胆红素测定
血清总胆红素和结合胆红素测定
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病理因素
肝病
肝炎、肝硬化等肝病可能导致血 清总胆红素水平升高。
胆道疾病
胆结石、胆囊炎等胆道疾病可能导 致血清总胆红素水平升高。
其他疾病
如溶血性贫血、急性胰腺炎等也可 能导致血清总胆红素水平升高。
药物因素
抗生素
长期使用某些抗生素如红霉素、 氯霉素等可能导致血清总胆红素
水平升高。
抗结核药
抗结核药物如利福平、异烟肼等 可能导致血清总胆红素水平升高。
抗肿瘤药
抗肿瘤药物如顺铂、阿霉素等可 能导致血清总胆红素水平升高。
05
血清总胆红素和结合胆红 素测定的注意事项
标本采集注意事项
空腹采集
为避免食物中色素对血清总胆红素和 结合胆红素测定的干扰，采集标本前 应确保受检者空腹至少8小时。
避免溶血
避免使用止血带
使用止血带会阻断静脉回流，导致血 液浓缩，影响测定结果。
正常值范围
成人
0-6.8μmol/L（0-0.3mg/dl）
新生儿
2.5-10μmol/L（0.1-0.4mg/dl）
03
血清总胆红素和结合胆红 素测定的临床意义
鉴别黄疸的类型
鉴别黄疸类型
血清总胆红素和结合胆红素测定可以 鉴别黄疸的类型，如溶血性黄疸、肝 细胞性黄疸和梗阻性黄疸。
判断黄疸程度
通过测定血清总胆红素和结合胆红素 水平，可以判断黄疸的严重程度，为 后续治疗提供依据。
采血时应避免采血部位发生溶血，因 为红细胞中的胆红素会干扰测定结果。
测定过程中的注意事项
仪器校准
为确保测定结果的准确性，应定期对测定仪器进 行校准。
避免试剂污染
在操作过程中，应避免试剂被污染，以免影响测 定结果。
胆红素测定的实验报告
一、实验目的1. 了解胆红素测定的原理和方法。
2. 掌握胆红素测定仪器的操作技能。
3. 通过实验，掌握胆红素测定的方法，并对胆红素含量进行定量分析。
二、实验原理胆红素是一种黄色的生物色素，是血红蛋白在体内代谢的产物。
胆红素在血液中含量过高会导致黄疸。
本实验采用紫外-可见分光光度法测定胆红素含量。
该方法基于胆红素在特定波长下有最大吸收的特性，通过测定其吸光度，计算胆红素含量。
三、实验仪器与试剂1. 仪器：紫外-可见分光光度计、恒温水浴锅、移液器、容量瓶、试管等。
2. 试剂：胆红素标准溶液、盐酸、硫酸铵、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、无水乙醇等。
四、实验步骤1. 准备工作（1）将胆红素标准溶液稀释至一定浓度，制成标准系列。
（2）将待测样品用无水乙醇提取胆红素。
（3）用移液器准确移取一定量的胆红素标准溶液和待测样品，分别加入试管中。
（4）向试管中加入适量的盐酸和硫酸铵，混匀。
（5）将试管置于恒温水浴锅中，加热至60℃，保温10分钟。
（6）取出试管，冷却至室温。
2. 吸光度测定（1）打开紫外-可见分光光度计，设定波长为510nm。
（2）将胆红素标准溶液和待测样品分别放入比色皿中。
（3）依次测定胆红素标准溶液和待测样品的吸光度。
3. 数据处理（1）以胆红素浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
（2）根据待测样品的吸光度，从标准曲线上查得相应的胆红素浓度。
（3）计算待测样品中胆红素含量。
五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制根据实验数据，绘制胆红素标准曲线，其线性方程为：y = 0.0036x + 0.0152，相关系数R² = 0.9987。
2. 待测样品胆红素含量测定根据待测样品的吸光度，从标准曲线上查得相应的胆红素浓度为0.8 mg/L。
3. 结果分析本实验通过紫外-可见分光光度法测定了待测样品中的胆红素含量，结果显示待测样品中胆红素含量为0.8 mg/L。
该结果与实际值较为接近，表明实验方法准确可靠。
血清总胆红素测定原理
血清总胆红素测定原理
血清总胆红素测定是一种常用的临床实验室检查方法，主要用于评估肝脏功能和诊断与胆红素代谢相关的疾病。
其原理基于血清中的胆红素可以与二硫苏糖酸钠反应生成带有特征性颜色的离子化合物。
