第五章 过敏源检测

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过敏性休克预案
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Step 3
点刺操作步骤及注意事项
1、常规消毒/清洁
患者手臂放松,平放于桌上，用酒精清洁其前臂掌侧皮肤。 酒精过敏者可采用生理盐水清洁。 注意擦拭方向 自然风干
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2、滴加点刺液
依次将变应原点刺液、阴性对照、阳性对照滴在消毒后 的皮肤上 液滴之间距离为3-5厘米（间距不可小于2厘米） 防止点刺后的红晕互相 融合 只准许液滴碰到皮肤， 瓶盖和滴管不应碰到
Asthma
ALLERGY
IgE
IgE
IgE
IgE
IgE
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尘螨是国内的主要过敏原
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单一尘螨过敏原检测的意义
尘螨是国内最主要的过敏原， 80% 以上的过敏性疾病患者 都对尘螨过敏。 多重过敏患者如其症状病史与尘螨相关性高，单一尘螨脱 敏亦可保证脱敏疗效。 目前国内上市用于脱敏治疗的药物仅针对尘螨过敏患者
The Allergy March
Atopic dermatitis Eczema Gastrointestinal disorders Wheeze Nasal polyps Respiratory Persistent problems atopic dermatitis Otitis media
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不良反应及其处理
不良反应
可能发生局部过敏反应，如瘙痒，但很轻微 系统性不良反应发生率极低
处理方法
一般不需用药，可在1小时内自行缓解 反应强烈者，可口服抗组胺药或局部使用激素抹膏
建议
询问过敏史，对高敏患者应准备好休克抢救措施 建议诊室中准备好药物（如1mg/ml肾上腺素），以治疗可能出 现的过敏反应
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常见问题-1
阳性对照/阳性结果出现阴性反应(假阴性）
操作手法：点刺针未刺破表皮，阳性对照液未进入皮肤 用药：点刺前服用抗阻按药、皮质类激素等 其他疾病减弱了皮肤反应，如神经系统和感染性疾病（ 如麻风病）可导致SPT出现假阴性皮肤反应性差
局部变应性鼻炎
点刺液存放不当或时间过长而失效
新员工产品培训
第五章 过敏原检测
我武生物市场部
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过敏原
过敏原/变应原-常见诱因,凡经吸入或食入等途径进入体 内后能引起IgE类抗体产生并导致变态反应的抗原性物质 过敏原种类
食入性：牛奶、鱼虾、鸡蛋等； 吸入性：尘螨、花粉、动物皮屑、真菌、昆虫等； 接触性：油漆、清洁剂、乳胶等； 药物过敏：磺胺类、抗生素类等； 昆虫毒液
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过敏原检测方法的比较
皮肤点刺试验
优点：灵敏度高，临床相 优点：影响因素少（如不受 关性好 药物使用的影响） 皮肤 操作简单、快速 体内试验 灵敏度较好 激发试验 费用低 缺点：出结果较慢 缺点：影响因素多(如服药 费用高 、划痕症等) 两种方法同时检测准确性最高 两种方法区别：皮肤点刺试验检测的是结合在肥大细胞上 的sIgE、炎症的释放及靶器官对炎症介质的敏感性；血清 检测是检测的游离在血清中的sIgE 与过敏性症状最直接相关的是与细胞结合的sIgE
适应症：
用于点刺试验，辅助诊断因粉尘螨致敏引起 的Ⅰ型变态反应性疾病
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点刺视频
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Step 1
试验前-试剂准备
变应原及阴、阳性对照
点刺液
阴性对照:生理盐水溶液
阳性对照:磷酸组胺溶液
点刺液应储存在2－8C的冷藏柜中 一次性使用采血针（片式点刺型）
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Step 2
• 如果使用了浴液/保湿剂/香波，患者需清洗臂部
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Allergy2012：EAACI POSITION PAPER，Practical guide to skin prick tests in allergy to aeroallergens
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Step 2
试验前-询问
是否有皮肤划痕症
考虑sIgE检测
是否有晕针
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晕针与过敏性休克的区别
