噬菌体及其研究进展知识分享
工程噬菌体：重塑生物科技与感染治疗的未来
工程噬菌体：重塑生物科技与感染治疗的未来引言在生物科技不断发展的今天，我们见证了多种新型技术的涌现，其中最具潜力和挑战性的就是工程噬菌体。
作为一种天然的生物工具，噬菌体在许多重要领域展示出其独特的优势，包括生物制造、感染治疗以及生物防御等。
本文将深入探讨工程噬菌体的研究进展、应用前景以及未来挑战。
图1图1工程噬菌体：重塑生物科技与感染治疗的未来一、工程噬菌体的研究进展噬菌体的生物学特性与功能噬菌体是一类专性吸附在细菌上的病毒，通过侵入细菌内部并利用其复制机制来产生新的病毒颗粒。
根据其宿主范围，噬菌体可分为广谱噬菌体和窄谱噬菌体。
此外，根据其生命周期，噬菌体还可分为烈性噬菌体（virulent phage）和温和噬菌体（temperate phage）。
工程噬菌体的改造与优化工程噬菌体是通过对野生型噬菌体进行遗传改造而获得的。
改造的主要目标是提高噬菌体的宿主范围、感染效率以及稳定性等。
通过基因敲除、基因置换、基因修饰等方式，我们可以对野生型噬菌体进行改造，从而获得适用于不同应用场景的工程噬菌体。
三、工程噬菌体的应用前景感染治疗工程噬菌体在感染治疗中具有巨大的潜力。
例如，通过特异性地靶向并裂解病原菌，工程噬菌体可以有效地治疗由耐药性细菌引起的感染。
此外，通过基因工程技术，我们还可以将药物分子编码到噬菌体基因中，从而开发出新型的基因疗法。
生物制造工程噬菌体在生物制造领域也展现出巨大的应用潜力。
例如，利用噬菌体的生物合成能力，我们可以生产出许多难以通过传统方法生产的生物分子。
此外，通过遗传改造，我们还可以提高噬菌体的生产效率，从而降低生产成本。
生物防御在生物防御领域，工程噬菌体可以作为一种有效的生物武器来对抗病原菌的传播。
例如，通过开发具有高度特异性以及高效感染力的工程噬菌体，我们可以将其用于防御由细菌引起的流行性疾病。
此外，工程噬菌体还可以用于开发新型的生物检测方法，从而实现对病原菌的快速检测与预警。
噬菌体的分类、生物学性状及应用
噬菌体的分类、生物学性状及应用噬菌体是一类寄生于细菌的病毒，也被称为细菌噬菌体或细菌病毒。
它们是病毒领域中最为广泛研究的对象之一，不仅在科学研究中有重要地位，也具有广泛的应用价值。
噬菌体的分类、生物学性状以及应用有着丰富的内容。
噬菌体的分类：噬菌体根据其基因组的结构和复制策略可以分为两大类：尾端噬菌体和整合噬菌体。
1. 尾端噬菌体（T4类噬菌体）：它们具有复杂的结构，并且有着特别高的复制速率。
这类噬菌体通常具有头部、尾部和尾纤维等结构，头部包裹着基因组，尾部主要参与寄主感染。
尾端噬菌体主要感染细菌，并在寄主内进行复制。
2. 整合噬菌体：整合噬菌体通过整合到细菌的基因组中而进行复制。
整合噬菌体在培养基中以类似于细菌的形态存在，并通过细胞分裂传递给下一代细菌。
这类噬菌体在寄主不利于感染时会转入潜伏状态，以免被细胞免疫系统发现。
噬菌体的生物学性状：1. 构造：噬菌体主要由头、尾和尾纤维等多个部分构成。
头部包含基因组，尾部用于寄主感染，尾纤维通过识别特异的寄主受体进行附着和感染。
2. 复制策略：噬菌体通过感染寄主细菌，将自己的基因组注入寄主细菌细胞内，并借助寄主细胞机制进行复制。
复制过程包括基因组复制、蛋白质合成和组装等步骤。
3. 感染特异性：噬菌体具有高度的感染特异性，只能感染特定种类的细菌。
这一特性使得噬菌体可以作为治疗感染性细菌病的有希望的替代品。
4. 寄主凋亡：噬菌体感染宿主细菌后，会通过寄主凋亡来释放复制产物。
这是一种机械性凋亡，将寄主细胞破裂，从而释放大量新生噬菌体。
噬菌体的应用：1. 抗菌剂：噬菌体可以作为抗菌剂用于治疗多种细菌感染，尤其是耐药菌感染。
相较于传统的抗生素，噬菌体具有极强的目标性，不会对人体的自身菌群产生伤害。
2. 食品安全：噬菌体可以用于食品安全领域，对抗致病菌的感染。
