怎样选择色谱柱
色谱柱参数
色谱柱参数
色谱柱的参数主要包括以下几个方面：
1. 尺寸：包括长度、内径和壁厚。
色谱柱的长度一般在10-30厘米之间，内径一般在1-5毫米之间，壁厚一般在0.1-0.5毫米之间。
尺寸的选择取决于分离物的性质和分析要求。
2. 粒径：色谱柱内填充物的粒径。
粒径越小，表面积越大，分离效果越好，但压力也会增大。
常见的填充物粒径有3、5、10和15微米等。
3. 填充物化学性质：填充物可以是无机物如硅胶、氧化铝等，也可以是有机物如聚苯乙烯、聚乙烯醇等。
填充物的选择取决于被分离物的性质。
4. 凝胶类型：色谱柱可以是非凝胶柱，也可以是凝胶柱。
凝胶柱多用于大小分离，凝胶类型一般为聚丙烯酰胺凝胶。
5. 柱包装密度：色谱柱内填充物的包装密度影响着柱内流体的扩散和分离效果。
一般来说，包装密度越大，分离效果越好，但压力和时间也会增加。
6. pH范围：色谱柱的填充物和柱壁材料需要具有一定的化学稳定性，以适应不同pH值的条件。
7. 温度范围：色谱柱的填充物和柱壁材料需要具有一定的热稳定性，以适应不同温度的条件。
以上是常见的色谱柱参数，根据具体的分析要求和分离物的性质，选择合适的色谱柱参数是非常重要的。
气相色谱柱选择的技巧 色谱柱常见问题解决方法
气相色谱柱选择的技巧色谱柱常见问题解决方法气相色谱柱在石油、化工、生物化学、医药卫生、食品工业、环保等方面应用很广。
它除用于定量和定性分析外，还能测定样品在固定相上的调配系数、活度系数、分子量和气相色谱柱在石油、化工、生物化学、医药卫生、食品工业、环保等方面应用很广。
它除用于定量和定性分析外，还能测定样品在固定相上的调配系数、活度系数、分子量和比表面积等物理化学常数。
一种对混合气体中各构成分进行分析检测的仪器。
气相色谱柱选择的技巧：一般，初次使用气相色谱仪的伙伴对色谱柱不知怎样合理配置色谱柱，总希望柱子越多越好，盲目购置很多柱子或固定液、担体等，结果有很多闲置造成挥霍。
现在向大家推举一些值得考虑的阅历。
一般准备几个柱子就基本可以解决各类气相色谱分析工作的要求，可优先选择固定液分别为SE—30（或者OV—101）、OV—17、PEG—20M、DEGS、FFAP，的柱子各一个。
对于填充柱，担体可选白色担体、红色担体（包括未酸洗、酸洗、硅烷化）、GDX系列（或者Porapak系列），三种，基本可以解决工作中绝大部分项目。
对柱子长短的选择：由于辨别率与柱长的平方根成正比。
柱子长，则提高辨别率。
一般来说：15m的短柱用于快速分别较简单的样品，也适于快速成分析；30m的色谱柱是常用的柱长，大多数分析在此长度的柱子上成；50m、60m或更长的色谱柱用于分别比较多而杂的样品。
对于口径的选择：柱径直接影响柱子的效率、保留特性和样品容量。
小口径柱比大口径柱有更高柱效，但柱容量更小。
0.25mm：具有较高的柱效，柱容量较低。
分别多而杂样品较好。
0.32mm：柱效稍低于0.25mm的色谱柱，但柱容量约高60%。
0.53mm：具有仿佛于填充柱的柱容量，可用于分流进样，也可用于不分流进样，当柱容量是紧要考虑因素时（如痕量分析），选择大口径毛细管柱较为合适。
中科国环环境讨论中心专家认为，对于一般用户，可选30米或50米长的毛细管，口径选0.32mm较为便利。
气相色谱操作条件的选择
