溶菌酶及其应用
溶菌酶知识
溶菌酶的研究前景
溶菌酶的作用机制研究
深入探究溶菌酶的作用机制，有助于发现新的溶菌酶种类和功能，为应用研究提供更多可能性。
溶菌酶的基因工程研究
基因工程技术的发展为溶菌酶的研究提供了新的手段，通过基因工程方法改良溶菌酶的性能，提高其稳定性和活性。
溶菌酶的抗菌作用研究
溶菌酶的抗菌作用研究可以为开发新型抗菌药物提供理论基础，有助于解决当前抗生素滥用和耐药性问题。
溶菌酶可以裂解细菌细胞壁，杀死多种革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌，包括金黄 色葡萄球菌、大肠杆菌、志贺氏菌等。
溶菌酶的抗菌作用主要通过裂解肽聚糖中的N-乙酰葡萄糖胺和N-乙酰胞壁酸之间 的β-1,4糖苷键，破坏细菌细胞壁，导致细菌溶解死亡。
溶菌酶的抗肿瘤作用
溶菌酶能够激活机体免疫系统，诱导肿瘤细胞凋亡，抑制肿 瘤细胞的生长和扩散。
溶菌酶知识
xx年xx月xx日
目录
• 溶菌酶简介 • 溶菌酶的生物活性 • 溶菌酶的生产和应用 • 溶菌酶的研究进展 • 溶菌酶的前景展望
01
溶菌酶简介
溶菌酶的定义
溶菌酶是一种能够裂解细菌细胞壁的肽酶。
它具有广谱的抗菌活性，能够破坏细菌细胞 壁，导致细菌溶解死亡。
溶菌酶的发现
溶菌酶最早是在19世纪末由法国微生物学家Jules Bordet发 现。
05
溶菌酶的前景展望
溶菌酶的应用前景
生物医药领域
在生物医药领域，溶菌酶作为 天然的抗菌剂，具有良好的生 物相容性和安全性，可用于药 物开发、医疗器械灭菌等方面
。
食品安全领域
在食品安全领域，溶菌酶可以用 于食品保鲜和防腐，提高食品卫 生质量，保障食品安全。
环保领域
在环保领域，溶菌酶可以用于水处 理、污染治理等方面，提高环保治 理效果。
溶菌酶应用简介
1. 溶菌酶简介溶菌酶，又称细胞壁水解酶，广泛存在于高等动植物组织及分泌物、原生动物、昆虫和各种微生物中。
1922年Fleming等发现，在人的唾液、眼泪中存在有能够溶解细胞壁杀死细菌的酶，因而被命名为溶菌酶。
它能够水解N一乙酰葡萄糖胺与N一乙酰胞壁酸之间的β一1，4糖苷键，因此可以溶解大多数革兰氏阳性菌的细胞壁而具有溶菌作用，溶菌酶本身是一种蛋白质，安全性能高，在食品、医药、生物学中得到了广泛的应用。
2. 溶菌酶的理化性质（可要可不要）溶菌酶是一种糖苷水解酶，是由129个氨基酸残基组成的小分子碱性球蛋白，相对分子质量为14 300，分子中富含碱性氨基酸和芳香族氨基酸，其多肽链经盘绕折叠形成二级和三级结构，形成一个椭圆形的外形结构，溶菌酶纯品为白色粉末结晶，无臭、甜味，易溶于水和低浓度的盐溶液，不溶于丙酮、乙醚等有机溶剂。
正常条件下溶菌酶作用的最适温度为45--50℃，最适pH为5～7，在低温干燥条件下可长期保存，热稳定性强，耐酸性强，pH为4—7时，100℃下处理45 min仍能保持其酶活性，但在碱性条件下化学性质不稳定，易变性。
3. 溶菌酶的作用1．抗菌消炎2．抗病毒：溶菌酶能与带负电荷的病毒蛋白直接作用。
与DNA、RNA、脱辅基蛋白形成复盐，使病毒失活。
3．增强免疫力：溶菌酶作为机体非特异免疫因子之一，参与机体多种免疫反应，在机体正常防御功能和非特异免疫中，具有保持机体生理平衡的重要作用。
