平卧菊三七中绿原酸提取及纯化工艺的优化

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平卧菊三七提取物降尿酸活性的物质基础分析

平卧菊三七提取物降尿酸活性的物质基础分析

平卧菊三七提取物降尿酸活性的物质基础分析马文婧;付桂明;赵富强;林素钦;万茵【期刊名称】《食品科学》【年(卷),期】2024(45)8【摘要】为探究平卧菊三七降尿酸活性物质基础,评价不同乙醇体积分数(0%、30%、70%)回流提取对平卧菊三七提取物有效成分含量、黄嘌呤氧化酶(xanthine oxidase,XOD)抑制能力及抗氧化活性的影响,利用非靶向代谢组学技术对提取物进行物质鉴定分析,同时,建立次黄嘌呤和氧嗪酸钾造模的高尿酸血症小鼠模型,以XOD抑制活性较高的30%醇提物和70%醇提物进行体内降尿酸效果评价。

结果表明,提取物的XOD抑制活性和总黄酮、总有机酸含量呈显著正相关(P<0.05、P<0.01),超氧阴离子自由基清除能力与总酚含量呈显著正相关(P<0.01)。

非靶向代谢组学共检测出705种差异代谢物,结合体外实验结果,推测柚皮素、1,5-二咖啡酰奎宁酸、α-亚麻酸、阿魏酸、香叶木素等物质为平卧菊三七降尿酸关键物质。

30%和70%醇提物均可通过降低血清尿酸和抑制XOD缓解高尿酸血症(P<0.01),且一定程度上缓解高尿酸血症带来的肝脏氧化损伤。

本研究通过体内和体外实验验证平卧菊三七具备降尿酸活性,对平卧菊三七降尿酸物质基础进行探讨,为平卧菊三七降尿酸活性物质的制备和功能食品开发提供理论依据。

【总页数】11页(P134-144)【作者】马文婧;付桂明;赵富强;林素钦;万茵【作者单位】南昌大学食品科学与资源挖掘全国重点实验室;南昌大学国际食品创新研究院【正文语种】中文【中图分类】R284【相关文献】1.平卧菊三七提取物体外抗氧化活性研究2.平卧菊三七提取物抗氧化活性研究与抗氧化特征成分的HPLC-MS/MS分析3.UPLC-Q-TOF-MS法分析平卧菊三七抗补体活性及活性部位4.平卧菊三七提取物对2型糖尿病大鼠肝肾功能的影响因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

平卧菊三七各提取物抗痛风作用的实验研究

平卧菊三七各提取物抗痛风作用的实验研究

江西中医药大学学报201 8年4月第30卷第2期JOURNAL OF JIANGXI UNIVERSITY OF TCM2018 Vol. 30 No. 2平卧菊三七各提取物抗痛风作用的实验研究★许溪何鹿玲1王木兰1龚琴1冯育林M杨世林2李俊…***(1.中药固体制剂制造技术国家工程研究中心南昌330006 ;2.江西中医药大学南昌330004)摘要:目的:研究平卧菊三七各提取物的抗痛风作用。

方法:腹腔注射尿酸酶抑制剂氧嗪酸钾建立小鼠高尿酸血症模型,灌胃 给予平卧菊三七各提取物,用磷钨酸法检测动物血清中屎酸水平,评价平卧菊三七各提取物的降尿酸作用;腹腔注射冰醋酸,灌胃给予平卧菊三七各提取物,统计小鼠扭体次数,评价平卧菊三七各提取物的镇痛作用;直接涂抹二甲苯,致小鼠耳廓肿 胀,灌胃给予平卧菊三七各提取物,计算小鼠耳肿胀度,评价平卧菊三七各提取物的抗炎作用。

结果:4000mg生药/k g的平卧 菊三七醇提物能显著性降低高尿酸血症小鼠血清尿酸水平,4000mg生药/k g的平卧菊三七水提物、醇提物和水提醇沉物以及 8000mg生药/k g的平卧菊三七水提醇沉物能够显著减少冰醋酸刺激引起的扭体次数;4000mg生药/k g的平卧菊三七水提物、醇提物和水提醇沉物以及8000mg生药/k g的平卧菊三七水提醇沉物能够显著抑制二甲苯致小鼠耳肿胀。

