植物基因转化常用方法(植物遗传,农杆菌、病毒介导和基因枪转化法)
一. 植物遗传转化的方法
植物遗传转化技术可分为两大类：一类是直接基因转移技术，包括基因枪法、原生质体法、脂质体法、花粉管通道法、电激转化法、PEG介导转化方法等，其中基因枪转化法是代表。另一类是生物介导的转化方法，主要有农杆菌介导和病毒介导两种转化方法，其中农杆菌介导的转化方法操作简便、成本低、转化率高，广泛应用于双子叶植物的遗传转化。
二.农杆菌介导的基因转化方法
（一）农杆菌的Ti质粒与T-DNA的整合机制几乎所有双子叶植物都容易受到土壤农杆菌感染，而产生根瘤。它是一种革兰氏阴性土壤杆菌（A. tumefaciens）。其致瘤特性是由Ti
（tumor－inducing）质粒介导的。农杆根瘤菌之所以会感染植物根部是因为植物根部损伤部位分泌出酚类物质乙酰丁香酮和羟基乙酰丁香酮，这些酚类物质可以诱导Vir（Virulence region)基因的启动表达，Vir基因的产物将Ti 质粒上的一段T－DNA单链切下，而位于根瘤染色体上的操纵子基因产物则与单链T－DNA 结合，形成复合物，转化植物根部细胞。T－DNA 上有三套基因，其中两套基因分别控制合成植物生长素与分裂素，促使植物创伤组织无限制地生长与分裂，形成冠瘿瘤。第三套基因合成冠瘿碱，冠瘿碱有四种类型：章鱼碱（octopine）、胭脂碱（nopaline）、农杆碱（agropine）、琥珀碱（succinamopine），使农杆菌生长必需的物质。
1. Ti质粒的结构
在发现根瘤农杆菌诱发冠瘿瘤的本质是Ti 质粒后，Ti质粒便成为冠瘿瘤形成基因鉴定与分析的主要研究对象。
Ti质粒大约在160～240kB之间。其中
T-DNA大约在15kb-30kb。Vir基因区在36kb 左右。除此之外，Ti质粒上还存在Con区（region encoding conjugation)和Ori区（origin of replication)。
T-DNA上共有三套基因和左右两个边界，LB和RB是长为25bp的末端反复重复顺序，在切除及整合过程具有重要意义。
tms由两个基因组成：tms1（iaaM）和tms2（iaaH）
tmr由一个基因组成iptz：
tmt由若干基因构成，合成稀有氨基酸衍生物，称为opines。它有三个成员：
octopine＝精氨酸与丙酮酸的缩合物
Napaline＝精氨酸与－酮戊二酸的缩合物
Agropine＝谷氨酸与二环糖的缩合物
据此可将Ti质粒分为三大类，感染的植物诱导合成这些有机碱，但不能利用它们，其分解酶基因在Ti质粒上，分解产物为氨基酸和糖类，供根癌农杆菌使用作为氮源及碳源。
（学习的目的是增长知识，提高能力，相信一分耕耘一分收获，努力就一定可以获得应有的回报）
浅析非病毒载体基因转移技术的现状和展望
浅析非病毒载体基因转移技术的现状和展望 摘要：目前基因治疗已经成为科学家治疗多种难治性疾病的一种新手段，基因导入技术是基因治疗的核心也是最基本的技术。目前研究较多的基因导入技术共分为两大类：一，病毒载体基因导入法；二，非病毒载体基因导入法。前者转染效率高,但存在安全性和免疫原性等问题。因此,近年来人们对非病毒类载体系统给予了更多的关注。 关键词：非病毒载体基因转移技术现状和展望 非病毒载体基因转移方法又分为物理方法和化学方法。物理方法如：注射法、基因枪法、电穿孔法、超声波法等都是借助物理力量穿透细胞膜达到基因转移的目的；化学方法则是借助天然的或者人工合成的化合物辅助完成基因转移。尽管近年来在非病毒基因转移领域中取得了显著成效，但总体而言，非病毒载体相对于病毒载体来说转移基因的效率要低，在体内的基因转移尤其如此。现在把目前较常用的非病毒载体基因转移方法的优势和局限综述如下。 1 物理方法 就是基于物理力量造成细胞膜的瞬间缺损，从而使质粒DNA进入细胞内的方法。如基因枪法、电穿孔法、超声波法等，还有近年来发现的激光相关辅助方法。 注射法 直接将质粒DNA注射入组织细胞中达到基因转移的目的。有学者成功地将裸露的质粒DNA注射入肌肉、肝脏、皮肤等组织，但基因表达水平较低。注射法中，细胞表面的某些受体起了一定的作用，它们能够特异或者非特异性地结合DNA并且介导DNA的内吞，但这些受体的详细作用机制不甚清楚。由于注射法有其独特优点如：方法简单，不需特殊试剂且毒性低而受到欢迎。此外，借助显微操作系统进行的显微注射法是目前国际上公认的制备转基因和基因剔除动物模 型的首选。 基因枪法 基因枪法是一种全新的基因导入技术，它以压缩气体（氦或氮）转换成的气体冲击波为动力，把附着于高速微弹上的DNA直接射入细胞、组织和细胞器，基因枪导入的基因被证明可在广泛类型的细胞中得到瞬时的、高效率的表达。基因枪法是皮肤、黏膜以及手术局部暴露组织较理想的基因转移方法，因而基因枪被认为是将来DNA疫苗的良好免疫工具。但是基因枪法用于基因治疗还需要进一步改进，如通过对微弹颗粒表面结构的改良使其可以结合更多的DNA或者使结合
基因转移技术
基因转移技术 什么是基因转移技术？ 基因转移技术是将特定的外源基因信息转入到受体细胞或生物并使其表达的一种基因工程技术。基因转移技术已广泛用于基因的结构和功能分析、基因表达与调控、基因治疗与转基因动物模型建立等研究方向。 基因转移方法有哪几类？ 一、化学转染 1.磷酸钙法 该技术通过将磷酸盐溶液和含有DNA的氯化钙溶液进行缓慢混合，形成DNA-磷酸钙共沉淀复合物。复合物能粘附于细胞膜上，通过细胞内吞作用进入细胞浆中。 优点：实验室中转染哺乳动物细胞最广泛使用的方法。试剂易获得，成本低，可用于瞬时转染和稳定转染。 缺点：重复性差，转染效率低。对基因和细胞的选择要求较高。 2.DEAE-葡聚糖法 DEAE-葡聚糖是最早开发的转染试剂之一。它是一种可溶的聚阳离子碳水化合物，通过与带负电的DNA结合形成聚集物。携带正电荷的复合物与带负电荷的细胞膜结合，通过细胞内吞作用进入细胞中。与磷酸钙转染过程中形成的复合物颗粒相比，其粒径更小。 优点：该试剂价格便宜，并且过程简便、效率较高。一般常用于瞬时转染，DNA使用量较少。 缺点：不适用于稳定转染。 3.脂质体法 脂质体分为单层脂质体和多层脂质体。常用的阳离子脂质体与带负电的DNA结合，形成DNA-阳离子脂质体复合物，从而吸附到带负电的细胞膜表面，通过细胞内吞作用进入细胞。脂质体介导的基因转移的效率可以通过整合病毒蛋白来提高，从而促进病毒包膜和细胞膜之间的主动融合。这种融合粒子被称为病毒体。 优点：能够在活体内应用，毒性低、重复性好。适用性广，在很多细胞中能得到有效的瞬时转染和稳定转染效果。 缺点：试剂难以自制，商品较为昂贵，转染效果在不同细胞类型中差异较大。
