卵母细胞
2第二章 卵细胞的形成
6、减数分裂 有丝分裂的一种特殊方式。其母细胞染色
体复制一次后，细胞连续分裂两次，产生 的子细胞中染色体数目比母细胞减少一半。
减数分裂的整个过程可分为前减数分裂期、 减数分裂I和减数分裂Ⅱ三个阶段。前减数 分裂期是减数分裂的准备阶段，绝大部分 DNA复制后即进入减数分裂。
而表现于两性译形的第二性征则是多方面 的，主要体现在雌雄个体的大小、鳍的变 化、生殖孔形状变化以及雄性在繁殖期所 出现的婚色、珠星等。
雌性有一对卵巢和输卵管组成。
硬骨鱼类的卵巢为封闭卵巢，卵巢外被腹 膜形成的卵囊膜包围，并往后延伸变窄成输 卵管，成熟的卵不排入腹腔，而是落进卵巢 的卵巢腔内，由此直接输送进输卵管。
卵细胞的过程。 动物的卵细胞都是在卵巢内发生的。
2、卵原细胞 卵原细胞，是卵巢中的原始生殖细胞，由动物胚 胎早期发育的生殖腺上皮中的原始生殖细胞分裂 而来。
在性成熟前，卵巢中有相当多的卵原细胞，其核 内染色质少而核仁明显。泡状的卵原细胞与周围 其他细胞一起，在卵巢皮层中形成许多细胞小团。 卵原细胞经过增殖期分裂，数目更多。
有些动物的卵母细胞中有可识别的生殖 质（germ plasm），它是由RNA和蛋白质 组成的有一定形态结构，在胚胎发育中， 获得生殖质的细胞将来分化为生殖细胞。
生殖质与生殖细胞的分化
生殖质 germ plasm 定义：卵母细胞中决定胚胎细胞分化成生
殖细胞的细胞质成分。
生殖细胞与原生殖细胞
两者有本质的差别
V期卵巢：性腺完全成熟，卵巢松软，卵已 排于卵巢腔中，提起亲鱼时，卵子从生殖 孔自动流出，或轻压腹部即有成熟卵流出。 成熟卵的颜色随种类而不同。海水鱼类V期 卵一般是透明的。
卵细胞的形成
减1前期
减1后期
减2后期
卵细胞的形成过程
第二次 分裂
极体(N)
卵 原 细 胞
(2N)
染色体 第一次 初级卵 分裂 复制 母细胞 (2N)
极体 (N)
极体(N) 极体(N)
退化
第二次 次级卵 分裂 母细胞 (N)
卵细胞 (N)
1、在减数分裂过程中，染色体数目减 半发生在：（ B ） A、减数第一次分裂后期
B、减数第一次分裂结束时
C、减数第二次分裂后期
D、减数第二次分裂结束时
2、在减数分裂过程中，每条染色体 的着丝点一分为二，两条染色单体形 成两条染色体发生在：（ D ）
A、第一次分裂中期 B、第一次分裂后期 C、第二次分裂中期 D、第二次分裂后期
48 （2）减数第一次分裂后期，着丝点数是
（
48 24 （3）减数第二次分裂后期，染色体数（
减数第二次分裂末期染色体数是（ ）
），染色单体数是（
）
），
24 12
思考与练习 1、下图为一生物细胞图 1）细胞中同源染色体
a a’ b b’
为——————
2）减数第一次分裂时
1
2c
c’ d d’
————发生分离
3.与有丝分裂相比，减数分裂过程中 染色体变化的显著特点是：( B ) A 染色体进行复制 B 同源染色体进行联会 C 有纺锤体形成 D 着丝点分开
4、在减数分裂过程中，有关同源染色体的 叙述，不正确的是 （ B ） A、第一次分裂开始不久两两配对的染色体 B 、在减数第二次分裂中，大小、形状相同的 染色体 C、一条来自父方，一条来自母方
D、在减数第一次分裂后期向两极移动
5、思考与练习
[经验]卵细胞发育和卵巢的分期
![[经验]卵细胞发育和卵巢的分期](https://img.taocdn.com/s3/m/db79b4310622192e453610661ed9ad51f01d54d5.png)
卵细胞发育和卵巢的分期卵细胞的生长时相主要淡水养殖鱼类雌鱼的性腺从卵原细胞(oogonial cell) 开始到成熟卵(matureova) 的形成需经过三个时期，即卵原细胞的繁殖期(propagative period)、卵母细胞(ooeyte) 的生长期和成熟期。
卵原细胞的繁殖期在这个时期中，卵原细胞进行有丝分裂(mitosis)，细胞数目不断增加。
经过若干次分裂后，停止分裂，开始长大，向初级卵母细胞(primary oocyte) 过渡。
此阶段的卵细胞，称第Ⅰ时相的卵原细胞。
生长期(growth period) 此期可分为小生长和大生长两个时期。
小生长期由于原生质的不断增加，使初级卵母细胞的体积增大，所以也称“原生质生长期”。
小生长期的后期，卵膜外面长了一层扁平的滤胞上皮细胞(follicular epithelial cell)。
