小鼠卵母细胞减数分裂染色体的制备 Preparation of Meiotic Karytype of Mouse Oocyte
小鼠卵母细胞MII期核(纺锤体)移植后经体外受精正常产仔
小鼠卵母细胞MII期核(纺锤体)移植后经体外受精正常产仔王敏康;陈大元;刘冀珑;李光鹏;廉莉;宋祥芬;孙青原【期刊名称】《生殖医学杂志》【年(卷),期】2001(010)003【摘要】目的：为研究和了解细胞核与细胞质的相互作用。
方法：采用3%蔗糖预处理显示及去核法进行昆明白小鼠与C57BL/6小鼠(黑色)之间卵母细胞MII期核(纺锤体)的移植、电融合、体外受精-胚胎移植(IVF-ET)。
结果：经3%蔗糖预处理卵母细胞的去核率达100%。
完成MII期核移植的重构卵母细胞约17.6%完成电融合。
IVF的受精率为82%。
受精卵2-细胞胚胎的发育率为80%～90%，8个1～4细胞胚胎移入两只自然怀孕1 d的寄母小鼠(Km×Km)输卵管，其中1只孕鼠生下3只小鼠，其中2只黑色小鼠为MII期核(纺锤体)移植生产的小鼠。
移植产仔率为25%。
结论：实验结果证明了3%蔗糖预处理显示MII期核(纺锤体)及去核效果可达100%；电融合的重构卵母细胞可完成正常的IVF。
为进行不同年龄和卵龄间的MII期核移植提供了一个模型。
%Objective: To study the interaction between nucleus and cytoplasm.rn Methods: Operation medium containing 3% sucrose was used to pretreatment murine oocytes and meiotic apparatus transfer(MAT) was carried out from C57BL/6 mouse (black) to enucleated Kunming murine oocytes and followed by electrofusion, in vitro fertilization (IVF) and embryo transfer.rn Results: The results showed that the enucleation rate by treating oocytes with 3% sucrose was 100%, 17.6% of reconstructed karyoplasm-recipient cytoplasm pairs fused sucessfully. When the fused oocytes were exposed tospermatozoa from C57BL/6 mice, 9 out of 11 (82%) were fertilized. Among them, eight embryos at one-to four-cell stages were transferred into the oviducts of two synchronous pregnant Kunming strain fosters and one delivered two normal C57BL/6 offsprings.rn Conclusion: This study indicated that MII meiotic apparatus or spindle sustains normal structure and function after micromanipulation and electrofusion. MAT provides a model for further research on the application of this technique to assistant human reproduction.