多药耐药革兰阴性杆菌qacE△1-sul1基因检测及临床意义

多药耐药革兰阴性杆菌qacE△1-sul1基因检测及临床意义朱健铭;姜如金;吴康乐;吴玲丽;沈跃建

【期刊名称】《中华医院感染学杂志》

【年(卷),期】2008(18)9

【摘要】目的了解多药耐药革兰阴性杆菌耐qacE△1-sul1基因存在情况,并讨论其临床意义。方法自临床分离225株多药耐药革兰阴性杆菌,采用聚合酶链反应法检测qacE△1-sul1基因。结果225株革兰阴性杆菌qacE△1-sul1基因阳性120株,阳性率53.3%。结论临床分离的革兰阴性杆菌qacE△1-sul1基因携带率较高。【总页数】3页(P1209-1211)

【关键词】革兰阴性杆菌;消毒剂;基因

【作者】朱健铭;姜如金;吴康乐;吴玲丽;沈跃建

【作者单位】杭州市余杭区中医院检验科

【正文语种】中文

【中图分类】R378

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整合子与大肠埃希菌耐药基因水平转移关系的研究进展(一)

整合子与大肠埃希菌耐药基因水平转移关系的研究进展(一) 【关键词】整合子;大肠埃希菌;水平转移整合子可特异性捕获或切除基因盒导致基因盒的移动，也可在接合性质粒、转座子、整合型噬菌体或细菌染色体间移动并且通过这些可移动元件在同种和不同种菌属间传播成为了目前大肠埃希菌广泛耐药的重要原因。目前细菌抗生素耐药和多重耐药已成为全球关注的问题。大肠埃希菌(Escherichiacoli,E.coli)，是存在于人和动物肠道中的正常菌群，也是引起临床感染最常见和最重要的革兰氏阴性杆菌之一，从上个世纪70年代报道其出现抗药性至今，大肠埃希菌的耐药状况日益严峻。人们在对于耐药机制的研究中发现，整合子是一种与耐药基因水平转移密切相关的克隆表达载体，是耐药基因储存和转移的重要结构。1991年Hall等人正式提出了基因盒整合子(Genecassette)系统的概念。基因盒整合子系统是一种具有位点特异性重组功能的可移动元件，由两个保守区及其间的基因盒构成，在事例酶的催化下可捕获和表达外源基因，并通过接合性质粒、转座子、整合型噬菌体或细菌染色体在同种和不同种菌属间传播，使细菌耐药性广泛播散，是细菌多重耐药快速发展的重要原因。 1基因盒整合子系统基因盒整合子系统由保守末端、保守末端和中间的可变区组成，系水平基因传递系统(horizontalgenetransfer,HGT)。包括1个整合酶基因(intI)、1个附着位点attI和启动子结构因整合子的类型不同而异;可变区可有数量和功能不同的基因盒。基因盒是较小的可移动基因元件，常以环状形式独立存在，也可被整合到整合子中的DNA单元。基因盒的基本结构是由一个单基因和一个位于其下游的短的回文序列attC 组成。多个基因盒可插入到同一个整合子上，为细菌产生多重耐药性提供了可能。 1.1整合子介导的基因水平转移基因盒整合子系统能够使细菌从环境中获取适应环境变化所需基因的同时去除掉那些会造成自身代谢冗余的基因，进而达到基因组的最优化配置，细菌对抗生素产生抗性也是适应环境的一种表现。整合子可整合数量不等且互不相同的耐药基因，一旦细菌对某种抗生素产生耐药基因，该耐药基因就可能被整合子捕获，继而使耐药性得以散播。整合子的水平转移可解释耐药基因的扩散和多重耐药菌株的产生。当耐药基因成为可移动基因盒的一部分时，可通过事例酶单个基因盒的移动、含重置基因盒、大转座子的扩散、不同菌种间含整合子的接合质粒的移动等机制进行水平转移，大大增强耐药基因的扩散1]。不同菌株的相同整合子可位于不同的DNA元件上，或者在整合子的外延序列中存在一些差异，使其有更高的移动性。接合是基因水平传递最常见的方式，耐药基因的水平传播主要是依靠接合性质粒，在接合过程中整合子可发生基因盒的捕获或丢失。通过接合水平转移的整合子可引起人类与动物之间大肠埃希菌对抗菌药物抗性的播散2]。基因和基因组学研究表明，基因水平转移在增加菌种的遗传多样性、获得新的生物学性状及新的微生物种的形成及其基因组的进化过程中具有非常重要的作用3]。另外，通过质粒、噬菌体或整合子的基因水平转移可推进微生物间的协同合作4]。在细菌耐药机制的研究中发现，基因盒整合子系统与细菌基因组的进化有着密切的联系。 1.2整合子的分类及常见耐药基因目前在130多种耐药基因盒已被确认5]，其中的基因主要为耐药基因，编码对多种抗菌药物、消毒剂及防腐剂等的耐药性。整合子根据其编码整合酶的DNA序列不同可分为9类6]，其中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ类与细菌耐药基因传播密切相关。在大肠埃希菌的研究中目前发现了Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ类整合子，其中以Ⅰ类整合子最为常见7]。细菌携带基因盒与其耐药表型有较好的对应关系，说明整合子介导了细菌相应的耐药性。在季胺类化合物(qac)基因家庭中，qacE△1是qacE的缺失型8]，△基因扩增结果可作为Ⅰ类整合子阳性株的检出方法9]。qac家庭表达细菌多种化合物外排泵，包括：

