疑难血型鉴定处理流程
疑难血型的实验室及临床处理
疑难血型的实验室及临床处理血型定义：血液系统遗传多太性。
但是一般来说，血型指红细胞ABO及Bh血型。
目前，血型主要由红细胞凝集来判断。
有时由于疾病引起红细胞血型抗原表达发生改变或血清中抗体改变，致使血型判断困难或判断错误。
和其他红细胞血型系统相比，ABO系统有其特殊性，即正常人红细胞上缺乏A或B抗原时，其血浆中会出现相应抗体。
因此，检查ABO血型，必须做正反定型，如正反定型吻合，则血型检测无误。
如正反定型不符合，多系技术错误造成，应症先重复试验，再找其原因。
常见的技术错误包括：1）标本、试剂、试管或玻片弄错。
2）红细胞悬液太浓或太淡。
3）记录错误。
4）标本混淆。
5）溶血。
6）未加试剂。
7）未按试剂供应商的要求进行操作。
8）离心机有问题。
9）试剂污染。
10）离心时加热。
某些疾病状态可能使红细胞抗原减弱或产生假抗原，如白血病，何杰金病，10号染色体转位，红细胞系统极度增生如海洋性贫血。
可能出现如下反应格局：正定型反定型表现型抗-A 抗-B 抗AB A1细胞B细胞A +mf —++mf —+++B —±+ ++++ —红细胞ABO抗原减弱与病程有关，病情缓解时抗原性会增强。
此外，血液中凝集素效价可由于低丙种球蛋白血病而降低，如慢淋、淋巴瘤、免疫缺陷性疾病如先天性低丙种球蛋白血病。
老年人及婴儿凝集素效价也低。
肠梗阻、结肠、直肠癌或其他下消化道疾病时肠壁通盘性啬，细菌多糖入血，使A节型患者出现获性B现象。
胃或胰腺恶性肿瘤患者血清中可能含有过多的可溶性血型物质，这些物质中和抗血清从而影响正定型结果。
如出现ABO正反定型不符，不能轻易发血。
首先应重复试验，如仍不符合，应再抽标本并进一步了解病人情况，如诊断、年龄、妊娠史、输血史、用药史、免疫球蛋白平等。
将ABO正反定型不符人为分为4类第一类由抗体减弱或缺乏导致ABO正反定型不符，常见情况如下：1）新生儿2）老年人3）白血病患者合并低丙种球蛋白血症4）淋巴瘤合并低丙种球蛋白血症者5）用免疫抑制剂导致低丙种球蛋白血症者6）先天性无丙种球蛋白血症7）免疫缺陷疾病患者8）骨髓移植患者（由于治疗引起的低丙种球蛋白血症或植入骨髓血型不同）处理方法：增强反定型反应----将患者血清与A1或B细胞在室温下孵育15-30分钟，如仍无反应，将混合物质4℃下孵育，注意做自身及O型细胞对照。
血型鉴定常见的疑难问题分析及处理共53页文档
血型鉴定常见的疑难问题分析及处理
11、用道德的示范来造就一个人，显然比用法律来约束他更有价值。—— 希腊
12、法律是无私的，对谁都一视同仁。在每件事上，她都不徇私情。—— 托马斯
13、公正的法律限制不了好的自由，因为好人不会去做法律不允许的事 情。——弗劳德
14、法律是为了保护无辜而制定的。——爱略特 15、像房子一样，法律和法律都是相互依存的。——伯克
临床血型鉴定、交叉合血及订血流程
第一部分血型鉴定一、主要流程离心→核收→登记→鉴定→复核→报告二、详细流程及操作步骤1.接收并检查标本是否合格（有无凝块，条码是否清晰完整等），若不合格则联系临床医生处理并登记；2.3000RPM离心5分钟，使红细胞与血浆分离；3.将标本核收入LIS系统中“戴安娜手工合血”项目下，并依次编号；4.登记：在“血型鉴定原始记录本”上登记病人信息和编号；5.检测前准备：(1)红细胞悬液配制：取软管，加入1ML生理盐水，再加入10UL红细胞后混匀待用；(2)反定型准备：取两只软管，分别标记“反A/反B”及编号，并分别加入混匀后的A1\B标准红悬一滴；6.检测：(1)正定型：取正定型鉴定卡片并标记病人姓名，检测日期和编号，撕开铝箔，每孔加入50UL上述制备并混匀好的红悬，卡式离心机离心9分钟后观察结果；(2)反定型：向上述制备并混匀好的“反A\反B”管中每管加入100UL待检者血浆，混匀静置1分钟后，3000RPM离心1分钟后观察结果；7.结果判读：先以反定型判读血型，再以正定型进行验证(1)反定型：于灯光下轻轻摇晃试管，出现絮状物表明有凝集，判定方式与正定型判断相反；(2)正定型：以凝胶柱上端出现红细胞凝集物为阳性，直接判读ABO和RH血型，并注意检查质控是否失效；8.结果登记并签字：将结果登记至“血型鉴定原始记录本”并签字；9.录入并审核发布报告：将结果录入“戴安娜手工合血”项目下，点击保存，最后检查一遍后审核报告。
