实验一植物细胞的质壁分离及死活鉴定

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人教版高中生物必修1分子与细胞课件知识点-植物细胞的质壁分离和复原

人教版高中生物必修1分子与细胞课件知识点-植物细胞的质壁分离和复原
1.从细胞角度分析: 1)具有中央大液泡的成熟植物细胞才可发生质壁分离 现象。 2)死细胞、动物细胞及未成熟的植物细胞不发生质 壁分离现象。 2.从溶液角度分析: 1)在溶质可穿膜的溶液中细胞会发生质壁分离后自动 复原现象。 2)在溶质不能穿膜的溶液中细胞只会发生质壁分离 现象,不能自动复原。 3)在高浓度溶液中细胞可发生质壁分离现象,但会 因过度失水而死亡不再复原。
4.质壁分离实验的拓展应用:
1)判断细胞的死活
待测细胞+蔗糖溶液
镜检
Hale Waihona Puke 发生质壁分离和复原——活细胞
不发生质壁分离——死细胞
2)测定细胞液浓度范围
待测细胞+一系列浓度梯度的蔗糖溶液 细胞液浓度范围等于未发 生质壁分离和刚刚发生质壁分离的外界溶液的浓度范围
分别镜检
3)比较不同植物细胞的细胞液浓度(农业生产中的水肥管 理)(生活中杀菌、防腐、腌制食品)
答案 C 解析 发生质壁分离的细胞必须是具有大液泡的植物细胞, 根尖生长点细胞、干种子细胞由于没有大液泡,所以不能 发生质壁分离;而蛔虫属于动物,其卵细胞和人体细胞均 不存在细胞壁,因此也不能发生质壁分离。
3.利用紫色的洋葱外表皮细胞和不同浓度的蔗糖溶 液,可以探究细胞质壁分离和复原。下列有关该实 验的叙述正确的是( ) A.该实验只是观察了质壁分离和复原现象,没有设 计对照实验 B.在逐渐发生质壁分离的过程中,细胞的吸水能力 逐渐增强 C.该实验需要染色才能观察到质壁分离现象 D.不同浓度蔗糖溶液下发生质壁分离的细胞,滴加 清水后都能复原
②原生质层与细胞壁逐渐分离
5. 清水 吸水纸吸引
6.低倍镜观察: ①中央液泡逐渐胀大 ②原生质层逐渐贴近细胞壁
• 外界溶液浓度﹥ 细胞液浓度时, 细胞渗透失水,发生质壁分离

人教版高一年级生物探究植物死细胞能否发生质壁分离PPT

人教版高一年级生物探究植物死细胞能否发生质壁分离PPT
4
实验步骤
1、制作洋葱鳞表皮临时装片
2、低倍镜观察洋葱鳞片叶外表皮细胞的中
央大液泡大小及原生质层的位置
3、从盖玻片的一侧滴入蔗糖溶液,在盖玻
片的的另一侧用吸水纸吸引。重复几次,使
整个洋葱鳞片叶浸润在蔗糖溶液中。
4、低倍镜观察,看细胞中央大液泡及原生
质层的位置变化
5、在盖玻片的一侧滴入清水,在另一侧用
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实验结论
1、植物死细胞不能发生质壁分离。 2、15%的盐酸能杀死细胞
THANK YOU
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每个人的心灵深处都有着只有他自己 理解的 东西。 对具有高度自觉与深邃透彻的心灵的 人来说 ,痛苦 与烦恼 是他必 备的气 质。 在一切创造物中间没有比人的心灵更 美、更 好的东 西了。 唯有心灵能使人高贵。所有那些自命 高贵而 没有高 贵的心 灵的人 ,都像 块污泥 。 一个人只要他有纯洁的心灵,无愁无 恨,他 的青春 时期, 定可因 此而延 长。 能充实心灵的东西,乃是闪烁着星星 的苍穹 ,以及 我内心 的道德 律。 你的心灵常常是战场。在这个战场上 ,你的 理性与 判断和 你的热 情与嗜 欲开战 。 无所事事并非宁静,心灵的空洞就是 心灵的 痛苦。
吸水纸吸引,重复几次,使整个洋葱鳞片叶
又浸润在清水中。
6、低倍镜下观察中央大液泡和原生质层位
置的变化。
8
5
未做任何处理的洋葱鳞表皮细胞 已经质壁分离
正在发生质壁分离
已经复原的细胞
6
实验步骤
7、等到质壁分离复原后滴加15%的盐酸1 滴,过1min后从一侧用吸水纸吸干后,在 低倍镜下观察,取下临时装片用缓水流冲 洗,再滴加0.3g/ml的蔗糖溶液,过一段时 间后在低倍镜下观察现象。
(2)进行实验的前六个步骤与第七个步骤形成对照,自变 量是细胞的死活。

