病原微生物之细菌部分

医学微生物学微生物：存在于自然界的一大群体形微小、结构简单、肉眼直接看不见，必须借助光学显微镜或电子显微镜放大数百倍、数千倍。

甚至数万倍才能观察到的生物。

第一章细菌的形态与结构第一节细菌的大小与形态1、观察细菌常采用光学显微镜，一般以微米为单位。

2、按细菌外形可分为：①球菌（双球菌、链球菌、葡萄球菌、四联球菌、八叠球菌）②杆菌（链杆菌、棒状杆菌、球杆菌、分枝杆菌、双歧杆菌）③螺形菌（弧菌、螺菌、螺杆菌）第二节细菌的结构1 细菌的基本结构：细胞壁，细胞膜，细胞质，核质细菌的特殊结构：荚膜，鞭毛，菌毛，芽孢2、革兰阳性菌（G+）：显紫色；革兰阴性菌（G-）：显红色。

3、细胞壁结构革兰阳性菌 G+革兰阴性菌 G-肽聚糖组成由聚糖骨架、四肽侧链、五肽交联桥构成坚韧三维立体结构由聚糖骨架、四肽侧链构成疏松二维平面网络结构肽聚糖厚度20～80nm 10～15nm肽聚糖层数可达50层仅1～2层肽聚糖含量占胞壁干重50～80% 仅占胞壁干重5～20%磷壁酸有无外膜无有4、G-菌的外膜｛脂蛋白、脂多糖（LPS）→【脂质A，核心多糖，特异多糖】、脂质双层、｝脂多糖（LPS）：即G-菌的内毒素。

LPS是G-菌的重要致病物质，使白细胞增多，直至休克死亡；另一方面，LPS也可增强机体非特异性抵抗力，并有抗肿瘤等有益作用。

①脂质A：内毒素的毒性和生物学活性的主要成分，无种属特异性，不同细菌的脂质A骨架基本一致，故不同细菌产生的内毒素的毒性作用均相似。

②核心多糖：有属特异性，位于脂质A的外层。

③特异多糖：即G-菌的菌体抗原（O抗原），是脂多糖的最外层。

5、细胞壁的功能：1 ）维持细菌基本形态，2）抵抗低渗环境，3）避免外界因素损伤，4）参与细菌物质交换，5）与某些细菌的致病性有关.6、细菌细胞壁缺陷型（细菌L型）：细菌细胞壁的肽聚糖结构受到理化或生物因素的直接破坏或合成被抑制，这种细胞壁受损的细菌在高渗环境下仍可存活者称为细菌细胞壁缺陷型。

原生质体：G+菌细胞壁缺失后，原生质层仅被一层细胞膜包住原生质球：G-菌肽聚糖层受损后尚有外膜保护■细菌L型的诱发因素，如：溶菌酶，青霉素，溶葡萄球菌素，胆汁，抗体，补体等。

溶菌酶：能裂解肽聚糖中N-乙酰葡萄胺和N-乙酰胞壁酸之间的β-1，4糖苷键，破坏聚糖骨架，引起细菌裂解。

青霉素：能与细菌竞争合成肽聚糖过程中所需的转肽酶，抑制四肽侧链上D-丙氨酸与五肽桥间的联结，使细菌不能合成完整的肽聚糖，在一般渗透压环境中科导致细菌死亡。

■细菌L型需在高渗低琼脂含血清的培养基中生长。

G+高渗环境中。

7、细胞膜：细胞膜的主要功能：物质交换、生物合成、呼吸作用、参与细菌分裂细菌细胞膜向细胞质内陷、折叠、卷曲形成的囊状物，称为中介体。

8、细胞质：①核糖体：链霉素（与细菌核糖体的30S亚基结合）和红霉素（与细菌核糖体的50S亚基结合）均能干扰其蛋白质合成，从而杀死细菌，但对人体核糖体无害。

②质粒：染色体外的遗传物质，为闭合环状的双链DNA③胞制颗粒：贮藏有营养物质。

异染颗粒（也成迂回体，嗜碱性强，用甲基蓝染色时着色较深呈紫色）常见于白喉棒状杆菌。

9、核质：细菌的遗传物质。

10某些细菌细胞壁外包绕一层粘液样物质；普通染色不易着色，光镜下可见透明环。

化学组成：①多数细菌：多糖②少数细菌：多肽（炭疽杆菌）、透明质酸（链球菌）有荚膜菌形成粘液型（M）、光滑型（S）菌落失去荚膜后菌落变为粗糙型（R）荚膜的功能：抗吞噬作用：是病原菌的重要毒力因子抗杀菌物质损伤：如溶酶体、补体粘附作用：与致病性有关；形成生物膜⑵鞭毛：概念：许多细菌菌体上附有细长并呈波状弯曲的丝状物。

