菌种的制作

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(3)粪草培养基:粪草95%、麦麸3%、蔗糖1%、 石膏粉1% 方法:粪草比1:1,要先经过堆积发酵15-18天, 其间翻堆2-3次,晒干截短。
(4)稻草培养基:稻草80%、麦麸或米糠18%、 蔗糖1%、石膏1%
方法:先将稻草切成3cm长的小段,用水浸湿, 堆积1-2天,待稻草吸水软化后,拌入麦麸或米 糠、石膏粉、蔗糖、含水量在65%左右。
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二、 菌种的制作
菌种是指经人工培养并可供进一步繁殖或栽 培使用的食用菌菌丝体。 食用菌的种型主要分固体菌种和液体菌种两 类。我国目前食用菌栽培中所用的菌种绝大 部分为固体菌种,液体菌种尚未在生产上大 面积应用。
菌种分三级,即母种、原种和栽培种。
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(一)母种的制作
母种又称一级种,就是从各种菌类的子实体(即菇体或 耳片)上直接分离(组织分离或孢子分离)而得到的第 一代菌丝体或扩大繁殖而成的试管斜面菌种。
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2 、灭菌
原种培养基装瓶后应立即进行灭菌: 高温高压:121℃ 、1小时 常温常压:100℃ 、8-10小时
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3 、接种培养
母种扩接为原种方法是:用接种铲从试管母 种上挑取一块带有培养基的菌丝体,放在原种培 养基上,一支母种可接4-5瓶原种,接种完毕,送 至培养室培养,约1个月长满瓶。
装至袋的3/5左右。 4、打孔;装好料后,从袋中央用木棒打一孔,
孔距底部2~3cm为止。 5、捆袋口 6、消毒与灭菌:卧式高压锅。 7、接种培养
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接种
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三、菌种的扩大与培养
(一)接种技术及扩大 食用菌的接种均要求无菌操作,无菌条件包括
如下: 接种空间需彻底灭菌。 菌种暴露和通过的空间应是无菌区。 试管口、瓶口应用酒精灯火焰封闭。 各种工具与菌种接触前应灭菌。棉塞或封口物取
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(二)原种(二级种)
把培养好的优良母种菌丝体,移接到谷粒,木屑, 粪草或棉籽皮等原料制成的培养基上,得到的菌种为原 种。原种可以进一步扩大繁殖栽培种(三级菌种)。
不同菇类,原种培养成分不同。谷粒种是大多数食 用菌菌种都可采用的培养原料。
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1 、常用培养基
(1)麦粒原种培养基:适合除银耳以外的木腐、草 腐菌类
第三章 菌种的制作
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食用菌菌种质量的优劣,直接影响到栽培的成 败和产量的高低及产品质量的优劣。
优良的菌种应具备两个条件:一是种性好—— 高产、优质、抗逆性强;二是纯度高——无病 虫感染。
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一、菌种生产的主要设备
(一)接种设备:用来分离和扩大各级菌种的专用 设备。主要有:
1、接种室:又称无菌室。分接种间和缓冲间。 接种间5-6平方米即可,缓冲间3平方米。接种间 与缓冲间的门应设在错开的方向上,并采用左右 移动的拉门。防止开门对外界空气直接进入接种 间,其内分别安装紫外灯及日光灯。
配方:麦粒(谷粒、高粱、玉米)98%,CaCO32% 方法:麦粒浸泡数小时,煮沸15-20分钟,一般以 麦粒熟而不烂,透明发亮的程度为好。加碳酸钙拌 匀,装瓶即可。另外,麦粒中还可添加一些辅料, 如0.1%的MgSO4和KH2PO4 。
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(2)木屑(棉子皮)培养基:适合于香菇、平菇、 银耳、木耳等木腐菌。 配方:棉子皮(木屑)78%、麦麸(米糠)20%、 蔗糖1%、石膏1%、料水比1:1.2~1.3。 方法:先将蔗糖用少量水溶化,然后和杂木屑、 麦麸、石膏粉等拌和,拌均匀后装袋或装瓶,原 种多用瓶装。
丝的方法,一种无性繁殖法。 ①挑选种菇:一般要求是第一潮菇,发育健壮,无病 虫害,成熟度适当。
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②菇体消毒:将选出的子实体菌柄基部切除,置接种箱内, 用75%酒精对菇体表面进行消毒。
③组织分离:用无菌刀自菌柄处切开或手指将菇体掰开, 用接种钩或镊子在菌柄和菌盖交界处取一小块组织迅速移 接到新鲜母种斜面培养基的中央,置适温下培养几天后长 出新的菌丝体,即为母种。
注:营养全面的培养基不宜作保藏菌种用。
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2、分装
将已煮好的培养基趁热分装于试管中,装量为试管 长度的1/5,塞上松紧适宜的棉塞,将塞好棉塞的试管每 7-10支绑扎成一捆,顶端用牛皮纸包扎好,以防棉塞被 打湿。注意分装时不得使培养基粘在试管的口壁上,以 防污染。捆好后置于手提式高压灭菌锅中,121℃保持30 分钟。灭完菌后将试管取出,趁热摆成斜面。凝固后将 试管在恒温箱中培养2天,若无杂菌生长,即可使用。
