化学发光进展
化学发光技术原理及应用
化学发光技术原理及应用化学发光技术，是指通过化学反应的方法来产生发光现象的一种技术。
它主要依赖于化学反应的能量释放和物质发生转化的过程中产生能量的特点，使用一定的化学试剂，通过物质的化学反应，来使化学能转化为光能，从而实现发光的效果。
化学发光技术广泛应用于生物医学、物质分析、环境监测、能源技术、材料科学等领域。
本文将分别探讨化学发光技术的基本原理，以及它在不同领域中的应用。
一、化学发光技术的基本原理化学发光技术的基本原理是通过特定的化学反应来激发发光分子的能级，使发光分子达到激发态，释放出光子实现发光的过程。
因此，化学发光技术的实现需要开发出一系列符合要求的发光试剂。
常见的发光方式有如下几种。
1. 化学发光化学发光法利用特定的化学反应，使反应物的活化能转化为光能而产生发光。
比如，乳酸氧化酶催化下乳酸和过氧化氢反应生成的基质产生化学发光，可以用于检测血液中的乳酸含量。
2. 其他类型的光化学反应还有一些类型的光化学反应也能产生发光现象，比如化学发光酶免疫分析法。
如果特定化学反应产生的物质与酶或抗体结合，这时的化学发光就能表现出高度的选择性和灵敏度。
3. 高分子发光材料发光高分子材料的制备通常是将一定量的化学反应物和发光剂混合，进一步地，将混合后的料加入到具有合适性能的基体中。
高分子发光材料因其易于加工、成本低廉、安全稳定等优点，在环境监测、生物医学等诸多领域都得到有效应用。
二、化学发光技术在生物医学领域的应用发光技术在生物医学领域的应用非常广泛。
一般来讲，生化指标对临床诊断和病理变化的判断测试和检测是具有非常重要价值的。
其中最重要的生化指标之一是蛋白质，通过检测蛋白质浓度、酶活性等参数的变化，能够早期发现人体的变化，这对于疾病预防和治疗至关重要。
化学发光技术能够针对不同类型的指标开发出相应的检测方法，如果高灵敏度、特异性，检测的速度也十分快。
三、化学发光技术在环境监测领域的应用化学发光技术在环境监测领域的应用十分广泛。
化学发光免疫分析法研究进展
（ Ｎａ ｔ ｉ ｏ ｎ ａ ｌ Ｉ ｎ ｓ ｉ ｔ ｔ ｕ ｔ ｅ ｏ ｆ Ｄｉ ａ ｇ ｎ ｏ ｓ ｉ ｔ ｃ ｓ ａ ｎ ｄ Ｖａ ｃ ｃ ｉ ｎ ｅ Ｄｅ ｖ ｅ ｌ ｏ ｐ ｍｅ ｎ ｔ ｉ ｎ Ｉ ｎ ｆ ｅ ｃ ｉ ｔ ｏ ｕ ｓ Ｄｉ ｓ ｅ ａ ｓ ｅ ｓ ， Ｘｉ ａ ｍｅ ｎ Ｕｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ，Ｘｉ ａ ｍｅ ｎ ，
动检测体 系并不被 市场所 完全认 可 ， 并且性 能上有待进一 步的提高。 为此 ， 《 分子诊断与治疗杂志》 特地设 置 国 内化 学发光试剂研 究专刊 ， 报道 国产全 自动化 学发光免 疫检测 系统的最新研 究 ， 以提 高大家对 于国
产 产 品 的 认 识 和 重视 ， 推 动 国产 化 学发 光免 疫检 测 产 业 的发 展 和提 升 市 场 可接 受程 度 。
化学发光免疫分析法研究进展
陆龙飞 葛胜祥
【 摘
张军
要 ］ 化学 发光 免疫 分析 法 （ ｃ ｈ ｅ ｍｉ ｌ ｕ ｍ ｉ ｎ ｅ ｓ ｃ ｅ ｎ ｃ ｅ ｉ ｍｍｕ ｎ ｏ ａ ｓ ｓ ａ ｙ， Ｃ Ｌ Ｉ Ａ） 是 一种高 灵敏 度高 特异性
的检测 分析技 术 具 有广 泛的应用 领域 。本 文简要 介绍 了化 学发光免疫 分析法 的分类 、 发展和应 用 ， 重 点
