组织工程支架制备有哪些方法
组织工程中的种子细胞和支架材料
组织工程中的种子细胞和支架材料组织工程是一种利用生物学、生物化学和工程学知识，在体内或体外制造人工组织或器官，以替代或修复受损组织或器官的方法。
在组织工程中，种子细胞和支架材料是两个关键要素。
种子细胞是构成人体组织的基本细胞，而支架材料则是制造人工组织的载体。
种子细胞是组织工程中最关键的要素。
种子细胞的来源非常广泛，既可以从体内获得，也可以从体外培养。
目前常用的种子细胞有间充质干细胞、胚胎干细胞、成体干细胞和多能干细胞等。
其中，间充质干细胞来源广泛，成本低廉，维持稳定性好，是目前组织工程中最为常用的种子细胞之一。
在组织工程中，种子细胞需要基于自己的特性与生存环境建立自然的联系。
此外，对种子细胞的培养、分化、传代以及植入对象等环节也需要特别注意。
在这些环节中，需要严格控制细胞密度、培养基的成分和种子细胞分化等参数，以避免种子细胞的死亡、分化和瘤形成等问题。
支架材料也是组织工程中不可或缺的重要要素。
支架材料的选择非常关键，它需要具备以下特点：生物相容性良好、可降解性、机械强度适中、支持细胞附着和生长等性能。
目前，支架材料主要有天然材料和人工合成材料两种。
天然材料包括胶原蛋白、凝胶素、海藻酸盐、蛋白多肽等，而人工合成材料包括聚乳酸、聚己内酯、聚乙烯醇等。
除种子细胞和支架材料外，组织工程中还需要考虑多种其他要素。
首先是环境因素，如细胞培养和生长培养基的成分、营养水平、氧气含量等因素都会对种子细胞的生长和分化产生影响。
其次是植入物的体内环境，植入前需要进行充分的生物学和生物工程评估，以为后续治疗提供科学依据。
总之，种子细胞和支架材料是组织工程中最为核心的两个要素。
它们的选择和优化对组织工程的成功与否至关重要。
此外，还需要考虑其他多种因素，将各种要素结合起来，才能够实现组织工程的良好效果，为人类健康事业做出重要贡献。
组织工程支架
实验用组织工程支架-明胶支架支架简介该支架由明胶 (gelatin) 组成。
明胶为胶原裂解后之片段，具有胶原的胺基酸序列，其序列中的RGD 序列，有助于细胞贴附与生长，且由于明胶不具有胶原之免疫端，故其不易造成免疫反应。
明胶具有良好的理化性能、生物兼容性与生物可降解性，是组织工程生物材料支架制备的理想成分。
支架结构支架孔径：范围在100~300 m (此范围较适合细胞生长；大小可依据需求调整)宏观直径：为 10 mm (直径与厚度可依据需求调整)支架形状：可根据需求塑成所需要的形状 (圆盘状、管状；其它不规则立体形状，需洽谈)特性：生物可分解性,细胞可生长,有弹性可搭配生物反应器使用使用：需先以70~75% 酒精浸润消毒，再以培养液或生理食盐水浸润后( 30 分钟以上), 方可使用组织兼容性（以兔膝关节软骨缺损修复为例）以明胶支架为基础构建的软骨修复材料可有效促进兔膝关节关节软骨缺损的修复。
细胞兼容性明胶支架可良好支持膝关节软骨细胞的粘附、三维生长和增殖0 Day 1 Month 3 Months多成分支架明胶是胶原水解后的产物，较胶原免疫原性更温和，且其含有氨基酸序列，可强化细胞粘附。
因此，根据不同组织工程应用需求，可将明胶与其它天然或合成的生物材料混合制作3D支架。
（1）明胶-壳聚糖支架壳聚糖是甲壳素脱乙酰后的产物，不具有免疫原性，具有良好的生物兼容性，抗菌，该材料在植入体内8-10周可完全降解。
N.Kathuria et al. Synthesis and characterization of elastic and macroporous chitosan–gelatin cryogels for tissue engineering. Acta Biomaterialia 2008.（2）明胶-透明质酸支架透明质酸是一种天然多糖，是ECM的主要组分。
