诱导性多能干细胞的研究进展
干细胞治疗时代到来
工作 。这也为之后干细胞在临床 中的应用做好基础 性的工作 。
开启干细胞产业大门
２ ０ １ ２ 年５ 月 １ ７ １ ３，加拿大卫生部批准了 Ｏ ｓ ｉ ｒ ｉ ｓ 公司生产的”伯如凯茂 ”干细胞药物上市销售。 该药成为世界上第一款经发达国家批准 的用于 治疗异体抗宿主病 的非处方间充质干细胞药物 ，并 获得 了在该领域长达 ８ 年半的独家生产类似产品的 排他性权利 。这种药物主要针对急性移植物抗宿主 病 （ 器官移植后 的排异反应症 ）、克罗恩病 、急性 放射性并发症 、Ｉ 型糖尿病、急性心肌梗死 和肺病
太重要 了， 有 了ｉ Ｐ Ｓ 细胞 ， 一些严重的风湿病 、 瘫痪 、 脊髓受伤等疾病才有了被治愈的可能。
近期 ，山 中伸 弥与 Ｌ ｉ ｎ ｕ ｘ 操作 系统 创 始人 努斯 ・ 托 尔 瓦 兹 共 同荣 获 了 ２ ０ １ ２ 千 年 技 术 奖 。这 一 奖 项
每两年颁发一次 ，以表彰在科研或发明领域取得重 大成就 的个人或 团体。此外 ，山中伸弥也于去年在
化 成 多种 功 能 细胞 ，因此 干 细胞 在 医疗 中具 有 广泛
Ｎ Ｅ Ｗ Ｂ Ｕ Ｒ Ｅ Ａ Ｕ
新 局
的应用空 间。比如骨髓 间充质干细胞在体内或体外 特定的诱导条件下 ， 可分化为脂肪 、 骨、 软骨 、 肌肉、 肌腱 、 韧带 、 神经、 肝、 心肌 、 内皮等多种组织细胞 ， 可作为理想的种子细胞用于衰老和病变引起的组织 器官损伤修复。 但到 目前 ，全球范围内干细胞移植疗法大多数 还处 于临床 试验阶段 ，其 中进入三期临床 的有 ３ ０ 多个产 品。主要临床研究集 中于骨科 、皮肤 、心血 管 、癌症 、糖尿病 、创伤修复、血液病 、泌尿系统 、
慢病毒介导的绿色荧光蛋白报告基因对人多能干细胞的生物风险评估研究
工 作 液 、Blebbistatin购 自 安 徽 中 盛 溯 源 生 物 科 技 有 限 公 司 ； 2 m M 谷氨酸盐,0.18 pM p- 巯 基 乙 醇 和 10 mM Y-27632)培养
Matrige丨 购 自 美 国 Coming 公 司 ；Ubi-MCS-EGFP] RES- 8 天 ，形成拟胚体( embryonic body,E B ),将 这 些 E B 铺 到 0.1%
A 通 讯 作 者 ：聂 魏 ，主 要 研 究 方 向 ：干 细 胞 与 组 织 重 建 ，E - m a i l :dr.xinnie@
( 收稿丨J 期 ：2020-丨2 - 2 3 接 受 日 期 :202丨-01-1 8 )
现 物 医 学 Progress in Modern Biomedicine VoL21 NO.12 JUN^021
GFP)报 告 基 因 在 研 究 中 的 应 用 十 分 普 遍 ，且具有其独特的优 势161其 中 慢 病 毒 载 体 由 于 其 整 合 基 因 组 的 特 性 ，其在感染时可 以 有 效 地 将 其 遗 传 物 质 引 入 靶 细 胞 ，可 在 细 胞 或 组 织 中 长 期 稳 定 表 达 目 标 蛋 丨 广 泛 应 用 于 基 W转染m 。但对于慢病毒的安全 性一直存在疑虑，是 否 对 0 标细胞的生物学特性产生不良影响 也较少报道。本 研 究 的 目 的 是 通 过 慢 病 毒 构 建 稳 定 表 达GFP 的 hiPSC,并 验 证 G F P 是否影响细胞的多能性和分化能力。
Green Fluorescence Protein Reporter Gene Labeled Human Induced Pluripotent Stem Cells Using Lentivirus*
成体干细胞向起搏细胞诱导分化的研究进展
ｒ ｅ ｇ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｌ ａ ｇ ｏ ｍｏ ｒ ｐ ｈ ｓ ［ Ｊ ］ ．Ｍｏ ｌ Ｂ ｉ ｏ Ｅｖ ｏ ｌ ，１ ９ ９ ７， １ ４ （ ８ ） ： ７ ７ ９ — ７ ８ ９ ．