目前 国 内多数 免 疫诊 断 企 业 包括 上 海 科 华 、 北 京 万泰 、 郑 州安 图 、 广 州达 安 和 达 瑞 、 深 圳 新 产 业 等 均 陆 续研 发 全 自动化 学发 光 免 疫检 测 系统 及 其 配 套试 剂 ， 部 分厂 家仪 器 和试 剂 已上 市销 售 。同时 ， 国家也 在 该 领 域 设 立 了相 应 的课 题 以支持 国产 全 自动 化 学发 光 免 疫 检 测 技 术 的 发展 。 然 而 ， 目前 上 市 的 国产 全 自
化学发光免疫分析技术新进展
化学发光免疫分析技术新进展
化学发光免疫分析技术新进展
本文评述了近5年国内外化学发光免疫分析技术的理论研究成果及应用进展,分别从基因工程试剂的应用、新标记物与标记技术、新固相材料、新联用检测技术和微型化、自动化检测仪器等方面进行阐述,并对该技术的发展进行了展望,引用文献162篇.
作者：王栩林金明WANG Xu LIN Jin-ming 作者单位：北京,100084,北京海淀区清华大学化学系刊名：分析试验室 ISTIC PKU 英文刊名：CHINESE JOURNAL OF ANALYSIS LABORATORY 年，卷(期)：2007 26(6) 分类号：O65 关键词：化学发光免疫分析综述。
2024年化学发光市场发展现状
2024年化学发光市场发展现状引言化学发光是一种通过化学反应产生光的现象，具有广泛的应用领域。
本文旨在介绍化学发光市场的发展现状，包括市场规模、应用领域和发展趋势。
市场规模化学发光市场在过去几年里取得了快速增长，主要受到以下因素的影响：1.市场需求增加：随着工业和科学领域的不断发展，对高性能发光材料的需求日益增加，推动了化学发光市场的扩大。
2.技术创新：化学发光技术不断创新，提高了产品的性能和品质，满足了市场需求，进一步推动了市场的发展。
3.成本下降：随着生产技术的不断成熟和规模效应的发挥，化学发光产品的制造成本逐渐下降，提高了产品的竞争力。
根据市场研究机构的数据，化学发光市场在过去五年里以每年8%的速度增长，预计未来几年将保持相似的增长趋势，市场规模有望进一步扩大。
应用领域化学发光技术在多个领域有广泛的应用，包括但不限于以下几个方面：生命科学化学发光在生命科学领域中起着重要作用，用于生物标记、蛋白质分析、细胞成像等。
例如，荧光素酶（Luciferase）被广泛用于基因表达分析，其反应发光的特性使得分析更为敏感和准确。
医疗诊断化学发光技术在医疗诊断领域具有广泛应用，如体外诊断试剂盒和免疫分析等。
化学发光产生的稳定且强烈的荧光信号，为快速、准确的诊断提供了有力的工具。
环境监测化学发光技术在环境监测中起着重要作用，如水质分析、大气污染监测等。
其高灵敏度和选择性使得化学发光成为一种理想的环境监测手段。
安防领域化学发光技术在安防领域有广泛应用，如指纹检测、荧光防伪等。
其独特的荧光特性使得化学发光成为一种高效可靠的安防技术。
发展趋势1.新技术的应用：近年来，有机发光材料、量子点技术等新兴技术得到了广泛应用，为化学发光市场带来了新的发展机遇。
2.自动化和智能化：市场对自动化和智能化设备的需求不断增加，推动了化学发光市场的进一步发展。
自动化和智能化设备提高了生产效率和质量，并降低了人工干预的风险。
3.环保要求：随着环保意识的提高，市场对环保型化学发光产品的需求逐渐增加。
化学发光法的进展综述
化学发光法的研究进展综述【摘要】化学发光分析法实际上是利用化学发光的原理，而建立起来的一种分析方法。
化学发光分析法的特点较为明显，主要表现在化学发光不需要任何光源，同时在实践的过程中化学发光分析法与其他方法相比较其灵敏度也较高，此外线性范围宽和仪器简单也是化学发光分析法的特点之一。
正式基于这些特点，化学发光分析法在环境化学、临床检验、药物分析等领域得到十分广泛的应用和研究。
