固体脂质体纳米粒制备方法的研究进展+冯炜玮

２１８　中国医药生物技术２０１１年６月第６卷第３期　ＣｈｉｎＭｅｄＢｉｏｔｃｃｈｎｏｌ，Ｊｕｎｅ２０１１，Ｖｏ１．６。Ｎｏ．３　ＤＯＥ１０．３９６９／ｅｍｂａ．ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３－７１３Ｘ．２０１１．０３．０１０　固体脂质体纳米粒制备方法的研究进展　

冯炜玮，陈志伟　固体脂质纳米粒（ｓｏｌｉｄ　ｌｉｐｉｄ　ｎａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓ，ＳＬＮ）又称　固体脂质体，是一种室温下为固态的天然或合成的脂质体或　类脂纳米粒子。ＳＬＮ的研究始于２０世纪９ｏ年代，是一　种以硬脂酸、卵磷脂、三酰甘油等脂类原料为基质，将药物　包裹于类脂核中制成５０—１０００　ｎｍ粒径的固体脂质粒子给　药体系　～。　ＳＬＮ常温下为固态，具有以下四方面特点：①良好的　生物兼容性；②能有效地控制药物释放，并可有效避免药物　的降解和泄漏；③适合于多种给药途径；④稳定性好，能提　高不稳定药物的稳定性［３１。另外ＳＬＮ在很多疾病特别是在　癌症治疗中也显示了特殊的优越性［４］，Ｓｔｅｖｅｎｓ等　研究发　现，叶酸受体靶向系统与ＳＬＮ的联合应用与对照组（叶酸　受体靶向系统）相比较，前者明显增加了药物的在体摄取和　在叶酸受体细胞系中的细胞毒性，改善了对肿瘤生长的抑制　作用，同时也提高了嫁接肿瘤小鼠的存活率。　ＳＬＮ主要适于包裹水溶性低的药物，用作静脉注射或　局部给药，或作为靶向定位和控释作用的载体ｆ６】。何林等口　研究了肝靶向阿克拉毒素Ａ（Ａｃｌａｃｉｎｏｍｙｃｉｎ—Ａ，ＡＣＭ—Ａ）　固体脂质纳米粒（ＡＣＭ—Ａ．ＳＬＮ）的性质，实验表明ＡＣＭ—Ａ—　ｓＬＮ体系在肝脑中的药物浓度是对照组ＡＣＭ．Ａ浓度的　近３倍，具有良好的靶向性。相对于常见的药物载体，如　脂肪乳、脂质体、聚合物纳米微粒等存在的热力学不稳定、　毒副作用大以及易被单核一吞噬细胞消除等不足的脂类物　质，ＳＬＮ对机体没有任何的毒副作用，具有明显的优势。　ＳＬＮ作为药物传递系统载体，除上述特点之外，还具有载　药能力强、对靶器官有特异趋向性、成本低和利于大规模生　产等优点　】。近年来，鉴于ＳＬＮ独特的优势，针对其作为　药物或食品载体系统等方面的研究越来越多。本文就目前　ＳＬＮ的制备方法、制备过程中的主要影响因素进行综述。　１　ＳＬＮ的主要制备方法　１．１溶剂扩散法　该法是将脂质在适当温度下溶于有机溶剂，然后将获得　的混合液倒入水相中，在一定温度下进行乳化，随着有机溶　剂向水相扩散使脂质溶解度降低，同时调节ｐＨ值改变粒　子的Ｚｅｔａ电位，便可得到凝聚的ＳＬＮ，离心分离干燥后　即可获得ＳＬＮ固体粉末ｆ９］。此法以溶剂乳化扩散法制备聚　合物纳米粒为基础，不同的是使用的有机溶剂具有一定的水　溶性，且制各过程中不需要蒸发有机溶剂。　卫薇等【ｍ】采用此法制备羟喜树碱磷脂复合物，利用激　光粒度仪测得复合物粒径为１９０～２１０　ａｍ、Ｚｅｔａ电位为　１０．５～２０．５　ｍＶ、药物浓度为３０．８８　ｉｘｇ／ｍｌ，且复合物中羟喜　·综述·　树碱在水中的溶解度相对其他溶剂明显增大，水中很容易分　散形成纳米粒，以羟喜树碱．磷脂（１：２）制备获得的复合物，　可在水中形成比较均匀的脂质纳米粒，与吴燕等ｆ】　１报道的　该脂质体纳米粒所用药．脂（１：２５）相比，磷脂用量减少了　１２．５倍，且药物浓度没有明显变化。　１．２微乳法　微乳是由亲脂相（一般为油脂）、表面活性剂和水相所　组成的澄清、透明、热力学稳定的溶液。微乳法制备ＳＬＮ原　理一般可分为两步，首先是制备微乳［】　。将温度控制在脂　质（常用为硬脂酸）熔点以上，将少量熔融脂质与１～１．５倍　表面活性剂及水混合均匀，根据目标物不同，可选择性添加　助表面活性剂，稍适搅拌形成外观透明、热力学稳定的　油／水（Ｏ／Ｗ）体系。其次是冷凝固化。匀速搅拌该体系，　并于期间缓慢匀量加入大量冷水，此时可逐渐沉淀形成　ＳＬＮ分散体，借助超滤或冷冻干燥技术即可获得大量固体　颗粒［１３－１４】。　Ｍａｒｅｎｇｏ等【ｌ　５＿用热熔融设备制备固体脂质纳米球，以　熔点较低的固体类脂物作为微乳液的内相，在高温下制各　Ｏ／Ｗ微乳液，然后将高温Ｏ／Ｗ微乳液分散在冷水中降温　制备固体脂质纳米球（ＳＬＮ），实验结果表明用０．２２　ｕｍ的　针头，在温度６０℃或稍高一些以及１．５Ｐａ的条件下，可　获得平均粒径２６　ｎｍ、分散指数０．１的颗粒。　１．３高压乳匀法　该法是采用高压（１０　２００　ＭＰａ）推动液体通过狭缝　（１００　ＭＰａ时只有几个微米宽），流体在短距离内加速到非　常高的速率（大于１０００　ｋｍ／ｈ），同时在极高的剪切力和空　穴力作用下，使颗粒尺度达到纳米级【ｌ６１。此方法包括两种　技术方法：热乳匀法和冷乳匀法。热乳匀法是在高于脂质熔　点温度以上制备ＳＬＮ［　。将载药熔融脂质、相同温度的水　和乳化剂等原辅料用高剪切混合设备混匀，然后在脂质熔点　以上温度进行混合物的高压乳匀，最后经过冷凝干燥，获得　ＳＬＮ粉末状固体颗粒。通常较高的温度可制得较小的颗粒　尺寸，但同时也增加了药物和载体的降解速率。热乳匀法所　制备的ＳＬＮ的平均粒径，取决于乳匀压力和循环次数，以　及药物自身的硬度等因素。冷乳匀法则是将固体脂质与液氮　或干冰混合，研磨产生粒径５０～１００　ｍ的脂质粉末粒子，　