遗传学
名词解释 等位基因：同源染色体上相对位置上的决定同种性状的基因。 性状：生物的形态、结构，生理功能过程的特征。 分离：（在生物的体细胞中，控制同一性状的遗传因子成对存在，不相融合；在形成配子时，成对的遗传因子发生分离，分离后的遗传因子分别进入不同的配子中，随配子遗传给后代。） 自由组合：控制两对性状的两对等位基因，位于不同对的同源染色体上，在形成配子时，每对同源染色体上的等位基因分离，而非同源染色体上的非等位基因自由组合。 外显率：一定基因型的群体中表现出预期表型性状的比率。 表现度：具有相同基因型的个体之间基因表达的变化程度称为表现度。 完全显性：两个不同的等位基因同时存在时，只有一个的表型效应得以完全显现。共显性：一对等位基因的两个成员在杂合体中都表达的遗传现象称为并显性遗传。 不完全显性：由一对等位基因决定的相对性状中，显性是不完全的。 连锁：位于同一染色体上的基因伴同遗传的现象。 交换：由于同源染色体相互间发生互换而使原来在同一染色体上的基因不再伴同遗传的现象。 顺序四分子：脉孢菌减数分裂的4个产物保留在一起，且以直线方式排列在子囊中，称为四分子。 F因子：细菌细胞中，独立于染色体之外，能够自我复制的环状DNA，分子量为 转化：没有噬菌体作介导，细胞从周围介质中吸收裸露的DNA由DNA直接转入受体细胞的过程。 接合：是指通过细胞的直接接解，遗传信息从供体单向转移到受体的过程。 转导：就是以病毒作为载体将遗传信息从一个细菌细胞传递到另一个细菌细胞。转导又可分为普遍性转导和局限性转导。 F’因子：从染色体上完整地游离下来形成F+菌株，但是偶尔也会出现不规则的环出，形成F因子携带一段相邻的细菌染色体。这种带有插入细菌基因的环状F 因子是一个复制子，这种新的F因子称为F’因子。 性导：利用F’因子将供体细胞的基因导入受体形成部分二倍体的过程称作性导。数量性状：所有能够度量的性状都可称为数量性状。 显性说：基因的杂合状态是产生杂种优势的根本原因，等位基因间不存在显隐性关系，基因处于杂合态时比两个纯合态的作用大，杂合座位越多，优势就越大。超显性说：杂种优势是对生长发育有利的显性基因相互补充的结果，杂合态中隐性有害基因被显性有利基因的效应所掩盖，杂种显示出优势。 母体影响：由于母体中核基因的某些产物积累在卵母细胞的细胞中，使子代表型不由自身的 基因型所决定而出现与母体表型相同的遗传现象，则称母体影响。母体影响有两种：一种是 短暂的，另一种是持久的。 短暂的母体影响： 持久的母体影响：
高考生物大复习 现代生物科技四十三 3.4 胚胎工程与生物技术的安全性和伦理问题课时提升作业(选修3)
胚胎工程与生物技术的安全性和伦理问题 (40分钟100分) 1.(12分)下图是某科研小组设计的用“精子介导基因转移法”培育转基因山羊(2n)的流程图。据图回答下列问题：世纪金榜导学号77982494 (1)“精子介导基因转移法”是利用精子易于与外源基因结合的能力，通过图中的①过程，将精子作为外源基因的________，由________的精子经过②过程，将外源基因送入卵母细胞。 (2)进行②过程的卵母细胞应处于____________期，此时细胞中含________个染色体组。 (3)③过程中的卵裂期有机物种类________，有机物总量________。 (4)④过程的实质是__________________。 【解析】(1)图中过程①为将外源基因导入精子，以精子作为外源基因的载体，由获能的精子将外源基因导入卵母细胞。 (2)②为体外受精，卵母细胞需培养至MⅡ中期才能进行受精作用，此时细胞中只有1个染色体组。 (3)③过程中的卵裂期细胞分裂、生长所需的营养物质来自受精卵的细胞质，有机物总量将逐渐减少，有机物种类增多。 (4)④为胚胎移植，其实质是早期胚胎在生理环境相同的条件下空间位置的转移。 答案：(1)载体获能(2)减数第二次分裂中 1 (3)增多减少 (4)早期胚胎在生理环境相同的条件下空间位置的转移 2.(12分)(2017·福州模拟)科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导性多能干细胞(iPS)，继而利用iPS 细胞培育出与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠。流程如下：世纪金榜导学号77982495