Ｋｅ Ｙ ，Ｓ ｕ Ｂ，Ｓ ｏ ｎ ｇ Ｘ ，ｅ ｔ ａ １ ． Ａｆ ｒ ｉ ｃ ａ ｎ ｏ ｒ ｉ ｇ ｉ ｎ ｏ ｆ ｍｏ ｄ ｅ ｒ ｎ ｈ ｕ ｍａ ｎ ｓ ｉ ｎ
Ｍｕ ｓ ａ ｎ ｏ ｖ ｉ ｃ Ｊ ， Ｆ ｉ ｌ ｉ ｐ ｏ ｖ ｓ ｋ ａ － Ｍｕ ｓ ａ ｎ ｏ ｖ ｉ ｃ Ｍ， Ｋｏ ｖ ａ ｅ ｅ ｖ ｉ ｃ Ｌ，ｅ ｔ ａ １ ．Ｄｅ ｔ ｅ —
（ 编 辑 ：黄 会 龙 ）
成 体 干 细胞 向起 搏 细胞 诱 导分 化 的研 究进 展
２ ０ １ １， １ ８ （ ６ ）：３３ — ３ ４ ．
Ｊ ｏ ｏ ｓ ｔ Ｓ ， Ｖｕ ｉ ｌ ｌ ｅ ｕ ｍｉ ｅ ｒ Ｓ ， ］ ｅ ｎ ｓ ｅ ｎ Ｊ Ｄ， ｅ ｔ ａ １ ．Ｕｎ ｃ ｏ ｖ ｅ ｒ ｉ ｎ ｇ ｔ ｈ ｅ ｇ ｅ ｎ ｅ ｔ ｉ ｃ
ｂ ａ ｓ ｉ ｓ ｏ ｆ ａ ｄ ａ ｐ ｔ ｉ ｖ ｅ ｃ ｈ ａ ｎ ｇ ｅ： ｏ ｎ ｔ ｈ ｅ ｉ ｎ ｔ ｅ ｒ ｓ ｅ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ ｌ ａ ｎｄ ｓ ｃ ａ ｐ ｅ
ｐ ｏ ｐ ｕ ｌ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ［ Ｊ ￣ ．Ｉ ｎ ｔ Ｊ Ｌ ｅ ｇ ａ ｌ Ｍｅ ｄ ， ２ ０ １ １ ， １ ２ ５ （ ６ ） ： ８ ９ ５ — ９ ０ ０ ． ［ ２ ６ ］ 桂宏胜 ， 杨丽 ， 李 生斌． 群体遗传学研 究中 Ｓ Ｔ Ｒ数据 的统计方法应 用口］ ． 遗传 ， ２ ０ ０ ７ ， ２ ９ （ １ ２ ） ： １ ４ ４ ３ — １ ４ ４ ８ ． ［ － ２ ７ ］ 单元春 ， 刁红雨． 群体遗传学分析软件 的应用 现状 ＿ Ｊ ］ ． 首都 医药 ，
RNA结合蛋白LIN28的研究进展
原性谱系，在分化过程中它们表达ＬＩＮ２８。然而，处
于控制中的胚胎干细胞，当有异种胚胎形成时， ＬＩＮ２８下调。这些结果提示，ＬＩＮ２８在肌肉中有着重 要的组织特异性功能。
Ｐｏｌｅｓｓｋａｙａ等旧¨发现，ＬＩＮ２８连接到多核糖体层
的翻泽起始复合物上可增强蛋白合成的效率，ＬＩＮ２８ 在肌细胞中的表达增加了分化的效率，这提示ＬＩＮ２８
鉴定了用于此抑制的ＬＩＮ２８必需区域，此发现确立
了前体的末端环在ｍｉＲＮＡ成熟过程中的调节作用， 提供了ＬＩＮ２８负性调节ｌｅｔ－＇／加工的机制。最近的研
变体中，Ｌ２期大量细胞的特异性分化消失，１３期的
细胞和后期细胞的发育出现成熟。Ｌａｕ等¨２１提出 ＬＩＮ２８的阶段特异性是由２个遗传通路所调节的。
・３０５５・
ＲＮＡ结合蛋白ＬＩＮ２８的研究进展
周红梅△
（江都市人民医院血库，江苏江都２２５２００） 中图分类号：１１３９２．Ｉｌ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００６－２０８４（２００９）２０－３０５５－０４
摘要：ＲＮＡ结合蛋白（ＲＢＰ）是决定细胞分化、活动力和其他过程的调节子。Ｌ１Ｎ２８是一 种高度保守的ＲＢＰ，在线虫和高等物种中有着复杂的调节机制和表达方式。它对微小ＲＮＡ 表达的调节、骨髂肌及心肌分化、肿瘤形成、多潜能诱导等多种发育的重要事件中起关键作 用。本文就ＬＩＮ２８的研究进展予以综述。 关键词：ＲＮＡ结合蛋白；ＬＩＮ２８；胚胎干细胞；诱导性多潜能细胞；微小ＲＮＡ
中ＬＩＮ２８的阻抑发生于转录后，且受ｕＮ４、ＬＩＮｌ４的 调控‘１引。
２
ＲＮＡ联结模体：冷休克结构域（ｃｏｌｄ
ｓｈｏｃｋ ｄｏｍａｉｎ， ｆｉｎｇｅｒ ｍｏ—
ＣＳＤ）和一对反向的ＣＣＨＣ锌指模体（ｚｉｎｃ