本文针对化学发光法的研究进展进行综述，希望本文的研究能够为相关领域提供一些指导和借鉴。
【关键词】化学发光法；研究进展；综述doi：10.3969/j.issn.1004-7484（x）.2012.08.686 文章编号：1004-7484（2012）-08-2967-021 化学发光概述所谓化学发光（chemiluminescence，cl）实际上是产生于化学反应过程中的一种光辐射。
化学发光法的基本原理就是：化学反应的反应物或生成物吸收了反应释放的化学能由基态跃迁至电子激发态，再由激发态的最低振动能级返回基态，同时将能量以光辐射的形式释放出来，产生化学发光。
2 常见化学发光体系及其应用2.1 鲁米诺化学发光体系鲁米诺是1928年albrecht首先发现的一种发光试剂。
鲁米诺属肼类有机化。
由于鲁米诺及其衍生物性质稳定，结构简单，易于合成，且无毒不污染环境，水溶性较好，从而成为研究最多，使用最早，应用范围最广泛的化学发光试剂之一。
它在碱性溶液中可以被强氧化剂氧化而处于激发态，激发态回到基态时同时发射425nm的蓝光，所以鲁米诺的发光体都是3-氨基邻苯二甲酸根。
2.2 吖啶类化合物的化学发光体系一光泽精化学发光体系光泽精（lucigenin，lc）化学发光体系是一个性能优良、应用广泛的化学发光体系，在国内对该体系的研究与应用还很少。
国外对lc发光体系作了较深入、系统的研究。
和鲁米诺一样，光泽精在碱性介质中被h2o2氧化，裂解为激活态，发出蓝色的光，其发光效率也较高，只是氧化产物n-甲基吖啶酮难溶于水，常沉积在反应器壁上，为此常加入表面活性剂如十六烷基三甲基溴化铵（ctab）使之增活。
电化学发光在药物分析中应用的研究进展
西北药学杂志２００６年２月第２ｌ卷第１期・综述・电化学发光在药物分析中应用的研究进展李延，张成孝（陕西师范大学化学与材料科学学院，陕西西安７１００６２）中图分类号：０６５７１文献标识码：Ａ文章编号：１００４－２４０７（２００６）０１－００４５４）３电化学发光（Ｅｌｅｃｔｒｏｇｅｎｅｒａｔｅｄｃｈｅｍｉｌｕｍｉｎｅｓｃｅｎｃｅ，ＥＣＬ）分析法是对电极施加一定的电压进行电化学反应，电极反应的产物之间或与体系中的某种组分发生化学反应，产生激发态物质，激发态物质回到基态时产生发光，用光电倍增管等记录发光强度，从而对物质进行痕量分析的一种方法。
它不但具有化学发光分析的许多优点如灵敏度高、线性范围宽和仪器简单等优点，还具有电化学方法的一些特点，如电发光反虚过程控制性强，选择性好等优点。
经过几十年的发展，ＥＣ［．的研究在分析化学中的应用也已从无机物和有机物的分析拓展到了药物分析、酶分析、免疫分析、核酸分析等众多科学领域。
近年来，电化学发光分析法在药物分析中应用日益受到人们的）乏注。
国内外有关电化学发光分析研究进展均有综述”。
１。
本文简要介绍电化学发光榆测原理，评述电化学发光分析法在药物分析中的研究进展。
１电化学发光分析法的原理ＥＣＬ体系按发光试剂的种类可以分为以Ｆ两类：（Ｉ）金属配合物电化学发光体系；（２）有机化合物电化学发光体系，包括稠环芳烃类和酰肼类。
这些ＥＣＬ体系虽然都涉及激发态分子以光的形式释放能量回到基态，但是其发光机理不尽相同。
详细发光机理见有关综述…。
目前．应用于药物分析的体系多为Ｒｕ（ｂｏｙ），孙体系，因而，我们以３～三丙胺（＇ｒＰＡ）为例说明ＥＣＬ的基本原理。
Ｒｕ（ｂｐｙ）３２＋和ＴＰＡ分别在阳极表而和三丙胺的阳离子自由基（ＴＰＡ＋），ＴＰＡ＋迅速脱去１个质子形成三丙胺自由基（ＴＰＡ＋）．ＴＰＡ‘具有强的还原性，从而把Ｒｕ（ｂｐｙ），¨还原为激发态的Ｒｕ（ｂｐｙ）３２～，产生波长为６２０ｒｔｎｌ的光辐射。