(1)从黑鼠体内获得体细胞后，对其进行的初次培养称为____________，培养的细胞在贴壁生长至铺满培养皿底时停止分裂，这种现象称为____________。 (2)图中2-细胞胚胎可用人工方法从灰鼠子宫内获得，该过程称为________；也可从灰鼠体内取出卵子，通过____________后进行早期胚胎培养获得。 (3)图中重组囊胚通过____________技术移入白鼠子宫内继续发育，暂不移入的胚胎可使用________方法保存。 (4)小鼠胚胎干细胞(ES细胞)可由囊胚的____________分离培养获得。iPS细胞与ES细胞同样具有发育的全能性，有望在对人类iPS细胞进行定向____________后用于疾病的治疗。 【解析】(1)原代培养指将动物组织用酶处理成单个细胞后进行的初次培养。接触抑制指贴壁的细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖的现象。(2)将早期胚胎从母体子宫中冲洗出来叫冲卵。 (3)暂不进行胚胎移植的胚胎可放入-196℃的液氮中保存。(4)iPS细胞与ES细胞一样，可通过定向诱导分化修补某些功能异常的细胞来治疗疾病。 答案：(1)原代培养接触抑制(2)冲卵体外受精(或核移植) (3)胚胎移植冷冻(或低温) (4)内细胞团诱导分化 【易错提醒】冲卵与排卵不同 (1)冲卵：从供体的子宫内把胚胎冲洗出来，而不是把卵子冲洗出来。 (2)排卵：指卵子从卵泡中排出，卵子不是卵细胞，而是初级卵母细胞或次级卵母细胞。 3.(12分)(2017·威海模拟)人组织纤溶酶原激活物(htPA)是一种重要的药用蛋白，可在转htPA基因母羊的羊乳中获得。流程如下： 世纪金榜导学号
农杆菌介导转化法的概述
农杆菌介导转化法的概 述 集团公司文件内部编码：（TTT-UUTT-MMYB-URTTY-ITTLTY-
学年第学期 2014级硕士生生物化学期末论文任课老师： 开课学院： 课程名称： 学院： 专业： 学号： 姓名： 2015年6月20日
农杆菌介导转化法的概述 摘要：自从1983年转基因植物诞生以来，植物基因工程成为发展最快、应用潜力最大的生物技术领域之一。植物转基因技术是指把从动物、植物或微生物中分离到的目的基因，通过各种方法转移到植物的基因组中，使之稳定遗传并赋予植物新的农艺性状，如抗虫、抗病、抗逆、高产、优质等。[1]? 目前，应用于植物转基因较多的方法有基因枪轰击法和农杆菌介导法。由于基因枪轰击的随机性，容易出现突变、丢失和引起基因沉默等不利于外源基因在宿主植物的稳定表达的缺点，而农杆菌介导法是一种天然的植物遗传转化系统,外源基因在转基因植物中的拷贝数低、遗传稳定，是最常用的转基因技术[2]。农杆菌介导法起初只被用于双子叶植物中，近年来，农杆菌介导转化法在一些单子 叶植物（尤其是水稻）中也得到了广泛应用。本文对农杆菌介导转化法进行综述。 关键词：农杆菌转化方法转化效率 1?关于农杆菌 农杆菌[3-5]是普遍存在于土壤中的一种革兰氏阴性细菌，它能在自然条件下趋化性的感染大多数双子叶植物的受伤部位，并诱导产生冠瘿瘤或发状根。与植物基因转化有关的有根瘤农杆菌和发根农杆菌这两种类型。 1.1??根癌农杆菌
依据Ti质粒诱导的植物细胞产生的冠瘿碱的种类不同，根癌农杆菌可分为4种类型：章鱼碱型（Octopine）、胭脂碱型（Nopaline）、农杆碱型（Agropine）和琥珀碱型（Succinamopine）。? 原始的Ti质粒根据其功能的不同可分为4个区： —DNA?region)：不同来源的菌株，T-DNA的长度在12~24?kb，它是在农杆菌侵染细胞时，从Ti质粒上切割下来转移到植物基因组中的一段DNA，其携带的基因与肿瘤的形成有关，但与T-DNA本身的转移与整合无关．T-DNA上最重要的是T-DNA区两端的边界各为25?bp的重复序列．其中14?bp是完全保守的，分10?bp(CAGGAATATAT)和4?bp(GTAA)不连续的2组．左右2个边界(LB和RB)是T—DNA转移所必需的，只要其存在，T-DNA可以将携带的任何基因转移并整合到植物基因组中，转移的方向是从右向左，T-DNA的右边界在T-DNA的整合中对于靶DNA位点的识别具有重要作用?，因此，尤以右边界更为重要。 位于T-DNA以外的1个30-40kb的区域内，该区段编码的基因虽然并不整合进植物基因组中，但对T-DNA的转移和整合非常重要。这些基因也称为Ti质粒编码毒性基因(vir)。目前，对章鱼碱型农杆菌Ti质粒 pTi15955和胭脂碱型农杆菌Ti质粒pTiC58的vir区进行了全序列分析，在章鱼碱型Ti质粒的vir区发现了8个操纵子，分别为virA-vjrH，共包括23个基因(virA，virB1-virB11，virC1，virC2，virD1-virD4，virE1，virE2，virF，virG，virH)．而胭脂碱型Ti质粒的vir 区不含vjrF和virH操纵子，它含有另一个基因tzs?，也有学者认为有大约35个vir基因成簇排布于vir区。
北京市朝阳区2020届高三一模生物试题(解析版)
北京市朝阳区2020届高三一模 1.下图为细胞膜的结构模式图，说法正确的是（ ） A. 磷脂双分子层是细胞膜的基本支架，③为疏水端，④为亲水端 B. 细胞癌变时，细胞表面发生变化，①减少使细胞的黏着性降低 C. 同种生物不同细胞的细胞膜上①、②、⑤的种类和数量完全相同 D. 性激素、甘油等小分子物质从A 侧运输到B 侧需要有②或⑤参与 『答案』B 『解析』 『分析』 据图分析可知，图示为细胞膜结构图，①表示糖蛋白，②⑤表示蛋白质，③④分别表示磷脂亲水头部和疏水的尾部，A 侧面为细胞膜的外侧，B 为内侧。 『详解』A 、磷脂由亲水的③头部和疏水的④尾部构成，A 错误； B 、癌细胞的表现发生了变化，由于细胞膜上的①糖蛋白等物质减少，使得癌细胞彼此之间的黏着性低，容易在体内分散和转移，B 正确； C 、膜的功能主要由蛋白质承担，故不同功能的细胞，其细胞膜上蛋白质的种类和数量不完全相同，C 错误； D 、性激素、甘油从A 侧运输到B 侧（进入细胞）的方式为自由扩散，不需要②或⑤的参与，D 错误。 故选B 『点睛』本题主要考查细胞膜的结构和功能，意在考查考生识图和理解能力，明确流动镶嵌模型是解答本题的关键。 2.下列有关生物多样性的叙述，正确的是（ ） A. 群落演替过程中生物多样性一般会逐渐降低 B. 建立动植物园是保护生物多样性最有效的措施 。
