鸡卵黄抗体的制备及其不均一性

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鸡抗内毒素卵黄抗体IgY的制备

鸡抗内毒素卵黄抗体IgY的制备常山;张雅萍;赵永亮;肖光夏【期刊名称】《第三军医大学学报》【年(卷),期】2002(24)10【摘要】目的研究分别应用内毒素 (LPS)、类脂A(LipidA)和大肠杆菌突变株J5免疫鸡后其蛋黄中抗内毒素抗体IgY的产量、纯度、效价并筛选最佳免疫抗原。

方法分别应用内毒素 (LPS)、类脂A(LipidA)和大肠杆菌J5突变株作为抗原免疫2 5周龄Leghorn鸡 ,水溶法 (WD)提取蛋黄中抗体IgY ,双紫外光测定抗体含量 ,SDS PSGE电泳检测抗体纯度 ,细菌酶联染色和ELISA检测抗体特异性、效价及筛选最佳免疫抗原。

结果 3种抗内毒素IgY含量和效价分别为 14 4mg ml和1∶12 80 0 (J5 )、10 61mg ml和1∶12 80 0(LPS)、9 2 6mg ml和1∶3 2 0 0 (LipidA) ,抗体纯度均为 95 %左右。

结论大肠杆菌突变株J5和内毒素 (LPS)为最佳免疫抗原 ,免疫鸡后其蛋黄中抗内毒素抗体IgY的产量和效价最高。

【总页数】3页(P1199-1201)【关键词】鸡卵黄抗体;IgY;内毒素;脂多糖;类脂A;J5;抗内毒素抗体【作者】常山;张雅萍;赵永亮;肖光夏【作者单位】第三军医大学附属西南医院全军烧伤研究所【正文语种】中文【中图分类】R392【相关文献】1.抗载脂蛋白apoB鸡卵黄抗体(IgY)的制备 [J], 尤昕;朴松旭;张静春;姜春善;崔鲜花;金春花2.抗中华眼镜蛇毒鸡卵黄抗体IgY的动物保护作用研究 [J], 潘泓;陈程;詹迪深;陈学文;孔天翰3.鸡卵黄抗眼镜王蛇毒抗体IgY的理化特性 [J], 王薇;余清声;王桂平4.抗胱抑素C鸡卵黄IgY抗体的制备及鉴定 [J], 傅龙章;杨平;李敏惠;潘克俭;邹珂珂;杨菌;李艳超;黄杰;叶启迪;马玲玲5.鸡抗人精子卵黄抗体IgY的制备 [J], 吕年青;黄宇烽;赵金然;徐建平;吕年贵;张建伟因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

抗日本血吸虫SEA鸡卵黄抗体的制备与鉴定

抗日本血吸虫SEA鸡卵黄抗体的制备与鉴定王成祖;莫红梅;程喻力;王磊;蒋自卫;刘文琪;李雍龙【期刊名称】《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》【年(卷),期】2007(25)3【摘要】目的制备特异性抗日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)的鸡卵黄免疫球蛋白(IgY)并检测其特异性、敏感性。

方法用日本血吸虫SEA经翅膀下静脉和皮下免疫25周龄海兰母鸡4次(首次剂量为60μg/只,加强剂量为30μg/只),每次间隔10d。

取免疫前和首次免疫后35d的鸡蛋卵黄,分别用水稀释法提取IgY,BCA法测定蛋白含量,并进行十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹(Westernblotting)分析,ELISA检测纯化后IgY特异性和敏感性。

分别提取免疫后不同时间的卵黄抗体,观察抗体效价的变化。

结果海兰母鸡经SEA首次免疫后35d,每枚蛋经提纯后可得到约61mg抗体,经SDS-PAGE和Westernblotting分析,纯化的IgY有1条主要蛋白带,相对分子质量(Mr)为130000,并可被SEA识别。