气相色谱操作条件的选择 胡焰 1145044049 卫生检验 在气相色谱分析中,我们要快速有效的分离一个复杂的样品,除了要选择一根最佳色谱柱以外,要对操作条件进行仔细的选择. 实际工作中,我们主要是要选择载气流速,进样技术,气化室温度,柱温,桥电流等几个方面,来有效的提高柱效率,使得分析出的色谱峰峰形正常,分离度高,从而提高分析结果的准确性. 一、 色谱柱的选择 1、材料的选择 色谱柱是决定色谱分离的核心，如果所选色谱柱对最难分享物质对的相对选择因子R=1，无论如何选择色谱条件，都不能得到分享。影响选择因子的两个因素是固定相和柱温。因此首先要有一根高效的、对被分析对象有效的色谱柱。 一根高效的、质量好的色谱柱应有选择性好、内壁惰性、温度使用范围广，这要取决于色谱柱的内表面和内表面上的固定相层，固定相在柱内壁是否形成均匀薄膜。应根据分析对象，选择合适的柱材料、固定相、去活方法等。 对于永久性气体分析，一般选择填固体吸附剂的气固色谱柱，如分子筛用于永久性气体的分析，Parapak Q用于二氧化碳和不凝气的分析。对于复杂的样品，一般选择毛细气液色谱柱，根据相似相容原理确定所选色谱柱的类型。 2、柱长的选择 色谱柱长选择时，应考虑分离度、分析时间和色谱柱的成本，分离度与柱长的平方根成正比，而分析时间直接与柱长成正比，即如果通过增加色谱柱长，提高分离度，分离度增大1倍，柱长必须增加3倍。一般填充柱的柱长在0.5-5m，对于毛细管色谱柱，一般柱长在10-30m间，可满足大多数分析的需求，对于复杂的混合物可采用50m、60m或100m的色谱柱。 在我们的实际工作，通常用15m的毛细管柱分析快速筛分简单混合物或高分子量的化合物；（发泡剂、6#油、苯），30m是普遍使用的柱长（天然气油），对汽油组分的分析，选用50m的色谱柱。 3、柱径的选择 柱径的选择受多种因素制约人。内径增大，意味着有更多的固定相，即使液膜厚度不增加，也有较大的样品容量，随着内径的减小，单位时间内的柱效率迅速增加，分离度增大，但样品的容量以内径的平方（r2）的关系减小；柱压降以1/ r4关系增加，对仪器的综合性能有较高的要求。 一般毛细柱选用0.2mm、0.25mm、.032mm内径的色谱柱；填充柱选择3-4mm。对于毛细柱：当样品容量是主要的考虑因素时，或分析强挥发性样品，采用吹扫捕集或顶空进校时，且分辨率的降低可接受时，可考虑采用0.53mm的大口径色谱柱。如与质谱检测器相联时，需用小口径色谱柱。 4、液膜的选择 液膜厚度既影响色谱柱，又影响分析时间。在一定温度下，分配系数K与柱型有关。由于液膜厚度的改变，会导致色谱柱的相比改变。膜厚为0.25-0.5µm薄液膜色谱柱，相比变大，分配比k变小，洗脱给分快，有利于实现组分的快速分离，适于高沸点化合物、组分密集化合物的分析；同时液相传质阻力下降，柱效变大，柱柱容量减小。采用1-8µm的厚液膜柱，柱容量大，可以不经分流直接进1µL的汽油而不引起超载，有利于痕量组分的分析；对于流出温度在100-200℃之间的组分，用1-1.5µm的膜效果较好。 在实际工作中，液膜厚度的选择，应与柱内径相联系，柱内径与液膜联系，柱内径与液膜厚度的比值在4000-1000之间，如柱直径为0.32mm的毛细管柱，以0.08-0.25µm的液膜厚度为宜。但是对不同柱材和柱内壁的不同惰性化程度，所需液膜厚度也不相同，不锈钢柱在一般应比同内径的石英柱的液膜大一倍左右。
气相色谱柱类型
气相色谱柱类型
气相色谱柱是气相色谱仪的关键部件，它的类型和选择对气相色谱分析的准确性和效率有很大的影响。
