中药制剂中各类化学成分分析
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展开系统：醋酸，醋酸乙酯-甲酸-水等 展开系统：醋酸，醋酸乙酯-甲酸-
纤维素--分离多糖苷混合物 纤维素--分离多糖苷混合物
展开系统：正丁醇-乙酸-水，甲酸，乙酸 展开系统：正丁醇-乙酸甲酸，
含量测定
总黄酮含量测定
紫外分光光度法 比色法 高效液相色谱法
正相色谱 硅胶固定相— 硅胶固定相—没有羟基或乙酰化黄酮类成分 反相色谱（C18或C8） 反相色谱（ 流动相：甲醇-水-乙酸（磷酸缓冲液），乙腈-水 流动相：甲醇乙酸（磷酸缓冲液），乙腈），乙腈 检测器
显色反应
+酸性染料（磺酸肽类）→有色配合物 酸性染料（磺酸肽类）
紫外光谱特征
生物碱类成分的分离
溶剂萃取 柱层析（氧化铝、硅藻土、离子交换柱） 柱层析（氧化铝、硅藻土、离子交换柱）
定性鉴别
沉淀反应、显色反应 沉淀反应、 多肽、蛋白质、鞣质等→ 多肽、蛋白质、鞣质等→假阳性反应 麻黄碱、秋水仙碱等→ 麻黄碱、秋水仙碱等→假阴性反应
皂甙—可溶于水，易溶于热水、含水稀醇等
大多无明显的紫外吸收或仅在200nm附近有末端 大多无明显的紫外吸收或仅在200nm附近有末端 吸收
理化性质
显色反应
醋酐醋酐-浓硫酸反应 五氯化锑反应 三铝醋酸反应 冰醋酸冰醋酸-乙酰氯反应 氯仿氯仿-硫酸反应
金属盐类反应
+铅、钡、铜盐→沉淀 铜盐→ 酸性皂甙+硫酸铵/醋酸铅/中性盐→ 酸性皂甙+硫酸铵/醋酸铅/中性盐→沉淀 中性皂甙+碱式醋酸铅/氢氧化钡/碱性盐→ 中性皂甙+碱式醋酸铅/氢氧化钡/碱性盐→沉淀
银杏叶提取物总黄酮醇苷含量测定 银杏叶提取物总黄酮醇苷含量测定 总黄酮醇苷含量
[含量测定]色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为 含量测定] 填充剂；以甲醇填充剂；以甲醇-0.4%磷酸溶液（50：50）为流动相；检测波长为360nm。 磷酸溶液（50：50）为流动相；检测波长为360nm。 理论板数按槲皮素峰计算应不低于2500， 理论板数按槲皮素峰计算应不低于2500，山柰素酚峰与异鼠李素峰的分离 度应大于1 度应大于1.5。 对照品溶液的制备（ 对照品溶液的制备（略） 供试品溶液的制备 取本品10片，除去包衣，精密称定，研细，取约 取本品10片 除去包衣，精密称定，研细， 相当于总黄酮醇苷19. mg的粉末，精密称定，精密加入甲醇20ml， 相当于总黄酮醇苷19.2mg的粉末，精密称定，精密加入甲醇20ml，称定重 量，超声处理20分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀， 超声处理20分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀， 滤过，精密量取续滤液10ml， 100ml锥形瓶中，加甲醇10ml、25% 滤过，精密量取续滤液10ml，置100ml锥形瓶中，加甲醇10ml、25%盐酸 溶液5ml ， 摇匀， 置水浴中加热回流30 分钟， 迅速冷却至室温， 溶液 5ml， 摇匀 ， 置水浴中加热回流 30分钟 ， 迅速冷却至室温 ， 转移至 50ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜（0.45μm）滤过， 50ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜（ 45μ 滤过， 取滤液，即得。 