由于其高保水性和内在的膨胀特性，可强化细胞粘附、促进细胞迁移到支架内部。
骨组织工程支架材料的机械强度及其制备
・ ５・ ２１
骨 组 织 工程 支 架材 料 的机 械 强 度 及 其 制 备
溶 剂 ， 具有 活性 基 团 （ Ｈ ） 是 Ｎ 的凝 胶 ， 并且 具 有较 好 的机械 强 度 和稳 定 的化 学性 质 。 一种 很 有应 用 前 是 景 的生 物 多 聚物 。但 是 ， 由于 目前 尚未 找 到适 宜 的
撑、 保护 的功能 。胶 原具 有生 物相容 性好 ， 促进 伤 口 愈合 的特性 ， 因其 机械 强度差 ， 但 常需 与其 他材 料复 合 用作 骨 组 织 工 程 支架 材 料 。Ｔｅｎ ｙ等 ｌ 胶 原 ． ｉｒｅ ３ ｌ 对
仅 有 ３ ～ ０ ｋ ａ ， 氏模 量 为 （ ７４ ＋ ．５ ） ａ ０ ６ Ｐ Ｉ 杨 ４ ． ０５ ９ ＭＰ ， ６
胶原 蛋 白是 动物 结缔组 织重要 的蛋 白质 ，因为 其 含量较 高 ，所 以结缔 组织 具有 了一定 的结 构与 机 械 力 学性 质 ， 张 力 强度 、 力 、 如 拉 弹力 等 ， 达 到支 以
ｄ ｉ１． ６ ￣ｉ ｎ１０ —９ ９ ０００ ．１ ｏ ０３ ９ ．ｓ． ５４ ７ ． １．３ ７ ： ９ ｓ ０ ２ ０
Ｐｒ ｐａ ａｔｏ ｎｄ Ｍ ｅ ｈａ ｃ ｌＰｒ ｐｅ ｔｅ ｆ Ｓ ａ ｏ ｄｓ ｆ ｒ Ｂｏ ｅ Ｅｎｇ ｎ ｅ ｉ ｅ ｒ ｉ ｎｓ ａ ｃ ｎｉａ ｏ ｒ ｉｓ ｏ ｃ ｆ ｌ ｏ ｎ ｉ ｅ ｒｎｇ ＬＩ Ｙａ ｇ Ｕ ｎ ，ＹＥ ｏ ｃ ａ ｇ Ｍａ — ｈ ｎ
骨支架多孔建模方法研究
骨支架多孔建模方法研究骨支架多孔建模方法研究摘要：骨支架在组织工程和骨科医学中扮演着重要角色。
但要准确模拟骨支架的特点和性能，需要一个良好的骨支架多孔建模方法。
本文主要研究了目前常用的骨支架多孔建模方法，并对其进行了探讨和分析。
1.引言骨支架是一种用于替代或重建骨骼缺损的人工材料。
它可以提供支撑和稳定，促进骨细胞的生长和骨组织的再生。
骨支架的特性与其多孔结构密切相关，多孔结构可以提供足够的孔隙和表面积，使细胞附着、生长和深入骨内部。
因此，准确地建模骨支架的多孔结构对于设计和制备具有良好生物相容性和力学性能的骨支架具有重要意义。
2.常用的骨支架多孔建模方法目前，常用的骨支架多孔建模方法包括直接造型、计算机辅助设计（CAD）和三维打印。
直接造型法是通过对已有骨支架进行扫描，利用计算机软件对其进行处理和重构，得到三维模型。
然而，直接造型法存在成本高、时间长等缺点。
计算机辅助设计（CAD）是通过使用计算机软件对骨支架进行设计、模拟和重建，可以实现复杂的几何形状和多孔结构的建模。
三维打印技术则是将设计好的骨支架模型直接打印出来，具有快速、精度高、可定制性强等优点。
3.骨支架多孔建模方法的探讨和分析3.1 直接造型法直接造型法是一种简单直接的骨支架多孔建模方法，可以通过对已有的骨支架进行扫描得到准确的骨支架模型。
然而，直接造型法的缺点也比较明显。
首先，它需要专业的扫描设备和软件，成本较高。
其次，直接造型法需要进行复杂的数据处理和重建过程，时间较长，不适用于快速制备。
因此，在实际应用中，直接造型法往往只适用于研究和小批量制备。
3.2 计算机辅助设计（CAD）计算机辅助设计（CAD）是一种常用于骨支架多孔建模的方法。
其通过使用计算机软件对骨支架进行几何建模和仿真分析，可以实现复杂的骨支架结构设计和重建。
CAD方法可以灵活地控制孔隙形状、大小和分布，满足不同应用的需求。
然而，传统的CAD方法仅能提供骨支架的表面形状和外部结构信息，对内部多孔结构的建模较为困难。
羟基磷灰石材料的制备及应用研究
