小鼠卵母细胞的孤雌激活
【国家自然科学基金】_卵母细胞_基金支持热词逐年推荐_【万方软件创新助手】_20140731
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科研热词 卵母细胞 猪 孤雌激活 小鼠 体外成熟 体外受精 胚胎培养 水牛 胚胎 减数分裂 胚胎发育 山羊 发育能力 卵母细胞成熟 ghrelin c-kit 骨形态发生蛋白15基因 骨形态发生蛋白 重编程 配子发生 转化生长因子-β 表达 草原兔尾鼠卵透明带3 胰岛素 胞质 胚胎细胞 绵羊 生殖系统 特异性表达 核移植 有丝分裂 早期胚胎 成熟促进因子 异种间体细胞核移植胚 巯基乙酸 孤雌生殖 卵泡发育 卵巢 卵子发生 南方鲇 人精子 黄鳝 黄胫小车蝗 非洲爪蟾卵母细胞 非侵袭性技术 雄性生殖细胞载体法 雄原核 长翅素木蝗 长qt综合征 钾通道 钙离子111 112 113 114 115 116 117 118 119 120 121 122 123 124 125 126 127 128 129 130 131 132 133 134 135 136 137 138 139 140 141 142 143 144 145 146 147 148 149 150 151 152 153 154 155 156 157 158 159 160
应用钙离子载体A23187及6-甲基嘌呤对人卵母细胞进行孤雌激活
应用钙离子载体A23187及6-甲基嘌呤对人卵母细胞进行孤雌激活舒益民;庄广伦;周灿权;张敏芳;徐艳文;方丛【期刊名称】《生殖医学杂志》【年(卷),期】2002(011)003【摘要】目的:观察钙离子载体A23187(Ca-A23187)及6-甲基嘌呤(6-DMAP)对人类卵母细胞的孤雌激活作用.方法:收集体外受精周期中不适于进行卵胞浆内单精子注射的生发泡期或第一次减数分裂中期的不成熟卵母细胞244个在体外培养成熟,其中155个体外成熟卵母细胞按不同激活方案分组:5 μmol/L Ca-A23187组、10 μmol/L Ca-A23187组、对照组、6-DMAP组及Ca-A23187+6-DMAP组.激活处理后12～18 h观察第二极体排出及原核形成情况.结果:5及10 μmol/L Ca-A23187组卵母细胞激活率分别为40.7%(11/27)和37.1%(13/35),较对照组的9.5%(2/21)明显增加(P<0.01);6-DMAP组的激活率,11.5%(3/26)较Ca-A23187+6-DMAP组,58.7%(27/46)明显下降.Ca-A23187激活后卵母细胞主要表现为一原核二极体,而Ca-A23187+6-DMAP激活的卵母细胞以一原核一极体占多数(19/27,70.4%).结论:卵母细胞孤雌激活的发生及原核形成类型与激活方案有关,单独Ca-A23187或与蛋白激酶抑制剂6-DMAP联合应用都能使人类卵母细胞发生孤雌激活,二者联合应用更易于诱导卵母细胞发生孤雌激活.【总页数】4页(P145-148)【作者】舒益民;庄广伦;周灿权;张敏芳;徐艳文;方丛【作者单位】中山大学附属第一医院妇产科生殖医学研究中心,广州,510089;中山大学附属第一医院妇产科生殖医学研究中心,广州,510089;中山大学附属第一医院妇产科生殖医学研究中心,广州,510089;中山大学附属第一医院妇产科生殖医学研究中心,广州,510089;中山大学附属第一医院妇产科生殖医学研究中心,广州,510089;中山大学附属第一医院妇产科生殖医学研究中心,广州,510089【正文语种】中文【中图分类】R321.1【相关文献】1.6-二甲基氨基嘌呤对体外成熟山羊卵母细胞孤雌激活及发育的影响 [J], 张果平;王金文;王德芹;李焕玲2.Ca2+载体A23187对受精失败人类成熟卵母细胞的补救激活作用 [J], 舒益民;庄广伦;周灿权;徐艳文;张敏芳3.