葡萄糖氧化酶法
葡萄糖(Glu)测定氧化酶法标准操作程序SOP文件
生成的醌亚胺的颜色深浅与样品中葡萄糖浓度成正比。
3 标本
血清及肝素/EDTA抗凝血浆，处理方法见标本准备。
稳定性：15－25℃8小时
2-8℃72小时
收集后的标本应该尽快检测，或者与细胞进行分离。
4 试剂
4.1ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ剂
来源：ROCHE配套试剂（详见试剂说明书）。
血糖降低：生理性血糖过低见于妊娠期、哺乳期、饥饿及长期剧烈体力劳动后。病理性血糖过低常见于过量的胰岛素治疗，胰岛细胞增生或瘤，严重肝病及对抗胰岛素的激素分泌不足。
12 危急值
成人女性和婴儿：<2.2或>22.2mmol/L
成人男性：>22.2或<2.7 mmol/L
新生儿：<1.6或>16.6 mmol/L
血糖增高:生理状态下，饱食后或运动后有一过性的血糖增高，注射葡萄糖、肾上腺素及精神紧张可使血糖升高。病理性升高多见于糖尿病。其它内分沁系统
ABCD医院
生化实验室
文件编号：
ABCD-SOP-04-23
葡萄糖（Glu）测定氧化酶法
版序：ABCD
页码：第3页，共3页
的疾病，如甲状腺机能亢进、垂体前叶嗜酸性细胞腺瘤、肾上腺皮质功能亢进、嗜铬细胞瘤、垂体前叶嗜碱性细胞机能亢进症等。
Measurement POINT(1)[34]
TECHNICAL LIMIT(HIGH) [ 25.2 ]
POINT(2)[ 0]
CALIBRATION METHOD [ LINEAR ]
POINT(3)[ 0 ]
CALIBRATION POINT [ 2 ]
实验 血糖测定(葡萄糖氧化酶法)
实验血糖测定（葡萄糖氧化酶法）【目的】体外测定血清或血浆中葡萄糖含量。
【临床意义】葡萄糖的准确测定对于诊断高血糖症是十分重要的。
通常在查找这些病症的起因时，还将各种耐量试验和抑制试验与葡萄糖测定一同进行。
葡萄糖含量增高见于：糖尿病、葡萄糖摄入过量、柯兴氏综合症、脑血管意外。
葡萄糖含量减少见于：胰岛瘤、胰岛素过量、先天性碳水化合物代谢障碍。
【原理】样本中的葡萄糖经葡萄糖氧化酶作用生成葡萄糖酸和过氧化氢，后者在过氧化物酶的作用下，将还原性4-氨基安替比林与酚偶联缩合成可被分光光度计测定的醌类化合物。
【器材】紫外分光光度计，恒温水浴箱，移液器（枪），枪头，试管【药品】葡萄糖测定试剂盒，试剂盒主要成分与浓度：【样本】新鲜无溶血血清。
【步骤】将10ml R1与90ml R2混合均匀，即为工作液。
空白管校准管样品管工作液 1.50 ml 1.50 ml 1.50 ml蒸馏水0.01 ml ————校准液——0.01 ml ——样品————0.01 ml分别混合均匀，37℃水浴10～15分钟（避免太阳光直射），用波长505nm、比色杯光径1.0cm，用空白管调“零”点测定各管的吸光度（A）值。
【计算】【参考值】血清/血浆：3.89—6.11 mmol/L (70—110 mg/dl)。
此范围仅供参考，各实验室须建立本室的参考值范围。
【参考文献】1．全国临床检验操作规程（第二版），主编：叶应妩，王敏三，1997，P616.2．Trinder P. Ann Clin Biochem，1969，6: 24-27.血糖测定实验所需器材：1.紫外分光光度计（比色杯光径1.0cm），2.恒温水浴箱（能调温度的，37℃），3.移液器（枪）（规格1.0ml 6个，20µl 6个），枪头各100个4.试管50支，6个试管架5.烧杯100ml一个，50ml（或25ml）6个6.记号笔6支7.蒸馏水1瓶。
