金线莲总黄酮测定
种苗级别对金线莲生长发育及产量和品质的影响
种苗级别对金线莲生长发育及产量和品质的影响作者：邵清松周爱存胡润淮张雨韵刘堂梅李明焱来源：《中国中药杂志》2014年第05期[摘要] 对金线莲种苗的株高、地径、叶片数、全株鲜重和高径比5个形态指标进行检测，并进行主成分分析确定分级指标，采用逐步聚类分析方法聚类分级；进行不同等级种苗盆栽试验，对植株生长指标，药材产量和品质指标进行测定。
结果表明可以选用株高和地径为种苗分级的质量指标，并初步制定了金线莲种苗质量分级标准；不同级别金线莲种苗对植株生长发育，药材产量有影响，Ⅰ级苗的株高和地径要比Ⅱ级、Ⅲ级苗高，且药材产量也显著高于Ⅱ级、Ⅲ级苗药材产量，而对药材内在品质无明显影响，为金线莲规范化栽培提供依据。
[关键词] 金线莲；种苗分级；生长发育；产量；品质[收稿日期] 2013-08-27[基金项目] 国家自然科学基金项目（81303167）；浙江省自然科学基金项目（LY13H280010）[通信作者] *邵清松，博士，副教授，主要从事药用植物栽培与育种研究，Tel：（0571）63741273，E-mail：sqszjfc@金线莲Anoectochilus roxburghii又名金线兰、金丝草，为兰科开唇兰属多年生草本植物，主要分布在福建、浙江、台湾、江西、贵州等地，在民间享有“药王”的美称[1-2]。
金线莲全草入药，主要含有多糖、黄酮、甾体化合物、萜类、生物碱等化学成分，具有清热凉血、除湿解毒等功效，主要用于治疗糖尿病、急慢性肝炎等[3-5]。
近年来，国内外对于金线莲的种苗繁育、规范化栽培、化学成分、药理作用的研究较多[6]。
由于市场需求量增加，金线莲栽培面积不断扩大，种苗需求量日益增加。
优质的种苗是实现中药材规范化生产的物质基础和源头，也是确保中药资源可持续发展和产业化的前提。
实行中药材种苗标准化有利于中药材种苗的优化筛选，为中药材生产提供高质量的种子种苗，从而提高中药材的产量和质量[7]。
为此，有必要对金线莲种苗进行质量分级，制定金线莲的种苗质量参数标准，使金线莲中药材的生产更加规范化。
闽东野生金线莲有效成分含量的比较
闽东野生金线莲有效成分含量的比较施满容;龚林光;陆志平;雷忠涌;周三女【期刊名称】《福建农业学报》【年(卷),期】2016(031)009【摘要】为探究闽东野生金线莲有效成分含量的差异,采用紫外分光光度法测定闽东4个县、福安5个海拔高度野生金线莲有效成分的含量。
研究结果：多糖含量在5．60％~6．20％,总氨基酸含量在3．48％~3．95％,总黄酮含量在0．55％~0．82％,总生物碱含量在0．062％~0．098％。
方差分析及多重比较的结果表明,闽东不同县以及不同海拔野生金线莲有效成分含量有显著差异。
多糖、总生物碱含量以周宁县最高,总氨基酸、总黄酮含量以寿宁县最高,与福安、柘荣金线莲比较,达到极显著差异或显著差异水平。
多糖含量随着海拔高度增加而增加,差异显著,海拔730、840 m金线莲多糖含量与海拔420、530 m 金线莲比较,达到极显著或显著差异水平；总氨基酸含量随着海拔高度升高有增加趋势,但差异不显著；总黄酮、总生物碱含量在海拔420~730 m随着海拔高度增加而增加,海拔730、840m金线莲总黄酮、总生物碱含量与420、530 m金线莲比较达到极显著差异水平。
总之,多糖、黄酮、生物碱含量在650 m以上海拔与650 m以下海拔之间有显著差异,650 m以上3种海拔之间有效成分差异不显著。
结果表明,植物组织培养种质资源可以优先选择寿宁、周宁产地野生金线莲,人工栽培金线莲可以选择在650 m以上的区域地带,可能更有利于有效成分的积累。