乙二醇及二甲基亚砜对小鼠卵母细胞冷冻后纺锤体及孤雌激活后发育能力的影响[J], 裴燕;索伦;王亮;朱士恩4.猪孤雌激活胚胎和卵母细胞体外成熟过程中的甲基化检测 [J], 宋尚桥;曾素先;马围围;王睿敏;严瑾;孙翠翠;李鑫;黎宗强5.钙离子载体A23187联合嘌呤霉素对人体外成熟卵母细胞孤雌激活作用的研究[J], 鹿群;马金龙;高选;赵跃然;陈子江因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
【国家自然科学基金】_孤雌胚胎_基金支持热词逐年推荐_【万方软件创新助手】_20140802
2011年 科研热词 推荐指数 猪卵母细胞 3 猪 3 孤雌激活 3 激活参数 2 小鼠 2 孤雌发育 2 培养液 2 卵母细胞 2 音猬因子 1 运动神经元 1 胚胎培养 1 胎牛血清 1 维甲酸 1 组蛋白去乙酰化酶(hdac1) 1 组蛋白乙酰化 1 电激活 1 早期体内外发育能力 1 手工核移植 1 实时定量pcr 1 孤雌胚胎干细胞 1 孤雌胚胎 1 孤雌激活胚 1 印记基因 1 单倍体率 1 分化 1 体外成熟 1 二倍体 1 mrna表达 1 dna甲基化 1
科研热词 孤雌激活 卵母细胞 猪 间充质干细胞 诱导分化 胰岛素 胰岛样细胞团 胚胎发育 胚胎 细胞松弛素b 组织相容性 糖尿病 精子提取物 稳定性 激活方法,小鼠 活性氧 水牛 氧化损伤 核移植 显微注射 延边黄牛 干细胞 小鼠 孤雌胚胎干细胞 孤雌胚 孤雌 基因组印迹 培养密度 发育相关基因 原核 印迹 化学激活 化学孤雌激活 分化 促性腺激素 体外培养 人类孤雌胚胎干细胞 人孤雌胚胎干细胞 x染色体失活
推荐指数 9 8 6 5 3 2 2 2 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
2009年 序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15
科研热词 猪 孤雌激活 卵母细胞 胰岛素 胚胎培养 渗透压 早期胚胎 换液 孤雌 半胱氨酸 体外成熟 体外受精 ve leptin fbs
推荐指数 4 3 3 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1 1
2010年 序号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37 38 39
老化对卵母细胞孤雌发育和减数分裂期间微管动态变化的影响
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卵母细胞化学激活在精子及精细胞体外受精中的应用
卵 母 细胞 自然 激 活 过 程 包 括 短 暂 性 细 胞 内 钙
。 金项 目：０ ９ 基 ２ ０ 年度 南京军 区医学科技 创新经 费资助 项 目
（ ９ Ｏ Ｏ Ｏ ＭＡ ４ ）
线粒体） Ｐ 受体（ ３ ）诱导细胞 内钙离子释放 ， 的Ｉ３ Ｉ Ｒ， Ｐ 低 ｃ 平 引起 Ｉ３ 通 道 开放 ，通过 正 反馈 机 制进 ａ水 ＰＲ
离 子释放 而导 致钙振 荡 。钙 振荡 将激 活钙调 蛋 白依 赖 的蛋 白激 酶 Ⅱ和蛋 白磷 酸 酶 ， 而使 ＭＰ 降解 ， 进 Ｆ 诱