【总页数】7页(P141-147)【作者】王敏康;陈大元;刘冀珑;李光鹏;廉莉;宋祥芬;孙青原【作者单位】云南师范大学生命科学院,;中国科学院动物研究所,;中国科学院动物研究所,;中国科学院动物研究所,;中国科学院动物研究所,;中国科学院动物研究所,;中国科学院动物研究所,【正文语种】中文【中图分类】R339.2【相关文献】1.不同因素对小鼠MII期卵母细胞纺锤体的影响 [J], 崔龙波;周雪莹;崔志峰;黄秀英;孙方臻2.用Polscope观察人类卵母细胞中MII期减数分裂的纺锤体能预测ICSI后胚胎发育能力 [J], 金海霞;孙莹璞3.人MII期卵母细胞纺锤体与正常受精卵早期卵裂的关系 [J], 朱亮;陈士岭;邢福祺;杜建新4.蔗糖预处理去核:一种可靠的无损害小鼠卵母细胞MII期核去除法 [J], 王敏康;刘冀珑;李光鹏;廉莉;陈大元5.小鼠spindlin1蛋白在稳定MII期卵母细胞纺锤体中的作用 [J], 王黎熔;张克梅;毕晔;马慜悦;霍然;周作民;孙青原;沙家豪因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
小鼠减数分裂标本的制备及观察ppt实用资料
【实பைடு நூலகம்内容】
一、标本制备过程 1. 处死动物，剥离睾丸。2. 取部分睾丸组织，匀浆取上皮细胞悬液。3. 处 滴死片动，物 Gi， em悬剥sa离染液睾色丸加，。镜入检。培养液小瓶，置培养箱内培养24小时。4. 培养终止前4小时， 动2椭、物圆使生 形用殖V油=细4镜加 7胞/3.找π有入a甲出丝b2减分秋(醇a数裂、分水过：b分裂程仙冰别各为时素醋长相、，。酸短着5（半重.径观收3)察：第取一1细次）减胞固数分低定裂渗的。形处8态.变理滴化。。片6，. 1G0i0e0mrspam染离色心，8分镜钟检，。取沉淀。 雌培雄养小 终二鼠止生前、殖4小标细时胞，本减加数的入分秋观裂水模仙察式素对。比 11一00、0000分rrpp12别mm、、离离求心心出精使88使分分用原用钟钟低，，油细倍取取镜沉沉镜胞(1淀淀0找有X。。)，出丝高倍减分镜数裂(40X分中)时裂期目镜各相测微时，尺相明每格，确代表着小的重鼠长度观染： 察色第体一数次目4减0数条分。裂的形态变化。 培圆养形终前V止=前4期/34π小Ir：时3(，r为细加半入线径秋)期水仙；素。偶线期；双线期；终变期。 计1甲、算醇精细 ：中后原胞冰细、醋期期胞细酸有II胞（：：丝核3：分体四同1裂积）分源中的固期公定体染相式。，：排色明列体确小在移鼠染赤向色道 两体数面 极目4上 ；0条；。 末期I： 圆 形 V=4/3πr 3(r为半径)
椭圆形 V动=4物/3π生ab2殖(a、细b分胞别有为长丝、分短半裂径过) 程
取部分睾丸组织，匀浆取上皮细胞悬液。 圆 形 V=4/3πr 3(r为半径) 甲醇：冰醋酸（3：1）固定。 理解小鼠睾丸组织减数分裂标本的制备技术
雌雄小鼠生殖细胞减数分裂模式对比
细线期 双线期
偶线期
粗线期
Spindly小鼠卵母细胞减数分裂博士论文
mSpindly在小鼠卵母细胞减数分裂进程中的定位与功能动物学， 2010，博士【摘要】与在有丝分裂中一样,减数分裂中的纺锤体检验点也是通过抑制后期的起始来保证染色体的精确分离,即使还剩一条染色体没有排列在赤道板上也会产生足够的后期延迟信号来保持纺锤体检验点的活性。
纺锤体检验点信号通路包括Mad1, 2, 3（Mad:mitotic arrest deficient）和Bub1, 2, 3（Bub:budding unperturbed by benzimidazole）蛋白等主要成分。
它们除了构成检验点的主要结构成份之外,还有负责放大检验点信号并调控其他检验点蛋白的活性,如Mps1和Aurora B等。
