总胆红素检测标准操作规程
总胆红素(tbil)钒酸盐氧化法
项目总胆红素(TBIL)方法钒酸盐氧化法目录1. 检测原理2. 标本采集与处理2.1 受检者的准备2.2 静脉采血2.3 抗凝剂2.4 标本处理3. 试剂3.1 试剂3.2 校准血清3.3 试剂与校准血清的稳定性4. 仪器5. 操作6. 计算7. 操作性能7.1 精密度7.2 准确度7.3 灵敏度7.4 可报告范围7.5 特异性7.6 干扰8. 参考值9. 临床意义附录A: 参数1. 检测原理钒酸盐测定钒酸盐作用前后吸光度差异，可求得样品中的直接胆红素的浓度。
胆红素————胆绿素pH 3.02. 标本采集与处理2.1 受检者的准备：病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。
体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。
注意有无应用影响测试项目的药物。
此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。
应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。
2.2 静脉采血：除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。
体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。
在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。
2.3 抗凝剂：血浆多主张用EDTANa2（1mg/mL）抗凝。
2.4 标本处理：血标本室温放置30min～45min后离心分离血清或血浆，在两小时内检测完毕；如两小时内不能检测完毕，将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8℃保存。
3．试剂3.1 试剂：本科使用湖南永和阳光科技有限责任公司TBIL试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：组成浓度R1：柠檬酸缓冲液100mM反应促进剂表面活性剂R2：磷酸缓冲液10mM偏钒酸钠3.2 校准血清：使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的40项校准血清。
校准频次：空白定标：每日需做试剂空白定标。
全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要全点定标。
血清总胆红素和结合胆红素测定
改良J-G法测定血清总胆红素和结合胆红素
【注意事项】
1．胆红素对光敏感，标准液及标本均应尽量避光保存。 2．轻度溶血对本法无影响，但严重溶血时可使测定结果 偏低。其原因是血红蛋白与重氮试剂反应形成的产物 可破坏偶氮胆红素，还可被亚硝酸氧化为高铁血红蛋 白而干扰吸光度测定。血脂及脂溶色素对测定有干扰， 应尽量取空腹血。 3．叠氮钠能破坏重氮试剂，终止偶氮反应。凡用叠氮钠 作防腐剂的质控血清，可引起偶氮反应不完全，甚至 不呈色。 4．本法测定血清总胆红素，在10～37℃条件下不受温度 变化的影响。呈色在2h内非常稳定。
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改良J-G法测定血清总胆红素和结合胆红素H
【评价】 1．灵敏度和线性范围 本法摩尔吸光系数为74 380，标本 中胆红素17.1mol/L时吸光度约0.08(血清用量已达0.2m1)， 正常血清总胆红素多数小于17.1mol/L，手工法测定显得 灵敏度很不够。在病理血清结合胆红素增高在 17.1μmol/L以下时，灵敏度同样不够。线性上限虽可做 到1.7吸光度，但手工法在胆红素超过171μmol/L时，吸 光度已达0.8，应减量操作。分析仪检测灵敏度高得多， 最低吸光度可测至0.02，线性上限可达342μmol/L；但本 法需3次加试剂，一般无法在全自动生化分析仪中使用。 2．精密度 正常浓度时精密度较差，特别是批间CV，据报 道为14%～20%；而胆红素342μmol/L时，精密度佳，批内 CV为0.95%，批间CV5%～10%。 12