导 卵母 细胞 激活 。 由上 可知 ， 卵母 细胞 自然激 活 过程 为 一 系列 生
Ｓ＋ ｒ ２ ￣被消耗但可引起内源性ｃ ２ ａ 的释放有关 ，从而 ＋ 产生 与正 常 受精 过程 中相似 的Ｃ ａ震荡 ，引起 卵母
细胞激 活 。其 适用 范 围包 括孤雌 激活 、 核移 植 、 未成 熟 卵体 外 培 养后 显 微 授 精 、 Ｓ后 受 精 失 败或 受 精 Ｉ Ｉ Ｃ 率 低 的补 救及 圆形精 子 显 微 注射 （ｏｎ ｐｒ ｔ ｒｕｄｓｅｍａｄ ｉ ｉ ｅｔ ｎＲ Ｓ） ｎ ｃｏ ， Ｏ Ｉ技术 。不 同实 验对 其最 佳 作 用浓 度 ｊ ｉ 及 时 间 的研 究结 果 也 不 尽 相 同 。作 用 浓 度 主要 为 ５ｍｍ ｌ 或 １ ｍｏＬ 作 用 时 间跨 度 较 大 ， 几 十 ｏ Ｌ ０ｍ ｌ ， ／ ／ 从
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２ ３６・
国际生殖健康 ， 计划生育杂志 ２ １ ５月第 ３ 卷第 ３期 Ｊ ｎ Ｒ ｐｏ ｅｈ ／ａ ｌ ， ａ ０ ２ Ｖ１３， ｏ ３ ０ ２年 １ Ｉｔ ｅｒ ｄＨ ａｈＦｍ Ｐａ Ｍ ｙ２１， ｏ． １Ｎ ． ｎ
似 物能够 激 活 Ｃ 赖性 蛋 白激 酶 Ｃ Ｐ Ｃ） Ｐ Ｃ ａ依 （Ｋ ， Ｋ 可 以促进 卵母 细 胞 内细胞 骨架 变化 、 质颗 粒 释 放 和 皮
江苏省苏州市2023-2024学年高三上学期期初调研测试生物
2023~2024学年第一学期高三期初调研测试生物学2023. 09一、单项选择题:共14 题,每题2分,共28分。
每题只有一个选项最符合题意。
1.下列关于细胞生命历程的叙述,正确的是A.多细胞生物的生长是细胞增殖的结果B.高度分化的细胞中不存在DNA复制C.衰老细胞的染色质固缩,细胞核缩小D.细胞凋亡时，基因发生了选择性表达2.高尔基体是有“极性”的,其顺面接受由内质网合成的物质并转入中间膜囊进一步修饰加工，反面参与溶酶体酶等蛋白质的分类和包装。
如图是发信号生在反面的3条分选途径。
下列叙述错误的是A.在高尔基体中间膜囊中会形成具有一定功能的蛋白质B.胰岛B细胞分泌胰岛素的过程属于是调节型分泌.C.若反面上的M6P受体数量减少会影响衰老细胞器的水解D.膜的流动性使顺面和反面的蛋白质种类和数量相同3.线粒体内膜是有氧呼吸第三阶段的场所,其上存在两条呼吸途径。
主呼吸链途径发生时，电子传递链释放的能量使H+通过蛋白复合体从基质移至内外膜间隙，然后H+驱动ATP合酶合成ATP;交替呼吸途径发生时，不发生H+的跨膜运输。
下列叙述的错误是A.合成ATP时H+顺浓度梯度由内外膜间隙进人基质B.主呼吸链途径中的蛋白复合体起载体蛋白的作用C.交替呼吸途径比主呼吸链途径产生更多的ATPD.乳酸菌细胞内不存在主呼吸链和交替呼吸途径4.下列关于构成细胞的元素和化合物的叙述,正确的是A.Mg是叶绿素的重要组分,缺Mg叶脉周围通常呈现黄色B.缺乏P时细胞中磷脂、核酸和A TP等物质的合成会受影响C.果糖是光合作用植物特有的，而半乳糖是动物特有的D.真核生物遗传信息的载体主要是由蛋白质和DNA组成的5.某家族患有甲、乙两种单基因遗传病,其中一种病的致病基因位于X染色体上。
研究人员通过调查得到了该家族的遗传系谱图(图1) ,然后对I1、II2、II3及III2的两对基因进行电泳分离,得到了不同的条带(图2)。
