生长素对红叶石楠组培苗过氧化物酶和多酚氧化酶活性的影响
植物生理学课后习题答案
植物生理学课后习题答案一、名词解释1. 光合作用：光合作用是绿色植物利用光能，把CO2和H2O同化为有机物，并释放O2的过程。
2. 作用中心：原初电子供体、反应中心色素分子对＋蛋白质、原初电子受体3. 作用中心色素：少数特殊状态的叶绿素a分子（其吸收峰在680nm或700nm），具光化学活性，既能捕获光能，又能将光能转换为电能。
4. 聚光色素：无光化学活性，能吸收光能并传递到反应中心色素，绝大部分叶绿素a，全部的叶绿素b、胡萝卜素、叶黄素都属此类。
5. 光合单位：约300个左右的色素分子围绕1个反应中心色素组成一个光合单位。
6. 爱默生效应（增益效应、双光增益效应）：在用远红光（700nm）照射小球藻的同时，如补充红光(650nm)，则量子产额或光合效率比用两种波长的光分别照射时的总和要大。
意义：导致两个光系统的发现。
PSⅡ和PSⅠ7. 荧光现象：叶绿素溶液经日光等复合光照射时，其透射光呈绿色，反射光呈红色。
叶绿素溶液反射光为红色的现象。
8. 光合链：指定位在光合膜上的，由多个电子传递体组成的电子传递的总轨道。
9. 光合磷酸化：人们把光下在叶绿体(或载色体)中发生的由ADP与Pi合成ATP的反应。
10. C3途径与C3植物：C3途径是碳同化的基本途径，可分为羧化、还原和再生三个阶段。
每同化1个CO2要消耗3个ATP与2个NADPH。
初产物为磷酸丙糖，它可运出叶绿体，在细胞质中合成蔗糖，也可留在叶绿体中合成淀粉而被临时贮藏。
11. C4途径和C4植物：在叶肉细胞的细胞质中，由PEPC催化羧化反应，形成C4二羧酸， C4二羧酸运至维管束鞘细胞脱羧，释放的CO2再由C3途径同化。
根据形成C4二羧酸的种类以及参与脱羧反应的酶类，可将C4途径分为NADP-ME、NAD-ME和PCK三种亚类型。
12. CAM途径和CAM植物：晚上气孔开启，在叶肉细胞质中由PEPC固定CO2，形成苹果酸；白天气孔关闭，苹果酸脱羧，释放的CO2由Rubisco羧化。
不同生长调节剂对红叶石楠扦插的影响
不同生长调节剂对红叶石楠扦插的影响摘要摘要：运用随机区组排列，以红叶石楠为材料，采取3种激素和5种激素浓度进行浸泡处理，观察扦插后生根情况。
结果表明，生根效果表现为吲哚丁酸>ABT生根粉>吲哚已酸；适宜浓度处理可以明显提高生根效率；200 mg/L的吲哚丁酸处理插条生根效果最好。
关键词：红叶石楠；扦插；吲哚乙酸；吲哚丁酸；ABT生根粉AbstractUsing randomized block arrangement and Photinia rubra as material, three hormones and five hormone concentrations were soaked to observe rooting after cutting. The results showed that the effect of rooting was indolebutyric acid > ABT Rooting Powder > indolecaproic acid; suitable concentration treatment could significantly improve rooting efficiency; 200 mg/L indolebutyric acid treatment had the best rooting effect.Key words: Photinia rubra; Cutting; Indole acetic acid; Indole butyric acid; ABT rooting powder目录第1章背景与意义 (1)第2章引言 (1)第3章材料与方法 ............................................. 错误!未定义书签。
3.1试验材料 (2)3.2试验方法 (3)第4章结果与分析 (3)4.1不同激素对红叶石楠扦插后25D后愈伤组织形成状况 (3)4.2不同激素对扦插苗浸泡两个小时后生根条数的影响 (4)4.3不同激素对扦插苗生根长度影响 (5)4.4不同激素对扦插苗生根率的影响 (5)4.5不同激素对扦插苗成活率的影响 (6)4.6不同体积分数NAA插前处理后红叶石楠生根情况 (6)4.7不同体积分数IBA插前处理后红叶石楠生根情况 (7)4.8不同体积分数IAA插前处理后红叶石楠生根情况 (8)4.9不同体积分数NAA+IBA插前处理后红叶石楠生根情况 (9)4.10不同体积分数NAA+IAA插前处理后红叶石楠生根情况. 10 4.11不同体积分数IBA+IAA插前处理后红叶石楠生根情况 (11)4.12插前喷洒叶面扦插生根时间与对比生根时间比较 (12)第5章结论与商议 (12)5.1结论 (12)5.1.1不同激素种类对红叶石楠扦插生根影响 (12)5.1.2不同激素浓度对红叶石楠扦插生根影响 (13)5.1.3激素种类交互作用对红叶石楠扦插生根的影响 (13)5.2商议 (13)参考文献： ............................................................ 错误!未定义书签。
氧化应激对植物生理及生化反应的影响机制
氧化应激对植物生理及生化反应的影响机制氧化应激是指细胞内外环境因素或化学物质导致细胞氧化还原平衡紊乱，引发自由基和活性氧物质产生过多，最终造成细胞膜、蛋白质、核酸等分子结构的损伤和代谢途径的改变。
植物作为最早出现在陆地上的生物，在长期的进化过程中发展出多种适应氧化应激的保护机制。
本文将从氧化应激对植物生理、生化反应的影响机制角度出发，探讨植物如何应对氧化应激。
一、氧化应激引发的生理反应氧化应激会导致植物生长、调节、保护等生理活动的异常。
例如，细胞膜的过氧化作用会引起膜脂质的氧化破坏，导致膜的通透性降低，细胞内物质流失增加，进而影响植物的生长发育及其反应过程。
此外，氧化应激还会干扰植物的新陈代谢，使得细胞内营养物质的转化代谢受到影响，进而影响植物的生理状态。
因此，氧化应激对植物的生理反应具有极大的负面影响。
二、氧化应激与抗氧化酶的关系植物不断与环境中各种氧化应激物质对抗，其自身生理反应主要包括两个方面：一是合成抗氧化酶，如超氧化物歧化酶、过氧化物酶、谷胱甘肽过氧化物酶等;二是利用一些辅助分子如多酚等反应，减少自由基活性或清除自由基。
通过这些反应进而减轻氧化应激对植物造成的损害。
抗氧化酶是植物在氧化应激等环境反应中产生的一种酶类。
其主要功能是清除细胞内过高的自由基和活性氧物质，保护细胞不受损伤。
抗氧化酶对植物维持正常生长发育和对抗外界环境的干扰起着至关重要的作用。
因此，针对氧化应激的反应机制的研究有助于深入了解抗氧化酶生物活性，也可为人类创新性地设计许多绿色安全的农业用品。
三、氧化应激对植物生化反应的影响机制氧化应激广泛影响植物的生理机制，从分子水平到细胞水平都不断地进行调控和影响。
氧化应激会导致种种生化反应的异常，包括蛋白质合成、碳水化合物代谢、氮素代谢等，并导致细胞壁结构发生变化甚至破裂。
因此，对氧化应激对植物生化反应的影响机制的研究，有助于加深人们对氧化应激机理的理解。
解决氧化应激对植物生长发育造成的负面影响，除了通过合适的管理措施维持植物环境等方式外，还有一个重要的途径，即合理应用天然植物活性成分进行治疗。
植物激素对植物生长和发育的影响
植物激素对植物生长和发育的影响植物激素是一种生长调节物质，可以促进植物生长和发育。
植物激素的种类很多，包括生长素、赤霉素、脱落酸、乙烯等，它们在植物体内的作用机理也各不相同。
本文将从生长素、赤霉素和乙烯三个方面来探讨植物激素对植物生长和发育的影响。
一、生长素对植物的影响生长素是植物体内最重要的激素之一，是一种促进植物细胞伸长和分裂的激素。
生长素参与了植物生长的各个方面，包括根系的伸长、茎的伸长、叶片的扩展和果实的发育等。
生长素合成和运输的过程都与植物生长和发育密切相关。
生长素对植物的作用机理主要是通过促进细胞的伸长和分裂来实现的。
生长素能促进细胞壁松弛酶的合成，从而降低细胞壁的压力，使细胞能够不受限制地生长和扩展。
此外，生长素还可以影响植物中的钙、镁、铁等离子的转运和吸收，从而增加植物体内的营养物质，促进植物的生长和发育。
二、赤霉素对植物的影响赤霉素是一种同时具有生长和抑制的植物激素，它有助于植物茎的生长和根系的分化。
赤霉素同时也能促进叶片的展开和花的开放，同时抑制芽的侧枝生长。
赤霉素的作用机理主要是通过调节植物中的蛋白质合成和生长素的运输来实现的。
赤霉素通过促进植物中的核酸合成和蛋白质合成来增加植物的细胞数量和质量，从而促进植物的生长和发育。
赤霉素还能影响生长素的运输和转化，从而调节植物中生长素的作用，增强细胞伸长和扩展的能力。
三、乙烯对植物的影响乙烯是植物体内一种重要的生长调节物质，能影响植物的生长和发育，同时也有抗逆性和促进果实成熟的功能。
乙烯的生物学作用主要是通过调节植物细胞壁酶的合成和植物的呼吸代谢来实现的。
乙烯能调节植物细胞壁中的酶的合成和活性，从而增加细胞壁的松弛程度，使细胞能够扩张并促进植物的生长和发育。
同时，乙烯也会影响植物的呼吸代谢，促进果实的发育和成熟，增加果实的产量和品质。
总结植物激素对植物的生长和发育起着重要的调节作用。
生长素、赤霉素和乙烯都是植物体内重要的激素，它们在植物生长和发育中的作用机理不尽相同，但最终的目标都是促进植物的生长和发育，提高植物的生产力和产量。
植物生长素作用
植物生长素作用植物生长素是一类由植物体内产生的内源性植物激素，对植物生长和发育起着至关重要的作用。
它具有多种功能，可以调节植物的生长、细胞分裂、开花、果实发育等多个方面的生理过程。
本文将探讨植物生长素的作用及其影响。
一、植物生长激素的分类植物生长素有多种类型，其中最常见的是茉莉酸（IAA）、赤霉素（GA）、细胞分裂素（cytokinin）、脱落酸（ABA）和乙烯（ethylene）。
这些激素在植物的生长和发育过程中扮演着不同的角色。
二、促进植物生长与细胞伸长植物生长素茉莉酸是植物体内最重要的生长素之一。
它能够促进细胞的伸长和分裂，影响植物的高度和枝条的生长。
茉莉酸通过刺激细胞壁松弛蛋白的合成和降解，使细胞伸长并改变细胞形态。
三、调节开花与果实发育除了影响植物的生长，植物生长素也对植物的花期和果实发育起着关键作用。
茉莉酸和赤霉素可以促进芽的分化和开花过程。
茉莉酸能够提前芽的分化，并且在花蕾发育过程中调节花瓣的展开。
赤霉素则在植物的果实发育和种子成熟中起着重要作用。
四、调控光合作用与光反应植物生长素能够通过调节叶绿素的合成和光合作用相关酶的活性来影响植物的光合作用。
茉莉酸和赤霉素可以促进叶绿素的合成和光合作用的进行，从而提高植物的光能利用效率。
