生物样品的采集制备和预处理
生物样品的采集制备和预处理生物样品的采集制备和预处理
一、生物样品采集
1、植物样品的采集
（1）采集的植物样品要具有代表性、典型性、适时性。
（2）布点方法
常采纳梅花形五点取样法或交叉间隔取样法。
（3）采样方法
①采样前应预先准备好采样工具。
②依据实际情况确定样品采样量。
③选择优势莳植物在采样区内按梅花形五点或交叉间隔取样方式采集5－10处的植株混合构成一个代表样品。
④将采好的样品装入布口袋或聚乙烯塑料袋中，贴好标签，并填写采样登记表。
2、动物样品的采集
（1）尿的采集
定性检测尿液成分时应采集晨尿。
定量检测尿液成分时一般采集24h总排尿量。
（2）血液的采集
一般用注射器抽取10mL血样冷藏备用。常用于分析血液中所含
金属毒物及非金属毒物。
（3）毛发和指甲的采集
采集和保存较为便利，重要用于汞、砷等含量的测定。
（4）组织和脏器采集
二、生物样品的制备
对于液体状态的动物样品常无需制备，对动物组织和脏器重要
是采纳捣碎的方法制成浆状鲜样备用，而对植物样常依据不怜悯况，利用不同方式进行样品制备。
植物样品的制备
（一）平均样的获得
四分法、切成块的1/4－1/8混合
（二）分析试样的制备
1、鲜样
2、风干样：60－70摄氏度低温真空干燥箱中烘干（匀浆、小片）
3、水分含量测定（100－105摄氏度烘干/真空干燥/低温烘干）
三、生物样品的预处理
常用的预处理方法有湿法消解法、灰化法、提取、分别和浓缩法等。
1、湿化消解法
利用强酸等与生物样品共同煮沸，将样品中有机物分解成二氧化碳和水除去。
常用的消解试剂体系有浓硝酸－高氯酸、浓硝酸－浓硫酸、浓硫酸－过氧化氢等。
2、灰化法
利用坩埚或氧燃烧瓶，使样品在高温条件下分解，并用适当的溶液溶解或汲取分解产物，制成分析试液。
3、提取法
整个过程包括提取、分别、浓缩三个步骤。
（1）提取
应依据样品的特点、待测组分的性质、存在形态和数量、分析方法等因素选择，常用方法有：
1、振荡提取法
2、组织捣碎提取法
3、脂肪提取器提取
4、直接球磨提取法
（2）分别
用提取剂从生物样品中提取欲测组分的同时，不可避开的会将
其他相关组分提取出来，因此，在测定之前，还必需将上述杂质分
别出去。常用的分别方法有：液－液萃取法、层析法、磺化法、低
温冷冻法、吹蒸法、液上空间法等。
（3）浓缩
当生物样品的提取液经过分别净化后，其中的污染物浓度往往
仍达不到分析方法的要求，需要进行浓缩和富集，常用方法有：蒸
馏或减压蒸馏法、K—D浓缩器浓缩法、蒸发法、真空冷冻干燥法等。
生物样品的采集制备和预处理
生物样品的采集制备和预处理生物样品的采集制备和预处理 一、生物样品采集 1、植物样品的采集 （1）采集的植物样品要具有代表性、典型性、适时性。 （2）布点方法 常采纳梅花形五点取样法或交叉间隔取样法。 （3）采样方法 ①采样前应预先准备好采样工具。 ②依据实际情况确定样品采样量。 ③选择优势莳植物在采样区内按梅花形五点或交叉间隔取样方式采集5－10处的植株混合构成一个代表样品。 ④将采好的样品装入布口袋或聚乙烯塑料袋中，贴好标签，并填写采样登记表。 2、动物样品的采集 （1）尿的采集 定性检测尿液成分时应采集晨尿。 定量检测尿液成分时一般采集24h总排尿量。
（2）血液的采集 一般用注射器抽取10mL血样冷藏备用。常用于分析血液中所含 金属毒物及非金属毒物。 （3）毛发和指甲的采集 采集和保存较为便利，重要用于汞、砷等含量的测定。 （4）组织和脏器采集 二、生物样品的制备 对于液体状态的动物样品常无需制备，对动物组织和脏器重要 是采纳捣碎的方法制成浆状鲜样备用，而对植物样常依据不怜悯况，利用不同方式进行样品制备。 植物样品的制备 （一）平均样的获得 四分法、切成块的1/4－1/8混合 （二）分析试样的制备 1、鲜样 2、风干样：60－70摄氏度低温真空干燥箱中烘干（匀浆、小片） 3、水分含量测定（100－105摄氏度烘干/真空干燥/低温烘干）
三、生物样品的预处理 常用的预处理方法有湿法消解法、灰化法、提取、分别和浓缩法等。 1、湿化消解法 利用强酸等与生物样品共同煮沸，将样品中有机物分解成二氧化碳和水除去。 常用的消解试剂体系有浓硝酸－高氯酸、浓硝酸－浓硫酸、浓硫酸－过氧化氢等。 2、灰化法 利用坩埚或氧燃烧瓶，使样品在高温条件下分解，并用适当的溶液溶解或汲取分解产物，制成分析试液。 3、提取法 整个过程包括提取、分别、浓缩三个步骤。 （1）提取 应依据样品的特点、待测组分的性质、存在形态和数量、分析方法等因素选择，常用方法有： 1、振荡提取法 2、组织捣碎提取法
样品的采集和处理
第一章样品的采集和处理 1范围 本章规定了用于人免疫缺陷病毒（HIV）检测的全血、血清、血浆、细胞、唾液、尿液以及滤纸干血斑（DBS）样品的采集和处理方法，适用于HIV抗体检测、抗原检测、核酸检测、耐药检测,CD4+和CD8+T淋巴细胞测定和HIV分离培养。 2规范性引用文件 《艾滋病和艾滋病病毒感染诊断标准》中华人民共和国卫生行业标准WS293-2008 《艾滋病病毒感染者及艾滋病患者CD4+T淋巴细胞检测质量保证指南（试行）》（中国疾病预防控 制中心，2006年2月） 《HIV-1病毒载量测定及质量保证指南（试行）》（中国疾病预防控制中心，2008年2月）Guidelines for Using HIV Testing Technologies in Surveillance WHO/CDS/CSR/EDC/2008 《可感染人类的高致病性病原微生物菌（毒）种或样本运输管理规定》，卫生部第45号令2006年2月1日 3样品种类及相应的用途 3.1全血、血清、血浆、唾液、尿液以及DBS样品可用于HIV抗体检测。 3.2抗凝全血可用于CD4+和CD8+T淋巴细胞测定。 3.3血浆可用于HIV-1病毒载量、基因型及耐药检测。DBS样品可用于HIV-1基因型及耐药检测。 