母鸡初次免疫后第10天,经SDS-PAGE和ELISA分析,鸡蛋卵黄内即有抗体产生,初次免疫后31d效价可达1∶1600。

双抗体夹心ELISA结果显示纯化后的IgY有较高的敏感性,可检测到的SEA达2.4ng/ml。

结论制备的抗SEA鸡卵黄抗体的特异性和敏感性均较高。

【总页数】5页(P193-197)【关键词】卵黄免疫球蛋白;日本血吸虫;免疫诊断;循环抗原【作者】王成祖;莫红梅;程喻力;王磊;蒋自卫;刘文琪;李雍龙【作者单位】华中科技大学同济医学院病原生物学系【正文语种】中文【中图分类】R383.24;R392.1【相关文献】1.抗弓形虫特异性鸡卵黄抗体的制备与鉴定 [J], 杨婷婷;李世清;潘浩;何似2.抗日本血吸虫雌虫卵黄腺单克隆抗体的制备与鉴定 [J], 汪学龙;蒋作君3.抗胱抑素C鸡卵黄IgY抗体的制备及鉴定 [J], 傅龙章;杨平;李敏惠;潘克俭;邹珂珂;杨菌;李艳超;黄杰;叶启迪;马玲玲4.鸭肝炎病毒的分离、鉴定及鸡抗高免卵黄抗体的制备 [J], 邵艳萍5.抗日本血吸虫Sjp40鸡卵黄抗体的制备及其生物学特性鉴定 [J], 闫俊;赵小玲;陈伟强;孙思明;周晓红;陈敏芳;张艳淑因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

卵黄抗体的研究进展

文献综述卵黄抗体的研究进展郑译西南大学荣昌校区动物医学系，重庆，荣昌402460摘要：抗体（免疫球蛋白，Ig）是指机体受到外来抗原物质刺激后，B细胞识别抗原后活化、增殖分化为浆细胞，由浆细胞合成和分泌的能与相应抗原特异性识别和结合的一类球蛋白。

关键词：卵黄抗体；免疫程序；研究进展卵黄抗体（Immunoglobulin of yolk，IgY）经特定抗原免疫后的母鸡可产生相应的特异性抗体，有研究证实[1]，产蛋鸡的卵黄对抗体有浓集作用，使其不断储存于卵黄中，这种抗体称为卵黄抗体。

1 卵黄抗体的概念卵黄抗体，英文名（vitelline antibody）定义：从免疫禽蛋中提取出的针对特定抗原的抗体，是一种具有较强免疫功能的蛋白质，多为IgG。

禽类免疫后在其卵黄中产生的大量高纯度IgG，其对某些禽类疫病具有明显治疗和紧急预防作用。

卵黄抗体是用特定抗原多次免疫产蛋母鸡，使机体产生相应的特异性抗体，并转移、贮存在卵黄中，经提取纯化的免疫球蛋白卵黄抗体（Egg yolk antibodies eyAb），也称卵黄免疫球蛋白(Egg yolkimmunogbhin，IgY)。

科学家在鸟类的血液循环壁发现三种免疫球蛋白(IgG、IgA 与IgM)，母鸡在细胞分裂产蛋的过程中，会将其免疫球蛋白转移至鸡蛋，母鸡血浆中之IgA与IgM，会在输卵管中与其他的蛋白质结合而构成鸡蛋蛋白的部分。

IgG：免疫球蛋白G (Immunoglobulin G，IgG)的缩写。

IgG是血清主要的抗体成分，约占血清Ig的75%。

其中40～50％分布于血清中，其余分布在组织中。

IGA：一种免疫球蛋白。

异常情况下，在肾脏受到各种炎症反应刺激等因素下，导致IGA过度沉积在肾脏肾小球系膜区等部位，与抗原一起形成免疫复合物，造成肾脏结构病理损害，引起的一系列临床症状，称为IGA肾病。

IGM：免疫球蛋白M(Immunoglobulin M，IgM)的缩写。

鸡法氏囊和腺病毒精制卵黄抗体制备与应用

2019.05作者简介:吴卫东(1979-),山东省菏泽市人,研究生,兽医师,主要从事动物疫病预防控制工作。

*通信作者:魏中锋(1978-),陕西省扶风县人,研究生,兽医师,主要从事动物疫病预防控制工作。

鸡法氏囊和腺病毒精制卵黄抗体制备与应用吴卫东1魏中锋2※徐梅2蔡文利1(1,山东省菏泽市食品药品检验检测研究院274000;2,山东省菏泽市动物疫病预防控制中心2740001)摘要:利用当地分离的禽法氏囊和腺病毒流行株制备二联油乳剂灭活疫苗后制备高免精制卵黄抗体,通过多次加强免疫,以PEG6000沉淀提取和微滤孔滤膜过滤获得精制卵黄抗体,并对卵黄抗体的质量进行检验和临床试验,结果表明,卵黄抗体的预防和治愈效果较好。