羟基磷灰石材料的制备及应用研究1. 羟基磷灰石的介绍羟基磷灰石是一种常见的生物无机材料，其化学式为Ca10(PO4)6(OH)2，主要存在于牙齿、骨骼、贝壳等生物硬组织中。
其与人体组织的相容性较高，因此具有广泛的医学应用价值。
由于其优良的生物活性和生物可降解性，羟基磷灰石材料可以被用作人工骨、组织工程支架、骨修复材料等医用材料的制备。
2. 羟基磷灰石材料的制备方法2.1 热水法热水法是制备羟基磷灰石的一种简单有效的方法。
首先将氢氧化钙和过量的磷酸一起加入到水中，并在100℃下反应6小时。
所形成的羟基磷灰石可以通过常规的沉淀和离心分离技术得到。
2.2 水热法水热法是利用高温高压条件下的化学反应，制备纳米级羟基磷灰石材料的方法。
其过程简单易行，只需将磷酸和氢氧化钙混合，并加入适量的水，然后在高温高压反应釜中进行反应。
该方法制备的羟基磷灰石颗粒尺寸分布均匀，具有较高的生物可降解性。
2.3 溶胶-凝胶法溶胶-凝胶法是一种有机-无机杂化制备羟基磷灰石的方法。
其过程包括两个步骤：先制备出有机前体，然后通过热处理将其转化为无机材料。
该方法制备的羟基磷灰石材料具有高度的结晶度和生物活性。
3. 羟基磷灰石材料的应用3.1 骨缺损修复羟基磷灰石材料在医学领域中最常见的应用是用于骨缺损修复。
其优良的生物相容性和生物可降解性，使其被广泛地用作人造骨、骨水泥、骨替代物等材料的制备。
研究表明，利用羟基磷灰石材料修复骨缺损可有效促进骨细胞增殖和骨再生，缩短骨愈合时间，使患者更快地恢复正常生活。
3.2 组织工程支架材料随着组织工程技术的发展，羟基磷灰石材料开始被用作组织工程支架材料的制备。
该材料具有延伸性、强度高、生物活性好等优点，可以为修复组织缺损提供支撑和生长环境，促进组织再生。
目前，羟基磷灰石材料被广泛地应用于修复骨、软骨、皮肤和神经等缺损。
3.3 药物缓释材料羟基磷灰石材料的孔隙结构可以用于控制药物的释放速度和量。
因此，该材料也成为了一种常见的药物缓释材料。
生物3D打印的分类有哪些？
生物3D打印的分类有哪些？3D打印渗入了各行各业，并引领创新，引发了全球制造业的变革,生物3D打印是3D打印技术在生物医学领域中的交叉应用，具有重要的研究意义及应用前景。
运用3D打印技术既可以制作标准模型，也可以为病人量身定制结构复杂的手术支架等。
通过计算机断层扫描（CT）或者核磁共振（MRI）等医学成像技术对病人骨缺损部位进行扫描得到所需要的支架模型，随后使用三维打印机进行打印成型。
这是传统的成型技术难以达到的。
近年来，三维打印技术在医用领域内取得了广泛应用，包括颅面移植、冠齿修复、假体器件、医疗设备、外科手术模型、器官打印、药物传输模型、骨组织工程支架方面的应用。
三维打印技术由于其可量身定制性，结构和孔隙可控性以及可复合多种材料等特性受到了研究人员的广泛关注。
这一趋势也为许多具有突破性的治疗方案及设备的发明提供了灵感。
接下来我们会详细介绍骨组织工程领域内目前可用于三维打印的生物材料，包括它们各自的优缺点以及打印标准。
同时由于不同的打印机能够打印的生物材料不尽相同，所以我们也对三维打印机的种类及成型原理进行了简要概述。
我们希望该篇综述能够鼓励更多的科研团队发明新的生物材料，最终使得三维打印技术在骨组织工程领域取得更大发展。
1.3D打印技术分类介绍生物材料能否被打印这与所使用的三维打印机器有很大关系。
不同的打印机对材料的要求不尽相同。
在生物医学领域，主要使用的打印机分为四种类型：光固化立体印刷技术、熔融沉积打印技术、选择性激光烧结技术、直接浆料挤压技术。
熔融沉积以及直接浆料挤压技术，是两种常用的制备骨组织工程支架的办法。
直接打印的浆料有些是与水或者低沸点溶剂（二氯甲烷(DCM)、二甲亚砜（DMSO）混融的聚合物溶液，有些是在挤出后能快速挥发的聚合物溶液，或者一些水凝胶能够在挤出后依然维持原来的结构。