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临床医学检验技师初级（师）微生物学及检验（细菌的分类与命名、革兰阳性球菌、革兰阴性球菌）-试卷1 (总分：74.00，做题时间：90分钟) 一、 B1型题(总题数：1，分数：4.00) A．葡萄球菌B．乙型溶血性链球菌C．肺炎链球菌D．脑膜炎奈瑟菌E．甲型溶血性链球菌（分数：4.00） (1).镜检为革兰阳性球菌，呈葡萄串状排列的是（分数：2.00） A. √ B. C. D. E. 解析：解析：葡萄球菌属革兰染色阳性，呈圆球形，直径0．5～1．5μm，不规则成堆排列，形似葡萄串状，在脓汁、肉浸液培养物中，可见单个、成对或短链排列。 (2).镜检为革兰阳性球菌，呈短链排列的是（分数：2.00） A. B. C. √ D. E. 解析：解析：肺炎链球菌为革兰阳性球菌。呈矛尖状，成双排列，有时呈短链状。二、 B1型题(总题数：1，分数：8.00) A．金黄色葡萄球菌B．淋病奈瑟菌C．表皮葡萄球菌D．肺炎链球菌E．肠球菌属（分数：8.00） (1).触酶阳性，对新生霉素敏感的是（分数：2.00） A. B. C. √ D. E. 解析： (2).触酶阴性，6．5％NaCl生长试验和七叶甘试验阳性的是（分数：2.00） A. B. C. D. E. √ 解析： (3).氧化酶和触酶阳性的是（分数：2.00） A. B. √ C. D. E. 解析： (4).胆汁溶解试验和菊糖发酵试验阳性的是（分数：2.00）

A. B. C. D. √ E. 解析：解析：此题考查的常见病原球菌的主要鉴定试验。三、 A1型题(总题数：24，分数：48.00) 1.细菌分类的基本单位是（分数：2.00） A.门 B.目 C.科 D.属 E.种√ 解析：解析：种是细菌分类的基本单位。 2.有关细菌的分类单位正确的是（分数：2.00） A.性状相似、关系密切的菌株组成属 B.群和组也是正式分类的等级 C.生物学性状基本相同的细菌群体构成一个种√ D.细菌最高分类等级为门 E.同一种细菌各方面的生物学性状相同解析：解析：种是细菌分类的基本单位，形态学和生理学性状相同的细菌群体构成一个菌种；性状相近、关系密切的若干菌种组成属。 3.用Laneefield血清分型法将链球菌分为多个群，其中对人类有致病性的大多属于（分数：2.00） A.A群√ B.B群 C.C群 D.D群 E.G群解析：解析：根据链球菌细胞壁抗原分类，将链球菌分为A、B、C、D……等18个群，对人类有致病性的90％属A群，B、C、D、G群较少见。 4.下列不属于原核生物界的微生物的是（分数：2.00） A.支原体 B.衣原体 C.立克次体 D.螺旋体 E.病毒√ 解析：解析：细菌、衣原体、支原体、立克次体、螺旋体和放线菌属于原核生物界，病毒属于非细胞型微生物。 5.血清学分型主要用于鉴定（分数：2.00） A.属间血清型 B.种间血清型 C.种内血清型√ D.属内血清型 E.科内血清型

