动物实验中嗅觉评估方法概述
嗅觉感受器与嗅觉的特点
嗅觉感受器与嗅觉的特点嗅觉感受器与嗅觉的特点：嗅觉感受器位于上鼻道及鼻中隔后上部的嗅上皮，两侧总面积约5cm2.由于它们的位置较高平静呼吸时气流不易到达。
因此在嗅一些不太显著的气味时，要用力吸气，使气流上冲，才能到达嗅上皮。
嗅上皮含有三种细胞，即主细胞、支持细胞和基底细胞。
主细胞也称呼嗅细胞，呈圆瓶状，细胞顶端有5-6条短的纤毛，细胞的底端有长突，它们组成嗅丝，穿过筛骨直接进入嗅球。
嗅细胞的纤毛受到存在于空气中的物质分子刺激时，有神经冲动传向嗅球，进而传向更高级的嗅觉中枢，引起嗅觉我们`搜集整理。
不同动物的嗅觉敏感程度差异很大，同一动物对不同有气味物质的敏感程度也不同。
嗅上皮和有关中枢究竟怎样感受并能区分出多种气味，目前已有初步了解。
有人分析了600种有气味物质和它们的化学结构，提出至少存在7种基本气味；其他众多的气味则可能由这些基本扬眉吐气的组合所引起。
这7种基本气味是：樟脑味、麝香味、花卉味、薄荷味、乙醚味、辛辣味和腐腥味；他们发现，大多数具有同样气味的物质，具有共同的分子结构有特殊结合能力的受体蛋白（理论上至少有7种），这种结合可通过G-蛋白而引起第二信使类物质的产生，最后导致膜上某种离子通道开放，引起Na+、K+等离子的跨膜移动，在嗅细胞的胞体膜上产生去极化型的感受器电位，后者在轴突膜上引起不同频率的动作电位发放，传入中枢。
用细胞内记录法检查单一嗅细胞电反应的实验发现，每一个嗅细胞只对一种或两种特殊的气味坡反应；还证明嗅球中不同部位的细胞只对某种特殊的气味起反应。
嗅觉系统也其他感觉系统类似，不同性质的气味刺激有其相对专用的感受位点和传输线路；非基本气味则由于它们在不同线路上引起的不同数量冲动的组合特点，在中枢引起特有的主观嗅觉感受。
利用动物嗅觉诊断癌症技术的研究进展
利用动物嗅觉诊断癌症技术的研究进展的报告，600字
近年来，动物嗅觉诊断癌症技术（Animal Olfactory Diagnosis
of Cancer Technology, AODCT）已经成为一种广泛报道的癌症诊断方法。
AODCT基于动物的嗅觉能力来识别肿瘤患者的味道，以确定该患者是否患有癌症。
研究人员认为，癌症患者体内的化学物质会合成一些特定的气味，而这些气味可以被动物新鲜的嗅觉所感知。
目前，AODCT的研究正在快速发展，许多不同动物的癌症诊
断研究都已经被展示。
例如，一个研究表明，用宠物猫来诊断膀胱癌是可行的，因为它们可以从尿液样本中识别出癌症特有的气味。
另一个研究表明，金鱼也可以用于识别子宫癌患者的体味，它们可以从患者脐部液体中分离出这种气味。
虽然AODCT已经取得了一定程度的进展，但它仍然有很多问题需要解决，才能使它能够应用到实践中。
首先，我们需要对使用的动物进行训练，才能确保它们可以准确地识别出癌症的典型气味。
此外，研究人员还需要收集更多的样本，以确保AODCT的准确性。
最后，它还需要有效的量化工具，以帮助
使用者更加客观地评估癌症患者的味道特征。
未来，将有更多的AODCT研究，以帮助我们更好地理解动物嗅觉准确识别癌症特征的能力，以及如何将它们应用到实践中。
随着技术的进步，AODCT可能会成为一种有效的、实用的癌
症检测技术，从而改变临床诊断的方式。
兽医临床诊疗技术学：第一章 临床检查的基本方法与程序
六诊在临床上的应用
问诊 能获得大致病况； 视诊 可知整体与浅表病变； 触诊 可深入判断病变性状； 叩诊 可知内脏特别是胸肺、胃肠的状态； 听诊 可知活动器官的形态与机能； 嗅诊 对某些病的诊断有可靠意义。
病例1
病例基本情况：比特犬雌性，17个月龄，体 重24kg，已怀孕51天，13年5月18日晚就诊。