【总页数】7页(P950-956)【作者】施满容;龚林光;陆志平;雷忠涌;周三女【作者单位】宁德职业技术学院，福建福安 355000;福安市质量监督检验所，福建福安 355000;宁德职业技术学院，福建福安 355000;宁德职业技术学院，福建福安 355000;宁德职业技术学院，福建福安 355000【正文语种】中文【相关文献】1.不同海拔阔叶林林下仿野生栽培金线莲效果比较研究 [J], 陈伟2.不同地区野生金线莲有效成分含量的比较 [J], 施满容;龚林光;陆志平;雷忠涌3.闽东野生金线莲资源调查研究 [J], 施满容;陆志平;钟幼雄;龚路生;周三女4.山西23个产地野生黄芩有效成分含量比较 [J], 陆子芳;郝建平;王秋宝5.不同月龄林下仿野生栽培金线莲有效成分含量研究 [J], 孙加焱; 余红伟; 方锡平因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
不同肥料对林下种植金线莲生长的影响
不同肥料对林下种植金线莲生长的影响发布时间：2022-09-14T02:50:08.868Z 来源：《科学与技术》2022年第30卷9期作者：李莉[导读] 通过多年的林下栽培实践，对金线莲的生长习性进行了分析和总结，制定了试验方案，并着重探讨了不同施肥措施对其生长李莉龙门县斛金缘生态农业发展有限公司广东惠州 516820摘要：通过多年的林下栽培实践，对金线莲的生长习性进行了分析和总结，制定了试验方案，并着重探讨了不同施肥措施对其生长、成活率、成活率和质量的影响。
为实现林下金线莲高产优质高效栽培提供了技术保证。
关键词：化肥；林下栽培；黄花；生长效应前言金线莲是兰科开唇兰属的一种多年生珍贵的草本植物，主要分布在福建，台湾，云南，广西，越南，缅甸等亚热带和热带地区。
金线莲是闽台民间常用的一种药材，用以治疗多种病症，是“神药”，台湾人有“中药之王”的美誉。
金线莲是一种很有价值的药材，但是由于长期的过度开采，使得它的天然资源逐渐减少，福建政府于1990年将其列入了濒临绝种的药材名单。
金线莲林下栽培因其生长特点、生长特点、林地选择、林地选择、林下栽培模式、水份管理等方面的技术问题，着重探讨了不同施肥方式对金线莲林下栽培的成活率、生长量和质量，为实现林下栽培的高产、优质、高效提供技术保证。
1金线莲的栽培特性从2012年开始，本公司在林下栽培金线莲，经9年的生产实践，现已形成以下几点：1.1金线莲对气温有很好的适应能力在20~25℃的环境中，最高气温不能超过30℃，在高温、低温条件下，要采取人工保温或降温措施[1]。
1.2含水量金线莲性喜湿，耐旱，对其生长有很大的影响。
金线莲生长于干旱、土壤缺水的地区，适宜于湿润的生态林中或小溪旁栽培，并保证土壤的相对湿度在80%以上。
1.3照明金线莲属喜荫，其光合作用的饱和度较低，最怕日光照射，适合在3000lx左右。
在天然条件下，以70%~80%的上部和40%为下层的森林为适宜的生长环境[2]。
保健食品 总黄酮测定方法
保健食品总黄酮测定方法
保健食品是指具有保健功能的食品，其中总黄酮是一种常见的保健成分。
总黄酮是指一类具有黄酮骨架结构的化合物，包括黄酮类、异黄酮类、花青素类等多种物质。
总黄酮具有抗氧化、抗炎、抗癌等多种保健作用，因此被广泛应用于保健食品中。
为了保证保健食品中总黄酮的含量符合标准，需要进行总黄酮测定。
总黄酮测定方法主要有两种：分光光度法和高效液相色谱法。
其中，分光光度法是一种简单、快速、经济的测定方法，适用于大批量样品的测定。
该方法的原理是利用总黄酮与铝离子形成络合物，使样品溶液的吸光度增加，从而测定总黄酮的含量。
该方法的操作简单，但对样品的前处理要求较高，需要去除干扰物质，否则会影响测定结果的准确性。
高效液相色谱法是一种准确、灵敏、选择性好的测定方法，适用于复杂样品的测定。
该方法的原理是利用高效液相色谱仪对样品中的总黄酮进行分离和检测。
该方法的优点是测定结果准确可靠，但需要较长的分析时间和较高的仪器成本。
总黄酮测定方法的选择应根据实际情况进行，以保证测定结果的准确性和可靠性。