以下是常见的气相色谱柱类型：
1. 常规柱：常规柱是最常用的气相色谱柱类型，它具有较高的分离效率和较宽的分离范围。
2. 高分辨率柱：高分辨率柱具有更高的分离效率和更窄的分离范围，适用于对样品进行高分辨率分析。
3. 毛细管柱：毛细管柱具有更高的分离效率和更窄的分离范围，适用于对样品进行高灵敏度分析。
4. 固定相柱：固定相柱具有更高的分离效率和更窄的分离范围，适用于对样品进行特定组分的分析。
5. 反向柱：反向柱具有更高的分离效率和更窄的分离范围，适用于对样品进行反向分析。
6. 多柱串联柱：多柱串联柱可以实现多级分离，适用于对样品进行复杂组分的分析。
选择气相色谱柱类型时，应考虑样品的特性、分离要求和分析目的，以选择最合适的柱类型。
安捷伦气相色谱柱选择
安捷伦气相色谱柱选择
安捷伦是一家著名的分析仪器制造商，提供多种类型的气相色谱柱，选择适合的气相色谱柱需要考虑以下几个因素：
1. 分离目标：确定需要分离的化合物或混合物，以及它们的化学性质和极性。
2. 柱子类型：安捷伦提供多种柱子类型，如毛细管柱、填充柱等。
填充柱通常用于简单的分离，而毛细管柱则适用于高分辨率的分析。
3. 固定相：选择合适的固定相是关键，它决定了柱子的分离能力。
安捷伦提供多种固定相，如聚硅氧烷、聚乙二醇、氧化铝等。
4. 柱子长度和内径：柱子长度和内径会影响分离效果和分析时间。
通常，长柱子提供更好的分离效果，但分析时间会延长。
5. 柱子温度范围：根据分析需要选择柱子的温度范围，确保柱子能够承受所需的温度条件。
6. 应用领域：根据具体的应用领域选择合适的柱子，如食品分析、环境监测、药物分析等。
agilent色谱柱的分类与选择
agilent色谱柱的分类与选择
Agilent的色谱柱可以根据其功能和分离机制进行分类。
常见的Agilent色谱柱分类及选择如下：
1. 相对极性柱：这类柱适用于非极性物质或具有较低极性的化合物的分离，如挥发性有机化合物。
常见的相对极性柱包括HP-5，HP-1和HP-35等。
2. 极性柱：这类柱适用于极性化合物的分离，如酸、碱、酮和醇等。
常见的极性柱包括DB-5MS，DB-Wax和DB-17等。
3. 离子交换柱：这类柱通常用于离子分析或离子交换色谱，用于分离离子化合物。
常见的离子交换柱包括IonPac和BioIon等。
4. 手性柱：这类柱用于手性化合物的分离，如药物中的非对映体。
常见的手性柱包括Chiralcel等。
5. 多种机制柱：这类柱结合了多种分离机制，适用于复杂样品的分析。
常见的多种机制柱包括HP-INNOWax和HP-88等。
对于选择Agilent色谱柱，一般需要考虑样品性质，分离需求，分析目标等因素。
同时，还需考虑色谱柱尺寸、填充物类型和分离机制等参数。
在选择时可以咨询
Agilent或其他专业人士，以获得更准确的建议。
气相色谱法色谱条件的选择
气相色谱法色谱条件的选择
气相色谱法（Gas Chromatography, GC）是常用的一种分离和
定性分析方法，其色谱条件的选择对于分析结果的准确性和稳定性至关重要。
以下是一些建议的气相色谱法色谱条件的选择：
1. 色谱柱选择：根据分析物的性质选择合适的色谱柱，如非极性柱、极性柱、离子柱等。
需要注意柱长、内径和填充物粒径的选择，这些参数可以根据分离目标和分析物的性质进行优化。
2. 载气选择：常用的载气包括氮气、氢气和乙烷等。