D
3．下列叙述中不属于触诊检查内容的是：
A、动物饮食活动检查 B、动物胃内容物的数量与性状检查 C、动物腹部敏感性检查 D、动物妊娠情况检查 E、动物鼻端干湿度检查
问诊
㈠ 现病史：即本次发病的详细情况和经过：
1. 起病情况 2. 主要表现 3. 病的经过 4. 病因的初步估计 5. 同群其它个体有无发病及发病率
㈡ 既往史：患病动物过去的病史
包括患病动物以前的健康状况，动物现生活地 区的主要传染病、寄生虫病和其他病的病史，对 药物、食物和其他接触物的过敏史，以及家族病 史等
浊音：叩击实质器官(心、肝)和肌肉，由于 组织不含气体，弹性也较差，故呈浊音。 其音性为短、高、弱、非乐音 。
过渡音：过清音、半浊音
五、听 诊
听诊是借助听诊器（也可直接用耳）听取 动物内脏器官在活动过程中所发的声音， 借以判定其异常变化的一种检查方法。
听诊时主要判断听诊音 强弱 频率 异常杂音
六、嗅 诊
主诉：患犬开始时咳嗽，流鼻涕，在当地治 疗过10天。6天前阴门流出白色的分泌物，3 天前阴门开始流血，前两天发烧。今天患犬 已不吃。
现症检查：患犬体温38.9℃，心率120次/分， 呼吸急速，腹部异常膨胀，质硬，叩诊有鼓 音，两后肢发抖，站立无力，精神极差，可 视黏膜苍白，阴门排出恶臭液气体。 血常规：RBC:4.5×1012/L ，WBC:32×109/L 血生化：ALT 98.2 ，BUN 16.8，
嗅觉的检测
嗅觉的检测嗅觉是一个很重要的感觉,与视觉、听觉相比其研究显著滞后。
主要表现在对嗅觉的中枢解剖通路、嗅觉机制、嗅觉障碍机制和治疗了解甚少,缺乏准确行嗅觉功能定性和定量检查的客观方法。
目前对嗅觉可从主观、客观及实验室方法等方面进行检测:(1) 主观测试方法(心理物理测试法) :用含不同种类和不同浓度嗅物质的液体、嗅棒,请患者鉴别,得到相应的资料,对嗅觉功能作出判断。
主要有五味试嗅液检测法(柳端今、孙安纳等研制) 、CCRC 检测法(康涅荻格化学感觉临床研究中心检测法) 、标准微胶囊嗅觉功能检查(又称美国宾州嗅觉研究中心嗅觉检查法,the universityof Pennsylvaniasmell identification test , UPSIT) ,共40 种微型胶囊,通过刮擦- 吸气来测定嗅敏度,UPSIT 要求双侧鼻孔同时测试。
(2) 客观测试法—嗅性相关电位:①电刺激诱发的嗅性诱发电位:日本学者、北京协和医院和北京同仁医院先后用电刺激记录动物的嗅性诱发电位, Ishimaru 等报告了电刺激诱发的人嗅性诱发电位。
②化学气体刺激诱发人的嗅性相关电位( olfactory event related potentials ,OERP) :OERP 系由气味剂(odrant s) 刺激嗅黏膜,应用计算机迭加技术,在头皮特定部位记录到的特异性脑电位。
1966年Finkenzeller 等用气味剂香草醛(vanillin) 刺激人类嗅黏膜,在头皮特定部位记录到了OERP。
这是人类第1 次在自身记录到OERP。
1978 年, Kobal 等研制了一种嗅觉刺激装置,在刺激嗅区黏膜的同时不会引起呼吸区黏膜的温度和体感变化。
1998 年以来北京协和医院、北京为尔福电子公司、中国科学院电气高技术研究所共同研制了化学刺激诱发嗅性电位刺激的记录装置。
至于嗅觉诱发脑电图(electroencephalogram , EEG) 和脑电地形图( brain electricalactivity mapping ,BEAM) 测试,蒋以亭等研究认为可作为嗅觉客观检查的一种参考依据,但有局限性。
嗅觉障碍——老年痴呆早期筛查的新标准
