植物中可溶性糖含量的测定
(整理)可溶性糖测定.
引言可溶性糖包括葡萄糖、果糖、蔗糖等单糖和双糖，是植物品质的重要构成性状之一，尤其是以果实为目的产品的植物，可溶性糖与酸的含量及其配比是影响果实风味品质的重要因素。
对于鲜食品种，一般来讲，高糖中酸，风味浓，品质优；低糖中酸，风味淡，品质差。
因此，可溶性糖的定量研究对植物的品质育种、储藏、加工特性等具有重要意义。
而且可溶性糖广泛存在于植物的根、茎块和种子中，是人体热量的最最主要来源，具有较高的营养价值。
本文重点介绍蒽酮比色法、铜还原碘量法、费林试剂法、原子吸收法、气相色谱法、液相色谱-蒸发光散射法，及连续流动法这几种实验如何定量测定可溶性糖含量。
1 蒽酮比色法1.1 原理糖在硫酸作用下生成糠醛，糠醛再与蒽酮作用形成绿色络合物，颜色的深浅与糖含量有关。
在625 nm波长下的OD值与糖含量成正比。
由于蒽酮试剂与糖反应的呈色强度随时间变化，故必须在反应后立即在同一时间内比色。
1.2 仪器与材料1.2.1实验仪器分光光度计，电炉，铝锅，电子天平，20ml刻度试管，刻度吸管5ml 1支、1ml 2支，漏斗。
1.2.2实验试剂（1）蒽酮乙酸乙酯试剂：取分析纯蒽酮1g，溶于50ml乙酸乙酯中，贮于棕色瓶中，在黑暗中可保存数星期，如有结晶析出，可微热溶解。
（2）浓硫酸（比重1.84）。
1.2.3实验材料植物叶片。
1.3 实验方法1.3.1标准曲线的制作取20ml刻度试管11支，从0～10分别编号，按表24-1加入溶液和水。
然后按顺序向试管内加入1ml 9%苯酚溶液，摇匀，再从管液正面快速加入5ml浓硫酸，摇匀。
比色液总体积为8ml，在恒温下放置30min，显色。
然后以空白为参比，在485nm 波长下比色测定，以糖含量为横坐标，光密为纵坐标，绘制标准曲线，求出标准直线方程。
按表1加入标准的蔗糖溶液，然后按顺序向试管中加入0.5ml蒽酮乙酸乙酯试剂和5ml浓硫酸，充分振荡，立即将试管放入沸水浴中，逐管均准确保温1min，取出后自然冷却至室温，以空白作参比，在630nm波长下测其光密度，以光密度为纵坐标，以糖含量为横坐标，绘制标准曲线，并求出标准线性方程。
苹果、橘子、香蕉中可溶性糖和蛋白质的提取及含量测定
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
．
再 缓慢加入 ５ 浓硫 酸 ， 盖上试 管塞 后 ， 轻轻摇 匀 ， 再置沸 水浴 中Ｉ （ Ｙ Ａ－ ￣（ 比色空 白 用２ 蒸馏 水和０ ． ５ 蒽酮试 剂混 合 ， 并一 同置 于 沸水浴 中保温 ｌ Ｏ Ａ Ｚ － ￣） 。 冷却 至室 温 后， 在６ ２ １ ￣ｒ ｎ 波长下 比色 ， 记 录光 吸收值 。 查 标准 曲线上得 知对应 的葡 萄糖含 量 （ ｇ ） （ ４ ） 、 实 验结 果 多糖 标 准 曲线 的绘制 ： 测得 标 准 曲线 的 方程 为 ： ｙ ＝０ ． ０ ０ １ ２ ｘ ＋ ０ ． ０ ０ ０ ８ 样品糖含量＝ 样品含量（ ｕ ｇ ） ＋ 稀释倍数＊ １ ０ ０ ／｛ 样品重（ ｇ ） ＊ ｝ ｇ ／ｌ Ｏ Ｏ ｇ 鲜重 ２ 、 植 物 组 织 中可 溶性 蛋 白质 含 量 的测 定 （ １ ） 蛋 白质 标准 曲线的 绘制 取６ 支试管 ， 按 下表 加入 试剂 ， 摇匀， 向各 试管 中加人 ５ 考 马斯 亮蓝试 剂 ， 摇