培养细胞之死活细胞的鉴别实验报告

培养细胞之死活细胞的鉴别实验报告
4.4.3 根据染色结果计算活细胞率:依据死细胞染成蓝色、活细胞不着色的原则计数死细胞数和细胞总数,以如下公式计算细胞存活率:
细胞存活率=(细胞总数-死亡细胞数)/细胞总数 *100%
4.5 关于血球计数板
4.5.1 血球计数板是一块特制的厚载玻片,载玻片上有四条槽而构成三个平台。中间的平台较宽,其中间又被一短横槽分割成两半,每个半边上面各有有一个方格网,每个方格网共分九大格,其中间的一大格(又称计数室)常被用作细胞的计数。
支原体污染的来源包括工作环境的污染、操作者本身的污染(某些支原体在人体是正常菌群)、培养基的污染、被污染细胞造成的交叉污染、实验器材的污染、制备细胞的原始组织或器官的污染,等等。
此次细胞培养实验几乎全部都是在无菌条件下进行,培养基和器材都保证无菌,并对实验操作进行了严格规范,基本能够保证避免支原体污染。
计数室的刻度有两种:一种是大方格分为16个中方格,而每个中方格又分成25个小方格;另一种是一个大方格分成25个中方格,而每个中方格又分成16个小方格。但是不管计数室是哪一种构造,他们都有一个共同特点,即每个大方格都有400个小方格组成。
图1 血球计数板的构造(a、平面图;b、侧面图)
图2血球计数板网格的分区和分格
生物化学实验报告
培养细胞之死活细胞的鉴别
一、实验目的
1.1 学习并掌握动物细胞培养的无菌操作技术。
1.2 了解并掌握用组织块贴壁培养法和消化细胞培养法进行动物细胞原代培养的实验方法。
1.3 熟练掌握动物细胞传代培养的实验方法。
1.4 学习细胞生死状态鉴别的方法。
1.5 了解细胞生死状态鉴别的原理。
1.6 熟悉和掌握各种鉴别细胞生死状态方法的判定特征。
细胞存活率=(110-77)/110*100%=30.0%

观察洋葱表皮细胞的质壁分离及质壁分离复原

观察洋葱表皮细胞的质壁分离及质壁分离复原
A.图中L是细胞壁,M是液泡,N是细胞质
现象。 所选择材料都必须是活细胞,因为只有活细胞的原生质层才具有选择透性,否则将不会出现质壁分离和复原的现象。
在C所述条件下,活的、成熟的植物细胞能发生渗透失水或吸水,B、C项都正确; 2.测定细胞液的浓度。
4.显微镜下观察细胞膜。正常植物细胞的细 1.原生质层的伸缩性比细胞壁的伸缩性大。
解析:选D。植物细胞的原生质层具有选择透 性,相当于一层半透膜,A项正确;在C所述 条件下,活的、成熟的植物细胞能发生渗透 失水或吸水,B、C项都正确;当细胞内外溶 液浓度相等时,细胞渗透失水和吸水达到动 态平衡,进出细胞的水分相当,D项错误。
2.利用紫色的洋葱外表皮细胞和不同浓度的 蔗糖溶液,可以探究细胞质壁分离和复原。 下列有关该活动的叙述正确的是( ) A.该活动只是观察了质壁分离和复原现象, 没有设计对照实验 B.在逐渐发生质壁分离的过程中,细胞的吸 水能力逐渐增强 C.将装片在酒精灯上加热后,再观察质壁分 离现象 D.不同浓度蔗糖溶液下发生质壁分离的细胞, 滴加清水后都能复原
3.判断植物细胞的死活。只有活细胞的原生 4.将不同植物的三个未发生质壁分离的细胞置于同一蔗糖溶液中,形态不再变化后的细胞图像如图所示。
D.不同浓度蔗糖溶液下发生质壁分离的细胞,滴加清水后都能复原
质层才可以看作半透膜,才有质壁分离和复 A.洋葱表皮细胞已经死亡
接着在盖玻片的一侧滴入清水,在另一侧用吸水纸吸引,这样重复3~4次,洋葱表皮细胞就浸润在清水中 3 g/mL的蔗糖溶液,在盖玻片的另一侧用吸水纸吸引。
分离后,原生质层的最外面即为细胞膜。 C.蔗糖分子进入细胞导致渗透平衡
A.该活动只是观察了质壁分离和复原现象,没有设计对照实验 所选择材料都必须是活细胞,因为只有活细胞的原生质层才具有选择透性,否则将不会出现质壁分离和复原的现象。