单层滤胞上皮细胞形成后，小生长期结束。
此期的初级卵母细胞称第Ⅱ时相的卵母细胞。
大生长期由于不断进入细胞的营养物质，不能完全同化成为卵内的原生质(protoplasm)，逐渐出现微细的卵黄颗粒，即大生长期的开始。
大生长期的前期主要是卵黄的积累，卵母细胞体积增大，细胞内缘出现液泡，卵膜增厚，出现放射带，滤胞上皮细胞分裂成两层。
此时的卵母细胞，称第Ⅲ时相的卵母细胞。
大生长期的后期，主要是卵黄的充满。
卵黄在液泡内外先后积累，并充满全部细胞质部分。
在细胞质中靠近卵膜的最外层，是粘多糖(mucopolysaccharide)，以便形成卵周隙时，起吸水作用。
此时的卵母细胞，已长足躯体，达到了成熟的第Ⅳ时相。
成熟期初级卵母细胞完成大生长期后，体积不再增大，开始核的成熟变化——核极化，核膜溶解，并进行两次成熟分裂。
初级卵母细胞进行第一次成熟分裂放出第一极体，紧接着次级卵母细胞又开始第二次成熟分裂(maturation division)，并停留在分裂中期。
通常把这个过程称为成熟。
《卵细胞的形成过程》课件
卵细胞在卵巢中以初级卵母细胞 的形式存在，处于静止期。
卵细胞形成过程中的细胞分裂
初级卵母细胞在排卵前，经过减数第 一次分裂形成次级卵母细胞和第一极 体。
减数第二次分裂发生在受精过程中， 次级卵母细胞分裂形成卵子和第二极 体。
卵细胞形成过程中的细胞分化
在卵细胞形成过程中，初级卵母细胞通过减数分裂形成次级卵母细胞，细胞核和 细胞质发生显著变化。
基因编辑
了解卵细胞形成过程中基因的表达和 调控，有助于设计更精确、更安全的 基因编辑策略，用于治疗遗传性疾病 和改良农作物。
卵细胞的保存与人工激活
卵细胞保存
研究卵细胞形成过程中所需的条件和因素，有助于开发有效的卵细胞保存技术，延长卵细胞的存活时 间和提高其质量。
人工激活
探索卵细胞激活的机制和条件，有助于实现人工控制卵细胞的发育和成熟，为生殖健康和辅助生殖技 术提供新的手段。
卵黄的形成与积累机制对于保 证卵细胞的正常发育和功能至
关重要。
透明带的形成
透明带是围绕在卵细胞外部的 一层特殊的膜，它的形成对于 保护卵细胞和受精过程具有重
要作用。
在透明带形成过程中，卵母细 胞周围的细胞通过一系列生物 化学反应，分泌出特殊的蛋白
质，最终形成透明带。
透明带能够保护卵细胞免受外 界环境的损伤，同时也有助于 精子与卵细胞的识别和结合。
这些信号转导途径可以调节细胞内的各种生理活动，如细胞增殖、细胞凋亡、细胞 分化等，从而影响卵细胞的发育和成熟。
表观遗传修饰
表观遗传修饰是指基因表达的调控不依赖于DNA序列的变化，而是通过 DNA甲基化、组蛋白修饰等机制来影响基因的表达。
在卵细胞形成过程中，表观遗传修饰也发挥了重要的作用。
表观遗传修饰可以影响基因的表达水平，从而影响卵细胞的发育和成熟 。同时，表观遗传修饰还具有可遗传性，可以影响后代的基因表达和发 育。
卵母细胞质量的影响因素
卵母细胞质量的影响因素蔡娇娇;陆文昊;杨欢利;李真法;诸溢扬【摘要】随着辅助生殖技术的不断发展与进步,越来越多的不孕患者通过这一技术成功妊娠.卵母细胞的质量在决定辅助生殖技术结局中扮演着至关重要的角色.随着妇女年龄的增长,卵母细胞质量总体来说是呈下降趋势,颗粒细胞通过小分子物质、活性氧等影响着卵母细胞及胚胎发育潜能,此外超促排卵方式通过对激素的调节也改变着卵母细胞质量,而子宫内膜异位症则是因为微环境的变化影响卵母细胞及后续发育.本文旨在综述过去的理论基础和现阶段的最新研究,对这一理论系统进行初步总结.%With the development of assisted reproductive technology,more and more infertile patients chose this technology and got pregnant.The quality of oocyte plays an important role in determining the outcome of assisted reproductive technology.In this review,the theory system is summarized briefly by studying the basic theory and the