选择载气时要考虑分析物的挥发性、稳定性以及色谱柱的耐受性等因素。
此外，压力和流速也是需要考虑的参数，可以根据柱长和类型进行调整。
3. 柱温选择：柱温对于色谱分离的效果和分析时间有很大影响。
一般情况下，柱温可以根据分析物的挥发性和热稳定性进行优化，一般在室温至300℃之间选择。
4. 检测器选择：常用的检测器有火焰离子化检测器（Flame Ionization Detector, FID）、热导率检测器（Thermal Conductivity Detector, TCD）、质谱检测器（Mass Spectrometry, MS）等。
选择检测器时要考虑分析物的性质以
及灵敏度、选择性等因素。
5. 标准品选择：根据分析物的特性和分析要求选择合适的标准品，可以是单一化合物的标准品、混合标准品或是内标法等。
综上所述，选择适合的色谱条件是确保气相色谱法分析准确性和稳定性的重要环节，需要综合考虑分析物特性和要求、色谱柱、载气、柱温、检测器和标准品等各方面因素进行优化。
色谱柱分类与选择-内部培训资料
目 录
• 色谱柱的分类 • 选择色谱柱的考虑因素 • 常见色谱柱品牌与特点 • 色谱柱使用与维护 • 色谱柱的常见问题与解决方案
01 色谱柱的分类
按固定相分类
01
02
03
04
硅胶柱
硅胶是常用的色谱柱固定相， 具有高纯度、高活性和高稳定 性，广泛用于各种分离要求。
氧化铝柱
2. 更换填料
如果色谱柱的填料塌陷或堵塞严重，可能需要更换新的填 料。
3. 减小进样量
减少进样量可以减少强保留物质在色谱柱上的积累。
4. 增加流动相的流速
提高流动相的流速可以减少填料塌陷和颗粒堵塞的可能性 。
分离度下降
总结词
分离度下降通常由色谱柱老化、流动相不匹配 或样品中的干扰物质引起。
01
1. 更换色谱柱
1. 更换填料
如果色谱柱的填料塌陷或堵塞严重，可能需要更换新的填 料。
2. 调整流动相
通过调整流动相的组成或比例，可以提高柱效。
3. 清洁色谱柱
使用适当的溶剂冲洗色谱柱，以清除堵塞的颗粒和杂质。
4. 控制温度
在适当的范围内控制色谱柱温度可以提高柱效。
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2. 调整流动相
通过调整流动相的组成或比例，可以改善峰形。
3. 检查检测器设置
确保检测器设置正确，以获得良好的峰形。
4. 更换色谱柱
如果色谱柱性能不稳定，可能需要更换新的色谱柱。
柱效降低
总结词
柱效降低通常由填料塌陷、颗粒堵塞或流动相不匹配引起 。
详细描述
柱效是色谱柱的重要参数，它反映了目标物在色谱柱上的 保留能力和分离效果。为了解决柱效降低的问题，可以采 取以下措施
液相色谱柱的分类与选择
液相色谱柱的分类与选择液相色谱柱的分类(按色谱固定相基质分)1.硅胶基质：1.1反相色谱柱：反相色谱填料常是以硅胶为基础，表面键合有极性相对较弱的官能团的键合相。
反相色谱所使用的流动相极性较强，通常为水，缓冲液与甲醇，已腈等混合物。
样品流出色谱柱的顺序是极性较强组合先被冲出，而极性弱的组份会在色谱柱上有更强的保留。
常用的反相填料有C18(ODS)、C8(MOS)、C4(B)、C6H5(Phenyl)等。
1.2正相色谱：正相色谱用的固定相通常为硅胶(Silica)，以及其他具有极性官能团，如胺基团(NH2,APS)和氰基团(CN，CPS)的键合相填料。
