8种野生百合的花粉形态及聚类分析
百合的适应性和环境生态意义
百合的适应性和环境生态意义百合是一种常见的多年生草本植物，属于百合科。
它们生长在地球上各个地区的不同环境中，拥有广泛的适应性。
百合不仅在自然界中发挥着重要的生态作用，还被广泛用于园艺和药用。
首先，百合的适应性使其能够在各种不同的环境中生存。
百合可以生长在高寒地区、温带地区、亚热带地区和热带地区，具有较强的耐寒、耐旱和耐阴的能力。
百合的适应性可以归因于其根茎的存活和地下鳞茎的形成。
根茎可以在恶劣的环境下存活，以便在适合的时机重新生长。
地下鳞茎则可以在干旱或人为影响下保护百合的生命力。
其次，百合在生态系统中发挥着重要的生态作用。
百合的花朵所含的芳香物质能够吸引昆虫、蜜蜂和蝴蝶等传粉者，促进花粉的传播和植物的繁殖。
此外，百合的根系可以稳定土壤，防止水土流失。
百合也是一种有效的生物修复植物，可以在受损的生态系统中恢复土壤结构和功能。
另外，百合还因其药用价值而受到人们的重视。
百合鳞茎中富含多种药用成分，如多糖、皂苷和生物碱等。
它们被用于治疗咳嗽、支气管炎、肺结核和糖尿病等疾病。
此外，百合还有镇痛、消炎、抗癌和抗衰老的作用，被广泛应用于中药和保健品领域。
在园艺方面，百合也是一种受欢迎的观赏植物。
百合花色彩鲜艳、形态各异，适合种植在花坛、花园和庭院中，以及盆栽和切花。
百合的花期较长，花朵持久，被人们誉为花中皇后。
百合还可以与其他花卉搭配种植，增加花园的美感和观赏价值。
最后，应该注意的是，尽管百合具有适应性和广泛的用途，但过度的采挖和开发可能对其生存和繁衍产生负面影响。
为了保护百合资源，需要合理规划和管理其栽培和野生化种群。
同时，人们应当增强对百合生态环境的认识和保护意识，促进百合在生态系统中的健康发展。
总之，百合的适应性使其能够在各种环境中生存，并在生态系统中发挥重要的生态作用。
其药用价值和园艺观赏性也被人们广泛认可和利用。
然而，在享受百合带来的益处的同时，我们也应该关注对它们的合理保护和管理，以确保百合在环境生态中持续繁衍和发展。
生物实验解剖花的步骤-解释说明
生物实验解剖花的步骤-概述说明以及解释1.引言1.1 概述概述在生物学学科中，解剖花是一项常见的实验，通过解剖花可以深入了解花朵的结构、功能以及花粉传播等生物过程。
花朵是植物繁殖的重要器官，它们以其多样的形态与颜色吸引着昆虫和其他传粉者的注意力。
解剖花的步骤不仅可以揭示花朵内部的组织结构，还可以进一步了解花的繁殖方式和适应环境的能力。
本文将详细介绍解剖花的步骤以及实验所需的准备工作。
首先，我们将准备所需的材料和工具，并简要介绍它们的作用和用途。
接下来，我们将详细描述解剖花的步骤，包括取样、切割、观察和记录花的各个部位的特征。
在实验结果部分，我们将呈现解剖花所得的实验数据和观察结果，并进行一些解析和讨论。
最后，我们将结合实验结果展开结论，分析实验的意义，并展望未来在这一领域的研究方向。
通过本文的阅读，读者将掌握解剖花的基本步骤和技巧，并理解花朵内部结构与功能的关系。
同时，读者也将对解剖花的意义和应用有更深入的了解。
本文旨在为读者提供关于解剖花实验的全面指南，以促进对植物生物学的理解和研究的深入探索。
1.2 文章结构文章结构部分的内容可以描述整篇长文的组织方式和主要内容，包括以下方面：1. 引言：介绍本篇长文的背景和重要性。
2. 正文：详细讲解了生物实验解剖花的步骤。
- 准备工作：描述了进行实验所需的材料和仪器的准备，以及实验环境的要求。
- 实验步骤：按照特定的顺序介绍了解剖花的具体步骤，包括准备器械、观察花的外部特征、花内部结构的解剖等。
- 实验结果：记录和分析了实验中得到的数据和观察结果，可能包括花的组织结构、花粉的形态、花蕊的结构等方面。
3. 结论：对实验结果进行总结和分析，解读实验结果的意义。
- 结果分析：对实验数据进行分析，找出其中的规律和特点，并给予解释。
- 实验意义：说明本次实验对生物学研究的贡献和应用前景，解释为什么解剖花这一实验方法的重要性。
- 展望：在结果的基础上，对进一步研究和应用提出展望，可能包括针对不同类型的花进行解剖研究、深入探究花的生物学功能等。
花粉形态数量化分析在忍冬属花类药材的鉴别及分类中的应用
花粉形态数量化分析在忍冬属花类药材的鉴别及分类中的应用李群;吴和珍;田代志;胡志刚【摘要】Objective:To make systemic morphological observation for 12 pollen samples of Lonicera L.from different habitats and provide a reference for pharmacognostic identification and classification based onthe character comparisons.Methods:The scanning electron microscope (SEM)was applied to observe the morphological characteristics and gauge the size and density of external spine while the pollen size was measuredby means of optical microscope,and the data were analyzed by SPSS 20.0 software.Results:Numerical features of pollens of same species from different habitats were broadly similar in contrast with interspecific differences.Conclusion:Application of Numerical Taxonomy of Pollen Morphology combined with statistical analysis can provide a basis for pharmacognostic identification and classification of Lonicera.%目的：对忍冬属不同产地12个样本的花粉形态进行系统观察，以期在表观性状比较的基础上，为忍冬属花类药材的鉴别及分类提供依据。
百合亚纲
5、分布：1万余种，我国1200，世界分布
花程式：P2A3G(2:1:1)
分类：竹亚科，禾亚科
小麦的叶和小花
小麦茎叶与花序
玉蜀黍
五 百合科（Liliaceae）
特征： 1、常为多年生草本，具根茎、块茎或鳞茎 2、单叶互生，稀对生或轮生或基生 3、花两性，三基数；花被花瓣状，裂片常6，排 成2列，雄蕊6，子房常上位，3室，中轴胎座 4、果为蒴果或浆果 6、分布：4000余种，世界，主产温带和亚热带 ，我国600余种，全国分布，西南最多
莎草花解剖
莎草
禾本科（Poaceae,Gramineae）
特征： 1、草本或木本，秆（茎）常圆柱形，具明显的节和节 间，节间多中空，稀中实； 2、单叶互生，2列，叶由叶鞘、叶片和叶舌，叶鞘常一 边开口（开裂），叶鞘两侧常具叶耳 3、由小穗组成各种花序，小穗由小穗轴，一对颖片和 多朵小花组成；小花：由一对稃片，2－3浆片(花被－传 . 粉)，雄蕊和雌蕊组成；小花两性，稀单性，雄蕊3，花 丝长，子房上位，1室，1胚珠，花株2，柱头羽毛状， 4、果常为颖果
花程式：* P3+3A3+3G(3:3:∞)
与石蒜科区别：子房下位
百合鳞茎
百合
卷 丹
卷丹花纵剖
文竹果枝
华重楼
玉簪
麦冬
6 兰科（Orchidaceae）