C. 湿地能调节气候，体现了生物多样性的直接价值 D. 生物多样性包括基因多样性、物种多样性、生态系统多样性 『答案』D 『解析』 『分析』 1.生物多样性是指生物圈内所有的植物、动物和微生物，它们所拥有的全部基因以及各种各样的生态系统共同构成的。 2.生物多样性的价值有：直接使用价值、间接使用价值和潜在使用价值。 『详解』一般情况下，群落演替过程中生物种类增多，生物多样性增加，A错误。建立自然保护区是保护生物多样性最有效的措施，B错误。湿地能调节气候，是属于生物多样性在生态上的功能，属于生物多样性的间接使用价值，C错误。生物多样性包括基因多样性、物种多样性、生态系统多样性，D正确。 3.有一种变异发生在两条非同源染色体之间，它们发生断裂后片段相互交换，仅有位置的改变，没有片段的增减。关于这种变异的说法错误的是（） A. 这种变异使染色体结构改变，在光学显微镜下可见 B. 该变异一定导致基因突变，为生物进化提供原材料 C. 该变异可导致染色体上基因的排列顺序发生变化 D. 该变异是可遗传变异的来源，但不一定遗传给后代 『答案』B 『解析』 『分析』 根据题干分析，“该类型的变异是两条非同源染色体发生断裂后相互交换，仅有位置的改变，没有染色体片段的增减”，属于染色体结构变异中的易位，据此分析作答。 『详解』A、由以上分析可知，该变异属于染色体结构变异，在显微镜下可以观察，A正确；BC、该变异属于染色体结构变异中的易位，可导致染色体上基因的排列顺序发生变化，但易位通常不会造成基因突变，B错误，C正确； D、可遗传变异包括突变（基因突变和染色体变异）和基因重组，故该变异属于可遗传变异，但不一定能遗传给后代，D正确。 故选B。 『点睛』本题考查染色体结构变异的相关知识，意在考查考生的识记能力、审题能力和理解
植物基因转化常用方法(植物遗传,农杆菌、病毒介导和基因枪转化法)
一. 植物遗传转化的方法 植物遗传转化技术可分为两大类：一类是直接基因转移技术，包括基因枪法、原生质体法、脂质体法、花粉管通道法、电激转化法、PEG介导转化方法等，其中基因枪转化法是代表。另一类是生物介导的转化方法，主要有农杆菌介导和病毒介导两种转化方法，其中农杆菌介导的转化方法操作简便、成本低、转化率高，广泛应用于双子叶植物的遗传转化。 二.农杆菌介导的基因转化方法 （一）农杆菌的Ti质粒与T-DNA的整合机制 几乎所有双子叶植物都容易受到土壤农杆菌感染，而产生根瘤。它是一种革兰氏阴性土壤杆菌（A. tumefaciens）。其致瘤特性是由Ti（tumor－inducing）质粒介导的。农杆根瘤菌之所以会感染植物根部是因为植物根部损伤部位分泌出酚类物质乙酰丁香 酮和羟基乙酰丁香酮，这些酚类物质可以诱导Vir（Virulence region)基因的启动表达，Vir基因的产物将Ti质粒上的一段T－DNA单链切下，而位于根瘤染色体上的操纵子基因产物则与单链T－DNA结合，形成复合物，转化植物根部细胞。T－DNA上有三套基因，其中两套基因分别控制合成植物生长素与分裂素，促使植物创伤组织无限制地生长与分裂，形成冠瘿瘤。第三套基因合成冠瘿碱，冠瘿碱有四种类型：章鱼碱（octopine）、胭脂碱（nopaline）、农杆碱（agropine）、琥珀碱（succinamopine），使农杆菌生长必需的物质。 1. Ti质粒的结构 在发现根瘤农杆菌诱发冠瘿瘤的本质是Ti质粒后，Ti质粒便成为冠瘿瘤形成基因鉴定与分析的主要研究对象。 Ti质粒大约在160～240kB之间。其中T-DNA大约在15kb-30kb。Vir基因区在36kb 左右。除此之外，Ti质粒上还存在Con区（region encoding conjugation)和Ori区（origin of replication)。
2020北京朝阳高三一模生物含答案
2020北京朝阳高三一模 生物 (考试时间90分钟满分100分) 第一部分(共30分) 本部分共15小题，每小题2分，共30分。在每小题给出的四个选项中，只有一项符合题目要求。 1.下图为细胞膜的结构模式图，说法正确的是 A.磷脂双分子层是细胞膜的基本支架，③为疏水端，④为亲水端 B.细胞癌变时，细胞表面发生变化，①减少使细胞的黏着性降低 C.同种生物不同细胞的细胞膜上①、②、⑤的种类和数量完全相同 D.性激素、甘油等小分子物质从A侧运输到B侧需要有②或⑤参与 2.下列有关生物多样性的叙述正确的是 A.群落演替过程中生物多样性一般会逐渐降低 B.建立动植物园是保护生物多样性最有效的措施 C.湿地能调节气候，体现了生物多样性的直接价值 D.生物多样性包括遗传多样性、物种多样性、生态系统多样性 3.有一种变异发生在两条非同源染色体之间，它们发生断裂后片段相互交换，仅有位置的改变，没有片段的增 减。关于这种变异的说法错误的是 A.这种变异使染色体结构改变，在光学显微镜下可见 B.该变异一定导致基因突变，为生物进化提供原材料 C.该变异可导致染色体上基因的排列顺序发生变化
D.该变异是可遗传变异的来源，但不一定遗传给后代 4.右图是人体缩手反射的反射弧结构，方框甲、乙代表神经中枢。当手被尖锐的物体刺痛时，先缩手后产生痛 觉。对此生理过程的分析正确的是 A.缩手反射的反射弧为A→B→C→D→E B.图中甲是低级神经中枢，乙是高级神经中枢 C.未受刺激时，神经纤维D处的电位是膜内为正、膜外为负 D.由甲发出的传出神经末梢释放的神经递质一定能引起乙的兴奋 5.下列关于人体免疫的叙述，正确的是 A.T细胞受到抗原刺激后可直接转变为效应T细胞 B.浆细胞产生的抗体可消灭宿主细胞内的结核杆菌 C.记忆细胞在二次免疫过程中产生更快更强的反应 D.人体内的吞噬细胞只能参与非特异性免疫的过程 6.下列关于细胞的叙述，正确的是 A.都能进行细胞呼吸但不一定发生在线粒体中 B.都能合成蛋白质但合成场所不一定是核糖体 C.都具有细胞膜但不一定具有磷脂双分子层 D.都具有细胞核但遗传物质不一定是DNA 7.下列与人们饮食观念相关的叙述中，正确的是 A.胆固醇会引起血管粥样硬化，不要摄入 B.谷物不含糖类，糖尿病患者可放心食用 C.食物中含有的核酸可被消化分解 D.过量摄入蛋白质类不会使人长胖 8.眼皮肤白化病(OCA)是一种与黑色素(合成时需要酪氨酸酶)合成有关的疾病，虹膜、毛发及皮肤呈现白色症状。 该病的两种类型OCA1(I型)与OCA2(II型)均是隐性突变造成的，有关该病的介绍如下表。有一对患病的夫妇生下了两个正常的孩子。下列说法不正确的是