由于硅胶表面的硅羟基(SiOH)或其他团的极性较强，因此，分离的次序是依据样品中的各组份的极性大小，即极性强弱的组份先被冲洗出色谱柱。
正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低，如：正乙烷(Hexane),,二氯甲烷(Methylene Chloride)等。
1.3离子交换色谱柱：以磺化交联强阴/阳离子键合硅胶色谱柱，常用规格：强阴离子色谱柱(SAX)，强阳离子交换色谱柱(SCX)2.聚合物基质：聚合物调料多为聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙酸酯等，其主要优点是在PH值为1～14均可使用。
相对与硅胶基质的C18填料，这类填料具有更强的疏水性；大孔的聚合物填料对蛋白质等样品的分离非常有效。
现在的聚合物填料的缺点是相对硅胶基质填料，色谱柱柱效较低。
所有聚合物基质在流动相发生变化时都会出现膨胀或收缩。
用于HPLC的高交联度聚合物填料，其膨胀和收缩要有限制。
溶剂或小分子容易渗入聚合物基质中，因为小分子在聚合物基质中的传质比在陶瓷性基质中慢，所以造成小分子在这种基质中柱效低。
对于大分子像蛋白质或合成的高聚物，聚合物基质的效能比得上陶瓷性基质。
因此，聚合物基质广泛用于分离大分子物质。
色谱柱的选择液相色谱仪基质的选择大致遵循以下法则，硅胶基质的填料被用于大部分的HPLC分析，尤其是小分子量的被分析物，聚合物填料用于大分子量的被分析物质，主要用来制成分子排阻和离子交换柱。
安捷伦气相色谱柱选择指南
安捷伦气相色谱柱选择指南安捷伦是一家领先的科学仪器制造商，其生产的气相色谱柱质量优异，被广泛应用于化学、药学、环境科学等领域。
选择合适的气相色谱柱对于确保分析结果的准确性和可靠性至关重要。
本文将从三个方面为您介绍安捷伦气相色谱柱的选择指南。
一、样品特性在选择气相色谱柱之前，首先需要了解待分析样品的特性。
常见的样品特性包括：挥发性、极性、化学稳定性等。
根据样品的挥发性，可以选择非极性柱或极性柱；根据样品的极性，可以选择相应极性柱；根据样品的化学稳定性，可以选择耐化合物腐蚀的柱材。
在目标分析物与其他杂质相对较少的情况下，可以选择通用柱进行分析。
如果样品中存在复杂的混合物，可以考虑选择具有更高分辨率和选择性的专用柱。
二、应用领域不同的应用领域对气相色谱柱的要求有所不同。
安捷伦提供了多个系列的气相色谱柱，包括PDMS、PLOT、DB、HT、HP等系列。
PDMS系列适用于挥发性化合物的分析，如石油化工、环境科学等领域；PLOT系列适用于分析气体或液体样品中的极性和非极性化合物，如食品、饮料、环境空气等领域；DB系列适用于一般样品的分析，具有较好的分辨率和选择性；HT系列适用于高温分析，具有优异的耐温性能；HP系列适用于高压气相色谱，适用于复杂样品的分析。
选择适合应用领域的柱系列可以提高分析效率和准确性。
三、操作条件在选择安捷伦气相色谱柱时，还需要考虑操作条件。
常见的操作条件包括柱温、流速、载气选择等。
柱温对于分离效果和分析时间具有重要影响。
一般情况下，分析温度应保持在柱的适用温度范围内，过高或过低的柱温可能导致柱效变差。
流速在一定范围内可以影响分离效果和分析时间。
在选择载气时，需要考虑其惰性和适用范围。
通常使用的载气有氢气、氦气和氮气，其中氢气具有更高的分离效果，但相对较危险，氮气常用于常规分析。