沙门菌多重耐药基因岛1(SGI1)研究进展

沙门菌多重耐药基因岛1(SGI1)研究进展王芳【摘要】多重耐药基因岛是指细菌染色体上一段具有典型特征的基因簇,携带有多种耐药基因,决定细菌的多重耐药性.目前已发现在沙门菌属和其它菌属的细菌中携带沙门菌多重耐药基因岛1(Salmonella multi-drug resistant genomic island 1,SGI1).由于SGI1上的耐药基因具有可移动性,使其在细菌多重耐药获得与传播机制的研究中具有重要意义. 【期刊名称】《中国抗生素杂志》【年(卷),期】2010(035)006 【总页数】7页(P414-420) 【关键词】SGI1;多重耐药;移动原件【作者】王芳【作者单位】中国人民解放军第309医院,北京,100091 【正文语种】中文【中图分类】R378 细菌的耐药性是由耐药基因决定的，耐药基因可以由染色体上一些特殊的位点编码，也可以由细菌的质粒携带。近年来在医学细菌学领域对细菌多重耐药的研究中出现了一个新概念：“耐药基因岛(resistance genomic island)或耐药岛(resistance island)”[1]。耐药基因岛是指编码细菌耐药基因簇的相对分子量比较大的染色体

DNA片段(>10kb)，其特点是岛两侧一般具有重复序列和插入元件，不稳定，岛内含有潜在的可移动元件(如整合子)，编码细菌多种耐药的基因位于岛上。研究表明，耐药基因岛的G+C含量与宿主菌染色体G+C含量有明显差异，说明它是细菌在进化过程中获得的[2]。发现及研究多重耐药基因岛为我们了解细菌多重耐药性获得和传播的机制提供了有效途径。目前已经发现在沙门菌属中的许多菌株存在一个较大的耐药基因岛—SGI1，该多重耐药基因岛上携带有blaPSE-1、floR、aadA、sul、tet等耐药基因，分别编码对氨苄西林、氯霉素、链霉素、磺胺类药物、四环素等药物的耐药性[1]。在沙门菌以外的其他细菌中也发现存在该耐药基因岛，提示SGI1在细菌多重耐药基因传播和转移过程中发挥重要的作用，现对SGI1的研究进展综述如下。 1 SGI1的发现沙门菌主要引起人类食源性传染病，在美国估计每年有四百万人因此感染发病，600人死亡。这些感染中，大约10%左右需要抗生素治疗[3]。噬菌体DT104型鼠伤寒沙门菌是最常见的一种致肠炎沙门菌，1989年首次从人体内分离鉴定该菌，到上世纪90年代初很快呈现全球流行，成为引起人类沙门菌感染的主要噬菌体型[4-5]。尽管在上世纪60年代对该菌已有描述，但直到80年代初，在英国分离出一株对氨苄西林(ampicillin)、氯霉素(chloramphenicol)、链霉素(streptomycin)、磺胺类药物(sulfonamides)、四环素(tetracycline)(五种抗生素简写为ACSSuT)同时耐药的DT104型菌，才发现该菌有多重耐药性[5]。进一步的研究发现，DT104型菌株的多重耐药决定区(MDR)是位于染色体上的一个较大区域，该区域被命名为SGI1[6]。发现多重耐药基因定位于染色体引起很大关注，因为这表明即使没有抗生素选择性压力，耐药性也会稳定持续存在。然而，引起更大关注的是在其他 11种血清型的沙门菌中也发现了该耐药基因岛存在[7-12]，其他菌株一旦获得该耐药基因岛，即表现和DT104菌株相同的多重耐药性。2000-2002年对法国分离

一株致病性溶藻弧菌的多重耐药与毒力基因分子分析

一株致病性溶藻弧菌的多重耐药与毒力基因分子分析胡梦华;马立才;赵姝;刘旭;周俊芳;房文红【摘要】A pathogenic Vibrio alginolyticus strain,named VA-76,was isolated from ceca contents of a diseased Litopenaeus vannamei collected from Fuqing,Fujian Province.Antimicrobial susceptibilty tests for 13 antimicrobials and infection assay for Litopenaeus vannamei were performed to determine the phenotype of antimicrobial resistance and pathogenicity of VA-76,respectivly.To explore the genotype of antimicrobial resistance and pathogenicity,the isolate was also analyzed by PCR detection for virulence genes,integron-related genes and antimircobial resistance genes.In artificial infection assay,death occurred in all 4 groups of Litopenaeus vannamei infected with 3.5 ×107cfu,3.5 ×106cfu,3.5 ×105cfu,and 3.5 ×104c fu,and the death rates were 100%,100%,80%,and 65%,respectively.The virulence-related genes such as tdh,tlh, toxS,collagenase,flaA,ompW,aspA,and fur were identified in VA-76.The results of antimicrobial susceptibility tests showed that this bacteria was res istant to multiple antimicribals,including florfenicol (32μg· mL- 1 ),doxycycline (32μg · mL-1 ),ciprofloxacin (>64μg · mL- 1 ),chloramphenicol (128μg·mL-1 ),streptomycin (>5 12μg·mL- 1 ),erythromycin (256μg·mL-1 ),sulfamethoxazole (>2048μg·mL- 1),TMP/SMZ (>128/2432μg·mL-1),and rifampin (>64μg·mL- 1).Especially,VA-76 exhibited high-level resistance to the latter 7 antimicrobials,and had relatively high MIC for neomycine (>32μg·mL-