4．其它方面的药理作用：溶菌酶还具有激活血小板的功能。
可以改善组织局部血液循环障碍，分泌脓液，增强局部防卫功能，从而体现其止血、消肿等作用。
它还可以作为一种宿主抵抗因子，对组织局部起保护作用。
5．促进双歧乳酸杆菌增殖：溶菌酶在婴儿体内可以直接或间接促进婴儿肠道细菌双歧乳酸杆菌的增殖，促进婴儿消化吸收，可以促进人工喂养婴儿肠道细菌的正常化。
4.溶菌酶的应用在乳制品中的应用：人乳中溶菌酶的含量是牛乳的3000倍，溶菌酶是婴儿生长发育必需的抗菌蛋白。
溶菌酶的名词解释
溶菌酶的名词解释溶菌酶是一种存在于细菌、动物和植物等生物体内的酶类物质，具有分解细菌细胞壁的能力。
这种酶广泛存在于自然界中，对于维持生态平衡和机体免疫防御方面都起着重要作用。
在这篇文章中，我们将详细探讨溶菌酶的特性、功能和应用。
一、溶菌酶的特性溶菌酶是一种水解酶，主要通过水解β-1,4-糖苷键的酶解作用，切断细菌细胞壁的纤维素和肽聚糖链。
溶菌酶可以依据其作用对象分为两类：1）内源性溶菌酶：存在于许多生物体内，如人体分泌的唾液、眼泪、鼻涕中，以及动物和植物体内的细胞和体液中；2）外源性溶菌酶：来自于环境中，如一些细菌和真菌分泌的溶菌酶。
溶菌酶的分子量通常在10,000至20,000道尔顿之间，具有抗菌谱较广的特点。
它是一种相对稳定、热稳定性较好且在酸性条件下活性仍保持较高的酶类物质。
二、溶菌酶的功能溶菌酶在生物体内扮演着重要的角色，具有多种功能。
1）免疫防御：溶菌酶在机体免疫系统中起到重要的作用。
当细菌感染机体时，免疫细胞会释放溶菌酶来破坏细菌的细胞壁，从而抑制其生长和扩散。
这对于维持机体的免疫稳态具有至关重要的意义。
2）消化道健康：人体消化道中存在着多种细菌，其中一些是有益的菌群。
溶菌酶可以促进这些有益菌的生长和繁殖，维护消化道健康。
同时，它还能降低有害菌在消化道内的数量，减少感染和疾病的风险。
3）食品工业应用：由于溶菌酶对细菌具有特异性的杀菌作用，它在食品工业中具有广泛的应用前景。
比如，将溶菌酶应用于食品加工中，可以延长食品的保质期，改善产品的质量和卫生安全性。
三、溶菌酶的应用溶菌酶的研究和应用领域非常广泛，涉及生物医药、食品工业、环境科学等多个领域。
1）生物医药领域：溶菌酶已被广泛应用于临床医学中，特别是在抗生素研发和治疗上。
由于细菌在抗生素中产生耐药性的情况日益严重，溶菌酶作为一种具有独特杀菌作用的物质，被认为是改善抗生素疗效的有力补充。
此外，溶菌酶还可用于细菌感染的快速诊断和疗效评估。
2）食品工业领域：溶菌酶在食品加工过程中的应用正在得到重视。
溶菌酶的结构与功能
溶菌酶的结构与功能溶菌酶是一种酶类蛋白质，具有重要的生物学功能，能够降解细菌细胞壁，引起细菌细胞溶解。
溶菌酶通常由一个或多个结构域组成，包括N-端信号肽、结构域和C-端的结构域。
信号肽用于定位和导入溶菌酶进入细胞内部。
结构域通常由α-螺旋和β-折叠组成，并通过非共价相互作用稳定结构。
C-端结构域通常与细菌细胞壁成分MurNAc结合。
溶菌酶的功能:溶菌酶的主要功能是降解细菌细胞壁。
细菌细胞壁是由多糖和蛋白质组成的结构，其中包括MurNAc、N-乙酰葡糖氨基酸、N-乙酰酰氨基葡糖等。