结论:4000mg生药/k g的平卧菊三七醇提物具有较强的抗痛风作用。

关键词:平卧菊三七;高尿酸血症;镇痛;抗炎;痛风中图分类号:R285 文献标识码:BExperimental Study of Gynura Procumbens for Gout in Each ExtractXU Xi1 ,HE Lu - Ung1, W ANG Mu - lan1 ,GONG Qin1 ,FENG Yu - lin12, Y ANG SM - lin12 ,LI Jun121.National Pharmaceutical Engineering Center f or Solid Preparation in Chinese Herbal Medicine, Nanchang 330006 f China;2.Jiangxi University o f Traditional Chinese Medicine,Nanchang330004, China.Abstract:Objective: To investigate the anti - gout ef fe ct in each extraction from Gynura Procumbens. Methods: The hypouricemic ef fec t of Gynura Procumbens in each extrac was investigated in hyperuricemia mice by Intraperitoneal injection the uricase inhibitor Po-tassium Oxonate, The mice were in tragastric f i l l e d by Gynura Procumbens in each extrac,and the Uric Acid levels in mice was detected by phosphotungstic acid method. The method of acetic acid writhing was used to study the antinociceptive property of each extrac from Gynura Procumbens. the mice were intraperitoneal injection of acetic acid and i nt ragastric f i l l e d by Gynura Procumbens in each extrac, and Collect the writhing times of mice, and the anti —inflammatory ef fe ct of Gynura Procumbens in each extrac was observed by the swelling of ear induced by dimethylbenzene directly in mice,The mice were intragastric f i l l e d by Gynura Procumbens in each extrac al­so,and the ear swelling in mice were calculated. Results:The results showed that 4000mg crude drugs/kg of Gynura Procumbens alcohol precipitation can significantly reduced the serum urate levels in hyperuricemia mice;4000mg crude drugs/kg of Gynura Procumbens Water extract ^alcohol precipitation^ w ater extract and alcohol extract and 8000mg crude drugs/kg of Gynura Procumbens water extract and alcohol extract can significantly reduced glacial acetic acid stimulus caused of twist body times ;4000mg crude drags/kg of Gynura Procumbens Water extract^alcohol precipitation,water extract and alcohol extract and 8000mg crude drugs/kg of Gynura Procumbens alcohol precipitation can significantly inhibit xylene to small ra t ear swelling. Conclusion:4000mg crude drugs/kg of Gynura Procum-bens alcohol precipitation has a nti- gout e f f e c t s.*基金项目:江西省教育厅科技计划项目(60852)。

三七总皂苷的提取及纯化

三七总皂苷的提取及纯化
兽 药
三 七 总 皂 苷 的 提 取 及 纯 化
苗 洋 王 广 李朋天 齐 晶 ( 大庆 华科股 份有 限公 司药业 分公 司 131 ) 636
三七主要产于云南、 广西等地 , 其总皂苷 ( N ) P S 具散淤止血 、 活血化淤 、 消肿止痛等功效。为 了避免 三七 根 中淀粉 糊化 , 目前 主要 采 用 醇提 和 提取 液 水
2 小时 , . 5 提取率 9 8 . %。超 临界二氧化碳萃取技术 9 具有萃取能力强 、 提取率高 、 生产周期短等优点 。 减压内部沸腾法 。取 l 克三七粉碎物料于三角 0 瓶 中,加入一定量浓度 乙醇溶液作为解吸剂使之润 湿均匀 ,5 2 ℃静置解 吸 3 分钟时间 ( 0 除了第 2次提 取用的是湿物料外 , 2次提 取 的解 吸操 作 均 七皂 苷 R 、 人参 皂苷 ,人参 、
单位 / ( 克 生药 ) 超声时间 9 分钟 , , 0 加水量 8 倍量。
所 得 三七 提 取液 中总 皂 苷 的含 量 为 1. , 取物 得 03 提 3
皂苷 R b、 人参皂苷 R 和黄酮类为指标 , 正交设计 d 用 法对 3 因素做出优化。得出三七根提取 的最优条 个 件为 , 提取溶剂水 2 倍量 , 0 浸提时间 2 4小时。此种 条 件下 提取 出的三七 总皂 苷抗血 小板 聚集作 用最 强 。
渗漉法。渗漉法是较好的提取方法 , 设备简单 , 操作安全 , 节能降耗 , 少成分破坏 , 减 有煎煮法不可 比拟 的 优点 。据报 道 ,5倍量 的 7 % 乙醇 以 5毫 升 / 1 5
分钟的速度渗漉为最佳提取方案 ,可提取出的三七 总皂苷含量达 1. %, 1 1 提取率 为 9 .%。认 为已基 0 3 1
沉 、 孔 树 脂 纯 化 的工 艺 , 大 乙醇 消耗 量 大 , 效 成 分 有

