谷氨酰胺合成酶(Glutamine synthetase,GS)试剂盒使用说明
人IgA-抗组织转谷氨酰胺酶抗体(IgA-tTG)酶联免疫分析
人IgA-抗组织转谷氨酰胺酶抗体(IgA-tTG)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用产品编号：CSB-E11907h特异性：本试剂盒可同时检测人IgA-tTG，且与其他抗体无交叉反应。
有效期：6个月预期应用：ELISA法半定量测定人血清、血浆或其它相关生物液体中IgA-tTG含量。
说明1．试剂盒保存：-20℃（较长时间不用时）；2-8℃（频繁使用时）。
2．浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。
3．中、英文说明书可能会有不一致之处，请以英文说明书为准。
4．刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。
实验原理用组织转谷氨酰胺酶包被酶标板，制成固相载体。
向微孔中先加入待测样品进行反应，然后再加入辣根过氧化物酶标记抗人IgA-tTG抗体进行反应，经过彻底洗涤后用底物TMB 显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的IgA-tTG呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品中IgA-tTG的效价（抗血清最终能显色的最高稀释倍数记为效价）。
试剂盒组成及试剂配制1.酶联板(Assay plate )：一块（96孔）。
2.样品稀释液(Sample Diluent)：1×20ml/瓶。
3.辣根过氧化物酶标记抗人IgA抗体稀释液（HRP-anti-human IgA Diluent）：1×10ml/瓶。
4.辣根过氧化物酶标记抗人IgA抗体（HRP-anti-human IgA）：1×120μl/瓶（1：100）。
5.底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
6.浓洗涤液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
7.终止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
植物谷氨酰胺Gln酶联免疫分析ELISA
植物谷氨酰胺（Gln）酶联免疫分析（ELISA ）本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定植物组织，细胞及其试剂盒使用说明书它相关样本中植物谷氨酰胺（Gln）含量。
实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中植物谷氨酰胺（Gin）水平。
用纯化的植物谷氨酰胺（Gln）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入植物谷氨酰胺（Gln）抗原，再与HRP标记的谷氨酰胺（Gln）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的植物谷氨酰胺（Gln）呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（0D值），通过标准曲线计算样品中植物谷氨酰胺（Gln）抗原浓度。
标本要求：1 •标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20 C保存，但应避免反复冻融2. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
操作步骤：1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在第一、第二孔中分别加标准品100 M，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50 d，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100 d分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50 d，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50 d弃掉，再各取50 d分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50 pl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50 pl，混匀后从第七、第八孔中分别取50 P加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50 p，混匀后从第九第十孔中各取50 P弃掉。