溶菌酶能够酶解这些细胞壁成分，使细胞壁弱化甚至破裂，导致细菌细胞溶解。
溶菌酶的作用机制:溶菌酶通过与细菌细胞壁的MurNAc结合，进而使其降解。
在细菌细胞壁中，MurNAc和N-乙酰葡糖氨基酸之间由β-1,4-糖苷键连接。
溶菌酶能够切断此糖苷键，使得细菌细胞壁的结构破坏。
溶菌酶与免疫系统:溶菌酶是人体内免疫系统的重要组成部分。
人体产生的溶菌酶可以降解细菌细胞壁，促进细菌的溶解。
此外，溶菌酶还能够激活免疫系统中的炎症反应，吸引炎症细胞和其他免疫细胞到感染部位，增强免疫系统的抗菌效应。
溶菌酶在临床上的应用:溶菌酶在临床上具有广泛的应用价值。
首先，溶菌酶可以用作一种抗菌剂。
通过溶菌酶可以破坏细菌细胞壁从而引起细菌的溶解，具有较强的抗菌作用。
其次，溶菌酶还可以用于诊断菌感染。
通过检测患者体液中溶菌酶的水平可以判断其细菌感染的程度和严重性。
此外，一些研究还显示，溶菌酶可能还具有抗肿瘤作用，能够抑制肿瘤细胞的生长和扩散。
总结:溶菌酶是一种重要的酶类蛋白质，具有降解细菌细胞壁的功能。
其结构包括信号肽、结构域和与MurNAc相结合的C-端结构域。
溶菌酶通过酶解细菌细胞壁的MurNAc，导致细菌细胞的破裂和溶解。
溶菌酶在免疫系统中起着重要作用，并具有广泛的临床应用前景。
溶菌酶(1)
1000.00
910.20
743.50
净利(元)
500.00
0.00
试验组
常规用药
176.70
空白组
2、抗菌谱广。
对耐药性菌株效果尤佳。采用纸片法和多点法 检定了“溶菌酶”对金黄色葡萄球菌的抑（杀）菌 作用，结果表明，对10株ß–内酰胺酶阴性菌，本品 和抗生素（青霉素、庆大霉素、头胞唑啉等）都有 明显的抑制效果，但对82株耐甲氧西林金葡萄 （MRSA）本品的敏感性显著高于其它抗菌素。最 低抑菌浓度（MIC）为120- 250μ/ml，相当于2450 μg / ml。
（2）皮肤和粘膜的刺激性试验及致热源试验反映为阴性。
（3）对鲜奶的发酵质量影响试验。
离体试验：即直接将药液加入鲜奶中。每20ml鲜奶中加 入 500、1000、2000 U ，相当于 100 μg 、200 μg 、400 μg 。经40℃ 2小时发酵后，酸度为63--73度，空白对照组 为61--73度。
四、社会效益和生态效益:
1、在畜牧业中推广应用，一方面将大大降低疫病造成的产量下降，
减少由此引起的巨大经济损失，大大提高畜牧业的经济效益。（若按 仔猪的死亡率达10——20%，鸡死亡率达20%左右，造成的直接经济损 失分别达到2.8亿元以上和4.44亿元左右。），另一方面，它的推广应 用能很好解决家禽家畜中的药害残留问题，改善人民用肉质量，确保 食品安全，同时，对于我国在加入WTO后，抗绿色壁垒，国产家禽家畜 肉制品参与国际市场竞争都有着十分重要的现实意义。
5、能提高机体的免疫力，加快机体损伤组织的修复