具体实验步骤如下：首先，将样本血清与二硫苏糖酸钠溶液混合，通过化学反应使胆红素与二硫苏糖酸钠结合。
然后，使用比色法通过测量生成离子化合物的颜色强度来确定血清中的胆红素浓度。
常用的检测方法包括分光光度法、比色滴定法和高效液相色谱法等。
在测定中，胆红素与二硫苏糖酸钠发生反应，形成红色或紫色的离子化合物。
生成的离子化合物的颜色强度与样本中的胆红素浓度呈正相关关系。
通过测量离子化合物的光吸收值，并通过与已知浓度的标准溶液比较，可以计算出样本中总胆红素的浓度。
总之，血清总胆红素测定原理是基于胆红素与二硫苏糖酸钠的化学反应，通过测定生成的带有特征性颜色的离子化合物的光吸收值来确定样本中的总胆红素浓度。
这种方法简便、快速，并且具有较高的准确性和灵敏度，在临床诊断中得到了广泛应用。
结合胆红素测定实验报告
1. 了解胆红素测定的原理和方法。
2. 掌握使用分光光度计测定胆红素浓度的操作技能。
3. 学会分析实验结果，了解胆红素在人体中的作用。
二、实验原理胆红素是人体内血红蛋白分解产物，具有橙黄色。
胆红素在血液中与白蛋白结合，形成胆红素白蛋白复合物。
通过分光光度计测定胆红素在特定波长下的吸光度，可以计算出胆红素浓度。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 血清样本- 胆红素标准溶液- 生理盐水- 酚酞指示剂- 10%三氯醋酸溶液- 10%氢氧化钠溶液2. 实验仪器：- 分光光度计- 移液器- 离心机- 试管- 烧杯- 移液管- 容量瓶1. 标准曲线绘制：（1）取10支试管，分别加入0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6、1.8 mL胆红素标准溶液。
（2）加入生理盐水至2.0 mL。
（3）加入酚酞指示剂2滴。
（4）加入10%三氯醋酸溶液2.0 mL。
（5）混匀，静置30分钟。
（6）用分光光度计在波长510 nm处测定吸光度。
（7）以吸光度为纵坐标，胆红素浓度为横坐标，绘制标准曲线。
2. 血清胆红素测定：（1）取血清样本2.0 mL，加入生理盐水至2.0 mL。
（2）按照步骤1中的方法，加入酚酞指示剂和10%三氯醋酸溶液。
（3）混匀，静置30分钟。
（4）用分光光度计在波长510 nm处测定吸光度。
（5）根据标准曲线，计算血清胆红素浓度。
五、实验结果与分析1. 标准曲线绘制：标准曲线线性范围为0～1.8 mg/L，相关系数R²=0.998。
2. 血清胆红素测定：本实验测得血清胆红素浓度为 5.2 mg/L，略高于正常范围（3.4～17.1 mg/L）。
六、实验结论本实验通过分光光度法测定了血清胆红素浓度，结果显示受试者血清胆红素浓度略高于正常范围，可能存在轻微的黄疸症状。
建议受试者进一步检查肝功能，以排除其他疾病。
七、实验讨论1. 实验过程中，注意保持操作环境的清洁，避免污染。
直接胆红素测定(d-bil)
1. 溶血性黄疸（肝前性黄疸பைடு நூலகம் 由于各 种原因使红细胞大量破坏，以致未结合胆红 素明显增加，超过肝脏的转化能力，但结合 胆红素正常。新生儿血脑屏障发育不全，游 离胆红素易进入脑组织，与脑部基底核的脂 类结合，将神经核染成黄色，称为核黄疸 （胆红素脑病）。
2. 阻塞性黄疸（肝后性黄疸） 由于 胆道阻塞，胆汁不能排出而淤积在胆管内， 使上端胆管内压力不断升高，最后使小胆 管和毛细胆管扩张，通透性增加，甚至破 裂，使胆汁返流入血，血中结合胆红素增 加。
3. 肝细胞性黄疸（肝源性黄疸） 由于 肝细胞病变，肝功能减退，使肝脏对胆红 素的摄取、转化和排泄作用发生障碍。一 方面肝脏不能将未结合胆红素转化成结合 胆红素，使血中未结合胆红素增加；另一 方面，病变区压迫毛细胆管，使结合胆红 素返流入血，血中结合胆红素也增加。
-——
1.5
混匀，置37 ℃水浴3min，比色（λ=578nm）读
取各管A值。
直接吸入*：吸入的量即为半自动生化分析仪设 定的吸入量，在分光光度计测定时则为此反应 的总体积量。
计算结果与临床意义
计 算：
血清直胆（μmol/l）=AU/AS×20
结果报告：略
实验参考值： 2~8μmol/l