同时，保健食品生产企业应严格按照国家标准进行总黄酮含量的测定，确保产品质量符合标准，保障消费者的健康。
总黄酮含量测定标准曲线
总黄酮含量测定标准曲线总黄酮含量是衡量植物中抗氧化活性的重要指标，也是评价植物药材质量的重要参数之一。
因此，建立准确可靠的总黄酮含量测定标准曲线对于保证植物药材质量的稳定性和可靠性具有重要意义。
本文将介绍总黄酮含量测定标准曲线的建立方法及相关注意事项。
首先，建立总黄酮含量测定标准曲线需要准备一定浓度范围内的标准溶液。
通常可以选择相对纯净的总黄酮标准品，按照一定的比例配制成不同浓度的标准溶液。
在配制标准溶液的过程中，需要注意溶解度、稳定性等因素，以确保标准溶液的准确性和可靠性。
其次，建立总黄酮含量测定标准曲线需要选择合适的测定方法。
常用的方法包括分光光度法、高效液相色谱法等。
在选择测定方法时，需要考虑样品的特性、仪器设备的可用性、实验操作的便捷性等因素，以确保测定结果的准确性和可靠性。
在进行总黄酮含量测定标准曲线的建立过程中，需要注意以下几点：1. 标准曲线的线性范围，需要选择合适的标准溶液浓度范围，确保在该范围内标准曲线呈现良好的线性关系。
2. 标准曲线的斜率和截距，通过线性回归分析，计算标准曲线的斜率和截距，以确定总黄酮含量与测定数值之间的关系。
3. 标准曲线的相关系数，通过计算标准曲线的相关系数，评估标准曲线的拟合度，以确保标准曲线的可靠性和准确性。
4. 标准曲线的验证，建立标准曲线后，需要进行验证实验，验证标准曲线的准确性和可靠性，以确保标准曲线的适用性和稳定性。
总之，建立总黄酮含量测定标准曲线是保证植物药材质量稳定性和可靠性的重要步骤。
在建立标准曲线的过程中，需要选择合适的标准溶液、测定方法，注意标准曲线的线性范围、斜率和截距、相关系数等参数，以确保标准曲线的准确性和可靠性。
建立准确可靠的总黄酮含量测定标准曲线，对于推动植物药材质量控制和质量评价具有重要意义。
总黄酮含量测试试剂盒 分光光度计法
总黄酮含量测试试剂盒（C002-96T 分光光度计法）一、测定原理黄酮中处于相邻位的羰基、羟基可以共同络合金属而显色。
在中性或弱碱性及亚硝酸钠存在条件下，黄酮类化合物与铝盐生成螯和物，加入碱溶液后显红橙色，在510nm处有最大吸收峰。
芦丁是公认的黄酮类化合物，常被用作标准品。
二、试剂组成试剂一：无色液体50mL ×1瓶试剂二：无色液体50mL ×1瓶试剂三：显色液 200mL ×1瓶试剂四：1.0mg/mL芦丁标准溶液 5mL×1瓶三、储存条件及有效期试剂一、试剂二4℃保存，试剂三-20℃保存，可保存3个月。
四、试剂的配制试剂四应用液：取2mL试剂四，加入18mL双蒸水，稀释至20mL，得到100μg/mL的芦丁标准液，分别采用移液管移取1.0，2.0，3.0，4.0，5.0mL试剂四于空试管中，加入4.0，3.0，2.0，1.0，0mL双蒸水，得到20，40，60，80，100 μg/mL芦丁标准液。
五、操作步骤充分混匀，室温静置6min。
充分混匀，室温静置6min。
充分混匀，室温静置15min，以试剂空白调零，分光光度计510nm处测吸光值。
1必须做标准管，以绘制标准曲线；2一般样品建议做空白管，以消除误差；3试剂三有腐蚀性，请务必戴手套操作，如不慎接触皮肤，参照碱烧伤的方法用流水冲洗，如有条件可用硼酸处理。
六、计算方法1.绘制标准曲线以芦丁应用液浓度0，20，40，60，80，100μg/mL为横坐标，以分光光度计测得的吸光值为纵坐标，在坐标纸上或利用EXCEL绘制标准曲线。
2.计算样品浓度对于坐标纸上绘制的标准曲线，请直接根据坐标求得样品浓度。
对于采用EXCEL计算的，根据方程求得样品浓度。
样品浓度表示为μg/mL总黄酮，也可根据测试溶液浓度计算出样品粉末中含量，表示为mg/g。
七、注意事项1. 试剂可能会有沉淀，请放置至室温后摇匀使用；八、应用举例小明提取得到了一种中草药的粗提物，并将其冻干得到粉末，配制成5mg/mL的溶液，分析其总黄酮含量。