数量与部位：①单毛菌②双毛菌③丛毛菌④周毛菌功能：①细菌的运动器官；②与致病性有关；③鉴定细菌和细菌分类。

④鞭毛蛋白有抗原性：H抗原⑶菌毛：许多G－菌和少数G＋菌菌体表面存在着一种直的比鞭毛更细、更短的丝状物与运动无关。

普通菌毛：遍布细胞表面，每菌可达数百根，短而直，粘附结构。

性菌毛：每菌1～4根，比普通菌毛长而粗，传递质粒。

⑷芽胞：某些细菌在一定环境条件下，胞质脱水浓缩，在菌体内部形成一个圆形或卵圆形的小体，是细菌的休眠形式，称为芽胞。

■细菌的芽胞由内向外依次是：核心、内膜、芽胞壁、皮质、外膜、芽胞壳和押宝外衣。

■芽胞的形成与发芽：芽胞具有完整的核质、酶系统和合成菌体组分的结构，能保存细菌的全部生命必须物质，芽胞形成后细菌即失去繁殖能力。

一个细菌只形成一个芽胞，一个芽胞也只能生成一个菌体。

■芽胞的功能：细菌的芽胞对热力、干燥、辐射、化学消毒剂等理化因素均有强大的抵抗力。

此外，当芽胞成为繁殖体后，能迅速大量繁殖而致病。

革兰氏染色：步骤：涂片→固定→结晶紫初染→碘液媒染→95%酒精脱色→复红复染结果：Ｇ＋菌：紫色Ｇ－菌：红色革兰染色法意义：鉴别细菌选择药物研究细菌致病性第二章细菌的生理第一节细菌的理化性质1、细菌的化学组成：水、无机盐、蛋白质、糖类、脂肪、核酸2、细菌的物理性状：①光学性质；②表面积；细菌的相对表面积大，有利于同外界进行物质交换；③带电现象；④半透性：细菌的细胞膜和细胞壁都有半透性，有利于吸收营养和排除代谢产物；⑤渗透压：细菌所处一般环境相对低渗。

第二节细菌的营养和生长繁殖一、细菌的营养类型1、自养菌：化能自养菌、光能自养菌2、异养菌：腐生菌、寄生菌所有的病原菌都是异养菌，大部分属寄生菌。

二、细菌的营养物质1、水2、碳源3、氮源：作为菌体成分的原料4、无机盐：常用元素（P、S、K、Na、Mg、Ga、Fe）微量元素（Zn、Cu、Mn、钴）各类无机盐的公用：①构成有机化合物，成为菌体的成分；②作为酶的组成成分，维持酶的活性；③参与能量的储存和转运；④调节菌体内外渗透压；⑤某些元素与细菌的生长繁殖和致病作用密切相关。

5、生长因子：生长因子是指，某些细菌细菌生长所必须的但自身又不能合成，必须由外界供给的物质。

三、细菌摄取营养物质的机制1、被动扩散：2、主动转运系统：①依赖于周浆间隙结合蛋白的转运系统；②化学渗透趋势转运系统；③基团转移。

四、影响细菌生长的环境因素（简答）1、营养物质：水、碳源、氮源、无机盐及生长因子为细菌的代谢及生长繁殖提供必需的原料和充足的能量2、酸碱度(pH)：多数病原菌最适pH为7.2--7.6，而结核杆菌最适pH值为6.5--6.8，霍乱弧菌最适pH值为8.4--9.2。

3、温度：病原菌最适温度为37度。

4、气体：O2：根据细菌代谢时对氧气的需要与否分四类：①专性需氧菌：具有完善的呼吸酶系统，需要分子氧作为受氢体以完成需氧呼吸，仅能在有氧环境下生长。

②微需氧菌：在低氧压（5%-6%）生长最好。

③兼性厌氧菌：兼有有氧呼吸和无氧发酵两种功能，在有氧、无氧环境中均能生长，但以有氧时生长较好。

大多数病原菌属于此。

④专性厌氧菌：缺乏完善的呼吸酶系统，只能进行无氧发酵，必须在无氧环境中生长。

CO2：对细菌生长也很重要，大部分细菌在代谢中产生的CO2可满足需要，个别细菌初次分离时需人工供给5-10%CO2。

五、细菌的生长繁殖1、细菌个体的生长繁殖：繁殖方式----细菌以简单的二分裂方式进行无性繁殖。

繁殖速度----繁殖一代所需时间（代时）约20-30min。

但少数细菌代时较长，如结核分枝杆菌代时为18小时。

2、细菌群体的生长繁殖：迟缓期、对数期、稳定期、衰退期繁殖规律----生长曲线迟缓期：细菌被接种培养基的最初一段时间，主要是适应新环境，同时为分裂繁殖作物质准备，此时细菌体积比较大，含有丰富的酶和中间代谢产物。