取滤液，即得。 测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ 谱仪，测定，分别计算槲皮素、山奈素和异鼠李素的含量， 谱仪，测定，分别计算槲皮素、山奈素和异鼠李素的含量，按下式换算成 总黄酮苷的含量。 总黄酮苷的含量。 总黄酮醇苷含量=（槲皮素含量+山奈素含量+ 总黄酮醇苷含量=（槲皮素含量+山奈素含量+异鼠李素含量） ×2.51
丹参醌IIA 丹参醌
Biblioteka Baidu
酸碱性
醌甙—可溶于热水，易溶于甲醇、乙醇
酚羟基→ 酚羟基→酸性
§4 醌类成分分析
理化性质
显色反应
羟基蒽醌+ 羟基蒽醌+碱→橙，红，紫红，蓝 紫红， +Pb2+/Mg2+ →配合物 +对亚硝基二甲基苯胺→紫，绿，蓝，灰 对亚硝基二甲基苯胺→
定性鉴别
显色反应 升华法 薄层鉴别
§3 三萜皂甙类成分分析 三萜皂甙类成分分析
COOH H
概述 理化性质
溶解性
R 2O OH H
20
O
3 RO H
H
3
物理性状（存在的形态，表面活性，吸湿性） 物理性状（存在的形态，表面活性，吸湿性）
皂甙元—能溶于石油醚、苯、乙醚、氯仿等
甘草酸
R 1O
6
人参皂甙(A型 人参皂甙 型)
紫外光谱特征
定性鉴别
薄层色谱鉴别 吸附剂：氧化铝、 吸附剂：氧化铝、硅胶 展开剂：氯仿、 展开剂：氯仿、苯等 显色剂：改良碘化铋钾试剂， 显色剂：改良碘化铋钾试剂，碘蒸气等 气相色谱 麻黄碱、苦参碱、 麻黄碱、苦参碱、颠茄类生物碱的含量测定 液相色谱
含量测定
总生物碱含量测定
化学分析法 分光光度法
直接测定 离子对萃取比色法 酸性染料比色法 BH十十In－→（BH十In－）→BH十In－ 苦味酸盐比色法 雷氏盐比色法 异羟肟酸铁比色法 （含有酯键结构的生物碱 ）
薄层色谱法 高效液相色谱 甘草酸、远志皂甙→紫外检测器 甘草酸、远志皂甙→ 其他→蒸发光散射检测器（ELSD） 其他→蒸发光散射检测器（ELSD）
O O
OH
9
O
OH
概述 理化性质
溶解性
O
OH
10
CH3 O
大黄素 物理性状（存在的形态，升华性，光不稳定性） 物理性状（存在的形态，升华性，光不稳定性） 游离—溶于乙醇、苯、乙醚、氯仿等
三萜皂甙类成分的分离
溶剂萃取 柱层析（大孔树脂柱） 柱层析（大孔树脂柱） 沉淀法
定性鉴别
泡沫反应 显色反应
定性鉴别
薄层色谱鉴别
吸附剂：硅胶、氧化铝、 吸附剂：硅胶、氧化铝、硅藻土 展开剂： 展开剂：
三萜皂甙—氯仿-甲醇-水、正丁醇-醋酸乙酯-水 三萜皂甙 甲醇正丁醇-醋酸乙酯等极性较大的体系 极性较大的体系 三萜皂甙元--以苯、氯仿、己烷等为主要组分 三萜皂甙元--以苯、氯仿、 --以苯
显色剂
三氯醋酸、50%及10%硫酸乙醇液、磷钼酸、浓 三氯醋酸、50%及10%硫酸乙醇液 磷钼酸、 硫酸乙醇液、 硫酸-醋酸酐、 硫酸-醋酸酐、碘蒸气等
含量测定
总皂甙含量测定
重量法 比色法
显色剂：香草醛-硫酸，香草醛-高氯酸，酸酐-硫酸 显色剂：香草醛-硫酸，香草醛-高氯酸，酸酐等等
三萜皂甙类单体成分含量测定
含量测定
单体生物碱含量测定