关键词:鸡;法氏囊;腺病毒;卵黄抗体;试验鸡法氏囊病(IBD)是一种急性、高度传染性可引起免疫抑制性的鸡的烈性传染病[1]。

近几年,鸡法氏囊和腺病毒对目前鸡养殖业已造成重大危害,尤其在有些地区还存在禽法氏囊和腺病毒混合感染的情况。

本试验用从当地分离的鸡法氏囊和腺病毒流行株病毒制备成二联油佐剂灭活疫苗后,经过对150日龄的蛋鸡进行3次免疫后,制备出抗鸡法氏囊和腺病毒二联精制卵黄抗体,有望对当地鸡法氏囊和腺病毒疫情进行有效控制。

1材料1.1毒株及疫苗毒株为由本实验室分离鉴定的当地流行株,疫苗为本实验室制备的鸡法氏囊和腺病毒二联灭活油乳剂疫苗。

1.2试验鸡卵黄抗体鸡有本地某种蛋鸡养殖场提供150日龄产蛋鸡50只,SPF 鸡购自济南斯帕法斯家禽有限公司。

1.3试验主要仪器电子天平购自日本岛津(Shimadzu)公司、高速冷冻离心机购自德国SIGMA/西格玛公司。

1.4试验试剂法氏囊琼扩标准抗原、法氏囊琼扩标准阳性血清,鸡腺病毒I 亚群IV 型琼扩标准抗原与标准阳性血清,购江苏农科院家禽研究所。

聚乙二醇6000购自江苏省海安石油化工厂。

2方法2.1产蛋鸡免疫对试验产蛋鸡每只鸡颈部皮下注射鸡法氏囊和腺病毒二联灭活疫苗0.5ml/只,2周后加强免疫胸部肌肉注射灭活疫苗0.5ml/只,在第4周后进行最后一次加强免疫颈部皮下和腿部肌肉各注射灭活疫苗0.5ml/只。