（稀释后各孔加样量都为50 P,浓度分别为30 ng/L, 20 ng/L , 10 ng/L , 5 ng/L , 2.5 ng/L ）。
谷氨酰胺合成酶在微生物代谢通路中的作用机制
谷氨酰胺合成酶在微生物代谢通路中的作用机制谷氨酰胺合成酶（glutamine synthetase，GS）是一种重要的酶，它在微生物代谢通路中起着关键的作用。
GS不仅参与谷氨酸-谷氨酰胺代谢途径，还在氮代谢、碳代谢和微生物生长等方面扮演了重要角色。
GS合成的谷氨酰胺用于氮的转运和储存，维持细胞的氮代谢平衡，也可作为能量来源，增强细胞在极端环境下的适应性。
GS的结构特点GS是一种分子量大的酶，其分子量约为500 kDa。
它通常由多个亚基组成，可分为两个结构域：谷氨酰胺合成结构域（glutamine synthetase domain，GS）和ATP-grasp（ATP酰化酶）结构域。
前者在酶的中心位置，参与对于谷氨酰胺合成反应的催化作用，后者通过与ATP结合，释放出磷酸来促进反应的进行。
GS的活性调控GS的活性受到多种因素的调节，其中γ-谷氨酰胺是主要的调节者。
在氮充足的情况下，大量的γ-谷氨酰胺通过GS的补充合成来抑制其活性；在氮不足的情况下，GS被激活来促进氮的吸收和利用。
此外，另外一些分子还可以调节GS的活性，比如能量代谢和环境压力的变化都可以对其进行调节。
GS在微生物代谢通路中的作用机制在微生物代谢通路中，GS的作用主要涉及谷氨酰胺的合成和氮代谢平衡的维持。
谷氨酰胺是一种氮代谢中的重要物质，在微生物代谢通路中参与蛋白质、核酸、酶和一些辅酶等的合成。
在GS催化下，谷氨酰胺的合成经过如下反应：谷氨酸 + 氨→ 谷氨酰胺这个反应是一种ATP耗能反应，需要消耗ATP作为能量输入。
同时，谷氨酰胺的合成还需要其他的元素，比如磷酸和二价钙离子等，来维持反应的进行。
此外，谷氨酰胺的合成是一个动态平衡过程，需要一些微生物特有的机制来控制其产量和平衡。
GS在微生物的适应性GS在微生物的适应性中发挥着重要的作用。
微生物生活在各种环境中，在氮源匮乏或其他压力环境下，GS可能会发生一些变化以适应环境。
比如在高盐度环境中，GS基因的表达水平可能会上升，从而提高微生物的耐盐性；而在氮源极度匮乏的情况下，GS活性可能会下降，从而保证微生物不会过早消耗掉其有限的氮源。
谷氨酸（Glu）含量检测试剂盒说明书
谷氨酸（Glu ）含量检测试剂盒说明书（微量法货号：BC5215规格：100T/48S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件试剂一液体85mL×1瓶2-8℃试剂二液体1.5 mL×1支2-8℃试剂三粉剂×2瓶-20℃保存试剂四粉剂×2支-20℃保存试剂五液体4mL×1瓶2-8℃保存标准液液体0.5 mL×1支2-8℃保存溶液的配制：1、试剂三：临用前取1瓶加入6mL 试剂一，用不完的试剂-20℃分装保存4周，避免反复冻融；2、试剂四：临用前取1支加入0.5 mL 试剂二，用不完的试剂-20℃分装保存2周，避免反复冻融；3、标准液：10 μmol /mL 谷氨酸标准品。
产品说明：Glu 广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，不仅是组成蛋白质的20种氨基酸之一，而且通过转氨基作用参与多种氨基酸合成，是生物体内主要氨基来源之一。
此外，Glu 还是味精的主要有效成分，常用做食品添加剂以及香料生产。
谷氨酸脱氢酶（GDH ）催化谷氨酸和NAD 生成α-酮戊二酸、NADH 和NH 4+，在1-mPMS 作用下，WST-1可与NADH 反应，产生水溶性formazan ，计算谷氨酸含量。
Glutamate+NAD +2-Oxoglutrate+NH 4++NADH formazan （450nm ）注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器、超声破碎仪、冰、蒸馏水。