临床意义： 血清胆红素测定对诊断黄疸和黄疸的鉴 别诊断有非常重要的意义。 溶血性黄疸 结合胆红素占总胆红素的20%以下。
肝细胞性黄疸 结合胆红素占总胆红素的35%以上。
阻塞性黄疸 结合胆红素占总胆红素的50%以上。
注意事项
样品的活性超出可测线性范围上限时，需 进行生理盐水稀释，测定结果乘以稀释倍 数。 叠氮钠能破坏偶氮试剂，终止偶氮反应， 凡用叠氮钠作为防腐剂的质控血清，可引 起重氮反应不完全，甚至不呈色。
胆红素的测定方法操作流程
胆红素的测定方法操作流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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检测胆红素的方法
检测胆红素的方法
检测胆红素的方法有多种，常见的方法包括：
1. 血清总胆红素测定：通过检测血液中的总胆红素含量来评估胆红素水平。
此方法常用于评估黄疸的严重程度。
2. 血清直接胆红素测定：血液中的直接胆红素主要来自于肝脏的代谢作用，直接胆红素测定可以评估肝脏功能。
3. 尿液胆红素测定：尿液中的胆红素通常与黄疸有关，通过检测尿液中胆红素的浓度可以评估肝脏或胆道系统的功能。
4. 新生儿血清胆红素测定：用于评估新生儿黄疸的程度，通常通过脚底或掌心的皮肤颜色变化来评估。
5. 胆红素结合能力测定：通过检测血液中胆红素的结合能力来评估肝脏功能和胆红素代谢能力。
以上方法常用于临床胆红素的检测，具体使用哪种方法需要根据患者情况和医生的判断来决定。
胆红素怎么检查
胆红素怎么检查你知道胆红素怎么检查吗？胆红素是判断肝病的指标之一，胆红素对肝脏具有一定的保护作用，一旦胆红素过高，就意味着疾病，那么你知道胆红素怎么检查吗？我们一起来看看。
文章目录胆红素怎么检查1、胆红素怎么检查1.1、湿化学法:反应均在液体试剂中进行,重氮法、氧化酶法、化学氧化(如钒酸盐氧化法)法等。
1.2、重氮法:在强酸(pH1-2)条件下,胆红素和重氮离子偶联,形成有颜色的偶氮化合物,重氮胆红素显色的强度与胆红素浓度呈比例,光电比色测定。
优点:可直接比色,手续简单、易于自动化。
缺点:重氮试剂不稳定,须由亚硝酸钠和氨基苯磺酸临时生成;易受溶血、脂血等因素干扰,胆红素浓度过高时影响准确度。
1.3、氧化酶法:胆红素氧化酶催化样品中的胆红素氧化,生成胆绿素引起450nm处吸光值下降。
1.4、化学氧化法:胆红素的四吡咯结构具有还原性,因此各种低分子的武技氧化剂和在一定条件下具有氧化性的各种镀金属元素都可以氧化胆红素。
1.5、钒酸法:在pH=3的条件下,血清胆红素可经钒酸氧化成胆绿素,从而使胆红素特有的黄色减少,可根据加入钒酸前后450nm处吸光度的下降与血清胆红素呈正比。
2、胆红素正常参考值直接胆红素的正常参考值范围为:0～0.4mg/dl。
总胆红素(直接胆红素与间接胆红素之和)正常值参考范围:约胆红素0.2～1.2mg/dl(一些实验室数值参考范围高达1.9mg/dl)。
3、胆红素的间接胆红素:说明可能是溶血性黄疸造成的,直接胆红素升高也可能会有输血时血型不合,贫血等原因分类3.1、总胆红素:间接胆红素偏高,直接胆红素偏高,说明肝细胞性黄疸,肝细胞受到损害,肝功能减退,肝脏不能完全将间接胆红素转化为直接胆红素,同时肝内胆管受压引起了排泄障碍,直接胆红也不能完全排到胆道,同时有可能伴有急性黄疸型肝炎,慢性活动性肝炎,肝硬化,肝癌等疾病。
3.2、直接胆红素:说明是由阻塞性黄疸造成的。
3.3、间接胆红素:说明可能是溶血性黄疸造成的,直接胆红素升高也可能会有输血时血型不合,贫血等原因。
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释放的的血红素等。 （3）极少部分是由于骨髓造血过程中，生成的Hb或血红
素，以及少量未成熟RBC的分解（无效造血）产生的 血红素。
胆红素的分类
（1）未结合胆红素(Bu)：未与葡萄糖醛酸基结 合，具亲脂性，须加入加速剂破坏分子内部的 氢键后才能与重氮试剂反应，又称间接胆红素。 占总胆红素的4/5。
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样本(ml)
