T0.1pg/mL -8 pg/mL使用目的：本试剂盒用于测定微生物样本中3-酮脂酰-辅酶A硫解酶（3KCT）含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中3-酮脂酰-辅酶A硫解酶（3KCT）水平。
用纯化的3-酮脂酰-辅酶A硫解酶（3KCT）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入3-酮脂酰-辅酶A硫解酶（3KCT），再与HRP标记的3-酮脂酰-辅酶A硫解酶（3KCT）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的3-酮脂酰-辅酶A硫解酶（3KCT）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中3-酮脂酰-辅酶A硫解酶（3KCT）浓度。
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。
加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
辅酶 I NAD 含量检测试剂盒(WST 显色法)说明书__ 可见分光光度法UPLC-MS-6007
辅酶I NAD(H)含量检测试剂盒（WST显色法）说明书货号：UPLC-MS-6007规格：50T/24S可见分光光度法产品内容：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称规格保存条件酸性提取液液体15mL×1瓶2-8℃保存碱性提取液液体15mL×1瓶2-8℃保存试剂一液体20mL×1瓶2-8℃保存试剂二液体6mL×1瓶2-8℃保存试剂三液体12mL×1瓶2-8℃保存试剂四液体3mL×1瓶-20℃保存试剂五液体40mL×1瓶2-8℃保存NAD标准品粉剂×1支-20℃保存NADH标准品粉剂×1支-20℃保存溶液的配制：1、NAD标准品：临用前加入1.5mL蒸馏水，即2µmol/mL。
-20℃可以保存2周。
2、NADH标准品：临用前加入1.4mL蒸馏水，即2µmol/mL。
-20℃可以保存2周。
产品说明：辅酶I包括还原型和氧化型两种形式，在生物氧化中起传递氢的作用。
氧化型辅酶I又称烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+）是脱氢酶的辅酶，它在糖酵解、糖异生、三羧酸循环和呼吸链中发挥着不可替代的作用。
中间产物会将脱下的氢递给NAD，使之成为NADH（还原型辅酶I）。
而NADH则会作为氢的载体，在呼吸链中通过化学渗透偶联的方式，合成ATP。
NAD(H)在机体内有重要的生理意义，与物质代谢、能量代谢、抗细胞衰老、抗氧化以及一些疾病的发生密切相关。
体内辅酶I含量降低会导致细胞损伤或衰亡。
分别用酸性和碱性提取液提取样本中NAD+和NADH，在1-mPMS作用下，WST-1可与NADH反应，产生水溶性formazan，在450nm下有特征吸收峰，而NAD+可被乙醇脱氢酶还原为NADH，进一步采用WST-1检测。
Ethanol+NAD+Alcohol Dehydrogenase Acetaldehyde+H++NADHNADH+WST-1+1-mPMS Formazan（450nm）注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
辅酶ⅠNAD(H)含量试剂盒使用说明
辅酶ⅠNAD(H)含量试剂盒使用说明产品简介：辅酶ⅠNAD(H)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，NAD是糖酵解和TCA循环的主要氢受体，生成的NADH经呼吸电子链传递把电子交给氧，在合成ATP的同时，形成大量的ROS，同时NADH再生为NAD。
糖、脂、蛋白质三大代谢物质分解中的氧化反应绝大部分通过这一体系完成。
NAD(H)含量和NADH/NAD比值的高低可用于评价糖酵解和TCA循环的强弱。
较高的NAD(H)及NADH/NAD比值说明细胞呼吸耗氧量较高，处于过氧化状态，NADH/NAD比值升高也可抑制糖酵解和TCA循环。
另外，NAD降解产物具有非常重要的调控作用。