金银花中绿原酸的提取、分离及纯化工艺研究的开题报告

金银花中绿原酸的提取、分离及纯化工艺研究的开题报告

金银花中绿原酸的提取、分离及纯化工艺研究的开题报告一、选题背景金银花是一种常见的中药材,具有清热解毒、解热祛病、抗菌消炎等多种功效,广泛用于传统中药的制剂中。

其中,绿原酸是金银花中的一种重要有效成分,具有较强的抗氧化、抗癌、抗炎、抗病毒等作用,是一种很有发展前景的天然药物。

目前,金银花提取绿原酸的工艺研究较少,大多数研究都是基于传统的水提法、酒精提法和乙酸乙酯提法等,这些方法都存在绿原酸回收率低、工艺复杂、有机溶剂残留等问题。

因此,本研究将探讨一种新型的金银花中绿原酸的提取、分离及纯化工艺,旨在提高绿原酸的提取效率和纯度,为金银花的开发利用提供科学依据。

二、研究内容及意义(一)研究内容:1. 金银花中绿原酸的特性研究;2. 建立绿原酸的提取、分离及纯化流程;3. 优化提取、分离及纯化工艺参数,并对提取液进行组分分析;4. 对提取液中绿原酸进行纯化和结晶,分别采用重结晶、溶剂结晶等方法进行纯化处理,得到高纯度的绿原酸;5. 对最优工艺进行评估和验证。

(二)研究意义:1. 系统掌握金银花中绿原酸的特性及提取分离纯化技术,为金银花的开发利用提供科学依据;2. 提高绿原酸的提取效率和纯度,从而增加其市场价值;3. 探索一条绿色环保的金银花中绿原酸提取分离纯化新途径,有助于推动中药现代化进程。

三、研究方法和思路(一)研究方法:1. 实验室规模的萃取实验,选用不同有机溶剂作为提取溶剂,优化不同因素对绿原酸提取率的影响;2. 对提取液进行组成分析,采用高效液相色谱仪和质谱仪检测不同组分的含量;3. 对提取液进行纯化处理,采用重结晶、溶剂结晶等方法进行纯化处理,得到高纯度的绿原酸;4. 对最优工艺进行评估和验证。

(二)研究思路:1. 研究金银花中绿原酸的特性,确定其适宜的提取、分离及纯化方法;2. 确定提取液的组成,分析其组分及含量;3. 优化提取、分离及纯化工艺参数,降低操作成本,提高提取效率和纯度;4. 对提取液中的绿原酸进行纯化处理,得到高纯度的绿原酸;5. 对最优工艺进行评估和验证,确定工业化生产技术流程。