3.4全血、血浆、淋巴细胞富集液、外周血淋巴细胞（PBMC）及DBS样品可用于HIV核酸的定性检测。 3.5PBMC、全血、淋巴细胞富集液等可用于HIV-1分离培养。 4操作步骤 4.1采样前准备 根据检测项目的具体要求，确定采集样品的种类、处理、保存及运输的时限和方法，按照临床采血技术规范的要求操作，遵守生物安全要求（参见本规范第八章实验室生物安全）。 要检查所需物品是否已备齐，是否在有效期内，有无破损，是否足量，特别应检查受检者信息与样品容器表面的标记是否一致，并注明样品采集时间。选择合适的室内（外）采血空间，受检者坐（卧）于合适的位置，准备采血用具、皮肤消毒用品、采血管及试管架、硬质废弃物容器等。 4.1.1样品的编码和记录 4.1.2应制定样品编码的标准操作程序（SOP），规定样品编码的原则和方法，为样品制定唯一性编码（编号），保证其唯一性。 4.1.3采血前，先对装有样品的离心管或滤纸进行标记，核对后编码。要将标签贴在试管的侧面，最好使用预先印制好的、专门用于冷冻储存的耐低温标签。 4.1.4应使用专门的样品记录本或登记表记录样品，同时录入电脑保存。 4.2采集和处理样品 4.2.1血液 4.2.1.1抗凝全血：消毒局部皮肤，用加有抗凝剂（EDTA钠盐或钾盐、枸橼酸钠、肝素钠）的真空采血管抽取适量静脉血，或用一次性注射器抽取静脉血，转移至加有抗凝剂的试管中，轻轻颠倒混匀6～8次，备用。
卫生化学笔记：样品的采集 样品的预处理
样品的采集 一、卫生分析样品的特点 1.品种繁多 （空气、水、土壤、食品、日用化学品、生物材料样品） 2.待测物质众多 （无机物、有机物；毒物、营养物质） 3.样品基体复杂，干扰物多 （有机物与无机物混杂） 4.待测组分含量低。（待测物含量水平为微量、痕量、超痕量） 二、样品的采集概述 采样的三原则 1.代表性 2.典型性 3.稳定性 固体样品的采集：四分法 将样品按照测定要求磨细，过一定孔径的筛子，然后混合，平铺成圆形，分成四等分，取相对的两份混合，然后再平分，直到达到自己的要求 液体样品的采集： 化学成分易受化学、物理及生理条件变化的影响。 气体样品的采集： 样品的温度和压力是十分重要的参数 三、各类样品的采集与保存 （一）空气样品的采集与保存 v 待测物质在空气中存在状态： 气体和蒸气 气溶胶（颗粒物质，尘、烟、雾） v 采集方法可分为两大类： 直接采集法 浓缩采集法 v 方法选择依据： 待测物状态 待测物浓度 测定方法灵敏度 1.采集方法 直接采样法：注射器采样法；塑料袋采样法；真空采样法；置换采样法 不适用于采集气溶胶状态的污染物 浓缩采样法：固体吸附法；液体吸收法；滤纸和滤膜阻流法；冷阱收集法 固体吸附法：气态、蒸汽态物质。吸附剂有硅胶、活性炭、分子筛等。 液体吸收法： 气泡吸收管：气态、蒸汽态 多孔玻板吸收管：气态、蒸汽态、雾态
冲击式吸收管：烟、尘、气溶胶 滤纸和滤膜阻流法：气溶胶，烟、尘样品微孔滤膜，超细玻璃纤维滤纸，定量滤纸 冷阱收集法：低沸点物质冷冻剂：冰，冰-食盐，干冰-乙醇，干冰，液氮等 2.采集仪器 收集器 流量计 抽气动力装置 3.采集点的布设 大气监测布点原则：选择有代表性区域；选风向的上风口；选不同污染物的地；采集高度离地1.5-2.0m；采集条件尽量一致。 作业场所采集点：选有代表性工作地点；尽可能靠近劳动者；正常工作状态；有害物浓度最高时段；一般不超过15min。 室内空气采样点：数量依面积定；避开通风口；离墙50cm以上，离门窗家具1m以上；室外1-2个点对照。 4.空气样品的运输与保存：避开高温、强光；防治错漏；包装用泡沫塑料分隔；保质期前测定。 （二）水样的采集与保存 1.采样仪器 水桶、单层采水瓶、深层采水瓶、急流采水瓶、采水泵 存水容器：聚乙烯瓶或桶、硬质玻璃瓶、不锈钢瓶。 2.采样点的设置 2.1 地表水： 江河水、湖泊水、水库水背景断面、控制断面、消减断面 2.2 生活饮用水： 水源水：表层水；泉水和井水 出厂水 末梢水 二次供水 2.3 城市污水和工业废水 2.4 地下水 3.采样量 单项分析：500-1000ml 一般理化分析：2-3L 检测项目多时：5-10L 4.采样时间和频率
生物样品处理与准备技术
生物样品处理与准备技术 生物样品处理与准备技术是生物分析领域中至关重要的一个环节。准确、高效 的生物样品处理和准备能够保证实验结果的可靠性和科学性。本文将从样品的采集、处理、保存、运输等方面，阐述生物样品处理与准备技术的重要性以及常见的技术方法。 一、样品采集 1. 血样采集 血样是临床诊断和分子生物学研究中常用的生物样品之一。采集前，需对患者 进行详细询问，了解患者的基本信息和特殊情况，如用药史、饮食状况、疾病史、妊娠状况等。采集血样应选用无菌一次性采集器，在采集时注意消毒，避免污染。不同的研究需要采集不同的血液，如血清、血浆、全血等，在采集时要根据实验需求选择。 2. 尿样采集 尿样是体内代谢产物的主要排泄途径之一，通常可反映出人体内代谢情况和某 些疾病的发生。尿样采集的时候，需避免与外界污染，彻底清洗外阴部，利用干净的尿杯采集中段尿标本，最后尽量避免采集尿废液。 3. 组织样本采集 组织样本采集是分子生物学和生物医学研究中常用的方法之一。组织样本采集 涉及到手术切除、活体穿刺等操作，需遵循医学伦理规范，在手术过程中严格按照规定进行操作，最大程度地减少对病人的损害。 二、样品处理 1. 血液处理