溶菌酶作为机体非特异免疫因子之一，参与机体多种免疫反映， 具有保持机体生理平衡的重要作用。可改善和增强巨噬细胞吞噬和消 化功能，激活白细胞吞噬功能，并能改善细胞抑制剂所导致的白细胞 减少,从而增强机体的抵抗力。溶菌酶本身具有T细胞表位，能诱导2 型(Th2) T辅助细胞反应；口服溶菌酶能诱导小鼠产生全身性的Th1 和Th2免疫反应，增强免疫功能。溶菌酶还具有激活血小板的功能,可 以改善组织局部血液循环障碍,分解脓液,增强局部防卫功能,从而体 现其止血、消肿、加快机体损伤组织的修复作用。它还可以作为一种 宿主抵抗因子,对组织局部起保护作用。从我们对使用过本产品的仔 猪眼踪调查来看,也证明了这一点。即用本产品治疗过的仔猪治愈后 在整个生长期内,下痢的复发率为0.5%。而用抗生素治疗治愈后复发 率为24.5%。
溶菌酶的功能主治
溶菌酶的功能主治1. 概述溶菌酶是一种可以溶解细菌细胞壁的酶，它在生物体内起着重要的保护作用。
本文将介绍溶菌酶的功能主治，包括溶菌酶的作用机制、主要途径、应用领域以及注意事项。
2. 溶菌酶的作用机制溶菌酶主要通过以下两种机制发挥作用： - 溶解细菌细胞壁：溶菌酶通过酶解作用，将细菌细胞壁中的多肽聚糖连接断裂，导致菌体的溶解和破坏。
- 促进溶菌酶释放：溶菌酶可以刺激宿主细胞产生和释放更多的溶菌酶，从而增强免疫系统对细菌的防御能力。
3. 溶菌酶的主要途径溶菌酶的主要途径包括以下几种： - 自然分泌：某些细菌可通过主动分泌将溶菌酶释放到周围环境中，以攻击潜在竞争者。
- 细菌感染：当细菌感染宿主时，机体会产生溶菌酶来对抗细菌入侵。
- 化学合成：人工合成的溶菌酶也可以应用于治疗感染性疾病。
4. 溶菌酶的主要功能溶菌酶具有以下主要功能： - 抗菌作用：溶菌酶可溶解细菌细胞壁，破坏细菌结构，从而抑制细菌生长和繁殖。
- 免疫调节：溶菌酶可以增强机体的免疫力，促进免疫细胞活性，提高抗菌能力。
- 抗炎作用：溶菌酶具有一定的抗炎效果，可减轻炎症反应，促进伤口愈合。
5. 溶菌酶的应用领域溶菌酶在医学领域有广泛的应用，包括以下几个方面： - 感染性疾病治疗：溶菌酶可以用于治疗细菌引起的感染性疾病，如肺炎、乳腺炎等。
- 食品工业：溶菌酶可用于食品工业中的细菌检测和控制，确保食品质量和安全。
- 生物工程：溶菌酶可以应用于生物工程领域，用于基因组研究、DNA提取等。
- 医药研发：溶菌酶在药物研发过程中可以用于筛选和测试抗菌药物。
6. 注意事项在使用溶菌酶时需要注意以下事项：- 剂量控制：使用溶菌酶时需要控制剂量，避免过量使用产生不良反应。
- 药物相互作用：溶菌酶可能与其他药物发生相互作用，导致药物疗效降低或产生不良反应，应避免与其他药物同时使用。
- 过敏反应：部分患者可能对溶菌酶过敏，使用时需密切观察患者的体征和症状，如有不适应立即停用并咨询医生。
高中溶菌酶知识点总结
高中溶菌酶知识点总结一、溶菌酶的结构和功能1. 溶菌酶的结构溶菌酶是一种酶类蛋白质，其主要由氨基酸组成。
它的分子结构通常呈现出球状或者棒状，具有一定的空间构象。
溶菌酶的分子结构决定了其在水溶液中的活性和作用方式。
2. 溶菌酶的功能溶菌酶的主要功能是溶解细菌细胞壁。
细菌的细胞壁主要由肽聚糖和脂多糖构成，溶菌酶可以在特定的酶活性和pH条件下，将细菌细胞壁中的肽聚糖和脂多糖降解成小分子物质，使细菌细胞失去保护作用而死亡。
3. 溶菌酶的作用机制溶菌酶作用的主要机制是通过其对细菌细胞壁的特异性降解作用。
