眼底荧光素血管造影在小鼠氧诱导视网膜病变中的应用评价
家族性渗出性玻璃体视网膜病变的荧光素眼底血管造影临床分析
家族性渗出性玻璃体视网膜病变的荧光素眼底血管造影临床分析发表时间：2019-12-05T11:38:30.307Z 来源：《中国结合医学杂志》2019年12期作者：瞿静灵[导读] 目的：分析家族性渗出性玻璃体视网膜病变的荧光素眼底血管造影临床应用效果。
德宏州人民医院眼科云南德宏 678400【摘要】目的：分析家族性渗出性玻璃体视网膜病变的荧光素眼底血管造影临床应用效果。
方法：随机选取2018年9月-2019年9月期间我院接收的家族性渗出性玻璃体视网膜病变患儿30例作为本次研究对象，全部患者均行荧光素眼底血管造影检查，分析患者的检查结果。
结果：患儿的视网膜睫状血流动力学明显存在变化；视网膜病变达到3期，结果已占总眼数的66.7%；病变程度达到2期，占总数的16.7%；1期；玻璃体后脱离合并有雪花状混浊的有6只，占总数的10.0%；正常眼仅有4只，只占总数的6.7%。
结论：家族性渗出性玻璃体视网膜病变患儿应用荧光素眼底血管造影检查，可及时掌握患儿视网膜病变情况，能够为临床治疗提供有价值的参考数据。
【关键词】家族性渗出性玻璃体视网膜病变；荧光素眼底血管造影；效果分析家族性渗出性玻璃体视网膜病变是一种高发的眼科疾病，其属于遗传性疾病，该病早期无明显症状，随着病情发展，患儿会逐渐发生视力下降，因此临床诊断误诊率及漏诊率极高[1]。
所以应加强对家族性渗出性玻璃体视网膜病变疾病的临床诊断治疗研究，及时掌握患儿的病情变化，尽早给予有效的治疗，控制病情发展，才能减轻疾病对患者视力的影响[2]。
为此，此次研究中详细分析了荧光素眼底血管造影检查在家族性渗出性玻璃体视网膜病变疾病诊断治疗中的应用效果，如下文所示。
1基础资料与检查方法1.1基础资料此次研究对象选取我院2018年9月-2019年9月期间接收的30例家族性渗出性玻璃体视网膜病变患儿进行研究分析，参与本次实验的患儿中，男14例、女16例，患儿年龄1-12岁，平均年龄（6.5±0.3）岁。
眼底照像与血管造影在糖尿病视网膜病变诊断中的比较
［ ］ 高宝鉴 ， ４ 彭靖 ， 郑苇 ， 关于肺 癌与肺结 核联合性 的回顾性 队列 等．
研究 ［ ］ 肿瘤 ，９ ５ １ （ ） ２ １２ ３ Ｊ． １９ ，５ ２ ：７ －７ ．
［ ］ 张敦熔． ５ 现代结核病学［ ］北京： 民军医出版社 ， ０ ： ７ ６． Ｍ． 人 ２ ０５ － ０ ０ ５５
（ 收稿 日期 ：０ １— ８—１ ） ２１ ０ １
重要 的意义。
综上所 述 ， 结核并 发肺癌 的原 因多而杂 ， 肺 临床 表现不 典
（ 本文编辑 ： 方华玲 ）
型， 其诊 断面临一 定 的挑 战 。但 是 医务 人 员应 高 度警 惕 该 疾
变 患者抗结核治疗 ６ 个月。本组结果显示 ， 例患 者中３ 例 患 ４ ５ １
者实施手术 治疗 ， 术后平均生存时 间为 ３２年 ，４例患者 给予化 ． １
疗， 治疗后 患者近期有效率为 ５． ％。以上表 明 ， ００ 及时有效 的治
ｃｎｅ ｈ ｍ ｔｅａ ｙ Ｊ ．Ｃ ｅｔ２ ０ ，２ （ ） ２ １－２ ２ ａｃｒｃｅ ｏｈｒｐ ［ ］ ｈｓ，０ ５ １８ ４ ：２ ８２２ ．
方式 。术前 除一般常规 准备外 ， 对患者进行 １个月左 右 的抗 应
病， 对该病临床表现及病 灶进行 及 时有效 的检查分 析 ， 要早 发 现， 早治疗 ， 在给予 患者抗 痨治疗 的 同时 ， 合手术 与化 疗 ， 结 最 终 降低患者死亡率 ， 延长患者生存时间 。 参考文献
［ ］ 中华医学会结核病分会． １ 肺结核诊断和治疗指南 ［ ］ 中华结核和 Ｊ． 呼吸杂志 ，０ １２ （ ）７ －４ ２ ０ ，４ ５ ：０７ ．
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１ ０８ ・
中 国实 用 医 刊 ２ １ ０ １年 １ １月第 ３ ８卷 第 ２ １期
眼底荧光血管造影范文
荧光信号可以通过眼底荧光血管造影设备检测到， 从而显示血管的形态和功能。
