小菜蛾饲养方法
野生与种植伏毛铁棒锤对小菜蛾的杀虫活性比较

野生与种植伏毛铁棒锤对小菜蛾的杀虫活性比较摘要:采用浸渍法测定野生与种植伏毛铁棒锤(Aconitum flavum Hand & Mazz)乙醇提取物及生物碱对小菜蛾(Plutella xylostella)的触杀活性。
结果表明,野生与种植伏毛铁棒锤30.0 mg/mL乙醇提取物对小菜蛾的72 h校正死亡率分别为86.67%、90.00%,LC50分别为13.14、12.37 mg/mL;野生与种植伏毛铁棒锤生物碱20.0 mg/mL用量时小菜蛾72 h校正死亡率均为90.00%,LC50分别为6.535、6.576 mg/mL。
野生与种植伏毛铁棒锤提取物对小菜蛾的触杀活性相近。
研究结果可为伏毛铁棒锤这一野生植物资源的有效保护提供一定的依据。
关键词:野生;种植;伏毛铁棒锤(Aconitum flavum Hand & Mazz);小菜蛾(Plutella xylostella);杀虫活性伏毛铁棒锤为毛茛科乌头属植物伏毛铁棒锤(Aconitum flavum Hand & Mazz)块根,是中国传统民族药材,主要用于风湿性关节炎、骨折、跌打瘀痛等的治疗[1,2]。
伏毛铁棒锤又称为铁棒锤、断肠草等,主要分布于中国西藏北部、甘肃、宁夏南部六盘山区等地。
现代药理研究表明,伏毛铁棒锤可作为一类重要的植物源杀虫剂,其主要活性成分为乌头碱、3-乙酰乌头碱、去氧乌头碱等生物碱类[3],防治害虫效果好[4],作为新型植物源农药的开发利用前景广阔。
伏毛铁棒锤一直以野生品入药,随着采挖量增加,资源日趋枯竭,产地生态环境也受到极大破坏。
为了解野生与种植伏毛铁棒锤的杀虫效果差异,保护野生资源和生态环境,本试验研究了野生与种植的伏毛铁棒锤乙醇提取物及生物碱对小菜蛾的杀虫活性,对比其作为杀虫剂的杀虫效果差异,为开展人工规范化种植和合理开发利用伏毛铁棒锤提供理论依据。
1 材料与方法1.1 材料1.1.1 供试昆虫小菜蛾(Plutella xylostella)采用油菜苗室内饲养,由宁夏大学能源化工重点实验室饲养继代(饲养环境温度20~28 ℃,相对湿度65%~75%,光照12 h/d),挑选生长发育状态一致的健康3龄幼虫供试。
甘蓝田小菜蛾发生规律与综合

20 年 以来 每 年稳 定 在 8 m 。 06 0 甘 h 蓝 种 植 面 积 大 ,早 中 晚 品 种 均 有 ,
宜 , 端 天气 少 , 小 菜 蛾无 明 显 抑 极 对
制, 因此小菜蛾为害较重 。
3 抗 药 性增 强 .
降雨 量 在 5 m 以 上 时 ,对 小 菜 蛾 0 m 的发 生有 一 定 的抑制 作 用 ; 雨量 在 旬 9 m 以上 时 , 0 m 小菜 蛾 发 生较 轻 。近 几 年 屯 留县 夏 季 降雨 偏 少 ,温 度 适
表皮也会被取食掉 ,仅留上表皮 , 俗 称“ 开天窗”大龄幼虫则把叶片吃成 ;
在植株上取食为害。幼虫较活跃 , 受 到惊 扰 即扭 动身体落到地面或菜叶 中; 老熟幼虫一般在菜叶背面或枯草
小菜蛾卵、 幼虫、 蛹的存活率较高 , 成 虫产卵量大 ,有利于小菜蛾的发生 。 湿度对小菜蛾的发育影响相对较小 ,
但 降 雨 量 对 小 菜 蛾 的 发 生有 直 接 影 响 , 雨 或 雷 阵 雨 对 卵 、 虫 有 冲 刷 暴 幼 作用 , 也可 导致 成 虫死 亡 。 观 察 , 据 旬
小 菜 蛾 对 许 多 有 机 磷 和 菊 酯 类 农
药产 生 了抗 药性 , 防治工作 带来 给 了困难 。菜农常采取增加施药浓度
和 使用频率 , 的甚 至使用 高毒农 有
药来 进行 防治 ,既杀死 了天 敌 , 也 破 坏 了生态 平 衡 ,造 成 害 虫 再 猖 獗 ,又导 致蔬 菜 中农 药残 留超标 ,
小 菜蛾 属鳞 翅 目菜 蛾 科 , 甘 蓝 是 上 的重 要 害虫 。 龄 幼 虫在 叶 片 的上 初 下 表 皮 之 间 潜 食 叶 肉 ,造 成 细 小 隧 道; 2龄幼 虫 除取 食 叶 肉外 ,叶 片 下
白僵菌对小菜蛾的杀伤效应研究

1 . 方 法 2
1 . 白僵菌 的培养 .1 2
制 备马铃 薯培养基 ( D ,用涂 布法转接 白僵菌, P A) 于
2 . ̄ 67 C的恒温生化培养箱 内培养 。 1 . 白僵菌孢悬液的制备 .2 2 取培养 2 w的 白僵 菌孢子粉 ,用 O5 . %吐温 8 O将孢予粉 稀释 ,在磁力搅拌 器上充分搅拌 4 h ~5 。再用 两层灭过菌的
第 2 卷第 2 9 期
菜蛾 的致死率。
唐 山 师 范 学 院 学 报
的为灰 褐色 。
20 年 3 07 月
1 .2 小菜蛾幼虫致死原因检测方法 .4 2.
将不 同浓 度杀伤致 死的幼 虫分别按先后 顺序移入倒有
1 %琼脂胶 的培养 皿中,放入 2 ℃恒温生化培养箱 内培 . 5 &7
维普资讯
第2 9卷第 2期
.