ｔｉｆｓ，ＺＦＭ），在哺乳动物中，以多种类型富集于未分化 的细胞中，ＬＩＮ２８影响分化中特殊ＲＮＡ的翻译和稳 定性…。
2种诱导 iPSC 向神经干细胞分化方法的比较
2种诱导 iPSC 向神经干细胞分化方法的比较杨坦;刘华;汪运山【摘要】目的：整体比较2种促进诱导性多能干细胞（ induced pluripotent stem cells ， iPSC）向神经干细胞（neural stem cells，NSC）分化的方法，确定一种稳定、高效的获得NSC的方法，并对NSC进行系统鉴定。
方法：方法A：SB431542和drosomophorin的浓度均为5μmmol／L，诱导初始密度100％；方法B：SB431542的浓度为5 mmol／L， drosomophorin的浓度为1 mmol／L，诱导初始密度为40％。
比较及鉴定方法：镜下观察诱导获得NSC的状态；real-time PCR比较神经干细胞相关基因Pax6、nestin、Sox1、Sox2等表达量；流式细胞术分析诱导第16天Pax6阳性率；免疫荧光定性分析神经干细胞相关蛋白的表达及其自发分化的能力。
结果：方法A获得的NSC悬起后成球趋势明显，圆形，透明；方法B诱导获得NSC形状不规则，色灰暗。
Real-time PCR结果证明方法A诱导获得的细胞神经干细胞相关基因的表达量高于方法B。
流式细胞术分析证明第16天，PAX6的阳性率，方法A高于方法B。
经鉴定，方法A获得的神经干细胞高表达Pax6、nestin、Sox2等基因自发分化30 d，形成明显的神经纤维束，表达TUJ-1、MAP2及GFAP等神经元和胶质细胞的特异性标志物。
结论：方法A整体优于方法B，我们推荐方法A作为诱导iPSC向神经干细胞分化的方法。
%AIM:To select an efficient way of promoting induced pluripotent stem cells ( iPSC) to differentiate into neural stem cells (NSC) by comparing 2 methods.METHODS:The culture system in method A contained SB431542 (5 mmol/L) and drosomophorin (5 mmol/L) with 100%initial cell density, while that in method B contained SB431542 (5 mmol/L) and drosomophorin (1 mmol/L) with 30%~50% initial cell density.Forcomparison and identification of the 2 methods, the growth state was observed under microscope , and the expression of Pax6, nestin, Sox1 and Sox2 was quantitatively detected by real-time PCR and flow cytometry .The related protein expression and the ability of spontaneous differentiation were determined by immunofluorescence analysis .RESULTS: The cells derived from method A with 5 mmol/L of SB431542 and drosomophorin and 100% initial cell density achieved the higher expression of Pax 6, nestin, Sox1 and Sox2.The growth state was better