• 晕针一般只在注射当时或者数分钟内发生，过敏性休克可即时发生， 也可在注射后数小时内发生
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晕针症状（晕倒）体征（血压下降，慢慢恢复）都是先重后轻，过 敏性休克先轻后重
过敏性休克一般都有心动过速，脉搏快、弱，呼吸正常至深呼吸； 而晕针是心率减慢，一般无心动过速，脉搏表现慢而饱和，因气道 阻塞而发生有声呼吸 过敏性休克有时可先见皮疹，以及荨麻疹、血管性水肿、支气管痉 挛等过敏症状，点刺发生过敏性休克时一般会伴随点刺部位的风团、 红晕的扩散。
尘螨与病史具有相关性的前提下，尘螨点刺或者 血检结果呈阳性，都需考虑脱敏治疗
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畅点：Spotter
商品名：畅点 通用名：粉尘螨皮肤点刺诊断试剂盒
阳 性 对 照：磷酸组胺溶液 阴 性 对 照：生理盐水溶液 配套：一次性使用采血针（片式点刺型）
国药准字：S20080010
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变应原检测-体外sIgE检测
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血清体外sIgE检测原理
96孔ELISA板
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sIgE诊断标准
血清sIgE水平分级标准
血清sIgE水平（KU/L） 0-0.35 分级 0级
0.35-0.7
0.7-3.5 3.5-17.5
1级
2级 3级
17.5-50
50-100 ≥100
4级
5级 6级
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血清检测(详见竞品分析)
体外检测，血清里游离的IgE
ImmunoCAP “敏筛”过敏原检测系统（AllergyScreen） 欧蒙、全自动酶免仪(e-STAR plus) 等
目前普遍采用标记免疫分析技术
放射性标记免疫分析法（放免法）
酶标记免疫分析法（酶标法） 酶荧光免疫标记分析法（CAP检测系统）
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过敏原检测的临床意义
（1）过敏性疾病的诊断必须明确过敏原
ARIA2008： 变应性鼻炎诊断是根据典型的过敏症状病史和与其 相一致的试验诊断结果而共同做出的 典型的过敏症状病史：症状、发作环境、家族遗传史、 体格检查等 试验诊断：过敏原检测试验
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过敏原检测的临床意义
（2）过敏性疾病的治疗必须明确过敏原
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常见问题-2
阴性对照出现阳性结果(假阳性）
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3、点刺操作
绷紧皮肤，避开血管，点刺针透过液滴垂直刺入皮肤 （刺破皮肤，使针尖下面有少量试液进入皮肤（深度 1mm），点刺针停留 1秒钟后提起，不同的液滴需更换 新的点刺针。
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4、拭去残液
点刺操作 2-3 分钟后，拭去皮肤上的残液，注意不要 交叉污染
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5、观察结果
点刺10-15分钟后观察点刺结果（皮试反应达到高峰）， 测量阴性对照、粉尘螨点刺液、阳性对照的点刺部位 产生风团和红晕的面积，并记录。
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6、结果判断
临床比较风团面积最简便的方法是目测，以阴性对照风 团或红晕面积做校正，比较粉尘螨与阳性对照风团或红 晕的面积，若粉尘螨风团和红晕面积为阳性对照面积的 25%以上，即可判断该粉尘螨阳性。
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法国 葎 草 阴性 艾蒿 粉尘螨 阳性 梧桐 阴性 粉尘螨 阳性 户尘螨 户尘螨 葎草 蒿属花粉 法国梧桐
特异性IgE检测
特异性IgE
对于吸入物变应原，皮肤试验是一线诊断方法之一。当 其结果与临床病史相关时，无需进行体外试验。如果结 果不一致，血清可能有助于对患者作出更好诊断
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尘螨过敏原检测方法的选择
首选皮肤点刺试验，结果呈阳性且与病史相关性 强则无需再进行血检
如强烈提示过敏而点刺呈阴性、或个别患者不适 合皮肤点刺，建议血检
试验前-询问
询问患者服药情况
如果患者符合以下情况，皮肤点刺试验应延迟
• 近3日内未服用抗组胺药；息斯敏等长效抗组胺药需停药7天以上。 抗组胺成分常见于抗过敏药、部分感冒药等 • 近1日内未服用全身性长效糖皮质激素药物 • 近1日内未在试验部位皮肤上使用糖皮质激素类药物
• 部分用于治疗过敏的中药可能也有抗炎的作用