血液的处理方法根据实验需求不同而有所差异。如需采集血清和血浆，则需将 采集到的血液置于无菌试管中， allow the blood samples to clot (at least 30 minutes) before centrifuging and separating the layered components of the blood.血小板在血液中 的浓度很高，若需分离出血清和血浆，则需将血液存放在4℃以下进行预处理。 2. 细胞处理 细胞是高度特异性结构和机能的小型独立体，处理细胞样本时需要注意样本数量、细胞纯度和细胞处理的顺序。分离细胞时可通过培养物法、悬液细胞法等方法，若需测定细胞内的某些物质，则需迅速离心剩余的胞体并彻底洗涤胞体，以免干扰实验结果。 3. DNA、RNA处理 DNA、RNA是生物体内的核酸，常用于分子生物学、基因工程等领域的研究。DNA、RNA的处理方法既涉及到样品的提取，也涉及到提取后的纯化。常见的DNA或RNA的提取方法包括酚-氯仿甲醛法、离心管法、磁珠法等。 三、样品保存和运输 1. 样品保存 样品保存可直接影响实验结果的科学性，常用的保存方法包括：低温保存法、 冻干法、加保护剂法等。其中，低温保存法是最常用的方法，通过将样品置于低温（-80℃）保存，能够保证样品的活性和完整性。 2. 样品运输 样品的运输也很重要，在样品的运输过程中要注意避免样品的温度变化、污染 和振动等不利因素。常见的样品运输方式有冰箱运输、速递等方式。 综上所述，生物样品处理与准备技术是一个十分复杂和关键的环节。正确认识 和操作样品处理与准备技术，能够保证实验结果的准确可靠。在进行生物实验时，
生物实验中的样本处理和保存技巧
生物实验中的样本处理和保存技巧 在生物学研究中，样本处理和保存是非常重要的环节。正确的样本处理和保存技巧可以确保实验结果的准确性和可靠性。本文将介绍一些常用的样本处理和保存技巧，帮助研究人员在实验中取得更好的结果。 一、样本处理技巧 1. 采样时的注意事项 在采集样本时，要注意避免污染和损伤。使用无菌手套和工具，以避免细菌和其他污染物的引入。此外，样本应该尽快采集并尽量避免长时间的暴露在环境中，以减少样本的降解。 2. 样本预处理 在进行实验之前，需要对样本进行预处理。对于液体样本，可以通过离心来去除固体颗粒和细胞。对于固体样本，可以使用切割或研磨的方法将其打碎，以便后续的实验操作。 3. 样本保存液的选择 为了保持样本的完整性和稳定性，选择适当的保存液是至关重要的。常用的保存液包括缓冲液、甘油溶液和冷冻保护剂等。选择保存液时，要根据不同的实验目的和样本类型进行选择。 4. 样本的冷冻和解冻 对于需要长期保存的样本，冷冻是常用的方法。在冷冻之前，应将样本放入冷冻管中，并将其迅速放入液氮或低温冰箱中。解冻时，应将样本放置在冰上缓慢解冻，以避免样本的损伤。 二、样本保存技巧
1. 长期保存的样本 对于需要长期保存的样本，如细胞系、DNA和蛋白质等，应选择适当的保存 温度和保存容器。一般来说，低温冰箱或液氮罐是常用的保存设备。同时，选择耐高温和耐腐蚀的保存容器，如冻存管或冻存盒。 2. 样本标签和记录 为了避免样本的混淆和丢失，样本的标签和记录非常重要。在保存样本时，应 在保存容器上标注清楚样本的编号、名称和保存日期等信息。同时，建立样本记录表格，记录每个样本的详细信息，以便后续的查询和使用。 3. 定期检查和维护 保存样本的设备和容器需要定期检查和维护，以确保其正常运行和保存效果。 定期检查温度计和液氮水平计等设备的准确性，并及时更换老化的保存容器，以避免样本的损失。 4. 分享和交流 在保存样本的同时，研究人员也应该与同行进行分享和交流。建立样本库和数 据库，将样本信息和实验结果共享给其他研究人员，以促进科学研究的进展和合作。 综上所述，样本处理和保存是生物实验中不可忽视的重要环节。正确的样本处 理和保存技巧可以确保实验结果的可靠性和重复性。通过遵循采样时的注意事项、样本预处理、选择适当的保存液和保存温度、样本标签和记录、定期检查和维护等步骤，研究人员可以更好地处理和保存生物样本，为科学研究提供可靠的基础。
生物化学实验中的样本处理技巧
生物化学实验中的样本处理技巧生物化学实验中的样本处理是一个至关重要的步骤，它直接影响到实验结果的准确性和可靠性。在进行生物化学实验时，样本处理技巧的正确应用可以最大程度地避免操作错误，提高实验的成功率。下面将介绍几种常用的生物化学实验中的样本处理技巧。 一、样本的收集和保存 在进行生物化学实验之前，首先需要收集合适的样本并妥善保存。样本的收集要注意防止杂质和污染的产生，应使用干净的器皿进行采集。对于液体样本，可以使用无菌的容器进行贮存，同时要注意避免样本的暴露在高温和阳光下。 二、样本的预处理 在进行生物化学实验之前，有些样本需要进行预处理，以去除其中的杂质或者不需要的成分。例如，血液样本可以通过离心分离血清或血浆，在得到纯净的样本后再进行后续实验操作。对于固体样本，如组织或细胞，可以使用适当的方法将其研磨或者裂解，并用适当的缓冲液进行悬浮。 三、样本的提取和纯化 许多生物化学实验需要从样本中提取目标分子或物质，如DNA、RNA、蛋白质等。样本的提取和纯化是一个复杂的过程，需要根据不同的实验目的选择合适的提取方法。常用的提取方法包括酚/氯仿、醇
沉淀、离心和柱层析等。在提取和纯化过程中，要注意操作的温度、 pH值和离心速度等条件，以确保获得高质量的样品。 四、样本的浓度测定 在进行生物化学实验之前，经常需要对样本进行浓度的测定。常用 的方法有分光光度法、比色法和荧光法等。这些方法可以根据样本中 目标分子或物质的特性和浓度范围来选择最适合的测定方法。在进行 浓度测定时，要注意样本的稀释和合适的操作条件，以确保测定结果 的准确性和可靠性。 五、样本的分装和保存 在完成实验后，剩余的样本需要进行适当的保存，以备后续实验或 进一步分析使用。对于液体样本，可以使用冷冻管或离心管进行分装，并存放在低温冰箱中。对于固体样本，可以使用密封的容器进行贮存，同时要避免样本与空气接触和湿气的进入。 综上所述，生物化学实验中的样本处理技巧对实验结果的准确性和 可靠性具有重要影响。正确的样本处理操作包括样本的收集和保存、 样本的预处理、样本的提取和纯化、样本的浓度测定以及样本的分装 和保存等。合理应用这些技巧可以确保实验结果的准确性，为进一步 的实验操作和分析提供可靠的样本基础。
