三七渗漉提取工艺的研究
三七总皂苷提取工艺研究
上述结果表明: 10倍量 70% 乙醇提取 3 次, 当 粒径范围在 8~ 40 目, 总皂苷含量在 84~ 92 m g / g 生药之间, 差异较小。 21213 提取工艺正交优化: 在对提取溶媒和粒径 考察的基础上, 采用正交试验法, 选用 L9 ( 34 ) 正交 表, 筛选因素为乙醇浓度, 乙醇用量, 提取次数, 提取 时间, 各因素分设三个水平。结果见 T ab 3、T ab 4。
不同粒径范围的三七对提取次数三七总皂苷得 率影响较小, 在选择的 8-12、12-16、16-24、24-40目 粒径范围内三七总皂苷得率为 88 mg / g生药左右, 考虑粉碎困难、节能降耗等因素, 从生产的综合效益 出发, 选择药材粒径达到 8目即可。
由于各因素中只有提取次数对三七总皂苷得率 有显著性影响, 因此提取次数选择 3次, 乙醇浓度、 乙醇用量、提取时间因素影响较小, 故最终选择工艺 条件为 10倍量 70% 乙醇提取 3次, 每次 115 h, 正交 验证结果三七总皂苷得率达到 85174 m g / g生药, 提 取率 > 96% , 提取相当完全。本文比较全面的考察 了各种影响三七总皂苷提取率的因素, 取得了令人 满意的结果, 且本工艺简便易行, 得率较高, 适用于 大生产。
关键词 三七总皂 苷; 三七; 提取工艺; 正交试验 中图分类号: R 28412 文献标识码: A 文章编 号: 1001-4454( 2006) 06-0593-03
三 七 ( Roadix Notog inseng) 为五加 科 ( A raliaceae) 人参属 ( P anax)植物, 具有散瘀止血、消肿定痛之
T ab 2
Comp ar ison of partic le size( n = 3)
正交试验法优选三七提取工艺
R 0. 549 0. 079 0. 059
7. 698
提取率 () 99. 95 99. 97 100. 22 97. 67 98. 47 99. 64 92. 86 93. 74 93. 52
表 6
方 差分析表
方差来源 A B C
误差
方差平方和 0. 500 0. 010 0. 006 0. 01
7. 0 6. 6
3 3 1 7. 6 10
25
10
9. 0 9. 7
4 4 3 12 4. 2
40
4. 0
10. 0 6. 1
5 5 5 15 2. 6
45
2. 0
5. 0 3. 2
从均匀 设 计 结 果表 明 , 试验 号 为 3 的组 合 较 好 , 以 LHPC占 1. 5 , CM S-N a占 0. 5 为佳 。 3 小结与结论 3. 1 该制备工艺以 丸剂水 分百 分数 、崩解 时限 和成丸 难易 为考察指标 , 优选 制备 工艺 。 因 为软材 的含 水量少 , 则 难成 丸 , 软材 的含水量 高 , 则难干 燥 , 导 致丸剂 水分百 分数偏 大 ,
因素影响不 大 。 由提 取率 可知 当乙 醇浓 度为 60% ～ 75%, 结果差不多 。 3 生药的含量测定
取三七粉末约 2 g, 精密称 定 , 加 60%乙醇 25 m L, 加热
回流提取 3次 , 每次 1 h, 滤 过 , 滤 液置 100 m L 量瓶中 , 加适 量乙醇和水使含醇量为 50%, 摇匀 , 滤过 , 取续 滤液 , 作为供
10, 成 丸难以评分 , 以软材黏性好 , 易拉 条 、丸均 匀 , 丸 外观圆
整均匀 、色泽一致 为 10 分 , 其 它与 之相比 评分 , 选 择最 适宜
三七提取液中三七总皂苷的分离纯化工艺研究
三七提取液中三七总皂苷的分离纯化工艺研究三七提取液中三七总皂苷的分离纯化工艺研究() () 文章编号: 1007-6611(2021) 06-0613-03三七提取液中三七总皂苷的分离纯化工艺研究谢茵, 邢桂琴, 刘秀芬(山西医科大学药学院药剂教研室, 太原030001)摘要: 目的研究影响分离纯化三七总皂苷的几个主要影响因素, 确立三七总皂苷分离纯化工艺。
在确立三七总皂苷测定方法的基础上, 采用HPD 2100型大孔吸附树脂, 以每ml 含0. 4g , 上柱量为1. 5倍柱体积, 并以1柱体积/h 的速度通过树脂柱, 。
,2-3倍柱体积/h 的速度洗脱, 用量为5-6倍柱体积时, %, 79. 6%, 精制度为241%。