改良J-G法测定血清总胆红素和结合胆红素H
【评价】
3．重氮反应法测定胆红素，也可用甲醇(M-E法)或二甲亚砜 等作加速剂，可做成单一试剂，反应pH和显色pH都在酸性， 560nm波长比色，易于自动化。但灵敏度比改良J-G法略低， M-E法摩尔吸光系数为60 500，Hb干扰较明显，Hb＞1g/L 时，需用样品空白校正。
血清总胆红素(TBIL)—生化检测项目
血清总胆红素（TBIL）
一、检测原理
在PH2.9左右时，钒酸盐可将胆红素氧化成胆绿素，在去污剂和钒酸盐的共同作用下，游离胆红素和结合胆红素均发生氧化，发生氧化后，胆红素在黄光波段的特异性吸光度会出现明显下降，在451或545nm波长处检测胆红素时，胆红素的吸光度降低程度与样品中的总胆红素浓度成正比，而求出总胆红素的浓度。
二、参考区间
血清：5—22umol/L
三、临床意义
1、血清TBIL增高主要见于：病毒性肝炎、中毒性肝炎、肝内或肝外胆道阻塞、溶血性疾病、新生儿生理性溶血等
2、测定血清TBIL和直接胆红素（DBIL）鉴别黄疸类型有较大意义：
①溶血性黄疸：TBIL增高，DBIL正常或稍升高。
②肝细胞性黄疸：TBIL和DBIL均升高。
③阻塞性黄疸：TBIL和DBIL均升高，但以DBIL升高为主。
血清总胆红素和结合胆红素测定
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病理因素
肝病
肝炎、肝硬化等肝病可能导致血 清总胆红素水平升高。
胆道疾病
胆结石、胆囊炎等胆道疾病可能导 致血清总胆红素水平升高。
其他疾病
如溶血性贫血、急性胰腺炎等也可 能导致血清总胆红素水平升高。
药物因素
抗生素
长期使用某些抗生素如红霉素、 氯霉素等可能导致血清总胆红素
水平升高。
抗结核药
抗结核药物如利福平、异烟肼等 可能导致血清总胆红素水平升高。
抗肿瘤药
抗肿瘤药物如顺铂、阿霉素等可 能导致血清总胆红素水平升高。
05
血清总胆红素和结合胆红 素测定的注意事项
标本采集注意事项
空腹采集
为避免食物中色素对血清总胆红素和 结合胆红素测定的干扰，采集标本前 应确保受检者空腹至少8小时。
避免溶血
避免使用止血带
使用止血带会阻断静脉回流，导致血 液浓缩，影响测定结果。
正常值范围
成人
0-6.8μmol/L（0-0.3mg/dl）
新生儿
2.5-10μmol/L（0.1-0.4mg/dl）
03
血清总胆红素和结合胆红 素测定的临床意义
鉴别黄疸的类型
鉴别黄疸类型
血清总胆红素和结合胆红素测定可以 鉴别黄疸的类型，如溶血性黄疸、肝 细胞性黄疸和梗阻性黄疸。
判断黄疸程度
通过测定血清总胆红素和结合胆红素 水平，可以判断黄疸的严重程度，为 后续治疗提供依据。
采血时应避免采血部位发生溶血，因 为红细胞中的胆红素会干扰测定结果。
测定过程中的注意事项
仪器校准
为确保测定结果的准确性，应定期对测定仪器进 行校准。
避免试剂污染
在操作过程中，应避免试剂被污染，以免影响测 定结果。
胆红素测定
临床意义
（1）黄疸及鉴别 DBi/TB 比值<20% 溶血性黄疸 比值40%~60% 肝细胞性黄疸 比值> 60% 阻塞性黄疸
（2）肝细胞损害程度和预后的判断。 （3）新生儿黄疸病情掌握。 （4）再障等疾病，TB减少。
思考 题
TB与DBi测定中试剂有何区别，为什麽？
胆红素的分类
（2）结合胆红素(Bc) ：与葡萄糖醛酸基结合， 具亲水性，与重氮试剂直接反应，又称直接 胆红素。占总胆红素的1/5。
黄疸分类
根据总胆红素的浓度 隐性黄疸:总胆红素17.1~34.2µmol/L。 显性黄疸:总胆红素大于34.2µmol/L。
注：TB 17.1µmol/L(2mg/dL)
DBil测定原理(改良J-G法)