总结来说，选择适合的气相色谱柱需要根据样品特性、应用领域和操作条件来综合考虑。
安捷伦提供了多个系列的气相色谱柱，以满足不同需求。
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怎样选择色谱柱 现代高效液相色谱中，分离效果好坏很大程度上取决于色谱填料的选择。但 是色谱填料的选择范围很宽，要做合适的选择，必须对此有一定的认识和了解。
1、正相色谱 正相色谱用的固定相通常为硅胶（Silica），以及其他具有极性官能团，如胺基团 (NH2,APS)和氰基团（CN，CPS）的键合相填料。
由于硅胶表面的硅羟基（SiOH）或其他团的极性较强，因此，分离的次序是依据样品 中的各组份的极性大小，即极性强弱的组份最先被冲洗出色谱柱。 正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低，如：正乙烷（Hexane）,氯仿 （Chloroform）,二氯甲烷（Methylene Chloride）等。 2、反相色谱 反相色谱填料常是以硅胶为基础，表面键合有极性相对较弱的官能团的键合相。 反相色谱所使用的流动相极性较强，通常为水，缓冲液与甲醇，已腈等混合物。 样品流出色谱柱的顺序是极性较强组合最先被冲出，而极性弱的组份会在色谱柱上有 更强的保留。 常用的反相填料有C18（ODS）、C8（MOS）、C4（B）、C6H5（Phenyl）等。
二、聚合物填料 聚合物调料多为聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙酸酯等，其主要优点是在PH值为1～ 14均可使用。 相对与硅胶基质的C18填料，这类填料具有更强的疏水性；大孔的聚合物填料对蛋白 质等样品的分离非常有效。 现在的聚合物填料的缺点是相对硅胶基质填料，色谱柱柱效较低。
三、其他无机填料 其它HPLC的无机填料色谱柱也已经商品化。由于其特殊的性质，一般仅限于特殊的 用途。如石墨化碳也用于正逐渐成为反相色谱填料。这种填料的分离不同与硅胶基质烷基 键合相，石墨化碳的表面即是保留的基础，不再需其它的表面改性，该柱填料一般比烷基 键合硅胶或多孔聚合物填料的保留能力更强，石墨化碳可用于分离某些几何导构体，又由 于HPLC流动相中不会被溶解，这类柱可在任何PH与温度下使用。氧化铝也可用于HPLC， 氧化铝微粒刚性强，可制成稳定的色谱柱柱床，其优点是可在PH高达12的流动相中使用。 但由于氧化铝与碱性化合物作用也很强，应用范围受到一定的限制，所以未能广泛应用， 新型氧化锆填料也可用于HPLC，商品化的仅有聚合物涂层的多孔氧化锆微球色谱柱，应 用PH范围1～14，温度可达100℃。由于氧化锆填料几年才开始研究，加之面临的实验难 度，其重要用途与优势尚在进行中。 怎样选择填料粒度 目前，商品化的色谱料粒度从1um到超过30um均有销售，而目前分析分离主要用3um、 5um和10um填料，填料的粒度主要影响填充柱的两个参数，即柱效和背压。粒度越小，填 充柱的柱效越高；小于3um的填料应用，在相同选择性条件下，提高柱效可提高分离度， 但不是唯一的因素。如果固定相选择是正确，但是分离度不够，那么选择更小粒度的填料 是很有用的，3um填料填充柱的柱数比相同条件下的5um填料的柱效提高近30%；然而， 3um的色相谱的背压却是5um的2倍。与此同时，柱效提高意味着在相同条件下可以选择更 短的色谱柱，以缩短分析时间，另外，可以采用低粘度的溶剂做流动相或增加色谱柱的使 用温度，比如用乙腈代替甲醇，以降低色谱柱的压力。