嗅觉障碍——老年痴呆早期筛查的新标准老年人嗅觉减退，经常容易被忽视。
最近一项研究发现，在老年痴呆（简称AD）的早期阶段即存在嗅觉的减退，甚至嗅觉的损失要比AD的典型症状（痴呆、记忆力丧失、智力下降等）出现得更早。
由于嗅觉系统的功能障碍与AD有着密切的联系，通过嗅觉功能的检查对AD进行早期筛查和检测，为AD的早期诊断和治疗提供了新的研究方向。
建立老年痴呆大鼠模型之后，对其各级嗅觉系统包括嗅粘膜、嗅球和海马组织进行相关的病理学及免疫组化等方面的检查，发现其改变均与老年痴呆的中枢改变相一致，另外在嗅觉系统中嗅觉特异性标记蛋白同样存在下降。
尤其是利用基因芯片技术对模型大鼠嗅球组织的基因表达谱的变化进行筛查，检查得出了相关的差异基因，并对其进行进一步验证，从而为嗅觉与老年痴呆关系的研究奠定了基因水平的基础。
此前，在分子生物学水平甚至基因水平上对二者联系的研究尚属空白。
此外，耳鼻喉科自主研发的嗅觉诱发电位仪目前已经在临床上应用于对老年痴呆病人进行检测。
目前普遍使用的嗅觉检测方法主要分为主观检测方法和客观检测方法。
主观的嗅觉检查随意性大，结果不够可靠，因此研究者一直想寻找一种客观的嗅觉检查方法。
听觉、视觉和本体感觉诱发电位已经作为评价感觉系统损害的客观、可靠依据应用于临床常规检查。
但是由于嗅觉的形成首先是一个化学刺激过程，嗅觉刺激也不易控制，所以嗅觉诱发电位的研究一直滞后。
嗅觉诱发电位仪首次将嗅觉的诱发电位检查作为客观的嗅觉检查方法应用于嗅觉的临床检查中，具有世界领先水平。
通过对部分老年痴呆患者的嗅觉功能检查，我们发现其存在嗅觉功能的减退，希望通过进一步的临床验证能够为老年痴呆的早期筛查提供新的诊断标准。
老年痴呆症又称阿尔茨海默病，是发生在老年期及老年前期的一种原发性退行性脑病，是人类最常见的神经退行性疾病之一。
据统计目前全世界65岁以上的老年人中的发病率可达5%，在欧美等发达国家中该病已上升为老年人致死病因的第四位。
动物感觉与感知研究
动物感觉与感知研究动物感觉与感知是动物行为学研究的重要领域之一。
通过深入研究动物的感觉器官、感知过程以及它们与环境的相互作用，我们可以更好地了解动物的行为和适应能力。
本文将介绍动物感觉与感知的基本原理、研究方法以及一些具体案例，希望能为读者提供全面的了解。
一、感觉器官动物的感觉器官包括视觉、听觉、嗅觉、味觉和触觉。
这些器官在动物身体的不同部位，接收和传递外界刺激信息，使动物能够感知到周围的环境。
1. 视觉视觉是动物获取信息最重要的感觉方式之一。
不同动物对光线的感知能力各异，有些动物可以看到更广泛的光谱范围，而有些动物则只能看到特定的颜色。
有些动物能够通过视觉捕捉到猎物，有些动物则通过视觉辨识环境中的同伴。
2. 听觉听觉是动物进行交流和感知的重要手段。
动物的听觉器官具有不同的频率和声音感知范围。
例如，大象可以感知低频声音，而蝙蝠则可以感知高频声音。
通过听觉，动物可以判断远离它们的危险，以及识别同种或异种动物的声音。
3. 嗅觉嗅觉是动物感知环境中化学物质的能力。
动物的嗅觉器官一般位于鼻腔内部，可以通过感知空气中的化学物质来判断食物、繁殖伴侣或潜在危险的存在。
犬类动物的嗅觉尤其敏锐，可以通过气味追踪物体或者人类。
4. 味觉动物的味觉器官主要位于舌头和口腔内部。
通过感知食物的味道，动物可以判断食物的可食性以及是否有毒。
不同动物对味觉的感知能力也有所差异。
5. 触觉触觉是动物通过身体接触感知物体的能力。
某些动物的皮肤具有更高的敏感度，可以感知到更细微的刺激，从而判断物体的形状、温度等特征。
二、感知过程动物感知过程包括感觉、感知和认知。
感觉是指动物对外界刺激的直接感知，包括接收和传递信息的过程。