特点： 1、多年生草本，陆生、附生或腐生，陆生或腐生常具 根状茎或块茎，附生的具肥厚根被的气生根 2、单叶互生，基部常具抱茎的叶鞘 3、花两性，两侧对称，花被6，外轮3为萼片（中萼片， 侧萼片），内轮为花瓣：两侧的称花瓣，中央特化形成 唇瓣；具合蕊柱，雄蕊1或2枚，具花粉块；子房下位， 扭转1800 4、蒴果；种子微小 5、2万余种，热带，亚热带，温带分布，热带美洲，亚 洲为多
百合种球的有性繁殖法种子法
两种方法的改进方案
结论
06
百合种球有性繁殖的可行性
繁殖方法的比较
繁殖技术的研究
研究总结
百合种球有性繁殖的成功，为百合种球的产业化发展提供了新的可能。这种繁殖方法具有较高的效率和遗传多样性，可以为百合产业提供更丰富、更优质的种球资源。
研究前景
百合种球有性繁殖可以有效地引入外源基因，为百合的遗传改良提供了新的机会。利用有性繁殖方法，可以培育出更适应市场需求、抗逆性更强、产量更高的百合新品种。
顶生种球：由母球顶端产生，一般较大，繁殖能力强，是主要繁殖方式之一。
子球：由基生或顶生种球上产生的不定芽生长发育而来，一般数量较多，繁殖速度快。
珠芽：由百合植株地上部分叶腋间形成的一种特殊繁殖器官，可以用来繁殖新植株。
百合种球的类型
百合种球的应用
园林应用：百合种球可以用于园林布景、花坛、花境等。
盆栽观赏：百合种球盆栽观赏价值高，可以用于装饰家居、办公场所等。
百合是全球重要的观赏植物之一，其观赏价值主要来源于其花朵的形态和颜色。
研究方法和范围
研究采用文献调研和实地调查相结合的方法，搜集国内外关于百合有性繁殖的资料，了解其生物学特性、生长环境、繁殖方法等。
研究对不同品种的百合进行实地种植，观察其开花结实情况，并对种子进行采收和测定。
研究范围包括百合种球的特征、种子收集和测定方法、不同品种的开花结实情况等多个方面。
本研究对于百合种球有性繁殖技术的探索，可以为其他植物的繁殖研究提供参考。类似的方法和思路也可以被应用到其他植物的繁殖领域，推动植物繁殖技术的进步。
百合种球的产业化发展
遗传改良的潜力
其他植物的繁殖研究
谢谢您的观看
THANKS
切花生产：百合种球是切花生产的主要材料之一，可以用于制作花束、花篮等。
铁线莲属植物品种及野生种的物候期观察分析
铁线莲属植物品种及野生种的物候期观察分析王磊;王红梅;贾君;于健;陈霞【期刊名称】《浙江农业科学》【年(卷),期】2016(057)002【摘要】对铁线莲属植物品种及野生种1年内萌芽期、展叶期、叶变色期、落叶期、始花期、盛花期、凋谢期及单朵花期的变化情况进行观察, 并进行了相关分析和极差分析. 结果表明: 单朵花寿命为5~14 d, 群体花期长达7个月之久, 4—12月都有开花的品种. 数据分析表明, 叶变色期和展叶期的变异系数较大, 分别为4. 4%和4. 1%, 说明各居群的叶变色期和展叶期差异较大. 另外, 萌芽期的变异系数最小, 为1. 9%, 说明各居群萌芽期的出现时间较为集中. 始花期各品种极差为44 d, 变异系数为6. 3%, 说明始花期不同种及品种间差异较大, 但相关分析表明各指标间相关性不强.【总页数】4页(P198-201)【作者】王磊;王红梅;贾君;于健;陈霞【作者单位】江苏农林职业技术学院风景园林系, 江苏句容 212400;江苏农林职业技术学院风景园林系, 江苏句容 212400;江苏农林职业技术学院风景园林系,江苏句容 212400;江苏农林职业技术学院风景园林系, 江苏句容 212400;江苏农林职业技术学院风景园林系, 江苏句容 212400【正文语种】中文【中图分类】S687.3【相关文献】1.百合属5个野生种及7个栽培品种花粉形态的观察 [J], 顾欣;张延龙2.不同仙茅属植物在广州的物候期及植物学特征观察 [J], 张虹;何钢;刘贤桂;倪尚格;张世良3.华东鼠尾草属植物的引种栽培及其物候期观察 [J], 周翔宇;4.铁线莲品种物候期调查及分析 [J], 巫建新;王磊5.西藏悬钩子属部分野生种与栽培品种花粉形态的观察 [J], 张良英;刘林;牛歆雨因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
百合科植物的应用及价值
村乡科技XIANGCUN KEJI52XIANGCUN KEJI 2020年12月（中）百合科植物的应用及价值段芳瑶向骞沈达理（湖南农业大学风景园林与艺术设计学院，湖南长沙410128）［摘要］百合科（Liliaceae ），通常为多年生草本，较少为亚灌木、灌木或乔木状，名花良药众多，环境适应性强，观赏价值高，株型种类多样，园林用途广泛，为丰富园林景观起到了重要作用。
近年来，百合科植物的其他应用价值也在慢慢呈现。
本文将从百合科植物的植物资源概况、繁殖技术、化学成分、观赏应用、药用价值及其他应用研究等方面探讨百合科植物的应用，以期为今后百合科植物的研究应用提供参考依据。
［关键词］百合科植物；资源概况；繁殖技术；观赏应用［中图分类号］Q949.9［文献标识码］A［文章编号］1674-7909（2020）35-52-21百合科植物资源概况我国作为百合科植物原产国，其植物资源丰富多样，分布范围广，观赏性状多样。
近年来，百合科植物的药用价值、经济价值和工业价值等隐藏价值也开始慢慢呈现出来，在资源开发及研究应用上有着广阔的发展前景，且国内外专家学者对百合科植物的关注度也越来越高。
据文献记载，广义百合科植物约有280属4000种，在世界范围内广泛分布，目前主要分布在温带地区以及亚热带地区，我国产62属约600种，遍及全国各个区域［1］。
我国常见的有百合属、沿阶草属、黄精属、天门冬属、葱属、贝母属及菝葜属等，特有的有知母属、白穗花属、鹭鸶兰属等。
2百合科植物繁殖技术百合科植物的繁殖方式主要是扦插、分株和分球等无性繁殖方法，但长期的无性繁殖会在植物体内积累大量的病毒，引发病毒病，降低观赏性能。
而利用植物组织培养技术可以生产无毒幼苗，提高幼苗质量。
如今，许多百合科植物的组培快繁技术已趋于成熟，在新品种选育、良种繁育、次生代谢产物生产、种质资源创新和保存以及理论研究上的应用均取得了显著进展。
目前，研究主要集中在露地栽培技术、组织快繁、脱毒苗生产和引种驯化等方面，在工厂化育苗、已有品种特征特性的描述以及新品种特殊养护要求等方面尚缺乏系统的研究和介绍［2］。
匍茎百合再生体系的建立及多倍体诱导
第５２卷第４期东㊀北㊀林㊀业㊀大㊀学㊀学㊀报Ｖｏｌ．５２Ｎｏ．４２０２４年４月ＪＯＵＲＮＡＬＯＦＮＯＲＴＨＥＡＳＴＦＯＲＥＳＴＲＹＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹＡｐｒ．２０２４１）国家自然科学基金项目（３１９７１７０８）；雄安新区科技创新专项项目（２０２２ＸＡＧＧ０１００）；中央高校基本科研业务费专项资金项目（ＱＮＴＤ２０２３０６）㊂第一作者简介：马小鸥，女，１９９９年１月生，北京林业大学园林学院，硕士研究生㊂Ｅ－ｍａｉｌ：ｘｉａｏｏｕ０６２９＠１６３．ｃｏｍ㊂通信作者：孙明，北京林业大学园林学院，林木资源高效生产全国重点实验室（北京林业大学），花卉种质创新与分子育种北京市重点实验室（北京林业大学），国家花卉工程技术研究中心（北京林业大学），城乡生态环境北京实验室（北京林业大学），林木花卉遗传育种教育部重点实验室（北京林业大学），教授㊂Ｅ－ｍａｉｌ：ｓｕｎｍｉｎｇｂｊｆｕ＠１６３．ｃｏｍ㊂收稿日期：２０２３年１０月２２日㊂责任编辑：李春雪㊂匍茎百合再生体系的建立及多倍体诱导１）马小鸥㊀张前㊀吴利雪㊀张智萱㊀郝俊夷㊀张鹏㊀张启翔㊀孙明（北京林业大学，北京，１０００８３）㊀㊀摘㊀要㊀为了保护匍茎百合（Ｌｉｌｉｕｍｌａｎｋｏｎｇｅｎｓｅ）的野生种质资源并提供简单有效的快繁方法，以匍茎百合为植物材料，建立以鳞茎为外植体的高效再生体系，并利用秋水仙素处理种子，诱导出多倍体植株㊂通过调节培养基中的植物生长激素和蔗糖的质量浓度，确定了匍茎百合不定芽诱导㊁小鳞茎膨大和生根的最佳培养基㊂结果表明：最佳不定芽诱导培养基为ＭＳ培养基＋６－苄氨基嘌呤（６－ＢＡ）１．