血管造影的原理
眼底荧光血管造影是一 种通过注射荧光染料， 使血管在荧光显微镜下 显影的技术。
01
荧光染料可以标记血管 内的红细胞，使血管在 荧光显微镜下呈现红色。
等
视网膜静脉阻塞： 如视网膜中央静脉 阻塞、视网膜分支
静脉阻塞等
玻璃体病变：如玻 璃体浑浊、玻璃体
后脱离等
禁忌症
严重过敏反应： 对造影剂过敏者 禁用
严重心肺功能不 全：可能导致呼 吸困难、心律失 常等
严重肝肾功能不 全：可能导致造 影剂在体内蓄积， 加重病情
妊娠期：可能 导致胎儿畸形 或流产
哺乳期：可能导 致造影剂通过乳 汁进入婴儿体内， 影响婴儿健康
03
02
荧光染料通过血液循环 到达眼底血管，使血管 在荧光显微镜下清晰可 见。
04
眼底荧光血管造影可以 清晰地显示眼底血管的 形态、结构、血流速度 和血流方向等信息。
眼底荧光血管造影的应用
诊断视网膜病变： 如糖尿病视网膜 病变、高血压视
网膜病变等
诊断黄斑病变： 如老年性黄斑变 性、黄斑水肿等
诊断视网膜血管 病变：如视网膜 静脉阻塞、视网
疗效果
07
视网膜肿瘤：评 估病变程度和治
疗效果
08
09
10
视网膜血管炎： 评估病变程度和
治疗效果
视网膜色素变性： 评估病变程度和
治疗效果
视网膜遗传性疾 病：评估病变程
度和治疗效果
设备更新和优化
设备更新：随着科技的发展，眼底荧光血管 造影设备不断更新，提高了成像质量和速度
眼科特殊检查及应用(二)
根据检查方法和目的的不同，眼 科特殊检查可分为前节检查、后 节检查、屈光检查、视野检查、 电生理检查等。
检查目的和意义
01
02
03
04
目的
通过对眼部结构和功能的全面 评估，辅助眼科医生进行疾病 的诊断、治疗和预后判断。
提高诊断准确性
通过特殊检查，可以更准确地 了解眼部病变的性质、程度和 范围，为治疗提供有力依据。
常见病变
利用裂隙光源和显微镜的结合，提供 高倍放大的眼前节细节图像。
角膜炎、结膜炎、角膜异物、角膜溃 疡等。
检查步骤
调整裂隙灯的角度和宽度，观察角膜、 结膜、巩膜等眼前节结构的病变。
前房角镜检查
前房角镜的原理
利用反射镜观察前房角结构，评 估前房角的开放程度和房水流通
情况。
检查步骤
将前房角镜置于眼前，调整角度和 焦距，观察前房角的形态和细节。
同时，也可用于评估视觉认知功能和大脑皮层的视觉处理能力。
06
眼科特殊检查应用举例
青光眼诊断中的应用
视力检查
青光眼患者常有视力下 降表现，通过视力检查
可初步判断病情。
眼压测量
眼压升高是青光眼的主 要特征之一，通过眼压
测量可辅助诊断。
前房角镜检查
前房角镜检查可直接观察 前房角结构，判断前房角 是否关闭及关闭程度。
通过静脉注射荧光素，然后使用特定的滤光片和 照相机捕捉眼底血管中的荧光素流动情况，从而 评估血管的状态和病变。
检查步骤
在注射荧光素后，医生会迅速使用眼底照相机拍 摄眼底的荧光图像，然后通过计算机分析图像， 得出血管病变的结论。
适应症
眼底荧光血管造影主要用于糖尿病视网膜病变、 视网膜静脉阻塞等血管性疾病的诊断和治疗监控。
眼底荧光血管造影
荧光素的性质(一）
• 80%的荧光素与白蛋白结合， 不能发出荧光；20% 游离于血中，可被蓝光激发出荧光
• 可通过脉络膜毛细血管、Bruch’s膜、视神经、 巩膜自由扩散
• 不能穿过屏障功能正常的视网膜 、完整的色素上 皮以及大的脉络膜血管
荧光素的性质（二）
• 在静脉注射后，经肝脏代谢以及由肾脏分 泌，可将皮肤和粘膜染成黄色，同时尿液 变黄，24-36小时后才能消退
• 口 服 ： 用 于 儿 童 及 不 能 静 脉 注 射 的 成 人 ， 2530mg/kg,配成2%的水溶液口服，约5分钟后在眼底 出现荧光。
• 荧光素钠 静脉注射
荧光眼底照相原理
• 由激发滤光片产生的蓝光( 465-490nm)照射视网 膜后被荧光素所吸收
• 荧光素再发出520-530nm的黄绿色荧光 • 屏蔽滤光片只允许荧光素发出的黄绿色荧光通过，
• 吸收光在蓝光范围 (490nm) • 发射光在黄光范围 (530nm)
血-视网膜内、外屏障的存在是 FFA应用的理论基础