唐 山 师 范 学 院 学 报
20 年 3月 07
M a . 00 r2 7
2 . 9No 2
Jun lf agh nTahr ol e ora Tnsa ces lg o e C e
白僵菌对小菜蛾的杀伤效应研究
死作用, 且敛 牺力强,防治效果好 ,对人畜 、作物无毒害 ,
纱布 过滤 ,制 备孢 悬液。用血细胞 计数板 计数法 分别制 备
l l 子/ ,l 1。 了/ 和 l 1 了/ 的 白僵菌分 × O 孢 ml x 0 孢 ml  ̄ 0 孢 ml
生孢 子 悬 液 。
是公 认的很有 前途 的虫生真 菌。众 多实验证实 马尾松虫【、
蠖幼虫, 凤蝶幼虫【 、茶耐纹象甲【 、花生蛴螬【 等,年防
治面积在干万 以上 , 对控制虫害的严重发生和减少灾害损 失起 '很人作用 。 r
最简单的养蛆方法

最简单的养蛆方法养蛆是指在人工环境中培育蝇类幼虫。
蛆是蝇的幼虫,常见的有家蝇、蚊蝇等。
蛆不仅是食蝇鸟的主要食物,也广泛应用于医学、生物实验、饵料等领域。
养蛆方法有很多种,下面我将介绍最简单的养蛆方法。
首先,选择适当的容器。
可以选择一个透明的塑料或玻璃容器,容器大约1-2升大小即可。
在容器上方开几个小孔,以便空气流通,防止蛆窒息。
然后,准备食料。
蝇类的幼虫以腐肉和腐烂的蔬菜、水果为食,我们可以准备一些剩菜剩饭,或者将食材放置在容器中腐烂。
接下来,将蟑螂放入容器中。
最简单的方法是在市场上购买蟑螂,然后将蟑螂放入容器中。
蟑螂会找食并繁殖,产下蛆。
需要注意的是,蛆的培育环境需要保持一定的温度和湿度。
一般来说,温度控制在20-30摄氏度之间,湿度控制在50%左右。
可以利用室温或者使用加热器加热容器,使用喷水或者湿布保持湿度。
同时,需要定期清理容器。
蛆的生长速度非常快,容器内的食材很快就会完全被蛆所吃光。
此时,需要将残渣清理出来,以避免细菌滋生。
养蛆的时间根据需要和使用目的来确定。
如果需要蛆作为饵料,可以在蛆体积增大并饱满时进行收获。
如果是为了其他目的,可以在蛆发育成蝇之前收获,这样可以避免蝇的散落。
此外,养蛆过程中要避免过度喂食和过于拥挤。
喂食过多会导致食材过快腐烂,无法及时被蛆摄食;过于拥挤会影响空气流通和蛆的健康生长。
在养蛆过程中,也要注意环境的清洁和卫生,以避免疾病传播。
定期清理容器、保持室内环境整洁是必要的措施。
总结起来,养蛆的方法主要包括选择适当的容器,准备食材并放入容器中,控制温度和湿度,定期清理容器,避免过度喂食和过于拥挤,以及保持环境的清洁和卫生。
这些都是最简单的养蛆方法,只需要一些基本的设备和材料,就可以在家里轻松养蛆。
当然,具体的养蛆方法还可以根据个人需求和实际情况进行调整和改进。
甜菜夜蛾养殖方法总计

专利一:一种饲养甜菜夜蛾的人工饲料饲料配方:按重量计为:大豆粉7% - 10% 酵母粉(啤酒酵母粉)3% -5% 麦麸2% -5%球脂1.5% -3% 辅料适水余量。
本发明饲料饲养出来的甜菜夜蛾平均蛹1达117. 8ng,羽化率99% ,幼虫存活率高蛹发育良好,产卵卡及卵的出孵耳均与天然恫料接近,连续传代无畸形,蛹1仍可保持较高的水平。
本发明还具有价格低廉、经济实用、配制简便的特点,完全可以清足甜菜夜蛹生长发育的需要,适于工业大规模饲养甜菜夜蛾辅料为维生素和防腐剂,其具体的组份配比按重量计为:维生素C 0.2%- 0.3% 复合维生素B 0.05%- 0.3%山梨酸0.1%-0.4 % 尼泊金0.1%- 0. 4%。
本发明的有益效果在于:本发明饲料饲养出来的甜菜夜蛾平均蛹重达90~117mg,羽化率85~96%,达到或超过了国内外报道的饲养水平,幼虫存活率高,蛹发育良好,产卵量及卵的出孵率均与天然饲料接近,连续传代无畸形,蛹重仍可保持较高的水平。
而且在整个饲养期内饲料不变质,无霉菌污染。
与原来的饲料配方相比,本发明具有价格低廉、经济实用、配制简便的特点,完全可以满足甜菜夜蛾的生长发育需要,适于工业大规模饲养甜菜夜蛾,为病毒杀虫剂的生产提供稳定可靠的来源。
实施例1(配制500g饲料)分别称取大豆粉40g,啤酒酵母粉20g,麦麸15g,经蒸煮灭菌处理,再称取维生素C1.5g,复合维生素B0.5g,山梨酸1g,尼泊金0.5g。
称取9g琼脂加入412.5m1水中,小火加热至溶化,然后加入上述固体物质,匀浆机搅拌2分钟,分装至养虫盘即可。
配得饲料为胶状固体, 微软,土黄色,不透明,有饲料香味。
专利二:一种大量生产粘虫及甜菜夜蛾的养虫装置专利三:一种甜菜夜蛾幼虫的人工饲养方法1.一种甜菜夜蛾幼虫的人工饲养方法,其特征在于:包括以下步骤:(1)将甜菜夜蛾的卵,置于玻璃孵化缸中,孵化缸内放置- -片甘蓝叶片,待其孵化;(2)将甜菜夜蛾初孵幼虫接入装有人工饲料的二十四孔养虫板中,每孔接入4 ~ 6头,养虫板盖内加垫一层吹塑纸,饲养至3龄;(3)将甜菜夜蛾3龄幼虫转移至装有人工饲料的平底玻璃指形管,每管2头,饲养至化蛹。
溴氰虫酰胺对小菜蛾幼虫肠道真菌群落的影响

㊀山东农业科学㊀2023ꎬ55(7):73~79ShandongAgriculturalSciences㊀DOI:10.14083/j.issn.1001-4942.2023.07.010收稿日期:2022-09-14基金项目:国家自然科学基金项目 肠道微生物对小菜蛾耐受溴氰虫酰胺胁迫的作用与机制 (31860509)作者简介:陈华璋(1975 )ꎬ男ꎬ贵州仁怀人ꎬ硕士ꎬ副研究员ꎬ主要从事农业栽培及推广应用工作ꎮE-mail:chz68081@sina.com通信作者:李文红(1983 )ꎬ女ꎬ江西吉安人ꎬ博士ꎬ副研究员ꎬ主要从事农业昆虫与害虫防治研究ꎮE-mail:liwh2015@126.com溴氰虫酰胺对小菜蛾幼虫肠道真菌群落的影响陈华璋1ꎬ郑苹2ꎬ田旭3ꎬ汪汉成2ꎬ向立刚3ꎬ李文红4(1.贵州省农业科学院旱粮研究所ꎬ贵州贵阳㊀550006ꎻ2.贵州省烟草科学研究院ꎬ贵州贵阳㊀550081ꎻ3.长江大学农学院ꎬ湖北荆州㊀434000ꎻ4.