葡萄糖测定方法操作规程
葡萄糖（GLu）测定方法操作规程【产品名称】通用名称：葡萄糖（GLu）测定试剂盒（葡萄糖氧化酶法）使用说明书【摘要】糖是人体的主要供能物质，也是组织细胞的主要成分。
血糖浓度受神经系统和激素的调节而保持相对稳定，当这些调节失去原有的相对平衡时，则出现高血糖或低血糖症状。
1.病理性高血糖：（1）原发性糖尿病（2）内分泌疾病：嗜铬细胞瘤、甲状腺毒瘤、肢端肥大症、巨人症、Cushing综合征、高血糖素细胞瘤；（3）胰腺疾病：急性或慢性胰腺炎、流行性腮腺炎引起的胰腺炎、胰腺囊性纤维化、血色病（血红蛋白沉着症）等；（4）抗胰岛素受体抗体与有关疾病：棘皮症、Wernicke’s脑病。
2.病理性低血糖：（1）胰岛细胞瘤、高血糖素缺乏；（2）对抗胰岛素的激素分泌不足，如垂体前叶功能减退、肾上腺皮质功能减退和甲状腺功能减退而使生长激素、肾上腺皮质激素和甲状腺素分泌减少；（3）严重肝病患者，肝细胞糖原储存不足及糖原异生功能低下，肝脏不能有效地调节血糖。
【预期用途】该试剂盒采用葡萄糖氧化酶法，用于体外定量测定人血清或血浆中葡糖糖的含量。
【检验原理】葡糖糖被葡萄糖氧化酶氧化后生成过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶的作用下，与4-氨基安替比林和对羟基苯甲酸钠缩合，生成醌系色素，通过测定此反应的吸光度可求得葡糖糖的含量。
D-2葡萄糖氧化酶D-葡萄糖醛酮+H2O22 H2O2 + 4-APP ++ H3O+POD醌系色素+ 5H2O【主要组成成份】试剂1（R1）：磷酸盐缓冲液100 mmol/L抗环血酸氧化酶4700 U/L葡糖糖氧化酶4000 U/L试剂2（R2）：磷酸盐缓冲液100 mmol/L过氧化物酶6700U/L4-氨基安替比林0.7 mmol/L对羟基苯甲酸钠 1.3 mmol/L校准品：葡萄糖溶液。
*不同批号试剂盒各组分请勿混用。
【试剂准备】R1：即用液体试剂R2：即用液体试剂【储存条件与有效期】未开启的试剂盒避光保存于无腐蚀性气味和通风良好的室内，在2℃~8℃有效期为一年。
血糖脱氢酶法和氧化酶法
血糖脱氢酶法和氧化酶法
血糖脱氢酶法和氧化酶法是两种常用的测定血糖的方法。
血糖脱氢酶法是利用葡萄糖脱氢酶将葡萄糖氧化为葡萄糖醛酸，再通过比色法或荧光法测定其浓度，从而确定血糖浓度。
这种方法的优点是灵敏度高、结果准确，但需要使用昂贵的试剂和设备。
氧化酶法则是利用葡萄糖氧化酶将葡萄糖氧化为葡萄糖醛酸，再通过电化学法或光学法测定生成的氧化还原电位或反应光强度，从而确定血糖浓度。
这种方法的优点是操作简单、试剂成本低，但灵敏度略低。
无论使用哪种方法，都需要注意影响测定结果的因素，如血红蛋白变异、胆固醇、药物等。
- 1 -。
葡萄糖氧化酶法须知
• 葡萄糖氧化酶法 • 因氧化酶方法的反应过程需要械咨询）行。 • 葡萄糖脱氢酶法 • 葡萄糖脱氢酶法一般有三种方法:NAD-GDH、FAD-GDH、PQQ-GDH。 因为葡萄糖脱氢酶方法反应过程不需要氧气参与，因此海拔高度 试验 无需进行，但该方法的特异性较差。如NAD-GDH、FAD-GDH 方法 在测量过程中会与木糖、PQQ-GDH方法会与麦芽糖、木糖及半乳糖 等非葡萄糖发生交叉反应，可能会使测定的血糖浓度过高导致患者注 射胰岛素过量发生 危险。因此凡是采用此种方法设计的血糖监测系统， 必须在说明书中明确注明“该方法在何种情况下可能导致血糖检测值 过高，有可能因胰岛素注射过量发生危险”。 • 其它工具酶或检测方法应关注的可能干扰因素。