在多细胞生物中,有另外3种蛋白:ZW10,Rough Deal（Rod）和Zwilch（三者合称为RZZ复合体）,也在有丝分裂纺锤体检验点中具有至关重要的作用。
最近,人们认为多细胞生物中的这3种蛋白会形成一种复合体,在募集动粒元件（dynein/dynactin复合体, Mad1和Mad2）到动粒的过程中发挥作用。
Spindly是一种新近才被发现的纺锤体检验点蛋白,它首先是在果蝇的S2细胞中被发现的,它在线虫和人类中的同源蛋白分别被命名为SPDL-1和Hs Spindly... 更多还原【Abstract】 As in mitosis, the spindle assembly checkpoint is ensuring correct segregation of chromosomes or sister chromatids by preventing the onset of anaphase. Even a single misaligned chromosome is sufficient to generate an anaphasewaiting signal to maintain SAC activation and delay the anaphase onset. SAC signal pathway includes Mad1, 2, 3 (Mad for mitotic arrest deficient) and Bub1, 2, 3 (Bub for budding unperturbed by benzimidazole) as major components. Besides these proteins, Mps1 and Aurora B amp... 更多还原【关键词】Spindly；小鼠卵母细胞；减数分裂；【Key words】Spindly；mouse oocyte；meiosis；中文摘要5-8Abstract 8-10缩略语表11-12第一篇文献综述12-31第一章细胞分裂中的纺锤体检验点12-201.1 动粒和动粒蛋白12-151.2 纺锤体检验点信号通路15-20第二章哺乳动物减数分裂过程中的纺锤体检验点及检验点蛋白20-312.1 减数分裂中纺锤体的构成20-222.2 减数分裂中的纺锤体检验点蛋白22-272.3 减数分裂中的纺锤体检验点系统27-292.4 mSpindly 及其同源蛋白29-31第二篇实验研究31-71第三章mSpindly 在小鼠卵母细胞中的表达和亚细胞定位31-593.1 实验目的313.2 实验材料31-383.3 实验方法38-513.4 实验结果及分析51-573.5 讨论57-59第四章mSpindly 在小鼠卵母细胞中的功能研究59-714.1 实验目的594.2 实验材料59-604.3 实验方法60-624.4 实验结果及分析62-674.5 讨论67-71参考文献。
《CentromereproteinF在小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育过程中的功能研究》范文
《Centromere protein F在小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育过程中的功能研究》篇一摘要：本文以Centromere protein F（CPF）为研究对象，深入探讨了其在小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育过程中的功能。
通过分析CPF在减数分裂染色体行为、纺锤体形成、以及早期胚胎发育的基因表达和细胞周期调控等方面的作用，为揭示其生物学功能提供了重要依据。