感知是指动物对感觉信息的加工和解读，通过对多种感觉信息的整合，动物能够对环境做出更为准确的判断和反应。
认知是指动物对感知信息的理解和认知，通过对感知信息的内部表征和记忆，动物能够建立对环境和行为的认知模型。
三、研究方法动物感觉与感知的研究方法主要包括行为观察、生理学实验和认知实验。
嗅觉辨别实验综述
溶剂（对照样品）。评价员应有100%选择正确率。
1.基础测试
A1 B1 A2 B2 A3 B3 A4 B4
C1
D1
C2
D2
C3
D3
C4
D4
2.辩香测试
挑选7个不同香型的香精（葡萄、金桔、哈 密瓜、水蜜桃、桔子、椰奶、番石榴）适当稀释 至相同香气强度，分装入干净棕色玻璃瓶中，贴 上标签名称，让评价员充分辨别并熟悉它们的香 气特征。
(三)实验仪器设备与试剂
1.仪器设备 具塞棕色玻璃小瓶；辩香纸。
2.试剂 标准香精样品；乙醇；水等。
（四）实验步骤
1.基础测试
挑选3～４个不同香型的香精（如葡萄、金桔、 哈密瓜、水蜜桃），用无色溶剂稀释配制成1％浓
度。以随机数编码，让每个评价员得到4个样品，
其中有两个相同，一个不同，外加一个稀释用的
经仔细辩香后，填入上下对应你认为二者相同 的香精编号，并简单描述其香气特征。
相同的 两种香 精的编 号 它的香 气特征
(五)结果分析
1.参加基础测试的评价员最好有100%的选择正确 率，如经过几次重复还不能觉察出差别，则不能
入选评价员。
2.等级测试中可用评分法对评价员进行初评，总
分为100分，答对一个香型得10分。30以下者为不
3.等级测试
将上述辩香试验的7个香精制成两份样品，一 份写明香精名称，一份只写编号，让评价员对14 瓶样品进行分辨评香。并填型相 同的样 品编号
1
2
3
4
5
6
7
4.配对试验
在评价员经过辩香试验熟悉了评价样品后， 任取上述香精中5个不同香型的香精稀释制备成外 观完全一致的两份样品，分别写明随机数码编号。 让评价员对10个样品进行配对试验，并填写下表。
简述食品的嗅觉识别方法
简述食品的嗅觉识别方法食品的嗅觉是人类感官中最为敏锐的，而嗅觉识别也是食品品质和安全检测中的一种重要方法。
嗅觉可以帮助我们鉴别食品的新鲜度、质量和是否受到了污染等信息。
那么食品的嗅觉识别方法是怎样的呢？一、嗅觉识别的基本原理嗅觉识别是通过鼻腔的感受器来感知气味的信息，这些感受器位于鼻黏膜上。
人的嗅觉能够感知到上千种不同的气味，其中一部分是能够识别的。
嗅觉识别主要是通过嗅觉感受器与大脑皮层的交互作用来实现的。
二、食品的嗅觉识别方法1.感官评估法感官评估法是一种主观评估方法，通过人的嗅觉、视觉、口感等感官来评估食品的质量、新鲜度、口感、气味等特征。
通常是由专业的品尝师或消费者进行评估。
2.气相色谱法气相色谱法是一种客观检测方法，它通过分离气味成分并进行定性和定量分析来鉴定食品的气味。
该方法通常需要使用气相色谱仪，这是一种高精度的仪器，能够对食品中的气味成分进行分析和检测。
3.电子鼻技术电子鼻技术是一种新兴的嗅觉识别技术，它模拟了人的嗅觉系统，能够实现对食品的气味进行快速、准确、定量的检测。
电子鼻通过感知不同的气味，将气味转化为电信号，然后通过算法进行分析和识别。
4.挥发性有机物分析法挥发性有机物分析法是一种基于物理化学原理的检测方法，它通过分离和提取食品中的挥发性有机物来识别食品的气味。
该方法需要使用专门的仪器和试剂，包括头空气相微萃取仪、气相色谱仪等。
三、嗅觉识别的应用领域嗅觉识别技术在食品品质和安全检测中有着广泛的应用。
例如，在食品加工过程中，通过嗅觉识别技术可以检测食品是否受到了污染或者是否存在异味等问题。
在食品销售和运输过程中，嗅觉识别技术可以用来检测食品的新鲜度和品质，保障消费者的健康和权益。