它们可以被添加到食品中，通过感染并降低细菌数量，从而保证食品的安全。
3. 生物工程：噬菌体被广泛应用于生物工程领域。
噬菌体的应用及原理
噬菌体的应用及原理噬菌体的定义噬菌体是一种寄生于细菌的病毒，可以感染细菌并在其中复制繁殖。
噬菌体可以用来治疗细菌感染，也可以作为研究细菌及基因工程的工具。
噬菌体的应用噬菌体在医学、科研和工业领域都有广泛的应用。
以下是噬菌体的主要应用领域：1. 细菌感染治疗噬菌体可以作为一种新型的生物治疗方式，用于治疗细菌感染病例。
与传统的抗生素相比，噬菌体具有以下优势： - 高度专一性：噬菌体只感染并杀灭特定细菌，对宿主细胞无害。
这使得噬菌体治疗能够减少对正常细菌群落的影响。
- 多样性：噬菌体种类繁多，可以选择性地感染不同的细菌株，包括耐药菌株。
- 动态适应性：噬菌体可以自行进化和适应细菌的变异，减少细菌抵抗的风险。
2. 细菌检测与监测噬菌体可以被用于检测和监测环境中的细菌污染情况。
通过选择性感染目标细菌株，噬菌体可以在环境样本中寻找特定的细菌，并提供一个快速、灵敏的细菌检测方法。
3. 基因工程噬菌体可以用作基因工程的工具，用于基因转导和基因表达调控。
通过将目标基因插入噬菌体中，可以利用噬菌体的感染及复制机制将目标基因导入宿主细菌，并实现基因的表达。
4. 抗菌剂发现噬菌体可以被用于发现新的抗菌剂。
通过在噬菌体基因组中插入可能具有抗菌活性的遗传元件，可以筛选出具有抗菌作用的化合物。
噬菌体的原理噬菌体感染细菌并复制繁殖的过程可以分为以下几个步骤：1. 吸附和附着噬菌体首先通过其尾部上的接受器与细菌表面的特定受体结合，完成吸附和附着。
2. 穿透细胞壁噬菌体通过尾部尾节的收缩来穿透细菌的细胞壁，使得噬菌体的基因组DNA 能够进入细菌细胞内。
3. 基因组注入噬菌体基因组的DNA进入细菌细胞后，噬菌体基因组的DNA会在细菌细胞内复制，并为合成新的噬菌体DNA提供模板。
4. 合成和组装在细菌细胞内，通过细菌细胞的基因表达系统，合成新的噬菌体基因组和噬菌体结构蛋白。
最后，这些结构蛋白会组装成新的噬菌体颗粒。
5. 噬菌体释放新的噬菌体颗粒会使细菌细胞破裂并释放出来，细菌细胞溶解后的噬菌体即可以感染新的细菌并重复上述过程。
噬菌体学 pdf
噬菌体学：探索微观世界中的生命之谜噬菌体学，一门研究噬菌体的科学，正逐渐揭开微观世界中的生命之谜。
噬菌体，一种能感染和裂解细菌的病毒，自其被发现以来，一直是生物学领域的研究热点。
在科技日新月异的今天，噬菌体学的发展不仅加深了我们对生命本质的理解，还为疾病治疗和生物技术应用带来了革命性的突破。
噬菌体的生物特性噬菌体是一种非常独特的生物体，它们具有高度的专一性，只能感染特定的细菌。
与传统的病毒相比，噬菌体的基因组通常较小，但结构却异常复杂。
它们拥有一套独特的复制策略，能够在细菌内部快速复制，最终导致细菌裂解，释放出新的噬菌体。
噬菌体学的应用价值随着噬菌体学的深入发展，其在多个领域的应用价值日益凸显。
首先，在医学领域，噬菌体疗法被视为一种对抗细菌感染的有效手段。
由于噬菌体的专一性和高效性，它们可以精准地清除体内的病原体，而不会对正常细胞造成损害。
此外，噬菌体还可以用于疫苗研发，为预防疾病提供新的策略。
其次，在生物技术领域，噬菌体展示技术已成为研究蛋白质相互作用和蛋白质组学的重要工具。
通过将外源基因插入噬菌体的基因组中，科学家们可以构建出具有特定功能的噬菌体，用于筛选抗体、蛋白质相互作用和药物发现等领域。
未来展望尽管噬菌体学已经取得了令人瞩目的成就，但未来的研究仍充满挑战与机遇。
随着基因组学、蛋白质组学和合成生物学等技术的不断发展，噬菌体的生命机制将得到更深入的揭示。
同时，随着噬菌体在医学和生物技术领域的广泛应用，如何解决其安全性和规模化生产等问题也显得尤为重要。
此外，随着全球环境问题日益严重，利用噬菌体进行生物治理和环境保护也成为一个新的研究方向。