０ｍｇ㊃Ｌ－１＋萘乙酸（ＮＡＡ）０．７ｍｇ㊃Ｌ－１＋蔗糖３０ｇ㊃Ｌ－１，不定芽诱导系数为２．３３，显著高于其他处理组合；最佳小鳞茎膨大培养基为ＭＳ培养基＋蔗糖６０ｇ㊃Ｌ－１，可显著提高小鳞茎的直径和鲜质量；最佳生根培养基为０．５倍浓度的ＭＳ培养基＋萘乙酸（ＮＡＡ）０．４ｍｇ㊃Ｌ－１＋吲哚丁酸（ＩＢＡ）０．１ｍｇ㊃Ｌ－１，可显著增加根长和根数㊂用质量分数为０．０３％的秋水仙素浸泡１８ｈ，种子的成活率最高，为９３．１５％，再通过形态学㊁生理学和流式细胞仪鉴定，最终鉴定出４个四倍体植株和１６个嵌合体植株㊂关键词㊀匍茎百合；再生体系；不定芽诱导；鳞茎膨大；多倍体育种分类号㊀Ｑ８１３．１＋２ＴｈｅＥｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔｏｆａＲｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎＳｙｓｔｅｍａｎｄＰｏｌｙｐｌｏｉｄＩｎｄｕｃｔｉｏｎｆｏｒＬｉｌｉｕｍｌａｎｋｏｎｇｅｎｓｅ／／ＭａＸｉａｏｏｕ，ＺｈａｎｇＱｉａｎ，ＷｕＬｉｘｕｅ，ＺｈａｎｇＺｈｉｘｕａｎ，ＨａｏＪｕｎｙｉ，ＺｈａｎｇＰｅｎｇ，ＺｈａｎｇＱｉｘｉａｎｇ，ＳｕｎＭｉｎｇ（ＢｅｉｊｉｎｇＦｏｒｅｓｔｒｙＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｂｅｉ⁃ｊｉｎｇ１０００８３，Ｐ．Ｒ．Ｃｈｉｎａ）／／ＪｏｕｒｎａｌｏｆＮｏｒｔｈｅａｓｔＦｏｒｅｓｔｒｙＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，２０２４，５２（４）：５２－５８．ＩｎｏｒｄｅｒｔｏｐｒｏｔｅｃｔｔｈｅｗｉｌｄｇｅｒｍｐｌａｓｍｒｅｓｏｕｒｃｅｓｏｆＬｉｌｉｕｍｌａｎｋｏｎｇｅｎｓｅａｎｄｐｒｏｖｉｄｅａｓｉｍｐｌｅａｎｄｅｆｆｅｃｔｉｖｅｒａｐｉｄｐｒｏｐａ⁃ｇａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄ，ａｎｅｆｆｉｃｉｅｎｔｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎｓｙｓｔｅｍｕｓｉｎｇｂｕｌｂａｓｅｘｐｌａｎｔｓｗａｓｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄｗｉｔｈＬ．ｌａｎｋｏｎｇｅｎｓｅａｓｔｈｅｐｌａｎｔｍａ⁃ｔｅｒｉａｌ．Ｂｙｔｒｅａｔｉｎｇｔｈｅｓｅｅｄｓｗｉｔｈｃｏｌｃｈｉｃｉｎｅ，ｐｏｌｙｐｌｏｉｄｐｌａｎｔｓｗｅｒｅｉｎｄｕｃｅｄ．Ｂｙａｄｊｕｓｔｉｎｇｔｈｅｑｕａｌｉｔｙｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆｐｌａｎｔｇｒｏｗｔｈｈｏｒｍｏｎｅｓａｎｄｓｕｃｒｏｓｅｉｎｔｈｅｃｕｌｔｕｒｅｍｅｄｉｕｍ，ｔｈｅｏｐｔｉｍａｌｃｕｌｔｕｒｅｍｅｄｉｕｍｆｏｒａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓｂｕｄｉｎｄｕｃｔｉｏｎ，ｂｕｌｂｌｅｔｅｎｌａｒｇｅｍｅｎｔ，ａｎｄｒｏｏｔｉｎｇｏｆＬ．ｌａｎｋｏｎｇｅｎｓｅｗａｓｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｏｐｔｉｍａｌｃｕｌｔｕｒｅｍｅｄｉｕｍｆｏｒａｄｖｅｎ⁃ｔｉｔｉｏｕｓｂｕｄｉｎｄｕｃｔｉｏｎｗａｓＭＳｍｅｄｉｕｍｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｅｄｗｉｔｈ１．０ｍｇ㊃Ｌ－１６－ｂｅｎｚｙｌａｍｉｎｏｐｕｒｉｎｅ（６－ＢＡ），０．７ｍｇ㊃Ｌ－１ｎａｐｈ⁃ｔｈａｌｅｎｅａｃｅｔｉｃａｃｉｄ（ＮＡＡ），ａｎｄ３０ｇ㊃Ｌ－１ｓｕｃｒｏｓｅ，ｗｉｔｈａｎｉｎｄｕｃｔｉｏｎｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｏｆ２．３３，ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｏｔｈｅｒｔｒｅａｔｍｅｎｔｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｓ．ＴｈｅｏｐｔｉｍａｌｂｕｌｂｌｅｔｅｎｌａｒｇｅｍｅｎｔｍｅｄｉｕｍｗａｓＭＳｍｅｄｉｕｍｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｅｄｗｉｔｈ６０ｇ㊃Ｌ－１ｓｕｃｒｏｓｅ，ｗｈｉｃｈｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎｃｒｅａｓｅｄｔｈｅｄｉａｍｅｔｅｒａｎｄｆｒｅｓｈｗｅｉｇｈｔｏｆｂｕｌｂｌｅｔｓ．Ｔｈｅｏｐｔｉｍａｌｒｏｏｔｉｎｇｍｅｄｉｕｍｗａｓ１／２ＭＳｍｅｄｉｕｍｓｕｐｐｌｅｍｅｎｔｅｄｗｉｔｈ０．４ｍｇ㊃Ｌ－１ＮＡＡａｎｄ０．１ｍｇ㊃Ｌ－１ｉｎｄｏｌｅｂｕｔｙｒｉｃａｃｉｄ（ＩＢＡ），ｗｈｉｃｈｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｉｎｃｒｅａｓｅｄｒｏｏｔｌｅｎｇｔｈａｎｄｎｕｍｂｅｒ．Ｓｏａｋｉｎｇｔｈｅｓｅｅｄｓｉｎ０．０３％ｃｏｌｃｈｉｃｉｎｅｆｏｒ１８ｈｏｕｒｓｒｅｓｕｌｔｅｄｉｎｔｈｅｈｉｇｈｅｓｔｓｅｅｄｓｕｒｖｉｖａｌｒａｔｅｏｆ９３．１５％．Ｆｉ⁃ｎａｌｌｙ，ｔｈｒｏｕｇｈｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ，ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ，ａｎｄｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ，４ｔｅｔｒａｐｌｏｉｄｐｌａｎｔｓａｎｄ１６ｃｈｉｍｅｒｉｃｐｌａｎｔｓｗｅｒｅｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ㊀Ｌｉｌｉｕｍｌａｎｋｏｎｇｅｎｓｅ；Ｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎｓｙｓｔｅｍ；Ｉｎｄｕｃｔｉｏｎｏｆｉｎｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｅｂｕｄｓ；Ｂｕｌｂｅｎｌａｒｇｅｍｅｎｔ；Ｐｏｌｙ⁃ｐｌｏｉｄｂｒｅｅｄｉｎｇ㊀㊀百合花姿雅致，花色丰富，气味芳香，被誉为球根花卉之王［１］㊂百合具有极高的观赏价值，不仅可用于鲜切花㊁盆栽花卉和园林绿化，其丰富的花形㊁花色㊁株型及优良的抗性也为中国培育自己的百合新品种奠定了良好的种质资源基础㊂中国不仅是百合的起源中心，也是百合的自然分布中心，百合属（Ｌｉｌｉｕｍｓｐｐ．）目前在全世界已出现约１１０个种类，其中约有５５种分布于中国，在各类花卉中资源丰富程度居全国第一，但是还有许多具备特殊优良性状的野生百合资源有待进一步挖掘和应用［２］㊂匍茎百合（Ｌｉｌｉｕｍｌａｎｋｏｎｇｅｎｓｅ）是中国的一个特有种，主要分布在西藏东南部㊁云南西北部等地，花被片反卷，花粉红色且有深红色斑点［３］㊂匍茎百合花型优美，气味芳香，具有较高的观赏价值，而且由于它对葡萄孢疫病具有高度的抗性，被认为是百合杂交育种的良好材料［４－７］㊂但其在自然条件生长缓慢，且因人为和自然灾害等原因，导致野生资源受到极大的破坏，因此，有必要充分开发㊁利用现有的匍茎百合资源，对它的遗传保护和种质创新做进一步研究㊂据研究，以鳞片㊁茎尖㊁株芽㊁花器官等为外植体都可以诱导愈伤组织并建立高效再生体系［８－１２］，用秋水仙素处理百合鳞片或种子也成功诱导出了多倍体植株［１３－１４］㊂本研究利用组织培养技术，以匍茎百合鳞片为外植体，建立匍茎百合的高效再生体系，同时，用秋水仙素处理匍茎百合的种子来获得多倍体新品种，这对百合种质资源的保存㊁遗传育种和种质创新等均具有重要意义㊂１㊀材料与方法１．