金银花中绿原酸的提取工艺

金银花中绿原酸的提取工艺

金银花中绿原酸的提取工艺
金银花是一种常见的中药材,具有清热解毒、消肿止痛等功效。

其中的绿原酸是一种重要的活性成分,具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种生物活性。

因此,绿原酸的提取工艺备受关注。

绿原酸的提取工艺主要包括以下几个步骤:
1. 采集金银花。

在金银花开花期,选择无病虫害、生长良好的金银花进行采集。

采集后应立即进行处理,以保证金银花的质量。

2. 粉碎金银花。

将采集好的金银花进行清洗、晾干后,使用研磨机或者手工研磨器将其研磨成粉末状。

3. 提取绿原酸。

将金银花粉末放入提取器中,加入适量的溶剂(如乙醇、水等),进行浸泡提取。

提取时间和温度应根据实际情况进行调整,通常为2-4小时,提取温度为60-80℃。

4. 过滤和浓缩。

将提取液过滤,去除杂质,然后使用旋转蒸发器或者真空浓缩器将其浓缩至一定浓度。

5. 结晶和纯化。

将浓缩后的提取物进行结晶,得到绿原酸结晶体。

然后使用色谱层析等方法进行纯化,得到高纯度的绿原酸。

以上就是金银花中绿原酸的提取工艺。

需要注意的是,在提取过程中应注意控制温度和时间,以免破坏绿原酸的活性成分。

此外,提取液的pH值也会影响绿原酸的提取效果,应根据实际情况进行调
整。

绿原酸的提取工艺还有待进一步研究和改进,以提高提取效率和纯度,为其在医药、保健品等领域的应用提供更好的支持。

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平卧菊三七中绿原酸提取及纯化工艺的优化摘要:采用超声醇提法从平卧菊三七(Gynura procumbens)中提取绿原酸,设计正交试验考察乙醇体积分数、料液比、pH、超声功率对绿原酸提取率的影响。

通过静态吸附—解吸试验优选适合绿原酸纯化的大孔树脂,并运用单因素试验优化动态吸附—解吸条件。

结果表明,最佳提取工艺条件为乙醇体积分数70%、料液比1∶15(m∶V,g/mL)、pH 4、超声功率120 W,此条件下绿原酸得率为3.13%。

HPD600型树脂对绿原酸有较高的吸附率和解吸率,优化后的吸附条件为上样流速2 mL/min、pH 3;适宜的洗脱剂为体积分数30%和50%的乙醇,纯化后绿原酸的纯度为77.4%。

关键词:平卧菊三七(Gynura procumbens);绿原酸;提取;纯化平卧菊三七(Gynura procumbens (Lour)Merr.)为菊科三七属多年生草本药食两用植物[1],近代药理研究表明其具有降压[2,3]、降糖[4,5]、降脂[5]、抗氧化[6]、消炎[7]、抗癌[8,9]等功效。

其主要活性成分有绿原酸、黄酮类、生物碱、萜烯类、香豆素类等[10—13]。

绿原酸是植物在有氧呼吸过程中由磷酸戊糖途径(HMS)的中间产物合成的一种苯丙素类物质,它包括绿原酸、隐绿原酸、新绿原酸、莱蓟素等十多种同分异构体,具有抗菌、抗病毒、保肝利胆、抗肿瘤、降血压、降血脂、降糖、清除自由基等作用,是保健品、食品、药品及化妆品的重要原料。

绿原酸在植物界广泛存在,在忍冬科和菊科植物中含量较高[14—17]。

本研究采用超声波醇提法从平卧菊三七中提取绿原酸,并选用吸附容量大、选择性好、吸附迅速、解吸容易、再生简单的大孔树脂对其进行纯化,以期为进一步开发利用平卧菊三七提供理论指导。

1 材料与方法1.1 材料与仪器平卧菊三七叶采自江西农业大学中药园,烘干粉碎后过60目筛,装袋备用;绿原酸标准品由湖南浏阳艾特天然产物研究与开发有限公司生产;无水乙醇、盐酸、氢氧化钠均为分析纯;大孔树脂AB—8、S—8、NKA—2、NKA—9、X—5、HPD600、D101、H103均购于沧州宝恩吸附材料科技有限公司。

UV—754型紫外可见分光光度计(上海光谱仪器有限公司);LXJ—ⅡB低速离心机(上海安亭科学仪器厂);KQ3200DB型台式数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);pH计(Thermo电子公司);恒温水浴锅(上海亚荣生化仪器厂);小型粉碎机(长沙市常宏制药机械设备厂);ZHWY—1102型摇床(上海智城分析仪器制造有限公司)。