结论HPD 2100大孔吸附树脂可用于富集、, 关键词: 三七总皂苷; ; ; 中图分类号: Study on the and purif ication of radix notoginseng saponinXIE Y in , XIN G Gui 2qin , L IU Xiu 2fen (Dept of Pharm aceutics , Pharm acy College , S hanxi Medical U niversity , Taiyuan 030001, China )Abstract : Objective To optimize the major conditions for the separation and purification of radix notoginseng saponin. MethodsOn the basis of determining radix notoginseng saponin , HPD -100macroreticular resin was used for enriching radix notoginsengsaponin. The extraction of 0. 4g material/ml was adsorbed in 1. 5times of column volume at a speed of one column volume per hour.Results The extraction was eluted by 70%ethanol of 5-6times with column volume at a flow rate of 2-3folds column volumeper hour. Elution ratio of radix notoginseng saponin was more than 98%, purity was 79. 6%, polishing was 241%. Conclusion HPD 2100macroreticular resin can be used to enrich , separate and purify radix notoginsensaponin ,and the effect is better. K ey w ords : radix notoginseng saponin ; HPD -100macroreticular resin ; elution ratio ; polishing三七(Radix Notoginsen ) 为五加科人参属植物三七[Panax Notoginseng (Burk. ) F. H. Chen 〗的根, 具止血、活血化瘀和消肿止痛的功效[1]。
正交法优化三七提取工艺的研究
正交法优化三七提取工艺的研究【摘要】目的优选三七的最佳提取工艺。
方法以三七皂苷R1和人参皂苷Rg1为指标进行正交试验，采用胶束毛细管电色谱法测定含量，优化影响三七提取工艺的条件。
结果 4倍量70%乙醇回流提取2次，每次1.5h，乙醚、正丁醇统一处理所得提取液中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1的含量最高。
结论试验结果可为三七提取工艺的确定提供实验依据，该优化工艺可为工业生产提供参考。
【关键词】三七；三七皂苷R1；人参皂苷Rg1；胶束毛细管电色谱Study on process for extraction of Panax notoginseng by orthogonal experiments【Abstract】 Objective To optimize the conditions for the extraction of Panax notoginseng.Methods Conditions for the extraction were studied by orthogonal experimental design as guided by the content of notoginsenoside R1 and ginsenosides Rg1 present in theextract.Results The optimum condition for the extraction ofP.notoginseng was to circumfuse the herb in 70% alcohol for 1.5h