薄层色谱法 高效液相色谱法
液—液分配色谱法（以反相为主，如ODS或C18） 液分配色谱法（以反相为主， ODS或 改进流动相（硅醇基抑制剂、 改进流动相（硅醇基抑制剂、低浓度的离子对试 季铵盐试剂、电解质缓冲液） 剂、季铵盐试剂、电解质缓冲液） 固定相改进（封尾技术） 固定相改进（封尾技术） 液—固吸附色谱法 离子交换色谱法（阳离子交换树脂） 离子交换色谱法（阳离子交换树脂） 检测器
结合蒽醌的测定
极性溶剂提取，水解测甙元 极性溶剂提取， 先酸水解后，非极性溶剂提取甙元后测定 先酸水解后，
醌类单体成分含量测定
薄层色谱法 高效液相色谱
牛黄解毒片中游离蒽醌和总蒽醌的测定— 牛黄解毒片中游离蒽醌和总蒽醌的测定—混合碱液比色法
对照品溶液测定：以1，8-二羟基蒽醌为对照品，精密称取10mg于100mL 对照品溶液测定： 二羟基蒽醌为对照品，精密称取10mg于100mL 量瓶中， 加甲醇溶解并稀释至刻度（ 100 g/mL ） 量瓶中 ， 加甲醇溶解并稀释至刻度 （ 100 g/mL） 。 取 1mL对照品液于 mL 对照品液于 10mL量瓶中，在水浴上蒸干，加5%氢氧化钠-2%氢氧化铵混合碱溶解并 10mL量瓶中，在水浴上蒸干， 氢氧化钠- 氢氧化铵混合碱溶解并 稀释至刻度，放置1小时， 稀释至刻度，放置1小时，以5%氢氧化钠-2%氢氧化铵混合碱液为空白， 氢氧化钠- 氢氧化铵混合碱液为空白， 在510nm波长处测定。 510nm波长处测定。 样品测定：⑴游离蒽醌的测定：取牛黄解毒片10片，刮去糖衣，精密称定 样品测定： 游离蒽醌的测定：取牛黄解毒片10片 刮去糖衣， 重量，研细。称取一片重，置于具塞三角瓶中，精密加入氯仿100mL， 重量，研细。称取一片重，置于具塞三角瓶中，精密加入氯仿100mL，称 重，水浴上回流4小时，取下，加塞，放冷，称重，用氯仿补充至原重量， 水浴上回流4小时，取下，加塞，放冷，称重，用氯仿补充至原重量， 滤过，吸取滤液50mL于分液漏斗中， 蒸馏水20mL洗涤数次， 滤过，吸取滤液50mL于分液漏斗中，用蒸馏水20mL洗涤数次，至水层无 色，弃去水液。氯仿层用5%氢氧化钠-2%氢氧化铵混合碱液振摇萃取数次， 弃去水液。氯仿层用5 氢氧化钠- 氢氧化铵混合碱液振摇萃取数次， 直至混合碱液无色，合并碱液， 20mL氯仿洗涤数次，至氯仿层无色， 直至混合碱液无色，合并碱液，用20mL氯仿洗涤数次，至氯仿层无色， 弃去氯仿层。 将混合碱液在水浴上 加热数分钟至氯仿挥尽， 冷却 ， 弃去氯仿层 。 将混合碱液在水浴上加热数分钟至氯仿挥尽 ， 冷却， 移入 100mL量瓶中，并稀释至刻度，放置1小时， 100mL量瓶中，并稀释至刻度，放置1小时，以5%氢氧化钠-2%氢氧化铵 氢氧化钠混合碱液为空白， 510nm处测定，计算游离蒽醌的含量（相当于1 混合碱液为空白，在510nm处测定，计算游离蒽醌的含量（相当于1，8-二 羟基蒽醌含量） 羟基蒽醌含量）。
第六章 中药制剂中各类化学成 分分析
§1 生物碱类成分分析
概述 理化性质
物理性状（存在的形态，升华性，挥发性，光学活性） 物理性状（存在的形态，升华性，挥发性，光学活性） 碱性 溶解性 游离—易溶于CHCl3，Et2O，EtOH等有机溶剂
沉淀反应 生物碱盐—水溶性增强
沉淀剂：碘化物复盐、重金属盐、 沉淀剂：碘化物复盐、重金属盐、大分子酸