实 验 原理 考 马斯 亮蓝 Ｇ 一 ２ ５ ０ 法 是利 用蛋 白质— 染 料 结合 的原理 ， 定量地 测 定微量 蛋 白质浓 度 的快 速 、 灵敏 的方法 。 考 马斯亮蓝 ＿ ２ ５ 薛在 着两种 不同 的颜 色形 式 ， 红色和 蓝色 。 它和蛋 白质通 过范德瓦尔 键结合 ， 在一 定蛋 白质浓 度范围 内， 蛋 白质 和染料结合符 合 比尔定律 。 此染 料与蛋 白质结合后 颜色 由红 色形式转变成 蓝色形 式， 最大光 吸收 由４ ６ ５ ｍ１ 变 成５ ９ ５ ｎ ｍ， 通 过测 定５ ９ ５ ｒ 】 Ｉ Ｉ １ 处光 吸收的增 加量可 知与其 结合蛋 白质 的量 。 蛋白质和染料结合是一个很快的过程， 约２ ｍｉ ｎ ￣ １ ］ 可反应完全， 呈现最大光 吸收 ， 并可 稳 定 ｌ ｈ， 之后， 蛋 白羼 染料 复合 物发 生聚 合并沉 淀 出来 。 此法 灵敏 度高 ， 易 于操 作 ， 干扰 物质 少 ， 是一 种 比较好 的定 量法 其 缺点 是在 蛋 白质 含 量 很高时线性偏低 ， 且不同来源蛋白质与色素结合状况有一定差异 。 糠 醛或羟 甲基糠醛 进一 步与蒽 酮试剂 缩合产 生蓝绿 色物质 ， 其在可 见光 区 ６ ２ ０ ｎ ｍ波长处有 最大 吸收 ， 且 其光 吸收值在 一定范 围 内与 糖的含量 成正 比关系 。 此法 可用 于 单糖 、 二糖 和 多糖 的含量 测定 ， 并具有 灵敏度 高 ， 简便 快 捷 ， 适 用于微 量 样 品的 测定 等优 点 。 二． 实 验 材料 ． 试 剂 与器 材
鲜玉米中可溶性糖含量的测定
1.3.1 色谱条件 色谱柱：Agilent Zorbax carbohydrate 柱(4.6mm ×
250mm，5μm)，流动相为乙腈 - 水(75:25，V/V)；柱温： 25℃；检测池温度：35℃；流速 1mL/min，进样量 20μL。
收稿日期：2010-09-11 基金项目：国家“8 6 3 ”计划项目( 2 0 0 8 A A 1 0 0 8 0 2 ) 作者简介：修琳(1979 —)，女，博士研究生，研究方向为食品资源深加工与综合利用。E-mail：jluxiulin1979@ * 通信作者：刘景圣(1964 —)，男，教授，博士，研究方向为乳品科学与功能性食品开发。E-mail：liujs1007@
本实验利用超声波以及高速离心的方法对鲜玉米进 行处理，采用高效液相色谱法检测鲜玉米中可溶性糖的 组成及含量，为检测鲜玉米中可溶性糖组成及含量提供 快速、准确而简便的方法。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂 垦糯 1 号玉米 天景公司。
蔗糖、葡萄糖和果糖标准品 美国 Sigma 公司； 乙腈(色谱纯) 国药集团化学试剂有限公司。 1.2 仪器与设备
实验证明随乙腈体积分数的增加，鲜玉米样品中糖的分 离程度提高，流动相中乙腈和水的比例为 85:15 时分离 效果最佳，但分离时间较长。当流动相中乙腈和水的 比例为 75:25 时分离度较好，分离度 R ＞ 2，且分离时 间短，14m in 就可以分析一个样品，综合考虑各个因 素，本实验采用流动相为乙腈和水的比例为 75:25，标 准品色谱图见图 1 ，样品色谱图见图 2 。
成分100g样品含量mg添加量mg100200300检测量mg2回收平均回收率10208100451005313率453554520255172551236537365092453125521665258果糖3508110102125250375623136225674653748848722587254624847471387403985698879937葡萄糖500319893153045690185139856695284269789688583919896925197289604蔗糖55259528表3方法的加标回收率实验n3table3resultsofspikerecoveryexperimentsn33结论本研究建立高效液相色谱法检测鲜玉米中可溶性糖含量的方法结果表明该方法样品前处理简单操作简便结果准确可靠可以快速准确的对鲜玉米中可溶性糖含量进行定性定量分析