生物样品预处理的原理
生物样品预处理的原理 生物样品预处理涉及到对生物样品中的杂质、干扰物以及与实验目的无关的成分进行去除和处理，以保证实验结果的准确性和可靠性。生物样品预处理的主要原理包括样品的选择与采集、样品的保存与保护、样品的前处理步骤等。 首先，生物样品的选择与采集是生物样品预处理的第一步。根据实验的需要和目的，选择合适的生物样品进行采集。生物样品的选择要基于样品的来源、适应实验的要求以及研究的目标等因素进行综合考虑。例如，对于研究人类血液中特定物质的含量，可以选择采集血液样本作为研究对象。样品采集的方法和技术也应根据实验的要求选择，包括无菌采集、活体采集、组织切割或取样等。 其次，样品的保存与保护是生物样品预处理的重要步骤。样品的保存和保护可以避免样品在采集后发生腐败、分解、变质等现象，确保样品的完整性和稳定性。常见的样品保存方法包括低温保存、冷冻保存、真空保存、避光保存等。对于涉及酶、蛋白质和核酸等生物分子的实验，常采用低温冰箱或液氮保存样品，以避免生物分子的降解和失活。 第三，样品的前处理步骤是生物样品预处理的关键环节之一。在实验分析之前，通常需要对样品进行一系列的处理步骤，以去除杂质、净化样品或改变样品的性质，以满足后续实验的需求。常见的前处理步骤包括离心沉淀、超滤、脱色、溶解、稀释等。离心沉淀可以去除悬浮物、沉淀物和大分子物质，使样品更纯净。超滤可以去除大分子，提取溶液中的小分子成分。脱色可以去除样品中的色素、
杂质和自动发生的化学反应产物。溶解可以将样品溶解到适当的溶液中，以满足后续实验的需要。稀释可以调整样品的浓度和组分比例，以便于后续分析或实验。 此外，为保证样品预处理的准确性和可靠性，还需要注意以下几点。一是实施严格的质量控制措施，包括使用消毒剂消毒实验室设备、无菌操作、采用纯净试剂和纯水等。二是避免样品污染与交叉污染。样品之间、样品与外界以及样品与实验人员之间的交叉污染会导致实验结果的干扰和扭曲。因此，要严格控制实验环境的洁净度、操作人员的卫生习惯和实验区域的通风等。三是根据实验要求选取合适的预处理方法和技术。不同的实验目的和要求需要采用不同的样品预处理方法和技术，如离心、过滤、萃取、化学处理、生物反应等。 综上所述，生物样品预处理的原理包括样品的选择与采集、样品的保存与保护、样品的前处理步骤等。通过合理选择样品、采取适当的保存措施和进行必要的前处理步骤，可以去除样品中的杂质、干扰物和与实验目的无关的成分，提高实验结果的准确性和可靠性。同时，还需要注意严格的质量控制和避免样品污染与交叉污染，以确保实验结果的准确性和可靠性。
生物样品预处理技术的发展与应用
生物样品预处理技术的发展与应用 近年来，生物样品预处理技术在生物医学领域中得到了广泛的应用和发展。在 生物学研究和诊断治疗中，高质量、标准化的实验数据是非常重要的。生物样品预处理技术是实验数据质量保证的重要一环，它主要包括提取、纯化、分离、检测等多个步骤。本文将围绕生物样品预处理技术的发展和应用进行探讨。 一、生物样品预处理技术的概述 生物样品预处理技术是实验前的一个不可或缺的步骤，可以有效地降低σ²（方差）和CV（变异系数），提高数据的准确性和可重复性。实验前的步骤包括样品 的处理、纯化、分离、浓缩等。例如，对于血液样本，提取血清或血浆是最常见的操作。此外，还有细胞培养上清液的收集和处理，组织样品的研磨、离心等。对于不同种类的样品，不同的预处理方法被使用，以达到最好的实验效果。预处理中各个环节的精度和准确度都对最终的实验结果产生很大的影响。 二、生物样品提取技术的发展 生物样品提取是预处理中非常重要的一环，其中最常见的提取是核酸和蛋白质。传统提取方法通常使用有机试剂，例如酚-氯仿法、三氯乙酸法等，但存在着提取 时间长、污染严重以及操作繁琐等问题。随着生物技术的发展，人们不断提出新的先进技术，如自动化和微流控技术，并不断增加提取总量、提高可靠性、自动化等方面的技术特点。 例如，基于核酸特异性交互的磁珠柱提取技术应用广泛，它不仅能够提高核酸 的提取效率，而且能够在较短的时间内提取更多的核酸。比较典型的就是 QIAGEN 公司的 QIAquick PCR 纯化试剂盒，它能够提取高纯度的 PCR 产物。 三、生物样品纯化技术的应用
纯化技术是生物样品预处理中一个重要的步骤。传统的纯化方法包括离心、沉 淀和过滤。在最近几年中，许多新的纯化技术被提出并逐步成为主流。例如，透析、膜过滤和离子交换色谱。这些技术不仅克服了传统纯化方法在处理大样品量和分离复杂混合物上的局限性，而且能够自动实现样品纯化，降低了实验操作的难度和成本。 四、生物样本分离技术的应用 生物样本分离技术是一种用于提取和分离不同组分的技术，通常用于寻找某一 种分子或寻找新的生物标志物。现在，许多生物技术公司已经开发了一系列的分离试剂盒，主要包括抗体毒理学、混合分析和蛋白质组学等。这些技术有助于加强和提高样品分离，减少非特异性背景。例如，蛋白质分离试剂盒 PURIFICATION 交 联亲和试剂盒是一种高纯度蛋白质纯化试剂盒，能够用于检测和分离特定的蛋白质。 五、生物样品检测技术的发展 基于不同检测目标，生物样品检测技术可以分为分子生物学检测、蛋白质分析、细胞检测和药物分析等多种类型。现在的检测技术已经具备了敏感度高、特异性好、自动化程度高的特点。新一代测序技术不但能够快速、精准地测定样本中的 DNA 序列，而且能够进行大规模并行测序。另外，光谱学技术、电化学技术等也在生物样品预处理技术的检测领域中得到了广泛应用。 六、未来的挑战和发展 预处理技术的发展非常迅速，不断更新的技术和产品不断变革我们的生活。虽 然预处理技术的应用范围广泛，且已经实现了无标记检测和多样的检测方法，但在实际应用中还存在不少问题和挑战，如样品处理质量的标准化、设备升级和维护等。未来，预处理技术应该进一步提高其自动化程度，并能够在复杂的检测环境下稳定运行。此外，预处理技术也应该更加人性化，且能够为临床实践提供更多解决方案。 七、结论