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0.05
混匀， 37 ℃孵育5分钟，550nm,空白管调0，读取 标准管和样本管的吸光度。
TB 操 作
空白管 标准管 样本管
工作试剂 (ml） 2.5
2.5
2.5
3 7 ℃孵育5分钟
蒸馏水(ml）
0.05 --
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标准液(ml）
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0.05
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样本(ml)
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0.05
混匀， 37 ℃孵育10分钟，550nm,空白管调0，读取标 准管和样本管的吸光度。
黄疸分类
根据造成黄疸的原因 (1)溶血性黄疸 (2)肝细胞性黄疸 (3)阻塞性黄疸
三种黄疸的比较
病因
溶血性黄疸
肝细胞性黄疸
阻塞性黄疸
RBC大量破坏 肝脏实质性病变 胆道阻塞
Bu
↑↑ ↑
↑↑
↑
Bc
↑
↑↑
↑↑↑
测定方法
(1) 重氮盐法 (2) 胆红素氧化酶（BOD)法 (3) 高效液相色谱法（HPLC) (4) 导数分光光度法 (5) 直接分光光度法 (6) 钒酸盐法
试剂组成 试剂A
试剂B
试剂
直接胆红素 盐酸
对-氨基苯磺酸
总胆红素 盐酸
对-氨基苯磺酸 表面活性剂
亚硝酸钠 亚硝酸钠
强调
两项目分开测定，利于时间控制。
DBi 操 作
空白管 标准管 样本管
工作试剂 (ml） 2.5
2.5
2.5
37 ℃孵育5分钟
蒸馏水(ml）
0.05 --
--
标准液(ml）
--
0.05
DBil测定原理(改良J-G法)
血清中的DBi在强酸环境中，与重氮对氨基苯磺 酸反应,生成有色偶氮胆红素, 通过测定550nm处吸 光度值的变化，即可计算出样本中DBi的浓度。
TB测定原理(改良J-G法)
血清中的结合胆红素在强酸环境中与重氮 对氨基苯磺酸反应,生成有色偶氮胆红素,非 结合胆红素在表面活性剂的作用下,也能进行 这样的反应,通过550nm比色,计算其含量。
(1.2—12mg/dL)
பைடு நூலகம்
注意事项
标准品、标本、试剂避光保存、溶解、使用。 本试剂线性范围可达300 µmol/L，超过用NS稀释。 溶血可引起测定结果偏低。 脂血及脂溶性色素可致结果假性偏高。 胆红素重氮反应对温度较敏感，测定时应予以恒温。 反应形成的色素可稳定1小时。
方法评价
在重氮试剂法中，改良J-G法有好的灵 敏度，抗干扰能力较好。
临床意义
（1）黄疸及鉴别 DBi/TB 比值<20% 溶血性黄疸 比值40%~60% 肝细胞性黄疸 比值> 60% 阻塞性黄疸
（2）肝细胞损害程度和预后的判断。 （3）新生儿黄疸病情掌握。 （4）再障等疾病，TB减少。
思考 题
TB与DBi测定中试剂有何区别，为什麽？
实验八
胆红素测定 ( 改 良 J – G 法)
实验目的
掌握总胆红素和直接胆红素 (改良J-G法)的测定原理，参考值范 围，注意事项。
胆红素测定作用
反 映 肝 脏 的 分 泌 与 排 泄 功 能。
胆红素的来源
Hb分解释放的血红素为胆红素的直接来源。 （1）约70%~80%是由衰老的RBC破坏、释放出的Hb分
计算方法
DBi浓度（umol/L)=A样/A标× DBi标准液浓度 TB浓度（umol/L) =A样/A标× TB标准液浓度 国际单位换算：
umol/L×0.0585=mg/dL
参考范围
成人直接胆红素：0—6umol/L (0--0.3mg/dL)
成人总胆红素：2--20umol/L (0.1—1.2mg/dL) 新生儿总胆红素：20--200umol/L
胆红素的分类
（2）结合胆红素(Bc) ：与葡萄糖醛酸基结合， 具亲水性，与重氮试剂直接反应，又称直接 胆红素。占总胆红素的1/5。
黄疸分类
根据总胆红素的浓度 隐性黄疸:总胆红素17.1~34.2µmol/L。 显性黄疸:总胆红素大于34.2µmol/L。
注：TB 17.1µmol/L(2mg/dL)