• 两个屏障控制液体、离子及电解质从视网膜血管 内向细胞外空间的运动
• FFA能检查血视网膜屏障的功能并做永久性记录
血-视网膜内屏障
（Inner blood-retinal barrier）
• 脉络膜和巩膜的荧光依赖于RPE的色素密度以及 它的完整性
• 黄斑区低荧光——黄斑RPE及视黄素的密度高遮 蔽脉络膜荧光
• 黄斑无血管区（FAZ ）500μm;中心凹 350μm
脉络膜荧光（背景荧光）
• 脉络膜呈小叶状结构，由睫状动脉供血，脉络膜 分片先后充盈，略早于视网膜
• 在FFA的最早期，脉络膜毛细血管很快充盈并融 合成弥漫荧光，称为背景荧光
alpha-晶体蛋白在氧诱导小鼠视网膜病变中的表达
alpha-晶体蛋白在氧诱导小鼠视网膜病变中的表达石怡;李筱荣;汪建涛;刘新玲【摘要】目的:建立氧诱导视网膜病变小鼠动物模型,研究alphaA-和alphaB-晶体蛋白在其视网膜组织中的mRNA定量表达及定位分布特点.方法:选取34只C57/BL小鼠于出生后7 d(P7)置于(75±5)％高氧状态下饲养5d,后回到正常环境中;另选取34只同日龄幼鼠作为正常对照组.采用荧光素血管灌注及视网膜铺片法观察视网膜血管形态;并行Real time RT-PCR检测alphaA-和alphaB-晶体蛋白mRNA在氧诱导模型鼠和正常视网膜组织中表达水平,免疫荧光方法检测这两种晶体蛋白在视网膜组织中的定位分布情况.结果:实验组鼠的视网膜血管形态特征为相对低氧状态下5d后(P17)在其视网膜中周部有血管区和无血管区交界处大量新生血管形成,出现周边渗漏.实验组alphaA-晶体蛋白mRNA在视网膜组织中的表达为先降低后升高的趋势,差异具有统计学意义(F=220.378,P＜0.01);实验组alphaB-晶体蛋白的表达呈现逐渐升高的趋势,但差异无统计学意义(F=0.895,P＞0.05).两种alpha-晶体蛋白阳性细胞均表达在神经节细胞、内核及外核细胞层.结论:在氧诱导视网膜病变小鼠视网膜组织中,alphaA-和ahphaB-晶体蛋白在视网膜组织中表达具有时空依赖性.%Objective: To establish the mice model in oxygen induced retinopathy (OIR) and investigate the changes of alphaA- and al- phaB-crystallin protein mRNA expression and their location characteristics in retina. Methods: 34 seven days (P7) wild type C57BL/6J mice were chosen to put in a terrarium with oxygen density of (75 ±5)% ,breeded for five days and return to normal atmosphere and 34 mice were as control ones. The vascular perfusion of fluorescein and retinal stretched preparation were used to observe the morphologic changes of retinal vessels. Realtime RT-PCR and FITC were used to observe expression of alphaA- and alphaB-crystallin protein,and the location of these proteins. Results: There was more neovascular which broke through internal limiting membrane or were near the crystal in P17 of OIR mice. Expression of alphaA-crystallin