吸附剂：硅胶 吸附剂： 展开剂：多含甲醇或水的混合溶剂系统→ 展开剂：多含甲醇或水的混合溶剂系统→分离甙和甙元 不含甲醇或水的混合溶剂系统→ 不含甲醇或水的混合溶剂系统→分离甙元 显色：碱性试剂，醋酸镁甲醇液、 显色：碱性试剂，醋酸镁甲醇液、氨熏
含量测定
游离蒽醌的测定
弱极性溶剂提取后，加碱比色 弱极性溶剂提取后，
马钱子散中生物碱成分的鉴别 取马钱子散1g，加浓氨试液数滴及氯仿 取马钱子散 ，加浓氨试液数滴及氯仿10ml，浸泡数小时， ，浸泡数小时， 滤过，取滤液1ml蒸干，残渣加稀盐酸 蒸干， 使溶解， 滤过，取滤液 蒸干 残渣加稀盐酸1ml使溶解，加碘化铋 使溶解 钾试液1~2滴，即生成黄棕色沉淀。 钾试液 滴 即生成黄棕色沉淀。
牛黄解毒片中游离蒽醌和总蒽醌的测定— 牛黄解毒片中游离蒽醌和总蒽醌的测定—混合碱液比色法 ⑵总蒽醌的测定：精密称取游离蒽醌项下的牛黄解毒片粉一 总蒽醌的测定： 片置于150mL烧瓶中， 片置于150mL烧瓶中，加2.5mol/L硫酸30mL直火回流4小时， mol/L硫酸30mL直火回流4小时， 放冷，加入氯仿20mL，水浴回流0 小时，放冷，吸出氯仿液， 放冷，加入氯仿20mL，水浴回流0.5小时，放冷，吸出氯仿液， 再加氯仿， 反复操作至氯仿无色为止 。 合并氯仿层液， 再加氯仿 ， 反复操作至氯仿无色为止。 合并氯仿层液 ， 用 蒸 馏水洗涤数次，至水层无色，弃去水液。氯仿液用5 馏水洗涤数次，至水层无色，弃去水液。氯仿液用5%氢氧化 钠-2%氢氧化铵混合碱液振摇萃取数次，至碱液无色，合并， 氢氧化铵混合碱液振摇萃取数次，至碱液无色，合并， 用20mL氯仿洗涤数次，至氯仿层无色，弃去氯仿液。将碱液 20mL氯仿洗涤数次，至氯仿层无色，弃去氯仿液。 置水浴上加热至氯仿挥尽，冷却，移入50mL量瓶中， 置水浴上加热至氯仿挥尽，冷却，移入50mL量瓶中，用混合 碱液稀释至刻度，放置1小时， 碱液稀释至刻度，放置1小时，以5%氢氧化钠-2%氢氧化铵液 氢氧化钠为空白， 510nm处测定，计算游离蒽醌的含量（相当于1 为空白，在510nm处测定，计算游离蒽醌的含量（相当于1，8-二羟
理化性质
显色反应 还原反应（盐酸镁粉反应） 还原反应（盐酸镁粉反应） 金属盐类试剂的配合反应（ 金属盐类试剂的配合反应（铝、铅、锆、 镁盐） 镁盐） 紫外光谱特征 I带(300-400nm) →B环桂皮酰基 (300→B环桂皮酰基 II带(240II带(240-285nm) →A环苯甲酰基 →A环苯甲酰基
气相色谱法
§2 黄酮类成分分析 黄酮类成分分析
概述 理化性质
物理性状（存在的形态，颜色，挥发性，光学活性） 物理性状（存在的形态，颜色，挥发性，光学活性） 溶解性
游离甙元—易溶于甲醇、乙醇、乙酸乙酯、乙醚等
酸碱性
黄酮甙—易溶于水、甲醇、乙醇
酸性：与酚羟基的数目和位置有关 酸性： 7,4‘ 二羟基> 77,4‘- 二羟基> 7-或4‘- 羟基> 一般酚> 5-羟基 羟基> 一般酚> 5碱性
黄酮类成分的分离
溶剂萃取 柱层析（聚酰胺柱） 柱层析（聚酰胺柱） 沉淀法
定性鉴别
显色反应 盐酸盐酸-镁粉反应 金属盐类配合反应
定性鉴别
薄层色谱鉴别
硅胶--分离弱极性黄酮 硅胶--分离弱极性黄酮
展开系统：甲苯-甲酸乙酯-甲酸，氯仿-甲醇 展开系统：甲苯-甲酸乙酯-甲酸，氯仿-