操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）细菌、细胞：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照每500万细菌或细胞加入1mL 试剂一，超声波破碎细菌或细胞（功率200w ，超声3s ，间隔10s ，重复30次），10000g ，常温离心10min ，取上清待测。
植物体内谷氨酰胺合成酶活力的测定
实验27 植物体内GS 谷氨酰胺合成酶活力的测定【原理】谷氨酰胺合成酶（GS ）是植物体内氨同化的关键酶之一，在A TP 和Mg 2+存在下，它催化植物体内谷氨酸形成谷氨酰胺。
在反应体系中，谷氨酰胺转化为γ─谷氨酰基异羟肟酸，进而在酸性条件下与铁形成红色的络合物，该络合物在540nm 处有最大吸收峰，可用分光光度计测定。
谷氨酰胺合成酶活性可用产生的γ─谷氨酰基异羟肟酸与铁络合物的生成量来表示，单位μmol ·mg ﹣1protein ·h ﹣1。
也可间接用540nm 处吸光值的大小来表示，单位A ·mg ﹣1 protein ·h ﹣1。
【仪器与用具】冷冻离心机；分光光度计；天平；研钵；恒温水浴；剪刀；移液管（2ml 、1ml ）。
【试剂】提取缓冲液：0.05mol/L Tris-HCl ，pH8.0，内含2mmol/L Mg 2+，2mmol/L DTT ，0.4mol/L 蔗糖。
称取Tris （三羟甲基氨基甲烷）1.5295g ，0.1245g MgSO 4·7H 2O ，0.1543g DTT （二硫苏糖醇）和34.25g 蔗糖，去离子水溶解后，用0.05 mol/L HCl 调至pH8.0，最后定容至250ml ；反应混合液A （0.1mol/L Tris-HCl 缓冲，pH7.4）：内含80mmol/L Mg 2+，20mmol/L 谷氨酸钠盐，20mmol/L 半胱氨酸和2mmol/L EGTA ，称取 3.0590g Tris ，4.9795 gMgSO 4·7H 2O, 0.8628g 谷氨酸钠盐，0.6057g 半胱氨酸，0.1920gEGTA ，去离子水溶解后，用0.1mol/L HCl 调至pH7.4，定容至250ml ；反应混合液B （含盐酸羟胺，pH7.4）：反应混合液A 的成分再加入80mol/L盐酸羟胺，pH7.4；显色剂（0.2mol/L TCA, 0.37mol/L FeCl 3和0.6mol/L HCl 混合液）： 3.3176g TCA （三氯乙酸），10.1021g FeCl 3·6H 2O ，去离子水溶解后，加5ml 浓盐酸，定容至100ml ； 40mmol/L A TP 溶液：0.1210g A TP 溶于5ml 去离子水中（临用前配制）。
谷氨酸(glutamic acid,Glu)含量测定试剂盒说明书
货号: QS1906 规格：50管/48样谷氨酸(glutamic acid，Glu)含量测定试剂盒说明书可见分光光度法正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义：Gu广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，不仅是组成蛋白质的20种氨基酸之一，而且通过转氨基作用参与多种氨基酸合成，是生物体内主要氨基来源之一。
此外，Glu还是味精的主要有效成分，常用做食品添加剂以及香料生产。
测定原理：利用专用提取液提取，然后用显色剂进行显色，显色后在570nm下进行测定。
自备实验用品及仪器：可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰、蒸馏水。
试剂的组成和配制：试剂一：液体100mL×1瓶，4℃保存；试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存；临用前加入10mL蒸馏水，充分混匀溶解，用不完的试剂仍4℃避光保存。
谷氨酸提取：1、细菌或培养细胞样品：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议1000万细菌或细胞加入2mL试剂一），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g 常温离心10min，取上清，置冰上待测。