protein mRNA in OIR mice was highest on P21 and lowest on P17, there was rna statistically significant difference (F=220.378, P<0.01). Expression of alphaB-crystallin protein mRNA in OIR mice was highest on P21 and lowest on P13, there was no statistically significant difference (F=0.895, P>0.05). The expression of alphaA- crystallin were observed in the retinal ganglial cells, inner and outer nuclear cells layers. Conclusion: The retinal mRNA expressions of alphaA- and alphaB-crystallin protein in OIR and control mice are associated with time and space.【期刊名称】《天津医科大学学报》【年(卷),期】2012(018)004【总页数】5页(P432-436)【关键词】alpha-晶体蛋白;氧诱导视网膜病变;信使RNA;免疫荧光;小鼠【作者】石怡;李筱荣;汪建涛;刘新玲【作者单位】天津医科大学眼科中心眼底病科,天津300384;天津医科大学眼科中心眼底病科,天津300384;天津医科大学眼科中心眼底病科,天津300384;天津医科大学眼科中心眼底病科,天津300384【正文语种】中文【中图分类】R774.1alpha-晶体蛋白（α-crystallin）属于小分子热休克蛋白（small heat shock proteins,sHSPs）家族，其在应激反应中维持细胞必需的蛋白质构象，而且在蛋白质聚集折叠、跨膜转运、移位、细胞骨架稳定等方面均发挥重要的功能。
oir小鼠模型原理
oir小鼠模型原理当我们谈论OIR（Oxygen-Induced Retinopathy，氧诱导性视网膜病变）小鼠模型时，我们指的是一种用于研究视网膜血管发展和病理性视网膜血管增生的动物模型。
视网膜是人类眼睛中充血血液的供应者，而OIR小鼠模型被广泛地用于研究因过氧化氢引起的新生血管生成。
在该模型中，小鼠在出生几天后被暴露在高氧环境中，导致其视网膜中的血管发育异常。
高氧环境刺激下，正常的视网膜血管发育停止，在眼底形成了一种中心性的虚拟缺血。
通常情况下，眼底组织会释放大量休克蛋白、细胞因子和生物标志物，该刺激会引起一系列可控制的生物化学和分子改变。
当小鼠再次处于正常的氧含量环境中时，虚拟缺血部位的缺氧诱发了新生血管的生成，与人类视网膜病变相关。
该模型的主要优点之一是它能够模拟人类视网膜病变的发展和治疗。
视网膜是人眼中最内层的光敏结构，也是感光细胞所在的位置。
然而，由于视网膜的特殊结构，它对氧气含量的要求非常高。
在OIR小鼠模型中，通过改变小鼠最初的氧气含量，模拟了新生婴儿视网膜在过度氧化应激下的发育过程。
这种模拟有助于研究与致盲性疾病相关的病理生理学和分子机制。
此外，OIR小鼠模型还具有可重复性和可控性的优势。
通过控制小鼠在高氧环境中的暴露时间和氧气浓度，可以实现对小鼠视网膜的一致损伤，并在相同的条件下进行多次试验。
这种可重复性有助于研究人类视网膜病变的不同方面，包括血管异常和新生血管生成。
然而，OIR小鼠模型也存在一些限制。
首先，该模型不能直接反映人类视网膜病变的所有特征。
尽管高氧暴露可以诱导视网膜的缺血和新生血管生成，但人眼中的视网膜疾病通常是多个因素的结果。
因此，研究人员需要结合其他实验方法和模型来更全面地研究视网膜病变的机制。
此外，OIR小鼠模型对条件的严格要求可能使其在实际应用中有一定局限性。
包括控制小鼠环境、氧气浓度和次数等几个因素，而且模型中所用仪器设备较为复杂，需要专业的操作技术。