and the cells differentiated into neurons and astrocytes normally .CONCLU-SION:The method A was superior to method B , and we recommend the method A with 5 mmol/L of SB431542 and droso-mophorin and 100%initial cell density as the method for differentiating NSC .【期刊名称】《中国病理生理杂志》【年(卷),期】2015(000)001【总页数】5页(P188-192)【关键词】诱导性多能干细胞;分化;神经干细胞【作者】杨坦;刘华;汪运山【作者单位】山东省医学科学院基础医学研究所，济南大学-山东省医学科学院医学与生命科学学院; 山东大学附属济南市中心医院中心实验室;山东大学附属济南市中心医院中心实验室; 山东省移植与组织工程研究中心，山东济南250013;山东大学附属济南市中心医院中心实验室; 山东省移植与组织工程研究中心，山东济南250013【正文语种】中文【中图分类】R33-3神经干细胞(neural stem cells, NSC)可用于建立神经系统疾病的细胞模型，因此在神经系统疾病的机制及治疗的研究中日趋重要[1]。
干细胞的提取和培养方法介绍
干细胞的提取和培养方法介绍干细胞被广泛认为是生物学领域内最具潜力的研究对象之一，因其具备自我更新和多能分化的能力而备受科学家关注。
为了更好地理解干细胞在生物体内的作用和应用其潜力进行研究，有效的提取和培养方法是至关重要的。
本文将介绍几种常见的干细胞提取和培养方法，包括胚胎干细胞（ESC）、诱导性多能干细胞（iPSC）、成体干细胞和间充质干细胞。
胚胎干细胞（ESC）是最早被发现的一类干细胞，具有自我更新以及多能分化的特性。
提取ESC的方法通常是通过将内细胞团从早期胚胎中分离出来并将其培养在基质上，如鹅卵石胎盘或凝胶基质中。
内细胞团是胚胎早期形成的一层细胞，可以发展成各种不同类型的细胞，如肌肉、神经和心脏细胞。
随着科学技术的进步，科学家发现可以通过重新编程细胞来生成诱导性多能干细胞（iPSC）。
iPSC具有和胚胎干细胞相似的自我更新能力和多能分化能力，但不需要从胚胎中获得。
iPSC的提取方法主要包括细胞重新编程，即通过转导特定的基因或使用李斯特病毒进行基因转移，将成体细胞重新编程为干细胞。
成体干细胞是体内已分化的特定组织或器官中存在的干细胞。
这些干细胞具有自我更新和有限的分化能力。
成体干细胞可以从多种来源中提取，例如骨髓、脂肪组织和肌肉组织。
提取成体干细胞的方法通常是通过穿刺或手术获取组织样本，然后分离和培养出其中的干细胞群。
间充质干细胞是一类存在于成体组织中的多潜能干细胞，可以分化为多种类型的细胞，如脂肪细胞、软骨细胞和骨细胞。
间充质干细胞主要存在于骨髓、脐带血和脂肪组织中。
提取间充质干细胞的方法主要通过采用骨髓穿刺、脂肪组织切割或脐带血采集等操作，然后将提取到的细胞进行培养和扩增。
无论是胚胎干细胞、诱导性多能干细胞、成体干细胞还是间充质干细胞，提取和培养方法都需要遵循一些基本原则。
首先，细胞提取过程应该尽量避免对细胞的损伤，以确保细胞的完整性和功能。
其次，培养环境应提供适当的营养物质、生长因子和细胞外基质，以促进干细胞的增殖和分化。
体细胞重编程和干细胞技术
体细胞重编程和干细胞技术近年来，体细胞重编程和干细胞技术已成为生物医学领域中备受关注的热点。
这两种技术都能够帮助人们更好地理解人类生命的奥秘，并为人们提供更多的治疗方法。
本文将从两种技术的定义、原理、应用以及前景等多个方面进行探究。
一、体细胞重编程技术体细胞重编程技术，指通过外源性基因表达的转录因子，导致体细胞转化为多能干细胞（也称为诱导性多能干细胞或iPS细胞）。