卵黄抗体的制备实验报告

卵黄抗体的制备实验报告
实验目的：
本实验旨在制备出卵黄抗体，为后续的生物学研究提供基础。

实验原理：
卵黄抗体是指针对卵黄中特定抗原的抗体。

制备卵黄抗体的过程中，首先需要将卵黄分离出来，并进行纯化处理。

接着将纯化后的卵黄制成免疫原，并将其注射到动物体内，使其产生相应的抗体。

最后，用相应的方法将卵黄抗体分离出来。

实验步骤：
1.卵黄的分离与纯化
将新鲜鸡蛋打开，分离出卵黄，并将其放入离心管中。

然后，用生理盐水将卵黄稀释，离心，去除卵黄中的杂质。

最后，用离心法或沉淀法将卵黄纯化。

2.卵黄免疫原的制备
将纯化后的卵黄用PBS缓冲液稀释至适当浓度，加入适量的胶体铝溶液并搅拌混合，静置一段时间，使胶体铝与卵黄充分结合。

最后，用PBS缓冲液将其稀释至适当浓度，以备注射。

3.动物的免疫注射
将制备好的卵黄免疫原注射到小鼠或兔子等适宜的动物体内。

注射后，需要进行多次免疫，以增强动物产生抗体的能力。

4.卵黄抗体的分离
将免疫动物的血清收集，离心去除红细胞，得到血清。

接着，用卵黄抗原进行免疫沉淀或免疫吸附，分离出卵黄抗体。

实验结果：
经过以上步骤，我们成功制备出了卵黄抗体，并用酶联免疫吸附实验对其进行了检测。

检测结果显示，卵黄抗体的纯度和活性均较高，可以用于后续的生物学研究。

实验结论：
本实验成功制备出了高纯度、高活性的卵黄抗体，为后续的生物学研究提供了基础。

同时，本实验也展示了免疫学的基本原理和操作方法，对我们深入了解生物学研究具有重要意义。

卵黄抗体生产工艺流程

卵黄抗体生产工艺流程
卵黄抗体的生产工艺流程一般包括以下几个步骤：
1. 动物免疫：选择适合的动物（例如兔子或鸡等）作为免疫动物进行实验室饲养和管理。

选择目标抗原或疫苗作为免疫原，通过注射或其他途径将免疫原引入免疫动物体内，激发免疫动物产生抗体。

2. 卵黄收集：根据免疫动物产生的抗体进入卵黄的特性，定期收集卵黄。

一般在动物免疫后的数周或数月内开始收集卵黄。

3. 卵黄精制：收集到的卵黄通过离心或其他方法分离出卵黄清液，将卵黄清液进行过滤、澄清等处理手段，除去杂质。

4. 抗体提取：将精制后的卵黄清液与某种形式的固相抗原结合，例如通过固定化的蛋白A或蛋白G等进行结合。

在温和的条
件下，使抗体与抗原结合，形成固定的抗原-抗体复合物。

5. 分离纯化：使用适当的方法可以从抗原-抗体复合物中分离
出目标抗体。

例如，可以通过调节pH值、添加盐溶液、洗脱
剂等方式，将抗体从固定相上洗脱。

6. 纯化抗体：得到的抗体需要进行进一步纯化，除去其他污染物。

可以使用不同的技术，例如盐析、凝胶过滤、离子交换层析、亲和层析等方法。

7. 鉴定及质量控制：对纯化后的抗体进行鉴定，确定其抗体活
性、纯度和规格等参数。

常用方法有酶联免疫吸附试验（ELISA）、SDS-PAGE凝胶电泳、Western blot、稀释实验等。

8. 储存和包装：将鉴定合格的抗体进行储存和包装，通常采用低温冷冻保存，以保持其稳定性和有效性。

以上是卵黄抗体生产工艺流程的一般步骤，实际操作可能会根据具体情况的不同有所调整和变化。

水稻白叶枯病菌鸡卵黄抗体的制备及其初步应用

水稻白叶枯病菌鸡卵黄抗体的制备及其初步应用许志刚;刘凤权;易建平;宋大鲁【期刊名称】《植物病理学报》【年(卷),期】1996(26)1【摘要】通过免疫产蛋母鸡制备了针对水稻白叶枯病菌菌株ＺＪ－１７３的卵黄抗体（ＩｇＹ），比较了一种中草药佐剂和福氏佐剂对抗体产生和效价的影响。

结果表明：与福氏佐剂相比，中草药佐剂对免疫母鸡的生活力和产蛋影响较小，母鸡恢复产蛋较早（免疫后７天）。

卵黄中抗体出现后，两种佐剂处理的抗体都能在抗体出现后１５天达到较高效价，并维持较高效价达２个月以上。

卵黄抗体经ＰＥＧ方法提纯后可得到比较纯净的ＩｇＹ。

提纯的ＩｇＹ蛋白含量平均为１１．８４３ｍｇ／ｍｌ，双扩散效价为１∶１２８～５１２。

将卵黄抗体ＩｇＹ作为包被抗体用于异动物抗体双夹心ＥＬＩＳＡ可有效地检测水稻病叶病种上的白叶枯病菌。

【总页数】5页(P1-5)【关键词】水稻;白叶枯病;中草药佐剂;卵黄抗体;种子检测【作者】许志刚;刘凤权;易建平;宋大鲁【作者单位】南京农业大学植病系;南京农业大学动物医学院【正文语种】中文【中图分类】S435.111.4;S511.103.2【相关文献】1.应用单克隆抗体鉴别水稻白叶枯病菌血清型的研究 [J], 朱华;黄奔立2.水稻白叶枯病菌单克隆抗体酶联试剂盒的研制及其应用 [J], 朱华;黄奔立3.水稻白叶枯病原细菌单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立及初步应用 [J], 高锦樑;朱华;李清铣4.水稻白叶枯病菌不亲和小种对水稻的诱导抗性和PR蛋白的初步研究 [J], 吴健胜;董春;冷芬飞;王金生5.水稻白叶枯病菌诱导水稻悬浮细胞防卫基因表达的初步研究 [J], 朱友林;吴健胜;王金生因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

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Vol.26No.12000202华　东　理　工　大　学　学　报 JournalofEastChinaUniversityofScienceandTechnology

收稿日期:1999203212

作者简介:杨曜中(1941～),男,江苏人,副教授,从事应用生物化学研究。

文章编号:100623080(2000)0120053204

鸡卵黄抗体的制备及其不均一性杨曜中,　宋聿文,　欧　伶,　范龙彬,　袁勤生(华东理工大学生物化学系,上海200237)

摘要:介绍了免疫期卵黄液中白蛋白(牛)抗体效价和亲合力的变化。研究了pH对稀释卵黄液去脂效果,以及硫酸铵浓度对IgY浓缩、纯化效果的影响。探讨了抗白蛋白IgY的异质性。实验表明稀释卵黄液酸化处理和IgY盐析的最适合条件分别是pH5.1和2.2mol󰃗L。经免疫亲和柱层析或金属(Fe