血清中的DBi在强酸环境中，与重氮对氨基苯磺 酸反应,生成有色偶氮胆红素, 通过测定550nm处吸 光度值的变化，即可计算出样本中DBi的浓度。
TB测定原理(改良J-G法)
血清中的结合胆红素在强酸环境中与重氮 对氨基苯磺酸反应,生成有色偶氮胆红素,非 结合胆红素在表面活性剂的作用下,也能进行 这样的反应,通过550nm比色,计算其含量。
解。 （2）约10%~20%来自于组织中非Hb的血红素，如肝中
释放的的血红素等。 （3）极少部分是由于骨髓造血过程中，生成的Hb或血红
素，以及少量未成熟RBC的分解（无效造血）产生的 血红素。
胆红素的分类
（1）未结合胆红素(Bu)：未与葡萄糖醛酸基结 合，具亲脂性，须加入加速剂破坏分子内部的 氢键后才能与重氮试剂反应，又称间接胆红素。 占总胆红素的4/5。
黄疸分类
根据造成黄疸的原因 (1)溶血性黄疸 (2)肝细胞性黄疸 (3)阻塞性黄疸
三种黄疸的比较
总胆固醇(TCHOL)检测标准操作规程5.0
迪安诊断总胆固醇(TCHOL) 检测标准操作规程(版本号Version：第5/0版)2013年 12 月 30 日颁布实施编制(Editor)：审核(Checker)：批准(Approver)：修订履历(Revision History)1.目的指导正确进行血清总胆固醇（TC）检测。
2.实验原理胆固醇氧化酶法胆固醇酯＋H2O 胆固醇酯水解酶胆固醇＋脂肪酸胆固醇＋O2 胆固醇氧化酶Δ4胆甾烯酮＋H2O22H2O2＋4－氨基安替比林 + 酚过氧化物酶醌亚胺色素＋4H2O生成的苯醌亚胺的颜色深浅与胆固醇的浓度成正比。
3.适用系统:罗氏Cobas C8000全自动生化检测系统。
4.试剂4.1检测试剂4.1.1厂家：罗氏诊断公司生产4.1.2稳定性：未开封于2～8O C保存，可稳定至有效期末，Cobas C501上机后稳定4周Cobas C701上机后稳定4周4.1.3成分：试剂1：PIPES缓冲液：225mmol/L，PH 6.8；Mg2+：10mmol/L；胆酸钠：0.6mmol/L；；4-氨基比林：≥0.45mmol/L；酚：≥12.6mmol/L；脂肪醇聚乙二醇醚：3%；胆固醇酯酶（假单胞菌属）：≥25μkat/L（≥1.5U/ml）；胆固醇氧化酶（大肠杆菌）：≥7.5μkat/L（≥0.45U/ml）；过氧化物酶（辣根）：≥12.5μkat/L（≥0.75U/ml）；稳定剂；防腐剂4.1.4配制：无需配制，直接使用4．1.5规格：400T/盒，2100T/盒4.2校准品 C.f.a.s4.2.1厂家：罗氏诊断公司生产4.2.2稳定性：未开封于2～8O C保存，可稳定至有效期末；校准物复融后冷冻起来，盖紧盖子保存在-15～-25O C，可稳定4周。
4.2.3配制：每瓶使用时用3mL去离子水复溶，静置30分钟轻轻混匀后使用，剩余量根据需要分装于离心管中，于-15～-25O C保存。
4.2.4规格：12×3mL4.3质控品伯乐化学物质质控物1,24.3.1厂家：美国Bio-Rad laboratories.INC4.3.2稳定性：未开启的质控品保存在2～8O C时，可稳定至有效期末。
胆红素测定方法
胆红素测定方法胆红素是人体内一种重要的生化物质，它是红细胞分解时产生的一种黄色的代谢产物。
正常情况下，胆红素会通过肝脏代谢后排泄出体外，但是当人体内胆红素代谢发生异常时，就会导致黄疸等症状的出现。
因此，准确测定胆红素的含量对于诊断和治疗相关疾病具有重要意义。
一、胆红素测定方法的原理。
胆红素的测定方法主要包括间接测定法和直接测定法两种。
间接测定法是通过测定血液中总胆红素的含量来间接反映胆红素的含量，而直接测定法则是直接测定血液中胆红素的含量。
二、胆红素测定方法的步骤。
1. 间接测定法的步骤：a. 采集患者静脉血标本；b. 用适当的试剂将血液标本中的胆红素转化为测定所需的产物；c. 通过光度法或比色法测定产物的吸光度；d. 根据吸光度值计算出胆红素的含量。
2. 直接测定法的步骤：a. 采集患者静脉血标本；b. 将血液标本中的蛋白质沉淀，得到清澈的血清；c. 通过高效液相色谱法或其他特定仪器测定血清中胆红素的含量。
