微生物标准操作规程三1

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耶尔森菌属检验标准操作规程

1.概述

耶尔森菌属包括鼠疫耶尔森菌、小肠结肠炎耶尔森菌等10个菌种。鼠疫耶尔森菌、小肠结肠炎耶尔森菌、假结核耶尔森菌是人类病原菌,临床上以小肠结肠炎耶尔森菌最为多见。

2.标本类型

粪便、血液等标本。

3.鉴定

3.1 形态与染色革兰阴性球杆菌。

3.2 培养特性血琼脂平板35℃培养18~24小时呈灰白色菌落。在麦康凯琼脂平板上形成无色、半透明的菌落。

3.3 生化反应氧化酶试验阴性,发酵葡萄糖、蔗糖和山梨醇,产酸不产气,不发酵乳糖;H₂S、赖氨酸脱羧酶和精氨酸双水解酶试验为阴性;VP试验25℃时为阳性,35℃时为阴性;25℃时有动力,35℃时无动力。

3.4 鉴别要点

3.4.1 本菌属特征发酵葡萄糖;25℃有动力,35℃无动力;VP试验25℃为阳性,35℃时为阴性;甲基红、大多数鸟氨酸脱羧酶和脲酶试验均为阳性。

3.4.2 耶尔森菌属的种间鉴别见表5—40。

表5—40耶尔森菌属鉴别的关键性试验(阳性%)

菌名吲哚脲酶蔗糖鸟氨酸水杨苷山梨醇鼠李糖小肠结肠炎耶尔森菌50 75 95 95 20 99 1 弗氏耶尔森菌100 70 100 95 92 100 99 中间耶尔森菌100 80 100 100 100 100 100 克氏耶尔森菌30 77 0 92 15 100 0 罗氏耶尔森菌0 62 100 25 0 100 0 鼠疫耶尔森菌0 5 0 0 70 50 1 假结核耶尔森菌0 95 0 0 25 0 70

3.5 操作步骤

3.5.1 氧化酶试验参见《氧化酶试验标准操作规程》。

3.5.2 鉴定从麦康凯琼脂平板上挑取可疑菌落,用微生物鉴定仪或传统生化反应进行细菌鉴定。

4.药敏

参见《药物敏感性试验标准操作规程》及CLSI M100一$20最新版本文件。

5.质量控制

见《质量管理程序》。

6.检验结果解释与分析

本菌能产生β-内酰胺酶,对青霉素、第一代头孢菌素耐药,因而临床多选用喹诺酮类药物(诺氟沙星、环丙沙星、氧氟沙星或左氧氟沙星等)治疗,症状较重者可选用第三代头孢菌素(头孢曲松、头孢他啶等)或氨基糖苷类药物。

7.临床意义

小肠结肠炎耶尔森菌是一种人兽共患病原菌。人类经口感染引起肠道感染性疾病,根据感染后定居部位不同,可分为小肠结肠炎、末端回肠炎,胃肠炎等(以结肠炎为多见),也可引起菌血症。病人可出现发热、黏液便或水样便,腹痛多位于回盲部,需与阑尾炎相鉴别。该菌还可引起结节性红斑及关节炎等。

8.鉴定流程

参考文献:临床微生物检验标准化操作(第二版)。

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