通过三维打印成型的水凝胶在挤出后能够通过触变行为、温度感应或者交联等方式维持形状。
对于熔融沉积和直接打印来说，分辨率可达到在XY 平面喷嘴尺寸25微米，层厚200-500微米。
高分子生物材料的组织工程支架成形方法
ｂ ｃ ｍ ｅ ｃ ｍｐ ｅ ｌ ｅ ｍｅ ｈ ｄ ｏ ｈ ｉ ａ ｉ ｔ ｏ ｆ ｒ ｃ ｍ ｐ ｉａ ｅ ｈ ｐ ｓａ ｄ ｃ ｎ ｅ ｔ ｇ ｐ ｒ ｕ ｅ ｏ ｏ ｌ ｔｙ ｎ ｗ ｔ ｏ ｓ ｆ ｒ ｔ ｅ ｒ ｂ ｌ ｙ ｔ ｏ ｍ ｏ ｉ ｌ ｔｄ ｓ ａ ｅ ｎ ｏ ｎ ｃｉ ｏ ｏ ｓ ｃ ｎ
关键 词 ： 织工 程 ； 组 多孔 支 架 ； 生物材 料 中图分类 号 ： ３ ８ 文献 标识 码 ： Ｒ ｌ Ａ 文章 编号 ：６ ２ ４ Ｘ（ ０ ８ ０ ｌ ７ —３ ９ ２ ０ ） ２—０ ５ —０ ０５ ５
聚癸二酸甘油酯支架在生物医学工程领域中应用的研究进展
聚癸二酸甘油酯支架在生物医学工程领域中应用的研究进展李颖1，金振伟2，刘腾1，张葛1，杨晓英3，马迎春21山东第一医科大学（山东省医学科学院）研究生部，济南250117；2山东第一医科大学第一附属医院（山东省千佛山医院）妇科；3潍坊医学院临床医学院摘要：聚癸二酸甘油酯（PGS）支架是一种由甘油和癸二酸缩聚而成的人工合成高分子材料，其良好的机械弹性、独特的表面生物降解性和广泛的生物相容性等特性，在软组织修复、骨组织再生、药物输送及预防组织粘连等方面具有广泛的应用前景，成为近年来生物医学工程领域研究的热点材料。
关键词：聚癸二酸甘油酯支架；生物医学工程；支架特性；临床应用doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2022.16.024中图分类号：R318文献标志码：A文章编号：1002-266X（2022）16-0099-05组织工程是一门以细胞生物学和材料科学相结合的新兴学科。
组织工程的核心是建立细胞或生物活性分子与生物材料的三维空间复合体，通过该复合体促进组织修复或再生［1］。
组织工程的三要素包括支架材料、种子细胞和生物活性分子。
理想的支架材料应具备以下条件［2］：①具有组织适配的机械弹性，能够在不压迫周围环境的同时，维持和恢复软组织的各种变形；②能够促进细胞增殖、黏附、迁移、浸润等，为组织修复提供平台；③具有良好的表面降解特性，在降解过程中仍保持支架的完整性，并且对周围组织无明显的炎症刺激；④最小的免疫原性。
聚癸二酸甘油酯（PGS）是一种由甘油和癸二酸缩聚而成的人工合成高分子材料［3］，因其具有弹性、生物降解性以及生物相容性等优良特性，成为近年来生物医学工程领域研究的热点材料。
目前，PGS支架已被美国FDA批准用于医疗用途［4］，如软组织修复、骨损伤修复、药物输送等。
本文结合文献就PGS支架在生物医学工程领域中应用的研究进展作一综述。
1PGS支架特性1.1弹性良好的生物医学工程支架须具有与组织器官相匹配的弹性模量，从而允许支架在人体动态环境中支撑和修复软组织，并且不会产生明显的机械刺激作用。
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纤维网状结构 加工示意图
A: PGA B: PLLA
(二) 多孔支架
松质骨结构
1. 粒子致孔法
最常用的是溶液浇注/粒子浸滤 ▪ 聚合物溶液与均一的盐晶混合 ▪ 溶剂挥发后形成固体的聚合物/盐复合物 ▪ 浸没在水中去除盐 ▪ 可控孔隙率达93%（厚度<2mm）
支架通过注射完成植入, 故可降低手术 难度, 减少手术创伤, 特别适用于微创伤 的修复。
高长有,马列.医用高分子材料.P229-234. 洪奕等.注射型组织再生支架的研究进展.生物医学工程学杂志,2007;24(2):463-465.