化学发光法原理
化学发光法原理
化学发光法是一种利用化学反应产生的光来进行分析的方法。
它广泛应用于生
物医学、环境监测、食品安全等领域，具有灵敏度高、选择性好、操作简便等优点。
化学发光法的原理是通过化学反应产生的激发态分子，经过激发态分子的衰减而释放出光，从而实现分析检测的目的。
化学发光法的原理可以简单地概括为以下几个步骤，首先，化学发光反应的底
物分子在特定条件下被激发，使其转变为激发态分子；其次，激发态分子在短时间内发生非辐射衰减，释放出光子；最后，光子被检测器捕获并转化为电信号，通过信号处理系统得到分析结果。
化学发光法的原理可以通过具体的实例来加以说明。
例如，生物医学领域中常
用的酶免疫法中，辣根过氧化物酶（HRP）与底物间的化学反应产生的激发态分子，通过激发态分子的衰减释放出光，从而实现对生物分子的检测。
在环境监测中，化学发光法也被广泛应用于水质、大气等样品的分析，例如利用过氧化物体系对水中的有机物进行检测。
化学发光法的原理不仅可以用于定性分析，还可以用于定量分析。
通过测量发
光强度，可以确定样品中的目标物质的含量。
同时，化学发光法还可以与其他分析方法相结合，如液相色谱、气相色谱等，实现对复杂样品的分析。
总之，化学发光法作为一种灵敏度高、操作简便的分析方法，具有广泛的应用
前景。
通过深入理解其原理，合理设计化学发光反应体系，可以实现对各种目标物质的快速、准确检测，为生物医学、环境监测、食品安全等领域的研究提供有力支持。
希望本文对化学发光法的原理有所帮助，谢谢阅读！。
化学发光技术的发展及其在生物成像中的应用
化学发光技术的发展及其在生物成像中的应用随着科技的不断发展和进步，化学发光技术作为一种新型的成像技术，正在逐渐成为生物医学领域中不可或缺的手段，而且有着广泛的应用前景。
本文将介绍化学发光技术的发展历程以及其在生物成像中的应用现状。
化学发光技术的起源及发展化学发光技术，顾名思义，是利用化学物质放出的光的原理进行成像的一种技术。
其历史可以追溯到自然界中某些生物所具有的荧光现象，例如蛍火虫、某些海洋生物等，这些生物能够在特定条件下，通过荧光的形式产生发光现象。
科学家们对这些生物发光机制的研究一直持续到了19世纪末和20世纪初期，这时，人们开始意识到荧光现象可以应用于生物医学成像领域。
在科学家们的不断努力下，化学发光技术也得到了快速的发展。
其中最重要的里程碑是荧光素和分子荧光技术的发明。
荧光素是一种具有强荧光的有机分子，可以在弱酸性条件下被氧化为具有激发荧光效应的分子，而分子荧光技术也是指通过在分子中引入芳香族化合物或自然产生高度荧光的分子库，来获得荧光成像的方法。
在分子荧光技术中，最具代表性的是绿色荧光蛋白（GFP）的发明。
GFP最初由日本科学家下村益重在1992年发现，它是一种源自于具有绿色荧光蛋白的水母的蛋白质。
此后，人们在其基础上，不断进行基因修饰和设计，使之成为了一个广泛适用于生物成像的工具。
化学发光技术在生物成像中的应用现状化学发光技术在生物成像领域中的应用具有广泛的前景和应用领域。
它的优势主要在于，与其他成像技术相比，其不需要光源、不受遮挡、具有高灵敏度、高分辨率等特点，从而为生物医学研究提供了一种新的思路。
目前，化学发光技术在生物成像领域中最主要的应用为生物标记（Probe）。
生物标记是一种用于生物成像的特殊颜料或物质，在被放置到需要成像的器材或生物组织中时，可以与器材或生物组织进行交互，并在此过程中，不断运动或释放有信号的颜料或物质，从而完成成像的目标。
其中，化学发光技术在生物标记领域中的应用主要有以下几个方面：1. 荧光成像荧光成像是化学发光技术的一种重要应用。