１㊀试验材料匍茎百合种球和种子采自国家花卉工程中心百合种质资源圃，种球直径为１．５ ３．０ｃｍ，选取其鳞片作为外植体建立再生体系㊂匍茎百合种子收获于２０２２年１１月份，于阴暗处室温保存，试验时挑选胚完整且大小均一的种子进行试验㊂１．２㊀匍茎百合再生体系建立培养基成分与培养条件：基本培养基为ＭＳ培养基添加蔗糖３０ｇ㊃Ｌ－１㊁琼脂７ｇ㊃Ｌ－１，１２１ħ高压灭菌２０ｍｉｎ，调节培养基的ｐＨ为５．８ ５．９㊂培养室温度控制在（２３ʃ１）ħ；光照强度为１５００ ３０００ｌｘ，光周期为１６ｈ光照㊁８ｈ黑暗㊂不定芽诱导：选取匍茎百合中层鳞片作为诱导材料，用体积分数为７５％的酒精和质量分数为１０％的ＮａＣｌＯ溶液将匍茎百合的鳞片消毒后，用无菌刀将鳞片切成合适大小，并在四周造成伤口㊂根据其形态特征，使鳞片凹面朝上与培养基接触，在不定芽诱导培养基（表１）中进行接种㊂生长５０ｄ时统计诱导率及诱导芽数等指标㊂不定芽诱导率＝（诱导出不定芽的鳞片数／总接种鳞片数）ˑ１００％；不定芽诱导系数＝诱导不定芽总数／分化不定芽的鳞片数㊂小鳞茎膨大培养：选取匍茎百合小鳞茎（质量约０．０３ｇ，直径约０．２ｃｍ）诱导出的１ｃｍ高的单株试管苗，接种到含蔗糖质量浓度分别为０㊁３０㊁６０㊁９０㊁１２０ｇ㊃Ｌ－１的ＭＳ培养基中（表２），诱导和促进小鳞茎膨大㊂观察小鳞茎形成及生长情况，接种４５ｄ后统计小鳞茎的质量和直径㊂生根及炼苗移栽：将增殖分化长至３ ４ｃｍ的丛芽切成单株，并挑选生长一致的单苗，接种到以０．５倍浓度的ＭＳ为基本培养基，含有萘乙酸（ＮＡＡ，０．２㊁０．４㊁０．６ｍｇ㊃Ｌ－１）和吲哚丁酸（ＩＢＡ，０．１㊁０．２ｍｇ㊃Ｌ－１）的培养基上（表３）㊂４５ｄ后观察根生长情况，统计生根数，并测量根长㊂生根数为每个丛芽长出的根数量；生根率＝（生根丛芽数／总接种数）ˑ１００％㊂生根培养后，在室温条件对再生植株进行炼苗处理３ ５ｄ㊂取出无菌苗后，用自来水洗去残留培养基，并移植到经高温高压灭菌过的基质（草炭㊁珍珠岩体积比为１ʒ１）中，覆盖塑料膜保湿，在人工气候培养箱中进行培养㊂３ｄ后揭去塑料膜进行正常养护管理㊂１．３㊀匍茎百合多倍体诱导种子的加倍处理：选取胚完整的匍茎百合种子（图１），将种子在含有１ ２滴洗洁精的水中浸泡并清洗２０ｍｉｎ，去掉浮起的干瘪种子，再用流水冲洗１ｈ㊂无菌条件下，用体积分数为７５％的乙醇消毒种子３０ｓ，然后用无菌水冲洗３次㊂再用质量分数为２％的Ｎａ⁃ＣｌＯ溶液消毒种子１０ｍｉｎ，振荡均匀，结束后用无菌水冲洗５次，转移到不定芽诱导培养基（ＭＳ培养基＋６－苄氨基嘌呤（６－ＢＡ）１．０ｍｇ㊃Ｌ－１＋萘乙酸（ＮＡＡ）０．７ｍｇ㊃Ｌ－１＋蔗糖３０ｇ㊃Ｌ－１）中进行预培养㊂在光照下培养１０ｄ左右，待种子露白后即可进行秋水仙素处理㊂种子露白以胚根和幼芽突破种皮为准，预培养的目的是让种子进入萌动期，以便与秋水仙素溶液充分接触㊂将露白的种子分别放入质量分数为０．０３％㊁０．０５％㊁０．１０％的秋水仙素溶液中，浸泡时间分别为１８㊁２４㊁３６ｈ，共９个处理，保证种子与秋水仙素溶液充分接触㊂处理结束后，用无菌水冲洗３ ５次，每次３ｍｉｎ左右，然后转移到不定芽诱导培养基中㊂培养５０ｄ左右，观察种子生长情况，记录发芽率㊂图１㊀匍茎百合果荚和种子倍性鉴定：分别从形态学㊁生理学㊁细胞学进行鉴定㊂（１）形态学鉴定：是最简单㊁最直接的一种植株倍性鉴定的方法㊂有研究表明，二倍体百合和四倍体百合在形态上存在显著的差异，如叶片的大小㊁厚度和褶皱程度，鳞茎的直径，根系的长度和粗细等㊂通过对表型的测量和观察，可以初步筛选出多倍体植株，为后续的其他鉴定方法提供较小的样本范围㊂（２）生理学鉴定：取二倍体和四倍体植株相同位置的叶片进行叶绿素的提取，叶绿素提取参考上海源叶叶绿素提取试剂盒说明书，叶绿素的测定参考曹嘉雯［１５］的方法，具体步骤为，以叶绿素提取作为空白对照，用ＵＶ８０００型分光光度计测定其在６６３㊁６４５ｎｍ处的吸光度值㊂使用Ａｒｎｏｎ公式，通过吸光度对叶绿素ａ和叶绿素ｂ的质量分数及总叶绿素的质量分数进行计算［１６］：㊀㊀㊀ｗａ＝（１２．７Ａ６６３－２．６９Ａ６４５）Ｖ／（１０００Ｗ）；㊀㊀㊀ｗｂ＝（２２．９Ａ６４５－４．６８Ａ６６３）Ｖ／（１０００Ｗ）；㊀㊀㊀ｗａ＋ｂ＝ｗａ＋ｗｂ㊂３５第４期㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀马小鸥，等：匍茎百合再生体系的建立及多倍体诱导式中：ｗａ为叶绿素ａ质量分数，ｗｂ为叶绿素ｂ质量分数，ｗａ＋ｂ为叶绿素ａ和叶绿素ｂ的总质量分数，单位为ｍｇ㊃ｇ－１；Ｗ为样品鲜质量（单位为ｇ），Ｖ为浸提液体积（单位为ｍＬ）；Ａ６６３为６６３ｎｍ处吸光度，Ａ６４５为６４５ｎｍ处吸光度㊂（３）细胞学鉴定：主要采用流式细胞仪鉴定，选取筛选出的表型变异的百合植株，用镊子和剪刀取新鲜叶片０．２ ０．５ｇ，叶片约０．５ｃｍˑ０．５ｃｍ大小，置于直径９ｃｍ的塑料培养皿中㊂取ＳｙｓｍｅｘＰａｒｔｅｃＣｙＳｔａｉｎＵＶＰｒｅｃｉｓｅＰ裂解液４００μＬ加于样本周围（叶片上只加２００μＬ左右液体，剩余液体加在培养皿边缘）㊂用锋利的单面刀片以垂直角度且刀片位置维持一个方向不变的手势将叶片切碎，然后将塑料培养基旋转９０ʎ，用同上的手势切碎叶片㊂当看不到完整的叶片碎片时即为最佳状态，能够充分提取出完整的细胞核，提取时间约为１０ｓ㊂将培养皿中的样品悬浮液用３０μｍ细胞过滤器过滤至样品管中㊂向样品管中加入ＳｙｓｍｅｘＰａｒｔｅｃＣｙＳｔａｉｎＵＶＰｒｅ⁃ｃｉｓｅＰ染色液１６００μＬ，避光染色１０ｓ左右㊂处理结束后上机测试，将染色后的样品液放至已经调试好的流式细胞仪中，所用仪器型号为Ｃｙｆｌｏｗ®ＰｌｏｉｄｙＡｎａｌｙｚｅｒ（ＰａｒｔｅｃＰＡＳ，德国）㊂以百合二倍体对照为内标，重复检测样品３次㊂流式细胞鉴定过程在北京林业大学实验室完成，统计诱导率㊂１．４㊀数据处理使用ＳＰＳＳＳｔａｔｉｓｔｉｃｓ１７．０软件对各数据进行显著性及多重比较分析（Ｄｕｎｃａｎ法）㊂采用Ｅｘｃｅｌ２０１９软件进行数据处理㊂２㊀结果与分析２．１㊀不同植物生长调节剂及配比对不定芽诱导的影响匍茎百合鳞片接种不同的培养基后，凹面的颜色由白色转为绿色，凸面与切口处则由白色转为褐色㊂在不定芽诱导过程中，鳞片表面先长出黄绿色的愈伤组织，随后愈伤组织变为青绿色，并分化为不定芽㊂当不定芽长出叶片后，形成了完整的植株（图２）㊂在培养过程中，匍茎百合接种２５ｄ左右开始长出不定芽；接种３０ｄ时，不定芽伸长１ ２ｃｍ，并开始长出叶片；接种４５ｄ左右，不定芽长成小鳞茎，并长出完整叶片，植株高度４ ５ｃｍ；接种６０ｄ左右，形成明显的小鳞茎，并长出约０．５ｃｍ的白色不定根㊂此时，由于培养基养分不足，部分叶片开始干枯㊁变黄，需转接至继代培养基㊂Ａ为接种２５ｄ；Ｂ为接种３０ｄ；Ｃ为接种４５ｄ；Ｄ为接种６０ｄ㊂图２㊀匍茎百合不定芽生长过程㊀㊀不同植物生长调节剂组合对不定芽诱导率的影响有显著差异㊂根据表１的结果，添加６－苄氨基嘌呤（６－ＢＡ）１．０ｍｇ㊃Ｌ－１㊁萘乙酸（ＮＡＡ）０．７ｍｇ㊃Ｌ－１的培养基不定芽诱导率显著高于其他培养基（ｐ＜０．０５），达到１００．００％；其次为添加６－苄氨基嘌呤（６－ＢＡ）１．０ｍｇ㊃Ｌ－１㊁萘乙酸（ＮＡＡ）０．５ｍｇ㊃Ｌ－１的培养基和添加６－苄氨基嘌呤（６－ＢＡ）０．５ｍｇ㊃Ｌ－１㊁萘乙酸（ＮＡＡ）０．７ｍｇ㊃Ｌ－１的培养基，不定芽诱导率分别为８８．８９％㊁７７．７８％；不定芽诱导率最低的组合出现在添加６－苄氨基嘌呤（６－ＢＡ）１．５ｍｇ㊃Ｌ－１㊁萘乙酸（ＮＡＡ）０．