NAD和NADH在254nm下有吸收峰，利用高效液相色谱法在相应波长下测定其含量。
试验中所需的仪器和试剂：高效液相色谱仪、低速离心机、溶剂抽滤装置、针头式过滤器（水系，50个，0.22μm）、滤膜（水系和有机系各2个，0.45μm）、C18柱（4.6×150mm）、可调式移液器、样品瓶（50个，2ml）、乙腈（120ml）、甲醇（色谱级，300ml）、蒸馏水注：若用自动进样器，需要样品瓶，测定时将不少于1ml的样品或标准品加入样品瓶中。
无自动进样器，需手动进样时，不需要样品瓶，用进样针将不少于20ul的样品或标准品打入进样阀。
产品内容：试剂一：粉剂1×1瓶，粉剂2×1瓶，4℃保存；临用前用少量蒸馏水将粉剂1和粉剂2溶解后倒入容量瓶中，用蒸馏水定容至100ml，形成NAD和NADH提取液（注：试剂瓶中的粉剂要冲洗干净），4℃保存3个月；试剂二：粉剂1×1瓶，粉剂2×1瓶，粉剂3×1瓶，4℃保存；临用前用少量蒸馏水将粉剂1、粉剂2和粉剂3溶解后倒入容量瓶中，用蒸馏水定容至1000ml，形成流动相缓冲液基质（注：试剂瓶中的粉剂要冲洗干净）,4℃保存3个月。
试剂三：NAD标准品5mg×1支，-20℃保存。
LAC乳酸测定试剂盒(乳酸氧化酶法)产品书说明书
乳酸测定试剂盒（乳酸氧化酶法）说明书【产品名称】通用名称：乳酸测定试剂盒（乳酸氧化酶法）英文名称：lactic acid Assay Kit（LAC）【包装规格】R1：1⨯40ml、R2：1⨯10ml；R1：2⨯40ml、R2：2⨯10ml；R1：2⨯60ml、R2：2⨯15ml；校准品（选配）：1⨯2ml（1个水平）。
【预期用途】用于体外定量测定人血浆中乳酸的含量。
临床上主要用于代谢性酸中毒的辅助诊断。
【检验原理】乳酸在乳酸氧化酶（lactate oxidase）的催化下，生成丙酮酸和过氧化氢，过氧化氢、4—氨基安替比林、4—氯酚反应生成紫红色化合物，在546nm处有最大吸收峰，其吸光强度与样本中乳酸含量成正比。
乳酸氧化酶乳酸＋O2—————〉丙酮酸＋H2O2过氧化物酶H2O2＋4—氯酚＋4—氨基安替比林—————〉紫色产物＋2H2O【主要组成成分】由试剂R1、R2和校准品组成。
试剂R1:4-氯酚2.1mmol/L、过氧化物酶2KU/L；试剂R2：4—氨基安替比林3.5mmol/L 、乳酸酶3KU/L；校准品:含乳酸水溶液。
校准品可溯源至Randox 参考品CAL2351，注：浓度见每批瓶标示。
不同批号试剂盒中各组分不可互换。
【储存条件及有效期】试剂和校准品在2℃～8℃无腐蚀性气体中避光储存，若无污染，可稳定至失效期，有效期365天。
试剂和校准品开瓶后2℃～8℃可稳定30天。
备注：生产日期及失效日期见外盒或瓶标签。
【适用仪器】日立7180、奥林巴斯AU680、贝克曼LX-20/DXC800、迈瑞BS-380、朕江T900全自动生化分析仪。
【样本要求】1、新鲜空腹血浆。
血液从静脉处收集，存于冰浴，血浆在30分钟内离心，并在1h内上机测定，延迟离心会使乳酸值升高。
离心后2℃～8℃可保存3小时。
2、为保证样本各组分稳定，新鲜采集的血浆需用抗凝剂EDTA氟化钠处理。
【检验方法】（1）双试剂无需配制，直接使用。
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乙酰辅酶A（Acetyl-CoA）含量测定试剂盒说明书微量法
注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。
货号：BC0985
规格：100T/96S
产品内容：
试剂一：液体100mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：粉剂×1支，-20℃保存。
临用前加入250μL试剂五充分溶解备用；用不完的试剂4
℃保存一周；
试剂三：液体×1支，4℃保存。
临用前加入250μL试剂五充分溶解备用；用不完的试剂4℃保存一周；试剂四：粉剂×1瓶，-20℃保存。
临用前加入22.5mL试剂五充分溶解备用；用不完的试剂4
℃保存一周；
试剂五：液体30mL×1瓶，4℃保存。
工作液的配制：临用前请根据拟用工作液体积（样本数×0.23mL）将试剂二、三和四按照1:1:90的比例混合，或者直接把试剂二和试剂三加入到试剂四中混匀（可以测定96样）；加样前置37℃（哺乳动物）或25℃（其它物种）水浴锅中预热30min；现配现用。