五、逆境抵抗与植物生理反应植物生长素还在植物的逆境抵抗和生理反应中发挥作用。
脱落酸和乙烯对植物的逆境抵抗具有重要意义。
脱落酸可以帮助植物对抗胁迫，并在抵抗病原菌和逆境条件下促进根系的生长。
乙烯则可以调节植物对干旱和盐碱胁迫的适应能力。
综上所述，植物生长素在植物的生长和发育中起着重要作用。
茉莉酸、赤霉素、细胞分裂素、脱落酸和乙烯等生长素的相互作用和调节，直接或间接地影响了植物的形态、生理状态和逆境抵抗能力。
因此，对植物生长素的深入研究可以为农业生产和植物科学研究提供理论基础和指导意义。
植物生长素的生物学作用
植物生长素的生物学作用植物生长素是一类重要的植物激素，它在植物的生长发育过程中起到了至关重要的作用。
本文将就植物生长素的生物学作用展开论述，分为植物生长调节、植物生理反应、植物光合作用和植物根系发育四个方面进行说明。
一、植物生长调节植物生长素通过调控细胞伸长、细胞分裂和组织分化等方式，对植物生长发育起到了调节作用。
它能够促进幼苗的细胞伸长，使其茎长得更高；同时，也能够抑制茎尖细胞的分裂，减缓茎的生长速度。
此外，植物生长素还能够延缓叶片的老化过程，延长植物的寿命。
二、植物生理反应植物生长素在光合作用、植物呼吸和物质代谢等方面也发挥着重要的作用。
首先，在光合作用中，植物生长素能够促进叶片的光合效率，提高植物的光合速率，增加光合产物的积累。
其次，在植物呼吸过程中，植物生长素能够影响呼吸酶的活性，调节呼吸速率，维持植物正常的能量代谢。
此外，植物生长素还参与了植物的物质转运和代谢，促进了植物体内各种物质的运输和合成。
三、植物光合作用植物生长素对植物的光合作用有一定的调节作用。
它能够促进叶片的气孔开张，增加二氧化碳的吸收量，并提高光合产物的积累。
同时，植物生长素还能够调节叶绿素的合成和分解，维持植物光合色素的平衡。
四、植物根系发育植物生长素对植物根系的发育也起到了重要的调节作用。
它能够促进根毛的生长和根突的形成，增加根系吸收水分和养分的能力。
此外，植物生长素还能够影响根部细胞的分裂和分化，形成完整的根系结构，提供良好的营养和支持。
总结起来，植物生长素在植物的生长发育中扮演着重要的调节角色。
它通过影响细胞伸长和分裂、调控光合作用和呼吸过程以及促进根系发育等方式，对植物生长发育的各个环节起到了关键的作用。
对于研究植物生理学、推动农业发展和提高农作物的产量和品质具有重要的意义。
不同抗褐化剂对青钱柳愈伤组织酶活性和生长的影响
第４７卷㊀第６期２０２３年１１月南京林业大学学报（自然科学版）ＪｏｕｒｎａｌｏｆＮａｎｊｉｎｇＦｏｒｅｓｔｒｙＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（ＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓＥｄｉｔｉｏｎ）Ｖｏｌ．４７，Ｎｏ．６Ｎｏｖ．，２０２３㊀收稿日期Ｒｅｃｅｉｖｅｄ：２０２２⁃０３⁃２１㊀㊀㊀㊀修回日期Ａｃｃｅｐｔｅｄ：２０２２⁃０５⁃１１㊀基金项目：江苏省农业重点研发项目（ＢＥ２０１９３８８）；国家自然科学基金项目（３２０７１７５０）㊂㊀第一作者：王纪（４３８２６７８１＠ｑｑ．ｃｏｍ），助教，博士㊂∗通信作者：方升佐（ｆａｎｇｓｚ＠ｎｊｆｕ．ｅｄｕ．ｃｎ），教授㊂㊀引文格式：王纪，方升佐．不同抗褐化剂对青钱柳愈伤组织酶活性和生长的影响［Ｊ］．南京林业大学学报（自然科学版），２０２３，４７（６）：１６７－１７４．ＷＡＮＧＪ，ＦＡＮＧＳＺ．Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔａｎｔｉ⁃ｂｒｏｗｎｉｎｇａｇｅｎｔｓｏｎｅｎｚｙｍｅａｃｔｉｖｉｔｙａｎｄｇｒｏｗｔｈｉｎｃａｌｌｕｓｏｆＣｙｃｌｏｃａｒｙａｐａｌｉｕｒｕｓ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＮａｎｊｉｎｇＦｏｒｅｓｔｒｙＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（ＮａｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓＥｄｉｔｉｏｎ），２０２３，４７（６）：１６７－１７４．ＤＯＩ：１０．１２３０２／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００－２００６．２０２２０３０７１．不同抗褐化剂对青钱柳愈伤组织酶活性和生长的影响王㊀纪１，２，方升佐２∗（１．南京晓庄学院，江苏㊀南京㊀２１１１７１；２．南京林业大学林草学院，江苏㊀南京㊀２１００３７）摘要：ʌ目的ɔ青钱柳（Ｃｙｃｌｏｃａｒｙａｐａｌｉｕｒｕｓ）在组织培养中的褐化问题一直是造成愈伤组织死亡和制约其规模化生产的重要原因，对褐化问题进行研究为青钱柳快速繁殖体系的建立和离体生产次生代谢物质奠定基础㊂ʌ方法ɔ以青钱柳无菌实生苗茎段㊁叶片和根系作外植体，研究维生素Ｃ（ｖｉｔａｍｉｎＣ，ＶＣ）㊁聚乙烯吡咯烷酮（ｐｏｌｙｖｉ⁃ｎｙｌｐｙｒｒｏｌｉｄｏｎｅ，ＰＶＰ）和活性炭（ａｃｔｉｖｅｃａｒｂｏｎ，ＡＣ）３种抗褐化剂及其不同浓度对青钱柳愈伤组织褐化率㊁增长量及相关酶活性的影响㊂ʌ结果ɔ不同抗褐化剂与不同浓度处理对青钱柳愈伤组织褐化率㊁增长量㊁苯丙氨酸解氨酶（ＰＡＬ）活性㊁多酚氧化酶（ＰＰＯ）活性和过氧化物酶（ＰＯＤ）活性均具有显著影响（Ｐ＜０．０５）㊂愈伤组织褐化率随ＰＶＰ和ＡＣ浓度的增加而降低，随ＶＣ浓度的增加呈先降低后增加趋势㊂与ＶＣ和ＰＶＰ相比，ＡＣ处理的愈伤组织褐化率最低，其中，以茎㊁根和叶为外植体的愈伤组织褐化率均以４．０ｇ／ＬＡＣ处理最低，分别为１６ ３％㊁３３ ３％和２６ ７％㊂不同处理下，以叶片为外植体的愈伤组织褐化率高于茎段和根系的㊂愈伤组织累计增长量随ＰＶＰ和ＡＣ质量浓度的增加而增加，随ＶＣ浓度的增加呈先增加后降低趋势㊂添加ＶＣ和ＰＶＰ处理不同外植体愈伤组织累计增长量高于ＡＣ处理，以ＶＣ浓度为０．４ｇ／Ｌ时茎段愈伤组织累计增长量最高，为６．６９ｇ㊂添加ＰＶＰ和ＡＣ处理的茎段㊁叶片和根系愈伤组织ＰＡＬ和ＰＯＤ活性略高于ＡＣ处理，而添加ＰＶＰ处理的茎段㊁叶片和根系愈伤组织ＰＰＯ活性高于添加ＡＣ和ＶＣ处理的㊂随着抗褐化剂浓度增加，愈伤组织ＰＡＬ活性逐渐降低㊁ＰＰＯ和ＰＯＤ活性呈单峰变化趋势㊂其中，以叶片为外植体的愈伤组织的ＰＡＬ㊁ＰＯＤ和ＰＰＯ活性均高于茎段和根系的㊂Ｐｅａｒｓｏｎ相关分析结果表明，青钱柳愈伤组织褐化率与ＰＡＬ活性呈极显著正相关（Ｐ＜０．０１），愈伤组织增长量与ＰＰＯ活性㊁ＰＯＤ活性呈极显著正相关（Ｐ＜０．０１）㊂ʌ结论ɔ抗褐化剂种类和浓度对青钱柳愈伤组织褐化及生长均有显著影响，以ＡＣ抗褐化效果最好，但高浓度的ＡＣ会一定程度抑制愈伤组织的生长㊂ＰＡＬ活性在愈伤组织褐化过程中起关键作用，可以作为青钱柳组织培养过程中褐化控制的主要参考酶指标，同时外植体器官的类型选择也是控制褐化考虑的因素㊂关键词：青钱柳；组织培养；外植体；愈伤组织；褐化率；酶活性中图分类号：Ｓ６８２．２９㊀㊀㊀㊀㊀㊀文献标志码：Ａ开放科学（资源服务）标识码（ＯＳＩＤ）：文章编号：１０００－２００６（２０２３）０６－０１６７－０９Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔａｎｔｉ⁃ｂｒｏｗｎｉｎｇａｇｅｎｔｓｏｎｅｎｚｙｍｅａｃｔｉｖｉｔｙａｎｄｇｒｏｗｔｈｉｎｃａｌｌｕｓｏｆＣｙｃｌｏｃａｒｙａｐａｌｉｕｒｕｓＷＡＮＧＪｉ１，２，ＦＡＮＧＳｈｅｎｇｚｕｏ２∗（１．ＮａｎｊｉｎｇＸｉａｏｚｈｕａｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｊｉｎｇ２１１１７１，Ｃｈｉｎａ；２．ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＦｏｒｅｓｔｒｙａｎｄＧｒａｓｓｌａｎｄ，ＮａｎｊｉｎｇＦｏｒｅｓｔｒｙＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｊｉｎｇ２１００３７，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：ʌＯｂｊｅｃｔｉｖｅɔＴｈｅｂｒｏｗｎｉｎｇｉｎｔｈｅｃａｌｌｕｓｃｕｌｔｕｒｅｐｒｏｃｅｓｓｏｆＣｙｃｌｏｃａｒｙａｐａｌｉｕｒｕｓｉｓａｎｉｍｐｏｒｔａｎｔｐｒｏｂｌｅｍｆｏｒｔｈｅｄｅａｔｈｏｆｃａｌｌｕｓ，ｗｈｉｃｈｏｂｖｉｏｕｓｌｙｒｅｓｔｒｉｃｔｓｉｔｓｌａｒｇｅ⁃ｓｃａｌｅｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ．Ｒｅｄｕｃｉｎｇｔｈｅｂｒｏｗｎｉｎｇｒａｔｅｗｉｌｌｌａｙｔｈｅｆｏｕｎｄａｔｉｏｎｆｏｒｔｈｅｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔｏｆａｒａｐｉｄｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎｓｙｓｔｅｍａｎｄｉｎｖｉｔｒｏｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｏｆｓｅｃｏｎｄａｒｙｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ．ʌＭｅｔｈｏｄɔＴｈｅｓｔｅｍｓｅｇｍｅｎｔｓ，ｌｅａｖｅａｎｄｒｏｏｔｓｏｆＣ．ｐａｌｉｕｒｕｓｓｅｅｄｌｉｎｇｓｗｅｒｅｕｓｅｄａｓｅｘｐｌａｎｔｓｔｏｓｔｕｄｙｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｔｈｒｅｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔａｎｔｉ⁃ｂｒｏｗｎｉｎｇａｇｅｎｔｓ，ｉｎｃｌｕｄｉｎｇｖｉｔａｍｉｎＣ（ＶＣ），ｐｏｌｙｖｉｎｙｌｐｙｒｒｏｌｉｄｏｎｅ（ＰＶＰ）ａｎｄａｃｔｉｖｅｃａｒｂｏｎ（ＡＣ）ｗｉｔｈｄｉｆｆｅｒｅｎｔ南京林业大学学报（自然科学版）第４７卷ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｎｔｈｅｂｒｏｗｎｉｎｇｒａｔｅ，ｉｎｃｒｅｍｅｎｔａｓｗｅｌｌａｓｅｎｚｙｍｅａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆＣ．ｐａｌｉｕｒｕｓｃａｌｌｕｓ．