三、胆红素测定方法的注意事项。
1. 采集血液标本时要注意无菌操作，避免污染；2. 试剂的选择和使用要严格按照说明书进行，避免试剂变质影响测定结果；3. 测定过程中要注意标本的保存和处理，避免因为外界因素导致结果出现偏差；4. 操作人员要熟练掌握测定方法，避免因为操作不当而导致结果不准确。
四、胆红素测定方法的应用。
胆红素测定方法主要应用于临床诊断和治疗过程中，可以帮助医生判断患者是否存在胆红素代谢异常，及时进行诊断和治疗。
此外，胆红素测定方法也可以用于科研领域，帮助科研人员深入了解胆红素的代谢规律及相关疾病的发病机制。
总结，胆红素测定方法是一项重要的生化检测方法，通过测定血液中胆红素的含量可以帮助医生进行诊断和治疗。
在实际操作中，要严格按照操作规程进行，避免因为操作不当导致结果不准确。
希望本文对于胆红素测定方法有所帮助。
总胆红素(TBIL)测定及日照对胆红素的影响
①阻塞性黄疸。当患有阻塞性胆道疾病 如胆道肿瘤、胆结石、胆道蛔虫症、肝毛细 胆管炎时，由于胆汁进入肠腔的通道被阻断， 胆红素无法正常排泄而逆流入血引起血清总 胆红素增高，结合胆红素增高，尿胆红素阳 性。 ②肝细胞性黄疸。如病毒性肝炎、中毒 性肝炎、肝硬化、钩端螺旋体病患者，因肝 脏不能将全部结合胆红素排至胆汁，故有一 部分进入血液，也可使血清总胆红素增高， 结合 胆红素增高，尿胆红素阳性。
2.肝细胞损害程度和预后的判断：胆红素浓度 明显升高反映有严重的肝细胞损害。但某些疾病如 胆汁淤积型肝炎时，尽管肝细胞受累较轻，血清胆 红素却可升高。 3.新生儿溶血症：血清胆红素有助于了解疾 病严重程度。 4.再生障碍性贫血及数种继发性贫血（主要 见于癌或慢性肾炎引起），血清总胆红素减少。 ㈡胆红素升高的意义 1.可以判断黄疸程度，黄疸程度与血总胆红 素及血清胆红浓度(微摩尔/升)的关系：
七、注意事项
1.如果样品中TBil含量超过342.0微摩 尔/L，则用蒸馏水稀释后测定， 2.肝素抗凝血浆不适用于本法。 3.校准液和标本均应注意避光 4.避免试剂污染。
小结
1.实验结果与日照的关系 2.讨论分析要求 3.下次课预习
谢 谢 ！
二、测定步骤
试 剂 （U） （Ub） （U照） （Ub照） 样 品（ml） 0.20 0.20 — — 日照样品 — — 0.20 0.20 工作液（ml） 3.0 — 3.0 — 试剂R1 (ml) — 3.0 — 3.0 各管混匀， 置37℃恒温5分钟，560nm波长， 以工作液调零，测定各管吸光度值。
隐性黄疸 17～34 轻度黄疸 34～170 中度黄疸 170～340 重度黄疸 >340 2.依此判断黄疸类型 黄疸类型 血清胆红浓度(微摩尔/升) 完全阻塞性黄疸 340～510 不完全阻塞性黄疸 170～265 肝细胞性黄疸 170～200 溶血性黄疸 >85 3.按照胆红素分类，判断黄疸性质
001总胆红素测定001
【操作人员】批准人授权的同志【部门主管】万斌【质量控制员】曾珍【目的】保证测试结果的准确性。
【适用仪器范围】日立7180 日立7600试剂及样品量根据不同仪器技术参数按比例调整。
【该SOP变动程序】本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、质控主管、科主任。
【校准方法】室温：20～25℃。
湿度：<80％。
试剂：所用试剂为仪器适用产品。
校准品：为仪器适用的产品，并在使用效期内，同时无变质或污染。
仪器：(1)校准前仪器各通道均已清洁。
(2)仪器的重复性符合要求，否则需请维修人员检修。
校准方法：仪器自动校正。
【质量控制】每天做质量控制物，采用常规质控图方法进行判定，分析在控后再进行日常工作。
【应用范围】体外检测血清总胆红素。
【收集要求】空腹抽血，避免溶血。
一些药物对此试验有干扰如利福平、酷氨酸、巴比妥等。
【方法学原理】胆红素在钒酸盐的作用下（pH=3.0）转化成胆绿素。
测定钒酸盐作用前后吸光度的差异，可求得样品中胆红素的浓度。
【方法局限性】轻度脂血、溶血对结果影响不大。