聚酰胺--分离含游离酚羟基的黄酮及其苷 聚酰胺--分离含游离酚羟基的黄酮及其苷
纤维素--分离多糖苷混合物 纤维素--分离多糖苷混合物
展开系统：正丁醇-乙酸-水，甲酸，乙酸 展开系统：正丁醇-乙酸甲酸，
含量测定
总黄酮含量测定
紫外分光光度法 比色法 高效液相色谱法
正相色谱 硅胶固定相— 硅胶固定相—没有羟基或乙酰化黄酮类成分 反相色谱（C18或C8） 反相色谱（ 流动相：甲醇-水-乙酸（磷酸缓冲液），乙腈-水 流动相：甲醇乙酸（磷酸缓冲液），乙腈），乙腈 检测器
显色反应
+酸性染料（磺酸肽类）→有色配合物 酸性染料（磺酸肽类）
紫外光谱特征
生物碱类成分的分离
溶剂萃取 柱层析（氧化铝、硅藻土、离子交换柱） 柱层析（氧化铝、硅藻土、离子交换柱）
定性鉴别
沉淀反应、显色反应 沉淀反应、 多肽、蛋白质、鞣质等→ 多肽、蛋白质、鞣质等→假阳性反应 麻黄碱、秋水仙碱等→ 麻黄碱、秋水仙碱等→假阴性反应
皂甙—可溶于水，易溶于热水、含水稀醇等
大多无明显的紫外吸收或仅在200nm附近有末端 大多无明显的紫外吸收或仅在200nm附近有末端 吸收
理化性质
显色反应
醋酐醋酐-浓硫酸反应 五氯化锑反应 三铝醋酸反应 冰醋酸冰醋酸-乙酰氯反应 氯仿氯仿-硫酸反应
金属盐类反应
+铅、钡、铜盐→沉淀 铜盐→ 酸性皂甙+硫酸铵/醋酸铅/中性盐→ 酸性皂甙+硫酸铵/醋酸铅/中性盐→沉淀 中性皂甙+碱式醋酸铅/氢氧化钡/碱性盐→ 中性皂甙+碱式醋酸铅/氢氧化钡/碱性盐→沉淀
银杏叶提取物总黄酮醇苷含量测定 银杏叶提取物总黄酮醇苷含量测定 总黄酮醇苷含量
[含量测定]色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为 含量测定] 填充剂；以甲醇填充剂；以甲醇-0.4%磷酸溶液（50：50）为流动相；检测波长为360nm。 磷酸溶液（50：50）为流动相；检测波长为360nm。 理论板数按槲皮素峰计算应不低于2500， 理论板数按槲皮素峰计算应不低于2500，山柰素酚峰与异鼠李素峰的分离 度应大于1 度应大于1.5。 对照品溶液的制备（ 对照品溶液的制备（略） 供试品溶液的制备 取本品10片，除去包衣，精密称定，研细，取约 取本品10片 除去包衣，精密称定，研细， 相当于总黄酮醇苷19. mg的粉末，精密称定，精密加入甲醇20ml， 相当于总黄酮醇苷19.2mg的粉末，精密称定，精密加入甲醇20ml，称定重 量，超声处理20分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀， 超声处理20分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀， 滤过，精密量取续滤液10ml， 100ml锥形瓶中，加甲醇10ml、25% 滤过，精密量取续滤液10ml，置100ml锥形瓶中，加甲醇10ml、25%盐酸 溶液5ml ， 摇匀， 置水浴中加热回流30 分钟， 迅速冷却至室温， 溶液 5ml， 摇匀 ， 置水浴中加热回流 30分钟 ， 迅速冷却至室温 ， 转移至 50ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜（0.45μm）滤过， 50ml量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜（ 45μ 滤过， 取滤液，即得。 