一、引言Centromere protein F（CPF）作为染色体上的一种重要蛋白，在细胞分裂过程中起着关键作用。
在小鼠的生殖系统中，CPF不仅影响卵母细胞的减数分裂，还对早期胚胎的发育有重要影响。
本研究旨在通过系统研究CPF的功能，揭示其在卵母细胞减数分裂和早期胚胎发育中的重要作用。
二、材料与方法本研究采用小鼠模型，通过基因敲除、免疫荧光、显微操作、实时PCR等技术手段，对CPF在小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育过程中的功能进行研究。
三、CPF在小鼠卵母细胞减数分裂中的作用1. 染色体行为与纺锤体形成CPF在卵母细胞减数分裂过程中参与了染色体的行为和纺锤体的形成。
通过免疫荧光实验发现，CPF在纺锤体微管组织中具有重要作用，对于维持染色体在减数分裂过程中的正确排列和分离至关重要。
2. 减数分裂进程的调控CPF对减数分裂进程的调控主要体现在对细胞周期的精确控制上。
通过基因敲除实验发现，CPF的缺失会导致卵母细胞减数分裂进程紊乱，表现为染色体排列异常和第一极体排放异常等现象。
四、CPF对小鼠早期胚胎发育的影响1. 基因表达与细胞增殖CPF在早期胚胎发育中参与了基因的表达与细胞的增殖过程。
实时PCR结果显示，CPF的缺失会导致胚胎发育过程中关键基因的表达异常，进而影响细胞的正常增殖。
2. 胚胎发育的表型变化CPF的缺失会导致早期胚胎发育出现明显的表型变化，如胚胎发育迟缓、囊胚形成障碍等。
这些变化进一步证实了CPF在早期胚胎发育中的重要作用。
《2024年转录因子TFⅡB对小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育影响的研究》范文
《转录因子TFⅡB对小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育影响的研究》篇一一、引言近年来，生殖生物学领域对转录因子TFⅡB在卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育过程中的作用进行了深入研究。
TFⅡB作为一种关键的转录调控因子，其在基因表达和细胞增殖中发挥着重要作用。
本研究旨在探讨TFⅡB对小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育的影响，以期为生殖医学和遗传学领域提供新的理论依据。
二、材料与方法1. 材料本实验选用小鼠作为研究对象，收集其卵母细胞及早期胚胎。
实验所需试剂、耗材等均经过严格筛选和质量控制。
2. 方法（1）卵母细胞的收集与处理：从小鼠卵巢中收集卵母细胞，并进行相应的处理。
（2）转录因子TFⅡB的干预：通过基因敲除、过表达等方法，对卵母细胞中的TFⅡB进行干预。
（3）观察卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育情况：利用显微镜等技术手段，观察并记录卵母细胞的减数分裂过程及早期胚胎的发育情况。
（4）数据分析：采用统计学方法对实验数据进行处理和分析。
三、实验结果1. TFⅡB对卵母细胞减数分裂的影响实验结果显示，TFⅡB的干预对小鼠卵母细胞的减数分裂过程产生了显著影响。
在基因敲除TFⅡB的小鼠卵母细胞中，减数分裂进程受到阻碍，而过表达TFⅡB的卵母细胞则表现出加速的减数分裂过程。
这表明TFⅡB在卵母细胞减数分裂过程中发挥了重要的调控作用。
2. TFⅡB对早期胚胎发育的影响实验结果表明，TFⅡB的干预对早期胚胎的发育也产生了显著影响。
在基因敲除TFⅡB的小鼠中，早期胚胎的发育受到抑制，而过表达TFⅡB的小鼠则表现出更好的胚胎发育潜力。
这表明TFⅡB在早期胚胎发育过程中发挥了重要的促进作用。