基金项目：山东省科学仪器设备技术攻关项目（２００８ＧＧ２ＴＧ０１０１Ｉ一５）　山东省优秀中青年科学家科研奖励基金（２００７ＢＳ０６０２１）　作者单位：２５５０４９淄博，山东理工大学生命科学学院　通讯作者：陈志伟，Ｅｍａｉｌ：ｃｈｅｎ＠ｓｄｕｔ．ｅｄｕ．ｃｎ　收稿日期：２０１１－０２　２１　中国医药生物技术２０１１年６月第６卷第３期　ＣｈｉｎＭｅｄＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌ，Ｊｕｎｅ　２０１１，Ｖｏ１．６，Ｎｏ．３　２１９　将粉末分散在表面活性剂溶液中，在低于脂质熔点５～　１０℃下高压乳匀，通过高压乳匀机的剪切使固体微粒形成　ＳＬＮ］　。　Ｌｉ等【ｌ９＿选择水飞蓟宾（ｓｉｌｉｂｉｎｉｎ，ＳＩＬ）和汉防己甲素　（ｔｅｔｒａｎｄｒｉｎｅ，ＴＥＴ）为模型药物，采用高压乳匀法将两　种药物分别包载于ＳＬＮ，制成的ＳＩＬ—ＳＬＮ呈球状，形态　规则，平均粒径为（１５７　４－８）ａｍ、Ｚｅｔａ电位为（－３５．３６　４－　２．６８）ｍＶ、包封率为９５．６４％、载药量为４，６３％；ＴＥＴ－ＳＬＮ　呈片状，形态不规则，平均粒径为（４７　４－３）ａｍ、Ｚｅｔａ电位　为（一３２．９９　４－２．５４）ｍＶ、包封率为９７．８２％、载药量为４．７６％，　实验表明ＳＩＬ—ＳＬＮ和ＴＥＴ－ＳＬＮ均具有较高的稳定性。　１．４溶剂乳化挥发法　此法是将脂质材料溶解于与水不相混溶的有机溶剂，脂　质，溶剂体系在水相中乳化，混合液在减压条件下随着有机　溶剂蒸发，脂质微粒便可在水相介质中聚集并沉淀，从而形　成纳米粒分散体［２０１。此法制得的ＳＬＮ平均粒径一般为３０～　１００　ａｍ，粒径大小主要受脂质含量和乳化剂种类影响ｒ２”。　樊兆敏等Ｉ２　１应用此法制备克拉霉素（ｃｌａｒｉｔｈｒｏｍｙｃｉｎ，　ＣＬＭ）乙基纤维素微球（ｅｔｈｙｌ　ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ　ｅｔｈｏｃｅ，ＥＣ　ＳＬＮ），　以载药量率和包封率为评价指标，进行了５因素４水平的　正交试验，确定了制备ＥＣ．ＳＬＮ的最佳工艺参数：乙基纤　维素（ＥＣ）浓度３％、克拉霉素中间体／ＥＣ为１：１、十二　烷基磺酸钠（ＳＤＳ）浓度０．１０％、油水体积比１：４、聚乙烯　醇１２４（ＰＶＡ）浓度１．０％，制得的ＣＬＭ—ＥＣ—ＳＬＮ得率和　包封率最高，分别为９８．６６％和８２．５９％。　１　５薄膜一超声分散法　将脂质和实验所需药物溶于适宜的有机溶剂，混合液置　于旋转蒸发仪减压蒸发除去有机溶剂，圆底烧瓶会形成一层　脂质薄膜，向膜中加入乳化剂水溶液，经过超声分散，便可　得到小而均匀的ＳＬＮＩ２　。　田海燕和翟光喜［２４］以去甲斑蝥素（ｎｏｒｃａｎｔｈａｒｉｄｉｎ，　ＮＣＴＤ）、硬脂酸、大豆卵磷脂等为原辅料，采用此法制备　去甲斑蝥素固体脂质纳米粒，所得ＮＣＴＤ—ＳＬＮ的平均包封　率为５４．６％，平均粒径为１９０　ａｍ，在４℃下放置３个月，　包封率和粒径、表面电位几乎无变化，颗粒实验结果表现出　良好的包封率稳定性。马艳等＿２　以姜黄素（ｃｕｒｃｕｍｉｎ，ＣＵＲ）、　硬脂酸及吐温一８０为原辅料，采用此法制备姜黄素固体脂质　纳米粒（ＣＵＲ—ＳＬＮ），通过正交试验优化表明选用姜黄素　３０　ｍｇ、硬脂酸６０　ｍｇ、卵磷脂１１７　ｍｇ等为原料时，所得　ＣＵＲ—ＳＬＮ粒径分布均匀，平均为５８．０　ａｍ，包封率达　９５．９８％、载药量为１５．８７％。　１．６方法比较　参考已报道文献［２６—２９］，综合归纳上述５种制备方法　的主要工艺指标以及生产中的优缺点，可得出表１。　