例如，利用噬菌体清除污染水体中的细菌，或利用噬菌体调控肠道微生物群落等。
总之，噬菌体学作为一门新兴的交叉学科，正以前所未有的速度改变我们对生命的认知。
在未来，随着研究的不断深入和应用领域的拓展，噬菌体学将在人类健康、生物技术和环境保护等方面发挥更加重要的作用。
噬菌体及其研究进展
噬菌体颗粒在结构上有很 大差别，一般可分成三种 类型，即 无尾部结构的二十面体， 有尾部结构的二十面体和 线状体，迄今已知的噬菌 体大多数是有尾部结构的 二十面体。
头部
尾部
核酸：DNA或RNA,基因组大小为2-200kb，某些噬菌体基因 组中还含有异常碱基。 大多数为线状双链
DNA噬菌体
简介
A图只有细菌,荧光视野里不见任何发光物质;B图中只有荧光标记O-I噬菌体,视野 下偶尔可见少量圆点状的荧光物质,不见菌形;C图是荧光标记O-I噬菌体和沙门氏 菌混合,可见大量杆状物,少量点状物,极少数彗星状杆状物,将杆状物质与沙门氏菌 的革兰氏染色形态进行比较,两者一致。 由此可推知,C图中杆形物是侵有荧光噬菌体的沙门氏菌,点状物是标记的O-I噬菌 体,结合B图可知彗星状杆形物是即将裂解的宿主菌。
利用噬菌体展示技术制备抗体、模拟抗原表位，不仅绕过 了细胞融合，而且可以以单克隆抗体（McAb ） 或单链抗 体（ ScFv）为靶分子筛选真菌毒素的模拟抗原表位，代 替真菌毒素的标准品，建立无毒 ELISA检测方法，保证实 验操作人员和相关研究人员的人身安全。 熊啸（2007 年）等选用抗黄曲霉毒素M1（antiAFM1,Aflatoxin M1,AFM1）单克隆抗体为筛选配基，从噬 菌体表面展示的随机 7 肽库中筛选出 AFM1 抗原的模拟表 位LTSFPRH 和MAPSSWR，为研制出安全无毒的 ELISA 试剂 盒奠定基础。
3、噬菌体在食品产业中的应用
食源性疾病病原的检测技术 作为食品添加剂 噬菌体展示技术检测真菌毒素
3.2作为食品添加剂
美国食品和药物管理局批准了一种由噬菌体病毒混合而成的产 品，主要用于杀灭肉制品中的李氏杆菌。这是美国首次批准将 病毒用作食品添加剂。 美药管局专家称，该产品在制备过程中可能留有残毒，但试验 表明，这些微量的残毒不会引起任何健康问题。该产品包含6 种噬菌体病毒，可在熟肉片和香肠等包装前喷洒在这些肉制品 上，有效杀灭多种李氏杆菌，预防由这些细菌引起的食物中毒。 产品中所包含的噬菌体只会攻击李氏杆菌，对人体和植物细胞 都不会产生影响。
知识点-噬菌体侵染细菌的实验
DNA的组成元素： C、H、O、N 、P （标记32P）
①标记噬菌体方法： 在分别含有放射性同位素32P 和35S的培养 基中培养细菌,细菌被分别标记上32P 和35S 分别用上述细菌培养T2噬菌体，制备含32P 的噬菌体和含35S的噬菌体
噬菌体侵染细菌的实验 噬菌体侵染细菌的实验 科学探究 提出问题 做出假设
放射性在 上清液 中 出现
DNA和蛋白质 放射性在 都注的实验 噬菌体侵染细菌的实验 进行实验、得出结论
蛋白质外壳 留在外面
DNA进入到细菌细 胞中
噬菌体侵染细菌的实验 噬菌体侵染细菌的实验
噬菌体侵染细菌的实验表明:
在噬菌体中,亲代和子代之间具有 连续性的物质是DNA,而不是蛋白质, 也就是说,子代噬菌体的各种性状是通 过亲代的DNA遗传给后代的,
实 验 设 计
得出结论 进行实验
噬菌体侵染细菌的实验 噬菌体侵染细菌的实验
提出问题
噬菌体侵染细菌时，注入细菌细胞内的物质究 竟是DNA还是蛋白质？
细菌
做出假设
①只注入DNA 不注入蛋白质
②只注入蛋白质 不注入DNA
③同时注入DNA和蛋白质
噬菌体侵染细菌的实验 噬菌体侵染细菌的实验
32P
实验设计
搅拌、离心
知识点——噬菌体侵染 细菌的实验
噬菌体侵染细菌的实验 噬菌体侵染细菌的实验
（1）噬菌体的结构模式图
T2噬菌体中 60%是蛋白质, 40%是DNA..