耐复方新诺明嗜麦芽窄食单胞菌耐药基因检测及同源性分析

耐复方新诺明嗜麦芽窄食单胞菌耐药基因检测及同源性分析伍启康;吴奎海;崔东岚【摘要】Objective To explore the resistance mechanisms and homology of TMP/SMX-resistant S. maltophilia isolates. Methods The antimicrobial susceptibility tests of 126 S. maltophilia isolates from clinical specimens between January and De-cember 2013 were determined by K-B method. The Sul1, sul2, ISCR1 and class I integron were performed by PCR. The PCR pos-itive products of class I integron were analyzed and were genetypes determined by sequencing, and the homology analysis was con-ducted by ERIC-PCR. Results The resistant rate of TMP/SMX-resistant S. maltophilia was 17.4%. There were 16 sul1 and 15 class I integrons positive isolates among the 22 TMP/SMX-resistant S. maltophilia isolates. But none of 126 isolates carried sul2 or ISCR2. 22 TMP/SMX-resistant S. maltophilia isolates contained 21 kinds of genotypes. Conclusions In our hospital, the resis-tance of S. maltophilia isolates to TMP/SMX is highly correlated with sull and class I integron, but not sul2 and ISCR2. There is no genetic correlation between the drug resistant strains.%目的：探讨嗜麦芽窄食单胞菌临床分离株耐复方新诺明的耐药机制及同源性。方法2013年1月至2013年12月共分离获得126株嗜麦芽窄食单胞菌，药敏试验采用 K-B法。 PCR法检测sul1、sul2、ISCR2、I类整合子。并对I类整合子PCR扩增阳性产物进行测序分析，确定基因型， ERIC-PCR对其同源性进行分析。结果嗜麦芽窄食单胞菌对复方新诺明的耐药率为17.4％。22株耐药菌有16株sul1阳性，15株I类整合子阳性；未发现sul2、ISCR2阳性株。22株耐药株分为21个基因型。结论本院嗜麦芽窄食单胞

耐复方新诺明香港海鸥型菌中Ⅰ类整合子、磺胺类耐药基因(sul1、sul2)的检测

耐复方新诺明香港海鸥型菌中Ⅰ类整合子、磺胺类耐药基因 (sul1、sul2)的检测陈冰;胡静;冯嘉丽;李美霞;朱江峰;魏耀红;张欧;康燕;俞守义;陈清【摘要】目的了解香港海鸥型菌淡水鱼与蛙来源分离株磺胺类耐药性以及Ⅰ类整合子介导耐药的情况.方法采用K-B纸片扩散法检测香港海鸥菌耐复方新诺明药物菌株,PCR方法扩增耐药菌株sul1、sul2和Ⅰ类整合子基因.结果 128株香港海鸥菌中共有20株耐复方新诺明药物,耐药率15.6%;20株耐药菌株中sul1阳性率90%,sul2阳性率50%,Ⅰ类整合子携带率80%.结论淡水鱼与蛙来源香港海鸥型菌菌耐磺胺的机制可能与Ⅰ类整合子、sul1、sul2基因有关.%The objective was to study the occurrence of sulphonamide resistance genes and class I integrons in Lari-bacler hongkongensis (LH) isolates. The isolates were obtained from freshwater fishes and frogs. The trimethoprim-sulfame-thoxazole (SXT) agent susceptibility was carried out by the K-B disk diffusion method, and all sulphonamide-resistant isolates were investigated for the presence of sull, sul2 and class I integron genes by PCR. The 15. 6% (20/128) of the Laribacler hongkongensis isolates were resistant to SXT. Among the SXT resistant isolates, sull, sul2 and class I integron genes were detected out 90% (18/20) , 50% (10/20) and 80% (16/20) , respectively. Results indicate that the mechanism of SXT-resistant LH isolates from freshwater fishes and frogs are likely to associate with sull, sul2 and class I integron genes. 【期刊名称】《中国人兽共患病学报》