ʌＲｅｓｕｌｔɔＤｉｆｆｅｒｅｎｔａｎｔｉ⁃ｂｒｏｗｎｉｎｇａｇｅｎｔｓａｎｄｔｈｅｉｒｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｈａｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｅｆｆｅｃｔｓｏｎｔｈｅｂｒｏｗｎｉｎｇｒａｔｅ，ｇｒｏｗｔｈａｎｄａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆｐｈｅｎｙｌａｌａｎｉｎｅａｍｍｏｎｉａｌｙａｓｅ（ＰＡＬ），ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｏｘｉｄａｓｅ（ＰＰＯ）ａｎｄｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ（ＰＯＤ）ａｃｔｉｖｉｔｙｉｎＣ．ｐａｌｉｕｒｕｓｃａｌｌｕｓ（Ｐ＜０．０５）．ＴｈｅｃａｌｌｕｓｂｒｏｗｎｉｎｇｒａｔｅｄｅｃｒｅａｓｅｄｗｉｔｈｉｎｃｒｅａｓｉｎｇＰＶＰａｎｄＡＣｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ，ｗｈｅｒｅａｓｔｈｅｒａｔｅｆｉｒｓｔｄｅｃｒｅａｓｅｄａｎｄｔｈｅｎｉｎｃｒｅａｓｅｄｗｉｔｈｉｎｃｒｅａｓｉｎｇＶＣｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ．Ａｍｏｎｇｔｈｅｍ，ｔｈｅｂｒｏｗｎｉｎｇｒａｔｅｉｎｃａｌｌｕｓｏｆｓｔｅｍｓｅｇｍｅｎｔｓ，ｒｏｏｔｓａｎｄｌｅａｖｅｓｗａｓｔｈｅｌｏｗｅｓｔｗｈｅｎｔｈｅＡＣｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆ４．０ｇ／Ｌｗａｓａｄｄｅｄ，ｒｅａｃｈｉｎｇ１６．３％，３３．３％ａｎｄ２６．７％，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．ＴｈｅｇｒｏｗｔｈｏｆｃａｌｌｉｉｎｔｈｅｅｘｐｌａｎｔｓｔｒｅａｔｅｄｗｉｔｈＶＣａｎｄＰＶＰｗａｓｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈａｔｉｎｔｈｅＡＣｔｒｅａｔｍｅｎｔ．Ｈｏｗｅｖｅｒ，ｗｈｅｎｔｈｅ０ ４ｇ／ＬｏｆＶＣｗａｓａｐｐｌｉｅｄ，ｔｈｅｃｕｍｕｌａｔｉｖｅｇｒｏｗｔｈｏｆｃａｌｌｉｉｎｓｔｅｍｓｅｇｍｅｎｔｓｗａｓｔｈｅｈｉｇｈｅｓｔ（６．６９ｇ）．Ｗｉｔｈｉｎｃｒｅａｓｉｎｇｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｆａｎｔｉ⁃ｂｒｏｗｎｉｎｇａｇｅｎｔｓ，ＰＡＬａｃｔｉｖｉｔｙｉｎｃａｌｌｕｓｇｒａｄｕａｌｌｙｄｅｃｒｅａｓｅｄ，ｗｈｅｒｅａｓｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｏｆＰＰＯａｎｄＰＯＤｓｈｏｗｅｄａｕｎｉｍｏｄａｌｔｒｅｎｄ．Ｍｏｒｅｏｖｅｒ，ｔｈｅｅｎｚｙｍａｔｉｃａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｃａｌｌｕｓｅｘｐｌａｎｔｓｆｒｏｍｌｅａｖｅｓｗａｓｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈａｔｏｆｓｔｅｍｓｅｇｍｅｎｔｓａｎｄｒｏｏｔｓ．ＰｅａｒｓｏｎｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎａｎａｌｙｓｉｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｃａｌｌｕｓｂｒｏｗｎｉｎｇｒａｔｅｗａｓｐｏｓｉｔｉｖｅｌｙｃｏｒｒｅｌａｔｅｄｗｉｔｈＰＡＬａｃｔｉｖｉｔｙ（Ｐ＜０．０１），ｗｈｅｒｅａｓｃａｌｌｕｓｇｒｏｗｔｈｗａｓｐｏｓｉｔｉｖｅｌｙｃｏｒｒｅｌａｔｅｄｗｉｔｈＰＰＯａｎｄＰＯＤａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ（Ｐ＜０．０１）．ʌＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎɔＴｈｅｔｙｐｅｓａｎｄｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓｏｆａｎｔｉ⁃ｂｒｏｗｎｉｎｇａｇｅｎｔｓｈａｖｅａｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｅｆｆｅｃｔｏｎｔｈｅｂｒｏｗｎｉｎｇａｎｄｇｒｏｗｔｈｏｆＣ．ｐａｌｉｕｒｕｓｃａｌｌｕｓ．ＡＣｈａｓｔｈｅｂｅｓｔａｎｔｉ⁃ｂｒｏｗｎｉｎｇｅｆｆｅｃｔ，ｂｕｔｓｏｍｅｗｈａｔｉｎｈｉｂｉｔｓｃａｌｌｕｓｇｒｏｗｔｈ．ＰＡＬｅｎｚｙｍｅａｃｔｉｖｉｔｙｐｌａｙｓａｋｅｙｒｏｌｅｉｎｐｒｅｖｅｎｔｉｎｇｃａｌｌｕｓｂｒｏｗｎｉｎｇ，ａｎｄｔｈｅｓｅｌｅｃｔｉｏｎｏｆｅｘｐｌａｎｔｏｒｇａｎｓｉｓｃｒｕｃｉａｌｄｕｒｉｎｇｔｉｓｓｕｅｃｕｌｔｕｒｅｏｆＣ．ｐａｌｉｕｒｕｓ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｃｙｃｌｏｃａｒｙａｐａｌｉｕｒｕｓ；ｔｉｓｓｕｅｃｕｌｔｕｒｅ；ｅｘｐｌａｎｔ；ｃａｌｌｕｓ；ｂｒｏｗｎｉｎｇｒａｔｅ；ｅｎｚｙｍｅａｃｔｉｖｉｔｙ㊀㊀青钱柳（Ｃｙｃｌｏｃａｒｙａｐａｌｉｕｒｕｓ）又名青钱李㊁摇钱树等，系胡桃科（Ｊｕｇｌａｎｄａｃｅａｅ）青钱柳属，主要分布于安徽㊁浙江㊁湖南㊁四川等亚热带地区［１］㊂研究发现，青钱柳中富含多酚类㊁黄酮类和三萜类等生物活性成分，具有抗氧化㊁抗肿瘤㊁抗菌等功效［２－４］㊂然而，青钱柳因其雌雄异型异熟的特性，导致其种子饱满率低，并且具有深度休眠特性，严重限制了青钱柳的开发和利用［５－６］㊂而基于组织培养技术的离体快繁技术不仅可以解决种苗供应不足，对突破季节限制组织培养生产次生代谢物质也具有特殊的理论和现实意义［７－８］㊂但由于青钱柳中含有较高的酚类物质，组培中的褐化问题成为其愈伤组织死亡和制约建立其快速繁殖体系的重要原因㊂褐化主要是由于植物组织细胞中的酚类物质氧化形成醌类物质，从而使组织呈现褐色的现象，因此在培养基中添加抗氧化剂抑制酚类物质的合成和氧化成为目前缓解外植体褐化问题的主要措施［９－１０］㊂目前，关于青钱柳组培褐化控制的研究主要集中在外植体的预处理［１１］㊁调整继代时间［１２］㊁添加抗氧化剂［１０，１３］和激素处理［１４］等４个方面㊂研究表明，添加抗氧化剂和激素在一定程度起到增加愈伤组织的增长量和降低褐化率的效果［１５－１７］㊂也有研究表明，外植体的取样部位也是影响褐化的重要因素，木质化程度越高的外植体褐化程度越高，幼嫩的材料褐化率相对较低［１８］㊂然而，有关青钱柳不同部位外植体愈伤组织褐化率㊁添加吸附剂活性炭（ＡＣ）及相关生理指标的研究鲜见报道㊂因此，本研究以无菌实生苗的不同器官为试验材料，添加具有抗氧化作用的维生素Ｃ（ＶＣ）㊁对酚类物质具有专一吸附作用的聚乙烯吡咯烷酮（ＰＶＰ）和具有无选择性吸附作用的ＡＣ作为抗褐化剂，并探究抗褐化剂种类和浓度对青钱柳愈伤组织褐变及其相关代谢酶活性的影响，旨在筛选褐化率低和愈伤组织生长量较高的抗褐化剂种类和最适浓度，为解决青钱柳组织培养过程中愈伤组织的褐化问题提供数据支撑和科学依据，为进一步组织培养生产次生代谢物质和建立快速繁殖体系奠定基础㊂１㊀材料与方法１．１㊀无菌实生苗培养材料及培养条件试验材料为采自江苏省镇江种苗基地（１１９ʎ３２ᶄ５２ᵡＥ，３０ʎ１６ᶄ４０ᵡＮ）的青钱柳成熟种子，种子采集后进行去翅㊁水筛，将沉淀的种子置于４ħ冰箱内保存㊂接种前对种子进行消毒处理，先用饱和洗衣粉水冲洗５ｍｉｎ，再在流水下冲洗１ｈ㊂冲洗干净后在超净工作台上对种子进行表面灭菌，先用７０％（体积分数，下同）酒精浸泡１ｍｉｎ，之后用０ ２％（质量分数，下同）ＨｇＣｌ２浸泡２０ｍｉｎ，最后用无菌水冲洗８次，用无菌水浸泡封口后置于超净台上过夜㊂于第２天和第３天在无菌条件下各换１次无菌水，继续浸泡㊂第４天在无菌条件下换０ １％ＨｇＣｌ２摇动５ｍｉｎ，浸泡过夜㊂第５天将浸泡后的种子用无菌水冲洗８次后，在超净工作台上进行剥种㊂取含胚轴和至少１／２子叶完整的胚作为接种试材，以获得无菌实生苗㊂无菌实生苗的培养基配方为：ＷＰＭ＋蔗糖３０ｇ／Ｌ＋琼脂６ｇ／Ｌ，ｐＨ调至５．８，１２１ħ高压灭菌８６１㊀第６期王㊀纪，等：不同抗褐化剂对青钱柳愈伤组织酶活性和生长的影响２０ｍｉｎ，培养温度２５ħ㊁相对湿度６０％㊁光照时间１２ｈ／ｄ㊁光照度２０００ｌｘ㊂１．２㊀愈伤组织诱导材料及培养条件分别取无菌实生苗的完整叶片㊁根部和茎部的１ｃｍ段作为外植体接入诱导培养基中进行愈伤组织诱导，３０ｄ后将诱导的愈伤组织进行两次继代㊂愈伤组织诱导培养基配方为：ＭＳ＋２．０ｍｇ／Ｌ６⁃ＢＡ＋１．０ｍｇ／ＬＩＢＡ＋蔗糖３０ｇ／Ｌ＋琼脂６ｇ／Ｌ，ｐＨ调至５．８，１２１ħ高压灭菌２０ｍｉｎ，培养温度２５ħ，相对湿度６０％，光照时间１２ｈ／ｄ，光照度１２００ｌｘ㊂１．３㊀抗褐化剂处理以愈伤组织诱导培养基为基本培养基，分别添加质量浓度为０．１㊁０．２㊁０．４和１．０ｇ／Ｌ的ＶＣ（分别记为ｚ１㊁ｚ２㊁ｚ３㊁ｚ４），１．０㊁３．０㊁５．０ｇ／Ｌ的ＰＶＰ（分别记为ｚ５㊁ｚ６㊁ｚ７）和１．０㊁２．０㊁４．０ｇ／Ｌ的活性炭ＡＣ（分别记为ｚ８㊁ｚ９㊁ｚ１０），共１０种处理㊂分别取茎段㊁叶片和根系经继代培养后外观条件基本一致的愈伤组织作为试验材料，分别接种到经１０种处理的培养基上，每种处理３个重复，每个重复１０瓶，每瓶接４块愈伤继续培养㊂１．４㊀测定指标方法１．４．１㊀愈伤组织鲜质量增长量和褐化率接种后于１０㊁２０㊁３０和４０ｄ统计愈伤组织鲜质量增长量和增长率，于４０ｄ时统计其褐化率㊂愈伤组织鲜质量增加量（ｇ／瓶）为每瓶收获鲜质量与每瓶接种鲜质量之差㊂愈伤组织褐化率为褐化数目占接种数目的百分比㊂１．４．２㊀生理指标的测定接种后于１０㊁２０㊁３０和４０ｄ分别取样，以鲜样进行生理指标的测定㊂苯丙氨酸解氨酶（ＰＡＬ）活性测定采用苯丙氨酸比色法，多酚氧化酶（ＰＰＯ）活性测定采用邻苯二酚比色法，过氧化物酶（ＰＯＤ）活性测定采用愈创木酚比色法［１９］㊂１．５㊀统计分析统计分析使用ＳＰＳＳ２０．０软件，多重比较采用新复极差法（Ｄｕｎｃａｎ，α＝０．０５），图表绘制分别使用Ｏｒｉｇｉｎ２０１７和Ｅｘｃｅｌ２０１６，数据为均值ʃ标准差㊂２㊀结果与分析２．１㊀抗褐化剂对青钱柳愈伤组织褐化的影响由不同处理下不同外植体愈伤组织的褐化率（表１）可知，不同种类和浓度抗褐化剂对青钱柳茎段㊁叶片和根系愈伤组织褐化率有显著影响（Ｐ＜０．０５）㊂３种外植体愈伤组织褐化率一般随抗褐化剂ＰＶＰ和ＡＣ浓度的升高而逐渐降低，其中叶片为外植体添加ＰＶＰ抗褐化剂时呈现先降低后升高的趋势㊂添加ＶＣ的３种外植体的愈伤组织褐化率都随着浓度的升高呈现先降低后升高的趋势㊂与ＶＣ和ＰＶＰ相比，添加ＡＣ抑制褐化效果最佳，茎段㊁叶片和根系愈伤组织在ＡＣ质量浓度为４．