重度脂血、溶血使测定结果偏低。
【超线性处理】盐水稀释标本后重做。
线性范围：在线性范围内，r2≥0.996。
准确度：测定值偏差在正常及异常质控值血清靶值的±10%范围内。
精密度：CV<4.5%批间相对极差：<5%（A2-A1）标本计算：总胆红素=————————×标准液浓度（A2-A1）标准【参考范围】 5.1-28.0mmol/L【临床意义】增高见于：中毒性或病毒性肝炎、溶血性黄疸、恶性贫血、阵发性血红蛋白尿症。
红细胞增多症、新生儿黄疸、内出血、输血后溶血、急性黄色肝萎缩、先天性胆红素异常、果糖不耐受等，以及摄入水杨酸类、红霉素、利福平、孕激素、安乃近等药物。
【参考文献】第二版《全国临床检验操作规程》。
06血清总胆红素和直接胆红素测定
一、目的胆红素是血红蛋白的代谢产物，来源有三：（1）人体内胆红素的3/4源于循环血液中衰老红细胞崩解后所释放出的血红蛋白辅基血红素降解而产生；（2）骨髓中的红细胞原位溶血所释放的血红蛋白；（3）含卟啉的血色蛋白如肌红蛋白和其他非血红蛋白性的正铁血红素分解后产生极少量胆红素。
血红蛋白被单核-巨噬细胞系统破坏后分解成胆绿素，再还原成胆红素进入血与血浆白蛋白结合而被运转，称为非结合胆红素或间接胆红素；间接胆红素难溶于水，不能由肾脏排出而进入肝脏，受肝内葡萄糖醛酸基转移酶的作用与葡萄糖醛酸结合，形成葡萄糖醛酸酯，称为结合胆红素或直接胆红素。
结合胆红素由肝随胆汁排至肠道，被还原成粪胆原（尿胆原）再经氧化变成粪胆素（尿胆素），大部分随粪便排出体外；小部分经门脉吸收回肝，复经肝肠循环，其中一小部分进入血循环，经肾排出，称尿胆原。
当肝细胞损伤，胆管阻塞，红细胞破坏增加或寿命缩短时，胆红素代谢发生异常，临床上即出现黄疸。
二、测定方法改良J-G法三、原理血清与醋酸钠-咖啡因-苯甲酸钠试剂混合后，加入偶氮苯磺酸，生成紫色的偶氮胆红素。
其中醋酸缓冲液用以保持偶氮反应的PH，咖啡因、苯甲酸钠加速偶氮苯磺酸的偶联反应。
抗坏血酸破坏剩余偶氮试剂，终止偶氮反应。
最后加入强碱性酒石酸溶液使紫色偶氮胆红素变成蓝色偶氮胆红素，在600nm波长下比色,测定蓝色偶氮胆红素的生成量。
四、标本1、静脉抽取病人空腹血，置于洁净干燥试管或含促凝剂的真空管内。
2、采血后应立即送到检验科生化室。
3、样品收到后立即分离血清，不能及时测定的血清应于2—8℃保存。
4、溶血或脂血的标本不能测定。
五、设备及试剂1、希迈全自动生化仪。
2、上海复星长征公司胆红素试剂。
3、胆红素试剂应于2—8℃冰箱保存。
六、操作步骤1、样本的准备：将编好号的样品离心，取血清加入样品杯放到样品盘的规定位置，再把样品盘放到仪器中相应位置。
2、试剂的检查：每天测定前先检查各种试剂的数量、效期、定标等情况，确认无误后方可进行测定。
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每日做标本之前从冰箱中取出复温至室温，轻轻颠倒混匀数次。每个浓度质控品取5-6滴加入日立杯中上机检测。每日标本量超过150加做一次质控。
9.5质控结果判断
利用Westgard多规则质控方法（12s,13s,22s,R4s,41s,10x)判断是否失控。
10.参考区间
3.42-20.5umol/l
13.性能指标
线性范围：在（3.4-684）umol/L范围内：a)线性相关系数（r）应>0.995;b)（3.4-100）umol/L范围内，线性偏差应≦10umol/L;（100-684）umol/L范围内，线性偏差应该≦10.0%。
准确度：相对偏差≦10.0%。
精密度：批内CV≦4.0%;批间相对极差<5.0%。
8.校准程序
8.1校准品来源
美康生物
8.2校准品名称
多项生化校准品
8.3校准品规格：
1×5ml
8.4用途
校准品与宁波美康生物科技有限公司生产的总胆红素检测试剂盒及全自动生化分析仪配套使用，用于上述检测系统进行项目的校准。
8.5主要组成成分
校准品组成成分为非人源性。
校准品中总胆红素的活性成分浓度具有批特异性，准确浓度见随附的数值表或说明书反面。