细菌多重耐药与整合子-基因盒系统

细菌多重耐药与整合子-基因盒系统单霞;黄茂【摘要】细菌的酎药性,尤其是多重酎药已成为临床治疗的大难题.修饰酶及灭活酶的产生、抗生素作用靶位的改变以及利用膜蛋白的缺失与主动外排泵系统过表达来减少抗生素在细胞内的浓度,是细菌的几个重要耐药机制.整合子介导耐药基因在染色体、质粒及转座予之闾移动,从而导致细菌耐药性的传播,是细菌耐药性迅猛发展的重要原因. 【期刊名称】《医学综述》【年(卷),期】2010(016)003 【总页数】3页(P354-356) 【关键词】多重酎药;整合子;基因盒;耐药基因【作者】单霞;黄茂【作者单位】南京医科大学第一附属医院呼吸科,南京,210029;南京医科大学第一附属医院呼吸科,南京,210029 【正文语种】中文【中图分类】R378 近年来由于抗生素的广泛及不合理应用,细菌的多重耐药性迅速出现,耐药细菌几乎对所有临床应用的抗生素都产生了耐药,给临床治疗带来了极大的困难。除自身基因突变,细菌通过抗生素耐药基因的水平转移从外部获得抗性,也是临床耐药菌株产

生的重要途径。整合子通过捕获并表达外来耐药基因而获得耐药性。整合子本身是不可移动的,可通过质粒、转座子或整合型噬菌体而在同种菌或不同种菌之间水平传播耐药性,也可存在于细菌的染色体上,随着细菌的繁殖复制到子代 DNA中,是革兰阴性杆菌多重耐药迅速发展的主要原因。 1 整合子的结构、分类 1.1 整合子的结构整合子由5′保守末端 (conserved segment,CS)、3′保守末端及中间的可变区组成,它能够捕获和整合耐药基因,形成巨大的多基因座[1]。5′CS是整合子的基本结构,包括 intI基因、整合子重组位点 attI和启动子。IntI编码整合酶 (integrase,Int I)催化基因盒在整合子重组位点 attI和基因盒重组位点 attC之间的整合和剪切。启动子通常有 P1和 P2两种,大多数整合子都含有 P1启动子, P2只见于少数整合子。中间可变区域是由基因簇与特异性整合位点组成,基因簇一般由一个或多个编码不同耐药性的耐药基因盒组成。几乎所有已知的耐药整合子上的基因盒都为编码对抗生素和消毒剂抗性的基因。3′CS的结构根据整合子种类而异。 1.2 整合子的分类整合子是根据其整合酶的碱基序列不同进行分类的。整合酶属于酪氨酸整合酶家族,目前发现的整合酶至少有 6类,Int I1～3与细菌耐药基因的播散密切相关,所以常被合称为耐药整合子。 1.2.1 Ⅰ类整合子Ⅰ类整合子是迄今研究最多的一类整合子,含有 337个氨基酸。 Ⅰ类整合子的5′CS多相似,3′CS存在差异。大多数3′保守端有 3个开放阅读框架:季铵盐化合物及溴乙锭的耐药基因、磺胺耐药基因、功能不明的开放阅读框架 5, 有少数Ⅰ类整合子不含3′保守端。整合子的可变区带有不同数量的基因盒,大部分是编码各种抗生素抗性的耐药基因盒。Ⅰ类整合子在革兰阴性菌中广泛分布,包括不动杆菌属、大肠埃希菌属、克雷伯菌属、假单胞菌属、沙门菌、志贺菌属等[2]。仅有少数研究报道表明革兰阳性菌中亦有Ⅰ类整合子的存在[3]。