０ｇ／Ｌ时褐化率最低分别为１６．７％㊁３３．３％和２６．７％㊂表１㊀抗褐化剂对青钱柳不同器官愈伤组织褐化率的影响Ｔａｂｌｅ１㊀Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆａｎｔｉ⁃ｂｒｏｗｎｉｎｇａｇｅｎｔｓｏｎｂｒｏｗｎｉｎｇｒａｔｅｏｆｃａｌｌｕｓｉｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｏｒｇａｎｓｏｆＣｙｃｌｏｃａｒｙａｐａｌｉｕｒｕｓ单位：％编号ｃｏｄｅ处理ｔｒｅａｔｍｅｎｔ抗褐化剂ａｎｔｉ⁃ｂｒｏｗｎｉｎｇａｇｅｎｔ质量浓度／（ｇ㊃Ｌ－１）ｍｅａｓｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ茎段ｓｔｅｍｓｅｇｍｅｎｔ叶片ｌｅａｆ根系ｒｏｏｔｚ１ＶＣ０．１５０．０ʃ１０．００ａ６６．７ʃ５．７７ａ４３．３０ʃ５．７７ａｂｃｚ２ＶＣ０．２４６．７ʃ５．７７ａｂ５６．７ʃ１１．５５ａｂ４０．００ʃ１０．００ａｂｃｚ３ＶＣ０．４４３．３ʃ５．７７ａｂ５３．３ʃ１５．２８ａｂｃ３６．７０ʃ１１．５５ａｂｃｚ４ＶＣ１．０５３．３ʃ５．７７ａ５６．７ʃ５．７７ａｂｃ５３．３０ʃ５．７７ａｚ５ＰＶＰ１．０５３．３ʃ１１．５５ａ５６．７ʃ５．７７ａｂ５３．３０ʃ２０．８２ａｚ６ＰＶＰ３．０４０．０ʃ１０．００ａｂｃ５０．０ʃ１０．００ａｂｃ５０．００ʃ１０．００ａｂｚ７ＰＶＰ５．０３３．３ʃ５．７７ｂｃｄ５３．３ʃ１１．５５ａｂｃ４３．３０ʃ５．７７ａｂｃｚ８ＡＣ１．０２６．７ʃ５．７７ｃｄｅ４３．３ʃ１５．２８ｂｃ３０．００ʃ１０．００ｂｃｚ９ＡＣ２．０２３．３ʃ５．７７ｄｅ３６．７ʃ１１．５５ｂｃ２６．７０ʃ５．７７ｃｚ１０ＡＣ４．０１６．７ʃ５．７７ｅ３３．３ʃ５．７７ｃ２６．７０ʃ１５．２８ｃ㊀㊀注：同列不同小写字母表示不同抗褐化剂处理间差异显著，（Ｐ＜０．０５）㊂下同㊂Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｌｏｗｅｒｃａｓｅｌｅｔｔｅｒｓｉｎｔｈｅｓａｍｅｃｏｌｕｍｎｉｎ⁃ｄｉｃａｔｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓｂｅｔｗｅｅｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔａｎｔｉ⁃ｂｒｏｗｎｉｎｇａｇｅｎｔｔｒｅａｔ⁃ｍｅｎｔｓ（Ｐ＜０．０５）．Ｔｈｅｓａｍｅｂｅｌｏｗ．㊀㊀由表１还可以看出，不同处理叶片愈伤组织褐化率高于茎段和根系㊂添加质量浓度为０ １㊁０ ２和０ ４ｇ／Ｌ的ＶＣ处理茎段愈伤组织褐化率略高于根系，添加ＰＶＰ（３．０和５．０ｇ／Ｌ）和ＡＣ处理根系愈伤组织褐化率略高于茎段㊂２．２㊀抗褐化剂对青钱柳愈伤组织增长量的影响不同种类和浓度抗褐化剂处理对青钱柳茎段㊁叶片和根系愈伤组织增长量均具有显著影响（Ｐ＜０．０５，表２）㊂在培养过程中，添加ＶＣ㊁ＰＶＰ和ＡＣ处理的茎段㊁叶片和根系愈伤组织每１０ｄ的增长量随浓度增加并未呈现一致变化规律，但添加ＰＶＰ和ＡＣ处理愈伤组织累计增长量（０ ４０ｄ）随浓度增加呈增加趋势，添加ＶＣ处理随浓度增加呈先增加后降低趋势，在０．４ｇ／Ｌ（ｚ３处理）时最高㊂由表２还可以看出，添加ＶＣ和ＰＶＰ处理不同外植体愈伤组织增长量高于ＡＣ处理，且这一差距随培养时间延长而增大㊂茎段愈伤组织累计增长量在ＶＣ质量浓度为０．４ｇ／Ｌ（ｚ３）时最高为６．６９ｇ，在ＡＣ质量浓度为２．０ｇ／Ｌ（ｚ９）时最低仅为０．３４ｇ；叶片和根系愈伤组织累计增长量在ＰＶＰ质量浓度为９６１南京林业大学学报（自然科学版）第４７卷５ ０ｇ／Ｌ（ｚ７）时最高，分别为６．４４和５ ５６ｇ，在ＡＣ质量浓度为１．０ｇ／Ｌ（ｚ８）时最低，分别为０．２５ｇ和０．４５ｇ㊂除个别处理外，茎段㊁叶片和根系愈伤组织增长量随培养时间呈逐渐增加趋势，在３０ ４０ｄ增长量最高，且不同外植体平均愈伤组织增长量从大到小依次为：茎段＞叶片＞根系，茎段愈伤组织质量为３ ５７ｇ，分别为叶片和根系的１．１７和１．１９倍㊂表２㊀抗褐化剂对青钱柳不同器官愈伤组织增长量的影响Ｔａｂｌｅ２㊀Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆａｎｔｉ⁃ｂｒｏｗｎｉｎｇａｇｅｎｔｓｏｎｃａｌｌｕｓｇｒｏｗｔｈｉｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｏｒｇａｎｓｏｆＣ．ｐａｌｉｕｒｕｓ单位：ｇ器官ｏｒｇａｎ处理时间／ｄｔｒｅａｔｍｅｎｔｔｉｍｅ增长量ｇｒｅｗｔｈｚ１ｚ２ｚ３ｚ４ｚ５ｚ６ｚ７ｚ８ｚ９ｚ１０茎段ｓｔｅｍｓｅｇｍｅｎｔ１００．４３ʃ０．１０ａｂ０．６８ʃ０．２０ａ０．７０ʃ０．２１ａ０．３８ʃ０．０７ａｂ０．３６ʃ０．０８ａｂ０．３９ʃ０．０８ａｂ０．４０ʃ０．１６ａｂ０．１３ʃ０．０３ｂ０．１６ʃ０．０５ｂ０．１４ʃ０．０２ｂ２００．９８ʃ０．１６ａ１．１３ʃ０．３８ａ１．０９ʃ０．３９ａ０．７５ʃ０．１５ａ０．７０ʃ０．１６ａ０．９０ʃ０．２２ａ０．９２ʃ０．１２ａ０．１２ʃ０．０７ｂ０．１２ʃ０．０３ｂ０．１５ʃ０．０５ｂ３０１．１１ʃ０．４４ａ１．７２ʃ０．９６ａ１．５７ʃ０．６１ａ１．３７ʃ０．４２ａ０．９６ʃ０．１ａ１．２８ʃ０．２７ａ１．６４ʃ０．５５ａ０．０１ʃ０．０５ｃ０．０３ʃ０．１１ｃ０．１５ʃ０．０６ｂ４０１．３３ʃ０．２８ｂ２．３２ʃ２．６ａｂ３．３３ʃ１．０６ａ２．６０ʃ０．３９ａｂ１．４０ʃ０．０７ｂ１．９２ʃ０．５７ａｂ２．１８ʃ１．０７ａｂ０．０９ʃ０．４６ｃ０．０３ʃ０．０５ｄ０．０４ʃ０．１９ｄ叶片ｌｅａｆ１００．５０ʃ０．１２ａ０．４３ʃ０．１３ａｂ０．４ʃ０．１５ａｂ０．３６ʃ０．１１ａｂ０．５２ʃ０．１５ａ０．３５ʃ０．１１ａ０．５１ʃ０．１４ａｂ０．１９ʃ０．０６ｂ０．１９ʃ０．０４ｂ０．２３ʃ０．０６ｂ２００．８２ʃ０．２３ａｂ０．６８ʃ０．２２ｂ０．５５ʃ０．１４ｂ０．５２ʃ０．２０ｂ０．７５ʃ０．１４ａ０．７０ʃ０．２５ａｂ１．０２ʃ０．２３ａｂ０．１２ʃ０．０４ｃ０．１０ʃ０．０４ｃ０．１７ʃ０．０７ｃ３０１．２８ʃ０．３７ａｂ１．０６ʃ０．３３ａｂ１．０６ʃ０．１８ａｂ０．８７ʃ０．２０ａｂ１．０７ʃ０．１４ａ１．１７ʃ０．４８ａｂ１．６０ʃ０．１４ａｂ－０．０５ʃ０．０１ｂ－０．０２ʃ０．０１ｃ０．０７ʃ０．０３ｄ４００．７３ʃ０．２０ｃ２．２３ʃ０．５３ａｂ２．１６ʃ０．４３ａｂ１．３３ʃ０．２６ｂ１．６６ʃ０．０６ａ１．８４ʃ０．３４ｂｃ３．３１ʃ０．７５ａｂ－０．０２ʃ０．００ｄ０．００ʃ０．００ｅ０．０７ʃ０．０２ｅ根系ｒｏｏｔ１００．３６ʃ０．１１ａ０．２８ʃ０．０８ａｂ０．３１ʃ０．０７ａ０．２９ʃ０．１０ａ０．２４ʃ０．０６ａ０．４０ʃ０．０９ａ０．４４ʃ０．０６ａ０．１３ʃ０．０４ｃ０．１８ʃ０．０５ｂｃ０．２０ʃ０．０７ｂｃ２００．３６ʃ０．１１ａ０．５３ʃ０．１６ａｂ０．５４ʃ０．１６ａｂ０．６１ʃ０．２３ａｂ０．６６ʃ０．２２ａｂ０．７６ʃ０．２８ｂ０．８６ʃ０．２８ａ０．４４ʃ０．１５ｂ０．１７ʃ０．０６ｃ０．１８ʃ０．０３ｃ３００．６１ʃ０．２２ａ０．８８ʃ０．３３ａｂ１．０１ʃ０．４９ａｂ０．９４ʃ０．３１ａｂ１．０１ʃ０．２５ａｂ１．４３ʃ０．５７ｂ１．５６ʃ０．３６ａ－０．２４ʃ０．０６ｃ０．１１ʃ０．０４ｂｃ０．１８ʃ０．０３ｂ４００．９８ʃ０．３ａｂ０．９３ʃ０．１６ａｂ２．７２ʃ１．０４ｂ２．２０ʃ０．６３ａ２．５０ʃ０．５１ａｂ２．２０ʃ０．６２ｂ２．７０ʃ０．２１ａｂ０．１１ʃ０．０４ｃ０．１１ʃ０．０４ｃ０．１４ʃ０．０５ｃ㊀㊀２．３㊀抗褐化剂对青钱柳愈伤组织相关酶活性的影响２．３．１㊀苯丙氨酸解氨酶（ＰＡＬ）活性由抗褐化剂对青钱柳不同器官愈伤组织ＰＡＬ活性的影响结果（图１ａ）可知，青钱柳茎段㊁叶片和根系愈伤组织ＰＡＬ活性在不同抗褐化剂种类和浓度处理间有显著差异（Ｐ＜０．０５）㊂添加ＰＶＰ和ＶＣ处理的茎段㊁叶片和根系愈伤组织ＰＡＬ活性略高于ＡＣ处理㊂在０ ４０ｄ，所有处理不同器官愈伤组织ＰＡＬ活性均值在叶片中最高为７５２６．８Ｕ／（ｇ㊃ｈ），比茎段和根系分别高出４２．３％和不同小写字母表示不同抗褐化剂处理间有显著差异（Ｐ＜０．０５）㊂下同㊂Ｔｈｅｓａｍｅｂｅｌｏｗ．Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｌｏｗｅｒｃａｓｅｌｅｔｔｅｒｓｉｎｄｉｃａｔｅｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓａｍｏｎｇｔｈｅｔｅｎａｎｔｉ－ｂｒｏｗｎｉｎｇａｇｅｎｔｔｒｅａｔｍｅｎｔｓ（Ｐ＜０．０５）．Ｔｈｅｓａｍｅｂｅｌｏｗ．图１㊀抗褐化剂对青钱柳不同器官愈伤组织ＰＡＬ活性的影响Ｆｉｇ．１㊀Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆａｎｔｉ⁃ｂｒｏｗｎｉｎｇａｇｅｎｔｓｏｎＰＡＬａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｃａｌｌｕｓｉｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｏｒｇａｎｓｏｆＣｙｃｌｏｃａｒｙａｐａｌｉｕｒｕｓ㊀㊀由图１还可以看出，愈伤组织ＰＡＬ活性随抗褐化剂添加浓度的增加整体呈逐渐降低的趋势㊂在０ ４０ｄ，ｚ３㊁ｚ４㊁ｚ６和ｚ７处理茎段愈伤组织ＰＡＬ活性变化相对平稳；ｚ１０处理ＰＡＬ活性显著低于其他处理，而ｚ１和ｚ５处理ＰＡＬ活性较高（图１ａ）㊂除ｚ３处理外，其他处理叶片愈伤组织ＰＡＬ活性在０ ４０ｄ均具有较大变化幅度，ｚ１处理的ＰＡＬ活性显著高于其他处理（图１ｂ）㊂根系愈伤组织ＰＡＬ活性在培养过程中整体呈逐渐降低的趋势；ｚ１处理愈伤组织ＰＡＬ活性最高，而以ｚ９和ｚ１０处理ＰＡＬ活性最低（图１ｃ）㊂２．３．２㊀多酚氧化酶（ＰＰＯ）活性抗褐化剂种类和浓度对青钱柳茎段㊁叶片和根系愈伤组织ＰＰＯ活性有显著影响（Ｐ＜０．０５，图２）㊂添加ＰＶＰ处理（ｚ５ ｚ７）的茎段㊁叶片和根系愈伤组织ＰＰＯ活性高于添加ＡＣ（ｚ８ ｚ１０）和ＶＣ（ｚ１ ｚ４）０７１㊀第６期王㊀纪，等：不同抗褐化剂对青钱柳愈伤组织酶活性和生长的影响处理㊂在０ ４０ｄ，不同处理愈伤组织ＰＰＯ活性在不同器官中均值从大到小依次为：叶片＞茎段＞根系，分别为８５８．１㊁７１３．７和７０５．