基因工程复习资料
基因工程复习资料 生物技术在制药行业的应用：基因工程制药、细胞工程制药、酶工程制药、发酵工程制药。 基因工程：基因工程是在分子水平上进行的遗传操作，是指将一种或多种生物体的基因分离出来或人工合成基因，按照人们的愿望，进行严密的设计和体外加工重组，转移到另一种生物体的细胞内，使之能在受体细胞中遗传表达并获得新的遗传性状而形成新的生物类型的生物技术。（又称遗传工程） 基因工程流程：分、切、接、转、筛、表。 基因工程的四大要素(或基本条件)：目的基因、载体、工具酶、受体。 基因工程的突出特点：打破物种间基因交流的界限。 连接酶：T4连接酶(辅助因子为ATP，高等生物，实验采用)和大肠杆菌连接酶(辅助因子为NAD+，低等生物)。 基因工程诞生的理论基础：证明生物的遗传物质是DNA（20世纪40年代）、明确了DNA的双螺旋结构和半保留复制机制（20世纪50年代）、明确了遗传信息的传递方式（20世纪60年代）。 基因工程诞生的技术突破：工具酶(限制性内切酶和DNA连接酶)的发现与应用（基因操作的剪刀，针线）、载体的发现（发现了运载工具）、逆转录酶的发现（便于真核生物基因的获取，因其常有内含子，不便于操作）。 基因工程诞生的元年：1973年的DNA体外重组和大肠杆菌转化实验。 基因工程制药：利用重组DNA技术，结合发酵工程、细胞工程、酶工程等现代生物技术研制预防和治疗人类、动物重大疾病的蛋白质药物、核酸药物，以及生物制品的一门技术。 工具酶：工具酶是指基因工程操作中所使用的核酸酶类。 核酸酶：核酸酶是指对核酸片段可以进行操作（核酸的扩增、核酸的切割、核酸的连接）的一类酶。 工具酶：限制性内切酶、连接酶、聚合酶、修饰酶。 胰蛋白酶：动物细胞消散需要胰蛋白酶。 限制性核酸内切酶的限制作用：指一定类型的细菌可以通过限制酶的作用，破坏入侵的噬菌体DNA，导致噬菌体的寄主幅度受到限制；这是维护宿主遗传稳定的保护机制。 限制性核酸内切酶的修饰作用：指寄主本身的DNA，由于在合成后通过甲基化酶的作用得以甲基化，使DNA得以修饰，从而免遭自身限制性酶的破坏；这是宿主细胞识别自身遗传物质和外来遗传物质的作用
遗传期末整理
平衡致死系：用另一个致死基因来“平衡”，条件是两个致死基因间不发生交换（倒位区内），且位于各别的同源染色体上。可用于保存致死基因（即永久杂种）和常染色体上基因突变的检出。 部分二倍体：在细菌的交配过程中，由供体提供部分基因组，受体提供全套基因组，构成的二倍体。 表型模写：是一种由非诱变因素引发的表型改变现象，这种表型改变与基因突变的效应十分相似；比如，果蝇的突变体(vgvg)为残翅，幼虫经过一定的高温处理，成体的翅膀接近于野生型，但基因型仍为vgvg。 抑制基因：指某一突变基因的表型效应由于第二个突变基因的出现而恢复正常时，称后一突变基因为前者的抑制基因。 抑制因子突变：回复突变发生在另一个座位上，但掩盖了原来的突变型表型；与真正的回复突变区别是：突变型×野生型→子代仍然有突变型出现。 条件致死突变：在一定条件下表现致死效应,但在其它条件下能够存活的类型。 复制错误或渗入错误：DNA复制过程中核苷酸配对发生错误的现象。 隔裂基因或重叠基因：编码顺序由若干非编码区域隔开，使可读框不连续的基因称为隔裂基因。 遗传漂变：在小群体里，形成的子一代配子与合子的基因型频率会产生偶然的变化，如中性基因甚至是不利基因可以保留下来，而有利基因被淘汰。 普遍性转导 转导颗粒：是一种携带有外源DNA片段的杂合病毒颗粒，其中的DNA可以全部是外源的，也可以部分是外源的，前者是烈性噬菌体感染宿主后形成的，后者是温和噬菌体感染宿主后形成的。 狭义遗传率：群体遗传变异包括基因的加性效应、显性效应和上位效应，而纯合体之间只有加性效应的差别，因此，加性方差占总方差的比率是真实的遗传率。 Hfr菌株：即高频重组菌株，这种菌株具有整合状态存在的F因子，与F-交配，重组子频率提高1000倍，但F-细菌很少转变为F+ 四分子分析：一次减数分裂的四个子细胞称为四分子，对四分子进行遗传学分析称为四分子分析。 准减数分裂： 母性影响：正反交情况下，子代某些性状相同于雌性亲本，其中由于母体中核基因的某些产物积累在卵母细胞的细胞质中，使子代表型不由自身的基因型所决定而出现与母体表型相同的遗传现象。又叫前定作用 异源多倍体：指不同物种杂交产生的杂种后代经过染色体加倍形成的多倍体。 判断 以烈性噬菌体为媒介转移外源基因的过程称为普遍性转导。 猫叫综合症属于常染色体数目异常疾病。 T2噬菌体的DNA是环状双链DNA。 三倍体无籽西瓜的种子来源于♀2n×♂4n。 F1红眼(♀) 与P红眼(♂)交配称为回交。 果蝇2号染色体上基因突变的检测通常用平衡致死系法。 游离的5-溴尿嘧啶（5-BU）以酮式结构进入DNA分子，可引发渗入错误。 连锁现象是Bateson和Punnett最先发现的。
农杆菌介导转化法的概述
