检验科微生物实验室作业指导书和相关制度

细菌室工作守则

1.每日工作前用紫外线照射实验室半小时以上。

2.入室前应穿工作服，并做好实验前的各项准备工作。

3.实验室内应保持肃静，不准吸烟、吃东西及用手触摸面部。尽量减少室内活动，以免引起风动，无关人员禁入。

4.非必要物品禁止带入实验室，必要资料和书籍带入后，应远离操作台。

5.做好标本的登记、编号及试验记录。未发出报告前，请勿丢弃标本。

6.标本处理及各项试验应在操作间进行，接种环用完后应立即火焰灭菌，沾菌吸管、玻片等用后应浸泡在消毒液内。

7.实验时手部污染，应立即用过氧乙酸消毒或浸于3%来苏儿溶液中5-10分，再用肥皂洗手并冲洗干净；如误入口内，应立即吐出，并用1:1000高锰酸钾溶液或3%双氧水漱口，根据实际情况服用有关药物。

8.实验过程中，如污染了实验台或地面，应用3%来苏儿覆盖其上半小时，然后清洗；如污染工作服，应立即脱下，高压灭菌。

9.若出现着火情况，应沉着处理，切勿慌张，立即关闭电闸，积极灭火。易燃物品（如酒精、二甲苯、乙醚和丙酮等）必须远离火源，妥善保存。

10.工作结束时检查电器、酒精灯等是否关闭，观察记录培养箱、冰箱温度及工作情况，用浸有消毒液的抹布将操作台擦拭干净，并将试剂、用具等放回原处，清理台面，未污染的废弃物扔进污物桶，有菌废弃物应送高压灭菌后处理。

11.离室前工作人员应将双手用消毒液消毒，并用肥皂和清水洗净。

12.爱护仪器设备，经常清洁，注意防尘和防潮。

细菌室消毒隔离措施

1.每天工作前用消毒液消毒工作台，上班前、下班后开紫外灯（最少半小时）进行空气消毒。

2.非必要品禁止带入实验室，必要资料和书籍带入后，应远离操作台。

3.使用后的载玻片、盖片、平皿、试管等用消毒液浸泡，经煮沸后清洗或丢弃。

4.试验后的血液标本用消毒液浸泡后煮沸消毒，所有用于试验的反应板、吸头等用消毒液浸泡（至少24小时以上）后清洗或丢弃。

5.所有微生物培养物（细菌、支原体、真菌等培养物），不管标本阳性或阴性均用消毒液浸泡后，经煮沸消毒，才能清洗或丢弃。

6.取材、最好采用一次性工具，不能采用一次性工具者，每次取材前均应彻底消毒。

7.用于浸泡各种器械如刮菌刀、持物钳、镊子等的消毒液要定期更换。

8.不慎发生临床标本或培养物污染工作台，不要立即用水冲洗，应先用纸巾、布等敷料加上消毒液（如5%石炭酸、3%来苏儿等）消毒30分钟以上，然后再清洗。如污染工作服，应立即脱下，高压灭菌。

9.实验时手部污染，应立即用肥皂洗手并冲洗干净，再外用消毒药水，如误入口内，应立即吐出，并用1:1000高锰酸钾溶液或3%双氧水漱口，必要时根据实际情况服用有关药物。

检验科微生物实验室安全与防护

在工作区内禁止饮食，吸烟和存放食物及使用化妆品。

实验室里应保持整洁，不存放与工作无关的杂物。

工作台每天至少用消毒剂清洁一次，在溢渗传染物后要立即消毒、清洗；

进入无菌室必须穿工作服，戴口罩、帽子。

在各种操作进程中均应尽量避免或减少气溶胶产生。

实验工作区禁止无关人员出入，尤其要严禁儿童进入。

工作人员在处理传染性物质或动物之后，以及在离开实验室时要洗手。

凡发生溢漏事故或接触传染性物质后，均应立即报告实验室监督员或实验室主任，并做好书面记录及采取相应措施。结核杆菌的培养及标本涂片务必在生物安全柜里操作。

9. 有涉及感染性材料的操作应在生物安全柜中进行，如结核杆菌培养、感染性组织等。

10. 工作人员在进入实验室工作区前，应在专用的更衣室（或缓冲间）穿着背开式工作服或其它防护服。工作完毕后必须脱下工作服，不得穿工作服离开实验室。可再次使用的工作服必须先消毒后清洗。