５Ｕ／（ｇ㊃ｍｉｎ）㊂茎段㊁叶片和根系愈伤组织ＰＰＯ活性随抗褐化剂添加浓度的增加整体呈先增加后降低的单峰变化趋势㊂在０ ４０ｄ，添加ＡＣ处理的茎段愈伤组织ＰＰＯ活性变化相对平稳，ｚ８处理ＰＰＯ活性低于其他处理（图２ａ）㊂除ｚ２和ｚ４处理外，其他叶片愈伤组织ＰＰＯ活性在培养过程中均有较大变化幅度，ｚ３和ｚ６处理ＰＰＯ活性高于其他处理，而ｚ８低于其他处理（图２ｂ）㊂根系愈伤组织ＰＰＯ活性在培养过程中均有较大变异幅度，ｚ６和ｚ７处理在第３０ｄ时活性最高，而其他处理均在第３０ｄ活性最低（图２ｃ）㊂图２㊀抗褐化剂对青钱柳不同器官愈伤组织ＰＰＯ活性的影响Ｆｉｇ．２㊀Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆａｎｔｉ⁃ｂｒｏｗｎｉｎｇａｇｅｎｔｓｏｎＰＰＯａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｃａｌｌｕｓｉｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｏｒｇａｎｓｏｆＣ．ｐａｌｉｕｒｕｓ２．３．３㊀过氧化物酶（ＰＯＤ）活性抗褐化剂种类和浓度对青钱柳茎段㊁叶片和根系愈伤组织ＰＯＤ活性有显著影响（Ｐ＜０．０５）㊂与茎段㊁叶片和根系愈伤组织ＰＯＤ活性较低㊂在培养阶段，不同处理愈伤组织ＰＯＤ活性在不同器官中均值从大到依次为：叶片＞茎段＞根系，分别为图３㊀抗褐化剂对青钱柳不同器官愈伤组织ＰＯＤ活性的影响Ｆｉｇ．３㊀Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆａｎｔｉ⁃ｂｒｏｗｎｉｎｇａｇｅｎｔｓｏｎＰＯＤａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｃａｌｌｕｓｉｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｏｒｇａｎｓｏｆＣ．ｐａｌｉｕｒｕｓ㊀㊀由图３还可看出，不同器官愈伤组织ＰＯＤ活性随抗褐化剂添加浓度的增加与ＰＰＯ呈一致单峰变化趋势㊂在培养过程中，不同处理茎段愈伤组织ＰＯＤ活性呈先增加后降低变化趋势，在第２０天或３０天达到最大值；ｚ３和ｚ６处理ＰＯＤ活性高于其他处理（图３ａ）㊂添加ＡＣ处理叶片愈伤组织ＰＯＤ活性在培养过程中变化平稳，ｚ２㊁ｚ３㊁ｚ５和ｚ７处理在第３０天和第４０天远高于第１０天和２０天；ｚ６处理ＰＯＤ活性显著高于其他处理（图３ｂ）㊂由图３ｃ可知，在０ ４０ｄ，ｚ８和ｚ９处理根系愈伤组织ＰＯＤ活性变化平稳，ｚ２㊁ｚ５和ｚ６处理变化明显，呈先增加后降低趋势；ｚ８和ｚ１０处理ＰＯＤ活性显著低于其他处理㊂２．４㊀相关性分析相关性分析结果（表３）表明，青钱柳愈伤组织褐化率与ＰＡＬ活性呈极显著正相关（Ｐ＜０．０１），但与ＰＰＯ和ＰＯＤ活性相关关系不显著㊂愈伤组织增长量与ＰＰＯ和ＰＯＤ活性显著正相关（Ｐ＜０ ０５），但与ＰＡＬ活性相关关系不显著㊂表３㊀青钱柳愈伤组织褐化率㊁增长量与生物酶活性指标的相关性分析Ｔａｂｌｅ３㊀Ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎａｎａｌｙｓｉｓｏｆｂｒｏｗｎｉｎｇｒａｔｅ，ｇｒｏｗｔｈａｎｄｅｎｚｙｍｅａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｉｎｃａｌｌｕｓｏｆＣ．ｐａｌｉｕｒｕｓ指标ｉｎｄｅｘＰＡＬ活性ＰＡＬａｃｔｉｖｉｔｙＰＰＯ活性ＰＰＯａｃｔｉｖｉｔｙＰＯＤ活性ＰＯＤａｃｔｉｖｉｔｙ褐化率ｂｒｏｗｎｉｎｇｒａｔｅ０．５１６∗∗０．３５９０．３４７愈伤组织增长量ｃａｌｌｕｓｇｒｏｗｔｈ０．３１７０．６０８∗∗０．６３１∗∗㊀㊀注：∗∗．Ｐ＜０．０１㊂３㊀讨㊀论植物组织初代培养㊁愈伤组织的继代培养过程１７１南京林业大学学报（自然科学版）第４７卷中经常出现褐化现象，这对离体培养的外植体诱导和生长产生不利影响［７，２０］㊂在植物组织培养过程中，褐变的底物是酚类化合物，而ＰＡＬ是酚类化合物合成途径中的关键酶和限速酶［２１］，因此，ＰＡＬ与植物组织培养的愈伤组织褐变有密切的关系㊂谢寅峰等［１０］对青钱柳愈伤组织褐化的研究结果表明，青钱柳愈伤组织的ＰＡＬ活性在不同种类抗褐化剂处理下均受到抑制，并且随着抗褐化剂浓度的增加呈下降趋势㊂本研究也证实，３种抗褐化剂对青钱柳茎段㊁叶片和根系的愈伤组织内的ＰＡＬ活性的抑制效果在不同种类和浓度的抗褐化剂处理间存在显著差异（Ｐ＜０．０５），且ＰＡＬ活性均随着抗褐化剂添加量的增加而降低㊂同时，叶片的愈伤组织ＰＡＬ活性高于茎段和根系的愈伤组织，这可能是由于青钱柳叶是酚类物质合成的主要部位［２２］㊂另外，添加ＡＣ处理的愈伤组织ＰＡＬ的活性低于ＰＶＰ和ＶＣ处理的，这可能是因为ＡＣ的吸附没有选择性，导致了培养基中的营养物质也被吸附，从而造成酚类物质的合成底物减少［２３］㊂ＰＰＯ和ＰＯＤ是植物体内普遍存在的氧化酶，在组织培养中将酚类物质氧化成醌类物质，从而引起愈伤组织褐变，因此，ＰＰＯ和ＰＯＤ活性的高低也是引起愈伤组织褐变的关键［２４－２５］㊂本研究结果显示，青钱柳叶片的愈伤组织内ＰＰＯ和ＰＯＤ活性显著高于茎段和根系愈伤组织的，这可能是因为青钱柳叶的酚类物质含量显著高于根和茎的［２２］，且ＰＰＯ和ＰＯＤ活性均与愈伤组织内酚类物质含量呈正相关关系［２５－２６］㊂同时，青钱柳茎段㊁叶片和根系愈伤组织内的ＰＰＯ和ＰＯＤ活性均随着３种抗褐化剂浓度的增加呈现单峰趋势，这可能是由于过高浓度的抗褐化剂抑制了愈伤组织内的酚类物质的合成㊂添加ＰＶＰ处理的愈伤组织ＰＰＯ和ＰＯＤ活性高于ＡＣ和ＶＣ处理，这可能是因为ＡＣ处理的愈伤组织合成的酚类物质较少，而ＶＣ作为一种强抗氧化剂，既能作为醌类物质的还原剂，又能抑制ＰＰＯ的活性，从而起到抗褐化的作用［２７］㊂由于不同外植体的酚类物质含量存在差异，因此抗褐化剂种类的选择及其浓度对不同组织的抗褐化能力和愈伤组织增长的影响并不一致［１８，２７］，本研究结果也表明青钱柳茎段㊁叶片和根系的愈伤组织褐化率和增长量在不同种类和浓度的抗褐化剂的处理间存在差异㊂此外，研究发现，植物愈伤组织的褐化与相关酶活性密切相关［２８］㊂本研究的相关分析表明，青钱柳愈伤组织褐化率与ＰＡＬ活性呈极显著正相关（Ｐ＜０．０１），而愈伤组织增长量与ＰＰＯ和ＰＯＤ活性显著正相关（Ｐ＜０．０５）㊂这说明ＰＡＬ的活性在青钱柳愈伤组织褐化过程中到关键作用，而愈伤组织增长量受到ＰＰＯ和ＰＯＤ活性的影响㊂综合上述ＰＡＬ㊁ＰＰＯ和ＰＯＤ３种酶的研究结果发现，添加ＡＣ的处理对青钱柳愈伤组织褐化抑制效果最好，青钱柳茎段㊁叶片和根系的愈伤组织褐化率结果也显示添加ＡＣ处理的褐化率最低㊂但是，添加ＡＣ处理的茎段㊁叶片和根系的愈伤组织增长量也是最低的，甚至抑制青钱柳愈伤组织的生长，这与陈雪梅等［２６］和冯代弟［２９］的研究结果一致，ＡＣ是一种无选择性的吸附剂，其在吸附酚类物质的同时也会影响培养基的营养物质的含量，导致生长受阻㊂同时高浓度的ＰＶＰ会抑制青钱柳茎段㊁叶片和根系的愈伤组织增长，可能是因为高浓度的ＰＶＰ会抑制植物对６⁃ＢＡ等有益物质的吸收利用［３０］㊂而高浓度的ＶＣ会增加青钱柳茎段㊁叶片和根系的愈伤组织褐化率，这可能是因为ＶＣ浓度过高时，部分ＶＣ会与氨基酸发生反应，增加褐化程度［３１－３２］㊂因此，在对青钱柳进行组织培养时，除了选择最适宜抗褐化剂及其最适浓度，还需对青钱柳外植体材料进行选择㊂综上所述，不同抗褐化剂及其不同浓度对青钱柳愈伤组织褐化率和生长的影响有所差异，以４ ０ｇ／Ｌ的ＡＣ处理褐化率最低，以０ ４ｇ／Ｌ的ＶＣ处理茎段愈伤组织累计增长量最高㊂进一步探索愈伤组织的褐化率与相关酶活性的关系，ＰＡＬ酶活性在愈伤组织褐化过程中起到关键作用，可以作为青钱柳组织培养过程中褐化控制的主要参考酶指标，同时外植体器官的类型选择也是控制褐化要考虑的因素㊂研究结果为青钱柳建立组织培养快速繁殖体系和离体生产次生代谢物质提供了一定的理论基础和技术支撑，但对其次生代谢物质的积累和褐化机理还有待进一步深入研究㊂参考文献（ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ）：［１］方升佐，洑香香．青钱柳资源培育与开发利用的研究进展［Ｊ］．南京林业大学学报（自然科学版），２００７，３１（１）：９５－１００．ＦＡＮＧＳＺ，ＦＵＸＸ．ＰｒｏｇｒｅｓｓａｎｄｐｒｏｓｐｅｃｔｓｏｎｓｉｌｖｉｃｕｌｔｕｒｅａｎｄｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎｏｆＣｙｃｌｏｃａｒｙａｐａｌｉｕｒｕｓｒｅｓｏｕｒｃｅｓ［Ｊ］．ＪＮａｎｊｉｎｇＦｏｒＵｎｉｖ（ＮａｔＳｃｉＥｄ），２００７，３１（１）：９５－１００．ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００－２００６．２００７．０１．０２３．［２］ＺＨＯＵＭＭ，ＱＵＥＫＳＹ，ＳＨＡＮＧＸＬ，ｅｔａｌ．ＧｅｏｇｒａｐｈｉｃａｌｖａｒｉａｔｉｏｎｓｏｆｔｒｉｔｅｒｐｅｎｏｉｄｃｏｎｔｅｎｔｓｉｎＣｙｃｌｏｃａｒｙａｐａｌｉｕｒｕｓｌｅａｖｅｓａｎｄｔｈｅｉｒｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｅｆｆｅｃｔｓｏｎＨｅＬａｃｅｌｌｓ［Ｊ］．ＩｎｄＣｒｏｐｓＰｒｏｄ，２０２１，１６２：１１３３１４．ＤＯＩ：１０．１０１６／ｊ．ｉｎｄｃｒｏｐ．２０２１．１１３３１４．［３］ＷＵＺＦ，ＭＥＮＧＦＣ，ＣＡＯＬＪ，ｅｔａｌ．ＴｒｉｔｅｒｐｅｎｏｉｄｓｆｒｏｍＣｙｃｌｏｃａｒｙａｐａｌｉｕｒｕｓａｎｄｔｈｅｉｒｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｅｆｆｅｃｔｏｎｔｈｅｓｅｃｒｅｔｉｏｎｏｆａｐｏｌｉｐｒｏｔｅｉｎＢ４８ｉｎＣａｃｏ⁃２ｃｅｌｌｓ［Ｊ］．Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２０１７，１４２：２７１㊀第６期王㊀纪，等：不同抗褐化剂对青钱柳愈伤组织酶活性和生长的影响７６－８４．ＤＯＩ：１０．１０１６／ｊ．ｐｈｙｔｏｃｈｅｍ．２０１７．０６．０１５．［４］ＸＩＥＰＪ，ＨＵＡＮＧＬＸ，ＺＨＡＮＧＣＨ，ｅｔａｌ．Ｐｈｅｎｏｌｉｃｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ，ａｎｄａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｏｆｏｌｉｖｅｌｅａｆａｎｄｆｒｕｉｔ（ＯｌｅａｅｕｒｏｐａｅａＬ．）ｅｘｔｒａｃｔｓａｎｄｔｈｅｉｒｓｔｒｕｃｔｕｒｅ⁃ａｃｔｉｖｉｔｙｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓ［Ｊ］．ＪＦｕｎｃｔＦｏｏｄｓ，２０１５，１６：４６０－４７１．ＤＯＩ：１０．１０１６／ｊ．ｊｆｆ．２０１５．０５．００５．［５］黄鹏，毛霞，韩歌，等．