农杆菌介导转化法的概述 自从1983年转基因植物诞生以来，植物基因工程成为发展最快、应用潜力最大的生物技术领域之一。植物转基因技术是指把从动物、植物或微生物中分离到的目的基因，通过各种方法转移到植物的基因组中，使之稳定遗传并赋予植物新的农艺性状，如抗虫、抗病、抗逆、高产、优质等。[1] 目前，应用于植物转基因较多的方法有基因枪轰击法和农杆菌介导法。由于基因枪轰击的随机性，容易出现突变、丢失和引起基因沉默等不利于外源基因在宿主植物的稳定表达的缺点，而农杆菌介导法是一种天然的植物遗传转化系统,外源基因在转基因植物中的拷贝数低、遗传稳定，是最常用的转基因技术[2]。农杆菌介导法起初只被用于双子叶植物中，近年来，农杆菌介导转化法在一些单子叶植物（尤其是水稻）中也得到了广泛应用。本文对农杆菌介导转化法进行综述。 1 关于农杆菌 农杆菌[3-5]是普遍存在于土壤中的一种革兰氏阴性细菌，它能在自然条件下趋化性的感染大多数双子叶植物的受伤部位，并诱导产生冠瘿瘤或发状根。与植物基因转化有关的有根瘤农杆菌和发根农杆菌这两种类型。 1.1根癌农杆菌 根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)含有Ti质粒，能诱导被侵染的植物细胞形成肿瘤，即诱发冠瘿瘤；Ti质粒是农杆菌染色体外的遗传物质，为双链共价闭合环状DNA分子，大小约200-250kb。 依据Ti质粒诱导的植物细胞产生的冠瘿碱的种类不同，根癌农杆菌可分为4种类型：章鱼碱型（Octopine）、胭脂碱型（Nopaline）、农杆碱型（Agropine）和琥珀碱型（Succinamopine）。 原始的Ti质粒根据其功能的不同可分为4个区： 1.1.1T-DNA区(Transfer—DNA region)：不同来源的菌株，T-DNA的长度在12~24 kb，它是在农杆菌侵染细胞时，从Ti质粒上切割下来转移到植物基因组中的一段DNA，其携带的基因与肿瘤的形成有关，但与T-DNA本身的转移与整合无关．T-DNA上最重要的是T-DNA区两端的边界各为25 bp的重复序列．其中14 bp 是完全保守的，分10 bp(CAGGAATATAT)和4 bp(GTAA)不连续的2组．左右2个
2020年高考生物核心素养提升练四十四胚胎工程与生物技术的安全性和伦理问题(含解析)
胚胎工程与生物技术的安全性和伦理问题 (30分钟100分) 1.(10分)下面是繁育良种奶牛的示意图，据图回答下列问题： (1)对供体母牛用_______处理可获得更多的卵母细胞，经配种后可得到早期胚胎。在胚胎移植前，若对胚胎进行性别鉴定，可以在分子水平上对早期胚胎进行性别鉴定，也可以在细胞水平上通过对_______的分析进行性别鉴定。若要对囊胚阶段的胚胎进行分割，其操作过程中需要注意的问题是______________。 (2)对受体母牛进行同期发情处理是为了_______________，图示流程中冲卵的“卵”是指__________________。实际生产中常利用体细胞克隆技术保持供体母牛的许多优良性状，操作中用于核移植的体细胞一般选用_______代以内的细胞，其原因是 _____________________________。
【解析】(1)对供体母牛用促性腺激素处理可使其超数排卵，以获得更多的卵母细胞。若在细胞水平上对胚胎进行性别鉴定，可通过对性染色体进行分析并加以鉴别。若要对囊胚阶段的胚胎进行分割，需要注意将内细胞团均等分割。 (2)对受体母牛进行同期发情处理是为了给供体的胚胎移入受体提供相同的生理环境。题图过程中的冲卵实际上是获得早期胚胎。实际生产中常利用体细胞克隆技术保持供体母牛的许多优良性状，操作中用于核移植的体细胞一般选用10代以内的细胞，其原因是10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型。 答案：(1)促性腺激素性染色体将内细胞团均等分割(2)使供体、受体的生理变化相同早期胚胎10 10代以内的细胞一般能保持正常的二倍体核型 2.(10分)(2018·广东六校联考)为了加快优良种牛的繁殖速度，科学家采用了以下两种方法，请根据图示信息回答下列问题： (1)试管牛的培育属于_______(“有性生殖”或“无性生殖”)；试管牛和克隆牛的培育过程中均用到的工程技术有早期胚胎培养、_______等；克隆牛的培育依据的原理是____。 (2)促使B牛多排卵的激素一般是_______。对B牛和D牛要进行_______处理。 (3)在受精的过程中，卵子受精的标志是____。 (4)要培育高产奶率的转基因牛，如建立生产生长激素的乳腺生物反应器，科学家将_______和乳腺蛋白基因的_______、_______等调控组件重组在一起(该过程需要用到的酶是 _________________)，再通过_______法导入牛的_______中。 【解析】(1)试管牛的培育属于有性生殖，试管牛和克隆牛的培育过程中均用到的工程技术有早期胚胎培养、胚胎移植等；克隆牛的培育依据的原理是动物细胞核具有全能性。(2)一般用促性腺激素处理供体母牛，促使其超数排卵；胚胎移植时，要对受体母牛和供体母牛进行同期发情处理。(3)在受精的过程中，卵子受精的标志是在透明带和卵细胞膜间有两个极体。(4)要培育高产奶率的转基因牛，如建立生产生长激素的乳腺生物反应器，科学家将生长激素基因和乳腺蛋白基因的启动子、终止子等调控组件重组在一起(该过程需要用到的酶是限制酶和DNA连接酶)，再通过显微注射法导入牛的受精卵中。 答案：(1)有性生殖胚胎移植动物细胞核具有全能性
农杆菌转化法原理
农杆菌转化法原理 This manuscript was revised on November 28, 2020