蒽酮法测定苹果中可溶性糖含量论文
蒽酮法测定苹果中可溶性糖含量班级：08生物科学2班学号：282010211 姓名：杨亮亮摘要：采用蒽酮比色法测定苹果中的可溶性总糖含量果实中可溶性糖的含量( 干样品中百分比)分别为31.％实验表明:苹果中可溶性糖的含量比较丰富有很大的利用价值。
关键词：苹果；总糖；含量苹果作为营养物质主要是可溶性糖和淀粉它们的作用主要有：有机物如核苷酸、核酸等；分解产物是其他许多有机物合成的原料，如糖在呼吸过程中形成的有机酸，可作为 NH 3 的受体而转化为氨基酸；糖类作为呼吸基质，为作物的各种合成过程和各种生命活动提供了所需的能量。
由于碳水化合物具有这些重要的作用，所以是营养中最基本的物质，也是需要量最多的一类。
一、试剂与仪器设备葡萄糖标准溶液（ 100 μg/mL 蒽酮试剂、分光光度计，分析天平，恒温水浴，试管，三角瓶，移液管,剪刀，玻棒水浴锅，漏斗，滤纸。
二、实验材料成熟的苹果去除果皮，称取剪碎混匀的新鲜样品 0.5 ～ 1.0 g备用。
三、实验方法1. 样品中可溶性糖的提取称取剪碎混匀的新鲜样品 0.5 ～ 1.0 g （或干样粉末 5 ～ 100 mg ），放入大试管中，加入 15 mL 蒸馏水，在沸水浴中煮沸 20 min ，取出冷却，过滤入 100 mL 容量瓶中，用蒸馏水冲洗残渣数次，定容至刻度。
2. 标准曲线制作取 6 支大试管，从 0 ～ 5 分别编号，按表 24-1 加入各试剂。
表 24-1 蒽酮法测可溶性糖制作标准曲线的试剂量长下，用空白调零测定光密度，以光密度为纵坐标，含葡萄糖量（μg ）为横坐标绘制标准曲线。
3 ．样品测定取待测样品提取液 1.0 mL 加蒽酮试剂 5 mL ，同以上操作显色测定光密度。
重复 3 次。
四、结果计算溶性糖含量（％）＝从标准曲线查得糖的量（μg）×提取液体积（ml）×稀释倍数/[测定用样品液的体积(ml)×样品重量(g)×106]×100式中： C ——从标准曲线查得葡萄糖量，μg 。
可溶性糖测定.
引言可溶性糖包括葡萄糖、果糖、蔗糖等单糖和双糖，是植物品质的重要构成性状之一，尤其是以果实为目的产品的植物，可溶性糖与酸的含量及其配比是影响果实风味品质的重要因素。
对于鲜食品种，一般来讲，高糖中酸，风味浓，品质优；低糖中酸，风味淡，品质差。
因此，可溶性糖的定量研究对植物的品质育种、储藏、加工特性等具有重要意义。
而且可溶性糖广泛存在于植物的根、茎块和种子中，是人体热量的最最主要来源，具有较高的营养价值。
本文重点介绍蒽酮比色法、铜还原碘量法、费林试剂法、原子吸收法、气相色谱法、液相色谱-蒸发光散射法，及连续流动法这几种实验如何定量测定可溶性糖含量。
1 蒽酮比色法1.1 原理糖在硫酸作用下生成糠醛，糠醛再与蒽酮作用形成绿色络合物，颜色的深浅与糖含量有关。
在625 nm波长下的OD值与糖含量成正比。
由于蒽酮试剂与糖反应的呈色强度随时间变化，故必须在反应后立即在同一时间内比色。
1.2 仪器与材料1.2.1实验仪器分光光度计，电炉，铝锅，电子天平，20ml刻度试管，刻度吸管5ml 1支、1ml 2支，漏斗。
1.2.2实验试剂（1）蒽酮乙酸乙酯试剂：取分析纯蒽酮1g，溶于50ml乙酸乙酯中，贮于棕色瓶中，在黑暗中可保存数星期，如有结晶析出，可微热溶解。
（2）浓硫酸（比重1.84）。
1.2.3实验材料植物叶片。
1.3 实验方法1.3.1标准曲线的制作取20ml刻度试管11支，从0～10分别编号，按表24-1加入溶液和水。