)螯合亲和柱层析后,白蛋白抗体样品均出现多个不同层析行为的抗体峰。实验提示免

疫卵黄液中不仅可能存在不同亲合力、特异性的白蛋白抗体,还可能存在反映基本结构、理化性质差异的白蛋白抗体。关键词:白蛋白抗体;鸡卵黄液;IgY;免疫亲和柱层析;Fe3+金属螯合亲和柱层析中图分类号:Q511文献标识码:A

鸡卵黄抗体(IgY)是极具开发潜力的抗体资源[1]。国内已有不少单位正在开展鸡卵黄抗体应用的基础研究[2～6]。已经证实卵黄抗体就是由血液转移入卵黄液的IgG类抗体。所以,专一性结合抗原的鸡卵黄抗体可以由相应抗原免疫鸡制得。在国内的研究报导中,极大部分是以病毒、细菌、细胞等颗粒性抗原为免疫原,采用鸡腹部皮内免疫注射。一般来说,可溶性抗原(尤其是低相对分子质量可溶性抗原)的免疫原性比颗粒性抗原差,更难诱导、激活鸡免疫系统的抗体产生。本实验以牛血清白蛋白为免疫原,以福氏佐剂为免疫佐剂,对鸡背部皮下多点免疫注射后,研究免疫卵黄液中白蛋白抗体的效价和亲合力,为免疫卵黄液中可溶性抗原类目抗体的产生积累经验。实验着重探讨了pH对稀释卵黄液去脂效果、硫酸铵盐浓度对抗体浓缩、纯化效果的影响,从而建立了一种简便而经济的卵黄抗体制备方法。从卵黄中分离得到的IgY是一种多克隆抗体。通过免疫所得的多克隆鸡卵黄抗体(IgY)是不均一的,除含有与抗原相关不同亲合力和特异性的IgY分子之外,尚可能含有反映IgY基本结构上差异的IgY分子,为进一步开展IgY的分型研究奠定基础。1　材料与方法1.1　主要材料与试剂蛋鸡由闵行区种禽场提供,鸡IgG抗血清由上海生物化学研究所张祖传研究员提供;除Sepharose

4B为进口分装外,其余试剂均为国产生化或分析纯。抗体稀释液(PBST):0.12mol󰃗L磷酸盐,0.04

mol󰃗LNaCl,1mol󰃗LTween220,pH7.4。1.2　分析方法白蛋白抗体活性按文献[7]的间接酶免分析法。抗体效价(Titre)以ELISA值(A492)≥0.10时的最

大抗体稀释度来表示[8]。使用2mol󰃗LMgCl2为免疫复合物解离剂,抗体亲合力(A)

以有、无2mol󰃗

MgCl2

存在时的抗体活性之比来表示[9],即

OD492(2mol󰃗LMgCl2)󰃗OD492

(PBST)。卵黄液中脂

质量测定按氯仿2甲醇提取法[10]。蛋白量测定按Lowry改良的福林2酚法[11],以牛血清白蛋白(BSA)为标准蛋白。

1.3　鸡的免疫取30周龄蛋鸡,背部皮下多点免疫注射。初次免疫采用佛氏完全佐剂乳化的白蛋白(牛),以后均用佛氏不完全佐剂乳化的白蛋白(牛)。开始连续免疫3次,每2周1次,每次剂量为400Λg。第10周中旬、第11周各加强免疫1次,每次剂量为800Λg。鸡卵黄产生抗体的效价和亲和力见图1。1.4　鸡卵黄抗体的提取取鸡卵黄液,用6倍去离子水搅拌下稀释,用0.1mol󰃗LHCl调至pH5.1。4°C过夜,12000r󰃗min

、

4°C离心25min。除去沉淀,上清液中加入硫酸铵至2.21mol󰃗L饱和度,加入最终浓度为0.5g󰃗L

的

35© 1994-2011 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http://www.cnki.net图1　鸡卵黄白蛋白抗体的表达Fig.1　ExpressionofalbuminantibodyineggyolkNaN3,4°C保存备用。临用前对抗体稀释液或层析平衡液充分透析脱盐。1.5　亲和吸附剂的制备和亲和柱层析BSA2交联琼脂糖按文献[12,13]介绍的环氧氯丙烷活化法制备(略),Fe3+螯合亲和吸附剂按HemdanES[14]介绍的方法制备(略)。