葡萄糖氧化酶法测量血糖浓度的详细介绍
葡萄糖氧化酶法测量血糖浓度的详细介绍?葡萄糖氧化酶法测定血清（浆）葡萄糖【原理】葡萄糖氧化酶(glucose oxidase，GOD)利用氧和水将葡萄糖氧化为葡萄糖酸，并释放过氧化氢。
过氧化物酶(peroxidase，POD)在色原性氧受体存在时将过氧化氢分解为水和氧，并使色原性氧受体4-氨基安替比林和酚去氢缩合为红色醌类化合物，即Trinder反应。
红色醌类化合物的生成量与葡萄糖含量成正比。
【试剂】1．0.1mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.0)称取无水磷酸氢二钠8.67g及无水磷酸二氢钾5.3g溶于蒸馏水800ml中，用1mol/L氢氧化钠(或1mol/L 盐酸)调pH至7.0，用蒸馏水定容至1L。
2．酶试剂称取过氧化物酶1200U，葡萄糖氧化酶1200U，4-氨基安替比林10mg，叠氮钠100mg，溶于磷酸盐缓冲液80ml中，用1mol/L NaOH调pH至7.0，用磷酸盐缓冲液定容至100ml，置4℃保存，可稳定3个月。
3．酚溶液称取重蒸馏酚100mg溶于蒸馏水100ml中，用棕色瓶贮存。
4．酶酚混合试剂酶试剂及酚溶液等量混合，4℃可以存放1个月。
5．12mmol/L苯甲酸溶液溶解苯甲酸1.4g于蒸馏水约800ml中，加温助溶，冷却后加蒸馏水定容至l L。
6．100mmol/L葡萄糖标准贮存液称取已干燥恒重的无水葡萄糖1.802g，溶于12mmol/L苯甲酸溶液约70ml中，以12mmol/L苯甲酸溶液定容至100ml。
2h以后方可使用。
7．5mmol/L葡萄糖标准应用液吸取葡萄糖标准贮存液5.0ml放于100ml容量瓶中，用12mmol/L苯甲酸溶液稀释至刻度，混匀。
【操作步骤】1．自动分析法按仪器说明书的要求进行测定。
2．手工操作法取试管3支，按下表操作。
葡萄糖氧化酶法测血糖操作步骤加入物(ml)空白管标准管测定管血清－－0.02葡萄糖标准应用液－0.02－蒸馏水0.02－－酶酚混合试剂 3.03.03.0混匀，置37℃水浴中，保温15min，在波长505nm处比色，以空白管调零，读取标准管及测定管吸光度。
葡萄糖氧化酶法的实验报告
竭诚为您提供优质文档/双击可除葡萄糖氧化酶法的实验报告篇一：葡萄糖测定-葡萄糖氧化酶法葡萄糖氧化酶法测定血清（浆）葡萄糖【原理】葡萄糖氧化酶(glucoseoxidase，goD)利用氧和水将葡萄糖氧化为葡萄糖酸，并释放过氧化氢。
过氧化物酶(peroxidase，poD)在色原性氧受体存在时将过氧化氢分解为水和氧，并使色原性氧受体4-氨基安替比林和酚去氢缩合为红色醌类化合物，即Trinder反应。
红色醌类化合物的生成量与葡萄糖含量成正比。
【试剂】1．0.1mol/L磷酸盐缓冲液(ph7.0)称取无水磷酸氢二钠8.67g及无水磷酸二氢钾5.3g溶于蒸馏水800ml中，用1mol/L氢氧化钠(或1mol/L盐酸)调ph至7.0，用蒸馏水定容至1L。
2．酶试剂称取过氧化物酶1200u，葡萄糖氧化酶1200u，4-氨基安替比林10mg，叠氮钠100mg，溶于磷酸盐缓冲液80ml 中，用1mol/Lnaoh调ph至7.0，用磷酸盐缓冲液定容至100ml，置4℃保存，可稳定3个月。
3．酚溶液称取重蒸馏酚100mg 溶于蒸馏水100ml中，用棕色瓶贮存。