其他常见的食物与花粉等过敏原可通过问诊确定并加以避 免。
单一尘螨点刺普查价格便宜，更易在科室开展。
哪些症状需尘螨过敏原检测？
鼻部：鼻痒，阵发性喷嚏，清水样鼻涕，鼻塞，嗅觉 障碍，天转凉流鼻涕，天转热打喷嚏。 咽喉：慢性咽喉炎 肺部：慢性咳嗽，咳嗽，呼吸困难同时们有喘息，常 在清晨或夜间发生 眼部：不同程度眼痒，异物感，畏光流泪，充血，灼 烧干涩，伴有分泌物 皮肤：痛痒，有干燥史，红斑，大小不等的小丘疹或 水肿，渗出或结痂，表皮剥落、苔藓化
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激发试验
鼻激发、支气管激发、口腔激发、粘膜激发 金标准
操作繁琐，存在危险性
鼻粘膜激发实验：激发前后分别测试鼻腔空气流量
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皮肤点刺试验
Skin Prick Tests (SPT)
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皮肤点刺试验的优势
WAO认为皮肤试验是检测IgE的金标准，是准确的IgE检测 方法；GA2LEN和ARIA认为SPT是诊断患者是否过敏的首选 方法；EAACI推荐为最佳体内诊断方法，现为欧美公认的 最方便、最有效的过敏原诊断方法 安全性高，操作简便，快速（10-15分钟出结果） 灵敏度高，临床相关性好 患者几乎无痛苦，小儿也能接受 费用低
过敏性疾病的治疗是一项系统工程，WHO推荐 “四位一体”的最佳治疗方案。
避免过敏原 对症药物治疗：抗炎、缓解症状 变应原特异性免疫治疗：SLIT、SCIT 患者教育
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过敏原检测的临床意义
（3）给指导患者提供依据
针对性地对患者进行教育，指导有效避免过敏原 早期确定出有可能发展成变态反应疾病的高危婴幼儿 ，提供机会来防止疾病加重
体内试验
激发试验（结膜、支气管、口腔）
皮肤试验 (问世于1909年)
划痕试验（Scratch tests） 点刺试验（Prick tests） 挑刺试验（Puncture tests）
皮内试验（Intradermal skin tests ）
特应性斑贴试验 （Atopy patch tests）：Ⅳ型过敏性疾病
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适应症与禁忌症
适应症
IgE介导的变应性疾病的诊断，结合患者症状、病史，可以作出致敏原的 确诊 从婴幼儿到老年患者都可以使用，但要注意结果解读
禁忌症
无已知禁忌症 患严重影响全身状态的疾病； 试验部位发生病理变化。当患者手部异位性皮炎发作时，可能出现假阳 性反应。在这种情况下，应代之在背部进行点刺试验，或待疾病缓解后 ，才进行点刺试验 怀孕期； 接受β受体阻滞剂或ACE抑制剂治疗者； 肾上腺素禁忌症
临床使用的过敏原检测方法
体外实验：主要是特异性IgE检测（血检） 体内试验：主要是皮肤点刺试验
激发试验
• ①鼻粘膜激发、 ②口腔激发、 ③支气管激发、 ④食物激发、 ⑤药物激发、 ⑥现场激发
皮肤试验
• ①划痕试验； ②点刺试验； ③挑刺试验； ④皮内试验； ⑤ 特应性斑贴试验
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基于sIgE水平的检测方法
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SPT原理
皮肤点刺试验是一种体内特异性免疫学检测方法
局部皮肤反应： 毛细血管扩张(红斑)，通 透性增强，渗出增加，最 后出现风团和红晕反应
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SPT的安全性
点刺过敏原进入皮肤的量为1-5×10-9克（纳克级） 吸入性过敏原点刺严重不良反应少，因为日常经常 接触，有耐受能力，日常过敏原量甚至为微克级 询问有无严重食物过敏史
建议改用血清sIgE检测
如皮肤点刺过程中发现，可延长点刺结果观察时间。 一般来说，皮肤划痕征所致风团比点刺所致风团消失 得更快。可等阴性对照风团消失后观察。
皮肤是否对酒精过敏
常见于低龄儿童。这种患者可改用生理盐水进行皮肤 清洁
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Step 2
试验前-询问
是否有过敏性休克史或严重的过敏不良反应
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如何精确测量风团和红晕的面积大小
1. 用油性笔描绘风团及红晕 四周边线 2. 然后用透明胶带将油性笔 描绘的圈转移到 mm 心电图 纸上 3. 比较粉尘螨及阳性对照的 风团所占格子数来确定该 患者对粉尘螨变应原反应 强度
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操作步骤要点回顾
问诊（服药、划痕征、严重过敏史、晕针、酒精过敏） 消毒/清洁 划号（点刺液种类多时可在清洁皮肤后划号，最后滴加 阳性对照） 点（部位、间距、瓶口勿触皮肤、交叉污染） 刺(绷紧皮肤、用力适当、刺后停顿、交叉污染（更换点 刺针） 拭残液(交叉污染) 看结果(15min、风团)