７ｍｇ㊃Ｌ－１的培养基中，为４４．４３％㊂综上，ＭＳ培养基＋６－苄氨基嘌呤（６－ＢＡ）１．０ｍｇ㊃Ｌ－１＋萘乙酸（ＮＡＡ）０．７ｍｇ㊃Ｌ－１最有利于匍茎百合不定芽的诱导㊂２．２㊀蔗糖质量浓度对小鳞茎膨大的影响根据表２数据显示，不同质量浓度的蔗糖处理均有利于鳞茎的膨大㊂当蔗糖质量浓度为６０ｇ㊃Ｌ－１时，匍茎百合鳞茎膨大后的质量和直径最大，分别为０．４０ｇ㊁０．８５ｃｍ㊂不加蔗糖时，匍茎百合鳞茎膨大后的质量和直径最小，分别为０．１６ｇ㊁０．２４ｃｍ㊂在试验的最初４５ｄ内，匍茎百合鳞片尚未分离，呈现为一个紧密相连的鳞茎结构㊂４５ｄ后，匍茎百合的芽开始逐渐分离，并形成由独立鳞片包裹的鳞茎（图３）㊂综上得出结论，ＭＳ培养基＋蔗糖６０ｇ㊃Ｌ－１是匍茎百合鳞茎膨大的最佳培养条件㊂表１㊀匍茎百合鳞片不定芽诱导培养基的筛选结果６－苄氨基嘌呤质量浓度／ｍｇ㊃Ｌ－１萘乙酸质量浓度／ｍｇ㊃Ｌ－１不定芽诱导率／％不定芽诱导系数０．５０．５（６６．６７ʃ１３．３０）ｂｃ（０．７７ʃ０．１９）ｂ１．００．５（８８．８９ʃ１９．２０）ｂｃ（１．２２ʃ０．５０）ｂ１．５０．５（６６．６７ʃ１３．３０）ｂｃ（０．８８ʃ０．３８）ｂ０．５０．７（７７．７８ʃ１９．２０）ｂｃ（１．２２ʃ０．１９）ｂ１．００．７（１００．００ʃ０）ａ（２．３３ʃ０．８８）ａ１．５０．７（４４．４３ʃ１９．２０）ｃ（０．５５ʃ０．１９）ｂ㊀㊀注：表中 不定芽诱导率 ㊁ 不定芽诱导系数 列数据为 平均值ʃ标准差 ，数据后同列不同小写字母表示差异显著（ｐ＜０．０５）㊂４５㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀东㊀北㊀林㊀业㊀大㊀学㊀学㊀报㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀第５２卷表２㊀不同蔗糖质量浓度时匍茎百合鳞茎膨大后的质量和直径蔗糖质量浓度／ｇ㊃Ｌ－１膨大后鳞茎质量／ｇ膨大后鳞茎直径／ｃｍ㊀０（０．１６ʃ０．０４）ｂ（０．２４ʃ０．０５）ｄ３０（０．２２ʃ０．０５）ｂ（０．４４ʃ０．１２）ｃ６０（０．４０ʃ０．１４）ａ（０．８５ʃ０．０６）ａ９０（０．２０ʃ０．０６）ｂ（０．６９ʃ０．１１）ｂ１２０（０．３１ʃ０．１８）ａｂ（０．４６ʃ０．１０）ｃ㊀㊀注：表中 膨大后鳞茎质量 ㊁ 膨大后鳞茎直径 列数据为 平均值ʃ标准差 ，数据后同列不同小写字母表示差异显著（ｐ＜０．０５）㊂图３㊀膨大前后匍茎百合鳞茎２．３㊀不同植物生长调节剂及配比对不定芽诱导生根的影响根据表３的数据，在６种培养基中，匍茎百合的不定芽都能够诱导生成不定根㊂在吲哚丁酸质量浓度确定的情况中，随着萘乙酸质量浓度的逐渐增加，诱导出的平均根数呈现下降趋势㊂添加萘乙酸０．２ｍｇ㊃Ｌ－１㊁吲哚丁酸０．１ｍｇ㊃Ｌ－１的培养基中，诱导出的平均根数最多，达到９．８条；其次是添加萘乙酸０．４ｍｇ㊃Ｌ－１㊁吲哚丁酸０．１ｍｇ㊃Ｌ－１的培养基，诱导平均根数为８．２条；而添加萘乙酸０．６ｍｇ㊃Ｌ－１㊁吲哚丁酸０．１ｍｇ㊃Ｌ－１的培养基诱导的平均根数最少，仅为３．６条㊂在吲哚丁酸质量浓度确定的情况，随着萘乙酸质量浓度的升高，平均根长先是增加，随后逐渐降低㊂当吲哚丁酸质量浓度为０．１ｍｇ㊃Ｌ－１，萘乙酸质量浓度为０．４ｍｇ㊃Ｌ－１时，平均根长达到最大值，为０．９３ｃｍ；当吲哚丁酸质量浓度为０．２ｍｇ㊃Ｌ－１㊁萘乙酸质量浓度为０．４ｍｇ㊃Ｌ－１时，平均根长为０．５４ｃｍ；当吲哚丁酸质量浓度为０．２ｍｇ㊃Ｌ－１㊁萘乙酸浓度为０．２ｍｇ㊃Ｌ－１时，平均根长达到最小值，为０．１６ｃｍ㊂由图４可见，匍茎百合的不定根存在两种形态，一种是具有根毛的簇状根，其茂盛的根系有助于植株生长；另一种是无根毛的单根不定根，更适用于根尖压片材料㊂综合考虑各因素，０．５倍浓度的ＭＳ培养基＋萘乙酸０．４ｍｇ㊃Ｌ－１＋吲哚丁酸０．１ｍｇ㊃Ｌ－１是诱导匍茎百合不定根的最佳培养基㊂表３㊀不同培养基培养的匍茎百合不定根诱导情况萘乙酸质量浓度／ｍｇ㊃Ｌ－１吲哚丁酸质量浓度／ｍｇ㊃Ｌ－１平均根数／条平均根长／ｃｍ０．２０．１（９．８０ʃ０．８４）ａ（０．３９ʃ０．０８）ｃ０．４０．１（８．２０ʃ１．４８）ａ（０．９３ʃ０．２０）ａ０．６０．１（３．６０ʃ０．８９）ｃ（０．３８ʃ０．０５）ｃ０．２０．２（５．８０ʃ１．４８）ｂ（０．１６ʃ０．０５）ｄ０．４０．２（４．８０ʃ１．６４）ｂｃ（０．５４ʃ０．０９）ｂ０．６０．２（４．００ʃ１．２３）ｃ（０．３２ʃ０．１１）ｃ㊀㊀注：表中 平均根数 ㊁ 平均根长 列数据为 平均值ʃ标准差 ，数据后同列不同小写字母表示差异显著（ｐ＜０．０５）㊂Ａ㊁Ｂ为有根毛簇状根；Ｃ㊁Ｄ为无根毛不定根㊂图４㊀匍茎百合两种不定根生长情况２．４㊀试管苗移栽将生根苗进行移栽，共移栽６０株，２个月后，成活５５株，成活率达到９１．６７％，且植株生长旺盛，长势一致（图５）㊂Ａ为生根苗；Ｂ为植株移栽㊂图５㊀试管苗移栽２．５㊀匍茎百合种子的多倍体诱导经过秋水仙素处理的匍茎百合种子，在１０ｄ左右开始萌发，胚根和幼芽突破种皮，胚体膨大㊂在１８ｄ左右，胚体长出愈伤组织；在４０ｄ左右，愈伤组织分化出不定芽；在５０ｄ左右，不定芽分化出子叶（图６）㊂秋水仙素的质量分数和浸泡时间对种子的成活率有显著影响（表４）㊂随着秋水仙素质量分数的增加和浸泡时间的延长，种子的成活率逐渐降低㊂当秋水仙素质量分数为０．０３％，浸泡时间为１８ｈ时，种子的成活率最高，达到９３．１５％㊂当秋水仙素质量分数为０．１０％，浸泡时间为３６ｈ时，种子的成活率最５５第４期㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀马小鸥，等：匍茎百合再生体系的建立及多倍体诱导低，仅为１１．４３％㊂这表明，秋水仙素对种子有一定的毒性，过高的质量分数和过长的浸泡时间会导致种子死亡㊂Ａ为浸泡在秋水仙素中的发芽种子；Ｂ Ｆ为秋水仙素处理后１０㊁１８㊁２５㊁４０㊁５０ｄ种子的表型变化㊂图６㊀秋水仙素处理后的匍茎百合种子生长过程表４㊀匍茎百合种子多倍体诱导情况秋水仙素质量分数／％浸泡时间／ｈ接种数／个出芽数／个成活率／％０．０３１８５８５４（９３．１５ʃ２．７４）ａ㊀０．０５１８６１５０（８１．８３ʃ７．９０）ａ０．１０１８６１３９（６３．９７ʃ５．３１）ｂ０．０３２４５９３０（５０．９６ʃ６．５０）ｃ０．０５２４５８２７（４６．６７ʃ１０．４１）ｃｄ０．１０２４６０２７（４５．００ʃ１３．２３）ｃｄ０．０３３６６２２７（４３．５７ʃ４．９２）ｃｄ０．０５３６５９２１（３５．６１ʃ５．１１）ｄ０．１０３６６１７（１１．４３ʃ５．５８）ｅ㊀㊀注：表中 成活率 列数据为 平均值ʃ标准差 ，数据后同列不同小写字母表示差异显著（ｐ＜０．０５）㊂２．６㊀倍性鉴定（１）形态学鉴定：对秋水仙素处理前后的匍茎百合组培苗的叶片进行测量和比较，结果表明，处理前后，植株在叶长㊁叶宽㊁叶形指数㊁叶面积㊁叶厚等方面均有显著差异（图７）㊂由表５可见，处理后植株的叶长平均为１．２７ｃｍ，处理前植株的叶长平均为２．６０ｃｍ，处理前植株的叶长明显比处理后植株的长，叶片长度比为２．０５㊂处理后植株的叶宽平均为０．１４ｃｍ，处理前植株的叶宽平均为０．２１ｃｍ，处理前植株叶片的宽度显著大于处理后植株的叶片宽度，叶片宽度比为１．５０㊂处理后植株的叶片厚度为０．１２ｍｍ，与处理前植株相比，厚度增加了０．０３ｍｍ，处理前后叶片厚度比为０．７５㊂处理前植株的叶形指数平均为１３．３８，比处理后植株大了４．０５，叶形指数比为１．４３㊂处理后植株的叶面积平均为０．１５ｃｍ２，比处理前植株叶片小了０．２１ｃｍ２，处理前后叶片面积比为２．４０㊂这些结果表明，多倍化对匍茎百合的叶片形态特征有显著影响，导致了处理前后植株之间的差异㊂Ａ为处理前植株；Ｂ㊁Ｃ为处理后植株㊂图７㊀匍茎百合秋水仙素处理前后植株对比结果表５㊀匍茎百合秋水仙素处理前后植株基生叶表型性状植株处理叶长／ｃｍ叶宽／ｃｍ叶厚／ｍｍ叶形指数叶面积／ｃｍ２处理前（２．