T2噬菌体是一种专门寄生在大肠杆菌中的病毒。
噬菌体侵染细菌的实验 噬菌体侵染细菌的实验
（2）研究方法：
同位素标记法
35 蛋白质的组成元素： C、H、O、N、S （标记 S ）
DNA才是真正的遗传物质
噬菌体在基因工程技术领域中的应用研究进展
噬菌体在基因工程技术领域中的应用研究进展噬菌体（phage）是一类寄生于细菌体内的病毒，它们以细菌为宿主，通过感染细菌并进行复制繁殖来完成自己的生命周期。
噬菌体在基因工程技术领域中具有广泛的应用前景。
不仅可以用于基因传递和基因治疗，还可以在基因工程中作为模型组织来研究基因功能和调控。
本文将重点探讨噬菌体在基因工程技术领域中的应用研究进展。
噬菌体在基因工程中的一项重要应用是基因传递。
噬菌体可以作为载体传递外源基因到细菌中，实现基因的插入、表达和产物的生产。
常见的噬菌体载体有T7、lambda和M13等。
通过对这些噬菌体载体进行修饰，可以构建目标基因的克隆，实现目标基因的表达和功能分析。
此外，噬菌体还可以被用于将外源基因传递到其他生物中，如植物、动物细胞和真核微生物等。
这些应用丰富了基因工程技术在不同领域的研究内容，并促进了基因工程技术的快速发展。
另一个噬菌体在基因工程中的应用是基因治疗。
基因治疗是利用基因工程技术来修复或替代患者体内缺陷基因的一种新型治疗方法。
噬菌体可以通过转导获得的基因带入人体细胞，使其表达函数性蛋白质，以治疗基因缺陷带来的疾病。
噬菌体可以作为基因传递载体，将目标基因传递到人体细胞中，使其发挥治疗作用。
这种基因治疗方法具有靶向性、高效性和安全性等优势，且可以应用于众多遗传病的治疗，为基因工程技术开辟了新的研究和应用领域。
此外，噬菌体还可以在基因工程中作为模型组织来研究基因功能和调控。
通过研究噬菌体的基因组、基因调控和其与细菌宿主的相互作用，可以深入了解细菌感染和噬菌体复制的机理。
噬菌体的复制过程中涉及的调控因子和蛋白质可以为其他生物的基因调控研究提供参考。
此外，噬菌体还被广泛应用于基因工程中的分子生物学研究，如DNA测序、PCR扩增和基因克隆等。
通过对噬菌体的研究，可以不断优化和改进基因工程技术，以满足不同研究领域的需求。
噬菌体在基因工程技术领域中的应用受到了广泛关注，然而也面临着一些挑战。
噬菌体知识点总结
噬菌体知识点总结一、噬菌体的结构噬菌体的结构包括头部、尾部和纤毛等部分。
头部包含病毒的遗传物质（DNA或RNA），尾部和纤毛负责连接并注射病毒的遗传物质到细菌内。
噬菌体具有一定的遗传物质，有些噬菌体还带有一些蛋白质酶和结构蛋白，其结构紧凑而高效，能有效感染细菌。
二、噬菌体的生命周期噬菌体的生命周期包括寄主细胞感染、复制、组装和释放等多个阶段。
当噬菌体感染到细胞表面后，病毒会通过尾部和纤毛注射遗传物质到细胞内，遗传物质随后开始复制并制造新的病毒颗粒。
最终，新的病毒颗粒会组装成完整的噬菌体，并释放到环境中去感染其他细菌。
三、噬菌体在医学领域的应用噬菌体可以作为一种天然的抗菌剂，用于治疗多种细菌感染疾病，如肺炎、脑膜炎、败血症等。
由于细菌对抗生素产生抗药性的问题日益严重，噬菌体治疗被认为是一种非常有前景的替代方法。
目前已有一些临床试验表明，噬菌体治疗在治疗细菌感染方面具有显著效果，且对人体没有明显的毒副作用。
四、噬菌体在农业领域的应用在农业生产中，细菌性疾病是造成农作物减产和质量下降的重要原因。
而噬菌体可以作为一种天然的抗菌剂，用于预防和治疗作物上的细菌性疾病。
例如，噬菌体可以用于防治番茄、土豆、玉米等作物上的细菌性病害，取得了良好的防治效果。