3. 数据分析与统计通过统计学分析，我们发现TFⅡB的干预与卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育之间存在显著的相关性。
具体数据详见附表。
四、讨论本研究表明，转录因子TFⅡB对小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育具有重要影响。
在卵母细胞减数分裂过程中，TFⅡB 发挥了关键的调控作用，其基因敲除会导致减数分裂进程受阻，而过表达则会加速减数分裂过程。
小鼠睾丸生殖细胞标本制作及减数分裂期染色体观察
Isolation and staining of mouse meiotic metaphasechromosomes小鼠睾丸生殖细胞标本制作及减数分裂期染色体观察xx 2011级生科四班201100140120 同组者：xx【实验目的】1、learn to isolate mouse testes cells and stain with Giemsa.学会分离小鼠睾丸细胞并用Giemsa染液染色2、Observe the number and morphology of mouse chromosomes观察小鼠染色体的数目及形态特征【实验材料】【Reagents】秋水仙素colchicine solution吉姆萨染液Giemsa stains solution生理盐水physiological saline氯化钾溶液KCl solution固定液fixation solution【Tools and equipments】Dissecting tray，beaker，centrifuge tube，microscope，glass slide，pipette，scissors，forceps，copper mesh.解剖盘，烧杯，离心管，显微镜，载玻片，吸管，剪刀，镊子，铜网【实验原理】meiosis is a process of reductional division in which the number ofchromosomes per cell is cut in half. In animals, meiosis always results in the formation of gametes, while in other organisms it can give rise to spores. 减数分裂是细胞分裂染色体数减半的过程，在动物中,减数分裂的结果总是在形成配子,而在其他生物可以产生孢子。
《CentromereproteinF在小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育过程中的功能研究》范文
《Centromere protein F在小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育过程中的功能研究》篇一摘要：本文旨在探讨Centromere protein F（CPF）在小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育过程中的功能。
通过建立小鼠模型、分析胚胎细胞数据、对比相关生物学行为等方式，全面阐述CPF在这一特殊生命活动过程中的重要作用及其可能涉及的机制。
本研究对于了解哺乳动物生殖过程中的基因调控与遗传学有着重要意义。
一、引言卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育是生物繁殖的关键阶段，在这一过程中，众多遗传因子及蛋白参与了各种复杂的过程，以确保精卵的结合和遗传物质的正确传递。
Centromere protein F （CPF）作为一种与有丝分裂及减数分裂的染色质稳定性紧密相关的蛋白，在生殖过程中起着关键作用。