表1 各试管加溶液和水的量管号 0 1、2 3、4 5、6 7、8 9、10 100μg/ml蔗糖液0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0(ml)水(ml) 2.0 1.8 1.6 1.4 1.2 1.0蔗糖量(μg) 0 20 40 60 80 100然后按顺序向试管内加入1ml 9%苯酚溶液，摇匀，再从管液正面快速加入5ml浓硫酸，摇匀。
比色液总体积为8ml，在恒温下放置30min，显色。
植物生理指标测定方法
植物生理指标测定方法本文介绍了植物生理指标的测定方法，包括叶片持水率、植物暂时萎蔫率、叶片相对含水量、相对电导率和可溶性糖的测定。
首先介绍叶片持水率的测定方法。
选择植株上部枝条健康完整的定型叶，摘取后混均匀分成三份即时称量鲜重，然后置入40℃恒温烘箱中烘40 min，取出称重，再置入85℃烘箱中恒温烘至恒重。
失水率的大小可以反映叶片持水能力的高低，计算公式为失水率=[（鲜重－40℃烘40 min重）÷（鲜重－85℃烘至恒重）]×100%。
其次介绍植物暂时萎蔫率的测定方法。
观察植株叶片萎蔫下垂、翌日晨不能恢复正常者，即取盆中土壤测定。
将植株连土团倒出，用小刮铲从根的周围取土，剔除杂物后称重，带回室内置于105℃烘箱内烘至恒重。
每种植物每次测试一盆，按公式计算暂时萎蔫率：暂时萎蔫率=[（土壤湿重－土壤干重）÷土壤干重]×100%。
接下来介绍叶片相对含水量的测定方法。
取各植株相同部位叶片，测定叶片的鲜重M1，然后将叶片浸入蒸馏水中使其吸水达到饱和状态，再取出擦干叶片至表面无水分残留，称重得到叶片的饱和鲜重M2，最后将叶片放进烘箱，105℃杀青半小时，再于85℃环境下烘至恒重，得到叶片干重M3.按公式计算叶片相对含水量。
然后介绍相对电导率的测定方法。
取各植株相同部位叶片，用蒸馏水拭净叶片表面和背面，去除叶片中脉，剩下部分剪成大小为5mm×5mm的叶片。
取0.20g各3份放入锥形瓶中并加入30ml蒸馏水，放于真空干燥器中，用真空泵抽气10min，以抽出细胞间隙空气。
缓慢放入空气，水即渗入细胞间隙，叶片变成透明状，细胞内溶质易于渗出。
取出锥形瓶，在室温下保持30min后用电导仪测定电导率L1，然后将加塞锥形瓶转入沸水中，水浴20 mins，取出冷却至室温后测定电导率L2.按公式计算细胞膜相对透性（相对电导率）。
最后介绍可溶性糖的测定方法。
取各植株相同部位叶片，用90%乙醇浸泡2h，过滤后将滤液置于水浴中加热至乙醇挥发完毕，再用蒸馏水补足至定容，最后用显色剂显色后测定吸光度，按公式计算可溶性糖的含量。
蒽酮比色法测定可溶性糖
实验三蒽酮比色法测定可溶性糖
一、原理：糖在浓硫酸作用下可经脱水反应生成糖醛，并能进一步与蒽酮反应生成蓝绿色的糖醛衍生物，在一定浓度范围内，其颜色深浅与浓度大小成正比。
二、材料与仪器
植物叶片、分光光度计、水浴锅、漏斗、容量瓶、烧杯
三、步骤
1、取植物叶片0.15g，放入刻度试管中，加蒸馏水10ml。
2、将试管置于沸水中加热提取30min。
3、将提取液过滤，定容于25ml容量瓶。
4、取0.5ml提取液，依次加入1.5ml蒸馏水、0.5ml蒽酮乙酸乙酯溶液和5ml硫酸。
5、沸水浴保温1min。
6、630nm波长下，测定溶液吸光度值。
四、结果计算
可溶性糖含量（mg/g）=217.37X−3.0742∗25
w∗1000∗0.5。
硫酸苯酚法测定糖
硫酸苯酚法测定糖
原理：
植物体内的可溶性糖主要是指能溶于水及乙醇的单糖和寡聚糖。
苯酚法测定可溶性糖的原理是：糖在浓硫酸作用下，脱水生成的糠醛或羟甲基糠醛能与苯酚缩合成一种橙红色化合物，在10－100mg范围内其颜色深浅与糖的含量成正比，且在490nm波长下有最大吸收峰，故可用比色法在此波长下测定。
苯酚法可用于甲基化的糖、戊糖和多聚糖的测定，方法简单，灵敏度高，实验时基本不受蛋白质存在的影响，并且产生的颜色稳定160min以上。
试剂：