安全阀,适合试管培养基灭菌用,以火力或电力为能源。 (2)立式高压灭菌锅:除有压力表,放气阀、安全阀,
还有进出水装置,容量也不大,适合小规模生产或原种 培养基灭菌用。 (3)卧式高压灭菌锅
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3 、常压灭菌灶:适合农村大规 模生产用,要求容量大,耗能 少,造价低,灭菌彻底,大多 自行设计制造。
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(二)培养菌种设备
指用来放置和培养各级菌种的专用设备,包括: 1、培养室:进行菌种恒温培养的房间。保证低温季
节能升温,高温季节能降温,室内应设置有分层 的培养架和干湿球温度计,以充分利用室内空间 和掌握培养室的温湿度。 2 、培养箱:又称恒温箱,一般用于培养试管斜面 菌种和少部分原种。
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(三)灭菌设备
有干热灭菌设备和湿热灭菌设备,包括以下几种: 1 、干热灭菌器:一种能加热到200℃的电热恒温干燥箱,
或称烤箱。一般用于接种用的玻璃器皿和金属器皿, 加热到160℃保持1-2小时,即可达到灭菌要求。
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2 、高压灭菌锅:有以下几种 : (1)手提式高压灭菌锅:结构简单,有压力表,放气阀、
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3、接种和培养
接种需要在无菌的环境中以无菌操作方法 进行接种,以减少污染。接种后,贴好标签, 放到恒温箱内(温度为该菌要求的最适温度) 一般培养3天后,检查有无杂菌生长,5—7天 菌丝即可长好。
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4、菌种分离方法
(1)孢子分离法: (2)基内菌丝分离法: (3)组织分离法:是指利用子实体组织来分离获得纯菌
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3、原种接栽培种: 菌种生产的再扩大。一瓶原种可扩接40~50袋栽培种。
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(二)接种后的培养
各级菌种接种完成后,需在适宜的环境条 件下进行培养。一般少量的可在恒温箱内培养, 大量的则在培养室内培养架上培养。
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配方1:马铃薯(去皮)200克、葡萄糖(蔗糖) 20克、琼脂18-20克、维生素B12片、硫酸镁0.5 克、磷酸二氢钾1克、水1000毫升。
配方2:马铃薯(去皮)200克、葡萄糖(蔗糖) 20克、琼脂18-20克、玉米粉30~40克、水1000 毫升。
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方法:称好土豆,去皮切成小块,加水1000毫升, 煮沸20~30分钟,用双层纱布过滤,取其滤液,加入 琼脂用文火加热使其溶化,再加葡萄糖或其它物质, 最后补足水量至1000毫升。
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百度文库
1 、母种培养基的制作
①土豆琼脂糖(PDA)培养基 配方:马铃薯(去皮)200克、葡萄糖20克、琼脂 18-20克、水1000毫升。
②土豆琼脂蔗糖培养基(PSA) 配 方 : 马 铃 薯 ( 去 皮 ) 200 克 、 蔗 糖 20 克 、 琼 脂 18-20克、水1000毫升。
③马铃薯综合培养基:以PDA或PSA为基础,再添加 一些营养物质
出后不能接触非灭菌的物体。
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1、母种的转接: 用接种钩从一支菌种试管中取一小块带
菌丝培养基,接种到另一支待接斜面试管培 养基中央,置恒温下培养,即可长成母种。 通常一支试管母种可转接20~30支试管。
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2、母种接原种: 是菌种生产的扩大过程。从分离得到的母种,由于数量
有限,不能满足生产上的需要,应进行扩大繁殖培养。 一支试管种可接4~5瓶原种。
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2、 接种箱:又叫无菌箱。用木材和玻璃制 成的密闭箱子,有单人操作和双人操作两种。
3、超净工作台:操作简便,是一种局部净 化的设备,接种不受无菌空间的限制,但价 格昂贵。
4、 接种工具:接种针、接种环、接种刀、 接种铲、接种钩、镊子等。
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(三)栽培种的制作
用原种接种出来的菌种称栽培种,一瓶棉籽皮 可扩接40~50袋,配方同上。 步骤: 1、拌料:按比例称好各营养成分,将棉籽皮与麦 麸先混合在一起,糖、过磷酸钙混合在拌料用的 水中,搅拌均匀后,泼撒在棉籽皮上,混匀。
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2、测含水量:料水比:1:1.2~1.3。 3、装袋:装入聚丙烯袋中,边装边压实,一直
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