本研究即围绕CPF在小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育过程中的功能展开研究。
二、材料与方法1. 实验材料采用小鼠作为实验动物，构建特定基因型的模型，如CPF基因敲除或过表达小鼠模型。
2. 实验方法（1）通过显微操作技术对小鼠卵母细胞进行观察和操作；（2）采用分子生物学技术如PCR、免疫荧光等技术对胚胎细胞的基因和蛋白进行检测和分析；（3）运用统计分析和计算机软件进行数据对比和处理。
三、实验结果与分析1. CPF在小鼠卵母细胞减数分裂过程中的作用通过观察和分析CPF基因敲除和野生型小鼠的卵母细胞减数分裂过程，发现CPF对于染色体的正确排列和分离具有重要作用。
在CPF缺失的情况下，小鼠卵母细胞的染色体排列紊乱，出现无法正常完成减数分裂的现象。
此外，在过表达CPF的模型中，观察到减数分裂过程更为顺畅。
2. CPF在早期胚胎发育过程中的功能（1）影响胚胎细胞发育的稳定性：在早期胚胎发育中，CPF 能够维持胚胎细胞的稳定状态，对于细胞的增殖和分化有积极影响。
当CPF表达水平发生异常时，如过少或过多，均会导致胚胎发育的异常。
《转录因子TFⅡB对小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育影响的研究》范文
《转录因子TFⅡB对小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育影响的研究》篇一一、引言近年来，生殖生物学领域对于卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育的机制研究取得了显著进展。
其中，转录因子TFⅡB （TFIIB）作为一种重要的真核生物转录因子，其在细胞内基因表达调控过程中扮演着至关重要的角色。
然而，TFⅡB对小鼠卵母细胞减数分裂及早期胚胎发育的影响尚未完全明确。
因此，本文将重点研究TFⅡB对小鼠卵母细胞减数分裂和早期胚胎发育的生物学作用及机制，为相关研究提供新的理论依据和实验依据。
二、材料与方法2.1 实验动物本实验采用特定品系的小鼠，年龄、体重等指标符合实验要求。
所有实验小鼠均饲养在特定的实验室动物房内，环境温度、湿度等条件稳定可控。
2.2 主要试剂与设备实验过程中需用到各种生物化学试剂、抗体等。
主要设备包括显微镜、荧光定量PCR仪、倒置显微镜等。
2.3 实验方法（1）小鼠卵母细胞的获取与处理；（2）通过基因敲除、过表达等技术手段调节TFⅡB的表达水平；（3）观察不同TFⅡB表达水平下卵母细胞的减数分裂过程；（4）分析早期胚胎发育过程中TFⅡB的表达变化；（5）利用荧光定量PCR、免疫印迹等技术手段检测相关基因的表达水平。
三、实验结果3.1 TFⅡB对小鼠卵母细胞减数分裂的影响实验结果显示，在TFⅡB表达水平降低的情况下，小鼠卵母细胞的减数分裂进程受到明显影响，表现为减数分裂停滞、异常卵母细胞比例增加等现象。
而在TFⅡB过表达的情况下，卵母细胞的减数分裂进程得以正常进行，表现出较高的正常卵母细胞比例。
3.2 TFⅡB对早期胚胎发育的影响在早期胚胎发育过程中，TFⅡB的表达水平与胚胎发育质量密切相关。
实验结果显示，在TFⅡB表达水平较低的情况下，早期胚胎的发育质量明显下降，表现为胚胎发育停滞、死亡等现象。
而在TFⅡB表达水平较高的情况下，早期胚胎的发育质量得以显著提高。
3.3 相关基因表达分析通过荧光定量PCR、免疫印迹等技术手段检测相关基因的表达水平，发现TFⅡB的表达水平与一系列与减数分裂和早期胚胎发育相关的基因表达水平密切相关。
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１ ． ２中期Ｉ 和中期Ｉ Ｉ 染色体的制备