化学发光法激发液
化学发光法激发液化学发光法激发液是一种利用化学反应产生的光来实现发光效果的材料。
它在许多领域都有广泛的应用，如生物荧光显微镜、生物传感器、化学荧光分析等。
本文将介绍化学发光法激发液的原理、应用和研究进展。
一、化学发光法激发液的原理化学发光法激发液是通过一系列化学反应产生激发态物质，进而发生光致发光的过程。
其原理主要包括两个部分：激发和发光。
1. 激发：在化学发光法激发液中，存在一种或多种激发剂，能够吸收外界能量，进入激发态。
这些激发剂通常是具有共轭结构的有机分子或金属离子。
当外界能量被吸收后，激发剂会发生电子激发，跃迁到高能级的激发态。
2. 发光：在激发态的激发剂分子中，由于能级差异，电子会自发地发生跃迁，返回到低能级的基态。
这个跃迁的过程伴随着能量的释放，即发光。
发光的波长和强度取决于激发剂分子的结构和电子能级差异。
二、化学发光法激发液的应用化学发光法激发液在生物医学领域有着广泛的应用。
其中最重要的应用之一是生物荧光显微镜。
利用化学发光法激发液作为荧光探针，可以对生物样品中的特定分子进行标记，从而实现对细胞和分子的高分辨率成像。
这项技术在生物学研究、药物筛选和临床诊断等方面具有重要意义。
化学发光法激发液还可以应用于生物传感器的制备。
通过将特定的生物分子与化学发光法激发液结合，可以构建出高灵敏度、高选择性的生物传感器。
这些传感器可以用于检测特定的生物分子，如蛋白质、DNA等，对于生物分析和生物医学研究具有重要意义。
在化学荧光分析中，化学发光法激发液也是一种重要的分析工具。
通过将待测物与化学发光法激发液反应，可以得到特定的发光信号。
通过测量发光信号的强度和特征，可以对待测物进行定量或定性分析。
这种化学发光法激发液的分析方法具有高灵敏度、高选择性和快速分析的特点，在环境监测、食品安全等领域有着广泛的应用前景。
三、化学发光法激发液的研究进展随着科学技术的不断发展，化学发光法激发液的研究也在不断深入。
一方面，研究人员在开发新型的激发剂和发光剂，以提高发光效果和发光强度。
化学发光分析法在抗生素分析中的应用研究进展
发展。 目前 化学 发光分析法 已被 广泛 的应 用于抗 生素类 药物 的含量测定 ， 现综述如下 。
１ 化 学 发 光 分 析 法
集 中用于四环素 、 金霉素 、 土霉素及多西环素 的质量分析 ， 而很 少 用于米诺 环素的含量测定 。经总结 ， 主要用 到的发光 体系有
鲁米诺体系、ｕ ｂ ｙｊ一 Ｉ） Ｒ （ｉ ） 铈（ 体系、 ｐ Ｖ 过氧化氢体系等。 由于
降低 了噪声 ， 提高 了信噪 比 ， 加上灵敏的光 电检测技术 ， 使该法
具 有背景 低 、 灵敏度高 、 线性 范 围宽 、 备简单 、 设 分析 快速 等优
点 。化学发光分 析还 具有所谓的“ 素 药 物 分 析 中 的应 用
化学发光法 结合 Ｈ Ｌ Ｐ Ｃ可 准确测 定该 类抗 生素 的含量 。四环 素 和土霉 素 在氢 氧 化钠 溶 液 中 ， 鲁米 诺一 Ｉ 发 生 化 学反 与 ＫＯ 应， 化学发光强度与 四环素 和土霉素 的浓度成 正比。用化学 发
光 法 测 定 含 量 ， 测 限 分 别 为 １ ０×１ ｍ ｌＬ和 １ １Ｘ１ 检 ． ０ ｏ／ ． ０
快 、 作 自动 化 、 用 范 围 广 等 特 点 成 为抗 生 素 的 主 要 含 量 测 操 应
头孢菌素类抗生素化学发光体 系 （ 用增 敏剂有 多聚磷 酸、 所 甲 醛、 荧光素等 ） 及可溶性锰（Ｖ）甲醛 一头孢菌素类抗生素化学 １ － 发 光体系等 。鲁米诺化学 发光体 系所用 到的鲁米 诺试剂 属酰 肼 类有机物 ， 鲁米诺试剂 （ 一 ３氨基苯二 甲酰肼 ） 在水溶液 中可 以 被 强氧化剂如过氧化氢 ， 铁氰 化钾 （ ， Ⅲ） 高碘酸钾 等氧化 而处