眼底荧光血管造影及光学相干断层扫描在挫伤性视网膜损伤中的临床应用
摘要 ： 目的 ： 探 讨 挫 伤 性 视 网 膜损 伤 患 者 眼 底 荧光 血 管 造 影 （ Ｆ Ｆ Ａ） 及 光 学相 干 断层 扫 描 （ Ｏ Ｃ Ｔ） 的 应 用价 值 。 方 法： 对８ ３ 例 １ ０ ８ 眼 眼挫 伤 分 别 经 Ｆ Ｆ Ａ及 ０ Ｃ Ｔ 检 查 并进 行 分析 。 结果 ： 视 网膜 震 荡表 现 轻 ， 预后较好 ， 而视 网 膜 挫伤 表 现 重预 后 差 。 结论 ： 对 于眼 挫 伤 都 应 常规 检 查 眼 底 ， 条件 允许 的情 况 下 都要 行 Ｆ Ｆ Ａ 及 ０Ｃ Ｔ检 查， 他们 是评 价 视 网膜 损 伤 的 有效 客 观 工 具 。
≥０ 力 击 中 眼球 可 产 生 直 接 损 伤 和 间 接 损 伤 ， 直 接 的 损 伤 可 使 眼球 变形 ， 钝力通过 眼球 内部组织 及球壁 的传 递 ， 在压力 轴 上挤 压 眼球 并 在 垂 直 平 面 上 拉 伸 组 织 ， 而 引起 间 接 损 伤 。 视 网膜 震 荡 在 视 网 膜 可 出 现 灰 白色 水 肿 区 ． 改变 并不 明显 ； 视网膜挫伤 表现为视 网膜变 白明显 ， 出血较 常见 ， 可 伴 有 渗 出。 二 者 均 可 以使 视 功 能 受 到 不 同 程 度 损 害 ， 这 是 因 为 眼 球 挫 伤后 ， 导 致 视 网膜 脉 络 膜 损 伤 ， 外 屏 障功 能 遭 到破 坏 ， 具 体 为视网膜 脉络膜血管 发生痉 挛收缩 ， 故使相应 组织缺血 、 缺 氧、 坏死 ， 继 而 出 现视 网 膜 静 脉 及毛 细 血 管 扩 张 ， 从 而 通 透 性
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眼底荧光素血管造影在小鼠氧诱导视网膜病变中的应用评价李蓉;常远【摘要】目的：：在小鼠氧诱导视网膜病变模型( oxygen-induced retinopathy,OIR )中评价眼底荧光素血管造影( fundus fluorescein angiography,FFA)的应用价值。
方法：将前期实验证实视网膜病变严重程度有明显差异的两组( B组>A组)各12只新生幼鼠于出生后第7 d置于75％浓度氧环境中,第12 d时返回正常空气环境中饲养。
第17 d时将A组和B组的幼鼠均随机分配,分别进行FFA检查或高分子量FITC-Dextran灌注结合视网膜铺片检查,即每种检查方法纳入两组幼鼠各6只,利用图像分析软件对视网膜无灌注区进行定量分析和比较。
结果：FFA结合图像分析软件能对视网膜无灌注区进行定量分析,与FITC-Dextran灌注结合视网膜铺片的测量结果有良好的可比性,两种方法得到的结果无统计学差异(P>0.05)。
结论：FFA结合图像定量分析在小鼠OIR模型的血管病变评价中具有一定的实用价值。
%AIM:To investigate avascuIopathy-evaIuating method using fundus fIuorescein angiography ( FFA) in mice with oxygen-induced retinopathy ( OIR) . METHODS:OIR modeI was induced by exposure of mice from groups A and B ( the retinopathy was known to be more severe in group B than that in group A by previous research) to high oxygen (75%) from postnataI day 7 (P7) to P12 (n=12 for each group) and returned to normaI environment at P12. On P17, the mice from both groups were randomIy