2、组织样品：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.2g组织，加入2mL试剂一），进行冰浴匀浆。
8000g 常温离心10min，取上清，置冰上待测。
3、血清（浆）或细胞培养液样品：按照血清（浆）或细胞培养液体积（mL）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议取0.2mL血清（浆）或者细胞培养液加入2mL试剂一），进行冰浴匀浆。
8000g 常温离心10min，取上清，置冰上待测。
测定操作1、分光光度计预热30min以上，调节波长至570nm，蒸馏水调零。
测定管-A对照管。
对照管只要做一管。
糖原合成酶(GCS)活性检测试剂盒说明书__紫外分光光度法UPLC-MS-4177
糖原合成酶（GCS ）活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法UPLC-MS-417750T/48S 试剂名称规格保存条件提取液液体60mL×1瓶2-8℃保存试剂一液体45mL×1瓶2-8℃保存试剂二液体15mL×1瓶2-8℃保存试剂三液体40μL×1支2-8℃保存试剂四粉剂×2支-20℃保存试剂五粉剂×2支-20℃保存试剂六液体115μL×1支2-8℃保存试剂七粉剂×2支-20℃保存试剂八粉剂×2瓶2-8℃保存溶液的配制：1、试剂四：提供一个5mL 试剂瓶，用前取1支加入3mL 试剂一充分溶解，-20℃分装保存4周，避免反复冻融；2、试剂五：提供一个5mL 试剂瓶，用前取1支加入3mL 试剂一充分溶解，-20℃分装保存4周，避免反复冻融；3、工作液的配制：临用前将试剂三离心，取20μL 试剂三，加14mL 试剂一、3mL 试剂四、3mL 试剂五，充分混合（约26T ），现用现配，也可根据样本量按比例配制；4、试剂八的配制：（1）临用前取1瓶试剂八中加入6mL 试剂二充分溶解，再将1支试剂七转移到试剂八中混合溶解后待用，可-20℃分装保存4周，避免反复冻融；（2）用前先将试剂六离心，取55μL 试剂六加入5.74mL 上述（1）中溶液，充分混合（约28T ），现用现配，也可根据样本量按比例配制。
糖原合成酶（Glycogen synthase ,GCS ）将UDPG 的糖基加到原有糖原或是糖原蛋白的非还原端，以α-1,4糖苷键连接。
GCS 是动物机体糖原合成过程的限速酶，同时也是胰岛素作用的主要靶酶，在糖代谢及维持血糖相对稳定的过程中有着重要作用。
GCS 催化UDPG 和葡萄糖残基生成糖原和UDP ，丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶进一步依次催化NADH 生成NAD +，在340nm 下测定NADH 的下降速率，即可反映GCS 活性。
谷氨酰胺合成和代谢
谷氨酰胺合成和代谢谷氨酰胺（Glutamine，简称Gln）是人体内含量最高的氨基酸，也是非必需氨基酸中唯一在代谢过程中能够通过消耗产生ATP的氨基酸。
它广泛存在于肝、肾、肺、胃肠道和免疫组织等器官及组织中，并能够在血液中很快地与酰化谷氨酸转变为互补的代谢过程中起着重要的作用。
I. 谷氨酰胺的合成谷氨酰胺是由谷氨酸和游离氨基酸合成而来，其反应过程如下：谷氨酸 + 氨基酸→ 谷氨酰胺 + H2O谷氨酰胺的合成是由谷氨酰胺合成酶（Glutamine synthetase，简称GS）和谷氨酰胺酰化酶（Glutamine synthetase，简称GLN）协同完成的。
其中，GS主要在肌肉、肝脏和肺组织中发挥重要作用，它将游离氨基酸与谷氨酸进行缩合反应，生成谷氨酰胺，该反应需要ATP的参与；而GLN则主要存在于肠道上皮细胞和肝脏中，它将谷氨酸转化为谷氨酰胺。
II. 谷氨酰胺的代谢谷氨酰胺在体内的代谢和分布非常广泛，它不仅是细胞内蛋白质的构成部分，还与谷氨酰磷酸合成、氨基酸代谢、碱化机制、生物合成等方面有密切关系。
1. 蛋白质合成谷氨酰胺是肌肉中含量最高的氨基酸，通过合成谷氨酰胺和蛋白质来满足细胞的需求。
同时，谷氨酰胺也能够为肌肉细胞提供能量，促进糖原的合成和促进细胞内葡萄糖的利用。
2. 能量代谢谷氨酰胺的代谢也与能量的产生和利用密切相关。
在代谢过程中，谷氨酰胺可以发生氧化酶作用，通过氨基酸转化和ATP的产生来为细胞提供能量。
3. 碱化机制人体内细胞外液的pH值在7.35-7.45之间，如果pH值过低或过高，都会影响正常的生理过程。
谷氨酰胺可以通过与H+离子相结合，形成氨离子NH4+，通过尿液排出，从而起到调整体内酸碱平衡的作用。