当细菌受到感染或者侵袭时，生物体内的溶菌酶会针对特定种类的细菌细胞壁进行降解，从而消灭或抑制细菌的生长和繁殖。
二、溶菌酶在生物防御系统中的作用1. 溶菌酶对抗微生物感染在生物体的免疫系统中，溶菌酶是一种重要的抗菌蛋白质。
它可以通过溶解细菌细胞壁的方式直接杀死细菌，起到预防和抵抗感染的作用。
溶菌酶在吞噬细胞和粒细胞等免疫细胞中起着重要的作用，可以帮助这些细胞识别和清除各种外来的病原体。
2. 溶菌酶在炎症反应中的作用当生物体受到外伤或感染时，免疫系统会产生炎症反应，溶菌酶参与其中。
溶菌酶可以通过促进炎症反应的进行，从而加速伤口愈合和抗菌作用，保护机体免受病原菌的侵害。
3. 溶菌酶对营养物质的释放在生物体内，溶菌酶还可以通过溶解细菌细胞壁的方式帮助其吸收营养物质。
当溶菌酶降解细菌细胞壁时，会释放出一些营养物质，供生物体吸收和利用，起到促进生长和维持健康的作用。
三、与溶菌酶相关的重要概念和应用1. 溶菌酶的调节机制溶菌酶的活性受到多种因素的影响，包括pH值、温度、离子强度等。
不同种类的溶菌酶对这些因素的适应性也有所不同。
因此，对溶菌酶的调节和控制是生物体内免疫系统正常运作的重要保障。
2. 溶菌酶在医药和生物技术中的应用由于溶菌酶具有一定的抗菌作用和对细胞壁的特异性降解能力，因此在医药和生物技术领域有着广泛的应用。
例如，溶菌酶可以作为一种抗菌药物用于治疗细菌感染的疾病；在生物技术中，溶菌酶可以用于细胞壁的降解和细胞的裂解，有助于分离和提取细胞内的蛋白质和核酸。
溶菌酶结构
溶菌酶结构溶菌酶是一类广泛存在于细菌、真菌和病毒中的酶类物质，其作用是破坏细菌细胞壁，导致细菌溶解死亡。
溶菌酶的结构与功能一直是科学家们关注的焦点之一。
本文将从溶菌酶的结构特点、作用机制以及应用领域等方面进行介绍。
一、溶菌酶的结构特点溶菌酶属于酶的一种，其结构主要由氨基酸组成。
一般而言，溶菌酶的分子量较小，通常在10-20千道尔顿之间。
溶菌酶分子主要由一个或多个结构域组成，其中最常见的是催化结构域和结合结构域。
催化结构域负责溶菌酶对细菌细胞壁的降解作用，而结合结构域则负责与细菌表面的配体结合，从而实现定位和识别的功能。
二、溶菌酶的作用机制溶菌酶的作用机制主要涉及其与细菌细胞壁的相互作用。
细菌细胞壁主要由多糖和肽聚糖组成，而溶菌酶能够特异性地降解这些成分。
具体而言，溶菌酶作用于细菌细胞壁的聚糖链，通过切断β-1,4-糖苷键导致细胞壁的断裂，进而引起细菌细胞的溶解。
三、溶菌酶的应用领域由于溶菌酶具有高度特异性和高效性的特点，因此在医学和食品工业等领域具有广泛的应用前景。
在医学领域，溶菌酶可用于治疗细菌感染性疾病，如肺炎、骨髓炎等。
此外，溶菌酶还可以用于检测和鉴定细菌的种类和数量，对于临床诊断和疾病预防具有重要意义。
在食品工业中，溶菌酶可用于食品中细菌的去除和灭活，从而提高食品的安全性和质量。
总结：溶菌酶作为一类能够破坏细菌细胞壁的酶类物质，具有广泛的应用前景。
其结构特点主要包括催化结构域和结合结构域，作用机制则是通过与细菌细胞壁的特定成分相互作用，导致细胞壁的断裂和细菌的死亡。
溶菌酶在医学和食品工业领域的应用也是十分重要的，可以用于治疗感染性疾病以及提高食品的安全性。
未来，随着对溶菌酶结构和功能的深入研究，相信溶菌酶的应用领域将会更加广泛，为我们的生活带来更多的便利和健康。