雌雄异型异熟青钱柳花发育过程中养分的动态变化［Ｊ］．南京林业大学学报（自然科学版），２０１８，４２（５）：１－９．ＨＵＡＮＧＰ，ＭＡＯＸ，ＨＡＮＧ，ｅｔａｌ．ＤｙｎａｍｉｃｃｈａｎｇｅｓｏｆｎｕｔｒｉｅｎｔｓｄｕｒｉｎｇｆｌｏｒａｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｉｎｈｅｔｅｒｏｄｉｃｈｏｇａｍｏｕｓＣｙｃｌｏｃａｒｙａｐａｌｉｕｒｕｓ［Ｊ］．ＪＮａｎｊｉｎｇＦｏｒＵｎｉｖ（ＮａｔＳｃｉＥｄ），２０１８，４２（５）：１－９．ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００－２００６．２０１８０２０１８．［６］杨万霞，方升佐．青钱柳种子综合处理过程中内源激素的动态变化［Ｊ］．南京林业大学学报（自然科学版），２００８，３２（５）：８５－８８．ＹＡＮＧＷＸ，ＦＡＮＧＳＺ．Ｄｙｎａｍｉｃｃｈａｎｇｅｓｏｆｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓｈｏｒ⁃ｍｏｎｅｓｉｎＣｙｃｌｏｃａｒｙａｐａｌｉｕｒｕｓｓｅｅｄｄｕｒｉｎｇｓｔｒａｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ［Ｊ］．ＪＮａｎ⁃ｊｉｎｇＦｏｒＵｎｉｖ（ＮａｔＳｃｉＥｄ），２００８，３２（５）：８５－８８．ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００－２００６．２００８．０５．０１９．［７］梁艳，赵雪莹，许昕，等．黑皮油松外植体的抗褐化处理与诱导培养［Ｊ］．分子植物育种，２０２０，１８（２１）：７１７３－７１７８．ＬＩＡＮＧＹ，ＺＨＡＯＸＹ，ＸＵＸ，ｅｔａｌ．Ａｎｔｉ⁃ｂｒｏｗｎｉｎｇｔｒｅａｔｍｅｎｔｓａｎｄｉｎｄｕｃｅｄｃｕｌｔｕｒｅｏｎｔｈｅｅｘｐｌａｎｔｓｏｆＰｉｎｕｓｔａｂｕｌｉｆｏｒｍｉｓｖａｒ．ｍｕｋｄｅｎｓｉｓ［Ｊ］．ＭｏｌＰｌａｎｔＢｒｅｅｄ，２０２０，１８（２１）：７１７３－７１７８．ＤＯＩ：１０．１３２７１／ｊ．ｍｐｂ．０１８．００７１７３．［８］李琰，王冬梅，姜在民，等．培养基及培养条件对杜仲愈伤组织生长及次生代谢产物含量的影响［Ｊ］．西北植物学报，２００４，２４（１０）：１９１２－１９１６．ＬＩＹ，ＷＡＮＧＤＭ，ＪＩＡＮＧＺＭ，ｅｔａｌ．Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｂａｓｉｃｍｅｄｉａａｎｄｃｕｌｔｕｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｏｎｇｒｏｗｔｈｏｆｃａｌｌｕｓｅｓａｎｄｐｒｏ⁃ｄｕｃｔｉｏｎｏｆｓｅｃｏｎｄａｒｙｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓｏｆＥｕｃｏｍｍｉａｕｌｍｏｉｄｅｓ［Ｊ］．ＡｃｔａＢｏｔＢｏｒｅａｌｉＯｃｃｉｄｅｎｔａｌｉａＳｉｎ，２００４，２４（１０）：１９１２－１９１６．ＤＯＩ：１０．３３２１／ｊ．ｉｓｓｎ：１０００－４０２５．２００４．１０．０２５．［９］郭艳，杨海玲．植物组织培养中的褐化现象及解决途径［Ｊ］．山西农业科学，２００９，３７（７）：１４－１６，３１．ＧＵＯＹ，ＹＡＮＧＨＬ．Ａｄ⁃ｖａｎｃｅｓｉｎｓｔｕｄｉｅｓｏｎｂｒｏｗｎｉｎｇｉｎｐｌａｎｔｔｉｓｓｕｅｃｕｌｔｕｒｅ［Ｊ］．ＪＳｈａｎｘｉＡｇｒｉｃＳｃｉ，２００９，３７（７）：１４－１６，３１．ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２－２４８１．２００９．０７．００４．［１０］谢寅峰，张志敏，张颖颖，等．３种抗氧化剂对青钱柳愈伤组织褐化的影响［Ｊ］．安徽农业大学学报，２０１５，４２（４）：４９３－４９８．ＸＩＥＹＦ，ＺＨＡＮＧＺＭ，ＺＨＡＮＧＹＹ，ｅｔａｌ．ＥｆｆｅｃｔｓｏｆｔｈｒｅｅａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｓｏｎｃａｌｌｕｓｂｒｏｗｎｉｎｇｏｆＣｙｃｌｏｃａｒｙａｐａｌｉｕｒｕｓ［Ｊ］．ＪＡｎｈｕｉＡｇｒｉｃＵｎｉｖ，２０１５，４２（４）：４９３－４９８．ＤＯＩ：１０．１３６１０／ｊ．ｃｎｋｉ．１６７２－３５２ｘ．２０１５０６２６．０１０．［１１］吴群英，徐庆，李丽亚，等．青钱柳不同外植体组织培养及褐变防止的研究［Ｊ］．时珍国医国药，２００８，１９（８）：１８７２－１８７４．ＷＵＱＹ，ＸＵＱ，ＬＩＬＹ，ｅｔａｌ．Ｓｔｕｄｙｏｎｔｉｓｓｕｅｃｕｌｔｕｒｅｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｅｘ⁃ｐｌａｎｔｓａｎｄｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎｏｆｂｒｏｗｎｉｎｇｏｆＣｙｃｌｏｃａｒｙａｐａｌｉｕｒｕｓ（Ｂａｔａｌ．）Ｉｊｉｎｓｋａｊａ［Ｊ］．ＬｉｓｈｉｚｈｅｎＭｅｄＭａｔｅｒＭｅｄＲｅｓ，２００８，１９（８）：１８７２－１８７４．ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００８－０８０５．２００８．０８．０３４．［１２］王莹．青钱柳离体快繁及生根机理的初步研究［Ｄ］．南京：南京林业大学，２００８．ＷＡＮＧＹ．Ｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｙｓｔｕｄｉｅｓｏｎｒａｐｉｄｐｒｏｐａ⁃ｇａｔｉｏｎｉｎｖｉｔｒｏａｎｄｒｏｏｔｉｎｇｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆＣｙｃｌｏｃａｒｙａｐａｌｉｕｒｕｓ［Ｄ］．Ｎａｎｊｉｎｇ：ＮａｎｊｉｎｇＦｏｒｅｓｔｒｙＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，２００８．［１３］王纪，谢寅峰，方升佐．青钱柳愈伤组织诱导与增殖的初步研究［Ｊ］．安徽农业科学，２０１２，４０（３）：１３０９－１３１２．ＷＡＮＧＪ，ＸＩＥＹＦ，ＦＡＮＧＳＺ．Ａｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｙｓｔｕｄｙｏｎｃａｌｌｕｓｉｎｄｕｃｔｉｏｎａｎｄｐｒｏ⁃ｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆＣｙｌｏｃａｒｙａｐａｌｉｕｒｕｓ［Ｊ］．ＪＡｎｈｕｉＡｇｒｉｃＳｃｉ，２０１２，４０（３）：１３０９－１３１２．ＤＯＩ：１０．１３９８９／ｊ．ｃｎｋｉ．０５１７－６６１１．２０１２．０３．２１７．［１４］冯莹，钱莲文，林庆良．不同激素对青钱柳外植体和愈伤组织褐化的影响［Ｊ］．植物学报，２０１９，５４（５）：６３４－６４１．ＦＥＮＧＹ，ＱＩＡＮＬＷ，ＬＩＮＱＬ．ＴｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｈｏｒｍｏｎｅｓｏｎｅｘｐｌａｎｔｂｒｏｗｎｉｎｇａｎｄｃａｌｌｕｓｂｒｏｗｎｉｎｇｉｎＣｙｃｌｏｃａｒｙａｐａｌｉｕｒｕｓ［Ｊ］．ＢｕｌｌＢｏｔ，２０１９，５４（５）：６３４－６４１．ＤＯＩ：１０．１１９８３／ＣＢＢ１８１９３．［１５］ＡＬＩＨＭ，ＥＬ⁃ＧＩＺＡＷＹＡＭ，ＥＬ⁃ＢＡＳＳＩＯＵＮＹＲＥＩ，ｅｔａｌ．Ｂｒｏｗｎｉｎｇｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｂｙｃｙｓｔｅｉｎｅ，ａｓｃｏｒｂｉｃａｃｉｄａｎｄｃｉｔｒｉｃａｃｉｄ，ａｎｄｉｄｅｎｔｉｆｙｉｎｇＰＰＯ⁃ｃａｔｅｃｈｏｌ⁃ｃｙｓｔｅｉｎｅｒｅａｃｔｉｏｎｐｒｏｄｕｃｔｓ［Ｊ］．ＪＦｏｏｄＳｃｉＴｅｃｈｎｏｌ，２０１５，５２（６）：３６５１－３６５９．ＤＯＩ：１０．１００７／ｓ１３１９７－０１４－１４３７－０．［１６］ＹＡＲＩＫＡ，ＮＡＤＥＲＩ⁃ＭＡＮＥＳＨＨ，ＴＯＦＴＳＨ．ＥｆｆｅｃｔｏｆａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｓａｎｄｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅｓｉｎｃａｌｌｕｓｃｕｌｔｕｒｅｓｏｆＴａｘｕｓｂｒｅｖｉｆｏ⁃ｌｉａ：ｅｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆｂｒｏｗｎｉｎｇ，ｃａｌｌｕｓｇｒｏｗｔｈ，ｔｏｔａｌｐｈｅｎｏｌｉｃｓａｎｄｐａ⁃ｃｌｉｔａｘｅｌｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｂｉｏｉｍｐａｃｔｓ，２０１１，１（１）：３７－４５．ＤＯＩ：１０．５６８１／ｂｉ．２０１１．００６．［１７］侯健华，李正红，马宏，等．地涌金莲组织培养中的褐化抑制［Ｊ］．林业科学研究，２０１５，２８（２）：２１７－２２１．ＨＯＵＪＨ，ＬＩＺＨ，ＭＡＨ，ｅｔａｌ．Ｓｔｕｄｉｅｓｏｎａｎｔｉ⁃ｂｒｏｗｎｉｎｇｄｕｒｉｎｇｔｉｓｓｕｅｃｕｌｔｕｒｅｏｆＭｕｓｅｌｌａｌａｓｉｏｃａｒｐａ［Ｊ］．ＦｏｒＲｅｓ，２０１５，２８（２）：２１７－２２１．ＤＯＩ：１０．１３２７５／ｊ．ｃｎｋｉ．ｌｙｋｘｙｊ．２０１５．０２．０１２．［１８］王倩颖，唐佳妮，刘志高，等．景宁木兰组织培养外植体选择与抗褐化研究［Ｊ］．广西植物，２０１７，３７（９）：１０８８－１０９５．ＷＡＮＧＱＹ，ＴＡＮＧＪＮ，ＬＩＵＺＧ，ｅｔａｌ．Ｅｘｐｌａｎｔｓｅｌｅｃｔｉｎｇａｎｄａｎｔｉ⁃ｂｒｏｗｎｉｎｇｏｆＭａｇｎｏｌｉａｓｉｎｏｓｔｅｌｌａｔａｉｎｔｉｓｓｕｅｃｕｌｔｕｒｅ［Ｊ］．Ｇｕｉｈａｉａ，２０１７，３７（９）：１０８８－１０９５．ＤＯＩ：１０．１１９３１／ｇｕｉｈａｉａ．ｇｘｚｗ２０１６１００１５．［１９］李合生．植物生理生化实验原理和技术［Ｍ］．北京：高等教育出版社，２０００．ＬＩＨＳ．Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓａｎｄｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓｏｆｐｌａｎｔｐｈｙｓｉｏ⁃ｌｏｇｉｃａｌｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔ［Ｍ］．Ｂｅｉｊｉｎｇ：ＨｉｇｈｅｒＥｄｕｃａｔｉｏｎＰｒｅｓｓ，２０００．［２０］ＷＡＮＧＪＢ，ＬＩＵＢＨ，ＸＩＡＯＱ，ｅｔａｌ．