李艳 开
【 关键词】 化学发光分析法 ； 抗生素分析 ； 应用 ； 研究
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化学发光免疫分析技术新进展王 栩 2003年毕业于山东师范大学化学化工与材料科学学院,获理学硕士学位,2006年获中国科学院生态环境研究中心理学博士学位,同年进入清华大学化学系进行博士后研究,合作导师林金明教授。
现主要研究方向是化学发光免疫分析新技术及其在重大疾病诊断中的应用。
已经公开发表论文10余篇,申请专利4项,授权2项。
(通讯处:北京100084,北京海淀区清华大学化学系)林金明 教授,博士生导师。
1984年福州大学毕业,1992年在日本昭和大学国际交流基金资助下前往该校药学部从事访问研究。
1994年获得日本政府奖学金转入东京都立大学攻读博士学位,1997年3月获得工学博士学位,同年留学任教,2000年入选中国科学院“百人计划”,2001年获得国家杰出青年科学基金,2004年入选清华大学“百名人才引进”计划。
发表研究论文187篇,申请和获得专利15项,出版《化学发光基础理论研究与应用》、《环境、健康与负氧离子》专著各一部,《基础分析化学实验》教材一部。
兼任中国化学会分析化学学科副主任,中国色谱学会理事,中国预防医学会自由基专业委员会委员,第4届亚太环境污染物控制与分析大会秘书长,T alanta杂志“中日韩环境分析化学”特邀编辑,Eurasian Journal of Ana2lytical Chemistry,Recent Patents on Nanotechnology,Journal ofFlow Injection Analysis以及《分析化学》、《环境科学》、《分析试验室》、《科学通报》、《生命科学仪器》、《分析科学学报》、《化学通报》等国内外杂志编委。
(通讯处:北京100084,北京海淀区清华大学化学系)中图分类号:O65 文献标识码:A 文章编号:100020720(2007)062111212摘要:本文评述了近5年国内外化学发光免疫分析技术的理论研究成果及应用进展,分别从基因工程试剂的应用、新标记物与标记技术、新固相材料、新联用检测技术和微型化、自动化检测仪器等方面进行阐述,并对该技术的发展进行了展望,引用文献162篇。
关键词:化学发光免疫分析;综述化学发光免疫分析法(Chemiluminescence immunoassay,C LI A)是建立在放射免疫分析技术(radioimmunoassay,RI A)理论的基础上,以标记发光剂为示踪物信号建立起来的一种非放射标记免疫分析法,具有灵敏度高、线性范围宽、仪器设备简单、操作方便、分析速度快和容易实现自动化等优点。
经过三十年的发展,目前已成为融合众多学科知识的一种检测技术,并已广泛应用于生命分析、环境检测、临床检验、食品安全和工业分析等领域。
进入21世纪,随着基因工程试剂、新型标记物与标记技术、新固相材料、新联用检测技术的应用以及免疫测定的自动化、集成化和微型化,C LI A已渐突破了以往模式,在试剂、检测方法和仪器等方面呈现出新的发展趋势。
1 有关C LI A的综述报告自从1977年Tsuji等提出了化学发光免疫分析技术(Chemiluminescence immunoassay,C LI A)[A1]以来,随着C LI A被广泛应用于各个领域,不同领域的研究人员从不同角度对C LI A进行了综述评论,但大部分是针对某一领域或某一研究方向的阐述,并且C LI A只是作为评论的一部分得以报道,对C LI A进行全面详尽的评论则较少。