可注射型支架在组织工程中应用的示意图
水凝胶具有在一定条件下可保持流动状态而在外部 的物理或化学刺激下可形成一定形状和强度的体型 材料的特性, 因此成为可注射型支架的首选材料。
相分离/冷冻干燥法孔尺寸往往偏小，但该法 避免了高温，因而得到了研究者的重视。
改进：
不同温度下，多步相分离粗化，提高孔尺寸、连通性
3. 气体发泡法
（1）超临界流体技术（物理发泡法） 该法将聚合物压成片,浸泡在高压二氧化碳中
直至饱和,甚至超临界状态,然后降至常压, 气体的热力学不稳定性导致气泡成核和增 长,形成多孔支架。
支架设计及制备技术
表：三维支架制备技术
制备技术
材料 加工 要求
孔径 孔隙率
/m
/%
结构
溶剂流涎盐沥滤 流涎 溶解 30~300 ~90 球状孔径、盐粒会残留
挤出沥滤 模具 热塑性 50~500 <80 球状孔径、盐粒会残留
纤维粘合 编织 织物 20~100 <85
孔隙结构不规整
乳液冷冻干燥 流涎 溶解 20~200 >90
（2）化学发泡法
• 化学发泡法来制备多孔支架,采用的化学发 泡剂主要为碳酸盐类化合物。将聚合物溶 液/ 碳酸氢铵粒子混合物加入到模具中,待 溶剂部分挥发后直接浸入热水中发泡,最后 经冷冻干燥可得到多孔支架。
• 该法得到的多孔支架孔隙率超过90% ,孔相 连性好,孔尺寸约100－500μm ,并避免了 表面皮层的形成。
4. 微球聚集法
将可降解聚合物微球加入模具中,加热至 玻璃化温度以上,保持一定时间后冷却、脱 模可制得烧结微球支架。
热处理时微球相互接触处由于链运动而 连结在一起,冷却至室温后该结构被固定下 来,因而得到多孔的烧结微球支架。
Fabrication process of a composite of PLAGA and BG. The composite wasprepared in a 3-D, porous scaffold by microsphere sintering.
•超临界二氧化碳（SCCO2） •无残留溶剂 •制备非晶相聚合物支架
优点：
•不使用有机溶剂，因为残留在支架中的有 机溶剂对细胞有害;
•反应体系可以在比较低的温度下进行（30 －40C）,便于药物和生长因子的粘附。 缺点：
•支架的孔隙率和孔径不可控，由气体在固 体中溶解/释放过程的形态决定；
•连通率低（10－30％）； •闭孔结构，可联合粒子浸滤法改进。
当盐晶含量为70－90％时，有均匀的联孔结构
• 致孔剂粒子可采用氯化钠、酒石酸钠和柠檬酸钠 等水溶性无机盐或糖粒子，也可用石蜡粒子或冰 粒子。
• 溶液浇铸/粒子浸滤法制备多孔支架时易形成致 密的皮层，若浇铸后不断地振动至大部分溶剂挥 发，可防止粒子沉降，抑制表面皮层的形成。 （非溶剂聚沉）
• 粒子致孔法简单、适用性广，孔隙率和孔尺寸易 独立调节，是一个通用的方法，得到了广泛的应 用，但致孔时往往需用到有机溶剂。
溶液凝结点
凝胶
Morphology of the chitosan and alginate scaffolds
Ming-Hua Ho,et al. Preparation of porous scaffolds by using freeze-extraction and freeze-gelation methods. Biomaterials 2004;25:129–38
2. 热致相分离（TIPS）
相分离法是指将聚合物溶液、乳液或水凝胶在 低温下冷冻，冷冻过程中发生相分离，形成富溶 剂相和富聚合物相，然后经冷冻干燥除去溶剂而 形成多孔结构的方法。因而，相分离法又往往称 为冷冻干燥法。
按体系形态的不同可简单地分为乳液冷冻干燥 法、溶液冷冻干燥法和水凝胶冷冻干燥法。
液－液相分离相图
均向聚合物溶液：高温低温 淬火热力学状态 参数：溶液浓度、冷冻温度、冷冻时间和
冷冻速率等
溶液冷冻干燥
Porous PDLLA/Bioglasss composite scaffolds prepared by TIPS： bimodal and anisotropic pore structures composed of tubular macropores of 100 m, interconnected with micropores of 10–50 m in diameter (冷却到L-S相平衡线以下干燥)
PVA
LU et al. J Biomed Mater Res 64A: 465–474, 2003
微球紧密堆积产生的 孔隙成为支架的孔,孔尺 寸范围为37－150μm , 与微球尺寸成正比,孔隙 率则随微球尺寸增大略 有增加,为31－39 % ,孔 相连性很好。
该法优点在于孔相连性好,孔尺寸易调控,力学强度 大,微球可包裹药物、生长因子，进行可控释放。 缺点则在于孔尺寸偏小,孔隙率亦低。
• Typical morphologies of porous polymer foams produced by solid freeform fabrication technique