下列叙述正确的是A.甲病是伴X染色体显性遗传病，乙病是常染色体隐性遗传病B.条带①代表甲病的致病基因,条带③代表乙病的致病基因C.对II的两对基因进行电泳分离，所得的条带应该是①和③D.只考虑甲、乙两种遗传病，I4和II1基因型相同的概率是1/26.为研究DNA复制机制,科学家用荧光染料给Rep(解旋酶中驱动复制叉移动的结构)加上标记，以获知Rep相对于DNA分子的运动轨迹(如图)。
第五章-受精
第五章受精受精是单倍体的精子和卵子相互结合和融合而形成双倍体合子的过程，是有性生殖生物个体发育的起点。
它一方面保证了双亲的遗传作用，另一方面恢复了染色体双倍体数目。
同时受精可以把个体发生过程中产生的变异通过生殖细胞遗传下去，保证了物种的多样性，在生物进化上具有重要意义。
第一节受精研究历史的简单回顾1875年和1876年，Hertwig和Fol分别在各自独立的研究中首先在海胆中发现了受精现象。
Hertwig发现了海胆精子入卵后雌雄两原核融合的现象，而Fol发现了精子接近和穿入卵子以及受精膜形成的过程，至此结束了胚胎学上的“精源学说”和“卵源学说”。
1883年，van Beneden发表了马副蛔虫受精的细胞生物学研究论文，肯定了在遗传上父母贡献均等的理论，并使精卵作用的研究更为深入。
他在马副蛔虫受精卵的第一次有丝分裂纺锤体上看到四条染色体，其中两条来自父方，两条来自母方，提出父母的染色体通过精卵的融合传给子代。
此后，H.T. Boveri在马副蛔虫的研究工作进一步巩固了上述理论，把染色体看作是遗传信息的载体。
二十世纪以来，有关受精的研究转向探讨受精后生理学变化和两性配子结合的机制。
在早期的研究中发现受精后细胞膜通透性变化、耗氧量增加等现象。
1912年以后，F.R. Lillie根据在沙蚕和海胆获得的一系列研究结果，提出了精卵相互作用的受精素假说。
根据这一假说，卵子分泌称为受精素（fertilin）的物质，使精子运动能力加强，并向卵子聚集。
四十年代前后，A. Tyler 就受精素的生物学、化学和免疫学特征展开了一系列工作，并进一步强调卵子在成熟过程中分泌的物质对受精有重要意义。
与此同时，M. Hartmann在海胆的研究工作中证实，不仅卵子能分泌受精素（雌配素），精子也能排出抗受精素（雄配素），二者相互作用的程度决定着受精的成功与否。
不久以后，在两栖类上发现卵外胶膜在精卵相互作用中发挥重要功能，为两栖类受精所必需。
山东省招远第一中学2022-2023学年高二下学期期中考试生物试卷
招远市部分中学2022-2023学年高二下学期期中考试生物注意事项：1.答题前，考生务必将自己的姓名、考生号等填写在答题卡和试卷指定位置。
2.回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。
如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。
回答非选择题时，将答案写在答题卡上。
写在本试卷上无效。
3.考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。
一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。
每小题只有一个选项符合题目要求。