1、80%苯酚储备液：称取80g苯酚（AR），加蒸馏水20mL溶解，在室温下可保存数月；
2、8%苯酚溶液，
每次测定前取适量80%苯酚溶液稀释至8%浓度；
3、浓硫酸；
4、葡萄糖标准液：用电子天平称取约1g葡萄糖，准确记录重量，定容至1L。
步骤：
1、标准曲线制作：取50ml比色管6只，从0-5编号，0号管作为空白，
在1-5号管中分别加入1、2、3、4、5ml葡萄糖标准液。
定容至50ml
刻度，则1-5号管中溶液浓度依次为20,40,60,80,100mg/L。
2、测定：将样品稀释至浓度在0-100mg/L，然后取2ml稀释液，1ml8%
苯酚溶液，5ml浓硫酸至10ml的Hach管中，将葡萄糖溶液进行同
样操作，拧上盖子待温度降至室温后用分光光度计在490nm处波长
测定其吸光度。
3、按照葡糖糖溶液的吸光度做出标准曲线，然后由样品的吸光度求得
其浓度，再乘以稀释倍数得到最终浓度，检验样品重复性，三次平
行样相对误差应小于5%，若超过需要重新测定。
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植物组织中可溶性糖含量的测定
在作物的碳素营养中，作为营养物质主要是指可溶性糖和淀粉。
它们在营养中的作用主要有：合成纤维素组成细胞壁；转化并组成其他有机物如核苷酸、核酸等；分解产物是其他许多有
机物合成的原料，如糖在呼吸过程中形成的有机酸，可作为 NH 3 的受体而转化为氨基酸；
糖类作为呼吸基质，为作物的各种合成过程和各种生命活动提供了所需的能量。
由于碳水化
合物具有这些重要的作用，所以是营养中最基本的物质，也是需要量最多的一类。
Ⅰ蒽酮法测定可溶性糖
一、原理
糖在浓硫酸作用下，可经脱水反应生成糠醛或羟甲基糠醛，生成的糠醛或羟甲基糠醛可与蒽
酮反应生成蓝绿色糠醛衍生物，在一定范围内，颜色的深浅与糖的含量成正比，故可用于糖
的定量测定。
该法的特点是几乎可以测定所有的碳水化合物，不但可以测定戊糖与己糖含量，而且可以测
所有寡糖类和多糖类，其中包括淀粉、纤维素等（因为反应液中的浓硫酸可以把多糖水解成
单糖而发生反应），所以用蒽酮法测出的碳水化合物含量，实际上是溶液中全部可溶性碳水
化合物总量。
在没有必要细致划分各种碳水化合物的情况下，用蒽酮法可以一次测出总量，
省去许多麻烦，因此，有特殊的应用价值。
但在测定水溶性碳水化合物时，则应注意切勿将
样品的未溶解残渣加入反应液中，不然会因为细胞壁中的纤维素、半纤维素等与蒽酮试剂发
生反应而增加了测定误差。
此外，不同的糖类与蒽酮试剂的显色深度不同，果糖显色最深，
葡萄糖次之，半乳糖、甘露糖较浅，五碳糖显色更浅，故测定糖的混合物时，常因不同糖类
的比例不同造成误差，但测定单一糖类时，则可避免此种误差。
糖类与蒽酮反应生成的有色物质在可见光区的吸收峰为 620 nm ，故在此波长下进行比色。
二、实验材料、试剂与仪器设备
（一）实验材料
任何植物鲜样或干样。
（二）试剂
1. 80 ％乙醇。
2. 葡萄糖标准溶液（100 μg/mL ）：准确称取 100 mg 分析纯无水葡萄糖，溶于蒸馏水并定容至 100 mL ，使用时再稀释 10 倍（100 μg/mL ）。
3 ．蒽酮试剂：称取 g 蒽酮，溶于 80% 浓硫酸（将 98% 浓硫酸稀释，把浓硫酸缓缓加入到
蒸馏水中） 1000 mL 中，冷却至室温，贮于具塞棕色瓶内，冰箱保存，可使用 2 ～ 3 周。
（三）仪器设备
分光光度计，分析天平，离心管，离心机，恒温水浴，试管，三角瓶，移液管（ 5 、 1 、
mL ），剪刀，瓷盘，玻棒，水浴锅，电炉，漏斗，滤纸。
三、实验步骤
1. 样品中可溶性糖的提取称取剪碎混匀的新鲜样品～ g （或干样粉末 5 ～ 100 mg ），放