对数期：细菌分裂繁殖最快的时期，菌数以几何级数增长，研究细菌的最佳时期。

稳定期：由于营养物质的消耗，代谢产物的堆积，繁殖数与死亡数几乎相等。

活菌数保持稳定。

一些细菌的芽胞、外毒素和抗生素等代谢产物大多在稳定期产生。

衰退期：繁殖变慢，死菌数超过活菌数。

细菌形态发生改变，生理活动趋于停滞。

第三节细菌的新陈代谢和能量转换糖发酵试验：大肠埃希菌分解乳糖，产酸产气；伤寒沙门菌不分解乳糖。

吲哚试验：大肠杆菌有色氨酸酶，分解色氨酸产生吲哚甲基红试验：大肠杆菌（+），产气杆菌（-）VP试验：大肠杆菌（-），产气杆菌（+）IMViC试验 I：吲哚试验 M：甲基红试验 Vi：VP试验 C：枸橼酸盐利用实验常用于鉴定肠道杆菌，如大肠埃希菌+ + - -，产气杆菌- - + +1、热原质（致热源）：是细菌合成的一种注入人体或动物体内能引起发热反应的物质。

产生热致源的细菌大都为格兰阴性菌，热致源即其细胞壁的脂多糖。

2、毒素及侵袭性酶：①外毒素：多数G+菌和少数G-菌在生长繁殖过程中释放菌体外的蛋白质；②内毒素：G-菌细胞壁的脂多糖；外毒素毒性强于内毒素。

③侵袭性酶：某些细菌产生的，能损伤机体组织，促使菌体的侵袭和扩散，是细菌重要的致病物质。

3、色素：①水溶性；②脂溶性。

4、抗生素：某些微生物代谢过程中产生的一类能抑制或杀死某些其他微生物或肿瘤细胞的物质。

抗生素大多由放线菌和真菌产生。

5·细菌素：只能杀伤有亲缘关系的细菌，如大肠菌素。

无治疗意义，有助于细菌分型。

6·维生素：某些肠道菌合成，如B族维生素、VK。

第一节消毒灭菌的常用术语灭菌：杀灭物体上所有微生物的方法消毒：杀死物体上病原微生物的方法,并不一定能杀死含芽胞的细菌或非病原微生物防腐：防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法，微生物一般不死亡。

无菌：不存在活的微生物。

第二节消毒灭菌的方法一、物理消毒灭菌法：热力、辐射、滤过、干燥和低温等。

㈠热力灭菌法：分为干热灭菌和湿热灭菌1、干热灭菌法：一般细菌繁殖体在干燥状态下，80-100℃经1小时可被杀死，芽胞则需要更高温度才能被杀死。

①焚烧：废弃物、尸体②灼烧：接种环、试管口③干烤：（160~170℃，2h）利用干烤箱灭菌，一般加热至171℃经1h或160℃ 2h 或121℃ 16h。

适用于高温下不变质、不损害、不蒸发的器皿（如：玻璃器皿）。

④红外线（0.7~1000um波长的电磁波）：医疗器械2、湿热灭菌法：最常用，在相同温度下湿热灭菌法比干热灭菌法效果更好，因为：ⅰ湿热中细菌菌体蛋白较易凝固变性；ⅱ湿热的穿透力比干热大；ⅲ湿热的蒸汽有潜热效应存在。

①巴氏消毒法：用较低的温度杀灭液体中的病原菌或特定微生物，以保持物品中所需的不耐热成分不被破坏的消毒方法（61.1-62.8 ℃ 30min 或71.7℃15-30s，主要用于牛乳消毒和酒类）。

②煮沸法（100 ℃，5min）食具、注射器等消毒③流动蒸汽消毒法（100 ℃ 15-30min）④间歇蒸汽灭菌法（100 ℃ 5-30min，37 ℃24h×3天）⑤高压蒸汽灭菌法：*压力—103.4KPa（1.05Kg/cm2）*温度—121.3 ℃*时间—15-20min*效果—杀灭包括芽孢在内所有微生物*应用—所有耐高温、高压、耐湿的物品㈡辐射杀菌法：①紫外线：波长240—300nm的紫外线具有杀菌作用，其中以265—266nm最强。