latest research.The quality of oocyte gets worse with the age,and granulose cells influence oocyte by small molecular substance and reactive oxygen species.In addition,the different controlled ovarian hyperstimulation mode regulate the quality of oocyte through the hormone.And endometriosis influence oocytes and its subsequent development by changing the microenvironment.【期刊名称】《中国计划生育学杂志》【年(卷),期】2018(026)001【总页数】4页(P70-73)【关键词】卵母细胞质量;年龄;颗粒细胞;子宫内膜异位症;控制性超促排【作者】蔡娇娇;陆文昊;杨欢利;李真法;诸溢扬【作者单位】台州恩泽医疗中心集团浙江省台州医院 317199;台州恩泽医疗中心集团浙江省台州医院 317199;台州恩泽医疗中心集团浙江省台州医院 317199;台州恩泽医疗中心集团浙江省台州医院 317199;台州恩泽医疗中心集团浙江省台州医院 317199【正文语种】中文高质量的卵母细胞是体外受精-胚胎移植(IVF-ET)成功的重要前提。
减数分裂卵细胞的形成
有丝分裂与减数分裂图像辨析
减 数 第 一 次 分 裂
联会
有下列现 3 象之一 是否 含有 1 同源 染色 体
4
有
2
同源染色体排 4 列在赤道板上
同源染色体平 分移向两极
没有以上现象 6 5
4
有丝分裂 减数第二 次分裂
无
(1)A图表示 减数第一次 分裂的 中 时期；B图 中 表示 有丝分裂 分裂的 时期；C图表示 减数第二次 分裂 的 中 时期。 （2）具有同源染色体的是图 A、B 。 A （3）含有四分体的是图 。 （4）图A细胞内染色体、染色单体和DNA分子数依次 为 。 4、 8、 8
后期 末期
间期
减数第一次分裂
减数第二次分裂
2N
2N
N
2N
N
DNA 变 化 曲 线
4N
2N
间期
减数第一次分裂
减数第二次分裂
2N
4N
2N
N
染色单体变化曲线
4N
2N
后期
间期 减数第一次分裂 减数第二次分裂
0
4N
2N
0
DNA、染色体、染色单体 变 化 曲 线
4N
DNA 染 色 体 染色单体
2N
间期
减数第一次分裂
联会、四分体、同源染 色体分离，细胞质不均 等分裂
1个 次级卵母细胞 1个 极体
减数第二次分裂
1个 次级卵母细 胞
着丝点分裂，姐妹染色单体 分开，细胞质不均等分裂
1个卵细胞 1个极体
着丝点分裂，姐妹染色单体分开， 细胞质均等分裂
1个极体
2个极体
精原细胞
精子
卵原细胞
卵细胞
不同点 分裂场所
颗粒细胞与卵母细胞关系研究进展
颗粒细胞与卵母细胞关系研究进展赵杰;陈秀娟【摘要】颗粒细胞与卵母细胞共处于同一个微环境中，颗粒细胞通过复杂的缝隙连接与卵母细胞进行细胞之间的“对话”，并调控卵母细胞的生长与成熟。
卵母细胞成熟后发生排卵，卵丘细胞通过自身及分泌作用影响着精卵结合及雄原核的形成。
在哺乳动物的研究中发现，卵丘细胞与胚胎共培养能够克服发育阻滞，并对胚胎的发育起很好的支持作用。
随着人类辅助生殖技术的发展，学者们越来越重视在基因及转录水平上对卵丘细胞的检测，从而对卵子及胚胎质量进行预测。
综述颗粒细胞在卵子生长与成熟、受精及胚胎发育等方面的作用。
%The granular cells share the same microenvironment with oocyte,and the "cross talk" by the gap junction between ovarian granular cells and oocyte regulates the growth and maturation of oocyte. The cumulus cells (CCs) also affected the fusion of gametes and the formation of the male pronucleus after ovulation. It