混合淋巴细胞培养试验

混合淋巴细胞培养试验

文章目录*一、混合淋巴细胞培养试验的基本信息1. 定义2. 专科分类3. 检查分类4. 适用性别5. 是否空腹*二、混合淋巴细胞培养试验的正常值和临床意义1. 正常值2. 临床意义*三、混合淋巴细胞培养试验的检查过程及注意事项1. 检查过程2. 注意事项*四、混合淋巴细胞培养试验的相关疾病和症状1. 相关疾病2. 相关症状*五、混合淋巴细胞培养试验的不适宜人群和不良反应1. 不适宜人群2. 不良反应

混合淋巴细胞培养试验的基本信息

1、定义混合淋巴细胞培养试验(mixedlymphocyteculture,MLC)是一种测定受体和供体主要组织相容性抗原(HLA抗原)相容程度的试验方法,常用于器官移植前的组织配型。混合淋巴细胞培养将供者与受者的淋巴细胞做双向混合培养,或者灭活供者的淋巴细胞做向混合培养,细胞反应的程度与供-受者相容的程度呈负相关的试验。

2、专科分类生长发育检查

3、检查分类免疫检查

4、适用性别男女均适用

5、是否空腹非空腹

混合淋巴细胞培养试验的正常值和临床意义

1、正常值形态计数法: 转化率10%;同位素计数法:比较cpm 得出P0.05。

2、临床意义混合淋巴细胞培养试验为与供-受者相容的程度呈负相关的试验。异常结果:肾移植时,活体供肾者的转化率应10%;尸体供肾者的转化率应为10%。只能在同一批实验中选用低反应配组。淋巴细胞转化率10%者为不同两个体间的组织是相容的。淋巴细胞混合培养试验用以检测患者的免疫状态。T淋巴细胞数减少时,转化率也降低。可作为器官和骨髓移植的配型方法之一,用来选择合适的供体。如转化率高为供受者分歧用。转化率低,移植后的成功率高。

混合淋巴细胞培养试验的检查过程及注意事项

1、检查过程供体淋巴细胞的制备:

新鲜外周静脉血按1∶1比例加在装有比重为1.077的淋巴细胞分离液的离心管中,轻稳加在液面上。 2000 r/min离心20 min,吸取中间雾状淋巴细胞层。生理盐水洗涤2次。台盼蓝染色,计数板计数。调整细胞密度为2×109/L,分成3管,各自离

心,留取沉淀。每管中加入250 μL丝裂霉素(终浓度50 mg/L)和1.75 mL生理盐水,37℃水浴40 min, 生理盐水离心洗涤2次。用含100 mL/L胎牛血清的RPMI 1640液调整细胞密度为1×1010/L.加入抗体封闭抗原。标记为D。

受体淋巴细胞的制备:

新鲜外周静脉血按1∶1比例加在装有比重为1.077的淋巴细胞分离液的离心管中,轻稳加在液面上。 2000 r/min离心20 min,吸取中间雾状淋巴细胞层。生理盐水洗涤2次。用含120 mL/L胎牛血清的RPMI 1640培养液调整细胞密度为1×1010/L. 标记为R。

混合淋巴细胞培养:

将已制备好的R和D按如下分组加入96孔板,置37℃,50 mL/L CO2孵箱中培养24 h. A组:R 50 μL+D 50 μL;B组:R 50 μL+D 50 μL+IL?2纯化中和mAb 15 μL;C组:R 50 μL+IL?2纯化中和mAb 15 μL;D组:R 50 μL. 每组3个复孔,空白对照组为RPMI 1640培养液100 μL。