贵州省农业科学院植物保护研究所ꎬ贵州贵阳㊀550006)㊀㊀摘要:昆虫肠道共生真菌对宿主的生长发育㊁食物吸收与消化以及防御等多种生命活动有重要意义ꎮ为了解第二代鱼尼丁受体抑制剂溴氰虫酰胺作用小菜蛾后对其肠道真菌群落的影响ꎬ本研究采用传统分离培养法和高通量测序技术研究了1mg/L溴氰虫酰胺浸叶饲喂与未经处理的小菜蛾幼虫肠道真菌群落组成ꎮ结果表明ꎬ小菜蛾肠道可培养优势真菌主要为青霉菌(Penicilliumsp.)和盾壳霉菌(Coniothyriumsp.)ꎬ经溴氰虫酰胺处理后的小菜蛾肠道可培养真菌还包括曲霉菌(Aspergillussp.)和黄瓜织球壳菌(Plectosphaerellacucume ̄rina)ꎮ高通量测序表明ꎬ小菜蛾幼虫肠道优势真菌门为子囊菌门(Ascomycota)㊁担子菌门(Basidiomycota)㊁毛霉门(Mucoromycota)等ꎬ优势菌属为平脐蠕孢属(Bipolaris)㊁镰刀菌属(Fusarium)㊁散尾鬼笔属(Lysurus)㊁枝孢属(Cladosporium)和赤霉菌属(Gibberella)等ꎮ1mg/L溴氰虫酰胺浸叶饲喂后ꎬ小菜蛾肠道中担子菌门㊁镰刀菌属和散尾鬼笔属等相对丰度显著降低ꎬ而平脐蠕孢属相对丰度显著增加ꎻ小菜蛾肠道真菌群落丰富度和多样性也有增加但不显著ꎮ功能预测表明小菜蛾幼虫肠道真菌群落主要功能为植物病原菌㊁土壤木材腐生菌以及植物内生菌等类群ꎮ可见ꎬ溴氰虫酰胺处理后小菜蛾幼虫肠道中真菌种类及其功能无显著变化ꎬ仅对其相对丰度和数量有较大影响ꎮ关键词:小菜蛾ꎻ溴氰虫酰胺ꎻ肠道真菌菌群ꎻ高通量测序中图分类号:S433.4㊀㊀文献标识号:A㊀㊀文章编号:1001-4942(2023)07-0073-07EffectsofCyantraniliproleonGutFungalCommunityinPlutellaxylostella(L.)LarvaeChenHuazhang1ꎬZhengPing2ꎬTianXu3ꎬWangHancheng2ꎬXiangLigang3ꎬLiWenhong4(1.InstituteofUplandCropsꎬGuizhouAcademyofAgriculturalSciencesꎬGuiyang550006ꎬChinaꎻ2.GuizhouAcademyofTobaccoScienceꎬGuiyang550081ꎬChinaꎻ3.CollegeofAgricultureꎬYangtzeUniversityꎬJingzhou434000ꎬChinaꎻ4.InstituteofPlantProtectionꎬGuizhouAcademyofAgriculturalSciencesꎬGuiyang550006ꎬChina)Abstract㊀Insectintestinalsymbioticfungiareimportantforhostlifeactivitiessuchasgrowthanddevel ̄opmentꎬfoodabsorptionanddigestionꎬanddefense.Inordertounderstandtheeffectsofthesecond ̄genera ̄tionryanodinereceptorinhibitorcyantraniliproleonthegutfungalcommunityofPlutellaxylostellaꎬtraditionalculture ̄dependentmethodandhigh ̄throughputsequencingtechniquewereusedtostudythegutfungalcommu ̄nitystructureofP.xylostellafedwith1mg/Lcyantraniliproleandno.TheresultsshowedthatthedominantculturablegutfungiofP.xylostellaweremainlyPenicilliumsp.andConiothyriumsp.ꎬandtherewerealsoAs ̄pergillussp.andPlectosphaerellacucumerinaaftertreatedwithcyantraniliprole.High ̄throughputsequencingresultsshowedthatthedominantgutfungalphylumwereAscomycotaꎬBasidiomycotaandMucoromycotaꎬandthedominantgenerawereBipolarisꎬFusariumꎬLysurusꎬCladosporiumandGibberellaꎬetc.Afterfeedingwith1mg/LcyantraniliproleꎬtherelativeabundanceofBasidiomycotaꎬFusariumandLysurussignificantlyde ̄creasedꎬwhilethatofBipolarissignificantlyincreasedꎻtherichnessanddiversityoffungalcommunityalsoin ̄creasedbutnotsignificant.Functionalpredictionindicatedthatthemainfunctionsoffungalcommunityweredominatedbyplantpathogensꎬsoilandwoodsaprotrophaꎬandendophytes.Inconclusionꎬtherewerenosig ̄nificantchangesinthegutfungalspeciesandfunctionsofP.xylostelafterfedwith1mg/Lcyantraniliproleꎬbutthereweregreateffectsonthefungalrelativeabundanceandamount.Keywords㊀PlutellaxylostellaꎻCyantraniliproleꎻGutfungalcommunityꎻHigh ̄throughputsequencing㊀㊀昆虫体内微生物与其生命活动密切相关ꎬ影响昆虫的交配[1]㊁对寄主植物的选择[2]㊁昆虫寿命[3]以及对病原菌的抵抗力[4]等ꎮ小菜蛾[Plu ̄tellaxylostella(L.)]