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鲍曼不动杆菌中耐消毒剂基因qacEΔ1-sul1和Ⅰ类整合酶的携带情况调查陈秋霞;赵苏瑛【摘要】目的：调查分析我院临床分离的鲍曼不动杆菌菌株中耐药基因的分布情况及部分多重耐药株的流行病学特点。方法收集2016年1~6月我院院内分离的150株鲍曼不动杆菌，MIC法测定其对抗生素的敏感性；将对三类以上抗生素耐药的菌株定义为多重耐药菌，运用PCR法检测qacEΔ1-sul1和intI 1基因在所分离菌株中的分布，并用PFGE法对其中多重耐药鲍曼不动杆菌进行分子分型。结果鲍曼不动杆菌敏感率排行前三的药物为妥布霉素(50.0%)、庆大霉素(44.2%)和亚胺培南(42.4%)；84株多重耐药鲍曼不动杆菌中排行前三的药物为美罗培南(33.3%)、头孢哌酮(33.3%)和左氧氟沙星(13.1%)；qacEΔ1-sul1和intI 1在鲍曼不动杆菌中的携带率为46.2%(85/150)和58.0%(88/150)；在多重耐药鲍曼不动杆菌中的携带率为59.5%(49/84)和83.4%(70/84)。多重耐药鲍曼不动杆菌经PFGE分型可分为14个克隆，其中A克隆最多见，在ICU、呼吸科和急诊病房均存在集中流行，神经内科和老年科以C克隆多见，其余均为散在流行。结论qacEΔ1-sul1和intI 1在鲍曼不动杆菌中的携带率很高，在多重耐药株中更高，说明I类整合子是鲍曼不动杆菌产生耐药的原因之一，研发新的消毒剂以消除鲍曼不动杆菌在院内的流行迫在眉睫，此外同一克隆株在同一病区的集中流行和在病区间的交叉流行提示应采取进一步的感染控制和隔离措施。%Objective To investigate the profiles of antibiotic resistance genes and molecular typing of Acineto-bacter baumannii isolates collected from clinical specimens in our hospital. Methods This study included 150 A. bau-mannii isolates collected from Jan. 2016 to Jun. 2016. Antibiotic susceptibility test was

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中级临床医学检验技术微生物学及检验（肠杆菌、不发酵革兰阴性菌属）-试卷1 (总分：54.00，做题时间：90分钟) 一、A2型题(总题数：2，分数：4.00) 1.一细菌可发酵葡萄糖、还原硝酸盐、氧化酶阴性、触酶阳性，需氧或兼性厌氧生长，可能为（分数： 2.00） A.肠杆菌 B.非发酵菌 C.不动杆菌 D.葡萄球菌 E.肠球菌 2.29岁女性，发热1周，食欲缺乏、乏力、腹胀、腹泻、脾大。外周血白细胞偏低，起病后曾服退热药及磺胺药，发热仍不退，临床怀疑为伤寒病。为进一步确诊，首选应做的检查是（分数：2.00） A.肥达反应 B.血培养 C.尿培养 D.粪便培养 E.骨髓培养二、A1型题(总题数：22，分数：44.00) 3.由大肠埃希菌导致的最常见的肠外感染是（分数：2.00） A.烧伤创面感染 B.肺炎 C.泌尿系统感染 D.败血症 E.腹膜炎 4.在初步鉴别肠道致病菌和非致病菌上具有重要意义的试验是（分数：2.00） A.葡萄糖发酵试验 B.乳糖发酵试验 C.菊糖发酵试验 D.甘露醇发酵试验 E.吲哚试验 5.鼠疫耶尔森菌的生物学性状描述正确的是（分数：2.00） A.25℃动力阴性，37℃动力阳性 B.无荚膜、鞭毛、芽孢 C.生长迅速，繁殖快 D.陈旧培养物上细菌形态呈现多样性 E.在液体培养物上细菌形态呈现多形性 6.志贺菌引起中毒性菌痢的主要致病物质是（分数：2.00） A.痉挛毒素 B.肠毒素 C.溶血毒素 D.内毒素 E.侵袭性酶 7.沙雷菌属与克雷伯菌属、肠杆菌属的主要鉴别试验是（分数：2.00） A.DNA酶试验

B.鸟氨酸脱羧酶试验 C.赖氨酸脱羧酶试验 D.明胶液化试验 E.精氨酸脱羧酶试验 8.从尿路感染患者尿中分离到革兰阴性杆菌，以下哪一项试验可区分该菌为大肠埃希菌或普通变形杆菌（分数：2.00） A.动力试验 B.葡萄糖发酵试验 C.脲酶试验 D.吲哚试验 E.甲基红试验 9.下列可用来区分产气肠杆菌与阴沟肠杆菌的试验是（分数：2.00） A.动力试验 B.赖氨酸脱羧酶试验 C.鸟氨酸脱羧酶试验 D.V-P试验 E.甲基红试验 10.鉴定肠道致病菌的最确切根据是（分数：2.00） A.菌体的形态 B.革兰染色反应 C.生化反应 D.菌落特征 E.血清学反应 11.ESBLs常由下列哪种细菌产生（分数：2.00） A.痢疾志贺菌 B.肺炎链球菌 C.肺炎克雷伯菌 D.阴沟肠杆菌 E.金黄色葡萄球菌 12.变形杆菌属在普通培养基上菌落特点为（分数：2.00） A.常扩散生长，出现迁徙生长现象 B.菌落大，呈黏液状，相互融合，以接种环挑之易拉成丝 C.中等大小、圆形、凸起、灰白色、湿润、光滑菌落 D.圆形、隆起、光滑、湿润、不透明，菌落初呈白色，随后因种不同发展成黄色、白色或柠檬色 E.扁平粗糙型菌落 13.有关耶尔森菌属的特点中，哪一项不正确（分数：2.00） A.动力25℃阳性，37℃阴性 B.动力25℃阴性，37℃阳性 C.革兰阴性直或球杆菌 D.最适生长温度为28～29℃ E.氧化酶阴性，触酶阳性 14.空肠弯曲菌选择性培养最适宜的温度是（分数：2.00） A.30℃ B.35℃ C.37℃ D.40℃ E.42℃ 15.下列可用来作为O157：H7鉴别培养基的是（分数：2.00） A.TCBS