assigned to accept FFA or high moIecuIar weight fIuorescein isothiocyanate dextran ( FITC - Dextran ) perfusion combined with stretched preparation of retina( each method invoIved 6 pups from each group ) . The retinaI non - perfused areas werequantified and compared by using image anaIysis software.RESULTS:FFA combined with image anaIysis software was abIe to quantify the retinaI non-perfused areas, which was comparabIe to the resuIts anaIyzed by FITC-Dextran perfusion combined with stretched preparation of retina. No statisticaI difference was found between the resuIts obtained by the two methods (P>0. 05). CONCLUSION:FFA combined with image quantification anaIysis can be used in retinaIvascuIopathy evaIuation in mouse OIR modeI.【期刊名称】《国际眼科杂志》【年(卷),期】2016(000)001【总页数】4页(P41-44)【关键词】氧诱导视网膜病变;眼底荧光素血管造影;血管病变;定量分析【作者】李蓉;常远【作者单位】710077 中国陕西省西安市，西安医学院第一附属医院眼科;710021 中国陕西省西安市，西安医学院五官科教研室【正文语种】中文·实验研究·Evaluation of fundus fluorescein angiography in mice with oxygen-induced retinopathyCitation:Li R, Chang Y.Evaluation of fundus fluorescein angiography in mice with oxygen-induced retinopathy.GuojiYankeZazhi(IntEyeSci)2016;16(1):41-44目的：在小鼠氧诱导视网膜病变模型(oxygen-induced retinopathy，OIR)中评价眼底荧光素血管造影(fundus fluorescein angiography，FFA)的应用价值。
方法：将前期实验证实视网膜病变严重程度有明显差异的两组(B组>A组)各12只新生幼鼠于出生后第7d置于75%浓度氧环境中，第12d时返回正常空气环境中饲养。
第17d时将A组和B组的幼鼠均随机分配，分别进行FFA检查或高分子量FITC-Dextran灌注结合视网膜铺片检查，即每种检查方法纳入两组幼鼠各6只，利用图像分析软件对视网膜无灌注区进行定量分析和比较。
结果：FFA结合图像分析软件能对视网膜无灌注区进行定量分析，与FITC-Dextran灌注结合视网膜铺片的测量结果有良好的可比性，两种方法得到的结果无统计学差异(P>0.05)。
结论：FFA结合图像定量分析在小鼠OIR模型的血管病变评价中具有一定的实用价值。
引用：李蓉，常远.眼底荧光素血管造影在小鼠氧诱导视网膜病变中的应用评价.国际眼科杂志2016;16(1):41-44通过对动物品系及吸氧浓度等关键环节的逐步改良，20世纪90年代由Smith等[1]学者建立的小鼠氧诱导视网膜病变(oxygen-induced retinopathy，OIR)模型较为稳定，可重复性好，已被广泛用于早产儿视网膜病变(retinopathy of prematurity，ROP)的基础研究。