twice，then collect an amount corresponding to 4 times of the quantity ofP.notoginseng. The most content of ginsenosides Rg1 and notoginsenoside R1 in Panax notoginseng was determinate by MEKC after the collection was treated with ether and n-butanol.Conclusion The experimental results can be used for confirming process for extraction of Panax notoginseng and offering references for it’s industrial production.【Key words】 panax notoginseng； notoginsenoside R1；ginsenoside Rg1； capillary electrophoresis中药三七为五加科植物三七Panax notoginseng(Burk.)F.H.Chen的干燥根，皂苷类是其主要药效成分。
伤科接骨气雾剂渗漉提取工艺
均值 2 均值 3 方差 R
从实验结果的方差分析可以得 出， 四 个因 素 对 实 验 结 果 的影响均无显著性。直观分析可看 出， 影响本实验的主要因 素依次是 乙 醇 浓 度， 渗 漉 速 度， 浸 泡 时间， 溶 剂 用 量， 即A ＞ D ＞ C ＞ B， 伤科接骨 气 雾 剂 渗 漉 提 取 的 最 佳 工 艺 条 件为: 乙醇浓度为 30% ， 加 醇 量 为 20 倍 量， 浸 泡 36h， 渗漉速度为 5mL / min。 3 讨论 提取工艺 正 交 考 察中结 果 分 析 时， 因 素 D， 即渗漉速度 2 所得结果相同， 的水平值 1 、 从生产成本方面考虑， 在保证 ( 下转第 73 页)
列号 1
仪器 安捷伦高效液相色 谱 仪， 安 捷 伦 色 谱 工作站; 旋 KQ2200 超 声 波 转蒸发器 RE － 52A( 上海 亚 荣 生 化仪 器 厂 ) ，
清洗器( 昆山市检测仪器厂) ， 电子天平等。 1． 2 试剂 乙醇， 色谱纯甲醇等。 1． 3 药材 购于 安 国 药 材 市 场， 经 辽宁 中 医 药 大 学 王 冰 教 授鉴定， 为正品。 1． 4 对照品 人 参 皂 苷 Rg1 ， 购 于中国 药 品 生 物制 品 检 定 所( 批号: 200802015 ) 。 2 2． 1 方法与结果
漉液 ， 从其中取出一定量， 处理后注 入 高 效 液 相 色 谱 仪， 测定 其中人参皂苷 Rg1 含量， 计算不 同 试 验 安 排 中 人 参 皂 苷 Rg1 提取量作为考察的指标， 结果列入表 2 中。 2． 2． 2 高效液相色谱法测定伤 科 接 骨 外 用 制 剂 渗 漉 液 中 人 参皂苷 Rg1 含量: 2． 2． 2． 1 色 谱 条 件 检 测 波 长: 203nm; 柱 温: 35℃ ; 流速: 1mL / min; 流动相: 乙腈、 水; 填充剂: 十八烷基硅烷键合硅 胶; 理论塔板数: 按人参皂苷 Rg1 计算不应低于 6000 。 2． 2． 2． 2 对照品溶液的制备 精 密 称 取 人 参 皂 苷 Rg1 对 照 品适量， 加甲醇制成每 1mL 含人参皂苷 Rg1 0． 496mg， 即得。 2． 2． 2． 3 供 试 品溶 液 的 制备 分 别 取 九 个 样 品 的 提 取 液 5mL， 置 10mL 容量瓶中加 入 乙 醇 定 容 至 刻 度， 静 置 2h， 吸取 上清液， 微孔滤膜滤过， 即得。 2． 2． 2． 4 正交试验结果 表2
三七总皂苷提取、分离纯化技术的研究进展
三七总皂苷提取、分离纯化技术的研究进展三七总皂苷（Panax notoginseng saponins，PNS）作为三七（Panax notoginseng）的主要活性成分，具有多种药理作用和临床应用，广泛应用于药品、保健品、日化品等行业。
随着PNS的需求量日益上升，PNS的提取、分离纯化技术显得尤为重要。
目前，PNS的提取、分离纯化技术的研究甚多，综合考虑其提取率、经济效益及规模化生产等因素，常采用乙醇回流提取，经大孔吸附树脂分离纯化，部分联合酶解技术和醇沉技术制备PNS。