入大试管中，加入 15 mL 蒸馏水，在沸水浴中煮沸 20 min ，取出冷却，过滤入 100 mL 容量
瓶中，用蒸馏水冲洗残渣数次，定容至刻度。
2. 标准曲线制作取 6 支大试管，从 0 ～ 5 分别编号，按表 24-1 加入各试剂。
表 24-1 蒽酮法测可溶性糖制作标准曲线的试剂量
测定光密度，以光密度为纵坐标，含葡萄糖量（μg ）为横坐标绘制标准曲线。
3 ．样品测定取待测样品提取液 mL 加蒽酮试剂 5 mL ，同以上操作显色测定光密度。
重复
3 次。
四、结果计算
溶性糖含量（％）＝从标准曲线查得糖的量（μg）×提取液体积（ml）×稀释倍数/[测定用样品液的体积(ml)×样品重量(g)×106]×100
式中： C ——从标准曲线查得葡萄糖量，μg 。
V T ——样品提取液总体积 , mL 。
V 1 ——显色时取样品液量， mL 。
W ——样品重（ g ）。
Ⅱ苯酚法测定可溶性糖
一、原理
植物体内的可溶性糖主要是指能溶于水及乙醇的单糖和寡聚糖。
苯酚法测定可溶性糖的原理是：糖在浓硫酸作用下，脱水生成的糠醛或羟甲基糠醛能与苯酚缩合成一种橙红色化合物，在 10 ～ 100mg 范围内其颜色深浅与糖的含量成正比，且在 485 nm 波长下有最大吸收峰，故可用比色法在此波长下测定。
苯酚法可用于甲基化的糖、戊糖和多聚糖的测定，方法简单，灵敏度高，实验时基本不受蛋白质存在的影响，并且产生的颜色稳定 160 min 以上。
二、实验材料、试剂与仪器设备
（一）实验材料
新鲜的植物叶片。
（二）试剂
1. 90 ％苯酚溶液：称取 90 g 苯酚（AR），加蒸馏水溶解并定容至 100 mL ，在室温下可保存数月。
2. 9 ％苯酚溶液：取 3 mL 90 ％苯酚溶液，加蒸馏水至 30 mL ，现配现用。
3. 浓硫酸（比重）。
4. 1 ％蔗糖标准液：将分析纯蔗糖在 80 ℃下烘至恒重，精确称取 g ，加少量水溶解，移入100 mL 容量瓶中，加入 mL 浓硫酸，用蒸馏水定容至刻度。
5. 100 μg/L 蔗糖标准液：精确吸取 1 ％蔗糖标准液 l mL 加入100 mL容量瓶中，加蒸馏水定容。
（三）仪器设备
分光光度计，电炉，铝锅， 20 mL 刻度试管，刻度吸管 5 mL 1 支、lmL 2支，记号笔，吸水纸适量。
三、实验步骤
1 ．标准曲线的制作取 20 mL 刻度试管 11 支，从 0 ～ 10 分别编号，按表 24 –
2 加入溶液和水，然后按顺序向试管内加入 1mL 9 ％苯酚溶液，摇匀，再从管液正面以 5 ～ 20 s 时间加入5 mL 浓硫酸，摇匀。
比色液总体积为 8 mL ，在室温下放置 30 min ，显色。
然后以空白为参比，在 485 nm 波长下比色测定，以糖含量为横坐标，光密度为纵坐标，绘制标准曲线，求出标准直线方程。
表 24-2 苯酚法测可溶性糖绘制标准曲线的试剂量
2 ．可溶性糖的提取取新鲜植物叶片，擦净表面污物，剪碎混匀，称取～ g, 共
3 份，分别放入 3 支刻度试管中，加入 5 ～ 10 mL 蒸馏水，塑料薄膜封口，于沸水中提取 30 min （提取
2 次），提取液过滤入 25 mL 容量瓶中，反复冲洗试管及残渣，定容至刻度。
3 ．测定吸取 mL 样品液于试管中（重复 2 次），加蒸馏水 mL ，同制作标准曲线的步骤，按顺序分别加入苯酚、浓硫酸溶液，显色并测定光密度。
由标准线性方程求出糖的量，计算测试样品中糖含量。
四、结果计算
可溶性糖含量（％）＝从标准曲线查得糖的量（μg）×提取液体积（ml）×稀释倍数/[测定用样品液的体积(ml)×样品重量(g)×106]×100
式中： C ——标准方程求得糖量，μg 。
V T ——提取液体积， mL 。
V 1 ——吸取样品液体积， mL 。
W ——组织重量， g 。