第二部分临床配血及发血流程（一）主要流程：申请单与标本接收→大血型和抗筛检测→交叉合血→出库收费→发血（二）详细步骤：（1）申请单与标本接收：①接收到临床用血申请单后，首先明确用血类型为常规用血还是紧急用血，如果是紧急用血则需问清楚紧急用血的原因，病人目前全身情况等，并涉及后续交叉配血方法学选用的区别，常规用卡式合血法，紧急用凝聚胺合血法；②核对病人信息并检查标本合格之后，请医生在“标本接收与血袋回收记录本”上签字；大血型和抗筛检测：③检测前准备：1)大血型用标准红悬：取两只软管分别标记A1/B，按照4滴生理盐水：1滴混匀后红悬的比例配制适量的A1/B标准红悬待用；2)抗筛检测用红悬：同样取三支软管，分别标记I/II/III，按照4滴生理盐水：1滴相应抗筛红悬的比例配制适量待用；3)待检者红悬：按1ML生理盐水：10UL红细胞的比例于软管中配制并混匀待用；(2)抗筛检测：取抗筛卡三孔，标记病人姓名/日期及I/II/III编号，按编号分别加入I/II/III型红悬50UL，再向每孔加入25UL待检者血浆，温育器中温育15分钟后，于卡式离心机离心9分钟后观察结果并记录于输血申请单上；(3)大血型鉴定：取大血型鉴定卡标注病人信息，检测日期后于A\B\C\D\E\Ctl孔每孔加入50ul待检者红悬，A1/B孔分别加入50ul相应的标准红悬和50ul待检者血浆后离心9分钟后观察结果并记录于输血申请单；(4) 交叉合血根据患者的血型，申请量，病人血色素及全身状况结合库存及效期选择合适的血液品种和血量进行配血→取软管一支，将血袋上标记标签1贴于其上并扯下一段血辫将其内血液转移至软管中离心（3000RPM 3分钟）备用→以1ML生理盐水：10UL红细胞的比例分别配制献血者和受血者红悬备用→将血袋上另一标记标签撕下贴于申请单，同时将“病例备查”和“存档备查”两个标签撕下备用→用小纸片标注病人姓名和血袋号后与血袋一起放回冰箱保存。
疑难血型鉴定及处理分析
疑难血型鉴定及处理分析摘要：目的：探究ABO疑难血型产生原因和正确血型鉴定方法，意在提高疑难血型鉴定准确性。
方法：把2022年1月到2023年7月本院收集的献血者45例纳入研究，经微孔板法开展ABO血型正反定型检测，选出疑问标本并开展试管法复检，并实行吸收放散试验、不规则抗体筛查、抗球蛋白试验、特异性鉴定工作，鉴别患者血型。
结果：本组45例患者进行血型鉴定后，无标本差错例数35例，10例ABO血型正反定型不相符样本，包括4例（40.00%）抗体减弱，2例（20.00%）抗原减弱，2例（20.00%）冷自身抗体，1例（10.00%）同种抗体，1例（10.00%）亚型。
结论：ABO疑难血型正反定型不相符的原因比较复杂，结合患者基本资料，开展科学检验和分析，可保证疑难血型鉴定准确性，提高患者输血安全。
关键词：疑难血型；鉴定；原因临床输血是抢救危重疾病患者的重要手段，但人体血型类型多样，只有选择合适的血型输血，才可保证患者安全，鉴于此，血型准确鉴定至关重要[1]。
然而实际血型鉴定过程中，正反定型不相符现象时常出现，导致血型鉴定难度变大。
为分析疑难血型的鉴定方法，提高实际鉴定结果准确性，本文以2022年1月到2023年7月收治的献血者为研究对象，现报道如下。
1资料和方法1.1一般资料2022年1月到2023年7月期间，在本院收集的献血者45例均为研究对象，其中男性患者25例，女性患者20例，年龄分布在24~67岁间，均数（44.27±4.58）岁。
医院伦理委员会批准，患者或家属签署同意书。
1.2研究方式本组患者分别完成相关检测工作，包括：（1）ABO血型初筛：微孔板法正反定型，如果血型正反定型不相符，盐水介质试管法二次检测，如果O细胞阴性，正定型抗-A、抗-B反应强度<4+，反定型A型或B型红细胞<2+，亦或者抗原抗体不对应，增加开展试管法抗-AB、抗-H、抗-A1、抗-A1c和抗-A2c血清检验，完成血型正反定型试验工作。
血型鉴定操作规程
血型鉴定操作规程一．玻片法（仅适用于正定型）1 .原理：1.1根据红细胞上有无A抗原或（和）B抗原，可以将红细胞血型分为A型、B型、AB型和O型。
根据抗-A和抗-B抗体与对应红细胞的凝集反应，可以鉴定ABO血型。
1.2根据抗-D抗体与对应红细胞抗原的凝集反应，区分RhD阳性和RhD阳性。
2 .标本采集：用EDTA抗凝管采集被检对象静脉血，充分混匀，确保抗凝充分。
紧急情况下可以使用抗凝动脉血。
婴幼儿及其他不便于真空管采血的患者，如不进行反定型试验可采集末梢血。