细胞死活鉴定

细胞死活鉴定

【实验目的】1、回顾细胞培养的有关知识;2、学习小鼠脾细胞的分离技术及简单的细胞培养技术3、掌握无菌操作的具体过程及无菌操作台的使用;4、了解细胞原代培养的基本方法及操作过程;5、学习掌握染色法鉴别细胞的生死状态的原理及方法;6、学习使用血球计数板对细胞总数及活细胞数进行计数;7、学习实验过程的详细描述及实验记录。

【实验原理】细胞培养指的是在无菌条件下,把动、植物细胞从组织中取出,在体外模拟体的生理环境,使离体的细胞在体外生长和繁殖,并且维持其结构和功能的一种培养技术。

动物细胞培养可分为原代培养和传代培养。

从供体获得组织细胞,在无菌条件下,用胰蛋白酶消化或机械分散等方法,将动物组织分散成单个细胞开始首次培养长出单层细胞的方法称为细胞的原代培养。

当培养的动物细胞生长增殖达到一定密度,形成致密的单层细胞时,用胰蛋白酶将细胞消化分散成单细胞,从一个容器中以1:2或其他比例转移到另一个容器中扩大培养的方法,称为细胞的传代培养。

传代培养的累计次数就是细胞的培养代数。

高等生物是由多细胞构成的整体,在整体条件下要研究单个细胞或某一群细胞在体的功能活动是十分困难的。

但如果把活细胞拿到体外培养、增殖并进行观察和研究,则要方便和简单得多。

被培养的动物细胞是非常好的实验对象和实验研究材料,对体外培养的活细胞进行研究可以帮助人类揭开生、老、病、死的规律,探索优生、抗衰老和防治各种疾病的途径和机制,也可以人为地诱导和改变细胞的遗传性状和特性,使其向有利于人类健康长寿的方向发展。

因此动物细胞体外培养技术是研究细胞分子机制非常重要的实验手段,被广泛应用于医学、生物技术、基因工程等研究领域。

细胞生死状态的鉴别方法主要是化学染色法和荧光染色法。

活细胞和死亡细胞在生理技能和性质上主要存在一下差异:①细胞膜通透性的差异:活细胞的细胞膜是一种选择性膜,对细胞起保护和屏障作用,只允许物质选择性地通过;而细胞死后,细胞膜受损,其通透性增加。

质壁分离实验报告

质壁分离实验报告

实验名称:植物细胞的质壁分离与质壁分离复原一、实验原理及流程实验原理原理:成熟的植物细胞在外界溶液浓度高的条件下,液泡水分外渗,原生质层与细胞壁脱离。

当细胞液的浓度大于外界溶液的浓度时,外界溶液中的水分就透过原生质层进入到液泡中,使原生质层慢慢地恢复原状,植物细胞逐渐发生质壁分离复原。

流程实验材料:紫色的洋葱鳞片叶,刀片、镊子,滴管,载玻片,盖玻片,吸水纸,电子显微镜,0.3g/ml蔗糖溶液,清水流程图:实验步骤实验步骤:1.用镊子撕下一小块洋葱鳞片叶紫色的外表皮制作成临时装片。