11. 工作时必须戴手套（两副为宜）。一次性手套必须先消毒后丢弃。

12. 在实验室中必须配备有效的消毒剂、眼部清洗剂或生理盐水，且易于取用。可配备应急药品。

细菌室内质控制度

每位工作人员必须加强质控意识，以质量控制工作为核心，认真做好各项质控试验和记录。加强质量控制和专业理论知识的学习，规范操作，正确分析处理结果。

一旦发现失控，及时采取相应措施，纠正失控结果。

每批自配或购置的培养基、生化鉴定等试剂必须用标准菌株A TCC27853、A TCC25923、ATCC25922质控。合格方可使用，并作好记录。

每周进行药敏试验质量控制。对每批微量药敏板、培养基、药敏纸片必须用ATCC27853、ATCC25923、ATCC25922菌株进行质控，并做好记录，出现问题及时分析，采用相应措施。每天观察培养箱、CO2培养箱、冰箱的温度，并做好记录。

无菌间每周监测一次，三氧机、紫外线消毒灭菌情况，并做好记录。

每三个月用ATCC27853、ATCC25923、ATCC25922菌株对全自动微生物分析仪进行鉴定和药敏质量控制。

认真讨论、分析每次参加卫生部室间质评结果。总结经验教训。

临床微生物及实验室的医院感染管理

检验科医院感染管理应达到以下要求:

工作人员必须穿工作服,戴工作帽,必要时穿隔离衣，胶鞋，戴口罩,手套。

使用合格的一次性检验用品,用后进行无害化处理。

严格执行无菌技术操作规程,静脉采血必须一人一针一管一巾一带;微量采血应做到一人一针一管一片;对每位病人操作前洗手或手消毒。

无菌物品如棉签,棉球,纱布等及其容器应在有效期内使用,开启后使用时间不得超过24小时.使用后的废弃物品,应及时进行无害化处理,不得随意丢弃。

各种器具应及时消毒,清洗;各种废弃标本应分类处理(焚烧,入污水池,消毒或灭菌)。

报告单应消毒后发放。

检验人员结束操作后应及时洗手,毛巾专用,每天消毒。

保持室内清洁卫生.每天对空气,各种物表及地面进行常规消毒.在进行各种检验时,应避免污染;在进行特殊传染病检验后,应及时进行消毒,遇有场地,工作服或体表污染时应及时处理,防止扩散,并视污染情况向上级报告。

菌种、毒种按《传染病防治法》进行管理。

实验室的医院感染管理参照检验科的管理要求.实验动物应严格管理,防止逃逸或造成人与实验室动物的交叉感染;实验后的动物必须焚化进行无害化处理。

细菌鉴定和药敏试验操作按全国临床检验操作规程。

负责鉴定及签发报告的主管技术人员应通晓诊断细菌学的全面知识。

从事细菌专业技术人员，应了解医院监测知识，掌握其检测方法，定期统计分析医院感染细菌分布，耐药变迁，并将其结果反馈临床。

细菌室工作人员均应具备细菌传染、消毒、灭菌知识。

细菌专业人员不断更新知识，了解细菌学检验新进展。

定期或随时与临床联系，主动参与病例讨论了解病情及治疗情况，达到细菌检验与临床的密切联系。

每天发出的微生物报告应认真复审，分析报告、评价报告。

工作人员加强有菌观念，无菌操作。

当工作环境被细菌污染，必须立即消毒处理，报告主管人员，采取必要措施。

10工作人员被细菌培养物污染应消毒处理，必要时给予药物治疗，并向主管负责人报告，采取特殊措施。

无菌间规章制度

每一个工作人员必须树立无菌观念，严格进行无菌操作。

在无菌室内必须戴帽子、口罩，进行无菌操作。

每天早上8：00—8：30用紫外线消毒或在凌晨4-6点用多功能机消毒2小时，每月检查一次紫外灯的无菌效果。

无菌室内各种废弃物品必须煮沸消毒。

实验完毕后，用含氯制剂1000mg/L消毒桌面、地面。

菌（毒种）管理办法

1.菌种保管应有专人负责，保存于冰箱中，房门专人加锁，确保菌种安全。保管人员变动

时，必须严格交接手续。

2.2、菌种应有严格的登记，包括形态，分离日期，鉴定日期，签发者，主要鉴定性能（包