农杆菌转化法原理： 农杆菌是普遍存在于土壤中的一种革兰氏阴性细菌，它能在自然条件下趋化性地感染大多数双子叶植物的受伤部位(受伤处的细胞会分泌大量酚类化合物,从而使农杆菌移向这些细胞)，并诱导产生冠瘿瘤或发状根。 根癌农杆菌和发根农杆菌中细胞中分别含有Ti质粒和Ri质粒，其上有一段T-DNA，农杆菌通过侵染植物伤口进入细胞后，可将T-DNA插入到植物基因组中,并且可以通过减速分裂稳定的遗传给后代，这一特性成为农杆菌介导法植物转基因的理论基础。 人们将目的基因插入到经过改造的T-DNA区，借助农杆菌的感染实现外源基因向植物细胞的转移与整合，然后通过细胞和组织培养技术，再生出转基因植株。农杆菌介导法起初只被用于双子叶植物中，近年来，农杆菌介导转化在一些单子叶植物（尤其是水稻）中也得到了广泛应用。 农杆菌转化植物细胞涉及一系列复杂的反应，主要包括：①受伤的植物细胞为修复创伤部位，释放一些糖类、酚类等信号分子。②在信号分子的诱导下，农杆菌向受伤组织集中，并吸附在细胞表面。③转移DNA上的毒粒基因被激活并表达，同时形成转移DNA的中间体。④转移DNA进入植物细胞，并整合到植物细胞基因组中。 方法：（根据不同受体环境基因要求而不同） 1．农杆菌准备 2．外植体的准备（愈伤组织、悬浮细胞系、幼嫩茎段或叶片）; 3．用 MS-AS液体培养基稀释原菌液15倍（1.5ml / 20ml）或离心后稀释3倍; 4．外植体与菌液共培养20 分钟; 5．放置在带滤纸的培养皿上（注意充分吸干多余的菌液）; 6．将外植体接种到MS-AS固体诱导培养基，培养2－3天 ; 7．移至含卡那霉素（Kan）300mg/L和羧苄青霉素（Cb 300mg/L）的固体筛选培养基上进行Kan抗性愈伤组织的筛选; 8．隔20天，进行第二次筛选； 9．抗性愈伤组织在固体筛选培养基上分化成苗； 10 在生根培养基上生根，获得完整的再分化植株。
动物细胞培养及外源基因导入的原理和方法
动物细胞培养及外源基因导入的原理和方法 细胞培养是现代生物学研究中应用最为广泛的技术之一。它的突出优点，一是研究对象是活的细胞，可长时期地监控、检测甚至定量评估其形态、结构和生命活动等；二是可以人为地严格控制研究条件，便于研究各种物理、化学、生物等外界因素对细胞生长、发育和分化等的影响，有利于单因子分析；三是研究的样本可以达到比较均一性。常用的细胞系均是性质均一的细胞，需要时还可采用克隆化等方法使细胞进一步纯化；四是研究的内容便于观察、检测和记录。体外培养的细胞可采用显微镜，电镜等直接观察记录，充分满足实验的要求。另外还具有研究范围比较广泛，研究费用相对经济等优点。 然而，细胞培养也有其局限性。由于培养的细胞脱离了机体复杂的环境条件，其细胞形态和功能都会发生一定程度的改变。尤其是体外反复传代、长期培养的细胞，有可能发生染色体非二倍体改变等情况。因此，应将体外培养的细胞视为一种既保持动物体内原细胞一定的性状又具有某些改变的特定的细胞群体。 由于细胞培养技术的优点是其他实验方法和技术所不能比拟的，所以近年来细胞培养技术在分子生物学、细胞生物学、遗传学、老年学、免疫学、肿瘤学和病毒学等很多领域都得到了广泛的应用，其中对于分子生物学家及细胞生物学家而言，应用细胞培养对感兴趣的基因产物进行定位、运动及功能研究变得越来越重要。在克隆一个基因后的下一步，往往是将其导入不同类型细胞，以分析其表达，测定表达对细胞生长的影响，或将高表达的基因产物纯化。将外源DNA导入哺乳动物细胞有两种途径：稳定（永久）或暂时性转染。稳定转染的目的是将转移基因整合到细胞染色体DNA上，形成稳定表达转移基因的细胞系。一般需要共转染一个选择标记，用于追踪转染成功的细胞或转染效率。暂时性转染的目的是为了分析转移基因的暂时转录或表达，一般在转染后1-4天内进行。针对培养细胞的外源DNA导入已发展出多种技术，其中常用的有磷酸钙介导的转染，DEAE-葡聚糖介导的转染，脂质体介导的转染，电穿孔法等。这4种方法除DEAE-葡聚糖法外，均可用于暂时性转染和永久性转染。但它们有各自适用的细胞系。培养的细胞不同，其在摄取和表达外源DNA的能力上可能存在几个数量级的差异。因此针对细胞系优化并比较几种不同方法的效率很重要。
第二十三章 基因治1
第二十三章基因治疗 （一）选择题 A型题 1. 全世界第一例基因治疗成功的疾病是 A. β地中海贫血 B. 血友病 C. 重症联合免疫缺陷症 D. 高胆固醇血症 E. 糖尿病 2. 理论上讲，基因治疗最理想的策略是 A. 基因置换 B. 基因替代 C. 基因失活 D. 免疫调节 E. 导入“自杀基因” 3. 目前基因治疗所采用的方法中，最常用的是 A. 基因置换 B. 基因替代 C. 基因失活 D. 免疫调节 E. 导入“自杀基因” 4. 利用反义核酸阻断基因异常表达的基因治疗方法是 A. 基因置换 B. 基因替代 C. 基因矫正 D. 基因失活 E. 免疫调节 5. 将白细胞介素-2基因导入肿瘤病人体内，提高病人IL-2的表达水平，进行抗肿瘤辅助治疗。这种基因治疗方法是 A. 基因置换 B. 基因替代 C. 基因矫正 D. 基因失活 E. 免疫调节 6. 下列哪种方法不．是目前基因治疗所采用的方法 A. 基因缺失 B. 基因置换 C. 基因替代 D. 基因失活 E. 免疫调节 7. 基因治疗的基本程序中不．包括 A. 选择治疗基因 B. 选择载体 C. 选择靶细胞
D. 将载体直接注射体内 E. 将治疗基因导入靶细胞 8. 下列哪种方法不．属于非病毒介导基因转移的物理方法 A. 电穿孔法 B. 脂质体法 C. DNA直接注射法 D. 显微注射法 E. 基因枪技术 9. 下列哪种方法属于非病毒介导基因转移的化学方法 A. 电穿孔法 B. 基因枪技术 C. DNA直接注射法 D. 显微注射 E. DEAE-葡聚糖法 10. 将外源治疗性基因导入哺乳动物细胞的方法不．包括 A. 显微注射法 B. 电穿孔法 C. 脂质体法 D. CaCl 法 2 E. 病毒介导的基因转移 11. 目前在基因治疗的临床实施中，最常使用的载体是 A. 逆转录病毒载体 B. pBR322 C. λ噬菌体 D. pUC18 E. YAC 12. 逆转录病毒载体的特点中不．包括 A. 容量约10kb B. 有潜在危险性 C. 基因转移效率较高 D. 只感染分裂状态的细胞 E. 感染细胞后产生高滴度病毒 13. 腺病毒载体的特点中不．包括 A. 所获病毒滴度高 B. 外源基因可瞬时高表达 C. 外源基因长期稳定表达 D. 基因组结构复杂 E. 能感染分裂或非分裂状态的细胞 14. 腺相关病毒载体的特点中不．包括 A. 容量相对小 B. 优先整合于宿主染色体19q位点上 C. 外源基因稳定表达 D. 安全性好
基因枪操作步骤