这种技术的出现颠覆了传统干细胞研究中必须依赖于胚胎的限制，让科学家可以获得大量的以非胚胎干细胞为来源的多能干细胞。
体细胞重编程技术的原理是让四个转录因子（Oct4、Sox2、Klf4和c-Myc）重新表达，从而在体细胞中引起多能性基因的表达和敲除，通过最终调整染色体上的表观遗传模式，使细胞重建能够分化为体内所有类型的成体细胞。
这种重编程技术的产物称为iPS细胞，其多能性和自我复制能力可以与胚胎干细胞媲美，而且不涉及胚胎的使用，避免了伦理争议和道德问题。
iPS细胞还可以通过排除原始DNA序列中的缺陷来减少用于治疗的干细胞数量，这样可以减少对供体干细胞的需求，加速干细胞的应用领域。
体细胞重编程技术的应用前景非常广阔。
它可以用于研究疾病的成因和治疗方案的开发，还可以用于人工再生器官和组织的研究和制备。
同时，这种技术也可以用于替代动物试验，因为研究者们现在可以通过使用iPS细胞来制定与人类病变相关的模型。
此外，还可开发新药、修复受损组织、治疗遗传疾病等方面都有很大的潜力，是生物医疗领域未来的重要发展方向。
二、干细胞技术干细胞是一种能够自我复制并分化为不同细胞类型的生物细胞。
干细胞主要分为两种：胚胎干细胞和体细胞干细胞。
胚胎干细胞是从人类胚胎的内细胞团中分离出来的，因此对于胚胎干细胞研究产生了很大的争议和伦理风险。
同时，由于大量的细胞需要损坏胚胎，这部分干细胞的创建道德问题不断受到争议。
不同于胚胎干细胞，体细胞干细胞是指已分化的细胞，如肌肉细胞、神经元和皮肤细胞等，在特定细胞环境下仍具有干细胞的能力。
人类诱导性多能干细胞技术指导手册
人类诱导性多能干细胞（iPS 细胞）技术指导手册目录：1. 前言 ............................................................................................................................ 12. 人类胚胎成纤维细胞培养............................................................................................. 23. 重编程载体构建........................................................................................................... 34.病毒包装 .................................................................................................................... 45.人类iPS 细胞的诱导.................................................................................................... 66. iPS 细胞鉴定 .............................................................................................................. 86.1碱性磷酸酶活性检测 (8)6.2干细胞表面marker 的免疫染色检测 .................................................................... 9 6.3干性因子的去甲基化程度分析........................................................................... 