是危害十字花科作物最为严重的害虫之一ꎬ常导致甘蓝㊁西兰花㊁芥菜㊁油菜㊁萝卜和花菜等多种重要蔬菜严重的经济损失[5]ꎮ肠道是其重要的生命器官ꎬ栖息着大量的微生物ꎬ其中细菌的丰富度和多样性较高ꎮ目前ꎬ已报道的小菜蛾肠道细菌有蒙氏肠球菌(Enterococcusmundtii)㊁粘质沙雷菌(Serratiamarcescens)㊁肉杆菌(Carnobacteriummaltaromaticum)等[6-8]ꎮ这些肠道细菌对食物的消化㊁宿主的生长发育与环境适应性均起着积极作用[6ꎬ8]ꎮ相较而言ꎬ有关小菜蛾肠道真菌群落的研究较少ꎮ当前ꎬ化学方法是防控小菜蛾最为经济有效的手段ꎮ溴氰虫酰胺为双酰胺类杀虫剂ꎬ以昆虫鱼尼丁受体为靶标ꎬ导致昆虫细胞无限制释放钙离子ꎬ使其肌肉麻痹㊁瘫痪㊁停止取食ꎬ最终死亡[9ꎬ10]ꎮ该药剂自2012年上市以来便被广泛应用于小菜蛾的防治ꎬ且效果良好[11]ꎮ杀虫剂在发挥其作用的同时也影响着昆虫肠道微生物的组成和生理代谢活动[12ꎬ13]ꎻ同时部分肠道微生物也影响着宿主对包括农药在内的有害物质的降解[14]㊁抗药性的产生[15]以及抵御病原微生物的入侵[16]等ꎮ前期研究发现溴氰虫酰胺浸叶饲喂小菜蛾ꎬ其肠道厚壁菌门和肠球菌属相对丰度均显著降低ꎬ而蓝细菌门和血杆菌属相对丰度均显著增加ꎬ同时小菜蛾肠道细菌群落多样性㊁均匀度和丰富度整体呈增加趋势ꎬ且多样性和丰富度增幅显著(待发表)ꎮ但该药剂是否对小菜蛾肠道真菌群落结构存在影响尚不清楚ꎮ微生物纯培养方法为传统研究技术ꎬ能顺利获得后续研究的微生物菌株材料[17]ꎬ高通量测序技术虽不能获得活的菌株材料ꎬ但能够较为全面了解肠道微生物菌群组成与多样性特征[18]ꎮ将两种技术相结合用于小菜蛾肠道真菌的研究可以更全面地了解小菜蛾肠道真菌菌群结构与多样性特征ꎬ从而深入探寻溴氰虫酰胺浸叶饲喂处理对其肠道真菌群落的影响规律ꎮ1㊀材料与方法1.1㊀试验材料供试小菜蛾为溴氰虫酰胺敏感品系ꎬ由贵州省农业科学研究院植物保护研究所昆虫研究室长期室内饲养ꎮ97%溴氰虫酰胺(cyantraniliprole)原药由美国杜邦公司生产ꎮPDA培养基(HB0233-12ꎬ青岛海博生物技术有限公司)ꎬDNA提取试剂盒(DP307ꎬTIANGEN)ꎮ1.2㊀试验方法1.2.1㊀基于传统分离培养法的小菜蛾肠道真菌群落研究㊀前期研究发现溴氰虫酰胺对小菜蛾的半致死浓度(LC50)为0.143mg/Lꎮ本研究用含0.1%TritonX-100(T8200ꎬSolarbio)的无菌水配制1mg/L溴氰虫酰胺药液ꎬ浸泡新鲜甘蓝叶片30s后取出晾干至表面无水痕ꎬ放入小菜蛾饲养盒中ꎬ并接入生长一致的3龄小菜蛾幼虫ꎬ以相同体积的含0.1%TritonX-100无菌水处理甘蓝叶片饲喂的小菜蛾幼虫作为对照ꎮ12h后ꎬ从对照组和溴氰虫酰胺处理组中分别随机挑选健康且大小一致的小菜蛾幼虫100头ꎬ饥饿4h后置于75%乙醇中体表消毒90sꎬ再用0.8%生理盐水冲洗3次ꎬ最后在超净工作台上解剖挑取肠道ꎮ肠道组织放入2mL无菌离心管中4ħ保存备用ꎮ向离心管中加入1mLPBS缓冲液(P1022ꎬSolarbio)后使用组织研磨器进行充分研磨ꎬ随后用PBS缓冲液将研磨液分别稀释成10-1㊁10-2㊁10-3ꎮ分别取50μL上述不同浓度稀释液均匀涂47㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀山东农业科学㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀第55卷㊀布于含1%硫酸链霉素(S8290ꎬSolarbio)和氨苄青霉素钠(A8180ꎬSolarbio)的PDA培养基上ꎬ每个浓度3次重复ꎬ置于28ħ恒温培养箱黑暗培养7dꎮ期间每天观察培养基上菌落的生长情况ꎬ一旦有新菌落出现ꎬ便从菌落边缘挑取菌丝转接至新的PDA培养基上进行纯化ꎮ对纯化后的菌株进行编号ꎬ并接种于PDA斜面培养基上ꎬ4ħ冰箱保存备用ꎮ使用真菌基因组DNA提取试剂盒提取纯化菌株的DNAꎬ基因组经稀释后ꎬ以ITS1/ITS4为引物扩增其转录间隔区ITS区ꎬPCR反应条件及体系参考吴燕燕等[17]的方法ꎮ扩增产物送至生工生物工程(上海)股份有限公司测序ꎬ测序结果在GenBank数据库中进行BLASTn比对分析ꎮ1.2.2㊀基于高通量测序技术的小菜蛾肠道真菌群落研究㊀按1.2.1方法处理小菜蛾ꎬ对照组和溴氰虫酰胺处理组分别随机挑选小菜蛾幼虫200头ꎬ收集肠道组织ꎮ采用土壤基因组DNA提取试剂盒(DP336ꎬTIANGEN)提取小菜蛾幼虫肠道微生物总DNAꎬ每样品取100头幼虫肠道ꎬ每组重复2次(对照组:SCK1㊁SCK2ꎻ溴氰虫酰胺处理组:SJY1㊁SJY2)ꎮ随后采用超微量分光光度计检测其质量与浓度ꎮ以检测合格的DNA为模板ꎬ采用ITS1F和ITS2通用引物进行PCR扩增ꎬ扩增体系与程序参考苏日娜等[19]的方法ꎮ扩增产物经纯化后送至北京诺禾致源生物科技有限公司ꎬ采用PacBioSequel平台进行三代扩增子测序ꎮ首先通过QIIME2(2019.4)软件qiimecutada ̄pttrim-paired程序切除序列的引物片段ꎬ弃去未匹配引物的序列ꎻDADA2进行质控㊁去噪㊁拼接㊁去嵌合体ꎻ采用classify-sklearn算法[20]将过滤后的序列与UNITE数据库进行物种分类学注释ꎻ使用qiimefeature-tablerarefy功能ꎬ对样品中的序列进行抽平ꎬ用于后续Alpha㊁Beta多样性分析等ꎻ运用R语言和ggplot2包计算样品微生物群落香农(Shannon)[21]㊁辛普森(Simpson)[22]㊁Chao1[23]㊁测序深度指数(Observedspecies)㊁皮诺(Pielou)[24]和覆盖度(Good scoverage)[25]等Al ̄pha多样性指数ꎻ通过R语言㊁ape包等基于Bray-Curtis距离[26]进行Beta多样性分析及主坐标分析(PCoA)ꎻ使用FunGuild对真菌群落进行功能预测分析ꎮ2㊀结果与分析2.1㊀溴氰虫酰胺对小菜蛾幼虫肠道可培养真菌的影响由表1可知ꎬ溴氰虫酰胺处理显著增加了小菜蛾肠道可培养真菌种类ꎬ但明显降低了真菌总数ꎮ对照组共获得57株真菌ꎬ溴氰虫酰胺处理组共获得22株真菌ꎮ根据真菌的形态及分子鉴定ꎬ对照组的57株真菌分别为青霉菌(Penicilliumsp.