was reported that the early embryos can overcome developmental block when they were co-cultured with CCs in vitro. With the development of assisted reproductive technology (ART),the prediction of transcriptional and protein expression of genome in CCs to the oocyte and embryo quality attached much more importance. This review discussed the effectof granular cells on maturation and fertilization of oocyte and development of embryo.【期刊名称】《国际生殖健康/计划生育杂志》【年(卷),期】2015(000)005【总页数】4页(P406-409)【关键词】卵丘细胞;卵巢;卵子;卵母细胞;胚胎发育【作者】赵杰;陈秀娟【作者单位】010050 呼和浩特，内蒙古医科大学附属医院妇产科生殖中心;010050 呼和浩特，内蒙古医科大学附属医院妇产科生殖中心【正文语种】中文在哺乳动物中，卵泡由原始卵泡发育成为初级卵泡、次级卵泡、三级卵泡和成熟卵泡的生理过程，称为卵泡发育（folliculardevelopment）。
孤雌激活
5.卵母细胞的孤雌激活孤雌激活(parthenogenetic activation)是指处于第二次减数分裂中期的成熟卵母细胞不经过精子受精作用，而在某些理化因素的刺激下继续生长发育的过程，包括恢复并完成第二次减数分裂，发生卵裂形成早期胚胎。
由雌性配子经孤雌激活产生后代的生殖过程称为孤雌生殖形成的胚胎称为孤雌胚胎。
5.1.卵母细胞激活机制在受精时，一系列的细胞内Ca2+ 多次持续波动引起MPF的失活和卵母细胞的激活(Cuthbertson and Cobbold 1995; Collas et al. 1993; Swann and Ozil 1994)。
在小鼠(Miyazaki et al. 1986, 1993; Whitaker and Swann 1993; Kline 1994; Igarashi er al. 1997) 、仓鼠(Igusa and Miyazaki 1983; Miyazaki et al. 1986, 1991)和兔(Collas et al. 1995)上都证实了卵母细胞在受精时伴随有Ca2+的波动，说明Ca2+波动是启动卵母细胞周期和继续发育的前提。
卵母细胞激活是以Ca2＋为第二信使，成熟促进因子(MPF)、细胞分裂素活化蛋白激酶(MAPK)、细胞静止因子(CSF)等细胞因子综合作用的结果。
进行孤雌激活的卵母细胞是处于MII期的卵母细胞，其含有高活性的CSF，能维持MPF处于高活性状态，使卵母细胞处于减数分裂的中期(Rall J M 1992)。
孤雌激活是通过各种物理、化学方法刺激MII期卵母细胞完成第二次减数分裂，阻止第二极体排出，形成常染色体二倍体胚胎(李裕强2001)。
卵母细胞内Ca2+节律性脉冲的升高是卵母细胞完成孤雌发育不可缺少的过程(Hochi S 2000)。
MII期的卵母细胞受精或人工激活后卵母细胞胞质Ca2+升高可使MPF和CSF失活或消失，从而启动成熟分裂器，促使M期卵母细胞继续第二次成熟分裂(Kline D 1988)，并形成孤雌胚胎(Swann M 1999)。
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MII oocyte with granular cytoplasm (400× magnification).ZP is also abnormal with marked differences in thickness
MII oocyte with granular cytoplasm (400× magnification).ZP is thicker in the lower-left part of the oocyte in this view.