Ｃｌｏｎｉｎｇａｎｄｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎａｎａｌｙｓｉｓｏｆｌｉｔｃｈｉ（ＬｉｔｃｈｉｃｈｉｎｅｎｓｉｓＳｏｎｎ．）ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｏｘｉｄａｓｅｇｅｎｅａｎｄｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｗｉｔｈｐｏｓｔｈａｒｖｅｓｔｐｅｒｉｃａｒｐｂｒｏｗｎｉｎｇ［Ｊ］．ＰＬｏＳＯｎｅ，２０１４，９（４）：９３９８２．ＤＯＩ：１０．１３７１／ｊｏｕｒｎａｌ．ｐｏｎｅ．００９３９８２．［２１］ＬＩＵＨ，ＳＯＮＧＬＬ，ＪＩＡＮＧＹＭ，ｅｔａｌ．Ｓｈｏｒｔ⁃ｔｅｒｍａｎｏｘｉａｔｒｅａｔｍｅｎｔｍａｉｎｔａｉｎｓｔｉｓｓｕｅｅｎｅｒｇｙｌｅｖｅｌｓａｎｄｍｅｍｂｒａｎｅｉｎｔｅｇｒｉｔｙａｎｄｉｎｈｉｂｉｔｓｂｒｏｗｎｉｎｇｏｆｈａｒｖｅｓｔｅｄｌｉｔｃｈｉｆｒｕｉｔ［Ｊ］．ＪＳｃｉＦｏｏｄＡｇｒｉｃ，２００７，８７（９）：１７６７－１７７１．ＤＯＩ：１０．１００２／ｊｓｆａ．２９２０．［２２］ＱＩＮＪ，ＹＵＥＸＬ，ＬＩＮＧＹ，ｅｔａｌ．ＮｉｔｒｏｇｅｎｆｏｒｍａｎｄｒａｔｉｏｉｍｐａｃｔｐｈｅｎｏｌｉｃａｃｃｕｍｕｌａｔｉｏｎａｎｄｒｅｌａｔｉｖｅｇｅｎｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎＣｙｃｌｏｃａｒｙａｐａｌｉｕｒｕｓ［Ｊ］．Ｔｒｅｅｓ，２０２１，３５（２）：６８５－６９６．ＤＯＩ：１０．１００７／ｓ００４６８－０２０－０２０６８－６．［２３］肖小君，罗潼，王芳．木本植物组织培养过程中褐变现象及控制措施的研究进展［Ｊ］．江苏农业科学，２０１７，４５（１６）：２０－２４．ＸＩＡＯＸＪ，ＬＵＯＴ，ＷＡＮＧＦ．Ｒｅｓｅａｒｃｈｐｒｏｇｒｅｓｓｏｎｂｒｏｗｎｉｎｇｐｈｅ⁃ｎｏｍｅｎｏｎａｎｄｃｏｎｔｒｏｌｍｅａｓｕｒｅｓｉｎｗｏｏｄｙｐｌａｎｔｔｉｓｓｕｅｃｕｌｔｕｒｅ［Ｊ］．ＪｉａｎｇｓｕＡｇｒｉｃＳｃｉ，２０１７，４５（１６）：２０－２４．ＤＯＩ：１０．１５８８９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２－１３０２．２０１７．１６．００４．［２４］岑忠用，苏江，邓晰朝，等．总酚含量及多酚氧化酶活性与岩黄连愈伤组织褐化的相关性研究［Ｊ］．作物杂志，２０１６（１）：１４９－１５３．ＣＥＮＺＹ，ＳＵＪ，ＤＥＮＧＸＣ，ｅｔａｌ．ＳｔｕｄｙｏｎｔｏｔａｌｐｈｅｎｏｌｉｃｃｏｎｔｅｎｔａｎｄｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｂｅｔｗｅｅｎＰＰＯａｃｔｉｖｉｔｙａｎｄｂｒｏｗｎｉｎｇｏｆＣｏ⁃ｒｙｄａｌｉｓｓａｘｉｃｏｌａｂｕｎｔｉｎｇｃａｌｌｕｓ［Ｊ］．Ｃｒｏｐｓ，２０１６（１）：１４９－１５３．ＤＯＩ：１０．１６０３５／ｊ．ｉｓｓｎ．１００１－７２８３．２０１６．０１．０２８．［２５］张健，李敏，李玉娟，等．不同抗氧化剂对耐盐柳树愈伤组织褐化抑制研究［Ｊ］．扬州大学学报（农业与生命科学版），２０１５，３６（３）：９５－９９．ＺＨＡＮＧＪ，ＬＩＭ，ＬＩＹＪ，ｅｔａｌ．Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆｉｎｈｉ⁃ｂｉｔｉｏｎｅｆｆｅｃｔｓａｍｏｎｇｔｈｒｅｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｓｏｎｃａｌｌｕｓｂｒｏｗｎｉｎｇｏｆｓａｌｔｔｏｌｅｒａｎｔＳａｌｉｘ［Ｊ］．ＪＹａｎｇｚｈｏｕＵｎｉｖ（ＡｇｒｉｃＬｉｆｅＳｃｉＥｄ），２０１５，３６（３）：９５－９９．ＤＯＩ：１０．１６８７２／ｊ．ｃｎｋｉ．１６７１－３７１南京林业大学学报（自然科学版）第４７卷４６５２．２０１５．０３．０１９．［２６］陈雪梅，杨龙勇，陈张婷，等．三峡库区消落带落羽杉茎段外植体扩繁的不定芽褐化抑制机理［Ｊ］．重庆师范大学学报（自然科学版），２０２１，３８（４）：４８－５６．ＣＨＥＮＸＭ，ＹＡＮＧＬＹ，ＣＨＥＮＺＴ，ｅｔａｌ．ＩｎｈｉｂｉｔｉｏｎｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆａｄｖｅｎｔｉｔｉｏｕｓｂｕｄｂｒｏｗｎｉｎｇｉｎｓｔｅｍｅｘｐｌａｎｔｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎｏｆＴａｘｏｄｉｕｍｄｉｓｔｉｃｈｕｍｉｎｗａｔｅｒｌｅｖｅｌｆｌｕｃｔｕａｔｉｎｇｚｏｎｅｏｆＴｈｒｅｅＧｏｒｇｅｓＲｅｓｅｒｖｏｉｒａｒｅａ［Ｊ］．ＪＣｈｏｎｇｑｉｎｇＮｏｒｍＵｎｉｖ（ＮａｔＳｃｉ），２０２１，３８（４）：４８－５６．［２７］高红兵，杜凤国，王欢．抗褐化剂对天女木兰芽外植体褐化与酚酸氧化的影响［Ｊ］．林业科学研究，２０１７，３０（３）：５２５－５３２．ＧＡＯＨＢ，ＤＵＦＧ，ＷＡＮＧＨ．ＥｆｆｅｃｔｓｏｆｂｒｏｗｎｉｎｇｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓｏｎｂｕｄｅｘｐｌａｎｔｓｂｒｏｗｎｉｎｇａｎｄｐｈｅｎｏｌｉｃａｃｉｄｓｏｘｉｄａｔｉｏｎｏｆＭａｇｎｏｌｉａｓｉｅｂｏｌｄｉｉＫ．Ｋｏｃｈ［Ｊ］．ＦｏｒＲｅｓ，２０１７，３０（３）：５２５－５３２．ＤＯＩ：１０．１３２７５／ｊ．ｃｎｋｉ．ｌｙｋｘｙｊ．２０１７．０３．０２３．［２８］王若馨，王华芳．褐化抑制对 凤丹 试管苗扩繁培养中酚类物质含量及相关酶活性的影响［Ｊ］．西北农业学报，２０２１，３０（１）：１５２－１５９．ＷＡＮＧＲＸ，ＷＡＮＧＨＦ．Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｂｒｏｗｎｉｎｇｉｎｈｉ⁃ｂｉｔｉｏｎｏｎｐｈｅｎｏｌｉｃｓｕｂｓｔａｎｃｅｃｏｎｔｅｎｔａｎｄｒｅｌａｔｅｄｅｎｚｙｍｅａｃｔｉｖｉｔｙｆｏｒｉｎｖｉｔｒｏｐｒｏｐａｇａｔｉｏｎｏｆＰａｅｏｎｉａｏｓｔｉｉｖａｒ．ｌｉｓｈｉｚｈｅｎｉｉ［Ｊ］．ＡｃｔａＡｇｒｉｃＢｏｒｅａｌｉＯｃｃｉｄｅｎｔａｌｉｓＳｉｎ，２０２１，３０（１）：１５２－１５９．ＤＯＩ：１０．７６０６／ｊ．ｉｓｓｎ．１００４－１３８９．２０２１．０１．０１８．［２９］冯代弟．宝莲灯组培褐化作用机制的初步研究［Ｄ］．合肥：安徽农业大学，２０１５．ＦＥＮＧＤＤ．ＰｒｅｌｉｍｉｎａｒｙｓｔｕｄｙｏｎｔｈｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆｂｒｏｗｎｉｎｇｉｎｔｉｓｓｕｅｃｕｌｔｕｒｅｏｆＭｅｄｉｎｉｌｌａｍａｇｎｉｆｉｃａ［Ｄ］．Ｈｅｆｅｉ：ＡｎｈｕｉＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，２０１５．［３０］夏亚男，蒋建雄，易自力，等．三种抗褐化剂对南荻外植体褐变及愈伤诱导率的影响［Ｊ］．北方园艺，２０１４（１７）：９３－９６．ＸＩＡＹＮ，ＪＩＡＮＧＪＸ，ＹＩＺＬ，ｅｔａｌ．ＥｆｆｅｃｔｏｆｔｈｒｅｅａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｓｏｎｂｒｏｗｎｉｎｇｏｆｅｘｐｌａｎｔａｎｄｃａｌｌｕｓｉｎｄｕｃｔｉｏｎｒａｔｅｏｆＭｉｓｃａｎｔｈｕｓｌｕｔａｒｉ⁃ｏｒｉｐａｒｉｕｓ［Ｊ］．ＮｏｒｔｈＨｏｒｔｉｃ，２０１４（１７）：９３－９６．［３１］叶睿华，吕享，李小兰，等．五种抗褐化剂对杜鹃兰原球茎增殖培养的作用效果［Ｊ］．植物生理学报，２０１８，５４（６）：１１０３－１１１０．ＹＥＲＨ，ＬÜＸ，ＬＩＸＬ，ｅｔａｌ．ＥｆｆｅｃｔｓｏｆｆｉｖｅｂｒｏｗｎｉｎｇｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓｏｎｐｒｏｔｏｃｏｒｍｓｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｃｕｌｔｕｒｅｏｆＣｒｅｍａｓｔｒａａｐｐｅｎｄｉｃｕｌａｔａ［Ｊ］．ＰｌａｎｔＰｈｙｓｉｏｌＪ，２０１８，５４（６）：１１０３－１１１０．ＤＯＩ：１０．１３５９２／ｊ．ｃｎｋｉ．ｐｐｊ．２０１７．０５４４．［３２］周永妍，李亚，余爱农．抗坏血酸／谷氨酸Ｍａｉｌｌａｒｄ反应体系中间产物和褐变程度的研究［Ｊ］．湖北民族学院学报（自然科学版），２０１５，３３（１）：８０－８４．ＺＨＯＵＹＹ，ＬＩＹ，ＹＵＡＮ．Ｓｔｕｄｙｏｎｔｈｅｉｎｔｅｒｍｅｄｉａｔｅｐｒｏｄｕｃｔａｎｄｂｒｏｗｎｉｎｇｉｎｔｅｎｓｉｔｙｆｒｏｍａｓｃｏｒｂｉｃａｃｉｄ／ｇｌｕｔａｍｉｃｍｏｄｅｌｓｙｓｔｅｍ［Ｊ］．ＪＨｕｂｅｉＵｎｉｖＮａｔｌ（ＮａｔＳｃｉＥｄ），２０１５，３３（１）：８０－８４．ＤＯＩ：１０．１３５０１／ｊ．ｃｎｋｉ．４２－１５６９／ｎ．２０１５．０３．０２１．（责任编辑㊀吴祝华）４７１。
生长素(IAA)的生理作用
在某些植物或特定条件下，生长素还 可以通过非色氨酸途径合成，如吲哚 乙醛肟途径、色胺途径等。
代谢过程及产物
氧化代谢
生长素(IAA)在植物体内可被氧化为吲哚乙酸氧化物，进而分解为二氧化碳和水。
结合代谢
生长素可与氨基酸、糖等结合形成结合态生长素，如吲哚乙酰胺、吲哚乙酰葡萄糖等，这些结合态生长素在植物 体内具有一定的生理活性。
调节逆境信号传导
生长素(IAA)作为信号分子，可以参与逆境信号的传导过程，与其他激素和信号分子相互作用， 共同调节植物的逆境响应。
促进逆境适应性生长
生长素(IAA)能够调节植物的生长发育过程，使植物在逆境条件下进行适应性生长，如增加叶面 积、改变叶片角度等，以最大限度地利用有限资源。
与其他激素的互作关系
与赤霉素(GA)的互作
生长素(IAA)与赤霉素(GA)在植物生 长发育过程中具有协同作用。赤霉素 可以促进植物生长，而生长素则可以 调节植物的生长方向。两者共同作用 ，使植物在逆境条件下能够保持正常 的生长发育。
与脱落酸(ABA)的互 作
脱落酸(ABA)是一种与植物抗逆性密 切相关的激素。生长素(IAA)与脱落 酸在逆境条件下具有拮抗作用。生长 素可以促进植物生长，而脱落酸则抑 制植物生长，使植物进入休眠状态以 应对逆境。两者之间的平衡关系对于 植物的抗逆性具有重要意义。
与乙烯(ET)的互作
乙烯(ET)是一种与植物生长和发育密 切相关的激素。生长素(IAA)与乙烯 在逆境条件下具有协同作用。乙烯可 以促进植物细胞的伸长和分裂，而生 长素则可以调节植物的生长方向。两 者共同作用，使植物在逆境条件下能 够保持正常的生长发育并适应环境变 化。
PART 05
生长素(IAA)在农业生产 中的应用
3组织培养参考试题2、5