嗅觉是一种重要的感官，食品的嗅觉识别技术可以帮助我们检测食品的质量和安全性，保障消费者的健康和权益。
随着科技的不断进步，嗅觉识别技术也会不断得到改进和创新，为食品安全和品质保障提供更加精确和可靠的技术支持。
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动物实验中嗅觉评估方法概述[摘要] 嗅觉功能目前正受到越来越多的关注,在动物实验中出现的嗅觉评估方法很多,但是目前为止还没有一个全面、客观、高特异性的金标准方法出现,本文就目前动物实验中的常见的嗅觉评估方法(包括行为学、影像学、电生理学、组织形态学等多种类型的实验方法)进行一个概括性的介绍并简单分析其优缺点。
[关键词] 嗅觉; 嗅觉障碍; 评估方法; 动物实验; 文献综述嗅觉是人体原始的感觉功能之一,它同视觉、听觉一样,是人体捕获外界信息的特殊装置。
嗅觉还可以通过中枢神经系统影响人的情绪、调节生命周期。
嗅觉障碍患者对周围的事物不感兴趣,反应平淡,生活质量下降,更可以造成精神上的压抑或忧郁。
王鸿等[1]报道用T&T测试法测试了1 035例慢性鼻窦炎鼻息肉患者,86.3%的患者有嗅觉功能障碍,与患者的主诉有极显著的差异,说明嗅觉功能改变没有受到患者的注意。
近几年随着人们对生活质量要求的提高,对嗅觉障碍的关注程度有了很大的提高。
嗅觉评估不仅仅是要判断嗅觉功能是否正常,还需要进一步判断嗅觉障碍的程度、性质、部位等因素,如果能提示病因以及预后则更有临床、实验应用的价值。
在动物实验中关于嗅觉功能的研究已经有了较长的历史,出现了多种实验方法,但是目前为止还没有一个全面、客观、高特异性的金标准方法出现,本文就目前动物实验中的常见的嗅觉评估方法进行一个概括性的介绍。
1 行为学方法动物实验和临床试验的最大区别在于动物无法准确地和实验者交流,所以行为学方法在动物实验中就显得极为重要。
嗅敏动物的学习记忆能力、寻食能力等与嗅觉有很高的相关性,可以观察、记录其行为学的改变,从而判断其嗅觉功能的变化。
目前报道较多的可以评估嗅觉功能的行为学方法有以下几种。
1.1 埋藏食物小球实验(buried food pellet test,BFPT)BFPT是目前最常用于检测动物嗅觉功能的行为学检测方法[2]。
目前比较通用的方法由Nathan等[3]于2004年报道,他的实验中使用找寻食物小球等待时间作为数据进行统计分析,即从小鼠被随机放置于盒子中开始,到小鼠揭开食物小球并用它的前爪或牙齿抓住食物小球的时间,如果5 min(300 s)内小鼠未找到食物小球,即被移走。
林静等[4]以300 s(5次测试的平均值)内未找到食物小球作为判定小鼠存在嗅觉功能障碍的标准,并认为以300 s作为分组标准是合理的。
1.2 嗅觉测量仪Slotnick等[5]利用行为学原理设计出一种用于动物实验的嗅觉测量仪,可以通过改变气味的浓度后观察动物的行为学变化来评价其嗅觉。
该系统经众多实验验证其对动物嗅觉的检测是有效的[6],因操作方便且可进行多种设计,此方法被广泛应用于动物嗅觉功能的评估。
1.3 双瓶实验有研究证实小鼠、大鼠在分辨某些物质的时候主要是依赖于嗅觉而非味觉,例如盐酸、盐酸奎宁(quinine HCl, QHCl)等有一定挥发性的物质[7]。
因嗅觉障碍时动物分辨饮用水和实验溶液的能力下降,通过两种溶液被动物饮用的程度可以评估动物嗅觉障碍的程度。
1.4 幼鼠超声发声实验新生小鼠嗅觉的产生比其他的感觉要早。
新生小鼠嗅到成年鼠窝的气味时可发出一种超声作为回应,检测这种超声的出现与否可以判断其嗅觉功能是否正常[8]。