本文将对近年来实验研究中常用到的PNS提取、分离纯化技术进行综述，为PNS的进一步研究及工业生产等提供参考。
[Abstract]Panax notoginseng saponins（PNS），as the main active ingredient of Panax notoginseng，which has a variety of pharmacological effects and clinical applications，and it is widely used in medicine，health products，cosmetic products and other industries.With the rising demand for PNS，extracting and separating and purifying technologies of PNS are particularly important.Currently，the studying on extractive，separative and purificative technology for PNS are especially more，considering its extraction rate，economy，large-scale production and other factors，using one of the first and formost method，which is the frequently-use method that of extracting and separating and purifying PNS from Panax notoginseng，firstly adopts the technique of ethanol refluxing extraction，then uses the method of macroporous resin adsorption to separate and purify PNS，and parts of them also combine with enzymolysis approach and alcohol precipitation approach to prepare PNS.In this paper，the commonly used techniques in laboratory research，which are the methods of extracting and separating and purifying PNS from medicinal material Panax notoginseng in recent years，are reviewed to provide the reference to the further studying on PNS and industrial production.[Key words]Panax notoginseng；Panax notoginseng saponins；Extractive technique；Separative and purificative technique三七为五加科人参属植物三七（Panax notoginseng（Burk.）F.H.Chen）的干燥根，又称田七，古代称其为金不换，是我国传统名贵中药材，主产于我国云南文山和广西，目前多用其栽培品。
三七有效成分的提取技术
radices pseudoginseng三七为临床常用中药, 具有广泛的药理作用, 因此, 三七的复方制剂品种甚多, 常以生粉入药, 存在服用量较大, 使用不便等不足。
为了探索合理的生产工艺, 尽可能提取有效成分, 笔者以三七所含人参皂苷Rg 1 为考查指标, 对三七的不同提取工艺进行了比较研究, 现报告如下。
1. 探头式超声提取三七有效成分的工艺研究目的采用单频探头式超声(25 kHz) 技术对三七有效成分进行提取。
方法选择乙醇体积分数、物料粒径、提取固液比、提取温度、提取时间5 个因素进行正交实验。
结果影响三七药材中人参皂苷Rg1 的提取率的因素依次为: 乙醇体积分数＞物料粒径＞固液比＞提取时间＞提取温度, 优化工艺参数为: 乙醇体积分数95%,物料粒径80 ~100 目, 固液比1 颐15, 提取时间40 min, 提取温度40 益。