快速成型法可一步形成支架的外形和相 连的多孔结构,是一种一体化制备方法。
优点:
• 成型时间短,利于自动化大规模生产;可根 据个体的不同,迅速制备出具有个体特征的 三维多孔支架;
（1）雾化或喷雾涂曾
采用PLLA或PLGA溶液涂覆织物的方法，可使相 邻纤维间形成物理连结，从而使纤维支架稳定、 耐压。
（2）热处理溶出
• PGA 纤维浸在PLLA/CH2Cl2 溶液中 • 溶剂挥发后PGA 嵌入到PLLA中 • 加热到两种聚合物熔点以上， PLLA 熔点低，先
熔化，充满PGA纤维网络所有空洞（PLLA防止纤 维网塌陷作用）。交叉点的PGA 纤维熔融后物理 缠结在一起。
• 形成气体的盐致孔 • 水溶性致孔剂致孔 • 冰晶致孔
Morphology of cross-sections of PLLA sponges
Guoping Chen,et al. Development of biodegradable porous scaffolds for tissue engineering. Materials Science and Engineering,2001; C 17:63–9
水凝胶作为可注射型支架优点：
• 具有良好生物相容性； • 水溶液环境有利于保护细胞以及营养物和
分泌产物的运输；
• 易用细胞粘附配体进行改性。 水凝胶作为可注射型支架缺点：
水凝胶的操作不易控制, 机械强度较低，消 毒困难。
1.温敏型水凝胶类可注射支架:
温敏型水凝胶是指当一定浓度的溶液在 温度升高或降低到一定值时可迅速形成凝 胶, 可分为升温型水凝胶和降温型水凝胶。
乳液冷冻干燥
去离子水
乳液
液氮
聚合物 去离子水
冷冻干燥
真空干燥
Whang K,et al.A novel method to fabricate bioabsorbable scaffolds .Polymer 1995,36:837-42
水凝胶冷冻干燥（明胶、藻酸盐和壳聚糖等水凝胶）
溶液
冷冻
温度低于
光引发 光引发，引发剂引发 温敏型 温敏型，光引发，酶交联，M加成 温敏型 自组装 光引发
PPF：聚反丁烯二酸丙二醇酯
可注射型支架研究中存在的问题:
• 如何提高水凝胶的强度 • 凝胶化的可控性 • 对于预制备降温型、交联型等水凝胶时与细
胞的复合问题等。
H.J. Chung, T.G. Park / Advanced Drug Delivery Reviews 59 (2007) 249–262 Microspheres Biodegradable PLGA microspheres have been studied for delivery of chondrocytes for cartilage engineering. Non-porous PLGA microspheres could be used as (i) a microcarrier for cell expansion in vitro [130], prior to use as an (ii) injectable carrier for cartilage regeneration in vivo [131–133]. We recently reported that highly porous microspheres (∼200 μm in overall diameter and ∼30 μm in pore diameter) could be prepared by a gas foaming method [29]. These porous scaffold microspheres could be used for microcarrier suspension culture of cells, as well as injection of the cell/microsphere constructs into a tissue defect site (Fig. 5). These injectable and porous microspheres would provide a great advantage for cell therapy in many aspects. Prior to injection, the porous structure (∼30 μm) would allow sufficient cell seeding in and out of the matrix. After injection in vivo, the porous matrix would permit infiltration of cells and in-growth of tissue from the host, facilitating the regeneration process.