Lemasson等[8]用3-甲基吲哚来破坏新生小鼠的嗅上皮,结果成功地证实了该检测方法的可行性。
而且在该实验中发现由于被破坏嗅觉的小鼠无法正确识别乳头,其生存率大大降低,证明了嗅觉对新生小鼠有极其重要的作用。
行为学方法在动物实验的嗅觉评估中有很重要的作用,历史悠久、技术成熟,实验方法较为简单,实验装置花费较少,对嗅觉功能的初步评估价值较为肯定(尤其是埋藏食物小球实验和Slotnick的嗅觉测量仪),可行性及可重复性较高。
需要注意的是本类实验受个体差异影响较大,实验前应经预评估剔除先天差异比较大的个体,而且样本量不宜过小,有时候还需对动物进行预先的训练。
为保证实验的客观性,需要很好地进行实验设计与控制,有时连昼夜节律等变化的影响都需要考虑在内。
行为学测试结果对嗅觉功能评估只是一个综合的结果,对嗅觉障碍程度、部位等的判断较差,如果能结合嗅觉诱发电位等客观检查可以做到更加客观、可信。
在过去的实验中行为学测试往往与组织学检查相结合,既增加了实验的客观性,又为进一步研究嗅觉产生机制或嗅觉障碍的原因提供了基础。
2 客观评估方法嗅觉的感受、传导是个比较复杂的过程,气味分子通过鼻腔到达嗅黏膜后被其表面的黏液所吸附,进而在黏膜层中扩散,到达嗅细胞。
达到阈浓度的气味分子可刺激嗅细胞产生嗅觉电位,这是其感受过程。
产生的嗅觉电位通过嗅神经穿过筛骨筛板,到达嗅球,其内有第2级神经元,再通过嗅束传导至初级嗅皮质及皮质内侧核,而后至海马回的内嗅皮层即次级嗅皮层,神经冲动引起大脑皮层的激活才能最后引发嗅觉。
嗅觉功能的客观评估方法包括了对嗅觉感受、传导通路上各种指标,例如影像学、电生理学、组织学等的测量。
目前动物实验中使用较多的及可能有较大发展前景的客观评估方法包括以下几类。
2.1 组织学方法这里的组织学是泛指解剖取组织后进行的所有检查,包括大体解剖学、病理学、免疫学、分子生物学等诸多学科的检查方法。
嗅觉系统的改变既可以由病变本身引起也可以是因为嗅觉障碍后的退行性变引起。
组织检查比结构影像检查更有评估价值,因其可以更好地提示病因,也利于更好地研究嗅觉通路和嗅觉障碍产生的机制。
目前组织学方法在动物实验中有很广泛的应用,从部位选择上看整个嗅觉传导通路包括从嗅黏膜直到海马回的内嗅皮层都有报道,从实验方法上看更是复杂多样,最常用的几种方法有如下几种。
2.1.1 病理学检查这是早期免疫学技术及分子生物学技术还不是很发达时常用的检查手段,在早期嗅觉研究中有较多的应用,在嗅觉障碍的动物标本上可以看到细胞凋亡、空泡等变化,虽然特异性较差,但是也能提供宏观的信息,现在常常和其他检查方法一起使用,例如在陈志宏等的实验中在进行其他检查之前使用了HE染色方法检查了模型小鼠的嗅上皮,发现其嗅上皮变薄,其中的感觉神经元的细胞核层数变少[9]。
2.1.2 蛋白及核酸表达的检查对相应组织中某些标志性蛋白及核酸的检查可以间接地反映嗅觉功能及提示嗅觉障碍的原因。
例如用免疫组化方法检查嗅觉通路中嗅标记蛋白(olfactory marker protein, OMP)、酪氨酸羟(tyrosine hybroxylas, TH)、一氧化氮合酶(nitric oxide synthase, NOS)、c-Fos蛋白等标记物在许多文献中都有记载。
Buron等[10]在丙酮吸入诱导的嗅觉障碍实验中使用了嗅上皮组织的OMP及增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)作为观察指标,发现丙酮对于嗅上皮的损伤是有选择性的。
有学者使用多巴胺及细小白蛋白作为标记物进行免疫组化检查,发现失嗅动物模型的嗅球中含多巴胺及细小白蛋白的神经元细胞数量明显减少,认为通过该失嗅动物模型可以对嗅球萎缩进行定量描述,提示多巴胺及细小白蛋白在嗅球中的表达对于失嗅的作用[11]。