ꎬ42株)和盾壳霉菌(Coniothyriumsp.ꎬ15株)ꎻ溴氰虫酰胺处理组的22株真菌分别属于曲霉菌(Aspergillussp.ꎬ4株)㊁青霉菌(Penicilliumsp.ꎬ8株)㊁盾壳霉菌(Coniothyriumsp.ꎬ6株)和黄瓜织球壳菌(Plectosphaerellacucumerinaꎬ4株)ꎮ㊀㊀表1㊀小菜蛾肠道可培养真菌分类及统计物种菌落形态对照组溴氰虫酰胺处理组Aspergillussp.菌落白色ꎬ中央有黄色孢子04Penicilliumsp.菌落青色ꎬ边缘白色ꎬ背面黄色428Coniothyriumsp.菌落纯白色156Plectosphaerellacucumerina菌落白色042.2㊀溴氰虫酰胺对小菜蛾肠道真菌群落的影响2.2.1㊀数据质控及OTU聚类㊀IlluminaNovaSeq测序得到原始数据经过拼接和质控处理之后ꎬ溴氰虫酰胺处理组2个样本共得到93616条高质量序列ꎬ25595467个碱基ꎬ序列平均长度分别为266㊁280bpꎬ序列中GC含量分别为50.48%㊁50.68%ꎬ测序错误率小于0.01(Q20)和0.001(Q30)的碱基数分别占总碱基数的92.32%㊁86.13%和91.73%㊁85.23%ꎮ对照组中2个样本共得到131208条高质量序列ꎬ35074595个碱基ꎬ序列平均长度分别为277㊁259bpꎬ序列中GC含量分别为51.79%㊁51.81%ꎬ测序错误率小于0.01(Q20)和0.001(Q30)的碱基数分别占总碱基数的93.55%㊁87.87%和95.17%㊁90.51%(表2)ꎮ在97%的相似度水平下对样品序列进行OTU聚类ꎬ如表3所示ꎬ溴氰虫酰胺处理组中2个样本共鉴定得出真菌10门ꎬ33纲ꎬ80目ꎬ159科ꎬ271属ꎬ380种ꎻ对照组中2个样本共鉴定得出真菌10门ꎬ35纲ꎬ82目ꎬ163科ꎬ279属ꎬ397种ꎮ57㊀第7期㊀㊀㊀㊀㊀㊀陈华璋ꎬ等:溴氰虫酰胺对小菜蛾幼虫肠道真菌群落的影响㊀㊀表2㊀样本测序数据统计及质控样品原始序列高质量序列序列碱基数(nt)序列平均长度(bp)Q20(%)Q30(%)GC含量(%)高质量序列百分比(%)SCK177203614741704440427793.5587.8751.7979.50SCK289428697341803019125995.1790.5151.8177.01SJY162825462551232335826692.3286.1350.4873.07SJY261791473611327210928091.7385.2350.6876.42㊀㊀表3㊀各样本真菌群落不同分类水平下数目样品门纲目科属种SCK192965135214293SCK2103371132201265总数103582163279397SJY1102762123190243SJY282460117165212总数1033801592713802.2.2㊀ITS序列测序深度分析㊀稀释曲线(rare ̄factioncurve)是描述组内样本多样性的重要工具ꎬ可以直接反映测序数据量的合理性ꎬ并间接反映样本的物种丰富程度ꎮ本试验中两组共4个样品在测序数据为33000时曲线趋于平缓(图1)ꎬ说明此次测序数据深度已经足够ꎬ能够反映样品中大多数的真菌多样性信息ꎬ进一步测序对新OTU的产生贡献不大ꎮ因此ꎬ本研究测序量能反映小菜蛾肠道真菌群落的组成情况ꎮ图1㊀OTU水平稀释曲线2.2.3㊀小菜蛾肠道真菌群落组成㊀在门水平上溴氰虫酰胺处理组和对照组的优势菌门均为子囊菌门(Ascomycota)ꎬ其次是担子菌门(Basidiomy ̄cota)ꎻ经溴氰虫酰胺处理后的小菜蛾肠道上担子菌门丰度显著低于未处理组ꎬ其他真菌种类无显著性差异(图2)ꎮ溴氰虫酰胺处理组和对照组中相对丰度前10的菌门分别是子囊菌门(80%/77%)㊁担子菌门(4%/18%)㊁毛霉门(Mucoromy ̄cotaꎬ0.04%/0.27%)㊁被孢霉门(Mortierellomyco ̄taꎬ0.25%/0.17%)㊁罗兹菌门(Rozellomycotaꎬ0.10%/0.06%)㊁油壶菌门(Olpidiomycotaꎬ0.05%/0.08%)㊁壶菌门(Chytridiomycotaꎬ0.05%/0.04%)㊁球囊菌门(Glomeromycotaꎬ0.03%/0.02%)㊁捕虫霉门(Zoopagomycotaꎬ<0.01%)和Aphelidiomycota(<0.01%)ꎮ图2㊀小菜蛾肠道真菌门水平群落组成㊀㊀在属水平上ꎬ平脐蠕孢属(Bipolaris)为绝对优势菌ꎬ其次为镰刀菌属(Fusarium)和散尾鬼笔属(Lysurus)ꎮ溴氰虫酰胺处理组和对照组相对丰度前10的真菌属中平脐蠕孢属(66%/41%)㊁镰刀菌属(3.9%/18%)㊁散尾鬼笔属(2.9%/16%)㊁枝孢属(Cladosporiumꎬ0.6%/3.5%)㊁赤霉菌属(Gibberellaꎬ0.5%/2.3%)㊁链格孢属(Alternar ̄iaꎬ0.8%/1.7%)㊁曲霉属(Aspergillusꎬ0.3%/0.9%)和Pseudopithomyces(0.1%/0.9%)为二者共有菌属ꎻArchaeorhizomyces和伊萨酵母属(Issatchenkia)仅存在于溴氰虫酰胺处理组中ꎬ相对丰度分别为2.9%和0.5%ꎬ帚枝霉属(Sarocladium)和毕赤酵母属(Pichia)仅存在于对照组中ꎬ相对丰度分别为1.1%和0.7%(图3)ꎮ2.2.4㊀小菜蛾肠道真菌群落Alpha多样性㊀由表4可知ꎬ溴氰虫酰胺处理后小菜蛾肠道真菌群落的丰富度(Chao1㊁ACE指数)㊁测序深度指数(Ob ̄servedspecies)㊁系统发育多样性指数(PDwhole67㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀山东农业科学㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀第55卷㊀tree)均增加ꎬ除PDwholetree指数外ꎬ与对照组无显著性差异ꎬSimpson指数和Good scoverage指数均有所下降ꎮ对照组中小菜蛾肠道真菌群落Shannon㊁Simpson指数分别为3.9ʃ0.2㊁0.82ʃ0.04ꎬChao1㊁ACE指数分为980ʃ88㊁993ʃ46ꎬObservedspecies指数为830ʃ13ꎬPDwholetree指数为473ʃ14ꎬGood scoverage指数为0.995ʃ0.001ꎻ溴氰虫酰胺处理组中小菜蛾肠道真菌群落Shannon㊁Simpson指数分别为3.9ʃ0.7㊁0.67ʃ0.09ꎬChao1㊁ACE指数分别为1505ʃ561㊁1324ʃ287ꎬObservedspecies指数为1096ʃ129ꎬPDwholetree指数为745ʃ64ꎬGood scoverage指数为0.993ʃ0.003ꎮ图3㊀小菜蛾肠道属水平真菌群落组成㊀㊀表4㊀真菌群落Alpha多样性指数样品测序深度指数Observedspecies多样性指数ShannonSimpson丰富度指数Chao1ACE覆盖度指数Good scoverage系统发育多样性指数PDwholetreeSCK18393.70.789179600.996483SCK28204.10.85104210250.994463平均830ʃ13a3.9ʃ0.2a0.82ʃ0.04a980ʃ88a993ʃ46a0.995ʃ0.001a473ʃ14bSJY111874.40.73190215270.991790SJY210053.40.60110811210.995700平均1096ʃ129a3.9ʃ0.7a0.67ʃ0.09a1505ʃ561a1324ʃ287a0.993ʃ0.003a745ʃ64a㊀㊀注:同列不同小写字母表示处理和对照差异显著(P<0.05)ꎮ2.2.5㊀小菜蛾肠道真菌群落Beta多样性㊀PCoA主坐标分析表明ꎬ对照组2个样品与溴氰虫酰胺处理组2个样品距离较远ꎬ真菌群落组成差异较大ꎻ对照两样品间距离较小ꎬ真菌组成差异较小ꎬ而溴氰虫酰胺处理组的SJY1和SJY2样品之间距离较远ꎬ表明其真菌群落组成差异较大(图4)ꎮ图4㊀基于WeightedUnifrac距离PCoA分析2.2.6㊀小菜蛾肠道真菌FunGuild功能预测㊀真菌FunGuild功能预测(图5)表明:溴氰虫酰胺处理组和对照组小菜蛾肠道真菌群落的主要功能包括植物病原菌(PlantPathogenꎬ67%/45%)㊁未指定的(Unassignedꎬ17%/7%)㊁植物病原-土壤腐生微生物-木材腐生微生物(PlantPathogen-SoilSa ̄protroph-WoodSaprotrophꎬ4%/18%)㊁粪便腐生微生物-土壤腐生微生物(DungSaprotroph-SoilSa ̄protrophꎬ3%/16%)㊁未定义的腐生微生物(Unde ̄finedSaprotrophꎬ3%/5%)㊁内生植物病原(Endo ̄phyte-PlantPathogenꎬ0.6%/3.6%)㊁动物病原-内生菌-植物病原-木材腐生菌(AnimalPathogen-Endophyte-PlantPathogen-WoodSaprotrophꎬ0.8%/1.7%)ꎮ3㊀讨论与结论肠道中真菌群落相比细菌群落所占比例较小ꎬ但其对于肠道菌群稳态至关重要[27]ꎮ本研究通过传统分离培养技术从未经溴氰虫酰胺处理的小菜蛾肠道中分离出了青霉属和盾壳霉属真菌ꎬ而从溴氰虫酰胺处理的小菜蛾肠道中还分离出了曲霉属真菌和黄瓜织球壳菌ꎮ江宇航等[28]从云南松毛虫肠道中也分离出了曲霉菌属和青霉菌属ꎬ但其分离到的根霉菌㊁镰刀菌和念珠菌等本试验未获得ꎬ而高通量测序结果表明小菜蛾肠道中存在相关菌属ꎬ可能由于分离培养基和培养条件77㊀第7期㊀㊀㊀㊀㊀㊀陈华璋ꎬ等:溴氰虫酰胺对小菜蛾幼虫肠道真菌群落的影响图5㊀FunGuild功能注释相对丰度柱形图的差异未能分离出纯菌株ꎮ青霉菌作为常见的产纤维素酶菌株[29]ꎬ可帮助宿主更好地消化植物组织ꎮ研究表明青霉属㊁曲霉属和镰刀菌属均可作为昆虫肠道共生真菌ꎬ为宿主的生长发育和繁殖提供营养物质[30]ꎮ黄瓜织球壳菌可导致甘蓝[31]㊁土豆[32]㊁番茄[33]等作物发生萎蔫ꎮ此次在小菜蛾肠道中检测到黄瓜织球壳菌可能是因为其作为病原菌附着在甘蓝叶上ꎬ最后因取食进入肠道ꎮ高通量测序结果表明ꎬ平脐蠕孢属㊁镰刀菌属㊁散尾鬼笔属㊁枝孢属㊁赤霉菌属㊁链格孢属㊁曲霉属和Pseudopithomyces为肠道中优势真菌属ꎮ其中平脐蠕孢属可引起玉米[34]㊁水稻[35]和狗尾草[36]等禾本科植物的叶斑病ꎬ但尚未有其导致甘蓝感病的报道ꎻ镰刀菌属作为一种常见菌属ꎬ可以是有益菌㊁病原菌以及中性菌ꎻ散尾鬼笔属是可形成大型子实体的真菌ꎻ枝孢属㊁赤霉菌属和链格孢属中均包含大量植物病原菌ꎮ食物是肠道微生物的重要来源ꎬ因此小菜蛾肠道中包含了大量植物病原菌菌属ꎬ虽然多数并非甘蓝病原菌ꎬ但由于降雨和风力等自然因素也会导致其它植物的病原菌散播到甘蓝叶上ꎬ最终进入到小菜蛾肠道中ꎮ功能预测结果表明小菜蛾肠道中真菌群落主要为植物病原菌ꎬ其次为土壤木材腐生微生物以及植物内生菌ꎬ这也印证了小菜蛾肠道中的真菌多来自食物和土壤等ꎮ溴氰虫酰胺处理后小菜蛾肠道平脐蠕孢属的相对丰度显著增加ꎬ镰刀菌属㊁散尾鬼笔属相对丰度显著降低ꎮ物种群落方面ꎬ溴氰虫酰胺处理后小菜蛾肠道真菌群落丰富度指数㊁系统发育多样性指数等均有不同程度的上升ꎮPCoA的结果也证明了这一点ꎬ经溴氰虫酰胺处理后不同小菜蛾肠道真菌群落样本距离较远ꎬ物种组成差异较大ꎮ这可能是由于溴氰虫酰胺作用使得小菜蛾的防御机能降低ꎬ环境中的大量微生物群落进入到了小菜蛾肠道中ꎬ相关假设将在后续试验进一步验证ꎮ本研究检测了溴氰虫酰胺处理后小菜蛾肠道真菌群落结构的变化ꎬ结果显示溴氰虫酰胺处理后小菜蛾肠道真菌群落数量和多样性均有不同程度的增加ꎮ研究结果为小菜蛾肠道微生物功能的研究提供了借鉴ꎬ同时也为溴氰虫酰胺与小菜蛾的互作研究提供了参考ꎮ参㊀考㊀文㊀献:[1]㊀SharonGꎬSegalDꎬRingoJMꎬetal.CommensalbacteriaplayaroleinmatingpreferenceofDrosophilamelanogaster[J].Pro 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瓢虫的生活习性及饲养方法