4．酶酚混合试剂酶试剂及酚溶液等量混合，4℃可以存放1个月。
5．12mmol/L苯甲酸溶液溶解苯甲酸1.4g于蒸馏水约800ml中，加温助溶，冷却后加蒸馏水定容至lL。
6．100mmol/L葡萄糖标准贮存液称取已干燥恒重的无水葡萄糖1.802g，溶于12mmol/L苯甲酸溶液约70ml中，以12mmol/L苯甲酸溶液定容至100ml。
2h以后方可使用。
7．5mmol/L葡萄糖标准应用液吸取葡萄糖标准贮存液5.0ml放于100ml容量瓶中，用12mmol/L苯甲酸溶液稀释至刻度，混匀。
【操作步骤】1．自动分析法按仪器说明书的要求进行测定。
2．手工操作法取试管3支，按下表操作。
读取标准管及测定管吸光度。
【计算】【参考范围】空腹血清葡萄糖为3.89～6.11mmol/L。
氧化酶法测定血糖原理
氧化酶法测定血糖原理
氧化酶法是一种测定血糖的方法，其原理是利用葡萄糖氧化酶将血糖氧化为葡萄糖酸，并同时产生一定量的氧气。
氧气进一步与电极上的还原剂反应产生电流，电流与血糖浓度成正比。
具体操作步骤如下：
取少量血液加入含有葡萄糖氧化酶的缓冲液中，使血糖被氧化为葡萄糖酸。
在反应体系中加入还原剂，如硫代硫酸钠或亚硫酸钠，使产生的氧气与还原剂反应产生电流。
通过电极测定反应产生的电流，从而计算出血糖浓度。
氧化酶法测定血糖具有灵敏度高、精度高、操作简便等优点，广泛应用于临床血糖检测。
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葡萄糖氧化酶法
葡萄糖氧化酶法是指将葡萄糖（Glc）作为底物，由某种特殊酶（G6Pase）催化氧化而产生氢氧化物（H2O2），该反应又称为微量氢
氧化物（MDA）生成反应。
由于葡萄糖氧化酶法具有灵敏度高、反应
时间短、反应简便、检测量程广等特点，近些年来在生物医药领域的研究应用越来越广泛，因此对于葡萄糖氧化酶法的介绍显得尤为重要。
一、葡萄糖氧化酶法的原理
葡萄糖氧化酶法是通过由某种特殊酶（G6Pase）催化葡萄糖氧化而产生氢氧化物（H2O2），再由过氧化氢酶（H2O2ase）催化H2O2反应，最后将H2O2转化为电荷被电极检测，测定其等效电导率，来判
断溶液中glc浓度。
该过程简称为G6Pase-H2O2ase流程。
二、葡萄糖氧化酶法的性能特点
①灵敏度高。
以G6Pase酶为催化剂利用葡萄糖氧化酶法检测浓
度非常低的葡萄糖，其灵敏度可达1μM。
②反应时间短。
由于采用了G6Pase酶催化葡萄糖氧化，所以在
H2O2ase催化下，在室温下其反应时间仅为几分钟。
③反应简便。
葡萄糖氧化酶法的解决方案简单，只需要简单的试剂和仪器，实验过程也很简单，不用配制和稳定各种溶液，只需几步就可完成检测。
④检测量程广。
葡萄糖氧化酶法可从0.5μM到10.0mM范围内检测葡萄糖浓度。
三、葡萄糖氧化酶法的实际应用
葡萄糖氧化酶法广泛应用于药物研发、疾病检测以及抗病毒活性等领域，由于其具有灵敏度高、反应时间短、反应简便以及检测量程广等特点，受到了广大科研人员的关注。
（1）药物研发。
葡萄糖氧化酶法可以方便快捷地检测药物活性，从而为药物研发提供重要依据。
（2）疾病检测。
葡萄糖氧化酶法可用于检测血液中的葡萄糖浓度，可以快速有效地诊断糖尿病。
（3）抗病毒活性的检测。
葡萄糖氧化酶法可用于检测抗病毒药物的活性，以便快速有效地诊断抗病毒药物的抗病毒活性。
综上所述，葡萄糖氧化酶法的发展为广大科研人员提供了一种新的检测技术，在药物研发、疾病检测以及抗病毒活性等领域均有着重要的应用价值。