理化实验检测用样品的采集、制备、保存及预处理
理化实验检测用样品的采集、制备、保存及预处 理 样品的采集 采样：从大量的分析对象种抽去有代表性的一部分样品作为分析材料，此过程称为采样。 1．正确采样的重要性： 采样是食品分析工作的重要环节。同一种类的食品成品或原料，由于品种产地，成熟期，加工和保藏条件不同，其成分及含量也可能有较大差异。同一分析对象，不同部位的成分和含量也可能有较大差异。从大量的，成分不均匀的，所含成分不一致的被检物质种采集能代表全部被检物质的分析样品，必须科学的采样技术，以防止成分的逸散和被污染的情况下，均衡地采集有代表性的样品，否则，即使后期检测等环节非常精密，准确，其检测结果也毫无价值。 2．正确采样的原则： ①采集地样品要均匀，有代表性，能反映全部被检食品的组成，质量和卫生状况。 ②采样过程中要设法保持原有的理化指标，防止成分的逸散或带入杂质。 ③采样的步骤 检样→原始样品→平均样品
检样：由分析对象大批物料的各个部分采集的少量物料。原始样品：许多份检样综合在一起称为原始样品。 平均样品：原始样品经过技术处理，再抽取其中的一部分供分析检验的样品。 3．采样的方法： ①随机采样：按照随机原则,从大批物料中抽取部分样品。 ②代表性取样：是用系统抽样法进行采样,即已经了解样品随空间和时间而变化的规律，按此规律进行采样，以便采集的样品能代表其相应部分的组成和质量。例如：分层取样，随生产过程的各个环节采样，定期抽取货架上陈列不同时间的食品的采样等。 随机采样可以避免人为的倾向性，但是，在有些情况下，如难以混匀的食品（如粘稠液体，蔬菜）的采样，仅仅用随机采样法是不行的，必须结合代表性取样，从有代表性的各个部分分别取样。因此，采样通常采用随机采样和代表性取样相结合的方式。具体的采样方法，因分析对象的性质而异。均匀固体物料（如粮食，粉状食品） a．有完整包装的（袋，桶，箱等） 确定采样件数→从堆放的不同部位取样。 b．无包装的散堆样用四分法得平均样品 较稠的半固体物料（如稀奶油，动物油脂，果酱等） 混匀→取出检样→缩减至所需样品数量的平均样品。 液体物料（如植物油，鲜乳等）
生物样品的采集、储存和预处理的SOP
生物样品的采集、储存和预处理的SOP 1. 生物样品的采集：服药前取空白血样，服药后取样点应包括吸收相，分布相，消除相；药浓度峰值前至少有4个点，峰后取6个点或6个以上点，峰时间附近应有足够的取样点。总取样点不少于11个，取样应持续到3 ～ 5个半衰的1/10 ～1/20。具体可依据文献报道及预试验结果确定具体采血时 期，或C max 间点。于服药前（0 h）和各时间点，取前臂静脉血5mL，处理后，离心10 min ( 3000r.p.m)，分离血浆或血清样品置试管中。 2. 生物样品的储存:血浆、血清样品，尽快分离（24h内），冷冻保存；短期内分析，可置4℃冰箱内冷藏。长期分析，于－ 20℃冰箱内冷冻保存。 3. 生物样品的预处理:依据药物的理化性质，其酸碱性（pKa）、分子的亲脂性、挥发性、稳定性及可能的生物转化途径，制定相应的预处理方法。 a. 沉淀蛋白法 生成不溶性沉淀: 酸性试剂（三氯醋酸、高氯酸、钨酸、焦磷酸） 重金属盐类（锌盐、铜盐、银盐、汞盐） 盐析、脱水: 硫酸铵、硫酸钠、氯化钠等中性盐。 甲醇、乙腈、丙酮等可与水混溶的有机试剂。
各种沉淀试剂使用情况表 b. 液-液萃取法 水相pH：碱性药物最佳pH应高于其p Ka 2 ～ 3个单位 酸性药物最佳pH应低于其p Ka 2 ～ 3个单位 常用的有机溶剂：正己烷、异辛烷、环己烷、四氯化碳、甲苯、乙醚、苯、1，2-二氯乙烷、氯仿、二氯甲烷、乙酸乙酯（极性由依次小至大）。有机溶剂与水相容积比一般为 1：1或2：1。 选择提取溶剂的原则：对被测物有较大的亲和力；与水不互溶，极性较小；沸点适宜；不影响紫外检测；价廉、无毒、不易燃烧；化学性质稳定。
第二章样品的采取、制备、处理与保存
第二章样品的采取、制备、处理与保存 第一节样品的采取 ●1、采样：从产品中抽取有一定代表性样品，供分析化验用，叫作采样。 ●2、样品分类： ●检样：由整批食物的各个部分采取的少量样品称为检样 ●原始样品：把许多份检样综合在一起称为原始样品。其组成成分能代表全部物料的 成分。 ●平均样品：原始样品经过处理再抽取其中一部分作检验用者称为平均样品。 ●2、采样的一般方法：样品不同所采用的方法也不同。 ●（1）散粒状样品（如粮食、粉状食品） ●可用双套回转取样管插入容器中，回转一百八十度取出样品，每一包装须由 上、中、下三层取出三份检样，把许多检样合起来成为原始样品，原始样品用四分法做成平均样品，即将原始样品充分混合均匀后堆集在清洁的玻璃板上，压平成厚度在3厘米以下的正方形并划成对角线，将样品分成四份，取两对角的二份，再如上混合，分为四份，取两对角的二份，这样操作至取得所需数量为止，此即是平均样品。或把样品做成圆形进行混合、四分，来取得平均样品。 ●（2）较稠的半固体样品（如稀奶油） ●可用采样器从上、中、下层分别取出检样，然后混合缩减至得到所需数 量的平均样品。 ●（3）液体样品 ●在采样前须充分混合，混合时可用混合器，如容器内被检物量不多时， 可用由这一容器转移到另一容器的方法来混合。采样用长形管或特制采样器。一般可用虹吸法分层取样，每层各取500毫升左右，装入小口瓶中混匀。 ●（4）小包装的样品 ●如罐头、瓶装奶粉等连包装一起采样。 ●（5）鱼、肉、蔬菜等组成不均匀样品 ●视检验目的，可由被检物各个部分分别采样，须从有代表性的各部位（如 肌肉、脂肪等，蔬菜之根、茎叶等）分别采样，经过充分打碎混合后成为平均样品。 将样品装入预先洗净烘干的广口瓶中，瓶签上注明名称、采样日期、交货数量、采样方法及其他应说明的情况，并由经手人签封。 第二节样品的制备与预处理 ●一、样品的制备 ●1、样品的制备：是指对采取的样品进行分取、粉碎及混匀等过程。 ●制备的目的：要保证样品十分均匀，使在分析时取任何部分都能代表全部样品的成 分。 ●2、制备方法：（因产品类别不同而异。） ●（1）液体、浆体或悬浮液体，一般是将样品摇动和充分搅拌。常用的简便的搅拌工 具是玻璃搅拌棒，还有带变速器的电动搅拌器，可任意调节搅拌速度。 ●（2）互不溶的液体，如油与水的混合物，分离后分别采取。 ●（3）固体样品应切细、捣碎，反复研磨或用其他方法研细。常用工具有绞肉机、磨 粉机、研钵等。