取滤液，即得。 测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ 谱仪，测定，分别计算槲皮素、山奈素和异鼠李素的含量， 谱仪，测定，分别计算槲皮素、山奈素和异鼠李素的含量，按下式换算成 总黄酮苷的含量。 总黄酮苷的含量。 总黄酮醇苷含量=（槲皮素含量+山奈素含量+ 总黄酮醇苷含量=（槲皮素含量+山奈素含量+异鼠李素含量） ×2.51
丹参醌IIA 丹参醌
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酸碱性
醌甙—可溶于热水，易溶于甲醇、乙醇
酚羟基→ 酚羟基→酸性
§4 醌类成分分析
理化性质
显色反应
羟基蒽醌+ 羟基蒽醌+碱→橙，红，紫红，蓝 紫红， +Pb2+/Mg2+ →配合物 +对亚硝基二甲基苯胺→紫，绿，蓝，灰 对亚硝基二甲基苯胺→
定性鉴别
显色反应 升华法 薄层鉴别
§3 三萜皂甙类成分分析 三萜皂甙类成分分析
COOH H
概述 理化性质
溶解性
R 2O OH H
20
O
3 RO H
H
3
物理性状（存在的形态，表面活性，吸湿性） 物理性状（存在的形态，表面活性，吸湿性）
皂甙元—能溶于石油醚、苯、乙醚、氯仿等
甘草酸
R 1O
6
人参皂甙(A型 人参皂甙 型)
紫外光谱特征
定性鉴别
薄层色谱鉴别 吸附剂：氧化铝、 吸附剂：氧化铝、硅胶 展开剂：氯仿、 展开剂：氯仿、苯等 显色剂：改良碘化铋钾试剂， 显色剂：改良碘化铋钾试剂，碘蒸气等 气相色谱 麻黄碱、苦参碱、 麻黄碱、苦参碱、颠茄类生物碱的含量测定 液相色谱
含量测定
总生物碱含量测定
化学分析法 分光光度法
直接测定 离子对萃取比色法 酸性染料比色法 BH十十In－→（BH十In－）→BH十In－ 苦味酸盐比色法 雷氏盐比色法 异羟肟酸铁比色法 （含有酯键结构的生物碱 ）
薄层色谱法 高效液相色谱 甘草酸、远志皂甙→紫外检测器 甘草酸、远志皂甙→ 其他→蒸发光散射检测器（ELSD） 其他→蒸发光散射检测器（ELSD）
O O
OH
9
O
OH
概述 理化性质
溶解性
O
OH
10
CH3 O
大黄素 物理性状（存在的形态，升华性，光不稳定性） 物理性状（存在的形态，升华性，光不稳定性） 游离—溶于乙醇、苯、乙醚、氯仿等
三萜皂甙类成分的分离
溶剂萃取 柱层析（大孔树脂柱） 柱层析（大孔树脂柱） 沉淀法
定性鉴别
泡沫反应 显色反应
定性鉴别
薄层色谱鉴别
吸附剂：硅胶、氧化铝、 吸附剂：硅胶、氧化铝、硅藻土 展开剂： 展开剂：
三萜皂甙—氯仿-甲醇-水、正丁醇-醋酸乙酯-水 三萜皂甙 甲醇正丁醇-醋酸乙酯等极性较大的体系 极性较大的体系 三萜皂甙元--以苯、氯仿、己烷等为主要组分 三萜皂甙元--以苯、氯仿、 --以苯
显色剂
三氯醋酸、50%及10%硫酸乙醇液、磷钼酸、浓 三氯醋酸、50%及10%硫酸乙醇液 磷钼酸、 硫酸乙醇液、 硫酸-醋酸酐、 硫酸-醋酸酐、碘蒸气等
含量测定
总皂甙含量测定
重量法 比色法
显色剂：香草醛-硫酸，香草醛-高氯酸，酸酐-硫酸 显色剂：香草醛-硫酸，香草醛-高氯酸，酸酐等等
三萜皂甙类单体成分含量测定
含量测定
单体生物碱含量测定
薄层色谱法 高效液相色谱法