3. 标本运送与储存：采集好的标本与申请单同期尽快（一般2小时内）送往输血科。
标本采集后和检测后，应置于2~8℃环境下。
检测后的标本应至少保存7天，以备结果查对。
4 .仪器与材料：抗-A/B血型定型试剂（单克隆抗体）、RhD（IgM）血型定型试剂（单克隆抗体）、载玻片、试管架、一次性塑料滴管、记号笔。
5. 操作步骤：5.1用标记笔在载玻片上划分成A、B、D三个区域；5.2在标记好的玻片上分别加1滴抗-A、抗-B和抗-D血型定型试剂；5.3再各加1滴10%患者红细胞悬液（该红细胞悬液可以是盐水悬液，也可以是悬浮于自身血浆或血清中的红细胞）；5.4用干净的搅拌棒将红细胞悬液和试剂充分混合，并把混合物均匀涂开，使其覆盖大约直径20mm的面积；5.5缓慢连倾斜摇动玻片1-2min，观察结果并记录。
6. 结果判定：6.1凝集或发生溶血为阳性结果；6.2细胞混匀2min后仍呈悬液状态的为阴性结果；6.3对结果有怀疑，应用试管法或微柱凝胶法重复实验。
二、纸板法1 .原理：1.1根据红细胞上有无A抗原或（和）B抗原，可以将红细胞血型分为A型、B型、AB型和O型。
根据抗-A和抗-B抗体与对应红细胞的凝集反应，可以鉴定ABO血型正定型。
A1细胞上含有A和A1抗原，B细胞上含有B抗原。
用已知的A、B细胞检测被检者血清中有无相应的抗-A或抗-B抗体，即反定型。
综合正反定型结果确定受检标本ABO血型。
发现Rh阴性血型处理流程
发现Rh阴性血型处理流程
输血科Rh(D)阴性血型的处理流程
1.输血科工作人员进行血型检验发现患者为Rh（D）阴性时，应首先进行血型复查(必须重新采血样)，确认为Rh（D）阴性时，应及时上报科主任。
2.科主任了解相关情况后根据病情作必要的安排，需要联系血站，安排人员将病人标本送往市中心血站进行确证试验。
3.临床科室如需要Rh（D）阴性血液制品时，参照《中心医院紧急特殊用血（稀有血型）预案》执行。
4.妇产科的产妇为Rh（D）阴性时，需要提前安排检查其配偶的血型，为可能发生的新生儿溶血病作准备。
**医院输血科。
血型鉴定常见的疑难问题分析及处理剖析
2020/10/17
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A O
B
O
O
大多数CisAB型的人血清中含有弱抗-B抗体，能与 所有普通B型或AB型人的血液凝结，但不与顺式 AB细胞反应。因此输血时不能输B型或AB型的血 液，而应该输O型或A型的洗涤红细胞，或者考虑 自体输血。
2020/10/17
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二、正定型---红细胞自身相关问题
4.嵌合体血型 体内有两群红细胞，定型时显示“混 合外观凝集”现象。真正的嵌合体非常少见，可出 现于双胞胎，在胚胎期由于血管的吻合使得2个胎儿 的血液发生混合，2种血液都被机体认做自我，不产 生抗体。也可见于ABO不同型的骨髓移植术后。人工 嵌合状态可出现于输血后，如O型红细胞输给A或B型 的病人。
2020/10/17
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二、正定型---红细胞自身相关问题
8.可溶性血型物质增多 胃或胰腺恶性肿瘤患者血清中 可能含有过多的可溶性血型物质，这些物质中和抗A （B）血清从而影响正定型结果。
2020/10/17
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二、正定型---红细胞自身相关问题
9.红细胞发生自凝现象 患者血清中的高效 价自身冷凝集素使红细胞发生凝集。
1.技术和管理错误 2.正定型---红细胞自身相关问题 3.反定型---血清自身相关问题
2020/10/17
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一、技术和管理错误
（1）标本或试剂搞错，造成假阳性或假阴性结果。 （2）器材不洁产生假阳性结果。 （3）试剂污染或失效产生假阳性或假阴性结果。 （4）离心过度或不足，产生假阳性或假阴性结果。
3.高分子聚合物的影响 血浆增容剂也会引起缗钱状凝集导 致假阳性结果。
2020/10/17
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三、反定型---血清自身相关问题