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溶菌酶及其应用 环境1101班 11601540110 曾碧玲 摘要：溶菌酶又称胞壁质酶,是一种无毒、无害、安全性很高的高盐基水解蛋白酶,作为天然防腐剂的溶菌酶能选择性地分解微生物及植物细胞壁,而对没有细胞壁的人体细胞不会产生降解作用,因而被广泛应用于医药、食品等行业。本文介绍了溶菌酶的性质，制备及其应用。 关键词：溶菌酶 性质 制备 应用 Abstract:Lysozyme is also called murein enzyme, is a kind of avirulent and harmless, safety, high high base hydrolysis protease, as a natural preservative of lysozyme can selectively decomposition microorganisms and plant cell walls, and for no human cells do not produce degradation of cell walls, and therefore is widely used in medicine, food and other industries. This paper introduces the properties of lysozyme, preparation and its application. Keywords: Lysozyme properties preparation applications 引言：对溶菌酶的研究始于20世纪初, 人们发现人的唾液、眼泪中存在有溶解细菌细胞壁的酶, 因其具有溶菌作用, 故命名为溶菌酶[ 1]。溶菌酶[ Lysozyme ( EC3. 2. 1. 17) ] 又称为胞壁质酶, 是一种专门作用于微生物细胞壁的水解酶, 其化学名称为N- 乙酰胞壁质聚糖水解酶112[ 2]。 1.溶菌酶的性质 溶菌酶（lysozyme）又称胞壁质酶（muramidase）或N-乙酰胞壁质聚糖水解酶（N-acetylmuramide glycanohydrlase），是一种能水解致病菌中黏多糖的碱性酶。主要通过破坏细胞壁中的N-乙酰胞壁酸和N-乙酰氨基葡糖之间的β-1,4糖苷键，使细胞壁不溶性黏多糖分解成可溶性糖肽，导致细胞壁破裂内容物逸出而使细菌溶解。溶菌酶还可与带负电荷的病毒蛋白直接结合，与DNA、RNA、脱辅基蛋白形成复盐，使病毒失活。因此，该酶具有抗菌、消炎、抗病毒等作用。 溶菌酶的储存条件为2-8°C，形状为粉末状，颜色是白色，危险品标志为B，安全说明23-24/25-22，WGK Germany3，RTECS号 OL5989850，F3-10。白色或微白色冻干粉，溶于水，不溶于乙醚和丙酮，pI为11.0-11.35，最适pH值6.5。酸性介质中可稳定存在，碱性介质中易失活；96℃， pH值为3条件下，15min后活力保持87%。有碘、咪唑和吲哚衍生物、表面活性剂(十二烷基硫酸钠、醇类和碳链不少于12的脂肪酸)。