1.2 实验方法1.2.1 超声波辅助乙醇浸提法提取绿原酸①提取工艺流程。

称取1 g左右平卧菊三七叶样品粉末→加入适量石油醚挥干备用→超声波辅助乙醇提取→离心→取上层清液→定容至25 mL→吸取1 mL溶液定容到25 mL容量瓶,得平卧菊三七提取液[18]。

②绿原酸标准曲线的绘制[19]。

称取绿原酸标准品5 mg,用70%(体积分数,下同)的甲醇溶液定容于25 mL的容量瓶,配制成200 μg/mL 的标准溶液,然后用移液管分别取上述标准溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 mL置于25 mL容量瓶中,用70%的甲醇溶液定容,配成浓度分别为8、16、24、32、40 μg/mL的标准溶液,用紫外可见分光光度计在波长328 nm下测定吸光度,得到绿原酸标准溶液浓度(X//μg/mL)与吸光度A328 nm(Y)的回归方程为Y=0.041 3X—0.015 7,R2=0.999 6(图1)。

③正交试验优化绿原酸提取工艺。

设计正交试验考察pH、料液比、超声波超声功率和乙醇体积分数对平卧菊三七中绿原酸提取率的影响,正交试验因素与水平见表1。

1.2.2 大孔树脂纯化绿原酸1)工艺流程。

平卧菊三七提取液→依次经石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取得水相液作为样液→上样于大孔树脂→不同体积分数的乙醇进行梯度洗脱→接绿原酸含量最高的洗脱液→旋转蒸发浓缩洗脱液除去乙醇→冷冻干燥得绿原酸粗品。

2)树脂的预处理[20]。

各种树脂分别用双蒸水溶胀、浮选后,在1 mol/L NaOH 溶液中浸泡4 h,用双蒸水洗至中性;然后用0.5 mol/L HCl溶液浸泡24 h,不断搅拌,用双蒸水洗至中性;再在70%(体积分数,下同)的乙醇溶液中浸泡24 h 并不断搅拌,用去离子水洗至无白色浑浊、无乙醇味后用双蒸水浸泡待用。

3)树脂的静态吸附与解吸试验。

①静态吸附。

准确称取预处理好的树脂1 g,装入150 mL磨口三角瓶中,加入50 mL已测定浓度的样液,盖紧瓶塞,在25 ℃恒温水浴摇床上振摇24 h,充分吸附后过滤,测定吸附液中绿原酸的浓度,按式(1)和式(2)计算吸附量Q和吸附率E。

②静态解吸。

将完成吸附的树脂过滤后放入150 mL磨口烧瓶中,加入50 mL 70%的乙醇,在25 ℃恒温水浴摇床上振摇24 h,收集洗脱液,测定吸光度,按式(3)计算解吸率D。

Q=■ (1)E=■×100% (2)D=■×100% (3)式中,Q为吸附量(mg/g);C0为绿原酸样品的初始浓度(mg/mL);Ce为吸附后样液中绿原酸的浓度(mg/mL);V为吸附液体积(mL);W为树脂质量(g);C2为解吸液的浓度(mg/mL);V2为解吸液体积(mL)。

4)树脂的动态吸附与洗脱试验。

①上样流速对泄漏率的影响[21]。

把处理好的树脂装入吸附柱,上样液流速分别为2、4、6、8、10 mL/min,分别收集不同流速下的流出液,按式(4)计算泄漏率。

②上样液pH对动态吸附的影响[21]。

分别调节上柱液的pH为2、3、4、5、6,以一定的流速进行动态吸附,收集流出液,检测其中绿原酸的含量,计算其吸附率。

③梯度洗脱曲线的绘制。

取50 mL 的树脂装柱,调节提取液pH为3,按流速2 mL/min上样进行吸附。

待吸附完全后,依次用去离子水和体积分数分别为10%、30%、50%、70%、90%的乙醇水溶液各5 BV进行洗脱,分别收集每BV洗脱液,测定吸光度,绘制梯度洗脱曲线。