这些评论主要集中于环境检测、临床检验、生命分析和食品检测等。
近5年来内容涉及C LI A的综述评论见表1。
2 基因工程试剂和模拟抗体的应用免疫测定技术的基础在于抗原抗体之间的特异结合,所以好的免疫分析方法离不开优质的原料,如抗原、抗体、酶等。
上个世纪80年代中期,随着分子生物学的发展,出现了基因工程试剂,尤以人源化抗体、小分子抗体、抗体库技术、基因工程酶为代表,成为新一代免疫检测试剂的发展方向。
随之各种新型的测定方法也不断涌现,使得对以前一些难以检测的生物活性物质的测定变得容易起来,并且大大提高了检测的灵敏度和特异性。
2.1 基因工程抗体的应用单克隆抗体的广泛使用为建立高灵敏、高特异的免疫分析技术提供了极大的帮助,并且在抗体的细微结构解析、复杂生物物质的分离纯化等方面得到了应用。
但由于目前由杂交瘤技术制备的单克隆抗体大多是鼠源性的,容易被人体免疫系统识别而产生人抗鼠抗体,所以在保持单克隆抗体对抗原的亲和力的基础上对其进行人源化改造,制备人鼠嵌合抗体,可以降低异源抗体的免疫原性。
随着基因工程技术的发展与成熟,以基因工程抗原代替难以培养、获得的病原体抗原或高活性抗原,同时很好的解决了抗原纯度差难以纯化的问题。
而利用基因工程技术对抗体基因进行切割、拼装、修饰,并通过转基因技术使之在受体细胞中表达,或者利用抗体库技术制备单克隆抗体,已经成为目前研究的热点。
用这些抗体构建的免疫分析技术,将会更特异、更灵敏,并有助于大大提高免疫测定的多样性与丰富性[B1～B4]。
表1 近5年有关C LIA 的综述评论T ab .1 Published review s on C LIA in recent five years编号题名文献1Analysis of pesticides by chemiluminescence detection in the liquidphaseA22The ADVIACentaurin fectious disease assays :a technical reviewA33环境监测中的化学发光免疫分析研究A44化学发光技术在蛋白质和DNA 分析中的新进展A55化学发光法检测肿瘤标志物A66化学发光分析法应用新进展A77化学发光免疫分析A88化学发光免疫分析技术的研究现状与展望A99免疫分析中的标记试剂A1010微流控芯片免疫分析方法研究进展A1111小分子抗原酶免疫分析方法研究进展A1212E lectrochemical and chemiluminescent immunosens ors for tum or markersA1313Clinical applications of chemiluminescenceA1414Biotechnological applications of bioluminescence and chemiluminescenceA1515环境内分泌干扰物分析方法的研究与进展A1616标记免疫分析技术进展A1717标记免疫分析技术的发展点评A1818化学发光分析及其在药理学上的应用A1919增强化学发光免疫分析的研究进展A2020A selected history and future of immunoassay development and applications in clinical chemistryA21 Ueda 等[B5]在构建敞开式夹心E LIS A (open sandwichE LIS A ,OS 2E LIS A )检测体系中,利用噬菌体展示系统对杂交瘤细胞株进行筛选,得到合适的异二聚体抗体片断F v ,将其裂解后以抗体重链可变区V H 片断与碱性磷酸酶进行融合,而抗体轻链可变区V L 则生物素化,与亲和素包被板反应后即可固定,而后以OS 2E LIS A 测定双酚A 。