10 6.4干细胞内源基因的表达分析 .............................................................................. 13 6.5端粒酶活性检测................................................................................................. 14 6.6核型检测 ........................................................................................................... 15 6.7拟胚体形成........................................................................................................ 15 6.8畸胎瘤形成实验................................................................................................. 15 7．干细胞技术培训及服务一览表................................................................................... 158．附录 ......................................................................................................................... 161. 前言iPS 细胞最初从成纤维细胞重编程而来，因为它们准备和操作相对简单。
IPS技术手册
人类诱导性多能干细胞（iPS细胞）技术指导手册目录：1.前言 (1)2.人类胚胎成纤维细胞培养 (2)3.重编程载体构建 (3)4.病毒包装 (4)5.人类iPS细胞的诱导 (6)6.iPS细胞鉴定 (8)6.1碱性磷酸酶活性检测 (9)6.2干细胞表面marker的免疫染色检测 (9)6.3干性因子的去甲基化程度分析 (11)6.4干细胞内源基因的表达分析 (13)6.5端粒酶活性检测 (14)6.6核型检测 (15)6.7拟胚体形成 (15)6.8畸胎瘤形成实验 (15)7．干细胞技术培训及服务一览表 (15)8．附录 (16)1.前言iPS细胞最初从成纤维细胞重编程而来，因为它们准备和操作相对简单。
其他细胞类型，包括来自外胚层、中胚层和内胚层的细胞也可以用于产生iPS细胞（Eminili et al2008）。
2006年Yamanaka和Takahashi利用逆转录病毒系统在成鼠的成纤维细胞导入四个转录因子（Oct3/4,Sox2,c-Myc,和Klf4，Yamanaka因子），将其重编程为iPS细胞，它具有跟小鼠ES十分相似的特性，尤其重要的是，iPS细胞也能产生后代。
2007年，iPS技术在人类体细胞中得以应用，人类iPS 细胞的产生对退行性疾病的治疗产生巨大的影响（Takahashi et al;Yu et al,2007）。
由于iPS细胞具有和ES类似的功能，却绕开了胚胎干细胞研究一直面临的伦理和法律等诸多瓶颈，因此在医疗领域的应用前景非常广阔，成为干细胞研究的热点，《自然》和《科学》杂志分别将其评为2007年第一和第二大科学进展。
随后，iPS细胞的研究日新月异。
.近几年来，iPS研究方面取得的一系列的重大成果让我们欣喜不已，然而，这才刚刚开始，iPS细胞能真正用于临床惠及大众还面临着很多技术上的问题。
一方面iPS产生的方法有待改进；另一方面iPS细胞的定向分化手段需继续探索。
斯丹赛干细胞生物技术公司拥有成熟稳定的胚胎干细胞/iPS细胞技术平台，将竭力为全国各类进行干细胞/iPS研究的科研机构、高校、相关医疗机构和制药企业等提供高品质产品和优质的服务。