６０ʃ０．６３）ａ（０．２１ʃ０．０６）ａ（０．０９ʃ０．０２）ｂ（１３．３８ʃ１．４７）ａ（０．３６ʃ０．２０）ａ处理后（１．２７ʃ０．０５）ｂ（０．１４ʃ０．０２）ｂ（０．１２ʃ０．０１）ａ（９．３３ʃ１．７８）ｂ（０．１５ʃ０．０３）ｂ处理前㊁后比２．０５１．５００．７５１．４３２．４０㊀㊀注：表中 处理前 ㊁ 处理后 行数据为 平均值ʃ标准差 ，数据后同列不同小写字母表示同一叶片表型处理前㊁后差异显著（ｐ＜０．０５）㊂６５㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀东㊀北㊀林㊀业㊀大㊀学㊀学㊀报㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀第５２卷㊀㊀（２）生理学鉴定：对用秋水仙素处理前后匍茎百合组培苗的叶绿素质量分数进行比较（表６），发现处理后植株叶片的叶绿素ａ㊁叶绿素ｂ质量分数以及叶绿素总质量分数均显著大于处理前植株㊂处理后植株叶片的叶绿素ａ质量分数平均为０．６３ｍｇ㊃ｇ－１，处理前植株叶片的叶绿素ａ质量分数平均为０．３７ｍｇ㊃ｇ－１，处理前后植株叶绿素ａ质量分数比为０．５９㊂处理后植株叶片的叶绿素ｂ质量分数平均为０．２７ｍｇ㊃ｇ－１，处理前植株叶片的叶绿素ｂ质量分数平均为０．１２ｍｇ㊃ｇ－１，处理前后植株叶绿素ｂ质量分数比为０．４４㊂处理后植株叶片的叶绿素总质量分数平均为０．９０ｍｇ㊃ｇ－１，处理前植株叶片的叶绿素总质量分数平均为０．４９ｍｇ㊃ｇ－１，处理前后植株叶绿素总质量分数比为０．５４㊂（３）细胞学鉴定：对匍茎百合进行流式细胞鉴定㊂以匍茎百合二倍体作为对照，将经过形态鉴定的植株进行流式细胞分析㊂如图８所示，通过调节流式细胞仪的电压，将匍茎百合对照组的分离峰调至１０左右㊂若被鉴定材料分离峰位置处于１０左右，则为二倍体植株；若分离峰位置在２０左右，则说明该材料ＤＮＡ分子数是二倍体的２倍，则为四倍体植株；若分离峰位置在１０和２０处均有，则说明该材料为嵌合体植株㊂从表型上发现，变异的２０株植株经过流式细胞术检测后，确认了４株四倍体植株㊂其中，在秋水仙素质量分数为０．０５％，浸泡时间为１８ｈ时，诱导出２株四倍体；在秋水仙素质量分数为０．０５％，浸泡时间为３６ｈ时，诱导出２株四倍体㊂其余１６株均为嵌合体㊂表６㊀匍茎百合秋水仙素处理前后植株叶片的叶绿素质量分数植株处理叶绿素ａ质量分数／ｍｇ㊃ｇ－１叶绿素ｂ质量分数／ｍｇ㊃ｇ－１叶绿素总质量分数／ｍｇ㊃ｇ－１处理前（０．３７ʃ０．１２）ｂ（０．１２ʃ０．０４）ｂ（０．４９ʃ０．１５）ｂ处理后（０．６３ʃ０．０７）ａ（０．２７ʃ０．０２）ａ（０．９０ʃ０．０７）ａ处理前㊁后比０．５９０．４４０．５４㊀㊀注：表中 处理前 ㊁ 处理后 行数据为 平均值ʃ标准差 ，同列不同小写字母表示差异显著（ｐ＜０．０５）；处理前后测量植株总数为４０株㊂图８㊀匍茎百合流式细胞鉴定图３ 讨论百合的许多组织和器官都可通过组织培养诱导成苗，常作为外植体的主要有鳞片㊁叶片㊁花丝㊁花瓣等，其中，以鳞片最常见［１７－１８］㊂本试验使用了匍茎百合鳞片作为外植体，并获得了高诱导率㊂百合鳞片诱导分化时，受自身激素与外界激素水平调控，可能会向器官型或器官发生型途径进行分化［１９］㊂而细胞分裂素和生长素的水平是影响细胞脱分化与分化方向转换的关键因素㊂本试验采用的激素为６－苄氨基嘌呤（６－ＢＡ）和萘乙酸（ＮＡＡ），该激素组合中，鳞片主要通过器官型诱导分化，结果表明，ＭＳ培养基＋６－苄氨基嘌呤１．０ｍｇ㊃Ｌ－１＋萘乙酸０．７ｍｇ㊃Ｌ－１为诱导匍茎百合不定芽的最佳培养基，诱导率为１００．００％；在ＭＳ培养基＋６－苄氨基嘌呤１．５ｍｇ㊃Ｌ－１＋萘乙酸０．７ｍｇ㊃Ｌ－１的培养基中，诱导率最低，为４４．４３％㊂６－苄氨基嘌呤质量浓度为１．０ｍｇ㊃Ｌ－１时，是匍茎百合不定芽诱导的临界值，过高或过低都会抑制不定芽的分化㊂鳞茎的再生㊁增殖与植物生长调节剂的种类㊁质量浓度以及蔗糖的质量浓度有关，也受到相关蔗糖和淀粉合成基因的调控［２０］㊂糖是碳源及渗透压调节剂，蔗糖在植物组织培养中普遍使用，质量浓度范围为１０ １５０ｇ㊃Ｌ－１，其不仅提供植物生长发育所需的能量物质，还可以维持细胞渗透压平衡㊂在百合鳞茎的体外培养过程中，蔗糖是影响鳞茎大小和质量的关键因素㊂陈姝男［２１］在宝兴百合（Ｌｉｌｉｕｍｄｕｃｈ⁃ａｒｔｒｅｉ）鳞茎诱导研究中发现，蔗糖质量浓度为６０ｇ㊃Ｌ－１时，鳞茎的质量增加达到最大值㊂本研究发现，随着蔗糖质量浓度的增加，鳞茎的直径和质量均有所提高㊂但是，当蔗糖质量浓度过高时，鳞茎形态可能出现畸变，当蔗糖质量浓度为６０ ９０ｇ㊃Ｌ－１时，鳞茎膨大效果最好㊂在植物多倍体育种中，选择再生能力和细胞分裂活性强的诱导材料是非常重要的㊂常用诱导材料有种子㊁不定芽㊁幼苗等［２２］㊂Ｃｈｕｎｇｅｔａｌ．［２３］和王凯琪［１４］分别用秋水仙素处理虾脊兰杂交种（ＣａｌａｎｔｈｅｄｉｓｃｏｌｏｒˑＣａｌａｎｔｈｅｓｉｅｂｏｌｄｉ）种子和岷江百合（Ｌｉｌｉｕｍ７５第４期㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀马小鸥，等：匍茎百合再生体系的建立及多倍体诱导ｒｅｇａｌｅ）的鳞片和种子，均获得了四倍体植株㊂本研究以匍茎百合种子为诱导材料，也获得了多倍体植株㊂诱导剂浓度的选择与植物种类㊁诱导部位等因素相关，不同植物对秋水仙素的敏感性不同㊂吴婷等［２４］在处理象鼻兰（Ｐｈａｌａｅｎｏｐｓｉｓｚｈｅｊｉａｎｇｅｎｓｉｓ）种子诱导多倍体时发现，当质量分数为０．２０％的秋水仙素处理１ｄ时，可以得到最高的诱导率，为６６．５９％㊂本试验结果表明，当秋水仙素质量分数为０．０３％，浸泡时间为１８ｈ时，种子的成活率最高，达到９３．１５％㊂这表明，高质量分数或长时间的秋水仙素处理会抑制种子的萌发甚至致死，这是由于高质量分数秋水仙素或长时间浸泡对种子产生了毒害效应㊂匍茎百合种子经秋水仙素浸泡诱导后，其四倍体在形态特征和叶绿素质量分数方面表现出明显的变异㊂多倍体与二倍体的差异主要体现在外观表型上，多倍体植株的叶片往往较大较厚，植株较矮㊂本试验中二倍体的叶宽和叶面积均大于四倍体，张天悦［２５］诱导茶用菊多倍体时，处理前后的叶长㊁叶宽没有显著性差异，说明以形态特征不能准确鉴定多倍体，还需要进一步鉴定确认㊂本研究还增加了叶绿素质量分数和叶形指数两种鉴定方法㊂梁倩倩［２６］在诱导西瓜（Ｃｉｔｒｕｌｌｕｓｌａｎａｔｕｓ）多倍体时发现，多倍体的叶形指数较小，崔华蕾等［２７］在分析白榆（Ｕｌｍｕｓｐｕｍｉｌａ）二倍体与四倍体的差异时也表明，叶绿素质量分数可以作为鉴定多倍体的指标㊂本研究表明，匍茎百合经秋水仙素处理后，其叶形指数变小，叶绿素ａ㊁叶绿素ｂ质量分数以及叶绿素总质量分数均显著大于处理前植株㊂综合多种鉴定方法可以验证最初的变异植株中，有一部分是稳定的多倍体㊂不同植物有不同的特性，因此需要选择适合的鉴定方法组合㊂４ 结论匍茎百合不定芽诱导㊁小鳞茎膨大培养㊁生根培养对蔗糖质量浓度㊁植物激素种类和质量浓度要求都有差异，综合试验结果分析，匍茎百合最佳不定芽诱导培养基为ＭＳ培养基＋６－苄氨基嘌呤（６－ＢＡ）１．０ｍｇ㊃Ｌ－１＋萘乙酸（ＮＡＡ）０．７ｍｇ㊃Ｌ－１＋蔗糖３０ｇ㊃Ｌ－１；最佳小鳞茎膨大培养基为ＭＳ培养基＋蔗糖６０ｇ㊃Ｌ－１；最佳生根培养基为０．５倍浓度的ＭＳ培养基＋萘乙酸０．４ｍｇ㊃Ｌ－１＋吲哚丁酸（ＩＢＡ）０．１ｍｇ㊃Ｌ－１㊂用不同质量分数的秋水仙素诱导匍茎百合种子后，通过形态学㊁生理学和流式细胞仪鉴定得到４个四倍体植株和１６个嵌合体植株，其四倍体在形态特征和叶绿素质量分数方面表现出明显的变异㊂结果表明，用质量分数为０．０３％的秋水仙素浸泡１８ｈ，种子的成活率最高，为９３．