液—液分配色谱法（以反相为主，如ODS或C18） 液分配色谱法（以反相为主， ODS或 改进流动相（硅醇基抑制剂、 改进流动相（硅醇基抑制剂、低浓度的离子对试 季铵盐试剂、电解质缓冲液） 剂、季铵盐试剂、电解质缓冲液） 固定相改进（封尾技术） 固定相改进（封尾技术） 液—固吸附色谱法 离子交换色谱法（阳离子交换树脂） 离子交换色谱法（阳离子交换树脂） 检测器
结合蒽醌的测定
极性溶剂提取，水解测甙元 极性溶剂提取， 先酸水解后，非极性溶剂提取甙元后测定 先酸水解后，
醌类单体成分含量测定
薄层色谱法 高效液相色谱
牛黄解毒片中游离蒽醌和总蒽醌的测定— 牛黄解毒片中游离蒽醌和总蒽醌的测定—混合碱液比色法
对照品溶液测定：以1，8-二羟基蒽醌为对照品，精密称取10mg于100mL 对照品溶液测定： 二羟基蒽醌为对照品，精密称取10mg于100mL 量瓶中， 加甲醇溶解并稀释至刻度（ 100 g/mL ） 量瓶中 ， 加甲醇溶解并稀释至刻度 （ 100 g/mL） 。 取 1mL对照品液于 mL 对照品液于 10mL量瓶中，在水浴上蒸干，加5%氢氧化钠-2%氢氧化铵混合碱溶解并 10mL量瓶中，在水浴上蒸干， 氢氧化钠- 氢氧化铵混合碱溶解并 稀释至刻度，放置1小时， 稀释至刻度，放置1小时，以5%氢氧化钠-2%氢氧化铵混合碱液为空白， 氢氧化钠- 氢氧化铵混合碱液为空白， 在510nm波长处测定。 510nm波长处测定。 样品测定：⑴游离蒽醌的测定：取牛黄解毒片10片，刮去糖衣，精密称定 样品测定： 游离蒽醌的测定：取牛黄解毒片10片 刮去糖衣， 重量，研细。称取一片重，置于具塞三角瓶中，精密加入氯仿100mL， 重量，研细。称取一片重，置于具塞三角瓶中，精密加入氯仿100mL，称 重，水浴上回流4小时，取下，加塞，放冷，称重，用氯仿补充至原重量， 水浴上回流4小时，取下，加塞，放冷，称重，用氯仿补充至原重量， 滤过，吸取滤液50mL于分液漏斗中， 蒸馏水20mL洗涤数次， 滤过，吸取滤液50mL于分液漏斗中，用蒸馏水20mL洗涤数次，至水层无 色，弃去水液。氯仿层用5%氢氧化钠-2%氢氧化铵混合碱液振摇萃取数次， 弃去水液。氯仿层用5 氢氧化钠- 氢氧化铵混合碱液振摇萃取数次， 直至混合碱液无色，合并碱液， 20mL氯仿洗涤数次，至氯仿层无色， 直至混合碱液无色，合并碱液，用20mL氯仿洗涤数次，至氯仿层无色， 弃去氯仿层。 将混合碱液在水浴上 加热数分钟至氯仿挥尽， 冷却 ， 弃去氯仿层 。 将混合碱液在水浴上加热数分钟至氯仿挥尽 ， 冷却， 移入 100mL量瓶中，并稀释至刻度，放置1小时， 100mL量瓶中，并稀释至刻度，放置1小时，以5%氢氧化钠-2%氢氧化铵 氢氧化钠混合碱液为空白， 510nm处测定，计算游离蒽醌的含量（相当于1 混合碱液为空白，在510nm处测定，计算游离蒽醌的含量（相当于1，8-二 羟基蒽醌含量） 羟基蒽醌含量）。
第六章 中药制剂中各类化学成 分分析
§1 生物碱类成分分析
概述 理化性质
物理性状（存在的形态，升华性，挥发性，光学活性） 物理性状（存在的形态，升华性，挥发性，光学活性） 碱性 溶解性 游离—易溶于CHCl3，Et2O，EtOH等有机溶剂
沉淀反应 生物碱盐—水溶性增强
沉淀剂：碘化物复盐、重金属盐、 沉淀剂：碘化物复盐、重金属盐、大分子酸