热点04 遗传前沿科技(原卷版)
热点04 遗传前沿科技(情境预测+重难诠释+限时检测)情境预测生物科技的重要进展与突破已经在解决有关健康、医药、材料、能源、环境、气候变化和人口增长等全球问题方面展现了巨大前景，关键性、前沿性、交叉性、颠覆性技术发展引起各国高度关注，积极布局新一代基因组技术、合成生物技术、微生物组技术、生物成像技术研发。
尤其是基因组学技术不断突破，引领基因组研究从“读取”进入到“编辑”和“编写”时代。
近几年的诺贝尔奖多次涉及基因表达或基因编辑的相关内容。
命题点：①基因打靶；②基因编辑；③诱导多能干细胞；④细胞自噬的机制和相关基因表达(预测命题点)。
重难诠释诱导性多能干细胞，把Oct3/4、Sox2、C－myc和Klf4这四种转录因子基因克隆入病毒载体，然后引入小鼠成纤维细胞，发现可诱导其发生转化，产生的iPS细胞在形态、基因和蛋白表达、表观遗传修饰状态、细胞倍增能力、类胚体和畸形瘤生成能力、分化能力等方面都与胚胎干细胞相似。
与经典的胚胎干细胞技术和体细胞核移植技术不同，iPS技术不使用胚胎细胞或卵细胞，因此没有伦理学的问题。
利用iPS技术可以用病人自己的体细胞制备专有的干细胞，所以不会有免疫排斥的问题。
基因打靶是一种利用同源重组方法改变生物体某一内源基因的遗传学技术。
这一技术可以用于删除某一基因、去除外显子或导入点突变，从而可以对此基因的功能进行研究。
基因编辑技术指能够让人类对目标基因进行定点“编辑”，实现对特定DNA片段的修饰。
基因编辑依赖于经过基因工程改造的核酸酶，也称“分子剪刀”，在基因组中特定位置产生位点特异性双链断裂(DSB)，诱导生物体通过非同源末端连接(NHEJ)或同源重组(HR)来修复DSB，因为这个修复过程容易出错，从而导致靶向突变。
这种靶向突变就是基因编辑。
基因编辑以其能够高效率地进行定点基因组编辑，在基因研究、基因治疗和遗传改良等方面展示出了巨大的潜力。
植物基因的靶向修饰是基因编辑应用最广泛的领域。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
资料显 示 ： 用 高通 量 检 测 手段 ， ｉＳ ｓ 人 Ｅ 利 对 ＰＣ、 ｓ细
胞以及 成纤维 细胞 的 ｍＲ Ａ表达 谱 、 Ｒ Ａ表达谱 、 Ｎ ｍｉＮ
Ｈ ３甲基化 谱 、 因组稳定 性等等 进行 了 比较 ， 基 结果 发 现 ｉＳ ｓ Ｐ Ｃ 与人 Ｅ Ｃ在 ｍＲ Ａ表 达水 平存在 显著差异 ， Ｓ Ｎ
因子导 人 已分化 的小 鼠皮 肤 成 纤 维 细胞 ， 而 获 得 进 了类似 于 Ｅ Ｓ细胞 的多能 性干细胞 ， 一研究 明确 地 这
证实 了分化的细胞 可 以通 过 少数 几 个 因子 的外 源 导 人而被 重编程到具有 多 能性 的状 态 。２ ０ ０ ７年 ， ａ ａ Ｔ ｋ． ｈｓｉ Ｙ ａｈ 和 ｕ等 ’ 别 报 道 了成 功 获 得 人 的 ｉＳ ｓ 分 Ｐ Ｃ 系 。此 后 ， 相继有 多个研究 小组分别 将小 鼠肝细胞 和
三 、 Ｓ ｓ 人 类 疾 病 中 的 应 用 ｉ Ｃ在 Ｐ
实验鼠的四倍 体互 补试 验 则证 明 了 ｉＳ ｓ 备 和 Ｅ ＰＣ 具 ｓ
同样 的发育潜 能 。因此 ｉＳ ｓ Ｐ Ｃ 在细胞 形态 、 长 生 特性 、 干细胞标志 物表达 等方 面与 Ｅ Ｓ细胞非 常相 似 ， 形成嵌合体动物方面也与 Ｅ ｓ细胞几乎完全相 同。
・
医学 嗣 沿 ・
诱导 性 多能干 细 胞 的研究 进 展
刘 雪霞 诱 导 性 多 能 干 细 胞 （ｎ ｕ ｅ ｕｉｏ ｎ ｔ ｉｄ ｃｄ Ｐ ｌ ｐｔ ｔｓ ｍ ｒ ｅ ｅ ｃｌ ， Ｓ ｓ 是 通过基 因转染 技 术将某 些 转 录 因子导 ｅ ｓｉ Ｃ ） ｌ Ｐ 李建远