OIR的成模机制是将新生小鼠置入高氧环境，其发育不成熟的视网膜血管发生痉挛收缩、闭塞，在后极部形成无灌注区；返回常氧环境后，视网膜处于相对缺氧状态，引起血管内皮细胞增殖，最终形成病理性新生血管。
此新生血管反应可较好地模拟一些视网膜疾病的病理过程，因此，OIR 小鼠模型也成为糖尿病视网膜病变、视网膜静脉阻塞等缺血性视网膜病变的重要研究平台。
对视网膜病变能够进行定量分析是OIR模型成功应用于ROP病理机制和治疗方法研究领域的关键。
目前对OIR视网膜血管病变的观察方法主要包括眼底荧光素血管造影(fundus fluorescein angiography，FFA)、荧光素异硫氰酸葡聚糖(fluorescein isothiocyanate，FITC)-Dextran灌注联合视网膜铺片、视网膜铺片荧光标记的Lectin血管染色等。
FFA是临床观察视网膜血管形态的重要手段，因缺乏定量评价指标，因此在OIR模型中的应用相对少于以上另两种方法。
本研究探索了FFA应用于OIR的一种病变定量分析方法，旨在为此类基础实验提供一种新的评价手段。
1.1材料1.1.1动物及分组由西安医学院动物实验中心提供健康C57BL/6J孕鼠。
在光照/暗室周期12h/12h、背景噪音40±10db、温度20℃～24℃、自由饮水和进食的条件下饲养。
实验动物及条件符合国家科学技术委员会颁布的《实验动物管理条例》。
将24只小鼠分为A组和B组，每组各12只，根据前期实验结果[2]，已知B组的OIR病变比A组严重。
A组和B组均建立OIR模型，将每组的小鼠随机分配接受FFA检查或FITC-Dextran灌注。
1.1.2 主要试剂和仪器体式显微镜(德国Zeiss公司)，激光共聚焦显微镜(日本Olympus公司)，光学显微镜(德国Leica公司)，FITC-Dextran(分子量为2 000 000Da，美国Sigma公司)，共焦激光眼底血管造影仪(德国Heidelberg公司)。
1.2方法1.2.1 OIR模型建立将C57BL/6J新生幼鼠及哺乳母鼠于出生后第7d(P7)置于透明的密闭动物氧箱饲养，箱体内氧分压维持为(75±1)%，氧气流量控制在1.5L/min，期间采用氧气分析仪监测容器内的氧分压。
控制室温在(22±2)℃。
正常日光照明，每2d打开氧箱更换垫料，加饲料及更换饮用水。
出生后第12d(P12)时取出幼鼠及母鼠置正常空气中饲养5d。
昼夜时间交替维持12h/12h。
1.2.2 FFA检查及结果判定小鼠于P17时行FFA检查。
腹腔注射0.5%戊巴比妥钠(50mg/kg)麻醉后散瞳，将20%荧光素钠注射液稀释至2%，腹腔注射0.15mL 后立即开始计时，3min时开始用共焦激光眼底血管造影仪记录造影的影像，观察时间不少于注射后6～8min。
尽可能获取全视网膜图像，在拼图状态下由对实验分组不知情的人员利用Photoshop CS3软件对视网膜无灌注区的像素进行测量，利用一个采图视野(一个圆的面积)作为基准区像素，设定视网膜无灌注区面积比例=无灌注区像素/基准区像素(具体方法见结果部分)。
A、B两组各选择6只小鼠用于统计分析。
1.2.3 FITC-Dextran血管灌注及视网膜铺片经腹腔注射0.5%戊巴比妥钠(50mg/kg)麻醉P17小鼠，待疼痛反射消失后固定四肢，眼科剪打开胸腔，暴露心脏，头皮针针头自左心尖插入左心室并推入主动脉，小心剪开右心耳，缓慢推注0.9%的生理盐水约10mL，观察双肺无膨胀，口鼻无出血或水，肝脏等组织逐渐变为白色。
灌注分子量2000000Da的FITC-Dextran 1mL(50mg/mL，溶于PBS 中)，肝脏、结膜等组织变为黄绿色为灌注正确。
立即摘除眼球，在4%多聚甲醛中固定3h。
在体式显微镜下沿角巩膜缘剪下角膜及虹膜组织，娩出晶状体和玻璃体，将视网膜感觉层与色素上皮层分离，去除巩膜，将视网膜感觉层在PBS液中漂洗3次，清除残存的玻璃体，以视乳头为中心，将杯状视网膜放射状剪为4瓣，平铺于载玻片上，滴少量甘油后加盖玻片，激光共聚焦显微镜观察和照相记录。