培养 １－２ 小时后，卵母细胞自 ８ ０ 发停滞于第二次减数分裂的中期．用链蛋白酶 Ｅ处理去除透明带，将第一 极体去除．以避免极休内染色体的干扰．若要得到第一次减数分裂中期相，可在培养液中加０ ｐ ／ 秋水仙素 ． ｇ ２ ｍｌ 使卵母细胞停止在第一次减数分裂的中期． 制备中期Ｉ 染色体时，卵母细胞可在双蒸水中低渗处理 ３－４ 分钟（ ０ ０ 去除透明带的中期Ｉ卵母细胞可在 １ Ｉ ％ 的柠檬酸钠中低渗） ．用吸卵管吸取低渗较好的卵毋细胞于干净载玻片上，当溶液快干前，在解剖镜下将３： 的 １ 甲醇 ： 冰醋酸滴人固定，固定几次后更换为 １ Ｉ醇 ： ：１ 冰醋酸．空气干燥后，Ｇ ａ１ ９染液扣染 ３ 分钟， Ｉ Ｉ ｉ （： ） ｃ ｍｓ ０ 自 来水冲洗数秒．晾干后观察．
①引级 木科生， 工作单位： 现 江苏省如皋市搬经 中学．
２ ８
遗
传 ＨＥ Ｅ Ｉ Ａ （ｅ ｉｇ １９ Ｒ Ｄ Ｔ Ｓ ｉｎ） ６ Ｂ ｊ ９
１卷 ８
２结 果 一 讨 论 与
国内有关哺乳动物减数分裂染色体的研究，大多集中在雄性动物 （ ，可能是因为雌性动物的染色体制备相 ２ ） 对困难的缘故．本研究的目的就在于建｝ Ｌ ＇ 一个相对简单易行的卵．： ｒ细胞减数分裂染色体的制各方法ｒ实验结果如 ； Ｉ 图１ 所示，图 ｌ 为 ＭＩ ａ 晚期的分裂相．表现出２ ０对同源染色休相互配对的现象．由于小鼠是端着丝粒染色体， 因而１在分离的十字形的同源染色体配对特别清晰．图 ｌ Ｅ ｂ为ＭＥ分裂相。表现为姊妹染色单体尚未分离前的２ ０ 个姊妹染色体的形态．图 ｌ 为第一次减数分裂早中期分裂相的Ｃ带图，可见尚存在交叉的终变期染色体和正在 ｃ 分离的同禅染色体．每对同源染色体均有两个若丝粒，着丝粒的个数为 ４． ０
过程中各时期染色休的标本，尤其是两次减数分裂中期染色休的制备尤为方便．并通过显示 Ｃ带进一步确定染 色休的数目， 可用于研究休外培养条件下各种因家对卵母细胞染色休的影响．
Ｉ材 料 与 方 法
１ ． １卵母细胞的获取和体外培养
取 １－２ ９ ２日龄的雌性昆明系小鼠，用５Ｕ／ １ 只孕马血清激索处理以促进卵泡发育．４ ８小时后，颈部脱位法
遗传 ＨＥ Ｅ ＩＡ （ｅｉｇ １（ ： ２ １９ Ｒ Ｄ Ｔ Ｓ ｉｎ） ６ ２ ８ ６ Ｂｊ ８ ） ７ ９
小鼠卵母细胞减数分裂染色体的制备
李朝军 袁来平① 张锡然 陈宜峰
《 南京师范大学生物系， 南京 ２０９） １０７
Ｐ ｅａａｉ ｏ Ｍｅ ｔ Ｋ ｒｔｐ ｏ Ｍｏ ｓ Ｏ ｃｔ ｒｐｒｔ ｎ ｉ ｉ ａｙｙｅ ｕｅ ｙｅ ｏ ｆ ｏ ｃ ｆ ｏ
制备卵母细胞染色体时，有采用在小离心管低渗、固定 （ ，或在表而皿里低渗、固 ’ 〕 定方法 〔 ，其目的都 ） ５
是防止卵母细胞的丢失，我们在试验发现，山于卵母细胞本身的粘附作用和不同溶剂相的扰动，这些方法还是容 易造成细胞的丢失，所以我们采用低渗后放在载玻片上固定的方法．但是包含卵母细胞的液体，每滴尽量不超过 ２ 毫米直径．同时，固定时卵母细胞易随液休流动，极易造成染色休的－失．因此，必须等液滴的液休快千、卵 Ｔ ： 毋细胞刚刚铺展在载玻片上时，用吸卵管滴加固定液．固定过程中不能让其千燥，固定时间宜长些，以去除卵母 细胞浓厚的细胞质．同时，将低渗后的卵毋细胞直接放在载玻片上固定不易造成卵毋细胞的丢失，并可在固定细
胞的地方作 记号 ，便于观 察 ．
图 ， 小鼠 Ｊ 减数分裂中 １ 卵Ｎ细胞 期 晚期的 分裂相（ 、中 １的分裂相（ 及早中期分裂相的 Ｃ带（（ ２０ ａ ） 期 １ ｂ ） （ ｘ ） ｃ ０ ）