一、如何保证良好的柱性能与柱寿命 ◆ 认证阅读色谱柱使用说明书； ◆ 使用填充良好的色谱柱； ◆ 尽量减少压力波动，避免机械及热冲击； ◆ 使用保护柱及在线过滤器； ◆ 经常以强溶剂冲洗色谱柱； ◆ 充分过滤样品及流动相，尽量避免杂质微粒与强保留成分； ◆ 用稳定的固定相（C18最稳定）； ◆ 在中等PH值操作（6~8），用有机缓冲溶液； ◆ 色谱柱使用温度最好小于40℃； ◆ 硅胶基质的的色谱柱，应保持流动相的PH值范围在3.0~8.0； ◆ 在水流动相与缓冲溶液中加200ppm的叠氮钠； ◆ 流动相中含有缓冲溶液，应注意应95∶5的水及有机溶剂过渡，有机溶剂不能低于5%； ◆ 过夜或贮存时，冲洗掉盐和缓冲液，用纯有机溶剂流动相保存（乙晴最好）。
HPLC固定相及应用范围 名称 别名 功能基团 正相 反相 离子对 应用 Silica -OH √ 非极性和中等极性以及非离子性有机化合物。 SAS C1 -(CH3)3 √ 在所有的烷基键合相中对非极性化合物保留最 弱，典型用于中等极性和多官能团化合物. Butyl C4 -C4H9 √ √ 分离肽和蛋白质，保留时间比C8和C18短。 MOS C8， -C8H17 √ √ 中等极性相中对中等化合物，小肽和蛋白质， Octyl 极性药族化合物和环境样品。 ODS C18 -C18H37 √ √ 烷基键合相中对中等极性化合物保留最强。广 泛用于药物，甾族化合物，脂肪酸和环境样品. CPS CN ,Cyano -(CH2)3CN √ √ 对极性化合物有独特的选择性，适合应用于正相 (propyl 分离，当用于反相系统时，其选择性与 C8和 Nitrile) C18不同，在药学领域和复杂混合物的分离中应 用广泛。 APS NH2 -(CH2)3 NH2 √ √ 反相中分析糖类和其他极性化合物。弱阴离子交 (Amino Propyl) 换 ，阴离子和有机酸则应用缓冲剂和有机改性 剂 做流动相。正相中与硅胶的选择性机改性剂 不同,分析芳香族效果很好。 Phenyl -(CH3)C6H5 √ √ 芳香族化合物 Diol -(CH2)2O √ √ 反相时，分离肽和蛋白质。正相时，与硅选择 CH2(CH2OH)2 性 相似,但极性较弱。 SCX 强阳离子 -(CH2)2C6H4SO3H- √ 有机碱 交换 SAX 强阴离子 -(CH2)3N+(CH3)3 有机酸，核苷和核苷酸 交换
二、如何解决色谱柱使用过程中出现的问题 1.保留值与分离度重现性不好原因分析 问题 原因 表现 不同色谱柱间差异 填料、键合相不同 保留因子（k），分离因子（α） 使用期间柱变化 柱床破坏 柱效（N） 键合相丢失 保留因子（k），分离子（α） 硅胶基质溶解 柱效（N） 强保留分堆积堵塞 保留因子（k），柱效（N） 柱外效应 系统差异，进样量大、 柱效（N） 进样阀与 色谱柱之间、 色谱柱与检测器之间管 路太长、检测器流通池 体积大、接头死体积大 等。 分离效果变差 流动相组分改变 保留因子（k），柱效变化很小 流速改变 保留因子（k），分离因子（α） 温度改变 保留因子（k），柱效变化很小 柱平衡慢 重新平衡时间不够 保留因子（k），柱效变化很小 柱超载 样品量太大 保留因子（k），柱效（N） 2.造成色谱峰（不对称）拖尾的原因