瓢虫的生活习性及饲养方法瓢虫,又称七星瓢虫,是一种常见的昆虫,被广泛用于农业生物防控中。
瓢虫以吃害虫为主要食物,对农作物有一定的保护作用,因此深受农民的喜爱。
下面将介绍瓢虫的生活习性及饲养方法。
瓢虫的生活习性:1. 栖息地:瓢虫生活在多种不同环境中,包括田地、草地、树林、花坛等地方。
它们喜欢温暖湿润的环境,对阳光和光照要求较高。
2. 食物:瓢虫是肉食性昆虫,主要以各种吃嫩叶的害虫为食,如蚜虫、蓟马、小菜蛾等。
瓢虫寿命较短,一般为2-3个月,但其食量很大,可以每天吃掉几十只害虫。
3. 繁殖:瓢虫的繁殖速度较快。
雌性瓢虫一次可以产卵100-150枚,产卵多次后就会死亡。
卵孵化后出现幼虫,幼虫期约2-3周,期间会经历4次蜕皮。
幼虫主要以蚜虫等为食,长到一定阶段后就会结茧,并在茧中完成蛹化。
蛹期持续1-2周后,成虫开始孵化出来。
4. 昆虫嗜食性:瓢虫有一种与生俱来的嗜食性,即对食物的觅食和捕食能力较强,可以通过气味和触觉感知到害虫的存在并迅速捕食。
瓢虫的饲养方法:1. 温度:瓢虫对温度较为敏感,适宜的温度为20-30摄氏度。
在夏季,可以将瓢虫放在室外或阳光充足的地方饲养;在冬季,可以选择室内养殖,并提供适当的加热设备。
2. 环境:瓢虫对光照要求较高,因此需要提供充足的阳光。
瓢虫也需要高湿度的环境,可以通过喷水保持环境湿润。
饲养箱中也应提供一些树叶或草叶供瓢虫觅食和栖息。
3. 饲料:瓢虫主要以各种害虫为食,因此在瓢虫饲养箱中放入足够的害虫作为食物。
可以利用害虫捕捉器或自行捕捉害虫提供给瓢虫食用。
也可以购买商业化的瓢虫饲料作为辅助食物。
4. 防止逃跑:瓢虫的飞行能力很强,容易逃跑。
为了防止瓢虫逃跑,饲养箱应选择有盖的容器,并在顶部加上透明或通风的材料,以便观察瓢虫的生活状态。
5. 注意观察和保护:在饲养瓢虫的过程中,需要经常观察瓢虫的生长情况和食量,并及时添加足够的食物。
也要注意保护瓢虫的安全,避免接触有毒物质和杀虫剂。
小菜蛾几龄对照表
小菜蛾几龄对照表小菜蛾(Plutella xylostella)是一种重要的农业害虫,对十字花科蔬菜尤其是甘蓝类作物造成严重危害。
了解小菜蛾的生命周期和发育阶段对于有效防治该害虫具有重要意义。
本文将介绍小菜蛾的几龄对照表,帮助读者更好地了解小菜蛾的生长发育过程。
一、卵期小菜蛾的卵期是其生命周期中的第一个阶段。
小菜蛾的卵呈椭圆形,通常白色或黄色。
卵期一般持续3-7天,孵化后变为幼虫。
二、幼虫期小菜蛾的幼虫期是其生命周期中最长的阶段。
小菜蛾的幼虫身体呈淡绿色,有细长的体形和黑色的头部。
幼虫期一般持续10-14天,幼虫在这个阶段会经历几个龄期的变化。
1.一龄幼虫一龄幼虫孵化出来后,体长只有1-2毫米,身体呈淡绿色。
一龄幼虫主要以食用叶片为食,每天可以吃掉相当于自己体重的2倍以上。
2.二龄幼虫二龄幼虫的体长比一龄幼虫略长,约为3-4毫米。
二龄幼虫的身体颜色依然为淡绿色,但是会有一些黑色的斑点出现。
3.三龄幼虫三龄幼虫的体长约为6-8毫米,身体颜色深绿,黑色斑点更多。
三龄幼虫对叶片的食量较大,对植物的危害也相对较大。
4.四龄幼虫四龄幼虫的体长约为10-12毫米,身体呈深绿色。
四龄幼虫的食量达到顶峰,对植物造成的伤害也最为严重。
5.五龄幼虫五龄幼虫的体长约为12-15毫米,身体呈深绿色。
五龄幼虫进入准备蛹化的阶段,停止进食,寻找适合蛹化的场所。
三、蛹期小菜蛾的蛹期是其生命周期中的第三个阶段。
小菜蛾的蛹呈棕色或暗褐色,身体呈弯曲状。
蛹期一般持续5-10天。
四、成虫期小菜蛾的成虫期是其生命周期中的最后一个阶段。
成虫是小菜蛾的繁殖阶段,也是对作物造成危害的主要阶段。
小菜蛾的成虫翅膀呈银灰色,并有黑色斑纹。
成虫期一般持续7-10天。
总结小菜蛾的生命周期经历了卵期、幼虫期、蛹期和成虫期四个阶段。
了解小菜蛾的几龄对照表可以帮助农民和研究人员更好地掌握小菜蛾的生长发育规律,为防治小菜蛾提供科学依据。
希望本文对读者对小菜蛾的认识有所帮助。
阿维菌素等药剂对小菜蛾的毒力测定研究
19 4
阿维 菌素 等药 剂对 小菜蛾 的毒 业局 , 宁 山东宁 阳2 1 0 ) 740
摘 要: 研究了阿维菌素等药剂对小菜蛾的生物活性, 测定了阿维菌素对小菜蛾幼虫的胃毒毒力。 结果表明, 阿维 菌素对小菜蛾幼虫的毒力显著高于马拉硫磷、 灭多威、 氯氰菊酯和抑太保。 关键 词 : 小菜蛾 ; 阿维菌素 ; 毒力
2 6 6 2 mg L、 514 mg L、 9 . 0 / 7 7 34 mg L、 2 . 6 / 4 5 . 0 / 3 9 3 5 mg L、 8 .0 /
产 生 了一定程 度 的抗性 , 阿维 菌素对 防治小 菜蛾 仍很 有 但
效 , 生产 应用 上 应考 虑停 用 、 用 具不 同作 用 机制 的杀 在 换 虫剂 , 以缓解抗 性产 生。
参考 文献
【 : 维专 , 山东地区小 菜蛾对定虫 隆 、 t 性监测 [ . 1t 1: 等. B 的抗 J 植物保 】 护学报 , 9 3 2 3 :7 — 7 . 19 , 0( ) 2 3 2 6
规药 剂 己产生 高水平 抗性 , 阿维 菌素 还未产 生 明显 的 但对
抗性。 由于 阿维 菌素 的作 用 靶标 为G A AB 受体 一氯离 子 通
道 复合体 , 通过 阻断神 经传 导系统 使 昆虫产 生麻痹 造成 死 亡 , 目 生产 上常 用的其 他几类 杀虫 剂不 同 , 与 前 因此 , 管 尽
厂 )5 、 %抑太保 乳油(E本 石原产业株 式会社 ) t 。
13 试验 方法 .