1%水溶液在281.5nm处的吸光系数为26.4，通过水解细菌细胞壁的肽聚糖来溶菌。酶反应为Micrococcus luteus或Micrococcus lysodeikticus菌悬浮液═溶菌并澄清。 溶菌酶是一种无毒、无害, 安全性很高的高盐基蛋白质, 且具有一定的保健作用, 可广泛用于医疗和食品等行业, 还可作为生物工程研究中的工具酶, 提取微生物细胞内各类物质, 以及进行原生质体制备及融合育种。 溶菌酶的分子结构图 2.溶菌酶的生产与制备 以蛋清为原料，在pH6.5条件下用弱酸性阳离子交换树脂732吸附后，再用硫酸铵洗脱，经透析后冷冻干燥得产品。 溶菌酶是采用生物工程技术进行克隆、提取而制取,它是一种天然酶，安全绿色的添加剂，无抗药性。 该酶广泛存在于人体多种组织中，鸟类和家禽的蛋清、哺乳动物的泪、唾液、血浆、尿、乳汁等体液以及微生物中也含此酶，其中以蛋清含量最为丰富。从鸡蛋清中提取分离的溶菌酶是由18种129个氨基酸残基构成的单一肽链。它富含碱性氨基酸，有4对二硫键维持酶构型，是一种碱性蛋白质，其N端为赖氨酸，C端为亮氨酸。可分解溶壁微球菌、巨大芽孢杆菌、黄色八叠球菌等革兰阳性菌。 溶菌酶在等电点以下较广泛的pH值范围内，分子带正电荷，可吸附于弱酸性阳离子交换树脂上，洗脱后盐析，可得溶菌酶沉淀，再进行精制可得成品。蛋清吸附↓724树脂洗涤↓缓冲液洗脱↓硫酸铵溶液盐析透析去碱性蛋白↓NaOH冻干溶菌酶冻干粉沉淀干燥溶菌酶在5～10℃下，将新鲜蛋清540kg加入到已处理好的80kg 724树脂中，搅拌吸附6h，在0～5℃静置过夜。倾出上层蛋清，树脂离心甩干，用蒸馏水反复洗去黏附的卵蛋白，然后将树脂装入柱内，用0-15mol/L、pH=6?5磷酸缓冲溶液约150L洗涤树脂，再用约600L的10%硫酸铵溶液洗脱，收集洗脱液。洗脱液中加硫酸铵，使最终含硫酸铵量为40%，有白色沉淀生成，冷处放置过夜。虹吸上层清液，沉淀吸滤抽干，再用1倍蒸馏水溶解沉淀呈稀糊状，然后装入透析袋，在约5℃的条件下，对蒸馏水透析24h左右，中间换水2～3次。离心去除沉淀，沉淀再用少量水洗一次，洗液与离心液合并。再往透析清液中慢慢加入1mol/L氢氧化钠溶液，同时不断搅拌，使pH值上升到8?0～9?0，如有白色沉淀，即离心除去。然后用3mol/L盐酸调pH=5?0，冷冻干燥，即得白色片状溶菌酶。也可将离心液用3mol/L盐酸调pH=3?5，在搅拌下缓慢加入5%的固体氯化钠，在约5℃的温度下静置48h，离心，沉淀用0℃丙酮洗涤，干燥，即得溶菌酶。[ 12] 3.溶菌酶的应用 3.1在食品工业中的应用 溶菌酶是一种无毒、无副作用的蛋白质, 又具有溶菌作用, 因此可用作食品防腐剂。目前已广泛应用于水产品、肉食品、蛋糕、清酒、料酒及饮料中的防腐, 溶菌酶属于冷杀菌, 在杀菌防腐过程中不需加热, 因而避免了高温杀菌对食品风味的破坏作用, 尤其对热敏感的物质更具有重要意义[ 3] 。还可以添加到乳粉中, 使牛乳人乳化, 以抑制肠道中腐败微生物的生存, 同时直接或间接地促进肠道中双歧杆菌的增殖。此外, 还能利用溶菌酶生产酵母浸膏和核酸类调味品。 对于酵母、霉菌和革兰氏阴性菌等引起的腐败变质, 溶菌酶不能起到防腐作用。