2.用电子显微镜观察洋葱鳞片叶片细胞中紫色大液泡(原生质层紧贴细胞壁)。

3. 在盖玻片的一侧滴入0.3g/ml蔗糖溶液,在另一侧用吸水纸吸引。

重复几次,使盖玻片下面的洋鳞片叶表皮浸在蔗糖溶液中。

用10X的物镜观察,细胞中液泡的大小、颜色变化。

4.在盖玻片一侧滴入清水,在盖玻片的另一侧用吸水纸吸引。

重复几次,使洋葱鳞片叶浸入清水中。

用10X的物镜观察,细胞中液泡的大小、颜色变化。

制作洋葱鳞片表皮临时装片放在电子显微镜下观察临时装片0.3g/ml蔗糖溶液吸水纸吸引放在电子显微镜下观察临时装片吸水纸吸引清水放在电子显微镜下观察植物细胞的质壁分离及质壁分离复原实验报告(资料素材和资料部分来自网络,供参考。

可复制、编制,期待你的好评与关注)二、实验结果及分析 实验结果 实验结果:在电子显微镜下观察原始的洋葱鳞片叶紫色表皮细胞时,可观察到有一个紫色的大液泡,原生质层紧贴细胞壁;当洋葱鳞片表皮浸润在蔗糖溶液中,可观察到液泡逐渐变小,紫色加深;当洋葱鳞片表皮浸润在清水中时,液泡又逐渐胀大,原生质层逐渐贴近细胞壁。

分析 内因:原生质层具有半透性 细胞渗透失水(吸水) 细胞壁伸缩性小,原生质层伸缩性大外因:外界溶液浓度小于(大于)细胞液浓度三、实验讨论及反思 讨论 1. 如果没有细胞壁,实验结果会有什么不同? 如果没有细胞壁,就不会发生质壁分离分离反应,只会单纯的吸水或失水。

试验一植物组织渗透势的测定质壁分离法原理成长的植物细胞

试验一植物组织渗透势的测定质壁分离法原理成长的植物细胞

实验一植物组织渗透势的测定(质壁分离法)一、原理成长的植物细胞是一个渗透系统,当把细胞置于一定浓度溶液中时,当植物组织细胞内的汁液与其周围的某种溶液处于渗透平衡状态,且此时植物细胞内的压力势为零时,那么细胞汁液的渗透势就等于该溶液的渗透势。

该溶液的浓度称之为等渗浓度。

当用一系列梯度浓度溶液观察细胞质壁分离现象时,细胞的等渗透浓度将界于刚刚引起初始质壁分离的浓度和与其相邻的尚不能引起质壁分离的浓度梯级之间的溶液浓度。

代入公式即可计算出其渗透势二、仪器药品显微镜载玻片及盖玻片镊子刀片培养皿8套滤纸1M蔗糖溶液滴管三、实验步聚1.梯度浓度溶液的配制:用1M蔗糖溶液为母液,分别吸取8,7,6,5,4,3,2ml溶液于试管中,各加入蒸馏水至10ml,即成0.8,0.7,0.6,0.5,0.4,0.3,0.2M的梯度溶液。

用移液管,从0.2M依次取一定量的溶液(3ml),盛于培养皿内,盖上盖,贴上标签待用。

2.将带有色素的植物组织(叶片),一般选用有色素的洋葱鳞片的外表皮,紫鸭跖草,苔藓,红甘蓝及黑藻,丝状藻等水生植物,也可用乔豆,玉米、小麦等作物叶的表皮。

用镊子撕取下表皮,迅速分别投入各种浓度的蔗糖溶液中,使其完全浸入,3.5—10分钟后,从0.5M开始依次取出表皮薄片放在滴有同样溶液的载玻片上,盖上盖玻片,于显微镜下观察是否所有细胞都产生质壁分离的现象,实验中必须确定一个引起半数以上细胞原生质刚刚从细胞壁的角隅上分离的浓度,和不引起质壁分离的最高浓度。