微弹制备（金粉母液配制） （1）称取60mg金粉加入Eppendorf管。 （2）加入1mL 75%乙醇，充分涡旋，静置15min，1500rpm离心5min。 （3）弃上清，加入1mL无菌水，充分涡旋，1500rpm离心5min。重复3次。 （4）弃上清，加入1mL无菌的50%甘油，充分涡旋，-20℃保存。 DNA的包裹 （1）取50μL金粉悬液（指金粉母液）于Eppendorf管。 （2）依次加入5μL质粒DNA（1μg/μL）,50μL 2.5MCaCl2和20μL 0.1M亚精胺。（边涡旋边加入，每加完一样，可振荡2-3秒）。 （3）将上述混好的样品，涡旋1min，冰上静置1min，重复10次。 （4）冰上静置30min。10000rpm离心10sec，去上清。 （5）用250μL无水乙醇冲洗沉淀2次(10000rpm离心10sec，去上清)。 （6）最后用60μL无水乙醇重悬颗粒。 注：金粉很容易沉淀，点膜前要重悬。 PDS-1000/He型基因枪的操作步骤 转化前先靶材料放在高渗培养基（含0.2M山梨醇和0.2M甘露醇的MS培养基）上培养4h（愈伤组织集中放在培养基中间一，直径2-3cm左右）。 （1）在超净台上，75%酒精棉擦洗轰击室，75%乙醇消毒各配件15min，然后晾干。 （2）取10μL DNA包被的金颗粒点于颗粒子弹载体膜中心（一滴一滴滴加，待第一滴干燥后，滴加第二滴，防止金粉颗粒扩散太大）。 阻挡网载体膜 可裂膜
（1）打开真空泵和基因枪的电源开关。 真空泵的电源开关 基因枪的电源开关 可裂膜挡盖 微粒发射装置
（2） 打开氦气瓶阀门，旋转氦气调节杆，使气压高于所选可裂膜压为1500psi 左右。 （3） 旋下可裂膜挡盖，将可裂膜放在挡盖中央（要放正，防止漏气），将挡盖旋上，用专用扳手加固。 （4） 把微粒发射装置移出轰击室，旋下盖子，加入阻挡网，把微粒载片安装在固定槽中（有微粒的一面朝下）， 旋上盖子，将微粒发射装置放回轰击室。 先打开主阀 再旋转氦气调节杆 该表上的气压大于可裂膜的压强
[推荐学习]2019届高考生物总复习课时作业38胚胎工程及生物技术的安全性和伦理问题
课时作业(三十八) 第38讲胚胎工程 及生物技术的安全性和伦理问题 时间 / 30分钟 基础巩固 1.如图K38-1是某科研小组设计的用“精子介导基因转移法”培育转基因山羊(2n)的流程图。据图回答下列问题: 图K38-1 (1)“精子介导基因转移法”是利用精子易于与外源基因结合的能力,通过图中的①过程,将精子作为外源基因的,由的精子经过②过程,将外源基因送入卵母细胞。 (2)进行②过程的卵母细胞应处于 期,此时细胞中含个染色体组。受精过程中防止多精入卵的两道屏障是透明带反应 和。 (3)③过程需要在 (写出两点)等条件下进行。 (4)胚胎工程是指对动物的早期胚胎或所进行的多种显微操作和处理技术。④过程涉及的胚胎工程技术是。 2.胚胎工程和基因工程目前在生物技术中发展较快,回答下列问题: (1)在哺乳动物的核移植实验中,一般通过(物理方法)将受体细胞激活,使其进行细胞分裂并发育,当胚胎发育到阶段时,将胚胎植入另一雌性(代孕)动物体内。 (2)在“试管牛”的培育过程中,要使精子和卵母细胞在体外成功结合,需要对精子进行处理。另外,培养的卵母细胞需要发育至,该时期在显微镜下可观察到次级卵母细胞和第一极体。 (3)利用体细胞进行核移植技术的难度明显高于利用胚胎细胞进行核移植的原因 是。 (4)若要使获得的转基因牛分泌的乳汁中含有人干扰素,则所构建的基因表达载体必须包括:某种牛乳腺分泌蛋白基因及其启动子、、终止子、标记基因和复制原点等。目前常用的措施是将
该基因表达载体导入牛的(填“受精卵”或“乳腺细胞”),导入方法 是。 3.[2017·辽宁五校联考]胚胎工程的许多技术,实际是在体外条件下,对动物自然受精和早期胚胎发育条件进行的模拟操作。请根据动物受精和早期胚胎发育过程回答下列问题: (1)在动物体内卵子的发生过程中,减数第一次分裂完成的时间是在雌性个体。当次级卵母细胞发育到期时才具备与精子受精的能力,受精的场所是。判断卵子是否受精的重要标志是。 (2)受精过程中防止多精入卵的两道屏障是和。 (3)胚胎发育过程首先是卵裂,所得每个子细胞的体积比受精卵。胚胎发育到期会导致透明带破裂,胚胎从中伸展出来,这一过程叫作孵化。 (4)胚胎干细胞是从囊胚的或中分离出来的一类细胞,在人类疾病治疗和科学研究中有着广泛的应用。 4.[2017·成都二模]自然情况下,牛的生育率很低,通过胚胎工程的技术手段,可以实现良种牛的快速繁殖。回答下列问题: (1)哺乳动物精子的发生在内完成,卵子的发生在内完成。自然条件下,受精是在雌性动物的内完成的。 (2)采用胚胎移植的方法,可使一头良种雌性黄牛一年生下数十头自己的后代。该方法的操作过程中需要用激素对该良种母牛和代孕母牛进行 处理,还要用激素处理使该良种母牛。 (3)采用试管动物技术还可以使普通雌性黄牛产下奶牛、良种肉牛等不同品种小牛。该技术中首先要做的是体外受精和。体外受精主要包括、和受精等几个主要步骤。 能力提升 5.如图K38-2是胚胎工程技术研究及应用的相关情况,其中供体1是良种荷斯坦高产奶牛,供体2是黄牛。据图回答下列问题: (1)应用1为获得克隆牛的过程,从活体牛的卵巢中吸取的卵母细胞需要在体外培养到 期,并通过去除卵母细胞中的细胞核。最终克隆动物的遗传物质来 自。 图K38-2 (2)应用2为获得试管牛的过程,在前,需要对采集的优良公牛的精子用 法进行获能处理。胚胎移植是胚胎工程的最后一道工序,胚胎能够在受体内存活的生理基础是 。 (3)应用3中的细胞C取自牛胎儿的。应用4在获得二分胚①和②的同时,需要取囊胚的细胞做DNA分析进行性别鉴定。 6.[2017·洛阳二模]我国全面二孩政策已于2016年1月1日起正式实施。十二年前,产妇朱女士利用试管婴儿技术,成功生下一个男孩。2016年3月,朱女士决定生育第二个孩子,医院找到当年为她冷冻