在此条件下, 人参皂苷Rg1 的提取率是69.38%。
结论本研究将为三七工业化生产工艺参数的选择提供实验依据。
据文献[7] 报道, 三七中人参皂苷Rg1 回流提取优化条件为: 药材加体积分数60%乙醇浸泡1郾0 h, 回流提取2 次, 每次2. 0 h, 第1 次加醇量为药材的10 倍量, 第二次加醇量为药材的8 倍量。
在此条件下计算得人参皂苷Rg1 的提取率是60. 75% 。
本研究采用探头式超声提取三七中人参皂苷Rg1 的提取率达到69. 38% 。
对比文献[7] 结果可知, 相对乙醇回流提取, 探头式超声提取三七中人参皂苷Rg1 具有提取时间短、溶剂用量少、提取率高等优点。
2. 正交试验法研究三七提取工艺目的优选三七的最佳提取工艺。
方法: 采用正交试验法,以提取液中三七总皂苷含量为考察指标, 对影响三七提取工艺的因素进行了研究。
结果实验设计三因素中提取方式有显著影响。
结论三七的最佳提取工艺为用75%乙醇浸渍三七24 h后，以每公斤每分钟1〜3 mL 速度渗漉, 收集相当于三七10 倍量的渗漉液。
三七总皂苷提取工艺研究进展
三七总皂苷提取工艺研究进展对三七总皂苷的不同提取方法进行综述，其传统提取有渗漉、回流法等；现代提取有超声提取、超临界流体萃取、微波提取、酶提取法等。
笔者论述了当提取工艺变化时tPNS提取率的变化情况，总结了tPNS提取工艺的研究进展。
标签：三七；三七总皂苷；提取工艺；研究进展Abstract：Summary of the different extraction methods of saponins of notoginseng Panax （tPNS，total），The traditional extraction method and reflux percolation；Modern extraction，ultrasonic extraction，supercritical fluid extraction，microwave extraction，enzyme extraction method，etc.The change of tPNS extraction rate is discussed when the extraction process is changed，Research Progress on the extraction process of tPNS.Keywords：Roadix Notoginseng；tPNS；Extract technology；Study progress三七[Panax notoginseng（Burk.）F.H.Chen]为五加科（Araliaceae）人参属（Panax）植物三七的根与根茎[1]。
三七总皂苷（total saponins of panar natoginseng，tPNS）是三七根部提取的有效成分，含有多种皂苷成分包括人参皂甙Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re、Rf、Rg1、Rg2、Rh、三七皂甙R1、R2、R3、R4、R5、R6等70多種单体皂甙[2]，以三七皂甙R1、人参皂甙Rb1、Rg1含量最高[3]，tPNS的特征化合物为三七皂苷R1。
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摘要 ： 目的 优 选三七的最佳渗漉提取 工艺。 方法
结论
采用正 交试验 法， 以三七总皂苷和三七 总氨基 酸为考察指标，
对影响三七渗漉提取工艺 的因素进行研 究。结果 乙醇浓度 、 乙醇用量 、渗漉速度 均对三 七提取 工艺有 显著影响 。
三七的最佳渗漉提取工 艺为用 １ 倍 量 ５ ％ ２ Ｏ 乙醇， 渗漉速度 为 １ Ｌ （ｉ ｋ ） ～３ｍ ／ｍ ｎ‘ ｇ 。 关键词 ：正交试验；三七；提取工 艺；三七 总皂苷 ；三七素
中图分类号：Ｒ ８． ２３ ５ 文 献 标 识 码 ：Ａ 文 章 编 号 ： １０ —３ ４２ １）４０ ５ －２ ０ ５５ ０ （０ ００ —０ １ ０
Ｓｔ ｕｄｙ ｎ ｏ Ｐｅ ｃ ｌ ｔｏ Ｅｘｔ ａｃ ｉ ｏｇ ｎｓ ｎｇ Ｔ Ｐｒ ｅ ｓ ｆ Ｐａ ｔ ｉ ｅ ＡＮ ａ —ａ ｇ Ｚｈ ｏ ｙ ｎ ，ＹＯＵ ａ —ｉｇ， Ｚｈ ｏ ｌｎ