取二者的平均值为等渗透势。

4.按照公式把等渗浓度换算成渗透势,以MPa表示之。

ψπ=-RTiCψπ表示欲测渗透势,MPa;R表示气体常数:0.008314( MPa ·L/M·K);T表示绝对温度,即(273+t℃) K;i 表示解离系数,蔗糖等于1。

C表示等渗溶液的浓度,则:ψπ=-0.008314×(273+ t℃)×1×C测出引起质壁分离刚开始的蔗糖溶液浓度和与其相邻的不引起质壁分离最高浓度之后,可按下列公式计算在常压下该组织细胞质液的渗透势。

植物质壁分离实验教案

植物质壁分离实验教案

一、教案基本信息1. 课题名称:植物质壁分离实验教案2. 学科领域:生物学3. 适用年级:高中4. 教学目标:理解植物细胞质壁分离的概念及原因。

掌握植物细胞质壁分离实验的原理和操作步骤。

培养学生的实验操作能力和观察分析能力。

二、教学重点与难点1. 教学重点:植物细胞质壁分离的概念。

植物细胞质壁分离实验的操作步骤及注意事项。

2. 教学难点:理解植物细胞质壁分离的内在原因。

掌握实验中溶液配比和实验现象的观察。

三、教学准备1. 实验材料:成熟植物细胞(如洋葱表皮)、显微镜、载玻片、盖玻片、显微镜下的滴定管、解剖针、酒精灯、解剖刀等。

2. 实验试剂:质量分数为30%的蔗糖溶液、清水。

3. 教学工具:多媒体教学设备。

四、教学过程1. 导入新课:通过展示植物质壁分离的图像和实例,引导学生思考植物细胞质壁分离的现象和原因。

2. 讲解概念:详细讲解植物细胞质壁分离的定义,解释细胞壁的性质和作用,以及原生质层与细胞壁的关系。

3. 演示实验:a. 制作洋葱表皮细胞装片。

b. 在盖玻片一侧滴入30%的蔗糖溶液,另一侧用吸水纸吸引,观察细胞质壁分离现象。

c. 改变蔗糖溶液浓度,观察不同浓度下细胞质壁分离的情况。

4. 学生实验操作:学生分组进行实验,自行操作完成植物细胞质壁分离实验,并记录实验现象。

5. 分析讨论:a. 学生汇报实验结果,讨论不同浓度蔗糖溶液下细胞质壁分离的原因。

b. 分析实验中可能出现的误差和问题,引导学生思考实验操作的准确性和严谨性。

6. 总结归纳:强调植物细胞质壁分离的条件和原因,总结实验操作的关键步骤。

五、作业布置1. 完成实验报告:记录实验步骤、观察到的现象和分析结果。

2. 预习下一节课内容:植物细胞质壁分离的复原实验。

3. 思考题:探讨如何通过实验优化植物细胞质壁分离的效果。

六、教学延伸1. 对比实验:准备两组洋葱表皮细胞装片,一组在蔗糖溶液中,另一组在清水中,观察并比较两组细胞的质壁分离与复原现象。

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实验一植物细胞的质壁分离及死活鉴定
细胞是植物结构与功能的基本单位,而原生质则是细胞中有生命的部位。

死、活细胞原生质的理化性质有显著差别,如果细胞原生质的膜系统有半透性,可与外界溶液构成渗透系统;活细胞可以主动积累某些溶质等等,而死细胞的原生质则丧失了这些特性。

在植物生理研究中,经常需要鉴定细胞的死活。

本实验练习两种鉴定方法:质壁分离法及活体染色法,同时还可以通过对质壁分离及活体染色结果的观察,了解原生物的某些特性,如黏滞性、荷电性等,以加深对有关理论的理解。

一、植物细胞的活体染色与死活鉴定
[原理]活体染色是利用某种对植物无害的染料稀溶液对活细胞进行染色技术。

中性红是常用的染料之一,它是一种弱碱性pH6.4~8.0之间(由红变黄),在中性或微碱性环境中,植物的活细胞能大量吸收中性红并向液泡中排泌,由于液泡在一般情况下呈酸性反应,因此,进入液泡的中性红便解离出大量阳离子而呈现桃红色。