２制备中主要影响因素　２．１载体物（类脂）　ＳＬＮ是以固体脂质或者混合固体脂质为原料，经高温　乳匀法制备后，饱和脂肪酸ＳＬＮ部分或全部以高能态的ａ　和Ｄ’晶型存在ｐ　。储存过程中，高能态的晶型可以转变成　能量更低、更加有序的Ｂ晶型。由于Ｂ晶型的高度有序性，　不规则晶格数目减少，从而将药物排出。形成不规则的固体　脂质骨架是ＳＬＮ高载药量的必要条件。一般说来，药物可　位于脂肪酸链或者脂质层之间，还可存在于不规则晶格中　（如无定型ＳＬＮ骨架）［３１１。饱和脂肪酸甘油酯主要有亚稳　态的ｃｃ、ｐ’和稳定的ｐ晶型，硬脂酸主要有Ａ、Ｂ、Ｃ三　种晶型。随着降温或贮存过程中品格的老化和多晶型转变，　晶格越来越有序，容纳药物的能力也随之降低，药物逐渐析　出。脂质的链长对晶型转变的速度具有显著的影响，三肉豆　蔻酸甘油酯ＳＬＮ的多晶型转变的速度快于三硬脂酸甘油　酯，后者由于转型缓慢，更易将药物分子从晶格中挤出　。　Ｍａｎｄａｗｇａｄｅ和Ｐａｔｒａｖａｌｅ［３３１研究了高度不饱和脂肪酸　和低不饱和脂肪酸，以及两种脂肪酸氢化后分别制备而成的　ＳＬＮ，并对比了各种ＳＬＮ的理化性质与药理学作用，发现　脂肪酸链的长度对ＳＬＮ有较大影响。　２．２乳化剂　乳化剂可影响ＳＬＮ的表面性质，降低表面张力，促进　粒子分离，减少粒子聚集而达到稳定ＳＬＮ的作用。乳化剂　的种类、浓度等指标均可影响ＳＬＮ的质量，常用的乳化剂　有磷脂、ＴｉｒｏｎＸ一１００、Ｐｏｌｏｘａｍｅｒ及Ｐｏｌｏｘａｍｉｎｅ。通常情况　

表１　固体纳米脂质体主要制备方法比较