1.色谱柱本身填装问题，筛板堵塞或填料塌陷； 2.柱头有污染； 3样品超载； 4样品溶剂不合适； 5.柱外效应； 6化学或二次保留（硅羟基）效应； 7缓冲容量不足或不合适； 8重金属污染。
3.如何解决峰形拖尾的问题 A．与化学有关的拖尾问题 1．流动相中，加入30mM的三乙胺（用与碱性化合物）或醋酸胺（用与酸性化合物），未 知化合物加醋酸三乙胺； 2．如仍然拖尾，将三乙胺换为二甲基辛胺（或醋酸二甲基辛胺）； 3．降低进样量至<1ug。 B．与色谱柱有关的拖尾问题 1．如柱头处有强保留的样品组分积聚，反相柱可用20倍柱体积的96%的二碌甲烷与4%甲 醇，加1%氢氧化铵混合液冲洗，正向柱可用甲醇冲洗。 2．使用保护柱
C．与HPLC 系统有关的峰拖尾和峰加宽 1．进样体积过大，（通常≤25uL）； 2．进样阀与色谱柱及检测器之间的管路体积过大（最佳连接管应<20cm，内径为0.007″）； 3．检测器流通池的体积过大。
4．如何储存色谱柱 1．防止缓冲溶液和水溶液流动相产生微生物，做到流动相用多少配多少，或在水流动相中加200ppm的叠氮钠以抑制细菌成长（一定当心其毒性和潜在的爆炸性）；或在流动相中加20%的有机改性剂，也可抑制微生物生长，有机改性剂还有助于流动相脱气。 2．尽可能将色谱柱贮存于100%有机溶剂（乙晴最好）中，避免在缓冲溶液中保存。 3．使用缓冲溶液后的色谱柱，应用15～20倍柱体积的不含缓冲剂的同种水—有机溶剂流动相冲洗色谱柱，后换成100%有机溶剂储存。 4．避免用纯净水冲洗键合致密的C18柱。 5．将色谱柱的两端用堵头拧好，以免柱床填料干裂。
如何选择保护柱 怎样选择保护柱，但又不能影响分离分析？这是色谱工作者经常提出的一个问题。通常，在选择保护柱之前首先要考虑的是样品是否清洁。对于大部分分析工作者来说，一只1cm长的保护柱，那么就应选择2cm或3cm长的保护柱。保护柱越长，自然所装填的色谱填料就越多，则其越能避免污染物进入分析色谱柱的机会。当然，随着保护柱的长度加长，样品的保留时间会比使用短保护柱长。一般来说，保护柱的内径与分析色谱柱的内径相同或相当即可。
保护柱的填料装填方式也很重要。目前有薄膜装填法的保护柱，使用过程很简单方便，而且可以在实验室中进行干装。但是，其最大的缺点是不经济，特别是针对中国的具体情况，一次性使用相对费用较高。另外，薄膜装填法的保护柱所装填的色谱填料有限，只能提供有限的保护作用；不过也因为所装填的色谱料较少，保护柱的长度也较短，所以对分析样品的保留时间的影响也很小。
另一种保护柱结构其实质是缩短了的色谱分析拄，设计方式上有直连式、手紧式或整体式。整体式设计是由色谱的生产厂商直接安装在色谱分析柱上的，必须与色谱分析柱一同订货，可以非常方便地使用，但不能够被修改。直连式结构设计可在任何时候有色谱工作者来安装连接，可以与任何品牌的色谱分析柱连接使用，而且还可以根据样品的相关情况选择不同的保护柱长度。手上紧即可。另外从保护柱结构又分为是否可以更换保护柱柱芯。可以降低保护柱的使用成本。
大多数人是根据色谱分析柱的填料选择保护柱的填料，正常情况下可以选择与分析色谱柱一样的色谱填料。但是，根据实际的分析工作，也可不必与分析色谱柱的填料完全相匹配。
对于选择保护柱的原则是：在满足分析分离要求的前提条件下，尽可能的选择较短的保护柱结构，尽可能选择对分离样品小一些保留性的填料。