泄漏率=■×100% (4)2 结果与分析2.1 正交试验结果平卧菊三七中绿原酸提取工艺的正交试验结果见表2,利用DPS软件进行极差分析、方差分析和Duncan’s新复极差法进行多重比较,优选出超声波辅助醇提法提取平卧菊三七中绿原酸的最佳工艺参数。

结果表明,各因素对绿原酸提取率的影响由大到小依次为料液比、乙醇体积分数、pH、超声功率。

其中料液比、乙醇体积分数和pH对绿原酸提取的影响极显著,超声功率的影响不显著。

最佳提取工艺为A3B1C2D2,即pH 4、料液比1∶15(m∶V,g/mL)、超声功率120 W、乙醇体积分数70%,在此条件下进行验证试验,得到绿原酸的平均提取率为3.13%,高于正交试验组合的最高值,说明该结果是可靠的。

2.2 树脂的静态吸附与解吸试验结果表3为8种树脂对绿原酸的吸附和解吸效果。

从表中可以看出,S—8、H103、HPD600的吸附率高于其他5种树脂,而HPD600的解吸率远高于其他类型的树脂,考虑到绿原酸的极性与大孔树脂的吸附解吸特性,HPD600树脂为适合用于绿原酸纯化的树脂。

2.3 HPD600树脂的动态吸附与洗脱试验结果2.3.1 上样流速对泄漏率的影响上样流速影响吸附质向树脂表面的扩散,从而决定吸附效果。

如果流速太快,吸附质分子来不及扩散到树脂内表面就已经从柱中流出而泄漏,造成样品流失,但流速太慢会造成试验周期过长,增加成本。

图2为不同流速下样品的泄漏率。

从图中可以看出,绿原酸泄漏率随上样流速的加快而升高,上样流速大于4 mL/min时,绿原酸的泄漏率迅速升高。

2.3.2 上样液pH对绿原酸吸附率的影响图3为上样液pH对动态吸附绿原酸吸附率的影响。

可以看出,绿原酸的吸附率随pH的增大呈先上升后下降的趋势,pH为3时吸附率最高。

这可能是由于绿原酸作为多羟基酚酸在酸性条件下以分子形式存在,疏水性增强,易被树脂吸附;但在强酸性条件下以内酯形式存在的绿原酸易水解。

2.3.3 梯度洗脱曲线的绘制分别选用体积分数10%、30%、50%、70%、90%的乙醇作为洗脱剂,绿原酸的洗脱效果有较大差异(图4)。

当乙醇体积分数为10%时,洗脱液中绿原酸浓度很低,将此部分洗脱液冷冻干燥,干粉呈淡灰色,在空气中易吸潮,与蒽酮试剂反应呈绿色,与费林试剂反应有红色沉淀产生。

这些特点与糖的特性相吻合,因此可以采用10%的乙醇把提取物中糖类化合物分离出来。

乙醇体积分数为30%和50%时均出现了洗脱液浓度峰,这可能是因为紫外分光光度计测得的数据为总绿原酸含量,不同浓度洗脱剂的洗脱液中含有不同种类的绿原酸,绿原酸的单体分离工作还有待下一步试验研究。

将此部分洗脱液收集起来,旋转蒸发除去乙醇再冷冻干燥后得到绿原酸粗品,紫外分光光度法测得绿原酸纯度为77.4%。

3 结论运用正交试验得到超声辅助醇提法从平卧菊三七中提取绿原酸的工艺条件为乙醇体积分数70%、料液比1∶15(m∶V,g/mL)、pH 4、超声功率120 W,绿原酸提取率为3.13%。

通过静态吸附与解吸试验得到纯化绿原酸的最佳树脂为HPD600型,通过动态解吸试验得到最佳树脂的吸附—解吸条件为上样流速2 mL/min、pH 3,分别用5 BV的去离子水和体积分数10%的乙醇洗脱后依次用5 BV的体积分数30%及50%的乙醇进行洗脱,收集洗脱液,旋转蒸发去乙醇后冷冻干燥,得到的绿原酸纯度为77.4%。

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