黄酮的测定
标曲：用分度值0.01mg天平精密称取在120℃条件下烘干至恒重的芦丁对照品50mg，置于25ml容量瓶中，加无水甲醇至刻度，用10ml移液管量取10ml置100ml容量瓶中，加水至刻度。
量取对照溶液0 ml，1 ml，2 ml，3 ml，4 ml，5 ml，6ml分别置于20ml试管中，各加水至6ml，加5%亚硝酸钠溶液1ml，混匀后放置6min，10%亚硝酸铝溶液1ml，混匀后放置6min，加4%NaOH溶液10ml, 混匀后放置15min，加无水甲醇至刻度，按照紫外可见分光光度法在508nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标。
测定:取样品溶液6ml置于20ml试管中，加5%亚硝酸钠溶液1ml，混匀后放置6min，10%亚硝酸铝溶液1ml，混匀后放置6min，加4%NaOH溶液10ml, 混匀后放置15min，加无水甲醇至刻度。
以相应的试剂为空白，按照紫外可见分光光度法在508nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标。
并通过标准曲线方程计算成浓度C（mg/ml），计算得率，其计算公式如下：黄酮的率=C×V1×V2m×1000×100%式中：C—黄酮浓度（mg/ml）V1—提取液定容体积（ml）V1—粗黄酮溶液体积（ml）m—花椒原料质量（mg）精密度实验：准确吸取同一样品提取液1ml，分别置于3只10 ml刻度试管中，分别测定其吸光值,计算相对标准差（RSD）。
重复性实验：准确称取质量相同的原料3份，在相同条件下提取，分别测定其吸光值，计算相对标准差（RSD）。
稳定性实验：准确吸取样品提取液1ml，置于10 ml刻度试管中，每隔10min重复3次测定吸光度。
回收率实验：准确称取己知含量的同一样品液1ml于6支10 ml刻度试管中，分别加入已配好的芦丁标液0 ml，1 ml，1.5 ml，2 ml，2.5 ml，3 ml，测定其加入后的吸光值，计算相对标准差（RSD）。
金线莲
名贵中药材——金线莲开发与加工项目建设地点：安远县版石镇建设内容：新建金线莲温室大棚300亩，引进金线莲萃取加工生产线，建设厂房及配套设施。
建设条件：安远县地处江西省南部，属中亚热带季风气候，气候温和湿润，水资源丰富，自然环境适合金线莲生长。
项目投资：总投资6000万元，其中固定资产投资4000万元，铺底流动资金2000万元。
市场预测：金线莲，又叫金线草，学名花叶开唇兰，性喜阴凉潮湿的环境，常生于山涧林下，全草均可入药，是珍稀药用植物。
其性平味甘，具有滋补、清热、止痛、镇咳等功效，常用于治疗小儿惊风高热、糖尿病、肝炎、膀胱炎、咯血、毒蛇咬伤等。
近年来，金线莲在福建、台湾一带备受青睐，大量收购，价格逐年攀升，野生种苗被大量采集、破坏，资源日益枯竭，其价格逐年攀升。
效益预测：投产后可实现年销售收入9500万元，实现利润1700万元，4年可收回全部投资。
合作方式：独资由于金线莲对生态环境要求严格，加之近年自然环境破坏严重，野生金线莲越来越少，安远乡现每年农民在山上采摘野生金线莲10公斤左右，因而市场需求非常旺盛，供不应求，商品价格居高不下，有巨大的发展前景。
目前人工栽培技术已进入推广阶段。
安远乡地处闽西丘陵山区，年平均气温16.8℃，海拔较高的耕地，坡地达2万亩以上，全年气候温和，雨量充沛，四季分明，光照适当，山地立体气候明显，地理、气候等条件都非常适宜发展珍稀中草药金线莲种植。
2．2成分含糖类成分（多糖13.326%，低聚糖11.243%，还原糖9.73%）、牛磺酸、强心甙类、酯类、生物碱、甾体，多种氨基酸，微量元素及无机元素等。