4. 生物合成谷氨酰胺还参与了生物合成过程中关键的反应步骤。
例如，它参与了胆碱、嘌呤和嘧啶等重要物质的合成。
总之，谷氨酰胺作为人体内含量最高的氨基酸之一，不仅在蛋白质合成中发挥作用，也在能量代谢、碱化机制和生物合成等方面发挥着重要的作用。
谷氨酸（Glu）含量检测试剂盒说明书（WST 法）
谷氨酸（Glu ）含量检测试剂盒说明书（WST 法）可见分光光度法货号：BC5210规格：50T/24S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称规格保存条件试剂一液体70mL×1瓶2-8℃保存试剂二液体2.5mL×1瓶2-8℃保存试剂三粉剂×2瓶-20℃保存试剂四粉剂×2支-20℃保存试剂五液体12mL×1瓶2-8℃保存标准液液体0.5 mL×1支2-8℃保存溶液的配制：1、试剂三：临用前取1瓶加入18mL 试剂一充分溶解，用不完的试剂-20℃分装保存4周，避免反复冻融；2、试剂四：临用前取1支加入1.2 mL 试剂二充分溶解，用不完的试剂-20℃分装保存2周，避免反复冻融；3、标准品液：10 μmol /mL 谷氨酸标准品。
产品说明：Glu广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，不仅是组成蛋白质的20种氨基酸之一，而且通过转氨基作用参与多种氨基酸合成，是生物体内主要氨基来源之一。
此外，Glu 还是味精的主要有效成分，常用做食品添加剂以及香料生产。
谷氨酸脱氢酶（GDH）催化谷氨酸和NAD 生成α-酮戊二酸、NADH 和NH 4+，在1-mPMS 作用下，WST-1可与NADH 反应，产生水溶性formazan ，计算谷氨酸含量。
Glutamate+NAD 2-Oxoglutrate+NH 4++NADH （450nm ）技术指标：最低检出限：0.009 μmol/mL 线性范围： 0.019-0.3125 μmol/mL注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵/匀浆器、超声破碎仪、冰、蒸馏水。
操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）细菌、细胞：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照每500万细菌或细胞加入1mL试剂一，超声波破碎细菌或细胞（功率200w，超声3s，间隔10s，重复30次），10000g，常温离心10min，取上清待测。
谷氨酰胺转肽酶和谷氨酸脱氢酶_概述说明
谷氨酰胺转肽酶和谷氨酸脱氢酶概述说明1. 引言1.1 概述在生物化学和细胞代谢过程中，谷氨酰胺转肽酶（glutamine transaminase）和谷氨酸脱氢酶（glutamate dehydrogenase）是两种重要的酶类。
它们在细胞内发挥着关键的催化作用，并参与到多种生物体内代谢途径中。
1.2 文章结构本文将围绕谷氨酰胺转肽酶和谷氨酸脱氢酶展开论述。
首先，我们将对这两种酶的定义、功能以及在生物体中的作用进行概述。
接下来，文章会介绍这两种酶的结构和特点，并比较其异同之处。
然后，我们会讨论谷氨酰胺转肽酶与谷氨酸脱氢酶之间存在的关系，包括其在代谢途径中的协同作用和相互调控机制。
最后，在结论部分我们将总结主要观点和发现，并提出未来研究方向的建议或展望。
1.3 目的本文旨在全面概述谷氨酰胺转肽酶和谷氨酸脱氢酶这两种重要的生物催化酶。
通过对它们的定义、功能、结构和特点进行分析，我们希望能够深入探讨它们在生物体内代谢途径中的作用以及其相互之间的调控关系。
此外，本文将为未来研究提供一些可能的方向和视角。
2. 谷氨酰胺转肽酶概述：谷氨酰胺转肽酶（glutamine transaminase），也被称为谷氨酰胺转换酶，是一类重要的酶，在生物体内发挥着关键的生理功能。
它主要参与氨基酸代谢途径中的转氨反应，将谷氨酰胺（glutamine）和某些代谢底物之间进行互相转化。
2.1 定义和功能：谷氨酰胺转肽酶是一种转移酶（transferase），催化从底物A到底物B的反应。
具体来说，它能够将谷氨酰胺中的α-氨基团和某些代谢底物之间进行相互转化。
这个过程涉及到蛋白质和多种有机分子之间的化学变换，通过该反应可以合成或分解特定的化合物，在细胞中维持正常的代谢平衡。
2.2 酶的结构和特点：谷氨酰胺转肽酶由多个亚单位组成，每个亚单位都具有催化活性。
