菠菜中色素的提取预习实验报告

实验名称：菠菜中的色素提取

一：实验目的：了解薄层色谱在有机物分离中的应用，掌握薄层色的基本原理；加强有机物分离提纯技术的训练。

二：实验基本原理：菠菜的叶片中含有叶绿素（包括叶绿素a和叶绿素b）、叶黄素及胡萝卜素等天然色素。叶绿素是绿色植物的主要色素，分子由脱镁叶绿素母环、叶绿酸、叶绿醇、甲醇、二价镁离子等部分构成。高等植物中有两种叶绿素即叶绿素a和叶绿素b共存，叶绿素a为一蓝黑色固体粉末，在乙醇溶液中为蓝绿色，并有深红色荧光。而叶绿素b为暗绿色固体粉末，其乙醇溶液为黄绿色，并有红色荧光。叶绿素不溶于水，易溶于有机溶剂，常可用极性有机溶剂，例如丙酮、乙醇、乙酸乙酯等。从植物匀浆中提取它。叶绿素存在于植物细胞的叶绿体中，与类胡萝卜素、类脂物质及脂蛋白复合在一起，分布在叶绿体内的蝶形体的片层膜上。胡萝卜素是一种橙色的天然色素，属于四萜类，为一长链共轭多烯。有α、β、γ三种异构体，其中β异构体最多。叶黄素是一种黄色色素，与叶绿素同存在与植物体内，是胡萝卜素的羟基衍生物，较易溶于乙醇，在石油醚中溶解度较小。根据

它们的化学特性，可将它们从植物叶片中提取出来，并通过萃取、沉淀和色谱方法将它们分离出来。色谱法的基本原理是利用混合物中各组分在某一物质中的吸附或溶解性能的不同，或和其它亲和作用性能的差异，使混合物的溶液流经该种物质，进行反复的吸附或分配等作用，从而将各组份分开。薄层层析是一种微量、快速和简便的色谱方法。由于各种化合物的极性不同，吸附能力不相同，在展开剂上移动，进行不同程度的解析，根据原点至斑点中心及展开剂前沿的距离，计算比移值。化合物的吸附能力与它们的极性成正比，具有较大极性的化合物吸附较强。在给定的条件下（吸附剂、展开剂、板层厚度等），化合物移动的距离和展开剂移动的距离之比是一定的，即Rf值是化合物的物理常数，其大小只与化合物本身的结构有关,因此可以根据Rf值鉴别化合物。

五、实验简单操作步骤

1、制板将硅胶加0.8%CMC溶液，调成浆状，将其余涂在载玻片上，并使其平坦，放在干净平坦的台面上，晾干之后放入105 ℃

烘箱活化1h，取出放入干燥器内待用。

2、叶绿素的提取在研钵中放入几片菠菜叶。加入10mL2:1石油醚和乙醇混合液，适当研磨。将提取液用滴管移至分液漏斗中，加入10mL 饱和NaCl溶液除去水溶性物质，分去水层，再用蒸馏水洗涤两次。将有机层干燥的小锥形瓶中，加入无水硫酸钠干燥。干燥后的液体倾至另一锥形瓶中。

3、点样用一根内径1mm的毛细管，吸取适量提取液，轻轻地点在距薄板一端1cm 处，平行点两点，两点相距1cm 左右。可多点几次，但点样斑点直径不得超过2mm.

4、展开先在展开槽中放入展开剂，加盖使缸内蒸气饱和10min,再将薄层板斜靠于展开槽内壁。点样端家畜展开剂但样点不能浸没于展开剂中，密闭展开槽。待展开剂上升到距薄层板另一端约1cm时，取出平放，用铅笔或小针划前沿线位置，晾干薄层板。

5、分离如需提取色素，可分别将不同组分的薄层板硅胶小心挂下，收集同组分的硅胶于小锥形瓶中，用有机溶剂浸泡后，将硅胶过滤掉。有机溶剂蒸干即可得到不同组分的色素。

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