1.下列有关发酵工程在食品工业上的应用的叙述，错误的是A.醋酸菌将糖分解成醋酸需要氧气和糖源都充足B."精酿"啤酒发酵完成后，不进行过滤和消毒处理，保质期比较短C.啤酒发酵的过程分为主发酵和后发酵两个阶段，其中，酵母菌的繁殖在主发酵阶段完成，大部分糖的分解和代谢物的生成在后发酵阶段完成D.日常生活中食用酱油的制作以大豆为主要原料，利用产生蛋白酶的霉菌的作用，将原料中的蛋白质水解成小分子的肽和氨基酸2.下列关于微生物培养的叙述，正确的是A.高压蒸汽灭菌后，务必在常压、60摄氏度以下的温度时再打开灭菌锅B.纯化培养时，在培养皿皿盖做标记后倒置在恒温培养箱中静置培养C.涂布接种时，需要将涂布器浸在酒精后再酒精灯外焰引燃后，立刻涂布D.用平板划线法对微生物进行分离计数，也可直接用显微镜对某些微生物计数3.研究人员从青藏高原班戈桥地区的土壤中分离到一株能利用原油为碳源生长的细菌（BGQ-6），该菌对原油的总降解率为74.14%，且对直链烷烃、支链烷烃、环烷烃和芳香烃等60种烃类有较高的降解率。
下列说法错误的是A.由单一的BGO-6繁殖所获得的BGQ-6群体称为BGQ-6纯培养物，该过程即纯培养B.利用添加石油的普通培养基能从被石油污染的土壤中筛选BGQ-6C.可采用稀释涂布平板法对BGQ-6进行计数，同一稀释度应至少对三个平板重复计数D.一般选择菌落数为30-300的平板进行BGQ-6菌落计数4.限量补充培养法可用于营养缺陷型菌株的检出（如下图）。
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卵母细胞的孤雌激活
将体外成熟卵母细胞（COCs要提前脱卵丘）分别用M2液及含10mM SrCl2的无钙无糖CZB液洗3遍，然后将卵母细胞置于含10mM SrCl2的无钙无糖CZB液中培养2.5小时，之后转入不含SrCl2的无糖CZB液中继续培养3.5小时，即在激活处理6小时后观察原核统计激活率。
为了维持孤雌激活胚胎的二倍性，激活液和6小时检查原核前短期培养的培养液中均添加5μg/ml的CB。
激活的判定：2原核或2-细胞各具一原核的卵母细胞判断为激活；卵质膜破裂者判断为死亡；胞质分裂一次或多次但不出现原核者判断为碎裂（fragmentation）。
本实验将碎裂卵均归为未激活卵。
对照组为未经激活处理，但与激活组培养相同时间的卵母细胞。
每次实验，只有当对照组卵母细胞无一激活时，实验组数据才有效。
实验原理：利用氯化锶抑制第二极体的排出
实验用品：培养12小时并老化12小时，即24小时后的卵【要提前脱卵丘】，透明质酸酶，M2操作液，10摩尔每毫升的氯化锶，含钙CZB,
孤雌激活实验步骤
1,，第一天上午杀鼠取卵，培养卵。
假设只有一个培养孔的卵，一个孔里最好有20至30个卵，留置第二天孤雌激活。
2,，第二天上午，算好时间，用紫外线照射两个培养孔，15分钟后加液，一个孔里放激活液，【激活液的组成是CB加氯化锶加无钙CZB】，
配置激活液的方法问师兄。
另一个孔里放培养液【含钙的CZB】。
3，注意激活液不能预热太长时间，CB热时间长会影响效果，【君佐师兄的加法是无钙CZB450微升加上氯化锶50微升平衡20分钟，然后加上氯化锶做滴平衡20分钟就可以放卵了】，在配置激活液时最后应该用枪打一打，好充分混匀。
至于放培养液的孔可以以后考虑，激活需要6个小时。
把握好时间，脱卵丘后就马上激活。
同时预热上需要的药品，包括M2，含钙的CZB，再照上两个中平皿。
4，开始做时先用透明质酸酶处理培养的卵1至3分钟，脱卵丘。
再用M2洗3至4遍，再用激活液洗3至4遍，再移入含有激活液的培养孔中。
移入培养箱中激活6个小时。
5，假设上午9点做完，下午3点就可以观察。
激活的判断方法是2原核或2细胞各具一原核的卵母细胞判断为激活。
卵质膜破裂者判断为死亡。
胞质分裂一次或多次，但不出现原核者判断为碎裂，本实验将碎裂卵均归为未激活卵。
6，将激活成功的卵母细胞用含钙的CZB培养液洗5至6遍，再转移如含钙CZB的培养孔中培养，理论上48小时后就可以看到4细胞期，此时再转入含糖含钙CZB胚胎培养液中培养，即可以到达囊胚期。