产品说明：
乙酰辅酶A广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中。
是生物体能源物质代谢过程中产生的一种重要的中间代谢产物。
在体内能源物质代谢中是一个枢纽性的物质。
糖、脂肪、蛋白质三大营养物质通过乙酰辅酶A汇聚成一条共同的代谢通路-三羧酸循环和氧化磷酸化，经过这条通路彻底氧化生成二氧化碳和水，释放能量用于ATP合成。
此外，乙酰辅酶A是合成脂肪酸，酮体，胆固醇及其衍生物等生理活性物质的前体物质。
测定原理苹果酸脱氢酶可催化苹果酸和NAD生成草酰乙酸和NADH。
柠檬酸合酶可催化乙酰辅酶A和草酰乙酸生成柠檬酸和辅酶A。
利用苹果酸脱氢酶和柠檬酸合酶的偶联反应，乙酰辅酶A含量和NADH的生成速率成正比，340nm下吸光值的上升速率反应了乙酰辅酶A含量的高低。
试验中所需的仪器和试剂：
紫外分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。
操作步骤：
一、乙酰辅酶A的提取
1、细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量
（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL试剂一），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一），进行冰浴匀浆。
8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
二、测定操作表：
1、分光光度计或酶标仪预热30min，用蒸馏水于340nm处调零。
2、将工作液置37℃（哺乳动物）或25℃（其它物种）水浴锅中预热10min。
2、取25μL样本和230μL工作液至微量石英比色皿或者96孔板，混匀，立即记录340nm
处20s的吸光值A1和80s时的吸光值A2，计算ΔA=A2-A1。
乙酰辅酶A含量计算
a.使用微量石英比色皿测定的计算公式如下：
标准条件下测定的回归方程为y=1640x+0.012；x为吸光值，y为标准品浓度（nmol/mL）。
注意：本试剂盒最低检测限为1.6nmol/mL。
（1）按照蛋白浓度计算
乙酰辅酶A含量(nmol/mgprot)=[(1640×ΔA＋0.012)×V1]÷(V1×Cpr)=(1640×ΔA＋0.012)÷Cpr
需要另外测定，建议使用本公司BCA蛋白质含量测定试剂盒。
（2）按照样本质量计算
乙酰辅酶A含量(nmol/g鲜重)=[(1640×ΔA＋0.012)×V1]÷(W×V1÷V2)=(1640×ΔA＋0.012)÷W
(3)按照细菌或细胞密度计算：
乙酰辅酶A含量(nmol/104)=[(1640×ΔA＋0.012)×V1]÷(500×V1÷V2)=(1640×ΔA＋0.012)÷500 V1：加入反应体系中样本体积，0.025mL；V2：加入提取液体积，1mL；
Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；
500：细胞或细菌总数，500万。
b.使用96孔板测定的计算公式如下：
标准条件下测定的回归方程为y=3280x+0.024；x为吸光值，y为标准品浓度（nmol/mL）。
注意：本试剂盒最低检测限为1.6nmol/mL。
（1）按照蛋白浓度计算
乙酰辅酶A含量(nmol/mgprot)=[(3280×ΔA＋0.024)×V1]÷(V1×Cpr)=(3280×ΔA＋0.024)÷Cpr
需要另外测定，建议使用本公司BCA蛋白质含量测定试剂盒。
（2）按照样本质量计算
乙酰辅酶A含量（nmol/g鲜重）=[(3280×ΔA＋0.024)×V1]÷(W×V1÷V2)=(3280×ΔA＋0.024)÷W
(3)按照细菌或细胞密度计算：
乙酰辅酶A含量（nmol/104）=[(3280×ΔA＋0.024)×V1]÷(500×V1÷V2)=(3280×ΔA＋0.024)÷500 V1：加入反应体系中样本体积，0.025mL；V2：加入提取液体积，1mL；
Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；
500：细胞或细菌。