１５％㊂其中，在秋水仙素质量分数为０．０５％，浸泡时间为１８ｈ时，诱导出２株四倍体；在秋水仙素质量分数为０．０５％，浸泡时间为３６ｈ时，诱导出２株四倍体㊂其余１６株均为嵌合体㊂参㊀考㊀文㊀献［１］㊀赵祥云，王树栋，陈新霞，等．百合［Ｍ］．北京：中国农业出版社，２０００．［２］㊀傅立国，陈潭清，郎楷永，等．中国高等植物：第１３卷［Ｍ］．青岛：青岛出版社，２００２．［３］㊀ＬＩＡＮＧＳＹ，ＴＡＭＵＲＡＮ．Ｌｉｌｉｕｍ［Ｍ］／／ＦｌｏｒａｏｆＣｈｉｎａ．Ｂｅｉｊｉｎｇ：ＳｃｉｅｎｃｅＰｒｅｓｓ；Ｓｔ．Ｌｏｕｉｓ：ＭｉｓｓｏｕｒｉＢｏｔａｎｉｃａｌＧａｒｄｅｎＰｒｅｓｓ，２０００．［４］㊀ＭＣＲＡＥＥＡ．Ｌｉｌｉｅｓ：ａｇｕｉｄｅｆｏｒｇｒｏｗｅｒｓａｎｄｃｏｌｌｅｃｔｏｒｓ［Ｍ］．Ｐｏｒｔ⁃ｌａｎｄ：ＴｉｍｂｅｒＰｒｅｓｓ，１９９８．［５］㊀ＰＲＯＳＣＥＶＩＣＩＵＳＪ，ＲＡＮＣＥＬＩＥＮＥＶ，ＤＡＭＢＲＡＵＳＫＡＩＴＥＤ．Ｃｙｔｏｇｅｎｅｔｉｃａｎａｌｙｓｉｓｏｆｐｒｏｇｅｎｙｄｅｒｉｖｅｄｆｒｏｍａｌｌｏｔｒｉｐｌｏｉｄｉｎｔｅｒ⁃ｓｐｅ⁃ｃｉｆｉｃｈｙｂｒｉｄｓｏｆＬｉｌｉｕｍ［Ｊ］．Ｂｉｏｌｏｇｉｊａ，２００７，５３（２）：８－１２．［６］㊀ＮＯＲＴＨＣ，ＷＩＬＬＳＡＢ．Ｉｎｔｅｒ⁃ｓｐｅｃｉｆｉｃｈｙｂｒｉｄｓｏｆＬｉｌｉｕｍｌａｎｋｏｎ⁃ｇｅｎｓｅｆｒａｎｃｈｅｔｐｒｏｄｕｃｅｄｂｙｅｍｂｒｙｏ⁃ｃｕｌｔｕｒｅ［Ｊ］．Ｅｕｐｈｙｔｉｃａ，１９６９，１８：４３０－４３４．ｄｏｉ：１０．１００７／ＢＦ００３９７７９３．［７］㊀苏丹美，李娟，郭先林，等．匍茎百合的细胞地理学分析［Ｊ］．西北植物学报，２０２１，４１（２）：３２３－３３０．［８］㊀ＳＨＥＲＩＤＡＮＷＦ．ＴｉｓｓｕｅｃｕｌｔｕｒｅｏｆｔｈｅｍｏｎｏｃｏｔＬｉｌｉｕｍ［Ｊ］．Ｐｌａｎ⁃ｔａ，１９６８，８２（２）：１８９－１９２．［９］㊀ＡＲＺＡＴＥ⁃ＦＥＲＮÁＮＤＥＺＡＭ，ＮＡＫＡＺＡＫＩＴ，ＯＫＵＭＯＴＯＹ，ｅｔａｌ．Ｅｆｆｉｃｉｅｎｔｃａｌｌｕｓｉｎｄｕｃｔｉｏｎａｎｄｐｌａｎｔｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎｆｒｏｍｆｉｌａｍｅｎｔｓｗｉｔｈａｎｔｈｅｒｉｎｌｉｌｙ（ＬｉｌｉｕｍｌｏｎｇｉｆｌｏｒｕｍＴｈｕｎｂ．）［Ｊ］．ＰｌａｎｔＣｅｌｌＲｅｐｏｒｔｓ，１９９７，１６（１２）：８３６－８４０．［１０］㊀赵祥云，程廉，邢尤美，等．百合珠芽组培及脱毒研究［Ｊ］．园艺学报，１９９３，２０（３）：２８４－２８８．［１１］㊀刘选明，周朴华，屈姝存，等．百合鳞片叶离体诱导形成不定芽和体细胞胚［Ｊ］．园艺学报，１９９７，２４（４）：３５３－３５８．［１２］㊀张杰，李洋，孙红梅．ＬＡ系列百合 Ｅｙｅｌｉｎｅｒ 花器官组培快繁技术研究［Ｊ］．西北植物学报，２０１４，３４（９）：１８９４－１８９９．［１３］㊀张静．百合体细胞和雄配子体染色体加倍的研究［Ｄ］．南京：南京林业大学，２００７．［１４］㊀王凯琪．基于两种不同外植体的岷江百合多倍体诱导研究［Ｄ］．延安：延安大学，２０２１．［１５］㊀曹嘉雯．软枣猕猴桃多倍体诱导及倍性鉴定［Ｄ］．长春：吉林农业大学，２０２２．［１６］㊀陈杰，周军，孙正海，等．组织培养结合秋水仙素诱导滇杨多倍体的研究［Ｊ］．云南农业大学学报，２０１３，２８（２）：２５１－２５６．［１７］㊀许洁婷，王月，唐克轩，等．麝香百合花部组织离体培养与植株再生［Ｊ］．上海交通大学学报（农业科学版），２００８，２６（１）：１３－１６．［１８］㊀樊敏，唐亚玲，王莉，等．兰州百合不同外植体植物组织培养［Ｊ］．农业与技术，２０２１，４１（１８）：２６－２８．［１９］㊀张旭红，王頔，梁振旭，等．欧洲百合愈伤组织诱导及植株再生体系的建立［Ｊ］．植物学报，２０１８，５３（６）：８４０－８４７．［２０］㊀张雪敏，李佳敏，康圣楠，等．百合鳞茎发生发育研究进展［Ｊ／ＯＬ］．分子植物育种［２０２３－０９－２５］．ｈｔｔｐ：／／ｋｎｓ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ／ｋｃｍｓ／ｄｅｔａｉｌ／４６．１０６８．Ｓ．２０２２０７２８．１２０５．００８．ｈｔｍｌ．［２１］㊀陈姝男．宝兴百合组织培养和试管鳞茎膨大研究［Ｄ］．雅安：四川农业大学，２０１８．［２２］㊀刘志杰，郑妍，牛伟康，等．两种野生铁线莲多倍体诱导与鉴定［Ｊ］．北方园艺，２０２２（１８）：５２－５９．［２３］㊀ＣＨＵＮＧＭＹ，ＫＩＭＣＹ，ＭＩＮＪＳ，ｅｔａｌ．ＩｎｖｉｔｒｏｉｎｄｕｃｔｉｏｎｏｆｔｅｔｒａｐｌｏｉｄｓｉｎａｎｉｎｔｅｒｓｐｅｃｉｆｉｃｈｙｂｒｉｄｏｆＣａｌａｎｔｈｅ（Ｃａｌａｎｔｈｅｄｉｓ⁃ｃｏｌｏｒˑＣａｌａｎｔｈｅｓｉｅｂｏｌｄｉｉ）ｔｈｒｏｕｇｈｃｏｌｃｈｉｃｉｎｅａｎｄｏｒｙｚａｌｉｎｔｒｅａｔ⁃ｍｅｎｔｓ［Ｊ］．ＰｌａｎｔＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙＲｅｐｏｒｔｓ，２０１４，８（３）：２５１－２５７．［２４］㊀吴婷，葛红，杨树华，等．秋水仙素诱导象鼻兰种子产生多倍体［Ｊ］．北方园艺，２０２２（２）：７１－７８．［２５］㊀张天悦．秋水仙素诱导的多倍体茶用菊的生物学特征研究［Ｄ］．泰安：山东农业大学，２０２３．［２６］㊀梁倩倩．西瓜多倍体的诱导及其倍性鉴定的研究［Ｄ］．杨凌：西北农林科技大学，２００９．［２７］㊀崔华蕾，郭欢欢，杨丽晓，等．二倍体及多倍体白榆叶片形态与光合特性分析［Ｊ］．黑龙江农业科学，２０２３（３）：６８－７２．８５㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀东㊀北㊀林㊀业㊀大㊀学㊀学㊀报㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀第５２卷。
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［］ １ 吴学尉 ， 李树 发， 熊
丽， 等．云南 野生百合 资源分 布现状及保护
利用 ［ ］ 植 物遗传 资源学报 ， ０ ，（ ）３ ７— ３ ． Ｊ． ２ ６７ ３ ： ０ ２ ３０ ［ ］ ｉ ， ｅ Ｗ Ｒ Ａ ｓ ｄ ｏ ｈｌ ｉ ｌ ｈｒ ｔ ｓ Ｎ ｈ ｎ ｓ ２ Ｋｍ Ｙ Ｓ Ｌ ｅ ． ｕｙ ｆ ｒ ｏ ｇ ａ ｃａ ｃ ｒ Ｏ ｅ ｅｕ ｔ ｏｍ ｐ ｏ ｃ ａ ｅ ｔ ｇ
基 础 上 演 化 变 异 的类 型 ， 有 待 于进 一 步 研 究 。另 一 方 面 ， 这 研
Ｏ
８
６
４
２
０
以花粉粒形状 、 网纹 深度 、 网脊瘤状颗粒 排列情 况 、 萌发
沟大 小 、 轴 长 Ｅ、 ／ 赤道 Ｐ Ｅ等 ６个 形 态 指 标 得 到 各 花 粉 形 态 代 码表 （ ２ 。 表 ）
每种 花 粉 测 量 ｌ ０粒 ， 量 极 轴 长 Ｐ， 道 测 赤
花粉 ， 花粉撒于导 电胶带 上 ， 台上 喷镀 金属膜 ， 有代表 将 样 取
性的群体 ， 行扫描 电镜拍 照 ， 进 对赤道 面 、 面及纹饰 等进行 极 观察 、 测量 。统 计 每种 花粉 的赤道 轴 长 、 轴 长； 极 并记 录花
中提供帮助 ， 特表感谢 。
百合属花粉粒形态呈两侧 对称 ， 面观为长椭 圆形到椭 极
圆形 ， 赤道面观 大部分 为近 圆形。均 为单 萌发 沟 ， 延伸 至两
吴学尉等 ： ８种野生百合的花粉形态及聚类分析
较均一 、 列紧密的瘤状颗粒 组成 ， 排 颗粒界 限明显 ， 网眼连接
处 颗 粒 变 大 。基 柱 宽 １９ Ｉ ． ｍ。 ｘ
供试百合材料为百合野生种或变种， 编号及采集地见表 １ 。
表 １ 供试 百合材料 基本情 况
１ ２ 研 究方 法 ．