免疫亲和柱层析:以第10周免疫卵黄液提取的白蛋白抗体为层析样品,上白蛋白(牛)2交联琼脂糖柱(30cm×1.5cm,玻璃柱)。平衡液为pH4.5,0.1

mol󰃗L乙酸缓冲液。洗脱液为3mol󰃗LKCNS。流速0.5mL󰃗min,每管4mL,分部收集,分析洗脱液蛋白量(OD

280

值),结果见图2。

Fe3+金属螯合亲和柱层析:以第12周免疫卵黄

液提取的白蛋白抗体为层析样品,上Fe

Sepharose4B柱(40cm×1.5cm,玻璃柱)。平衡液为0.1mol󰃗LpH6.0磷酸缓冲液。洗脱液系统由分别为pH6.0、pH8.0的0.1mol󰃗L磷酸缓冲液组成。采用线性pH递增梯度洗脱,流速0.2mL󰃗min,每管4mL分部收集,洗脱结果见图3。Fe

3+解离液为0.05

mol󰃗LEDTA20.5mol󰃗LNaCl。

图2　鸡卵黄白蛋白抗体的免疫亲和柱层析Fig.2　Immunoaffinitycolumnchromatographyofanti2albuminchickenIgY

2　结果与讨论2.1　鸡卵黄白蛋白抗体的产生免疫后每周卵黄液抗体效价变化见图1,第2～6周为低效价(<1∶400)抗体,第6、14周为中等效

图3　鸡卵黄抗体的Fe3+金属鳌合亲和柱层析Fig.3　Fe3+metal2chelatedaffinitycolumnchromatographyofchickenIgY价(1∶3200～1∶6400)抗体,第7～13、14～15周为高效价(1∶6400～1∶12800)抗体。免疫后每周免疫卵黄液抗体亲合力的变化见图1,第2～4周为低亲合力(<0.7)抗体,第5、7～9、13～16周为中等亲合力(0.7～0.85)抗体,第6、9、11、12周为高亲合力的抗体。在免疫后的早期(2、3周),抗体的效价和亲合力都处于较低水平;次早期(4～6周),抗体亲合力迅速升高,效价仍处于较低水平;中、后期(7～14周),抗体亲合力稳定在较高水平,效价变化较大。2.2　鸡卵黄白蛋白抗体的制备2.2.1　稀释卵黄液的最适pH　收集含白蛋白抗体的卵黄液,用6倍去离子水稀释,打匀后,分成7份,

用0.1mol󰃗LHCl分别调pH6.6、6.0、5.4、5.1、4.8、4.6和4.4。静止过液,12000r󰃗min、4°C离心25min

肉眼观察离心后上清液的浑浊度及沉淀量。去除沉淀,通过测定上清液的脂质量和抗体活性,推算得到去脂率(%)和抗体得率,实验结果见表1。鸡卵黄中含有水(约48%)、脂类物质(磷脂、脂蛋白等)和水溶性蛋白(IgY,鸡血清白蛋白,Α

22糖蛋白、抗生物素

蛋白等)[15]。当从卵黄液中提取抗体时,首先从卵黄液中分离去脂质,再从可溶性蛋白中分离抗体。酪蛋白钠[15]、卡拉胶[16]、海藻酸钠[16]等脂质凝集剂常被用于卵黄液中脂质的去除。实验表明,当卵黄液经6

倍去离子水稀释后,不需添加任何去脂剂,即可促使卵黄液中脂质的沉淀。当稀释卵黄液处于pH6.6、pH6.0时,分别有26.84%和79.5%的脂质转移入沉淀,离心后的稀释卵黄液呈高度浑浊状态;当pH5.4、5.1、4.8、4.6时,均有92%以上的脂质转移入沉淀,但大量抗体与脂质一起转移入沉淀,pH4.6

和pH4.4时有70%以上的抗体转移入沉淀;当pH5.1时,脂质几乎全部转移入沉淀,肉眼观察的沉淀量也达到最大,抗体仍全部保留在卵黄液中,稀释卵黄液呈微混状态。所以,稀释卵黄液的pH是影响脂质和抗体彼此分离的关键因素,pH5.1是从稀释卵黄液分离抗体的最适条件。低于pH5.1,引起抗

45 华　东　理　工　大　学　学　报第26卷