从自然界中筛选微生物菌种的方法和步骤
从自然界中筛选微生物菌种的方法和步骤 微生物是指肉眼看不见的微小生物体，包括细菌、真菌、病毒等。微生物广泛存在于自然界中的土壤、水体、空气等环境中，并且在人类生活和工业生产中起着重要的作用。为了发现和利用具有特殊功能的微生物菌种，科学家们常常需要进行从自然界中的筛选工作。下面将介绍从自然界中筛选微生物菌种的方法和步骤。 一、样品采集和预处理 样品采集是从自然界中筛选微生物菌种的第一步。样品的选择要根据研究目的来确定，可以选择土壤、水体、植物根际等样品。样品采集时要注意避免污染，使用无菌器具进行采集，并储存在无菌容器中。采集的样品需要进行预处理，通常包括样品的干燥、粉碎、筛网等步骤，以方便后续的菌种筛选工作。 二、菌种分离和纯化 菌种分离是从自然界样品中筛选微生物菌种的关键步骤。首先，将样品进行稀释，然后将稀释液均匀涂布在培养基上。经过一段时间的培养，可以观察到单个菌落的形成。然后，将菌落进行分离，通过挑取单个菌落进行连续传代培养，最终得到纯化的菌种。菌种的纯化可以通过传统的细菌学方法，如制备菌液、涂布法等进行。 三、菌种鉴定和筛选 菌种鉴定是从自然界样品中筛选微生物菌种的关键步骤。菌种鉴定
可以通过形态学、生理生化特性、分子生物学等方法进行。首先，可以通过观察菌落形态、细胞形态、孢子形态等特征进行初步鉴定。然后，可以通过菌种的生理生化特性进行进一步鉴定，如氧需求性、温度耐受性、代谢产物等。最后，可以通过分子生物学方法进行菌种的鉴定，如16S rRNA基因测序、脱氧核酸杂交等。 在菌种鉴定的基础上，可以根据研究需要进行菌种的筛选。筛选的方法和指标根据研究目的的不同而不同。比如，如果需要筛选产生特定代谢产物的菌种，可以通过培养基中特定底物的降解情况来进行筛选；如果需要筛选对特定环境因子具有耐受性的菌种，可以通过培养基中添加相应环境因子的方法进行筛选。筛选的目的是发现具有特殊功能的微生物菌种，为后续的应用研究打下基础。 四、菌种保存和应用 筛选出具有特殊功能的微生物菌种后，需要进行菌种的保存和应用。菌种的保存可以采用常规的冷冻保存、干燥保存、液氮保存等方法。菌种的应用可以根据具体的研究目的进行，如微生物酶的生产、生物农药的开发、环境修复等。 总结起来，从自然界中筛选微生物菌种是一项复杂而重要的工作。需要进行样品采集和预处理、菌种分离和纯化、菌种鉴定和筛选等多个步骤。通过科学的方法和严谨的步骤，可以发现和利用具有特殊功能的微生物菌种，为人类的生活和工业生产带来福祉。
生物样品的采集储存及预处理
第四章生物样品的采集、储存及预处理 第一节生物样品的采集、储存 体内药物分析的任务和分析对象具有如下特点：被测定的药物和代谢物的浓度极低；样 品介质复杂，其中存在各种各样直接或间接影响测定结果的物质，大多需要分离和净化；仅有少量样品可供分析，尤其是在连续测定过程中，很难再度获得完全相同的样品；样品的稳定性需要特别注意等。 一、生物样品的采集 生物介质（biologicalmatrix）包括全血、血浆、血清、尿、粪、唾液和各种组织。其中最常用的生物样品是血液和尿液。 1.血样的采集 供测定的血样应能代表整个血药浓度。若能从动脉或心脏取血最为理想，但只能用于动物，不能用于人。动物采血可根据不同种类及实验需要，采取适当的方法。如大、小鼠可由尾动脉、静脉、心脏、眼眶取血或断头取血等，家兔可由耳缘静脉、颈静脉等多处取血，犬可由前、后肢静脉等处取血。对于受试者通常采用静脉取血（成人从肘正中静脉取血，小儿从颈外静脉取血）。静脉取血一般将注射器针头插入静脉血管抽取。抽取的血液转移至试管或其它容器时应缓缓压出，以防血细胞破裂。 全血在加肝素或柠檬酸、草酸盐等抗凝剂后，离心分取血浆，其体积约为全血的一半。血清则是由血液中纤维蛋白原等影响下，引起血块凝结而析出，离心取用，而血块凝结时往往易造成药物吸附的损失。 全血直接作为样品时，也应加入抗凝剂混匀，防止凝血。对大多数药物来说，血浆浓度与红细胞中的浓度呈正比，所以测定全血不能比测定血浆提供更多的信息。而全血的净化较血浆与血清复杂，尤其是溶血后，血色素等可能会给HPLC测定带来影响。但是，一 些药物可与红细胞结合，或药物在血浆和红细胞的分布比率因人而异，在这些情况下，宜采用全血。 血样抽取量受到一定的限制。人体药代动力学研究需要在多个时间点（一般为12〜20点） 取样，每次由前臂静脉取血3〜5m1。随着高灵敏度测定方法的建立，取样量可继续降低， 从而更易为受试者接受。实验动物取血量应注意是否超过了动物的生理承受能力。 制备血浆样品时，将采取的血样置含有抗凝剂的试管中，缓缓转动试管使其充分混合、离心，所得上清液即为血浆。常用的抗凝剂有肝素，它是体内正常的生理成分，因而不会
样本采集与处理