在这种情况下,原生质和细胞壁一般不着色。

死细胞由于原生质变性凝固,胞液不能维持在液泡内,因此,用中性红染色后,不产生液泡着色现象,相反,中性红的阳离子却与带有一定负电荷的原生质及细胞核结合,而使原生质与细胞核染色。

[仪器与用具]显微镜1台;小培养皿一套;载玻片2片;盖玻片2片;单面刀片1片;尖头镊子1把;酒精灯1具;火柴1盒;擦镜纸、吸水纸适量。

[试剂] 0.03%中性红溶液;1mol/dm3硝酸钾溶液。

[方法]
1.选用洋葱鳞茎(或大葱假茎基部幼嫩部位)及小麦片作实验材料。

2.切下一片较幼嫩的洋葱鳞片,用单面刀片在鳞片内侧纵横割划成0.5cm2的小块,用
尖头镊子将内表皮小块轻轻撕下,即可投入中性红溶液染色(注意应将表皮内
側向下)。

若用小麦片为材料,可将叶片背面朝上平放在载玻片放入盛有少量清水的培养皿内,用左手将叶片按平,右手用刀从一个方向轻轻刮去下表皮和叶肉部分,只留下透明的上表皮细胞。

当刮到的只剩下少量叶肉细胞时要小心,用力太重容易损伤表皮细胞,甚至只剩下一层细胞壁,太轻又会留下过多的叶肉细胞,影响观察。

除了小麦外,其他禾本科植物均可用此法制备表皮细胞纸片。

将刮好的纸片切成约
0.5cm2的小块。

3.将制好的洋葱鳞茎内表皮或小麦叶片下表皮小块投入0.03%的中性红溶液中,染色5~ 10min取出1~2片,在蒸馏水中稍加冲洗,在载玻片上滴一滴蒸馏水,小心地将制片平展到载玻片上,加盖玻片,在显微镜下观察,将可看到细胞壁被染成红色,而原生质和液泡均不染色,这是应为蒸馏水偏酸,在弱酸性条件下,细胞壁带负电荷和染料阳离子发生吸附作用的结果。

4.将步骤3中的活体染色制片取出几片放入pH略高于7.0的自来水中浸泡
10~15min,再置于载玻片上镜验,将发现细胞壁脱色,而液泡却被染成深红色,这是因为在溶液pH 高于7.0的情况下,中性红分子的解离作用很弱,主要以分子状态存在,不易被细胞壁吸附,但较易透过质膜和液泡膜进入液泡,而植物的细胞液多呈酸性反应,进入液泡的中性红于是发生解离,将液泡染成樱桃红色。

此时细胞核和原生质不染色。

为了确证中性红染色的部位,可将上述洋葱内表皮染片侵入1mol/dm3的硝酸
钾溶液中浸泡10min左右。

然后取出观察。

由于硝酸钾能使原生质强烈膨胀,发生“帽状质壁分离”,因而能清楚地区别开无色透明的原生质和染成红色的液泡。

5.将步骤4中的活体制片放在酒精灯火焰上微微加热,以杀死细胞,再在显微
镜下观察,会看到原生质凝结成不均匀的凝胶状,与细胞核一起被染成红色。

6.在活染制片中仔细寻找,可能看到个别斯细胞,其细胞核因被中性红染色而
成橙红色,清晰可辨。

二、植物细胞的质壁分离
[原理] 成长的植物细胞一般具有中央液泡,在中央液泡和细胞壁之间为细胞质的薄层及其内外膜——液泡膜和质膜。

液泡中的胞液具有一定的溶质势(或称渗透势),而活的原生质特别是液泡膜和质膜则具有半透性。

所以,当细胞与外界溶液接触时,便与外液构成渗透系统,并可能发生水分的移动。

若外液的水势低于胞液的溶质势,则水分外渗的结果可使原生质随着液泡一起收缩而脱离细胞壁,发生质壁分离,质壁分离的细胞与水或水势较高的溶液接触时,可重新吸水而是质壁分离复原。