Ｔｈｅ ｐｅ ｃ ｌ ｔ ａ ｅ ｃ ｎ ｅ ｔ ａ ｏ ｎｄ ｑ ｎ ｔｔ ｆａ ｃ ｈ ｌｈ ｉ ｎ ｆ ａ ｔ ｅ ｅ ｔ ｎ ｅ ｐｒ ｃ ｓ ．Ｃｏ ｃｕ ｉ ｎ ｒ ｏ ａ ｅ ｒ ｔ ， ｏ ｃ ｎ ｒ ｔ ｎ ａ ｕａ ｉ ｏ ｏ ｏ ａｄ ｓ ｇ ｉ ｃ ｉ ｙ ｌ ｉ ｎ ｆ ｃ ｓｏ ｔ ｏ ｅ ｓ ｈ ｎ ｌ ｓｏ
ｌ ｏ ｏ ｅｃ ｌｔ ｔ ｒｔ ｆ ａｃ ｈ ｌ ｎｄｐ ｒｏａｉ ｇａ ａｅｏ ～３ｍ Ｌ （ ｎ 。 ｇ． ａ ｎ ａ １ ／ｍｉ ｋ ）
Ｋｅ ｗ ｒ ｓ ｏｔ ｏ ｏ ａ ｘ ｅｉ ｎ ； Ｐ ｎ ｘ Ｎ ｔｇｎ ｅ ｇ （ｕ ｋ） ＦＨ． ｈ ｎ ； ｅ ｒ ｃ ｏ ｒ ｃ ｓ ｙ ｏ ｄ ： ｒｈ ｇ ｎ ｌ ｅｐ ｒ ｍｅ ｔ ａ ａ ｏｏ ｉｓ ｎ Ｂ ｒ ． ． Ｃ ｅ ｔ ｘ ａ ｔ ｎ ｐ ｏ ｅ ｓ； ｉ
２ １ 年 ４月第 １ 卷 第 ４期 ００ ７ ・靠Ｉ － ．－ Ｊ 剂 ５＂ ． Ｔ 艺 ． ・
中国 中 医药信 息杂 志
・５ １・
三 七 渗 漉 提 取 工 艺 的研 究
谭朝 阳， 昭玲 ， 尤 袁宏 佳
（ 南 中医药大学中药药性与药效研究实验室， 南 长沙 ４００） 湖 湖 １２ ８
Ｔｈｅ ｏ ｉ ｕｍ ｏ ｉ ｏ ｆ ｒ ｔ ｅ ｅ ｒ ｃ ｏ ｆ Ｐａ ａ ｔ ｇ ｎｓ ｎｇ ｗａｓ ａｄ ｉ １ ｉ ｅ ｍ ｏ ｐｔ ｍ ｃ ｎｄ ｔ ｎ ｈ ｘｔ ａ ｔ ｎ ｏ ｎ ｘ ｎｏ ｏ ｉ ｅ ｉ ｏ ｉ ｄ ｎｇ ２ ｔｍ ｓ ａ ｕｎｔ ｏ ０％ ｆ５
ｎｏ ｏ ｉ ｅ ｇ ｓ ｐｏ ｎ； ｄｅ ｉ ｈｉ ｅ ｔ ｇ ｎｓ ｎ ａ ｎｉ ｎｃ ｃ ｎ
三 七 Ｐｎ ｘｎ ｔｇ ｎ ｅ ｇＢ ｒ ． ＦＨ Ｃ ｅ ａ ａ ｏ ｏ ｉ ｓｎ （ｕ ｋ ） ． ． ｈ ｎ为 五 加 科 人 参 属 植 物 ， 用 主 要 取 其 根 ， 有 散 瘀 止 血 、 肿 定 痛 的功 效 。有 药 具 消 关 三 七 的 提 取 研 究 方 法 报 道 较 多， 多 以三 七 皂 苷 为考 察指 标 但
醇 适 量 使 溶 解 ， 置 １ Ｌ 量 瓶 中 ， 甲 醇 稀 释 至 刻 度 ， 匀 ， 移 ０ｍ 加 摇
三 七 素 的 总 氨 基 酸 为 考 察 指 标 ， 三 七 渗 漉 提 取 工 艺 进 行 研 究 对 为 三 七 有效 成分 的提 取 及 最 佳 工 艺 条件 的优 选 提 供 依 据 。
ｎ ｔｇｎ ｅ ｇ （ ｒ ． ＦＨ．ｈ ｎ Ｍ ｅｈ ｄ Ｃ ｎ ｉｏ ｓ ｏｒ ｈ ｐ ｒｏａ ｏ ｒ ｓｕｄｅ ｂ ｏｔ ｏ ｏ ａ ｏｏ ｉｓ ｎ Ｂｕ ｋ ） ． Ｃ ｅ ． ｔｏ ｓ ｏ ｄｔ ｎ ｆ ｔ ｅ ｅ ｃ ｌｔ ｎ ｗｅ ｅ ｔ ｉｄ ｙ ｒｈ ｇ ｎ ｉ ｉ ｌ ｅ ｐ ｒ ｎ ａ ｅ ｉｎ ａ ｕｄ ｄ ｂ ｅｃ ｎ ｅ ｔ ｆ ｏａ ｏｏ ｉ ｓ ｎ ａ ｏ ｉ ｎｄｔｔｌ ｍ ｉ ｏａ ｉｓ ｅｕｔ ｘ ｅ ｍｅ ｔｌ ｓｇ ｓｇ ｉ ｅ ｔ ｏ ｔｎ ｓｏ ｔｌ ｔ ｇｎ ｅ ｇｓ ｐ ｎｎ ａ ａ ｎ ｃｄ ．Ｒ ｓ ｌ ｉ ｄ ｙ ｈ ｔ ｎ ｏ ａ ｓ
Ｃｈ ｎ ｓ ａ４ ０ ０ ， ｉａ ａ ｇ ｈ １ ２ ８ Ｃｈｎ ）
Ａ ｓｒｃ ： ０ｂｅｔ ｅ ｏ ｐ ｉ ｉｅ ｔ ｅ ｏ ｄｔ ｎ ｆｒ ｔ ｅ ｅ ｃ ｌｔ ｎ ｅ ｔａ ｔ ｎ ｒ ｃ ｓ ｏ ａ ａ ｂ ｔａｔ ｊｅｉ Ｔ ｏ ｔ ｚ ｈ ｃ ｎ ｉ ｏ ｓ ｏ ｈ ｐ ｒｏａ ｏ ｘｒ ｃ ｏ ｐ ｏ ｅ ｓ ｆ Ｐ ｎ ｘ ｖ ｍ ｉ ｉ ｉ
而 对 其 止 血 活 性 成 分 三 七 素 未 涉及 。 试 验 以三 七 总皂 苷及 含 本
２ １ ２ 样 品测 定 ．．
精 密 吸 取 各 三 七 提 取 液 ５ ｍ ， 水 １ Ｌ Ｌ加 Ｏｍ，
置 水 浴 上 蒸 去 乙 醇 ， 置 分 液 漏 斗 中， 水 饱 和 的正 丁 醇 提 取 移 用 ４次 ， 次 １ Ｌ 每 Ｏ 。合 并 正 丁 醇 提 取 液 ， 水 浴 上蒸 干 ， 渣 加 甲 ｍ 置 残
Ｙ Ｎ ｎ ｊａｒａ ｏａｏｙｏ ＮａｕｅａｄＰ ａｍ ｃ ｄｎ ｍｉ Ｒ ｓａｃ ｈｎ ｓ ｄｃ ｅ Ｈｕａ ｎｖｒｉ Ｃ ＵＡ Ｈｏ ｇ ｉ Ｌ ｂ ｒｔｒ ｆ ｔｒ ｎ ｈ ｒ ａ ｏ ｙ ａ ｃ ｅｅ ｒｈｏ Ｃ ｉｅｅＭｅｉｉ ， ｎ ｎＵ ｉ ｓｙｏ Ｔ Ｍ， ｆ ｎ ｅ ｔ ｆ