样本采集 样本采集要注意的重点是，所采集的临床标本一定要正确和采集的时间合适，并注意采用正确的标本容器，采集的方法程序对有些临床标本非常重要。在疾病发展过程中，标本采集过早或过晚都可能会给出假阴性结果。 尽可能在最短的时间内完成样本的采集（应该保证30min内完成，不适当的处理时间将直接影响和干扰研究的结果），应尽快降低所采集组织样本的温度。 肿瘤组织标本的采集和处理应遵循严格的生物安全处理规范，也可根据研究者所提出的特殊要求，按照对方提供的操作模式进行相关处理。 （1）患者入院后进行生物安全性检查。检测HIV以及嗜肝病毒HBV及HCV感染情况。HIV感染患者不列为采集对象。HBV及HCV感染者，须在样本上明确注明。 （3）组织标本取材时间肿瘤外科手术后，标本离体30min内。 （4）标本采集 每种肿瘤主要采集3 类生物样本，并要保证这些样本的质量和数量能够用于DNA、RNA 和蛋白质提取及满足相关的实验分析。 1)新鲜组织(包括手术和活检组织) 实体组织样本采集包括外科手术切除的或活检和尸检得到的正常、良性和恶性肿瘤 组织。手术结束后，在临床肿瘤病理专家的指导下，在不影响病理诊断取材需要的 前提下，采集组织样本。 A。标本取材部位：肿瘤组织、癌旁组织（癌组织旁1cm）和正常组织（癌组织旁5cm 以外或最远处）。 a）临床诊断明确，未经放疗和化疗的手术切除标本，在病理医生指导下取材。 b）尽量保证癌组织没有坏死（有坏死的标本很难提取高质量的RNA 和蛋白）。 c）配对“癌旁组织”，选择距离癌灶边缘3 cm 范围内的组织样本，配对“正常组织”，要选择距癌灶边缘5 CM 以上或距离癌灶边缘最远段（或手术切缘处）取组织样本，应注明距离。对于空腔器官，如食管、胃、肠、胆囊、膀胱等，“癌旁组织”“正常组织” 应取相应部位的“粘膜组织”样本。 d）在保障病理学检测所需标本的前提下，尽量提供足量的肿瘤和癌旁正常组织，一般不少于200mg 或10E7 细胞。 e）手术切除的组织样本必须迅速置于液氮中，然后保存于液氮罐或-80℃冰箱，这一过程尽量在手术标本离体后30 分钟内完成。 f) 其中一块组织可用OCT 处理后冻存，可用于形态学观察和显微切割。 (OCT(Optimal Cutting Temperature)包埋剂是一种常用的固形剂。用其包埋组织进行速冻后，能与组织固定成形，有利于保存组织结构完整性，便于其形态结构的分析) B。过程：使用数码相机拍摄标本外观后，将标本切成小块（直径×，厚度<），为减少处理时间，标本不应切得太小，然后放入冻存管中，标记后放入标本盒中，盒盖上附有记录标本编号、采集时间及标本类型的标签。每例病人样本保存3-5份冻存管标本。每份组织重量原则上不低于2g。 2) 石蜡包埋组织 a）中性福尔马林固定手术切除标本按病理学操作规范进行取材 b）取材部位包括癌灶，以及癌灶周围3cm 以内的癌旁组织，3~5cm 的近癌组织和5cm 以外的远癌组织或距癌灶边缘最远段分别取2-3 块。取材尽量以癌灶为中心水平向两侧取材，尽量保证足够大的组织样本。取材应该以“远癌-近癌-癌灶”的顺序。癌灶处
浅析食品微生物检验样品的采集和制备
浅析食品微生物检验样品的采集和制备 摘要：随着科学技术的发展，国民经济水平有所提升，人们的物质和精神生 活水平都有了极大的提高，这就需要有足够的、多样化的高质量食物来满足不同 人群的生存需求及发展需求。因此，食品检验工作近年来迅速发展，为保障和改 善食品品质提供了技术支撑。食品检验包括理化、添加剂、重金属、农药残留及 微生物等。近几年人们尤其关注微生物检测。微生物污染是食品风险监控项目中 的一部分，若想切实提高食品微生物检验质量，则需要探索更为有效的微生物样 品的质量控制方法。 关键词：食品微生物；样品；采集与制备 1食品微生物检验特殊性分析 食品微生物检验具有一定的时效性。在现实生活中，部分厂家对食品质量控 制不够，导致食品中微生物大量繁衍，食品质量下降甚至变质。食品微生物检验 主要是通过检测食品中微生物含量来判断食品是否存在污染以及是否对人体构成 威胁。食品微生物检验是一个非常复杂的过程，其中每个环节出现问题均可能对 检验结果产生影响，同时检验时间越长，检验结果受到影响的概率越大，因此需 要检验人员在较短的时间内完成检测，对菌落总数、大肠菌群、霉菌以及金黄色 葡萄球菌等微生物指标进行准确判定与统计。此外，食品微生物检验容易受到微 生物多样性影响。微生物类型繁多，不同类型微生物具有不同特点。部分微生物 可用于食品发酵以及食品状态调节，在食品生产中具有积极作用；但部分微生物 会影响食品质量，对食品造成污染，降低食品安全性，进而影响人们的饮食健康。因此，食品微生物检验人员不仅要掌握整个检验流程以及其中的关键环节，还需 要具备专业的微生物检验知识，能够综合不同检验技术对微生物检验结果进行反 复验证，避免微生物多样性的干扰，确保检验结果可靠性。 2食品检测样品管理要求
生物样品的样品制备技术
生物样品的样品制备技术 生物样品的样品制备技术是一项复杂的过程，它可以影响数据的准确性和可重复性。生物样本包括血液、组织、血清、唾液、尿液等等。生物医学研究和临床实践都需要对这些生物样品进行定量、定性、分析和诊断，因此，在样品的制备过程中，需要考虑样品的种类、处理方法、仪器设备和操作技巧等因素。本文将对生物样品的样品制备技术进行讨论。 一、生物样品的收集和保存 样品的质量和稳定性对最终的结果至关重要。因此，在样品的收集和保存过程中，需要注意以下几点： （1）准确记录样品的信息 包括样品编号、收集日期、收集地点、样品类型、收集量等信息。这些信息对于后续的分析和研究非常重要。 （2）样品的收集
采用适宜的采集管或容器进行收集，避免污染和损伤。例如， 血样的采集需要用无菌针头和无菌采血管，并且需要严格按照标 准操作程序进行采血。 （3）样品的处理 样品的预处理可以移除杂质、保护样品、提高分析灵敏度等目的，简化后续的操作流程。如，将血样进行离心分离血浆和血细胞。 （4）样品保存 根据不同的样品种类，选择合适的保存方法，避免样品的降解 和变质。例如，血样和组织样品应该保存在低温和冷冻条件下。 二、生物样品的样品制备流程 生物样品的样品制备流程包括样品的处理、分离、纯化等步骤。这些步骤可以提取感兴趣的化合物、分子、生物标志物等，从而 实现对样品的定量、定性、分析和诊断。