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51、没有哪个社会可以制订一部永远 适用的 宪法， 甚至一 条永远 适用的 法律。 ——杰 斐逊 52、法律源于人的自卫本能。——英 格索尔
53、人们通常会发现，法律就是这样 一种的 网，触 犯法律 的人， 小的可 以穿网 而过， 大的可 以破网 而出， 只有中 等的才 会坠入 网中。 ——申 斯通 54、法律就是法律它是一座雄伟的大 夏，庇 护着我 们大家 ；它的 每一块 砖石都 垒在另 一块砖 石上。 ——高 尔斯华 绥 55、今天的法律未必明天仍是法律。 ——罗·伯顿
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26、要使整个人生都过得舒适、愉快，这是不可能的，因为人类必须具备一种能应付逆境的态度。——卢梭
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27、只有把抱怨环境的心情，化为上进的力量，才是成功的保证。——罗曼·罗兰
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28、知之者不如好之者，好之者不如乐之者。——孔子
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29、勇猛、大胆和坚定的决心能够抵得上武器的精良。——达·芬奇
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30、意志是一个强壮的盲人，倚靠在明眼的跛子肩上。——叔本华
谢！
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疑难血型鉴定处理流程
血型鉴定是血液学中的重要内容，对于献血、输血、器官移植等医学领域具有重要意义。
常见的ABO血型系统和Rh血型系统已经被广泛应用，但是在实际操作中，仍然会遇到一些疑难血型，这些血型的鉴定处理流程需要我们特别注意。
一、疑难血型的定义
疑难血型是指在常规血型鉴定中不能确定血型的血清学现象，包括以下情况：
1.反应弱阳性：指血型抗体试验中，试验反应弱而难以判断是阳性还是阴性。
2.反应不一致：指血型抗体试验中，不同试验反应结果不一致，或者同一试验在不同实验室或不同试验人员的操作下结果不一致。
3.异常反应：指血型抗体试验中，出现异常的血清学反应，如异常凝集、异常吸附等。
4.矛盾血型：指献血者或受血者血型抗体与血型抗原不相符，出现矛盾的情况。
二、疑难血型处理流程
对于疑难血型，我们需要进行进一步的血清学鉴定和分析，以确保献血和输血的安全性。
1.血清学鉴定
首先需要对疑难血型进行血清学鉴定，包括以下步骤：
(1) 重复血型抗体试验：在不同时间、不同试验人员或不同实验室中重复进行血型抗体试验，以排除误判的可能性。
(2) 血型抗原检测：对于疑难血型，需要进行血型抗原检测，以确定血型抗原是否存在。
(3) 血清学鉴定：对于疑难血型，需要进行血清学鉴定，包括直接凝集试验、间接凝集试验、单纯免疫吸附试验、酶联免疫吸附试验等，以确定血型抗体是否存在。
2.分析疑难血型的原因
在进行血清学鉴定之后，需要对疑难血型的原因进行分析，包括以下几个方面：
(1) 技术问题：疑难血型可能是由于操作不当、试剂失效、试验环境不佳等技术原因造成的，需要排除技术问题。
(2) 血型抗体种类：疑难血型可能是由于罕见的血型抗体种类引起的，
需要进行深入的血清学鉴定。
(3) 基因型问题：疑难血型可能是由于基因型问题引起的，需要通过基因分型等方法进行进一步分析。
3.制定血型鉴定方案
在分析疑难血型的原因之后，需要制定相应的血型鉴定方案，包括以下几个方面：
(1) 确定血型：对于疑难血型，需要确定其血型，以确保献血和输血的安全性。
(2) 制定输血方案：根据疑难血型的情况，制定相应的输血方案，包括输血前进行特殊处理、选择适当的血型配合等。
(3) 建立血库：对于一些罕见的疑难血型，可以考虑建立相应的血库，以备不时之需。
三、总结
疑难血型的鉴定处理流程需要我们认真、细致地进行，以确保献血和输血的安全性。
在实际操作中，我们需要注意技术问题、血型抗体种类和基因型问题，制定相应的血型鉴定方案，确保疑难血型得到正确的处理和应用。