室 内饲 养小 菜蛾 成功 与否 , 接影 响本 研究 工作 的进 直 行 。 据 本研 究 的要 求 与特 点 , 根 小菜 蛾 室 内饲养 主要 采用
小菜蛾的识别发生与绿色防治
·160·农 技 推 广农业开发与装备 2016年第9期摘要:小菜蛾是十字花科蔬菜的主要害虫,危害重,防治难。
对小菜蛾从农业生态系统出发,以生态控制为基础,充分发挥农业、物理、化学防治等综合的绿色防控技术,从而生产出符合农产品质量安全的健康蔬菜。
关键词:小菜蛾;发生特点;绿色防治十字花科蔬菜是人们餐桌上的菜肴之一,我区有些地方十字花科蔬菜连年种植,给小菜蛾的连续大面积发生创造了有利的环境条件。
小菜蛾已成为十字花科蔬菜的主要害虫,分布广,危害重[1]。
长期以来,菜农大多选择大量化学农药进行液面喷施防治,这样不仅使小菜蛾对化学药剂产生抗药性,而且会威胁到食品安全。
因此,采用绿色防控技术不仅可以有效预防小菜蛾的危害,减少化学农药的使用,可从源头上保证农产品安全。
1 小菜蛾的发生特点1.1 分类与寄主小菜蛾[Plutella xylostella (Linnaeus)]属鳞翅目,菜蛾科,又名小青虫、两头尖、吊丝虫,是一种世界性害虫主要危害十字花科蔬菜,其中以甘蓝、花椰菜、白菜、萝卜、油菜等受害最为严重。
1.2 形态特征与识别要点小菜蛾成虫体长6~7mm,灰褐色,翅狭长,前翅后缘有黄白色三度曲折的波纹,前翅缘毛长并翘起如鸡尾。
卵:长约0.5mm,宽0.3mm,椭圆形,出产时淡黄色,具光泽。
幼虫:出孵时深褐色,后变为绿色。
体纺锤形。
成熟幼虫体长约10 mm。
蛹:体长6~8 mm,颜色变化大,初化蛹绿色,渐变淡黄绿色,最后灰褐色。
1.3 生物学习性1.3.1 成虫习性:昼伏夜出,羽化、取食、交尾、产卵等,多在晚上,趋光性较强。
成虫飞行力不强,但可随风远距离迁移。
性诱力强。
产卵:雌成虫羽化后即可交尾,交尾后当晚就能产卵,卵在夜间产于叶背近叶脉的凹陷处,散产或3~5粒聚集在一起。
成虫寿命一般为11~28天,雌虫寿命长于雄虫。
1.3.2 幼虫习性:幼虫昼夜都能孵化,共4龄,初孵幼虫钻入叶片上下表皮之间,啃 食 叶肉 或 在 叶 柄、叶 脉 内 蛀 食,形 成 细 小 遂 道。
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小菜蛾饲养
1 虫源、材料器械和饲养条件
虫源 小菜蛾(Plutella xylostella)敏感品系,由贵州农业科学院植保所提供。
材料器械 蛭石,萝卜种子,甘蓝种子,葡萄糖,毛笔(转移幼虫),小排
笔(收集虫蛹),产卵笼(45 cm×45 cm×100 cm),不锈钢饭盒(15 cm×10 cm),
养虫架,除湿机,空调,烘箱。
饲养条件 温度21±1℃,相对湿度为40﹪-50﹪,每天光照17 h。
2 小菜蛾饲养植物的培植
催芽 将萝卜种子用5%的多菌灵药液浸泡6~8 h,去除药液后,再用清水
漂洗,除去漂浮在水面上的种子后,将其平铺于垫有黑布的塑料方盒中(不宜太
厚),覆盖黑布,放入培养箱中,温度30±1 ℃左右,相对湿度70%-75%条件下
对其进行催芽约24 h,待种子出芽后即可播种。
种植 在长方形金属饭盒中铺一层厚约3 cm的经高温灭菌的蛭石,用水浸
透(水量以蛭石吸水饱和但不能流动为准)。然后将已催芽的萝卜种子均匀撒播于
蛭石表面上,每饭盒需萝卜种子约21 g(干重),再撒上蛭石将种子覆盖(保温
保湿,有助于种子萌发生长),然后放入培养箱中培养,条件与催芽时相同(注
意浇水),待幼苗长至约3 cm时将其移入小菜蛾人工饲养室中培养。待叶片完全
展开后(约播种后5-6天,株高6~7 cm)即可用于成虫产卵或供幼虫取食。
3 小菜蛾的人工饲养
成虫饲养 在室内光照充足处设成虫产卵笼,将5盆长至6~7 cm的萝卜苗
和收集的小菜蛾虫蛹700~800头放入产卵笼中,产卵上方悬挂5%葡萄糖水饱和
的棉球供成虫补充营养,并每天更换。成虫将卵产于萝卜苗也片和茎秆上,每隔
两天更换一次萝卜苗,将更换出的萝卜苗直接置于培养环境(温度21±1℃,相对
湿度为40﹪-50﹪,每天光照17 h)下饲养。
幼虫饲养 将萝卜苗从产卵笼移出后第3~4天卵开始孵化,初孵幼虫开始取
食叶片(叶片上出现细小透明的取食小孔),萝卜苗被幼虫吃光后,靠接上新的
萝卜苗使其自动转移取食,也可将室外培植的甘蓝叶片覆盖其上,使幼虫转移到
甘蓝叶片上,再将甘蓝叶片转移到盆栽的整株甘蓝上,让其自由取食生长。一般
幼虫从孵化到达3龄需要7~8 天,此时可用于化合物的杀虫活性测定。
虫蛹收集和保存 从幼虫孵化到化蛹需要13 天左右,当幼虫化蛹,并完全
呈现蛹的形态时,将虫蛹收集起来,并将收集到的虫蛹放入4℃冰箱中保存,保
存虫蛹的容器用90 mm培养皿,在培养皿中垫上脱脂棉(可吸水,防止虫蛹被
冷凝水浸泡死亡),当收集数量达到700~800 头时,将其放入产卵笼中进行下一
代繁殖。