减数分裂染色休制备对研究减数分裂过程中雌性生琐细胞同源染色休联会，遗传物质交换以及染色体减数 （ 由二倍体减至单倍体） 等现象的规律．以及环境中各种诱变因子对其影响提供了方便， 特别是一些遗传病是由于 减数分裂过程中染色休分离不完全所致．如一些非整倍体的发生等 （ ．所以，建立制备卵母细胞染色休方法， ‘ ） 根据卵母细胞减数分裂过程中染色休的变化研究一些染色体病的发病机理具有一定的意义．
Ｐ ｂ ｉｈｎ ， ． 一 １４ ｕ ｌｓ ｉ ｇ ｐ ５ ｐ ４ ２． 〔 ５〕 Ｅ ｃ ｅ ｌｕ 一 ｔｅ Ｕ， ｏｌ １ ８ ． ｙｏ ｅ ｅｉ Ｃ ｌ Ｇｅ ｅ． ５ ： ０－１ ６ ｉｈ ｎ ａ ｂ Ｒｕ ｔｒ Ｂ ｌ １ ９ ９ Ｃ ｔｇ ｎ ｔｃ ｌ ｎ ｔ ２ １ － ７ ． ， ｅ ， ７ （ ６〕 Ｅ ｃ ｅ ｌｕ 一 ｔｅ Ｕ， ９ ． ｒ ｍｏ ｏ ｓ ｄ ｙ Ｓ ｍｎ ｒ ａ ｄ ｈ ｎ ｌ ＡＣ ｄ ． ｉｈ ｎａ ｂ Ｒｕ ｔｒ １ ３ Ｃｈ ｏ ｓ ｍｅ Ｔ ａ ． ９ ｏ ｕ ｅ ＡＴ ｎ Ｃ ａ ｄ ｙ Ｅ ｓ Ｃｈ ｐ ｎ ｄ ａｌ ｅ ｓ Ｌ ｎ ｏ ． ｉ， Ｄ ３ ３ ３ ６ ａ ｍａ ａ Ｈ ｌ Ｐ ｓ， ｄ ｎ Ｖ． Ｐ ． 一 ３ ． ｎ ｒ ｏ ｉ ２ 本文于 １ ９ ９ ５年 １ 月 ６日 收到 ．１ ９ １ ９ ６年 ５月 ２日修 回 ．
哺乳动物的卵母细胞的减数分裂过程中存在两次自发的停滞现象，第一次是在第一次减数分裂前期的双线 期，这一静止期持续很长时间，一 直到动物性成熟后卵母细胞进人发育周期，在促性腺激家的作用下，卵母细胞 的第一次减数分裂才重新启动．完成第一次减数分裂后，又停滞在第二次减数分裂的中期．在精子或化学因素刺
激 作用 完 第二 减数 的 下， 成 次 分裂（ ． 此， ｐ乳 物的 母 在一 条件 进 养， 制备 数 ） ４ 因 对ｉ 动 卵 细胞 定 下 行培 可 减 分裂 ｌ ｌ
Ｌ Ｃ ａ ｊｎ Ｙａ Ｌ ｉｉｇ Ｚ ａ ｇ ｉ ｎ Ｃｈ ｎ ｆｎ ｉ ｏｕ ｈ ｎ ｃｐｎ ｈｎ Ｘｒ ａ ｃ Ｙｉ ｇ ｅ
（ ｉｏ ｙ ｐ ｒ ｅ ｔ ｎｉ Ｎ ｒ ｌ ｉ ｒｉ ， ｎｉｇ ０ ９） Ｂｏ ｇ Ｄ ａｔ ｎ ｏ Ｎａｊ ｇ ｍａＵｎｖ ｓｙ Ｎ ｊ ２ ０７ ｌ ｅ ｍ ｆ ｎ ｏ ｅ ｔ ａ ｎ １
１ ． ３染色体 Ｃ带的制备
取片龄在 Ｉ 周左右的染色休玻片标本，３： 的甲醉 ： １ 冰醋酸固定液褪色 １ 分钟．在 ０ ｍ ｌ ． ｏ／ ２ Ｌ盐酸溶液中
室 温处理３ 分钟，除去非酸性蛋白质．蒸馏水清洗后，于５℃的５ ０ ２ ％的Ｂ（Ｈ： ａ ）水浴中 Ｏ 处理６ 分钟到８ 分钟左
右，于６℃的 ２ Ｓ ０ ｘ Ｃ榕液中处理 ２ Ｓ 小时，清恍后用３ ％的Ｇｉ ａ ｅ 染液染色 １ 分钟，观察 （ ． ｍｓ ５ Ｉ ）参 考文献
（ ） 王子淑编著，１８ ．人休及动物细胞遗 传学 实验技术， １ ９７ 成都： 四川 大学出版社． （ 〕 黄天华等，１８ ．遗传与疾病， （） １４ ２ ９７ ４３： ． ７
（ 〕 苏瑞珍， ３ 何 建，１８． ９２ 科学通报， ７２） １２－１２． ２（４： ３ ５４ ５
（ ） Ｂ ｏ ｄ ｒ Ｗ ｔ １９ ．Ｄ ｖｌｐ ｎ ａ Ｂｏｏ ｙＴ ｉ ｅ ｉ ｏ ） Ｓ ｕ ｄ ｒ Ｃ ｌ ｇ ４ ｒ ｗ ｅ Ｌ ｅ ａ， １ ｅ ｅ ｍｅ ｔｌ ｌｇ （ ｈｒ ｄｔ ｎ， ｎ ｅｓ ｌ ｅ ｌ ９ ｏ ｉ ｄ ｉ ａ ｏｅ
处死小鼠．将卵巢置于Ｍ２ 培养液中，在实休解剖镜下除去输卵管及附着的 脂肪，用小号针头穿刺有腔卵泡，轻 轻挤压，外面 有卵丘细胞生长完全的卵母细胞从卵泡中 包围 逸出．用玻璃吸卵管将卵母细胞一一移出，置于Ｍ２
培养液中，用略小于卵母细胞直径的吸卵管轻轻吹打卵毋细胞。将外而的卵丘细胞去除．将卵母细胞置于覆盖有 石蜡油的微滴中，于３ｒ， Ｏ： ７ ５ － ％Ｃ 的溉度饱和培养箱中培养，培养液为ＤＭＥ ４ ／ 牛血清白蛋白． Ｍ＋ｍｇ ｌ ｍ