植物组织培养试题（三）一、名词解释（每题3分，共15分）1. 花药培养2.继代培养3. 体细胞杂交4. 液体浅置培养5. 再分化二、填空题（每空1分，共20分）1、进行热处理植物脱毒的温度在__________左右。
2、配制螯合态铁盐需要的成分是_________和__________。
3、培养基中有机态N素营养主要是___________和___________。
4、目前认为植物组培诱导分化成苗的方式有4种__________、__________、__________和___________。
5、常用生长素类中作用再强的是__________，细胞分裂素中作用再强的是_______。
6、杀菌剂中的次氯酸钠是靠_________杀菌的，而酒精是靠_________杀菌的，升汞是靠_________杀菌的。
7、植物病毒检测方法有____________、___________、____________、等几种。
8、减少组培苗变异的主要措施有__________________、__________________、____________________。
三、单或多项选择题（每题3分，共15分）1. 下列不属于生长素类的植物激素是_________。
A BA；B NAA；C ZT；D 2.4－D2. 植物组织培养可用于：_____________。
A 快速繁殖；B 脱除病毒；C 提高品质；D 育种；E 减少品种变异3、诱导试管苗分化丛芽，培养基的调整应_____________。
A加大生长素的浓度B加大分裂素的浓度C加活性炭 D 降低盐的浓度。
4. 下列不属于MS中微量元素的盐是_________。
A NH4NO3；B KNO3；C ZnSO4.7H2O； D MgSO4.7H2O5. 对生根培养不起作用的激素是：___________。
A GA；B IAA；C NAA；D IBA四．计算题(每题5分，共10分)1、培养基的配方是MS＋BA2.0＋IBA0.2＋3%糖，要配制5000ml，MS母液的浓度分别是：大量元素20倍，微量元素100倍，铁盐20倍，有机物50倍，BA1 mg/ml ，NAA0.1mg/ml。
植物生长调节剂对植物生长的影响
植物生理学综合实验报告植物生长调节剂对植物生长的影响（多效唑PP333对小麦幼苗生长发育的影响）摘要：本实验采用0、50、100、200mg/LPP333浸种，以水培幼苗观察其对观察其对种子成苗的影响。
分别测定小麦的生理指标（发芽小麦根系活力测定、叶绿素含量的测定、丙二醛含量）以及形态指标（苗高，根长，发根数，根冠比）。
实验表明，施用多效唑PP333后，对小麦幼苗呼吸强度的增加，小麦幼苗根系生长受到抑制，随着施用的浓度增加，根系的平均长度增加。
但随着PP333的浓度增加，小麦幼苗的呼吸强度出现先增加后降低，根冠比增加，且低浓度增加更明显。
关键词：多效唑（PP333）植物生长延缓剂叶绿素含量根系活力丙二醛谷氨酸含量前言：多效唑是80年代研制成功的三唑类植物生长调节剂，是内源赤霉素合成的抑制剂。
也可提高水稻吲哚乙酸氧化酶的活性，降低稻苗内源IAA的水平。
明显减弱稻苗顶端生长优势，促进侧芽(分蘖)滋生。
秧苗外观表现矮壮多蘖，叶色浓绿。
根系发达。
解剖学研究表明，多效唑可使稻苗根、叶鞘、叶的细胞变小，各器官的细胞层数增加。
示踪分析表明，水稻种子、叶、根部都能吸收多效唑。
叶片吸收的多效唑大部分滞留在吸收部分，很少向外运输。
多效唑低浓度增进稻苗叶片的光合效率；高浓度抑制光合效率。
提高根系呼吸强度；降低地上部分呼吸强度，提高叶片气孔抗阻，降低叶面蒸腾作用。
多效唑的农业应用价值在于它对作物生长的控制效应。
具有延缓植物生长，抑制茎杆伸长，缩短节间、促进植物分蘖、促进花芽分化，增加植物抗逆性能[4]，提高产量等效果。
本品适用于水稻、麦类、花生、果树、烟草、油菜、大豆、花卉、草坪等作（植）物，使用效果显著。
材料与方法1.1材料：小麦品种川育21 15%多效唑 0.1%HgCl21.2方法1.2.1种子的前处理1.2.2种植消毒：精选饱满的充实，胚完整的小麦种子若干，用0.1%的HgCl2消毒10min用自来水和蒸馏水冲洗3次并用滤纸吸干种子的水分1.2.3催芽与浸种：用200mg/L的PP333母液配置成50、100、200三种浓度的PP333的溶液，并用蒸馏水无PP333浓度做对照，将已消毒的种子分别用四种溶液浸种24h后，将种子摆放在培养皿中，置于28C的恒温箱中催芽48h。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
中 图 分 类 号 ：Ｑ８ ３ １；￥ ２ ． ７ １． ７２３
木本植 物 离体快 繁 技术 虽 有很 大 的发展 ，但 生 根 难 仍 是 其 主要 的 限制 因子 ．近 年来 ，对 根 分 化 、发育 的研究 日益 受到 重视 ．过氧 化 物酶 （ ＯＤ） Ｐ 是普 遍 存在 高 等植 物体 内的 一类 含 铁 卟 啉辅 基 的酶 ， 是 木质 素 亦
组 培苗 生根 间 的 内在 关 系 ，为 红叶石 楠 的生 产 实践 及进 一 步 的研究 开 发提 供科 学 的理 论依 据 ．
１ 材 料 与 方 法
１ １ 材 料 ．
取 生长健 壮 的红 叶石 楠幼 嫩 枝条 进行 组 织 离体 培 养 ，经 过 ２ ３代 增殖 培养 后 获 得 丛 生 芽．以丛 生 芽 ～ 作 为本次 实 验 的材料 ．
维普资讯
３ ４
１ ２ ２ ＰＯＤ 活 性 测 定 ．．
西 南师 范大 学 学报 （ 自然科 学版）
第 ３ ２卷
Ｐ Ｄ 活 性测 定 ， 照 孙文 全 的方法 ， Ｏ 参 并作 适 当修 改 ．操 作步 骤 如下 ： 称取 材 料 １ｇ 加入 ２ ， ０ｍｍｏ／ ｌＬ
维普资讯
第３ ２卷 第 ４期
Ｖｏ１ ２ ．３
Ｎ Ｏ． ４
西 南 师 范 大 学 学报 （ 自然科 学版 ）
Ｊ ｕ ｎ ｌ ｆＳ ｕｈ ｓ ｈｎ ｒ ｌＵｎｖ ｒｉ （ ｔｒｌＳ ｉｎ ｅ ｏ ｒ ａ ｏ ｏ ｔｗｅｔＣ ｉａＮｏｍａ ｉｅｓｔ Ｎａｕ ａ ｃ ｃ） ｙ ｅ
１ ２ 方 法 ．
１ ２１ Ｉ ． ． ＢＡ 及 ＮＡＡ 对 生 根 的 影 响
选取 长 势一致 的丛生 芽分 成 单株 ，转至 培 养基 上诱 导 生 根．试 验 分 成处 理组 和 对 照 组 ．处理 组 培 养 基 分 别为 ：（ ） ／ ＭＳ ＋ Ｉ Ａ ０ ５ｍｇ Ｌ 蔗 糖 ２／， ２ １ ２ １１ ２ Ｂ ． ／ ＋ ５ （ ） ／ ＭＳ＋ ＮＡＡ ０ ５ｍｇ Ｌ＋ 蔗 糖 ２ ；对照组 培 养 ９ ． ／
ＫＨ Ｐ 液 ５ｍＬ，于研钵 中研磨 成浆 ， ０ ／ ｎ下 离 心 １ ｎ Ｏ 溶 ４０ ０ ｒｍｉ ５ｍｉ．取 上清 液 定 容 到 ２ ５ｍＬ作 为 酶液 ，
于 ４℃ 下保存 备用 ． 测 定 时 ， ２只 １ｃ 的 比色杯 ， １只 中加 入 已混 匀 的反应 混合 液 ［ ０ 取 ｍ 于 － ０ｍｍｏ／ １ ｌＬ磷酸 缓 冲液 （ Ｈ６ ０ ｐ ．） ５ ０ｍＬ，加入 愈创 木 酚 ２ ８ｍＬ，于磁力 搅拌 器上 加 热搅 拌 ，愈 创 木 酚溶 解 后 ，冷 却 ，加 入 ３ 过 氧化 氢 １ ０ ９ ｍＬ，混匀 ３ ３ｍＬ， １ｍＬ失活 的酶 液作 为参 比液 ； 另 １只 中加入 反 应混合 液 ３ｍＬ，酶液 １ｍＬ， 即计 加 而 立 时并 置 于紫外 分光 光度 计 中 ， 波 长 ４ ０ｎ 下测 定 Ｏ 在 ７ ｍ Ｄ值 ， １ｍｉ 每 ｎ读数 １次 ， 连续 测 ３ ｎ ０ｍｉ．重 复 ３次 ．
活 性 又 开 始 下 降 ；多 酚氧 化 酶 活 性 在 ０ １ ｈ ５ｄ内逐 步 上 升 ，在 根 开 始 伸 长 时 ，活 性 也 开 始 下 降． 而 在 不 使 用 任 何
生 长 调 节 剂 的情 况 下 则 不 生 根 ，过 氧 化 物 酶 活性 在 ０ １ ｈ ５ｄ内 逐 步 上 升 ， １ ５ｄ后 开 始 下 降 ；多 酚 氧 化 酶 活 性 在 整
个 根 诱 导 过 程 中 都 维 持 在 较 低 水 平 ． 同 时 还 发 现 ，在 生 根 过 程 中 ，处 理 与 对 照 相 比 ，各 酶 的 活 性 差 异 达 极 显 著 水
平 ，表 明 红 叶 石 楠 组 培 苗 的不 定 根 发 生 和 发 育 与 过 氧 化 物 酶 、多 酚氧 化 酶 的 活 性 密 切 相 关 ． 关 键 词 ：红 叶 石 楠 ；过 氧 化 物 酶 ；多 酚 氧 化 酶 ；根 分 化
合 成 的主 导酶 ， 根 的起 源 和生 长过 程 中主要 通过 氧化 Ｉ 在 ＡＡ 而起 作 用．多酚 氧化 酶 （ Ｐ 是 一种含 铜 的能 Ｐ Ｏ）
催 化各 种酚 类 氧化 的酶 ， 能催 化 酚类 物 质与 Ｉ 缩 合 而形成 一 种“ＡＡ一酚酸 复合 物” 它 ＡＡ Ｉ ，这种 复合 物是 一
浙 江 万 里 学 院 ，宁 波 ３ ５ ０ １ １０
摘 要 ：试 验 对 红 叶石 楠 组 培 苗 根 诱 导 分 化 过 程 中 过 氧 化 物 酶 （ ＯＤ 、 多 酚 氧 化 酶 （ Ｐ 活 性 的变 化 进 行 了 研 究 ． Ｐ ） Ｐ Ｏ） 结 果 表 明 ，在 使 用 Ｉ Ａ 和 ＮＡＡ 后 ，过 氧 化 物 酶 活 性 在 ０ １ Ｂ ～ ５ｄ先 迅 速 下 降 ，然 后 急 剧 上 升 ， 在 根 开 始 伸 长 时 ，
２０ ０ ７年 ８月
Ａ ｕｇ ． ２ ０ ０７
文 章 编 号 ：１ ０ ０ ０—５ ７ （ ０ ７ ０ ４ １ ２ ０ ） ４—０ ３ ０ ３—０ ４
生 长 素 对 红 叶石 楠 组 培 苗 过 氧 化 物 酶 和 多 酚 氧 化 酶 活 性 的 影 响
刘秀莲 ， 吴月燕 ， 汪财 生
基 为 ： ３ １２ （ ） ／ ＭＳ＋ 蔗 糖 ２ ．分别 取诱 导 ０ ３ ，９ ２ ５ ８ｄ的 根培 养材 料 ， 于 酶活性 测 定． ， ，６ ，１ ，１ ，１ 用
收稿 日期 ：２ ０ ０ —２ ０ ７— １ ２
基 金 项 目 ：浙 江 万 里 学 院 重 点 项 目．
作 者 简介 ：刘 秀 莲 （ ９ ４一 ， 女 ，浙 江 嵊 州 人 ，浙 江 万 里 学 院实 验 师 ， 主 要从 事 生 物 技 术 研 究 １６ ）
种 生根 辅助 因子 ，可促 进不 定 根 的形成 ， 桉树 插 条在 生根 过 程 中 Ｐ Ｏ活性 提 高 ．而有关 Ｐ ］ 如 Ｐ Ｊ ＯＤ， Ｐ Ｐ Ｏ 活性 变化 与红 叶石 楠 不 定 根 发 生 之 间 的关 系 在 国 内 外 尚未 见 报 道 ．为 此 ，本 试 验 以红 叶 石 楠 （ ｈ ｔ ｉ Ｐ ｏｉ ａ ｎ ｛ａｅｙ 组培 苗为 料 ，探讨 生根 过 程 中 Ｐ Ｄ 和 Ｐ Ｏ 活 性 的变 化 ，以揭 示 Ｐ Ｄ 和 Ｐ Ｏ 活性 与 红 叶石 楠 ｒｓｒ ） Ｏ Ｐ Ｏ Ｐ