c-Fos蛋白可反映大脑组织活动程度,对c-Fos蛋白的观察可以一定程度上起到功能磁共振的作用[12]。
2.2 电生理学方法2.2.1 嗅电图将电极直接置于嗅区黏膜,当其接受嗅素刺激时记录到的一种慢相负性电位变化称为嗅电图,目前普遍认为它是单个嗅细胞电位变化的总和,嗅电图已经在动物实验中得到证实[13]。
嗅电图最大的缺陷在于虽然其对嗅黏膜损伤引起的嗅觉障碍有较大的意义,但是对于黏膜后传导通路以及嗅球、海马回等中枢病变导致的嗅觉障碍没有什么评估价值。
2.2.2 嗅觉脑电图嗅觉诱发脑电图是指在给予嗅刺激时,实验对象的脑电图可发生变化,Hirano 等[14]用狗做实验时成功地获得了该变化,在他的实验中发现脑电图的快波对嗅觉功能的意义较大。
嗅觉诱发脑电图又相继在大鼠等其他动物身上得到了验证[15]。
嗅觉脑电图产生的机制还不是很明确,而且其特异性不是很高,故目前在动物实验中研究、应用的较少。
2.2.3 嗅觉诱发电位又称为嗅觉事件相关电位(olfactory event-related potentials,OERP),最早是用电刺激动物嗅黏膜时在头皮特定部位记录到稳定的脑电位的变化,该方法经过一段时间的发展后认为其和自然嗅觉之间有一定的差距,故逐渐被化学气味诱导的嗅觉诱发电位所取代,目前使用的已经比较少。
早期化学气味刺激除了有嗅觉刺激外还常常伴有物理刺激及对三叉神经的化学刺激,这些非嗅刺激干扰了正常嗅觉诱发电位的获得。
随着仅能兴奋嗅觉系统而不兴奋三叉神经系统的化学物质如香草醛等,以及Kobal式嗅觉刺激器的出现,嗅觉诱发电位研究成为嗅觉研究领域的热点。
嗅觉诱发电位仪至少包括嗅觉刺激器及脑电采集系统,测量时需要在电声屏蔽室进行,且需要给予一定的白噪声掩蔽刺激探头释放刺激时产生的干扰噪声。
目前动物嗅觉诱发电位各波的具体来源以及与疾病间的相互关系还不清楚,嗅觉诱发电位的出现是否意味着动物确实产生了嗅觉还不能肯定,所以用来证明嗅觉传导通路是否畅通比较可行[16],而暂不能用于嗅性疾病的定位、定性诊断。
嗅觉诱发电位应该是最可能成为动物嗅觉评估客观标准的检查方法。
3 影像学方法3.1 嗅觉系统结构影像检查有研究证明嗅球及嗅束等神经结构的生长与周围神经冲动的输入有关[17],所以嗅觉障碍后嗅觉系统各部位可有一定的不依赖于年龄的结构改变,通过磁共振影像检查可以发现这些改变,例如嗅球体积变小、嗅沟缺失或变浅、嗅束缺失等现象,从而间接评价嗅觉功能。
3.2 嗅觉系统功能影像检查这是目前嗅觉研究的热点方向之一,主要技术有功能性磁共振成像(fMRI)、PET成像和脑信号的光学成像等。
3.2.1 功能磁共振检查功能磁共振检查技术有很多,用于嗅觉系统功能的fMRI技术主要是(blood level dependent fMRI, BOLD fMRI),当氧合血红蛋白的比例增加时或去氧血红蛋白含量减少时,T2信号缩短效应减弱,表现为MR信号增强。
嗅觉功能成像既能反映血流的变化,也能反映神经元活动的代谢变化,近些年在研究神经功能方面发挥着巨大的作用,特别是fMRI无放射暴露,可反复测试,且时间、空间分辨率要优于PET成像,故是目前嗅觉功能成像的主要方法。
在大鼠实验中已经证实,7 T的fMRI能够显示气味刺激后大鼠嗅球的活化[11]。
其空间分辨率很高,对于研究嗅觉相关皮层的定位、嗅觉功能障碍情况下嗅觉相关皮层反应的变化等有极大的应用价值。
有学者拟通过信息技术将啮齿类动物嗅球的激活图像编成二维的气味图(OdorMap,OM)及气味图数据库(OdorMap Database,OMDB)以利于嗅觉工作者对嗅觉系统的研究[18]。