的光芒 时 ， 威斯 康星大 学张素 春教授 研究发 现 ， ． ｉ Ｐ Ｓｓ Ｃ 即便 是那 些不用 导人外 源基 因诱 导 的 ｉＳ ｓ Ｐ Ｃ 比对
应的 Ｅ Ｓ细 胞 的 分化 的 、 效率 和 忠 实 度 低 。而且 ， 有
经祖 细 胞 、 经 干 细 胞 和神 经 前 体 细 胞 诱 导 为 ｉ． 神 Ｐ
而且早 代 ｉＳ ｓ Ｐ Ｃ 与晚代 ｉＳ ｓ 比 ， ＰＣ 相 这个差 异更 明显 ， 相 反在 甲基 化 或 小 Ｒ Ａ 水平 ， 者 的差 异 不 显 著 。 Ｎ 两
将 ４种基 因种植 皮肤 细胞 ， 以此 促 使细 胞转 变 ¨’ｊ ” 。 不论是作 为载体 的病 毒 ， 还是 种 植 的基 因 ， 具 有 致 都
二 、 Ｓ ｓ 胞 定 向分 化 研 究 ｉ Ｃ 细 Ｐ
科 学家 们尝 试利 用病 态 的细胞诱 导成 ｉＳ ｓ从 ＰＣ， 而使 这种 细胞成 为 研究 疾 病 的最 佳 模 型 。科 学 家 可
制备方 法 的优化 及病人 特异 ｉＳ ｓ系 的建立 ， 向分 ＰＣ 定 化， 在人 类疾病 中的应用进 行综述 。
一
、
ｉＳ ｓ细 胞 制 备 方 法 的 优 化 及 病 人 特 异 ｉ． ＰＣ Ｐ
Ｓ ｓ系 的 建 立 Ｃ
２０ ０ ６年 ，Ｔ ｋ ｈｓｉ Ｙ ｍ ｎｋ … 将 几 个 转 录 ａａ ａｈ 和 ａ ａ ａａ
入 动物或人 的体 细胞 ｃｌ， Ｓ 样 的 多 潜 能 细 胞 。 ｅ ｂｙｎｃ ｔ ｅ Ｅ ） ｅ ｌ
由于其 在生物 医药及临床 方面 的广阔前 景 ， 许多研 究
人员都 开始着手 进行 ｉＳ ｓ Ｐ Ｃ 的研究 。现 主要就 ｉＳ ｓ Ｐ Ｃ
胃上 皮 细 胞 、 岛 细 胞 、 末 分 化 的 Ｂ淋 巴 细 胞 、 胰 终 神
从 ｉＳ ｓ Ｐ Ｃ 首次 在实验 动物 中诞 生 ， 到建立方法 的 逐渐完 善 ， 再到 ｉＳ ｓ Ｐ Ｃ 细胞 研究在 人类 细胞 中获得 成
功 ，最后到应 用 于疾 病 模 型 动 物 的 治疗 ，整 个 过 程 只用 了短短 几 年 时 间。就 在 ｉＳ ｓ被赋 予 无 与 伦 比 ＰＣ
癌等风 险。这标 志 着 ｉＳ ｓ Ｐ Ｃ 研究 向 临床 应 用 迈 出 了
重要一步 。 同时 ， 白质 和 维生 素 Ｃ的应用 将 ｉＳ ｓ 蛋 Ｐ Ｃ 的低诱导效 率迅 速提 高 ， 次利 用 ｉＳ ｓ克隆 出活体 首 ＰＣ
这都 意 味着在 把 ｉＳ ｓ可靠 地 用 于 临 床环 境 之 前还 ＰＣ 需 要解决更 多 的问题 。
干细 胞 的 致命 缺 点 （ 率 低 ， 要 大 量 卵细 胞 ； 立 效 需 建 胚胎 干细胞 系需要 破 坏胚 胎 ， 引起 道德 伦 理 争议 ； 目
前 尚无 人核移植 多 能 干细 胞建 系 的成 功报 道 ） 利 用 ， 这一技 术人们 可 以制造 特定病 人 来源 的 ｉＳ ｓ 可 望 ＰＣ ， 用“ 个性 化 ” 的移植来 治疗诸 多疾病 。 ２０ ０ ９年 ， ｉＳ ｓ 人 Ｐ Ｃ 成功诱 导分 化成为 造血细胞 和 内皮 细胞 ， 管 不 同 的 ｉＳ ｓ系 诱 导 分 化 的 效 率 不 尽 ＰＣ 同， 但是 来 自新 生儿 、 年 、 青 成人 的 ｉＳ ｓ Ｐ Ｃ 系其 分化 模 式类似 ｓ。２ ０ ｌ ］ ０ ９年美 国加州大学 洛杉矶 分校科 学家 首次将 人体 ｉＳ ｓ 导 分 化成 电活 跃 的运 动 神 经 细 ＰＣ 诱 胞 。成功 将人 ｉＳ ｓ 效 分化 成 能分 泌胰 岛素 的 ＰＣ 高 成熟胰 岛细胞 和肝细胞 的报道 也相 继 出现 。
Ｓｓ Ｃ 。此外 ， 学 家们 还 建立 了疾 病 特异 性 或 患 科 者特异 性 的 ｉＳ ｓ系 ’ ０ ９年 英 国、 拿 大 以 ＰＣ １ 。２ ０ １ ３ 加
及美 国的研 究 团队分别报 道了不借 助病毒获 得 ｉＳ ｓ Ｐ Ｃ
的 方 法 ， 此 前 ， 得 ｉＳ ｓ的 方 法 都 需 要 利 用 病 毒 而 获 ＰＣ