但溶菌酶有良好的配伍性, 可与其他添加剂( 如同植酸、甘氨酸、聚合磷酸盐等) 复配使用, 从而大大提高其防腐保鲜的效果。 3.2在科研中的应用 在科研上利用溶菌酶专一性水解细胞壁的特点, 可以了解细胞壁的构造; 分解细胞壁后制备的原生质体可用于微生物育种以及微生物分类等学术研究和专用试剂。近年来, 溶菌酶已成为基因工程及细胞工程必不可少的工具酶, 用以制造和提取菌体的活性物质如核酸、酶和活性多肽等[ 4]。 目前, 有关溶菌酶应用的最新研究进展包括以下几个方面: ( 1) 将溶菌酶固定化在食品包装材料上, 生产出有抗菌功效的食品包装材料, 以达到抗菌保鲜功能[ 5]; ( 2) 将溶菌酶固定化在HEPA( 空气过滤器) 上,作为空调的空气净化系统, 使其具有高效除尘和杀菌两大功能。当空气通过滤网时, 先滤集捕捉尘粒和细菌, 然后将捕捉到的细菌杀灭[ 6]。 ( 3) 用溶菌酶非专一性地降解海洋生物高分子壳聚糖, 使其成为能被人体吸收的低分子量的有独特的生理活性和功能性质的低聚壳聚糖[ 7]。 3.3在医学中的应用 3.3.1 溶菌酶在抗菌消炎、增强免疫力方面的应用 溶菌酶对G+ 、枯草杆菌等有很好的杀灭作用, 对大肠杆菌、普通变球菌等G- 也具有一定程度溶解。此外,溶菌酶与抗菌素合用效果更佳, 因而, 溶菌酶广泛应用于医药行业, 如利用溶菌酶治疗各种五官科炎症, 尤其对急性炎症如急性咽炎、急性喉炎、急性中耳炎等效果明显[ 8]。 3.3.2 溶菌酶在多种疾病诊断方面的应用 戴清源等[ 9]报道, 正常情况下, 人体尿液中一般只存在少量溶菌酶, 因此测量尿中溶菌酶含量, 有助于检测肾小管功能障碍性疾病。同时, 烧伤病人分泌的溶菌酶比常人多出几倍, 也可在尿液中检出, 有助于对手术移植排斥、烧伤严重程度的判断。此外, 血清中溶菌酶含量高低对白血病的诊断起辅助作用。 此外, 可用溶菌酶来制造眼药水、润喉液等。溶菌酶作为内服剂时, 可抑制流行性感冒和腺病毒的生长, 抗感染及抗炎症, 而且溶菌酶对耐药性细菌同样具有溶菌作用, 且具有疗效显著和对人体副作用小的特点, 因而是一种较为理想的药用酶。[ 10] 3.4在体育领域中的应用 溶菌酶还可以应用在体育领域, 据俄罗斯巴.戈托夫米夫的报道[ 11], 用溶菌酶可以对运动员身体机能进行评定, 他认为, 处于良好状态的运动员其唾液溶菌酶的滴定值高于训练水平不佳的运动员, 训练负荷大, 能使运动员溶菌酶的滴定值下降, 溶菌酶是构成机体非特异性免疫功能的因素之一。在一定程度上能反映机体的免疫能力, 是一项较灵敏的亚临床指标。测定唾液溶菌酶取样属于无损伤方法, 测定方法简单易行, 便于较长时间追综观察, 有助于在训练期和恢复期进行机能评定。 4.结论 当今世界环境污染日趋严重, 在人人倡导绿色食品的今天, 溶菌酶作为一种无毒安全的天然蛋白质, 在食品、医药和生物工程中已有广泛的应用, 工业上对溶菌酶制剂的需求量也是与日俱增。 近年来, 我国也相继开展了一些有关溶菌酶提取和应用方面的研究工作, 但溶菌酶制造业还停留在规模小、设备和生产技术相对落后的阶段。尽管我国对溶菌酶开发应用十分有限, 我们要相信随着科学技术的不断发展和人民生活水平