分析灵敏度：样本浓度为90umol/L时，吸光度差值不小于0.0400。
14.参考文献
14.1《全国临床检验操作规程》
14.2《试剂使用说明书》
14.3《校准品使用说明书》
14.4《临床生物化学检验质量管理与操作规程》
辅助波长
546nm
反应方法
终点法
反应温度
37℃
反应方向
向下
试剂1
180ul
样本
6ul
混匀，37℃孵育3-5min，读取吸光度A0
试剂2
45ul
混匀，37℃孵育3-5min，读取吸光度A1,ΔA=A0
全自动生化分析仪自带程序参数输入法，上述基本参数需结合该输入法，进行上机参数输入后试剂才能配套仪器自动测定。具体仪器的详细测定参数联系试剂公司。
5.3注意事项
使用新鲜血清和血浆，明显溶血对血清TBIL测定有负干扰，脂浊时有正干扰，建议早晨空腹抽血。
6.检测仪器
日立7180全自动生化分析仪，使用具体要求和校准程序详见《仪器操作规程》。
7.试剂
7.1试剂品牌
美康生物
7.2包装规格
R1:2×60mL+R2:1×30mL
7.3主要组成成分
试剂
成分
终浓度
总胆红素
1.目的
规范总胆红素（T-BIL)测定的操作程序，确保总胆红素测定结果准确。
2.检验方法
化学氧化法(终点法）
3.检验原理
总胆红素在表面活性剂TritonX-100存在下，被亚硝酸钠氧化，生成胆绿素，测定450nm吸光度的减小与总胆红素的浓度成正比。
胆红素=胆绿素
4.临床意义
血清总胆红素增高见于病毒性肝炎、中毒性肝炎或肝癌、肝内或肝外胆道阻塞、溶血性疾病、新生儿生理性黄疸等。
11.检验结果的解释
仪器加样针、比色杯、管路等未清洗干净时可能对试验结果产生影响。
反应曲线异常时需进行确认，干扰物质超出限度时需进行确认。
高度溶血可导致结果偏高。
12.检验方法的局限性
12.1干扰物质：抗坏血酸≦30mg/dl、甘油三酯≦2000mg/dl、血红蛋白≦25g/l时对测定无影响
12.2总胆红素测定只是临床医师对患者进行诊断的指标之一，临床医师还要根据患者的体征、病史及其他的诊断项目、诊断手段进行综合判断。
8.8校准周期
按照生化分析仪操作手册中的校准程序进行校准。至少每两周校准1次。
当发生以下情况时建议重新校准：变更试剂批号;质控值发生显著偏移;生化分析仪进行了较大维护。
9.质量控制程序
9.1质控品来源
BACKMAN质控品，上海市临检中心提供
9.2质控品浓度
低/中/高三个浓度
9.3储存条件
-20℃冷冻保存
测定血清总胆红素与直接胆红素用来鉴别黄疸类型有较大意义。溶血性黄疸总胆红素增加，直接胆红素正常或稍有增高。肝细胞性黄疸总胆红素和直接胆红素均增高。阻塞性黄疸总胆红素与直接胆红素均增高，但以后者增高为主。
5.标本采集及干扰因素
5.1标本要求
空腹不抗凝静脉血2~3ml。
5.2标本保存
室温保存，及时送检。室温下胆红素不稳定，故应在收集样品后2h内完成检测，密封和避光条件下，保存在2-8℃冷藏12h内必须分析，-20℃冰冻3-4个月内必须分析。
三羟甲基氨基甲烷0.1mol/L，二硫苏糖醇0.25g/L,防腐剂1g/L
8.6储存条件及有效期
校准品在2-8℃避光保存可稳定1.5年。校准品复溶后，于-20℃避光保存可稳定1个月;于2-8℃避光密封保存时，二氧化碳可稳定8小时，胆红素可稳定一天，其他项目可稳定一周。
8.7复溶方法
使用时，小心打开瓶盖，开启橡胶塞，每瓶准确加入5ml蒸馏水或去离子水，盖好橡胶塞，室温放置30分钟，同时避免阳光直射。轻轻旋转，使冻干品充分溶解，避免泡沫形成。随后即可与常规标本同时取样进行测定。每次吸取后及时盖好瓶盖，并于-20℃避光密封保存。
试剂1
三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液
50×10-3mol/l
曲拉通X-100
10ml/l
试剂2
磷酸盐缓冲液
10×10-3mol/l
亚硝酸钠
80×10-3mol/l
不同批次的试剂不推荐混合使用
7.4储存条件有效期
试剂在2-8℃保存可稳定1年，试剂开瓶后于2-8℃可稳定1个月。
7.5参数设置
主波长
450nm