建立了金线莲总生物碱的提取和测定方法.将金线莲全草粉末用pH=2的水溶液提取,以阳离子交换树脂吸附后,经酸化,用氯仿/甲醇(体积比2∶1)对其进行索氏提取,蒸发有机溶剂.冷冻干燥即得金线莲总生物碱.以盐酸麻黄碱为对照品,酸性染料比色法测定总生物碱,折算为盐酸麻黄碱获得总生物碱含量.测得金线莲总生物碱含量是0.079 4%,线性回归方程A=0.009 2 C-0.001 6(r=0.999 9),回收率103.13%.本提取及含量测定方法操作简单,总生物碱的提取率较高.本发明公开了一种分离中药总生物碱的方法，尤其是一种从中药金线莲提取液中分离总生物碱的方法，属中药领域。
黄酮类含量测定方法
黄酮类含量测定方法
黄酮类是一种常见的植物次生代谢产物，具有多种生物活性，如抗氧化、抗炎、抗肿瘤等作用。
因此，测定黄酮类的含量对于研究植物的生物活性和药用价值具有重要意义。
以下是测定植物中黄酮类含量的常用方法：
1. 酸水解法
通过酸水解将黄酮骨架中的糖部分裂解，然后用紫外光谱法（UV）或高效液相色谱法（HPLC）等方法测定莽草中黄酮类的总含量。
但是，该方法会破坏一部分黄酮类化合物的结构、消耗大量的试剂和时间。
2. 高效液相色谱法（HPLC）法
由于黄酮类化合物的分子结构复杂，所以HPLC法是测定黄酮类含量的有效方法之一。
通过将样品在特定条件下分离、纯化，利用紫外或荧光探测器分析检测出样品中的黄酮类含量并计算。
该法具有分离效率高、检测灵敏度、可靠度高等优点。
3. 毛细管电泳法（CE）法
毛细管电泳法是利用毛细管对混合物进行分离，将混合物分离为单独的组分的方法，实现其含量分析。
该方法抗干扰性强、检测速度快，适用于对样品含量分析较低且复杂的情况。
综上所述，不同的样品或应用领域需要不同的黄酮类含量测定方法，研究者可以
根据自己的需要选用不同的方法进行研究。
两种金线莲不同生长期主要活性成分动态变化
两种金线莲不同生长期主要活性成分动态变化金线莲在民间应用广泛，享有“药王”的美称，其化学成分和药理活性已被人们逐步认识。
由于过度采挖其野生资源现已濒临灭绝，目前主要运用生物技术手段对金线莲进行繁育，然而利用组织培养技术得到的金线莲其活性成分与野生金线莲的差异如何，是否能否代替野生品种现在还没有定论。
因此，本课题拟通过对金线莲主要活性成分动态变化的研究，了解人工培育金线莲活性成分的累积规律，并与野生福建金线莲进行比较，以便为生产上金线莲质量的控制和最佳的生长期的确定，提供一些参考依据。
现研究结果主要如下：1.建立了福建金线莲和台湾金线莲其黄酮苷元类物质的HPLC快速检测方法，其色谱条件：Agilent色谱柱，（TC-C18(2)4.6×250mm,5μm）；流动相为甲醇-水-磷酸（59:41:0.3%），流速为1.0mL/min；柱温为30℃；紫外检测波长为370nm，进样量50μL，此法可同时检测2种金线莲黄酮苷元类物质，分离度高并且出峰时间早。
2.福建金线莲和台湾金线莲均富含多糖和黄酮类物质，其含量动态变化规律主要如下：两种金线莲从生根壮苗培养阶段到大棚移栽阶段其总多糖和总黄酮含量增长方式都呈“双峰曲线”模式，并且不同部位（茎段和叶片）其成分含量动态变化趋势基本保持同步。
槲皮素、山萘酚、异鼠李素3种黄酮苷元含量增长呈“单峰曲线”模式。
台湾金线莲除了异鼠李素呈“双峰曲线”增长模式外另外两黄酮苷元变化趋势与福建金线莲相似。
3.两种金线莲生根壮苗培养5个月的多糖含量高于4个月的；另外福建金线莲全草多糖含量略高于台湾金线莲。
大棚移栽阶段，移栽5个月时（8月上旬），福建金线莲多糖累积量达最高值，而台湾金线莲移栽4个月（7月上旬）时达最高值。
4.两种金线莲生根壮苗培养5个月，其总黄酮含量均高于生根壮苗培养4个月的，移栽4个月后（7月上旬）两种金线莲总黄酮含量均达最高值。
5.两种金线莲生根壮苗培养5个月，3种黄酮苷元的含量比较分别是从槲皮素＞异鼠李素＞山萘酚；生根壮苗培养5个月黄酮苷元总含量均高于生根壮苗培养培养4个月的。