五、噬菌体在食品工业领域的应用由于其对细菌的高效杀灭作用，噬菌体可以被用于食品加工和保存中。
例如，在食品加工中，可以使用噬菌体对肉类、奶制品等食品中的细菌进行控制，延长食品的保质期。
此外，噬菌体还可以被用于抑制食品中的致病菌，保障食品的安全性。
六、噬菌体的未来发展方向随着人们对抗生素耐药性的关注不断增加，噬菌体治疗作为一种替代疗法，具有广阔的应用前景。
在未来的研究中，可以通过基因工程技术对噬菌体进行改良，使其更加高效、安全和稳定，以满足不同领域应用的需求。
同时，研究人员还可以进一步深入了解噬菌体的生存机制和感染方式，以拓展其在医学、农业和食品工业等领域的应用范围。
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3.1.2荧光染料标记法
❖ 原理：选用一种合适的染色剂，噬菌体的核酸染色标记，
然后用标记过的噬菌体侵染相应的宿主菌，噬菌体吸附在 宿主菌表面后，随即将标记过的核酸注入宿主细胞，随着 越来越多的噬菌体核酸的注入，细胞内荧光随着荧光素的 增多而增强，借助荧光显微镜便能判定宿主菌的存在，从 而实现病原菌的检测。
烈性噬菌体:能在宿主菌内复制增殖，产生许多子代噬菌
体，并最终裂解细菌。
温和噬菌体（溶原性噬菌体）：噬菌体基因组整合于宿主 菌染色体中，不产生子代噬菌体，也不引起细菌裂解，但 噬菌体DNA随细菌基因组的复制而复制，并随细菌的分裂 而分配至子代细菌的基因组中。
烈
性
噬
菌
生物合成
体
的
装配
溶 菌
释放
周 期
2、噬菌体的应用技术
噬菌体及其应用
Contents
1
噬菌体简介
2
噬菌体应用技术简介
3
噬菌体在食品产业中的应用
4
前景及展望
1、噬菌体简介
❖ 概念：噬菌体是感染细菌、 真菌、螺旋体、支原体、 立克次体及放线菌等微生 物的病毒,属非细胞微生 物。
❖ 特性： ▪ 个体微小，需用电镜观察，
可以通过细菌滤器； ▪ 没有完整的细胞结构，由
大多数为线状双链 DNA噬菌体
少数为环状单链 多数为线状单链 RNA噬菌体 少数为线状双链
化学组成
❖ 核酸：DNA或RNA,基因组大小为2-200kb，某些噬菌体基因 组中还含有异常碱基。 大多数为线状双链 DNA噬菌体 少数为环状单链 多数为线状单链 RNA噬菌体 少数为线状双链
❖ 按与宿主的相互关系，噬菌体可以分为两种类型： 烈性噬菌体，温和噬菌体（溶原性噬菌体）
简介
A图只有细菌,荧光视野里不见任何发光物质;B图中只有荧光标记O-I噬菌体,视野 下偶尔可见少量圆点状的荧光物质,不见菌形;C图是荧光标记O-I噬菌体和沙门氏 菌混合,可见大量杆状物,少量点状物,极少数彗星状杆状物,将杆状物质与沙门氏菌 的革兰氏染色形态进行比较,两者一致。 由此可推知,C图中杆形物是侵有荧光噬菌体的沙门氏菌,点状物是标记的O-I噬菌 体,结合B图可知彗星状杆形物是即将裂解的宿主菌。
❖ 在每格中央用灭菌的毛细滴管滴上O-I噬菌体, 待溶液干 后置37 ℃ 6-8 h 培养或过夜, 观察噬菌体裂解情况。
❖ 发现被O-I 噬菌体裂解的菌株, 马上挑取噬斑周围菌苔直 接做沙门氏菌A- F 多价血清凝集试验, 凝集阳性者即可 初步报告结果, 然后转种克氏双糖铁管作进一步鉴定分型。
简例
❖ 该技术中，将一个报告基因通过噬菌体插入到目标菌体的 D N A 中，随着报告基因的表达，目标菌体便可快速得到 检测。