其结构通常呈现出四聚体或二聚体的形式，这种特殊的结构使其具备高度的催化效率和稳定性。
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谷氨酰胺合成酶（Glutaminesynthetase，GS）试剂盒使用说明
分光光度法
货号：BC0910
规格：50管/24样
产品内容：
提取液：30mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：10mL×1瓶，-20℃保存。
试剂二：10mL×1瓶，-20℃保存。
试剂三：粉剂×2瓶，-20℃保存。用时每瓶加入5mL蒸馏水充分溶解备用，用不完的
试剂仍-20℃保存。
试剂四：10mL×1瓶，4℃保存。
产品说明：
GS（EC6.3.1.2）主要存在于植物中，是生物体内氨同化的关键酶之一，催化铵离子和
谷氨酸合成谷氨酰胺，不仅可以防止过多的铵离子对生物有毒性，而且谷氨酰胺也是氨的主
要储存和运输形式。
GS在ATP和Mg2+存在下，催化铵离子和谷氨酸合成谷氨酰胺；谷氨酰胺进一步转化为
γ─谷氨酰基异羟肟酸，在酸性条件下与铁形成红色的络合物；该络合物在540nm处有最大
吸收峰，可用分光光度计测定。
所需的仪器和用品：
可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰
和蒸馏水。
操作步骤：
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一、样本测定的准备
1、细菌、细胞或组织样品的制备：
细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（10
4
个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），
超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g4℃
离心10min，取上清，置冰上待测。
组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加
入1mL提取液），进行冰浴匀浆。8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
2、血清（浆）样品：直接检测。
二、测定步骤
1、分光光度计预热30min以上，调节波长至540nm，蒸馏水调零。
2、在EP管中加入下列试剂：
试剂名称（μL）测定管对照管
试剂一320
试剂二320
试剂三140140
样本140140
混匀，37℃（哺乳动物）或25℃（其他物种）准确水浴30min
试剂四200200
混匀，静置10min后，5000g，常温离心10min，取上清液测定540nm处的吸光值A。△A=A
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测定管-A对照管。每个测定管需设一个对照管。
GS活力单位的计算
1.血清（浆）GS活性
单位定义：每mL血清（浆）在每mL反应体系中每min使540下吸光值变化0.01定义为一
个酶活力单位。
计算公式：GS（U/mL）=ΔA×V反总÷V样÷0.01÷T=19×ΔA
2.组织、细菌或细胞GS活性
（1）按样本蛋白浓度计算：
单位的定义：每mg组织蛋白在每mL反应体系中每min使540nm下吸光值变化0.01定义为
一个酶活力单位。
GS（U/mgprot）＝ΔA×V反总÷（Cpr×V样）÷0.01÷T=19×ΔA÷Cpr
（2）按样本鲜重计算：
单位的定义：每g组织在每mL反应体系中每min使540nm下吸光值变化0.01定义为一个酶
活力单位。
GS（U/g鲜重）＝ΔA×V反总÷(W×V样÷V样总)÷0.01÷T=19×ΔA÷W
（3）按细菌或细胞密度计算
单位定义：每1万个细菌或细胞在每mL反应体系中每min使540nm下吸光值变化0.01定义
为一个酶活力单位。
GS（U/104cell）＝ΔA×V反总÷(500×V样÷V样总)÷0.01÷T=0.038×ΔA
V反总：反应体系总体积，0.8mL；V样：加入样本体积，0.14mL；V样总：加入提取液体
积，1mL；T：反应时间，30min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量，g；500：
细菌或细胞总数，500万。