与传统的竞争法比较,本法测定双酚A 的特异性更强,灵敏度更高,线性范围宽,操作时间短。
完全适用于对半抗原等单价抗原进行非竞争式的化学发光免疫检测。
为了提高临床IgD 检出率,Arakawa 等[B6]制备了针对Fabδ链的鼠单克隆抗体(Anti 2Fab δm ono )和针对Fc δ链的兔多克隆抗体,并且对单克隆抗体识别Fabδ链位点的能力与其它抗体进行了对比。
Anti 2Fabδm ono 可以特异识别纯化的IgD 和骨髓源的Fab δ链,对其它的同型抗体或轻链则无法识别。
通过免疫印迹的方法进行验证,Anti 2Fabδm ono 可以对22份骨髓血清中的19份进行完整IgD 或片断识别,且其中4份可以识别区分Fab δ片断。
而其它3份血清与Anti 2Fab δm ono 则无反应,以化学发光免疫分析测定其中IgD 的值很低。
2.2 基因工程酶的应用Andrade 等[B7]以克隆酶供体免疫测定技术(cloned enz 2yme donor immunoassay ,CE DI A )构建均相酶免疫分析方法。
以DNA 重组技术制备β2半乳糖苷酶的两个片段,大片段为酶受体(enzyme acceptor ,E A ),小片段为酶供体(enzyme do 2nor ,E D ),单独的两个片段均无活性,在一定条件下结合后可显示酶的活性,并催化底物发光。
因为无需分离,所以操作简便、快速、适合于自动化,在检测灵敏度、试剂用量等方面与商业化CE DI A 试剂盒进行了对比,采用检测丙戊酸不同的3种底物,即氯酚红β2D 2吡喃半乳糖(chlorophe 2nol red 2β2D 2galactopyranoside ,显色底物)、Lumi 2G al 530(化学发光底物)、D 2虫荧光素2氧2β2吡喃半乳糖(生物发光底物)。
结果表明生物发光较适合于CE DI A 检测,可以用于生物传感器构建和监测药品和代谢物。
酶互补体系(enzymaticcomplementation systems ,ECS )是建立高灵敏均相免疫分析技术的途径之一[B8]。
K omiya 等[B9]以二价的人血清白蛋白(human serum albumin ,HS A )为待检抗原,设计了一种基于β2半乳糖苷酶的“crab 2claw ”三明治酶互补免疫检测体系(crab 2claw sandwich enzymatic complementation immunoassay ,CS 2ECI A )。
构建了两个嵌合体蛋白(chimeric protein ),分别针对HS A 分子空间相距较远的两个抗原决定簇,每一个蛋白由一个单链抗体(single 2chain Fvs ,scFvs )融合于β2半乳糖苷酶的N 端缺失株(Δα)或C 端缺失株(Δω)构成。
当样品与蛋白混合后,两个嵌合蛋白分别结合HS A 的两个抗原决定簇从而使得两株变异酶结合在一起,具有比β2半乳糖苷酶更高的活性,加入底物后发光。
测定HS A 浓度范围为10～—211—1000pgΠm L。
作者指出若将单链抗体换为其它抗体后会大大拓展CS2ECI A的应用范围。
2.3 模拟抗体的应用分子印迹聚合物(m olecular imprinted polymer,MIP)由于对模板分子的高度特异性和在强酸、强碱、高温条件下稳定的物理化学性质,被用于免疫反应中的模拟抗体研究。