携带blaKPC-2基因泛耐药肺炎克雷伯菌可移动遗传元件分析

携带blaKPC-2基因泛耐药肺炎克雷伯菌可移动遗传元件分析黄支密;夏守慧;周芸;杨伟平;李洁;糜祖煌【摘要】目的了解临床分离的携带blaKPC-2型碳青霉烯酶基因泛耐药肺炎克雷伯菌中可移动遗传元件(mobile genetic elements,MGEs)存在情况.方法在2008年11月至2009年7月从住院患者中分离19株携带blaKPC-2型碳青霉烯酶基因泛耐药肺炎克雷伯菌,通过分析3种基因gyrA、parC和mdfA序列对菌株进行分子鉴定.采用PCR方法检测4种可移动遗传元件遗传标记基因,分别为:泛宿主性接合性质粒遗传标记trbC、转座子Tn1548遗传标记tnpU、Ⅰ类整合子遗传标记qacE△1-sul1和插入序列共同区遗传标记ISCR1基因;对扩增阳性的4种遗传标记基因PCR产物采用双向测序,测序结果用Chromas软件直接作BLASTSearch比对分析.结果本组19株gyrA、parC和mdfA基因PCR扩增均阳性,其基因序列经GenBank中的BLASTn程序进行同源性比较分析,证实19株均为肺炎克雷伯菌.19株中,4种可移动遗传元件遗传标记trbC、tnpU、qacE△1-sul1和ISCR1基因阳性率均为100.0％,经对该4种遗传标记基因PCR阳性产物进行测序比对,发现与GenBank中己发布的4种相对应基因trbC、tnpU、qacE△1-sul1和ISCR1序列完全相同(同源性均为100.0％),均得到确认.结论可移动遗传元件在携带blaKPC-2型碳青霉烯酶基因泛耐药肺炎克雷伯菌中广泛存在. 【期刊名称】《中国抗生素杂志》【年(卷),期】2017(042)002 【总页数】5页(P139-143)

产ESBLs肺炎克雷伯菌的耐药基因谱及遗传学特征

产ESBLs肺炎克雷伯菌的耐药基因谱及遗传学特征【摘要】目的：了解产ESBLs肺炎克雷伯菌的耐药基因谱及其遗传学特征。方法：对35株产ESBLs肺炎克雷伯菌，采用聚合酶链反应(PCR)检测aac（3）-Ⅰ,aac（3）-Ⅱ,aac（6′）-Ⅱ,ant（3″）-Ⅰ,ant（2″）-Ⅰ，aac(6′)-Ⅰ，aac(6′)-Ⅰb等7种氨基糖苷类修饰酶基因，TEM,SHV,LEN,OKP,CTXM-1,CTXM-2,CTXM-9,GES,PER,VEB,OXA-10,OXA-1,OXA-2,DHA,ACT-1等15种β-内酰胺酶基因，intI1,intI2,intI3等3种整合子基因，tnpA（TnA转座子标记）,merA （Tn21/Tn501转座子标记），qacEΔ1-sul1消毒剂耐药基因，qnr喹诺酮类耐药基因，共检测29种耐药基因并对部分产物进行测序。结果：35株肺炎克雷伯菌中检出β-内酰胺酶基因22株，阳性率62.9%。整合子基因阳性22株，阳性率62.9%。氨基糖苷类修饰酶基因阳性26株，阳性率74.3%。tnpA全部阴性。merA 阳性2株，阳性率5.7%。qacEΔ1-sul1阳性13株，阳性率37.1%。qnr全部阴性。在测序中发现一种新的基因型，并以aac(6′)-Ⅰb-Suzhou型命名，登录于美国NCBI(登录号：EF375621)。结论：产ESBLs肺炎克雷伯菌的耐药基因及耐消毒剂基因的携带率非常高，耐药基因谱及其遗传学特征非常复杂。【关键词】肺炎克雷伯菌；耐药基因；遗传学特征