受到严重伤害或被杀死的植物细胞,由于质膜和液泡膜失去了半透性,不能在低水势溶液中发生质壁分离,因此质壁分离法可用来鉴定细胞的死活。

[仪器、用具、试剂] 见本试验项目一。

[方法]
1.取洋葱鳞片或小麦叶片按本试验项目一的方法进行制片和活体染色。

2.将染好色的纸片放在载玻片上,盖好盖玻片,在显微镜下观察,可以看
出液泡被染色,无色透明的原生质体则紧贴细胞壁。

3.从盖玻片的一边滴加1mol/dm3硝酸钾溶液而对边用滤纸吸水,将硝酸钾溶液引入盖玻片下使与制片接触并立即镜验,仔细观察质壁分离现象。

4.观察到质壁分离后,与盖玻片一边小心滴加清水,于对边用滤纸慢慢吸去硝酸钾溶液,反复几次,一洗净硝酸钾。

镜验,仔细观察质壁分离复原的情况。

质壁分离复原缓缓进行时,细胞仍会正常存活,如进行太快,则原生质会发生机械损伤而死亡。

5.另取一部分纸片,置载玻片上,先在酒精等火焰上加热,以杀死细胞,镜验细胞染色情况,再引入硝酸钾溶液,观察有无质壁分离现象发生。

三、质壁分离的不同形式
[原理] 植物细胞因原生质体和细胞壁结合的紧密程度或原生质的黏性大小而表现不同的质壁分离形式。

质壁分离的主要形式由凸形和凹形两种,有时也把特别严重的凹形质壁分离叫做“痉挛式”质壁分离。

质壁分离最初一般由凹形开始,以后或保持这一形式或逐渐转为凸形。

保持凹形质壁分离的时间长短与原生质的黏性关系很大,凡是原生质黏性大的,能维持较长时间的凹形,甚至成为“痉挛形”,而原生质黏性很低的,则较快地转为凸形质壁分离。

本实验观察由于Ca2+、K+离子对原生质黏性的不同影响而发生不同形式的质壁分离现象,Ca2+能降低原生质水合度,使原生质黏性加大,K+正好相反。

所以经Ca2+处理后,发生凹形质壁分离,经过K+处理后则发生凸形质壁分离。

当用KNO
3
的高渗溶液进行长时间质壁分离时。

由于原生质强烈膨胀,使原生质层变厚,似帽状质壁分离。

此时能清楚地区别无色透明的原生质和染成红色的液泡(图1)。

[仪器、用具、试剂] 本试验项目一。

另加1mol/dm
3
氯化钙溶液。

[方法]
1.按书本试验项目一的方法制取洋葱内表皮或小麦叶表皮活染制片各两份,分别置于
载玻片上。

一片滴加1~2滴1mol/dm
3硝酸钾溶液,另一片滴加1~2滴1mol/dm
3
氯化钙溶液,
盖上盖玻片立即进行镜,可见钾盐溶液使细胞发生凸形质壁分离,放置约
10min后可见帽状质壁分离;而钙盐溶液处理的则发生凹形或痉挛形质壁分离,经较长时间(15~20min)后,可能有部分细胞原生质全部离开细胞壁,可与K+处理的相区别。

[作业]
将观察到的凹形、凸形、帽形等不同形式的质壁分离,选择典型的细胞个绘制一图,并解释实验观察结果及原理。

[思考题]
1.渗透作用在植物生理上有何种意义?
2.质壁分离在细胞生理的研究上有哪些途径?
[参考文献]
[1] 山东农学院、西北农学院合编. 植物生理学实验指导,1~8页. 山东科技出版社,1985
[2] O.A.华尔捷尔著,徐建安等译. 植物生理学附生物化学原理实验指
导.14~19页、20~
22页,农业出版社,1966
[3] 张宪政等. 植物生理学实验指导,3~4页. 辽宁出版社. 1989
[4] 上海植物生理学会编. 植物生理学实验手册,28~30页. 上海科学技术出版社,1985。

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