Байду номын сангаас
粉的形态及外壁 纹饰特点 ， 包括花粉粒形状 、 网纹形态 、 条纹 选取经干燥处理后的百合 花药 ， 出 压
１２ １ 花粉形态 观察 ．．
类型 、 花粉颗粒大小及均匀程度 、 网孔排布 、 赤道轴长 、 赤道轴 长／ 极轴长 。在观察花粉粒形态时 ， 为扩 大观察数量 ， 辅
１８． ９ ３
图２ ８ 个百合 野生种 花粉形 态聚类分析
［１刘 １］
英， 赵连杰 ， 于
海． 种荷 兰百合品种 花粉形态 的电镜观 ５
３ 结果 与讨 论
察 ［］ Ｊ ．沈阳农业 大学学报 ， ０ ，１ ２ ： １ ２ ３ ２ ０ ３ （ ）２ — ２ ． ０ ２ ［２ 张西丽．几个百 合品种 花粉 电镜观察 及其 亲缘关 系分析 ［ ］ １］ Ｊ．
理百合与其他 ６个种分成一组 。卷瓣组的卷丹 、 川百合 、 兰州 百合分别与百合组 的文 山百合 、 岷江百合 和泸定百合 分成不 同的组。川百合 与其变种兰州百合准确地聚到了一起 。
［ Ｋ ｓｎ ｏＶ Ｎ． ｏｔｂ ｔ ｎ ｅｐｌ ｎｍｏ ｈｌ ｙａｄｔｘｎｍ ３］ ｏｅｋ Ｃ ｎｒ ｕｉ ｓｔ ｔ ｏｅ ｒ ｏｏ ｎ ｏｏ ｙｏ ｉ ｏ ｏｈ ｌ ｐ ｇ ａ ｆ
ｂ ｄ ） 亚洲百合（ ｓ ｔ ｙ ｉ ｓ 、 ｉｓ、 ｒ Ａ ｉ ｉ Ｈ ｂｒ ） 麝香百合 （ ｏｇｆｒｍ Ｈ — ａｃ ｄ Ｌｎ ｉｏｕ ｙ ｌ
ｂｄ） ｉ ｆ ｓ 杂种系 １ 品种及 ２个 野生百合 种的花粉形 态 ； ０个 李
景奇等报道 了 ９种野生百合 的花粉形态 ； 王欣 等用光学 显
我 国是百合属植物 的主要分布 中心 ，０ 以上 的野生 百 ５％
合在我 国有 自然分布 ， 中５ ％以上的野生 百合在云南省有 其 ０ 分布… 。随着百合切花生产和种球 生产面 积的 日益扩 大 ， 越 来越多的人开始关 注和研究 百合 。前期 ， 百合的分类 研究 主
要 集 中在 形 态 学 和 园 艺 性 状 上 。 花 粉 因 其 不 受 外 界 环 境 影
容易产生偏差 ， 只有在对细胞学 、 同功酶、Ｔ 、 Ｆ Ｐ等方 面作 ＩＳ Ａ Ｌ 充分研究 ， 再结合形态 学资料进行综合分析 ， 方可得出真正客 观的结论 。对 此 ， 张西丽研究百合 花粉 － 袁 涛等研究芍 药 － 、 花粉 、 郭先锋 等研 究 芍药 花粉 、 守 标等 研 究石 蒜 花 周
育种 重点实验室基金 。 作 者简介 ： 吴学尉 （９ ７ ） 男 ， １７ 一 ， 云南 大姚人 ， 助理研究 员， 从事百 合
育种 、 切花栽培及 花卉采 后研究 。Ｔ ｌ （８ １ ５ ９ ３ ０ ｅ： ０ ７ ） ８５ ２ ；Ｅ—ｍ ｉ： ａｌ
ｗｕ ｕ ｗ ｉ ３ ３＠ ｇ ｉ． Ｏ 。 ｘ ｅ ｅ２ ２ ｍａ ｌ Ｃ Ｂ
表 ２ 百 合 花 粉 形 态 代 码
究结果也表现了某种程度 的不一致性 ， 卷瓣 组大理百 合与其
他 ４个种分离开， 是否说 明大理 百合与其 他种的遗传组 成上
交流很少 ， 相似程度较低 ， 还是说明孢粉学分类具有一定的片 面性 。因此 ， 单凭孢粉学一方 面的证据下结论往往不全面 ， 并
聚类分析 ， 得到了百合属这 ３ 个组植 物的合理进化关系 ， 明花粉形 态对区分百合属的某些种具有一定参考价值 。 表
关键词 ： 生百 合 ； 野 花粉形态 ；聚类分析 中图分类号 ： ６２ ２ ５ ０ Ｓ ８ ． ６ ． １ 文献标 志码 ： Ａ 文章编号 ：０ ２～１０ （ ０ １ ０ ０９ ０ １０ ３ ２ ２ １ ） ３— １７— ３ 微镜 和扫描电子显微镜研究 了渥丹百合种 内 １ ０个居群 的花
［］ ７王
欣， 雷家军 ， 关婧竹． 渥丹百合种 内花粉多样性研 究［ ］ Ｊ ．黑
龙江农业 科学 ，０ ７ １ ：７— ９ ２０ （）４ ４ ．
［］ ８ 吴祝华 ， 季森 ， 施 席梦利 ， ． 等 百合种质资源花粉 形态及亲缘关 系 研究［ ］ Ｊ ．浙江林学院学报 ， ０ ， （ ） ４ ６ ４ ２ ２ ７２ ４ ： — １． ０ ４ ０
响， 能够较客观地反映 物种的进 化关 系
， 近年来 ， 随着扫
变种 ， 通过百合花粉形态扫描电镜 图的观察 比较 ， ３个组间 对
的进化关系进行 聚类分析 ， 为百合 品种选育提供依据。
１ 材 料 与 方 法
１ １ 供 试 材 料 ．
描 电镜 技术 的发展 ， 电镜越 来越多 地应用 于花粉 分类研究 。 曾小英等应用 扫描 电镜分析 了东方百合 杂种系 （ ｒ ｎａ Ｈ — Ｏ ｉ ｔ ｙ ｅ ｌ
准化采用标准差标准化 ， 采用 Ｓ Ｓ统计 软件 的 ｃ ｓ 进 行 聚 Ａ ｌｔ ｕｅ
类分析 。 ２ 结 果 与 分析 ２ １ 百 合 属植 物花 粉 形 态特 征 ．
通信作者 ： 王继华 。Ｅ—ｍａ ： ０ ０ ＠ｇ ｉ ｃｒ。 ｉ ｈ ５５ ｍａ ．ｏ ｌ ｌ ｎ
致谢 ： 本试验承蒙 云南 农业科学 院花卉研究所 的李 树发在野外采 集
（． １ 云南省农业科学 院花卉研究所 ， 云南昆明 ６ ００ ； ． ５２ ５ ２ 云南农业大学 ， 云南昆明 ６０ ０ ） ５２１
摘要 ： 应用扫描 电镜对野生百合属百合组 、 钟花组和卷瓣组 的 ８ 个野生 百合种 （ 变种 ） 的花粉形状 、 大小 、 外壁纹 饰等作了 比较研究 。结果表 明， 几种百合花粉形状 皆呈椭球形或长椭球形 ， 形状较为一致 ， 沟萌发孔 ， 具单 沟延伸到两 端 ； 同种或 变种 的花粉粒 在大小 、 不 网纹 等性状上存在 不同程度的差异 。在 花粉形态性状 比较基础 上 ， 通过 Ｓ Ｓ软件 Ａ
Ｌｌ ｍ Ｌ ｉ ｏｅ ［ ］ ｏｅｎＪｕｎｌ ｆ ｌｎ ａｏｏ ｙ １ ９ ２ ｉｕ ．ｎＫ ｒａ Ｊ ．Ｋ ｒａ ｏｒａ ｏ ａｔ ｘｎｍ ，９０，０ ｉ Ｐ Ｔ
（ ） １５—１８ ３ ：６ ７．
采用表 ２资料 ， 在统计 软件 Ｓ Ｓ中的 ｃｕｔｒ Ａ ｌｓ 进行 聚类分 ｅ 析 （ ２ 。由图 ２可见 ， 图 ） 钟花组 的玫红百合单 独分成 一组 ， 大
以光学显微镜观测 。求常见值和变异幅度 （ ２ ） ｎ＝ ０ 。
１２ ２ 聚类 分 析 ．．
轴长 Ｅ， 取平均值。数量性状 直接 以所 测得值 进行赋值 。非 数量性状赋值 方法 ： 二元性 状的编码 将 ２个 状态分别 以… ０’
和… ’ １ 表示 ， 肯定状态为“ ” 否定状态 为“ ” 有序多态性 状 １， ０ ； 按顺序进行编码 ； 序多态性状 经过分解进行 编码 。数据标 无
江苏农业科学 ２ １ 年第 ３ 卷第 ３ ０１ ９ 期
吴学尉， 王丽花 ， 张艺萍， ８种野生百合 的花粉形 态及 聚类分析［ ］ 等． Ｊ ．江苏农业科学 ， １ ，９ ３ ： ７ １９ ２ １３ （ ） １ — ９ ０ ９
一 ｌ７一 ９
８种野生百合 的花粉形态及 聚类 分析
吴 学尉 王 丽花 ， ，张 艺萍 ，崔光 芬 ，王继 华 ，吴丽芳 ‘ ，范眸天
收稿 日期 ：０ ０— ７— ７ ２ １ ０ ０ 基 金 项 目：国 家 科 技 支 撑 计 划 （编 号 ：２０ Ｂ Ｄ １ １０ ０ ６ Ａ ０ Ａ ８３、 ２０ Ｂ Ｉ Ｂ １２ ０ Ｂ Ｄ ５ ０ ；国家公 益性农 业行业 专项 （ ０ ７ ＡＭ５ ０ 、０ ７ Ａ ４ Ｂ ２） 编 号 ：０ ９３ ２ ） ２ ００ ０ ０ ；云南 省科技计划 （ 编号 ：０６ Ｇ ４） 云南省花 卉 ２０ Ｎ １ ；
［］ ９ 王伏雄 ， 钱南芬 ， 张玉龙．中国植物 花 粉形态 ［ ．２版．北 京： Ｍ］
０ １ ＯＢ２ ０ Ｂ Ｂ３ ０ ０ ０ ０Ｂ８ ０ Ｂ４ Ｂ６ Ｂ７ Ｂ５
科 学出版社 ，９ ５ １— ３ １９ ： ６ ． ［Ｏ 王 开 发， 宪 曾．孢 粉学 概论 ［ ．北京 ： 京 大学 出 版社 ， １］ 王 Ｍ］ 北