［Abstract］Objective: To understand the resistance gene spectrum and genetics characteristics of Klebsiella pneumoniae(Kpn) producting ESBLs.Methods：The genes including aac(3)-Ⅰ，aac(3）-Ⅱ，aac（6′）-Ⅱ，ant（3″）-Ⅰ，ant（2″）-Ⅰ，aac(6′)-Ⅰ，aac （6′）-Ⅰb，TEM，SHV，LEN，OKP，CTX-M-1，CTX-M-2，CTX-M-9，GES，PER，VEB，OXA-10，OXA-1，OXA-2，DHA，ACT-1，intI1, intI2，intI3，tnpA, merA, qnr，qacEΔ1-sul1 were analyzed by PCR. And Some products were sequenced. Results：β-lactamase gene was found in 62.9％，AMEs gene was found in 74.3％，tnpA was all negative，Integron gene was found in 62.9％，merA was found in 5.7％，qnr was all negative，qacEΔ1-sul1 was found in 37.1％in 35 Kpn. We found a new genotype and named as aac（6′）-Ⅰb-Suzhou，which we have registrated in NCBI(Login: EF375621). Conclusion：The carrying rates of resistance gene and disinfectant-resistant gene were very high，resistance gene spectrum and genetics characteristics of Kpn producting ESBLs were very complex. ［Key words］Klebsiella pneumoniae；resistance gene; genetics characteristics

医院感染铜绿假单胞菌抗菌药物多重耐药基因的研究(论文版)

医院感染铜绿假单胞菌抗菌药物多重耐药基因的研究王继东1周丽珍1宫玲玲 1 唐丽凤1郁敏 1 糜祖煌 3 1．江南大学附属医院（无锡市第五人民医院）214073 2．无锡市克隆遗传技术研究所 214026 铜绿假单胞菌（Pseudomonasaeruginosa, Pa）是呼吸道最常见的条件致病菌，也是医院感染的常见病原菌。其耐药多由于产生灭活药物的酶和/或细菌外膜对药物的通透性降低使抗菌素失效[1]。近年来Pa菌多重耐药株引起的感染常使临床治疗面临诸多困难，国外的分子生物学研究发现，Pa菌可以通过获得各种β内酰胺酶编码基因（广谱或超广谱β内酰胺酶、金属β内酰胺酶等）和／或外膜通道蛋白OprD2基因缺失而导致对β内酰胺类抗生素耐药的重要原因[2-5],由于β内酰胺类抗生素的广泛使用和碳青霉烯酶的产生，使其耐药性明显上升[6]。Pa菌还可通过获得氨基糖苷类修饰酶钝化氨基糖苷类抗生素而耐药[7]，Pa菌并可以借助获得整合子qacE△1基因从而耐消毒剂[8]。耐消毒剂Pa菌株的出现大大提高了引起医院内感染的可能性。为了解我院Pa菌医院感染分离株中β内酰胺酶、oprD2、氨基糖苷类修饰酶编码基因存在状况和铜绿假单胞菌的多重耐药机制，我们对37株Pa菌进行了TEM、SHV、CTX-M、OXA-10group、PER、GES、VEB、CARB、DHA、IMP、VIM、和oprD2等12种β内酰胺类抗菌药物耐药相关基因和aac（3）-Ⅱ、aac（6′）-Ⅰ、aac（6′）-Ⅱ、ant （3″）-Ⅰ、ant（2″）-Ⅰ等5种氨基糖苷类修饰酶基因以及耐消毒剂基因(qacE△1-sul1)的检测研究，现报告如下。 1 材料与方法 1.1 菌株来源 37株Pa菌均分离本院2004年1月～2005年12月住院病人临床标本。其中痰液29份，气管切开患者气管内分泌物4份，胸水2份，伤口分泌物1份,眼部分泌物1份。用法国生物－梅里埃公司VITEK--32系统鉴定菌种。标准菌株为大肠埃希菌ATCC25922和铜绿假单胞菌ATCC27853。 1.2 药敏试验采用K-B法测定15种抗菌药物的敏感性。并根据美国临床实验室标准化委员会（National Committee for Clinical Laboratory Standards，NCCLS）2004年版要求进行抗生素敏感性判断。 1.3 细菌处理挑纯培养菌落置入0.5ml离心管内（内已预置200ng/ml蛋白酶K溶液）。56℃水浴2h，改95℃水浴10min。离心15000r/min30s，移液器吸取上清液移入另一新的0.5ml