❖ 应用在这一技术的报告系统主要有原核生物和真核生物的 荧 光 素 酶 (lux,luc) 基 因 ， 细 菌 冰 核 蛋 白 (inaW) 基 因 ，
E.coliβ- 半乳糖苷酶(lacZ)基因和生物素亲和蛋白。报
反应是在荧光素酶的催化下进行的。细菌的荧光素酶是一个7 7 k D 的 二聚体，其中包含α亚基( 4 0 3 7 k D ) 和β亚基(37kD)。 目前，生物发光基因(lux,luc)在报告噬菌体检测技术中应用最为广泛。
❖ O-I噬菌体是作用于沙门氏菌属特异性噬菌体,染色体为双 链DNA,受体是宿主细胞壁上核心多糖的乙酰氨基葡萄糖。 应用O-I噬菌体进行饮食行业及公共场所从业人员带菌调 查结果表明, 沙门氏菌检出率为0. 131%, 与广东省报道 的0. 134%检出率相近, 说明O- I 噬菌体应用对沙门氏菌 的诊断具有较高的特异性和敏感性, 不失为大量从业人员 沙门氏菌调查的较为理想快速诊断方法。
简例
❖ 蒋鲁岩等用此方法快速检测食品源沙门氏菌，检测灵敏度 达10 CFU/100μL;120份食品样品中沙门氏菌的O-I噬菌体 检测与生化鉴定结果的阳性率分别为9.17%和10%,符合率 为91.7%。表明用荧光标记的O-I噬菌体可以快速、直观、 准确、大量地检测食品中沙门氏菌。
3.1.3报告基因检测技术
测定辐射剂量
鉴定细菌分型
预防和治疗 传染性疾病
应用
检测基因 产物的活性
检测病原菌
筛选目的基因
3、噬菌体在食品产业中的应用
❖ 食源性疾病病原的检测技术 ❖ 作为食品添加剂 ❖ 噬菌体展示技术检测真菌毒素
3.1食源性疾病病原的检测技术
食源性疾病病原的检测技术是食源性疾病的预防与控制的关 健的技术环节。数据显示，每年大约有7600 万人因食用了 受污染的食物而患病，其中91% 是由于细菌污染造成。
核酸和蛋白质组成； ▪ 专性活细胞内寄生,具有
严格的寄生特异性。
形态与结构
❖ 形态：蝌蚪形，微球形，细杆形❖ 噬菌体颗粒在结构上有很
大差别，一般可分成三种
头部
类型，即
无尾部结构的二十面体，
有尾部结构的二十面体和
线状体，迄今已知的噬菌
尾部
体大多数是有尾部结构的
二十面体。
❖ 核酸：DNA或RNA,基因组大小为2-200kb，某些噬菌体基因 组中还含有异常碱基。
告噬菌体已经能够成功检测许多菌种，如
E.coli,Salmonella.spp 等 。
简介
利用荧光素酶基因作为报告基因的快速检测技术
对于细菌来说，发光机理可用下式表述：
F M N H 2+ R C H O + O 2 → F M N + H 2O + R C O O H + h ν(490nm)
噬菌斑检测 荧光染料标记 报告基因检测
3.1.1噬菌斑检测
❖ 原理：用噬菌体截获某种 病原菌，随后病原菌被噬 菌体感染，用杀毒剂将胞 外的剩余噬菌体杀死，然 后将噬菌体与被感染细胞 混合并在装有软琼脂的双 层培养基上培养，被感染 的细胞破裂释放出子代噬 菌休，在培养基中就会形 成空斑。
实验方法
❖ 标本采集后置于SC 增菌管中37 ℃ 增菌18 h左右, SS 平 板分离培养37 ℃ 过夜, 然后挑出具有沙门氏菌特征的单 个菌落划线接种于普通琼脂平皿上, 每块平板划格后可接 种8 个菌落左右。
现存的检测方法包括传统的细菌分离培养法、多聚酶链式反 应(PCR)法、生物芯片技术和免疫学方法等。 缺点：费时费力、价格昂贵、特异性或灵敏度低、国内试剂 供应不配套等，很难适应公共卫生事件应急处理快速反应的 需要。
有必要寻找一种简捷、快速、灵敏度高的检测食源性病原微 生物的方法以及技术平台。
检测方法