Denudation sequences of a mature oocyte. (a) Cumulus – corona oocyte complex before the denudation process (100× magnification). CCs are abundant. (b) Oocyte surrounded by corona cells during hyaluronidase treatment (200× magnification). Many CCs are still present, but the mature oocyte is already visible with PB1 at the 7 o’clock position. (c) Denuded oocyte after mechanical stripping, a visible polar body is present in the PVS (200× magnification).
取卵前准备
◆ 打开各恒温台、恒温箱和体视显微镜，预热； ◆ 酒精纱布消毒台面； ◆ 取Pasture玻璃吸管2根，酒精灯开口烧钝，1根连接1mlBD注射器的硅胶 管内，另1根备用；
◆ 将10ml的卵泡冲洗液置于传递窗的恒温试管架中；
◆ 取1个Falcon3003置于温台上预热； ◆ 取1个Falcon3002，倒入2.5ml缓冲液，放入恒温箱备用；
卵过程的异常情况应在电脑管理系统的实验室备注里备注。
Denudation sequences of a mature oocyte. (a) Cumulus – corona oocyte complex before the denudation process with non-radiating CCs. (100× magnification). (b) Oocyte surrounded by corona cells during hyaluronidase treatment (200× magnification). (c) Denuded oocyte after mechanical stripping, a visible polar body is present in the PVS (200× magnification).
卵母细胞采集
黄检英
卵母细胞
■ 卵母细胞(oocyte):在卵子发生过程中进行减数分裂 的卵原细胞。分为初级卵母细胞、次级卵母细胞和成 熟的卵母细胞，它们分别是卵原细胞分化和DNA复制 分裂后产生、第一次减数分裂和第二次减数分裂的产 物。 ■从卵巢中排出的“卵”其实是次级卵母细胞。第一 极体和次级卵母细胞一同排出。次级卵母细胞进入输 卵管后，在输卵管中进行第二次减数分裂。这次分裂 要在受精之后，在精子核进入次级卵母细胞之后进行。 分裂的结果，和第一次一样，只产生一个有效的大细 胞，即卵细胞，以及一个不能受精的极体。
Ovoid MII oocyte. Note the ZP is also ovoid in appearance permitting the PVS to remain relatively normal (200×magnification).
Elongated MII oocyte within a grossly distended and irregular ZP (200× magnification).
取卵步骤（2）
◆ 当所有的卵泡抽吸完毕后，将获得的卵丘卵母细胞复合物经W1和 W2皿洗涤，如卵丘卵母细胞复合物有血沾染或颗粒细胞碎片，应 用Pasture玻璃吸管反复吸进推出以去除血块沾染，标记患者的名 字和获得的卵丘卵母细胞复合体的数目。 ◆ 与标签纸及胚胎记录表上的名字核对后放入培养箱，之后认真检查 3个洗涤盘有无剩余卵子，确定无多余卵子后再丢弃该盘，并在胚 胎记录表和电脑上录入取卵开始和结束时间、抽吸卵巢侧、每侧卵 泡数、获卵数以及培养箱号。 ◆ 取卵结束后，将获卵数与排卵监测表上的监测记录上的预计获卵数 做比较，有异常则查找原因并与实验室负责人及临床医生沟通，取
Normal homogenous cytoplasm in an MII oocyte (400× magnification).
Elongated MII oocyte inside an elongated ZP. Note the PVS appears relatively normal (400× magnification).
Two oocytes enclosed within a single ZP (400×magnification).
Ovoid MII oocyte. Note the ZP is also ovoid in appearance and the PVS is enlarged at both poles (200× m根据取卵人数准备记录纸及标签纸。
取卵步骤（1）
◆ 注意无菌操作技术，立即替换所有有污染可能的器皿； ◆ 将护士置于传递窗的恒温试管架中的Falcon2001试管中的卵泡抽吸液 倒入Falcon3003中，在体视显微镜下寻找卵母细胞复合物； ◆ 找到的卵母细胞复合物放于Falcon3002盘中； ◆ 如发现卵泡抽吸液异常或者2管未获卵，应及时与临床沟通。未获卵及 时通知洗精人员取消精液洗涤；
Denudation sequences of a mature oocyte. (a) Cumulus – corona oocyte complex before the denudation process with compact, non-ra-diating CCs. (100× magnification). (b) Oocyte surrounded by corona cells during hyaluronidase treatment (200× magnification). (c) Denuded oocyte after mechanical stripping, a visible polar body is present in the PVS (200× magnification).