吸附剂：硅胶 吸附剂： 展开剂：多含甲醇或水的混合溶剂系统→ 展开剂：多含甲醇或水的混合溶剂系统→分离甙和甙元 不含甲醇或水的混合溶剂系统→ 不含甲醇或水的混合溶剂系统→分离甙元 显色：碱性试剂，醋酸镁甲醇液、 显色：碱性试剂，醋酸镁甲醇液、氨熏
含量测定
游离蒽醌的测定
弱极性溶剂提取后，加碱比色 弱极性溶剂提取后，
马钱子散中生物碱成分的鉴别 取马钱子散1g，加浓氨试液数滴及氯仿 取马钱子散 ，加浓氨试液数滴及氯仿10ml，浸泡数小时， ，浸泡数小时， 滤过，取滤液1ml蒸干，残渣加稀盐酸 蒸干， 使溶解， 滤过，取滤液 蒸干 残渣加稀盐酸1ml使溶解，加碘化铋 使溶解 钾试液1~2滴，即生成黄棕色沉淀。 钾试液 滴 即生成黄棕色沉淀。
牛黄解毒片中游离蒽醌和总蒽醌的测定— 牛黄解毒片中游离蒽醌和总蒽醌的测定—混合碱液比色法 ⑵总蒽醌的测定：精密称取游离蒽醌项下的牛黄解毒片粉一 总蒽醌的测定： 片置于150mL烧瓶中， 片置于150mL烧瓶中，加2.5mol/L硫酸30mL直火回流4小时， mol/L硫酸30mL直火回流4小时， 放冷，加入氯仿20mL，水浴回流0 小时，放冷，吸出氯仿液， 放冷，加入氯仿20mL，水浴回流0.5小时，放冷，吸出氯仿液， 再加氯仿， 反复操作至氯仿无色为止 。 合并氯仿层液， 再加氯仿 ， 反复操作至氯仿无色为止。 合并氯仿层液 ， 用 蒸 馏水洗涤数次，至水层无色，弃去水液。氯仿液用5 馏水洗涤数次，至水层无色，弃去水液。氯仿液用5%氢氧化 钠-2%氢氧化铵混合碱液振摇萃取数次，至碱液无色，合并， 氢氧化铵混合碱液振摇萃取数次，至碱液无色，合并， 用20mL氯仿洗涤数次，至氯仿层无色，弃去氯仿液。将碱液 20mL氯仿洗涤数次，至氯仿层无色，弃去氯仿液。 置水浴上加热至氯仿挥尽，冷却，移入50mL量瓶中， 置水浴上加热至氯仿挥尽，冷却，移入50mL量瓶中，用混合 碱液稀释至刻度，放置1小时， 碱液稀释至刻度，放置1小时，以5%氢氧化钠-2%氢氧化铵液 氢氧化钠为空白， 510nm处测定，计算游离蒽醌的含量（相当于1 为空白，在510nm处测定，计算游离蒽醌的含量（相当于1，8-二羟
理化性质
显色反应 还原反应（盐酸镁粉反应） 还原反应（盐酸镁粉反应） 金属盐类试剂的配合反应（ 金属盐类试剂的配合反应（铝、铅、锆、 镁盐） 镁盐） 紫外光谱特征 I带(300-400nm) →B环桂皮酰基 (300→B环桂皮酰基 II带(240II带(240-285nm) →A环苯甲酰基 →A环苯甲酰基
气相色谱法
§2 黄酮类成分分析 黄酮类成分分析
概述 理化性质
物理性状（存在的形态，颜色，挥发性，光学活性） 物理性状（存在的形态，颜色，挥发性，光学活性） 溶解性
游离甙元—易溶于甲醇、乙醇、乙酸乙酯、乙醚等
酸碱性
黄酮甙—易溶于水、甲醇、乙醇
酸性：与酚羟基的数目和位置有关 酸性： 7,4‘ 二羟基> 77,4‘- 二羟基> 7-或4‘- 羟基> 一般酚> 5-羟基 羟基> 一般酚> 5碱性
黄酮类成分的分离
溶剂萃取 柱层析（聚酰胺柱） 柱层析（聚酰胺柱） 沉淀法
定性鉴别
显色反应 盐酸盐酸-镁粉反应 金属盐类配合反应
定性鉴别
薄层色谱鉴别
硅胶--分离弱极性黄酮 硅胶--分离弱极性黄酮
展开系统：甲苯-甲酸乙酯-甲酸，氯仿-甲醇 展开系统：甲苯-甲酸乙酯-甲酸，氯仿-
聚酰胺--分离含游离酚羟基的黄酮及其苷 聚酰胺--分离含游离酚羟基的黄酮及其苷