（1）样品的处理 样品的处理包括前处理、蛋白质去除、核酸去除等步骤。前处 理可以清洗或降解杂质，保护目标样品，如血液样品的前处理可 以去除氯仿、磷酸钾等浓度高的化合物。蛋白质去除可以通常使 用抗体、酶等进行。核酸去除可以使用RNAase或DNase酶。 （2）样品的分离 样品的分离包括离心分离、柱层析分离、电泳分离、毛细管电 泳等步骤。这些方法根据样品类型和杂质特征进行选择。离心分 离可以分离细胞、血浆等物质。柱层析分离可以根据物质的大小、电性、化学性等特征进行分离。电泳分离主要用于分离DNA、RNA、蛋白质等。 （3）样品的纯化 样品的纯化包括各种纯化手段，如固相萃取、甲醛化、酸水解、亲和层析等。固相萃取可以利用静电吸附将样品中的有机化合物
生物样本处理与预处理技术
生物样本处理与预处理技术 在生命科学中，生物样本处理与预处理技术是一个重要的研究 领域。简单来说，它包括对生物样本中细胞或分子的提取、分离、纯化和检测等多个步骤。这些步骤的准确性和可重复性对实验结 果至关重要，因此，生物样本处理技术的不断发展，对于科学研 究和医学诊断等领域都有着重要意义。 1. 细胞质提取技术 在研究细胞生物学、遗传学和分子生物学中，需要提取单个细 胞或细胞数量少的样本。细胞质提取技术是一种常用的方法，可 以提取出细胞质中的RNA、蛋白质和代谢产物等，从而实现对其 的遗传和代谢状态的研究。在细胞质提取前，需要对样本进行清洁、杀芯片和消化等预处理步骤，以确保提取的细胞质具有高质量、高纯度和稳定性。 2. DNA、RNA提取技术 DNA和RNA都是生物学研究中重要的分子，DNA提取技术是从生物体的细胞中分离出DNA的过程，而RNA提取技术则是分
离出RNA。这些技术通常使用化学方法来分离出DNA或RNA，并通过电泳或定量PCR等技术来检测样本纯度和浓度。 3. 蛋白质提取技术 蛋白质是生物体中最基本、最重要的分子之一，研究蛋白质相关的生理和病理状态非常重要。蛋白质提取技术是将蛋白质从细胞或组织中提取出来，用于蛋白质鉴定、定量和功能研究。不同的样本需要不同的蛋白质提取方法，如机械（切碎）、冻融、化学（沉淀）或酶消化等处理，以获得高质量的蛋白质样品。 4. 组织固定和切片 在组织学和病理学中，常常需要对组织进行染色、免疫化学反应等分析。但是，组织取自生物体的部位往往会导致组织上的分子和结构有所改变。为了保持组织样本的形态和细胞学特征，需要对其进行固定和切片。组织固定使用交联剂，如福尔马林和乙醛等，可以冻结生物体内的化学反应，保持其形态和结构不变。组织切片则需要使用组织切片机将组织切成微米级别的片。这些切片可以用来进行染色、免疫化学反应和显微成像等分析。
生物样品的制备与提取
第二章生物样品的制备 §2. 1 生物分析化学分析对象的复杂性 生物样品往往是一种具有高度复杂性的体系，这种复杂性表现在组成、含量、动力学范围、时空依存性等各个方面，这使得生物样品的处理有很大的难度。因此，与经典分析化学的样品制备相比，生物分析化学的样品制备有以下特点： （1）生物样品的组成极其复杂，常常包含有数百种乃至几千种化合物。如人类血浆蛋白质组学的阶段性研究结果表明，正常人血浆中的蛋白质至2005 年时已鉴定了3020 种。有的生物分子在分离过程中还在不断的代谢，所以生物分子的分离纯化方法差别极大，想找到一种适合各种生物大分子分离制备的标准方法是很困难的。 （2）许多生物分子在生物材料中的含量极微，只有万分之一、几十万分之一，甚至几百万分之一。分离纯化的步骤繁多，流程长，有的目的产物要经过十几步、几十步的操作才能达到所需纯度的要求。 （3）生物分子往往有很宽的动力学浓度范围。如不同的蛋白质在细胞内的浓度分布范围相 差106〜1010倍，而同一种蛋白质在不同的生理或病理状态下浓度相差有时也很大。 （4）许多生物分子一旦离开了生物体内的环境时就极易失活，因此分离过程中如何防止其失活，就是生物分子提取制备最困难之处。过酸、过碱、高温、剧烈的搅拌、强辐射及本身的自溶等都会使生物大分子变性而失活。 （5）生物分子的分离和制备几乎都是在溶液中进行的，很难准确估计和判断温度、pH 值、离子强度等各种参数对溶液中各种成分的综合影响，因而实验结果常常带有很大的经验成份，实验的重复性较差，分析仪器、分析方法学、乃至个人的实验技术水平和经验对实验结果会有较大的影响。 制备生物分子的基本原则是：以尽可能少的步骤、尽可能短的时间，获得尽可能多的目标产品。通常包括以下步骤：①确定要制备的生物分子的目的和要求；②通过文献调研和预备性实验，掌握目标产物的物理、化学以及生物学性质；③生物材料的破碎和预处理；④分离纯化方案的选择和探索；⑤选择相应的、可靠的分析技术，建立鉴定生物分子制备物的均一性（即纯度）的方法；⑥产物的浓缩、干燥和保存。 在进行样品处理时，需要考虑的生物分子的物理、化学及生物学性质主要有：①在水和各种有机溶剂中的溶解性；②在不同温度、pH 值和各种缓冲液中的稳定性；③固态时对温度、含水量和冻干时的稳定性；④各种物理性质：如分子的大小、穿膜的能力、带电的情况、等电点、在电场中的行为、离心沉降的表现、在各种凝胶、树脂等填料中的分配系数等；⑤其它化学性质，如对各种蛋白酶、水解酶的稳定性和对各种化学试剂的稳定性；⑥对其他生物分子的特殊亲和力；⑦在细胞内的定位等。 生物大分子和生物小分子的分离纯化方法多种多样，主要是利用它们之间在物理、化学及生物特异性的差异，如分子的大小、形状、酸碱性、溶解性、溶解度、极性、电荷和与其它分子的亲和性等。各种方法的基本原理基本上可以归纳为两个方面：一是利用混合物中几个组分分配系数的差异，把它们分配到两个或几个相中，如盐析、有机溶剂沉淀、层析和结晶等；二是将混合物置于某一物相（大多数是液相）中，通过物理力场的作用，使各组分分配于不同的区域，从而达到分离的目的，如电泳、离心、超滤等。目前纯化蛋白质等生物大分子的关键技术是电泳、色谱和高速与超速离心。由于生物大分子不能加热熔化和汽化，因而所能分配的物相只限于固相和液相，在此两相之间交替进行分离纯化。在实际工作中往往要综合运用多种方法，才能制备出高纯度的生物大分子。 制备物的均一性（即纯度）的鉴定，通常只采用一种方法是不够的，必须同时采用2〜3